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第三方检验检测机构PCR检测室防核酸污染措施 预览
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作者 闫彩虹 金文杰 +3 位作者 羊扬 刘文博 彭大新 王志强 《科技视界》 2019年第28期49-50,共2页
随着社会的需求,第三方检验检测机构的数量日益增多。检测数据的准确性不仅关乎检测机构的检测水平,也直接影响行政机关的执法效力,因此检测实验室必须确保其检测数据科学公正、准确可靠。核酸检测是第三方检验检测机构中最常见的检测项... 随着社会的需求,第三方检验检测机构的数量日益增多。检测数据的准确性不仅关乎检测机构的检测水平,也直接影响行政机关的执法效力,因此检测实验室必须确保其检测数据科学公正、准确可靠。核酸检测是第三方检验检测机构中最常见的检测项目,而气溶胶污染是核酸检测中最主要最常见的污染,也是困扰绝大多数实验室的难题,必须要加以重视。本文就本中心在核酸检测防污染方面的体会进行初步总结。 展开更多
关键词 检验检测机构 PCR检测室 核酸检测 气溶胶污染
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无偿献血者标本血清学和核酸检测情况分析
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作者 赵艳梅 李艳 +1 位作者 史志旭 毕星秀 《临床血液学杂志:输血与检验》 2019年第4期604-608,共5页
目的:分析无偿献血者标本血清学检测和核酸检测情况,为制定血液筛查策略提供依据,降低输血传播性病原体漏检率。方法:分别用2种ELISA试剂对无偿献血者标本进行HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体检测,用荧光定性PCR方法对HBsAg、抗-HCV、HIV抗... 目的:分析无偿献血者标本血清学检测和核酸检测情况,为制定血液筛查策略提供依据,降低输血传播性病原体漏检率。方法:分别用2种ELISA试剂对无偿献血者标本进行HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体检测,用荧光定性PCR方法对HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体ELISA检测结果阴性、0.5≤S/CO≤5.0、S/CO>5.0的标本进行HBV-DNA、HCV-RNA、HIV-RNA检测。对190份HBsAg(-)/HBV-DNA(+)献血者标本进行化学发光补充实验。结果:187 791例血清学检测阴性的无偿献血者标本中检出1例HIV-RNA病毒,194例HBV-DNA病毒,未检出HCV RNA病毒。科华和罗氏核酸检测系统拆分阳性率和阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体ELISA双试剂阳性(S/CO>10.0)标本HBV-DNA、HCV-RAN和HIV-RNA阳性检出率分别为88.89%、84.62%和100%,0.5≤S/CO≤10.0 ELISA双试剂阳性标本的HBV-DNA、HCV-RAN和HIV-RNA阳性检出率分别为69.44%(25/36)、0和0;HBsAg ELISA检测双试剂阳性结果不同组间(S/CO>10.0和0.7≤S/CO≤10.0)核酸阳性检出率差异无统计学意义(P>0.05)。对194例HBsAg(-)/HBV-DNA(+)中的190例标本进行化学发光补充实验,检出1例HBsAg阳性,HBcAb阳性检出率为90.00%。结论:HBsAg ELISA检测后HBV输血风险仍然较高(103/10万)。NAT技术的应用,降低了血液病毒窗口期、OBI等输血残余风险。HBsAg、抗-HCV、HIV抗原/抗体ELISA阳性反应的HBV-DNA、HCV-RAN、HIV-RNA检出率与ELISA检测S/CO值的高低及2种ELISA试剂检测结果一致程度有一定关联。采用灵敏度高的血清学方法和核酸检测技术,可进一步降低输血传播病原体的漏检率,保障输血安全。 展开更多
关键词 血清学检测 核酸检测 血液筛查策略 无偿献血者
天津市HBV-DNA单独反应性献血者标本检测结果分析
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作者 谢月娜 潘形 刘军 《中国输血杂志》 CAS 2019年第11期1159-1162,共4页
