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甲型流感病毒株H1N1(09pdm)的分离及HA和NA基因分析
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作者 刘媛 王文博 +5 位作者 何怡蓓 邹自英 胡宗海 朱紫衣 范泉水 熊杰 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第1期64-68,共5页
目的对成都某部人感染甲型流感病毒进行分离鉴定和基因突变分析。方法采集甲型流感患者咽拭子标本,通过MDCK细胞分离病毒毒株;采用免疫荧光法鉴定其感染细胞能力,采用基因分型特异性引物鉴定病毒亚型,PCR扩增血凝素基因(HA)和神经氨酸... 目的对成都某部人感染甲型流感病毒进行分离鉴定和基因突变分析。方法采集甲型流感患者咽拭子标本,通过MDCK细胞分离病毒毒株;采用免疫荧光法鉴定其感染细胞能力,采用基因分型特异性引物鉴定病毒亚型,PCR扩增血凝素基因(HA)和神经氨酸酶基因(NA)后测序,与NCBI数据库在线比对并利用MEGA软件构建系统发育进化树,分析突变位点。结果从甲型流感患者咽拭子标本中分离出1株流感病毒,经型特异性引物PCR鉴定为H1N1(09pdm)亚型,该毒株在37℃时对细胞致病力较强。免疫荧光检测到分离毒株感染细胞内甲型流感病毒核蛋白(NP)高表达,甲型流感病毒NP蛋白在细胞核和细胞质中均有大量分布。利用反转录PCR和测序获得该毒株HA和NA全长基因序列。在线比对及系统发育树分析显示,该毒株HA和NA序列与2017-2018流感季其他国家流行株同源性均>99%。对HA氨基酸突变位点进行分析,其序列的155位点存在组氨酸-酪氨酸(H-Y)点突变,该点突变也发生Influenza A/Hawaii/24/2018(H1N1)(MH245873)、Influenza A/North Carolina/19/2018(H1N1)(MH245873)和In-fluenza A/Missouri/51/2017(H1N1)(MH083792)毒株上。NA氨基酸序列与近期流行的毒株均相同。结论本起流感病毒株H1N1(09pdm)的HA、NA基因序列与同期其他国家流行株高度相似,但在HA氨基酸序列的155位点存在一个组氨酸-酪氨酸的点突变,其意义尚不清楚。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 H1N1 血凝素 神经氨酸酶 系统发育进化树
黄连-厚朴不同配伍比例对抑制大鼠神经氨酸酶活性影响
2
作者 李英 施明毅 游娟 《四川中医》 2019年第4期54-57,共4页
目的:研究黄连-厚朴药不同配伍比例对抑制神经氨酸酶活性的影响。方法:选取无特定病原体级SD大鼠120只为研究对象,将其平均分为12组,每组10只鼠,一组作为空白对照组,一组为奥司他韦组,一组为模型对照组,其余9组为不同配伍组。观察记录... 目的:研究黄连-厚朴药不同配伍比例对抑制神经氨酸酶活性的影响。方法:选取无特定病原体级SD大鼠120只为研究对象,将其平均分为12组,每组10只鼠,一组作为空白对照组,一组为奥司他韦组,一组为模型对照组,其余9组为不同配伍组。观察记录大鼠的体重、身长等一般病理特征,记录抑制率和拮抗剂的半抑制浓度,并记录三维响应面模型表示结果(黄连-厚朴协同、相加和拮抗作用情况以及协同作用最优时的配伍比例)。结果:黄连-厚朴不同配伍比例对神经氨酸酶活性影响差异较大,配伍比例为1:1时,对神经氨酸酶抑制率最高,拮抗剂的半抑制浓度最低;黄连-厚朴不同配伍比例药物之间作用主要是相加,然后是协同,拮抗作用最弱,当黄连和厚朴配伍比例在0.55∶1~1.11∶1范围内时,两种药物协同作用最为显著,协同作用强度达到-0.800,其他配伍比例呈现较强的拮抗或者相加作用。结论:黄连-厚朴药不同配伍比例对抑制神经氨酸酶活性的影响效果不同,最优配伍比例为1∶1。 展开更多
关键词 黄连 厚朴 配伍比例 抑制 神经氨酸酶
链球菌神经氨酸酶的作用机制及酶活性的测定技术
3
作者 范玉凤 刘广锦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期433-441,共9页
神经氨酸酶不仅存在于流感病毒,在细菌中也有分布。细菌的神经氨酸酶可裂解宿主体内糖结合物末端的神经氨酸残基,有助于细菌实现在宿主体内的定殖、穿透和扩散,是细菌重要的毒力因子之一。链球菌是自然界广泛存在的人畜共患的病原菌,在... 神经氨酸酶不仅存在于流感病毒,在细菌中也有分布。细菌的神经氨酸酶可裂解宿主体内糖结合物末端的神经氨酸残基,有助于细菌实现在宿主体内的定殖、穿透和扩散,是细菌重要的毒力因子之一。链球菌是自然界广泛存在的人畜共患的病原菌,在多种链球菌中均可检测出神经氨酸酶。肺炎链球菌的神经氨酸酶研究最为透彻,该菌可产生3种神经氨酸酶(NanA,NanB,NanC),NanA不但可以发挥酶的催化作用,分解唾液酸残基,暴露细菌的黏附受体,还能不依赖酶活基团,辅助细菌感染宿主细胞;NanB催化后产物可作为细菌的碳源;NanC可辅助细菌入侵脑部。在无乳链球菌和猪链球菌中,神经氨酸酶的活性一直未得到确切的验证,可能是由于它们的荚膜均含有神经氨酸,所以其神经氨酸酶的活性逐渐在进化中丧失。另外一些链球菌,例如化脓链球菌和C、G、L群链球菌,其神经氨酸酶的底物偏好相近,均对唾液类黏蛋白的催化活性较强,利于链球菌在含唾液类黏蛋白的组织中扩散。在口腔链球菌和血链球菌中,神经氨酸酶破坏血液成分中的神经氨酸链。由此可见,神经氨酸酶的特异性催化作用与链球菌在宿主体内的定植部位密切相关。此外,随着科技的发展,对神经氨酸酶的活性检测,也由早期的硫代巴比妥法,转为现在的荧光值和吸光度的测定,更为便捷和敏感。本文旨在对链球菌的神经氨酸酶的作用机制、与毒力关系及酶活测定方法等研究进展作一综述,为从事相关研究的科学工作者提供参考。 展开更多
关键词 链球菌 神经氨酸酶 致病性 酶活性
Synthesis of Chaicone Derivatives Containing Furan or/and Pyran Ring as Neuraminidase Inhibitors
4
作者 CHEN Aiyu LIANG Yongdong +4 位作者 YE Jiao HU Aixi LIAN Wenwen LIU Ailin DU Guanhua 《高等学校化学研究:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第3期395-402,共8页
Twenty-seven novel chaicone derivatives were designed and synthesized as neuraniinidase(NA) inhibitors. A concise suitable synthetic strategy was employed in the target compounds? synthesis with relatively high yields... Twenty-seven novel chaicone derivatives were designed and synthesized as neuraniinidase(NA) inhibitors. A concise suitable synthetic strategy was employed in the target compounds? synthesis with relatively high yields. The synthesized compounds were evaluated for their inhibitory activities against the NA of influenza A virus in vitro. The results show that compound 9b possesses the most potent NA inhibitory activity. Structure-activity relationship studies indicate that the chaicone system and hydrogen bond donor substituent are significant for the NA inhibitory activity. And the chaicone derivatives containing pyran ring have better NA inhibitory activity than those without the pyran ring. In addition, molecular docking studies reveal that compounds 9b and 9u are in the good binding mode with Zanamivir binding sites. This study indicates that compound 9b could be selected as a potent compoxind for further structural optimization and development of novel NA inhibitors. 展开更多