目的总结无偿献血者血液筛查中HBV-DNA单独反应性标本的血清学模式,分析血清学非反应性的原因,探讨HBV-DNA单独反应性感染状态的人群背景资料的高危因素。方法对2017年3月-2018年2月期间献血者标本进行血清学ELISA检测HBsAg,同时采用TM... 目的总结无偿献血者血液筛查中HBV-DNA单独反应性标本的血清学模式,分析血清学非反应性的原因,探讨HBV-DNA单独反应性感染状态的人群背景资料的高危因素。方法对2017年3月-2018年2月期间献血者标本进行血清学ELISA检测HBsAg,同时采用TMA法检测HBV-DNA;对HBsAg(-)/HBV-DNA(+)的标本,测定血清学乙肝两对半其它4项;利用电化学发光免疫分析法(ECLIA)对HBsAg(-)/HBV-DNA(+)标本进行HBsAg检测;运用Logistic回归分析方法分析HBV-DNA单独反应性人群的相关资料。结果经常规血液筛查后,共检测出HBsAg(-)/HBV-DNA(+)标本135例;135例标本利用ECLIA检测HBsAg,7例(5.19%)为HBsAg(+);128例HBsAg(-)/HBV-DNA(+)标本根据乙肝两对半检测血清学表达形式,归纳分为7种模式;128例标本中抗-HBs阳性率58.59%(75/128),抗-HBc阳性率47.66%(61/128);Logistic回归分析结果显示,献血者出生年份和是否重复献血2个因素为HBV-DNA单独阳性感染状态的相关危险因素。结论HVB-DNA单独阳性标本血清学HBsAg(-)的主要原因是OBI感染和HBV感染"窗口期";各地区HBV-DNA阳性献血人群中血清学标志物表达模式有差别,天津地区抗-HBs和抗-HBc阳性率较高;ECLIA能降低ELISA漏检HBsAg风险;92年以前出生的献血者群体及初次献血的人群HBV-DNA单独反应性感染状态的几率较高。 展开更多
关键词 乙肝病毒 隐匿性乙肝 LOGISTIC回归分析 核酸检测
外周血miR-15a、miR-16检测在献血者早期乙型肝炎病毒感染筛查中意义 预览
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作者 韩金玉 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第7期839-842,846共5页
目的探讨微小RNA(miRNA)miR-15a、miR-16在献血者乙型肝炎病毒(HBV)早期感染筛查中的意义。方法选择2017年2月至2018年1月该中心血站的无偿献血血液样本156份,其中有49份血液样本常规酶联免疫吸附测定(ELISA)双试剂筛查HBsAg呈阳性,而核... 目的探讨微小RNA(miRNA)miR-15a、miR-16在献血者乙型肝炎病毒(HBV)早期感染筛查中的意义。方法选择2017年2月至2018年1月该中心血站的无偿献血血液样本156份,其中有49份血液样本常规酶联免疫吸附测定(ELISA)双试剂筛查HBsAg呈阳性,而核酸HBV检测呈阴性,作为E单阳组;54份血液样本经ELISA筛查和核酸检测(NAT)均为阳性,作为EN双阳组;其余63份血液样本经ELISA筛查和NAT均为阴性,作为正常组。采用实时荧光定量PCR检测3组献血者miR-15a、miR-16的表达情况。结果相较于正常组样本,E单阳组和EN双阳组血液样本miR-15a和miR-16表达均明显下调(P<0.05);且EN双阳组血液样本miR-15a和miR-16表达下调较E单阳组更为明显(P<0.05)。经Pearson相关性分析,miR-15a和miR-16与EN双阳组患者HBV DNA拷贝数呈负相关(r=-0.725、-0.866,P<0.05)。结论 miRNA-15a、miRNA-16表达下调与HBV早期感染和复制活动密切相关,在HBV感染的早期筛查中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 酶联免疫吸附测定 核酸检测技术 乙型肝炎病毒 微小RNA
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实时荧光定量PCR在血站核酸检测中的应用
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作者 关茵 张国平 +2 位作者 王琳 韩惠云 来祝檩 《首都食品与医药》 2019年第6期80-81,共2页
目的探讨实时荧光定量PCR技术对无偿献血者进行核酸检测的应用效果。方法经ALT、HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗TP,初检、复检2次检测合格后的无偿献血者血液标本,再应用实时荧光定量PCR技术进行核酸检测。结果酶免检测合格的242698份无偿献... 目的探讨实时荧光定量PCR技术对无偿献血者进行核酸检测的应用效果。方法经ALT、HBsAg、抗HCV、抗HIV、抗TP,初检、复检2次检测合格后的无偿献血者血液标本,再应用实时荧光定量PCR技术进行核酸检测。结果酶免检测合格的242698份无偿献血者血液标本,经实时荧光定量PCR检测,HBV DNA反应性137例,HCVRNA反应性0例,HIVRNA反应性0例,反应性率0.057%。结论通过开展无偿献血者核酸检测工作,可有效缩短病毒检测窗口期,进一步提高血液安全水平。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 无偿献血者 核酸检测