关键词 Chaicone DERIVATIVE NEURAMINIDASE INHIBITOR Molecular DOCKING
2012—2017年杭州地区甲型H3N2流感病毒HA和NA基因遗传进化分析
5
作者 钱昕 于新芬 +4 位作者 李钧 寇宇 周银燕 文艳苹 王旭初 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期18-23,共6页
目的了解2012—2017年杭州地区甲型H3N2流感病毒的流行情况以及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的遗传进化特征。方法收集2012年1月至2017年12月间杭州地区流感样病例12185例,实时RT-PCR检测甲型H3N2流感病毒,同时选取部分甲型H3N2... 目的了解2012—2017年杭州地区甲型H3N2流感病毒的流行情况以及血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因的遗传进化特征。方法收集2012年1月至2017年12月间杭州地区流感样病例12185例,实时RT-PCR检测甲型H3N2流感病毒,同时选取部分甲型H3N2流感病毒阳性样本,用特异性引物扩增HA和NA基因,进行基因测序并分析其遗传进化特征。结果自2012年以来,杭州地区每年都有甲型H3N2流感病毒的流行。不同年龄段人群发病率存在统计学差异,趋势性卡方检验发现,随着年龄增长,发病率显著提高(Z=81.039,P<0.05)。2012年以来,杭州地区流行的甲型H3N2流感病毒主要属于3C.3a和3C.2a两个进化簇。HA和NA基因的序列一致性均为96.7%~100%,但在多个抗原位点发生了突变。结论甲型H3N2流感病毒在杭州地区流感流行中具有重要地位。2012—2017年,杭州地区甲型H3N2流感病毒抗原变异明显,但目前并未发现耐药株的出现和流行。 展开更多
关键词 甲型H3N2流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 遗传进化
抗H7N9流感病毒神经氨酸酶嵌合抗体的制备及初步鉴定
6
作者 阮菲儿 陈玲玲 +3 位作者 秦堃 刘明斌 陈海婴 周剑芳 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2019年第2期212-216,共5页
目的制备抗H7N9神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的嵌合抗体,初步鉴定其活性与功能特点。方法采用基因工程技术,将小鼠杂交瘤技术获得的2株特异性靶向流感病毒A/Anhui/1/2013(H7N9) NA的单克隆抗体VH、VL基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VH ... 目的制备抗H7N9神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的嵌合抗体,初步鉴定其活性与功能特点。方法采用基因工程技术,将小鼠杂交瘤技术获得的2株特异性靶向流感病毒A/Anhui/1/2013(H7N9) NA的单克隆抗体VH、VL基因分别克隆入嵌合抗体表达载体VH Express及VL Express中,共转染293T细胞后,表达纯化获得抗H7N9 NA的嵌合抗体,对抗体活性及功能进行鉴定。结果获得了两株特异性抗H7N9亚型流感病毒N9嵌合抗体1E2和3E3,这两株抗体识别抗原部位相似,能抑制NA酶活性及耐药N9神经氨酸酶活性,体外细胞实验中能抑制病毒释放,阻止病毒进一步感染细胞。结论本研究构建的两株嵌合抗体能特异性识别A/Anhui/1/2013(H7N9)的N9蛋白,KD值达pM,并能抑制N9酶活性,为流感抗体制备以及HAPI禽流感治疗提供了一种可选择的方法。 展开更多
关键词 H7N9 神经氨酸酶 嵌合抗体
神经氨酸酶抑制剂的研究进展 预览 被引量:1
7
作者 张黎明 王德传 《广东化工》 CAS 2018年第5期120-122,共3页
神经氨酸酶(neuraminidase)是流感病毒表面一种重要蛋白质,在病毒感染宿主细胞的过程中发挥着重要作用。神经氨酸酶抑制剂类药物可以有效的预防和治疗流感,本文通过综述近些年来神经氨酸酶抑制剂的研究进展,为后续神经氨酸酶抑制... 神经氨酸酶(neuraminidase)是流感病毒表面一种重要蛋白质,在病毒感染宿主细胞的过程中发挥着重要作用。神经氨酸酶抑制剂类药物可以有效的预防和治疗流感,本文通过综述近些年来神经氨酸酶抑制剂的研究进展,为后续神经氨酸酶抑制剂炎药物的设计与开发提供一些帮助。 展开更多
关键词 流感 神经氨酸酶 神经氨酸酶抑制剂
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2009—2017年烟台地区甲型(HIN1)pdm09流感病毒神经氨酸酶基因进化分析
8
作者 刘娟 高巧 +4 位作者 徐迎春 孙振璐 董兆静 徐小雯 宫连凤 《中华疾病控制杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期1032-1036,共5页
目的分析2009—2017年烟台地区甲型(H1N1)pdm09流感病毒流行情况及神经氨酸酶(neuramin-idase,NA)基因进化特征。方法收集2009年8月-2017年8月烟台地区两家哨点医院流感样病例咽试子标本10236份,狗肾细胞(Madin—Darby canine ki... 目的分析2009—2017年烟台地区甲型(H1N1)pdm09流感病毒流行情况及神经氨酸酶(neuramin-idase,NA)基因进化特征。方法收集2009年8月-2017年8月烟台地区两家哨点医院流感样病例咽试子标本10236份,狗肾细胞(Madin—Darby canine kidney cell,MDCK)分离流感病毒,血凝抑制实验进行病毒分型。选取甲型(HINl)pdm09流感毒株43株,扩增NA基因全序列并测序,应用分子生物学软件分析其遗传变异特征。结果系统发生分析表明大部分烟台分离株属于2、7、6C、6B.1和6B.2基因型;NA蛋白分子多个氨基酸位点发生变异,与疫苗株相比,6、7基因型增加了44位糖基化位点;6B.1和6B.2基因亚型,减少了386位糖基化位点;运用固定效应似然比模型和内部固定效应似然比模型发现34和386两个正向选择压力位点,NA蛋白酶活性中心位点及周围辅助位点均未发生变异。结论2009—2017年烟台地区甲型(H1N1)pdm09流感病毒NA基因持续发生变异,仍对神经氨酸酶抑制剂敏感,未来仍应加强流感流行状况和病原基因特征监测。 展开更多
关键词 甲型(HlNl)pdm09 神经氨酸酶 耐药 基因进化
先兆早产阴道微生态失衡状况分析
9
作者 沈雪艳 张国华 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期721-724,共4页
目的分析先兆早产妇女阴道微生态失衡状况。方法选择2013-2014年在我科住院的保胎的孕28周-36+6周无明显诱因先兆早产的单胎妊娠期妇女87例。取其阴道分泌物,选用阴道pH值、阴道清洁度、过氧化氢(H2O2)浓度、白细胞酯酶(LE)和唾液... 目的分析先兆早产妇女阴道微生态失衡状况。方法选择2013-2014年在我科住院的保胎的孕28周-36+6周无明显诱因先兆早产的单胎妊娠期妇女87例。取其阴道分泌物,选用阴道pH值、阴道清洁度、过氧化氢(H2O2)浓度、白细胞酯酶(LE)和唾液酸苷酶(SnaSe)等指标对阴道微生态进行评价。结果先兆早产妇女阴道微生态失衡发生率为70.1%。阴道分泌物检查清洁度Ⅲ-Ⅳ不正常者61例,乳杆菌均阴性。H2O2阳性率为47.5%,H2O2+LE阳性率为13.1%,显微镜检查出线索细胞+LE+H2O2+SnaSe阳性率6.6%,涂片镜检查出滴虫+LE+H2O2阳性率为3.3%,涂片镜检查出酵母样真菌孢子+LE+H2O2阳性率14.8%。结论先兆早产孕妇阴道微生态失衡率较高,可能是导致早产及足月前胎膜早破的重要原因。 展开更多
关键词 阴道微生态 先兆早产 阴道PH值 过氧化氢浓度 白细胞酯酶 唾液酸苷酶
2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感病毒基因进化分析
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作者 刘国良 李玉婵 +4 位作者 雍雲雲 刘崇娟 刘辰增 邢连波 王锋 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期1133-1137,共5页