核酸检测在筛查献血者乙型肝炎病毒中的应用
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作者 宋晓艳 汪鹏 +1 位作者 张瑞萍 胡官林 《中国输血杂志》 CAS 2019年第12期1273-1275,共3页
目的通过血清学检测和核酸检测并行的检测模式,合理评估核酸检测技术(NAT)应用于毕节市无偿献血血液筛查中的必要性。方法采用2种酶联免疫吸附(ELISA)试剂对2016年1月—2017年12月在毕节市采集的无偿献血者标本进行HBs Ag检测,对酶免检... 目的通过血清学检测和核酸检测并行的检测模式,合理评估核酸检测技术(NAT)应用于毕节市无偿献血血液筛查中的必要性。方法采用2种酶联免疫吸附(ELISA)试剂对2016年1月—2017年12月在毕节市采集的无偿献血者标本进行HBs Ag检测,对酶免检测无反应性和单试剂有反应性标本做核酸检测。部分核酸有反应性样本送国家卫生健康委确认。结果2016—2017年共采集血液标本56798份,酶免双试剂有反应性标本557份。HBs Ag酶免检测有反应性标本347份,其中单试剂有反应性标本86份,双试剂有反应性标本261份。核酸检测标本56241份,经核酸检测混检有反应性pool数为54,拆分有反应性数为27份,均为HBV DNA有反应性。核酸有反应性检出率为0.48‰。酶免单试剂检测有反应性且核酸检测有反应性样本为2份。6份核酸检测有反应性标本经卫生部临检中心确认,3份标本为HBV DNA确认有反应性,6份标本均为HBc Ab有反应性。结论核酸检测能够检出HBs Ag阴性的乙肝感染者,减少乙肝经输血传播的风险。 展开更多
关键词 血液筛查 ELISA 核酸检测 乙型肝炎病毒
核酸检测技术在青岛地区血液筛查中的应用研究 预览
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作者 图强 王爱英 《中国老年保健医学》 2019年第5期37-38,42共3页
目的为进一步提高血液安全性,了解本地区HBV、HCV和HIVELISA检测无反应性献血者中核酸阳性检出率,探讨开展血液核酸检测(NAT)的必要性。方法利用上海科华全自动核酸检测系统,采用8份混样的自动化检测模式,对2016年青岛地区ELISA检测无... 目的为进一步提高血液安全性,了解本地区HBV、HCV和HIVELISA检测无反应性献血者中核酸阳性检出率,探讨开展血液核酸检测(NAT)的必要性。方法利用上海科华全自动核酸检测系统,采用8份混样的自动化检测模式,对2016年青岛地区ELISA检测无反应性和ALT检测合格的无偿献血者样本进行HBV、HCV和HIV-1核酸检测,对NAT检出标本用进口核酸试剂复核检测验证和定量检测,以及乙肝5项检测。并在有可能的情况下,对NAT检出献血者实施随访。结果从50582份ELISA检测无反应性的血标本中共检出15份HBV DNA反应性样本,总阳性检出率为0.03%(15/50582);未检出HCV和HIV-1RNA反应性样本。随访的9位献血者全部表现为OBI的检测特征。结论献血者血液虽经两遍酶免血液筛查后仍存在较高比例的HBVDNA感染,核酸检测可以有效降低ELISA漏检造成的输血风险,大大提高血液安全性。 展开更多
关键词 核酸检测 血液筛查 血液安全 HBV HCV HIV
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无偿献血者血液报废情况分析
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作者 刘蕾 王莉 刘玉振 《中国输血杂志》 CAS 2019年第1期49-52,共4页