目的 了解2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感流行态势,分析H1N1血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酰酶(neuraminidase,NA)基因变异情况及其遗传进化特征。方法 选定2009-2017年河北省廊坊市分离的甲型H1N1流感毒14株,使经核酸... 目的 了解2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感流行态势,分析H1N1血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酰酶(neuraminidase,NA)基因变异情况及其遗传进化特征。方法 选定2009-2017年河北省廊坊市分离的甲型H1N1流感毒14株,使经核酸提取和PCR扩增测序HA和NA基因,采用MEGA version 6.0进行对比分析,采用N-J法构建新甲型H1N1流感病毒HA、NA基因进化树。结果 廊坊市2009-2017年新甲型H1N1流感病毒HA基因序列同源性为97.2%-100.0%,NA基因序列同源性为97.7%-100.0%,HA和NA抗原决定簇、受体结合位点、糖基化位点均未发生变异。随着时间的推移,NA和HA突变位点均呈增多趋势,表明毒株逐年发生变异。结论 2009-2017年河北省廊坊市新甲型H1N1流感病毒HA和NA基因与国内、国际代表株高度同源,但其编码蛋白氨基酸的序列逐年发生变异,并出现不同程度的变异增强现象,因此应进一步加强对流感的监测。 展开更多
关键词 新甲型H1N1流感 血凝素 神经氨酰酶 进化分析
绵马贯众中流感病毒H5N1神经氨酸酶抑制剂的筛选
11
作者 闫艳韬 刘畅 +2 位作者 王娟 胡京红 高增平 《中药材》 北大核心 2018年第3期691-698,共8页
目的:筛选绵马贯众中流感病毒H5N1神经氨酸酶(NA,neuraminidase)抑制剂。方法:将绵马贯众中已分离得到的99个化合物建立配体库,从Protein Data Bank(PDB)中下载NA(H5N1)的X-ray晶体三维结构文件,采用AutoDock Vina软件筛选出与NA有较好... 目的:筛选绵马贯众中流感病毒H5N1神经氨酸酶(NA,neuraminidase)抑制剂。方法:将绵马贯众中已分离得到的99个化合物建立配体库,从Protein Data Bank(PDB)中下载NA(H5N1)的X-ray晶体三维结构文件,采用AutoDock Vina软件筛选出与NA有较好结合作用的化合物,并通过神经氨酸酶抑制实验验证筛选出的化合物对NA的作用。结果:通过分子对接筛选出5个与NA有较好结合的化合物,神经氨酸酶抑制实验结果表明候选化合物中Dryocrassin ABBA对NA的抑制作用最强,IC50为(18.59±4.53)μmol/L。结论:绵马贯众中化合物Dryocrassin ABBA具有较好的抗H5N1流感病毒神经氨酸酶的作用。 展开更多
关键词 绵马贯众 H5N1流感病毒 分子对接 神经氨酸酶
山羊化脓隐秘杆菌分离鉴定及其神经氨酸酶遗传进化分析
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作者 李章程 张婷婷 +6 位作者 程方俊 曹立亭 蒋梦娜 付婷婷 范娟 林永润 郑凯文 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2018年第4期665-670,共6页
为确诊重庆涪陵地区一山羊养殖场发生山羊皮下脓肿的病原,采集病料分离病原、进行药敏试验。通过生化试验和16SrRNA分子方法鉴定病原茵;PCR扩增分离株的神经氨酸酶基因(neuraminidase,NA),并利用细菌神经氨酸酶的隐马尔科夫模型(... 为确诊重庆涪陵地区一山羊养殖场发生山羊皮下脓肿的病原,采集病料分离病原、进行药敏试验。通过生化试验和16SrRNA分子方法鉴定病原茵;PCR扩增分离株的神经氨酸酶基因(neuraminidase,NA),并利用细菌神经氨酸酶的隐马尔科夫模型(Pfam编号为PF13088)搜索自建的本地蛋白质组数据库,通过MEGA7.0构建系统进化树,从而分析神经氨酸酶基因在脊椎动物、寄生虫、真菌、细菌和病毒中的遗传进化特征,并利用PredictProtein进行分离株神经氨酸酶的点突变分析。结果表明,分离株的16SrRNA基因与JQ975932.1(中国新疆)株化脓隐秘杆菌序列同源性高达99.7%,结合生化特性确诊分离株为化脓隐秘杆菌;利用模型进行检索,共检索到214条神经氨酸酶氨基酸序列。神经氨酸酶遗传系统进化树显示,细菌神经氨酸酶主要集中在放线菌门中,脊椎动物的神经氨酸酶主要聚集在GroupⅠ和GroupⅡ,寄生虫的神经氨酸酶主要集中于GroupⅠ,真菌神经氨酸酶分布较广,存在GroupⅠ、GroupⅡ以及GroupⅣ中,而病毒神经氨酸酶主要分布于GroupⅠ和GroupⅡ。点突变分析表明,细菌神经氨酸酶不同位点的氨基酸突变对神经氨酸酶功能的影响不同。 展开更多
关键词 山羊 化脓隐秘杆菌 分离鉴定 神经氨酸酶 遗传进化
Mutation-induced spatial differences in neuraminidase structure and sensitivity to neuraminidase inhibitors
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《中国物理B:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2018年第1期145-153,共9页
基于分子对接技术的金莲花主要成分抗病毒和抗炎机制预测 预览 被引量:1
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作者 方明月 李德利 +4 位作者 刘双月 王青青 赓迪 马超 王如峰 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2018年第7期57-61,共5页
目的利用分子对接技术预测金莲花中牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱的抗病毒和抗炎机制。方法运用Discovery Studio 2.5软件和药物化学数据库,将金莲花的6个活性成分与Toll... 目的利用分子对接技术预测金莲花中牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱的抗病毒和抗炎机制。方法运用Discovery Studio 2.5软件和药物化学数据库,将金莲花的6个活性成分与Toll样受体蛋白(TLRs)及神经氨酸酶(NA)靶点进行分子对接,通过模拟运算,分析对接结果及其功能区域的相互作用关系。结果牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、藜芦酸、金莲花碱均作用于1种或多种TLR,而荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷与3种TLR均无相互作用;黄酮类化合物,即牡荆素、荭草素、牡荆素-2"-O-β-L-半乳糖苷、荭草素-2"-O-β-L-半乳糖苷均可与NA结合,而藜芦酸和金莲花碱与NA无相互作用。结论金莲花的6个活性成分中,5个成分可影响TLRs介导的信号通路,TLR3、4、7是其抗病毒抗炎作用的潜在靶点;4个黄酮类化合物可通过作用于NA而影响流感病毒活性。本研究可为探讨金莲花的抗病毒和抗炎有效成分及其进一步开发利用提供依据。 展开更多
关键词 金莲花 分子对接 Toll样受体蛋白 神经氨酸酶 抗病毒 抗炎
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绵马贯众中间苯三酚类化合物抗H1N1流感病毒神经氨酸酶的活性成分筛选
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作者 闫艳韬 王娟 +3 位作者 耿东浩 付深振 胡京红 高增平 《北京中医药大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第1期71-75,共5页
目的研究绵马贯众中间苯三酚类化合物对H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)的抑制作用。方法通过检索建立了由34个间苯三酚类化合物组成的配体库,从ProteinDataBank中下载的x—ray晶体三维结构文件,采用AutoDockVina软件及LigPlot+软件筛... 目的研究绵马贯众中间苯三酚类化合物对H1N1流感病毒神经氨酸酶(NA)的抑制作用。方法通过检索建立了由34个间苯三酚类化合物组成的配体库,从ProteinDataBank中下载的x—ray晶体三维结构文件,采用AutoDockVina软件及LigPlot+软件筛选出与NA结合能较低且与NA形成氢链作用较强的分子;采用荧光法检测化合物对NA活性的作用。结果通过分子对接筛选出4个(绵马酸ABA、绵马酸ABB、绵马酸ABP、绵马贯众素ABBA)与NA有较好结合的化合物,并对这4个化合物进行活性验证,结果表明绵马贯众素ABBA对NA抑制作用最强,IC50值为(26.73±0.57)μmol/L。结论绵马贯众中绵马贯众素ABBA具有较好的抗H1N1流感病毒NA的作用,为开发新的抗流感病毒药物奠定了基础。 展开更多
关键词 绵马贯众 间苯三酚 H1N1流感病毒 分子对接 神经氨酸酶
抗病毒口服液治疗甲型H1N1流感病毒感染药效及机制探讨 预览
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作者 毛鑫 姚荣妹 +6 位作者 高英杰 孙静 包蕾 曲天歌 时宇静 郭姗姗 崔晓兰 《中国药物警戒》 2018年第9期518-522,共5页
目的 观察抗病毒口服液对体内感染甲型H1N1流感病毒模型的治疗作用并探讨其作用机制。方法 使用ICR小鼠,采用甲型H1N1流感病毒FM1株及PR8株经滴鼻感染小鼠造成肺炎模型,经治疗给药后,计算各组小鼠肺指数;采用实时荧光定量聚合酶链式反应... 目的 观察抗病毒口服液对体内感染甲型H1N1流感病毒模型的治疗作用并探讨其作用机制。方法 使用ICR小鼠,采用甲型H1N1流感病毒FM1株及PR8株经滴鼻感染小鼠造成肺炎模型,经治疗给药后,计算各组小鼠肺指数;采用实时荧光定量聚合酶链式反应RT-PCR法检测小鼠肺组织流感病毒载量;采用ELISA法检测小鼠血清中丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的含量;体外采用甲型H1N1流感病毒FM1株及PR8株感染MDCK细胞,经治疗给药后,检测细胞上清液中神经氨酸酶(NA)活性。结果 与模型组相比,抗病毒口服液在体内能明显降低流感病毒感染小鼠的肺指数,降低肺组织中的流感病毒载量,降低TNF-α的含量并升高IFN-γ的含量;在体外可明显抑制NA活性,且均具有统计学意义(P 〈0.05或P 〈0.01)。结论 抗病毒口服液对甲型H1N1流感病毒体内感染有较好的治疗作用,其作用机制可能在于抑制炎性反应并抑制病毒繁殖。 展开更多
关键词 抗病毒口服液 甲型流感 病毒载量 TNF-α IFN-Γ 神经氨酸酶
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2016年南京市乙型流感流行病学及病毒NA基因序列分析
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作者 王炜翔 吴小清 +2 位作者 苏晶晶 李伟 邓斐 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 2018年第12期886-890,共5页
目的分析2016年南京市乙型流感流行病学特征及病毒NA基因分子进化特征。方法从中国疾病预防控制中心国家流感监测信息系统导出2016年南京市流感监测数据,应用生物信息学软件进行分析。结果2016年南京市流感监测网络实验室共检测流感样... 目的分析2016年南京市乙型流感流行病学特征及病毒NA基因分子进化特征。方法从中国疾病预防控制中心国家流感监测信息系统导出2016年南京市流感监测数据,应用生物信息学软件进行分析。结果2016年南京市流感监测网络实验室共检测流感样病例咽拭子样本5 626份,检测阳性病例771例,占13.70%。乙型流感282例,占流感病毒分离总数的36.58%。乙型流感病毒感染中,主要以Victoria谱系为主(93.62%);发病年龄以≤15岁人群居多,占58.87%(166/282);发病时间主要集中在3-4月,占71.63%(202/282);9株南京株NA全部分布进化树的Group2分支的两个小分支A/B,同B/Brisbane/60/08NA相比,共发生45I→T、73L→I、120I→V等10处氨基酸位点的替换,重要的酶活性位点及耐药位点均未发生变化。结论乙型流感为南京市2016年流感流行主要的优势毒株之一,春季为高发季节,NA氨基酸位点无特异性位点突变。 展开更多
关键词 乙型流感病毒 神经氨酸酶 分子特征 氨基酸位点 基因进化
芦丁与奥司他韦联合对H1N1流感病毒神经氨酸酶的抑制作用 预览
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作者 王心佳 于淼 +5 位作者 李源博 王烨 于大海 毛春玲 全吉淑 房学迅 《中国实验诊断学》 2018年第5期815-819,共5页
目的探究芦丁与奥司他韦联合对H1N1流感病毒神经氨酸酶(N1)的抑制作用。方法首先分别测定芦丁与奥司他韦对N1抑制的IC50值,而后根据芦丁与奥司他韦各自对N1的抑制活性选取浓度分别为其0.5,1,2,4倍IC50的浓度倍数,保证加入芦丁奥司他... 目的探究芦丁与奥司他韦联合对H1N1流感病毒神经氨酸酶(N1)的抑制作用。方法首先分别测定芦丁与奥司他韦对N1抑制的IC50值,而后根据芦丁与奥司他韦各自对N1的抑制活性选取浓度分别为其0.5,1,2,4倍IC50的浓度倍数,保证加入芦丁奥司他韦的浓度的比例保持一致。最后测定二者联合使用对N1的抑制作用。结果芦丁与奥司他韦联合药物指数(CI)均小于1。结论芦丁与奥司他韦联合用药对H1N1流感病毒神经氨酸酶是协同抑制作用。 展开更多
关键词 芦丁 奥司他韦 流感病毒 神经氨酸酶 抑制剂
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2014-2016年四川省B型流感病毒全基因组进化特征分析
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作者 杨慧萍 潘明 +2 位作者 童文彬 李天舒 徐佳楠 《国际病毒学杂志》 2018年第3期154-158,共5页
目的了解2014-2016年四川省B型流感病毒的流行特点,明确流行株与国际疫苗株的匹配情况及流感病毒全基因组进化特征。方法选取2014-2016年四川省分离的29株B型流感病毒,全基因组测序后完成序列拼接,采用Bioedit、MEGA5.0软件对各基... 目的了解2014-2016年四川省B型流感病毒的流行特点,明确流行株与国际疫苗株的匹配情况及流感病毒全基因组进化特征。方法选取2014-2016年四川省分离的29株B型流感病毒,全基因组测序后完成序列拼接,采用Bioedit、MEGA5.0软件对各基因片段进行系统发育分析及分子特征分析。结果2014-2015年以Yamagata系流感病毒为主,2016年以Victoria系流感病毒为主。全基因组分析表明,29株B型流感毒株中有5株发生了B/Yamagata系血凝素(hemagglutinin,HA)和B/Victoria系神经氨酸酶(neuraminidase,NA)间的重配;B/Yamagata系HA氨基酸序列与国际疫苗株B/Massachusetts/2/2012相比,进化树上group1分支毒株突变较多,所分析的15株病毒株均发生K58R、A118P、N126K、S1601、N176Y等14处氨基酸突变;2016年的11株Victoria系毒株与毒株B/Brisbane/60/2008相比,EA基因主要有2个氨基酸位点发生了共有突变(1127V、N139D)。本研究中的29株分离株均未发生NA蛋白酶活性位点及耐药位点的突变。结论2014-2016年四川省B型流感病毒两系交替流行,29株分离株中的5株出现BY/BV系间神经氨酸酶基因的重配,会导致抗原转变使疫苗失去保护效果,双组分的B型流感疫苗可能更为有效;NA重要的氨基酸位点相对保守。 展开更多
关键词 流感病毒B型 全基因组关联研究 血凝素 神经氨酸酶 进化特征分析
苯甲酸衍生物类神经氨酸酶抑制剂的合成及活性评价
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作者 王敬 袁建勇 +2 位作者 刘盼和 胡叶敏 李雁武 《精细化工》 CSCD 北大核心 2018年第6期1029-1036,1048共9页
以4-氨基-3-碘苯甲酸甲酯(Ⅴ)为原料,经过偶联、酰化、水解等反应得到苯甲酸衍生物类流感病毒神经氨酸酶抑制剂Ⅵ-Ⅸ,化合物Ⅴd[4-乙酰胺基-3-(2-乙基-1-丁烯基)苯甲酸甲酯]经过氧化、还原、水解反应得到化合物Ⅹ-Ⅻ,结构经^1HNMR、... 以4-氨基-3-碘苯甲酸甲酯(Ⅴ)为原料,经过偶联、酰化、水解等反应得到苯甲酸衍生物类流感病毒神经氨酸酶抑制剂Ⅵ-Ⅸ,化合物Ⅴd[4-乙酰胺基-3-(2-乙基-1-丁烯基)苯甲酸甲酯]经过氧化、还原、水解反应得到化合物Ⅹ-Ⅻ,结构经^1HNMR、^13CNMR、MS确证,并用化学荧光法测定对神经氨酸酶的抑制率,测试选用流感病毒菌株H3N2(California/04),H1N1(California/99)和B(Shanghai/02)。结果显示:在Ⅵ-Ⅸ中,苯环C3位置侧链越大,化合物的活性越低,其中,化合物Ⅸ[4-乙酰胺基-3-(2-羟基-2-乙基丁烷基)苯甲酸]的活性最强,对H3N2、H1N1、B的半数抑制浓度分别为1.0、2.1、1.6μmol/L;Ⅹ-Ⅻ中,苯环侧链α位碳上的羟基比β位活性增强,在苯环侧链α位的碳上含有单羟基的化合物Ⅻ[4-乙酰胺基-3-(2-乙基-1-羟基丁烷基)苯甲酸]具有对两种A型流感病毒最强的活性,半数抑制浓度分别为0.15和0.20μmol/L。 展开更多
关键词 神经氨酸酶 流感病毒 苯甲酸衍生物 化学荧光法
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