目的了解郑州市无偿献血者血液报废情况,以便制定相应对策,减少血液报废。方法采用唐山启奥软件系统对郑州市2013-2017年无偿献血者血液检验报废率和非检验报废率做统计分析。结果郑州市2013-2017年无偿献血者血液检验报废率2.496%(24 4... 目的了解郑州市无偿献血者血液报废情况,以便制定相应对策,减少血液报废。方法采用唐山启奥软件系统对郑州市2013-2017年无偿献血者血液检验报废率和非检验报废率做统计分析。结果郑州市2013-2017年无偿献血者血液检验报废率2.496%(24 402/977 761),各项报废率从高到低依次为:ALT 1.406%(13 751/977 761)、HBsAg 0.362%(3 541/977 761)、抗-HCV 0.321%(3 136/977 761)、抗-TP 0.269%(2 633/977 761)、抗-HIV 0.137%(1 341/977 761);除2013和2014年报废率无显著差异外(P>0.05),各年度之间报废率比较有显差异(P<0.05),其中2014年报废率最高2.993%(5 726/191 315),2017年报废率最低2.001%(4 285/214 115),平均报废率(2.521±0.428)%。核酸检测报废率为0.488‰(371/760 687),各项报废率从高到低依次为:HBV DNA 0.480‰(365/760 687),HIV RNA 0.005‰(4/760 687),HCV RNA 0.003‰(2/760 687);HBV DNA报废率明显高于HCV RNA及HIV RNA(P<0.01),HCV RNA和HIV RNA报废率无明显差异(P>0.05)。非检验总报废率为3.206%(134 335/4 189 536),按报废原因从高到低依次为:脂血2.797%(117 182/4 189 536)、血袋破损0.235%(9 848/4 189 536)、血凝块0.086%(3 604/4 189 536)、过期0.062%(2 597/4 189 536)、血液不足量0.023%(945/4 189 536)、溶血0.003%(116/4 189 536)、色泽异常0.001%(43/4 189 536);按血液制剂品种报废率:浓缩血小板42.63%(3 832/8 988)、冰冻血浆12.403%(117 648/948 521)、病毒灭活冰冻血浆1.361%(8 243/605 521)、冷沉淀0.431%(1 209/280 368)、全血0.393%(17/4 331)。结论加强对献血者献血前的咨询,规范采供血以及临床用血等各环节的操作,有助于减少血液报废。 展开更多
关键词 血液报废 血液检验 核酸检测 血液制备 献血者咨询 采供血 临床用血
一种核酸检测系统应用于血液检测前的性能确认
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作者 李俊英 王艺芳 +2 位作者 葛文超 王顼 方建华 《中国输血杂志》 CAS 2019年第1期73-75,共3页
目的对华益美核酸检测系统使用前进行性能验证,评估是否达到预期要求。方法通过通量测试、压力测试和内标精密度测试评估其工作性能;通过分析灵敏度验证,评估其分析灵敏度;通过抗交叉污染实验,评估其准确性、抗交叉污染能力;通过与罗氏c... 目的对华益美核酸检测系统使用前进行性能验证,评估是否达到预期要求。方法通过通量测试、压力测试和内标精密度测试评估其工作性能;通过分析灵敏度验证,评估其分析灵敏度;通过抗交叉污染实验,评估其准确性、抗交叉污染能力;通过与罗氏cobas s201检测系统的平行试验,评估其正常检测性能。结果华益美核酸检测系统9 h 10 min可完成一批满负荷为752份标本的8混样模式检测,压力测试试验过程无设备及软件程序故障。内标精密度测试中,DNA内标Ct值30.68±0.12、CV为0.56%,RNA内标Ct值30.12±0.16、CV为0.53%。在灵敏度验证试验中,1例20 IU/mL的HIV RNA标本未检出,其余所有阳性标本均被检出。平行试验中,2 383份阴性标本和2例HBV DNA阳性标本与罗氏cobas s201检测系统结果一致。结论华益美核酸检测系统的各项性能符合预期要求,可满足实际检测工作要求。 展开更多
关键词 核酸检测 性能验证 分析灵敏度
2016-2018年宁夏流感监测结果分析 预览
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作者 温秋芳 孙晓强 +2 位作者 马学旻 马江涛 孙伟 《宁夏医学杂志》 CAS 2019年第10期884-886,共3页
目的对2016-2018年宁夏流感哨点监测结果进行分析,探讨其流行特征。方法将国家级哨点监测医院每周统计上报流感样病例(ILI),采集ILI咽拭子标本;流感网络实验室采用实时荧光定量RT-PCR方法进行流感病毒核酸检测,对有关资料进行统计分析... 目的对2016-2018年宁夏流感哨点监测结果进行分析,探讨其流行特征。方法将国家级哨点监测医院每周统计上报流感样病例(ILI),采集ILI咽拭子标本;流感网络实验室采用实时荧光定量RT-PCR方法进行流感病毒核酸检测,对有关资料进行统计分析。结果 2016年第14周-2018年第13周宁夏9家哨点医院共报告ILI 29 330例,占门急诊病例的0.74%,24岁以下年龄组占65.23%。采集ILI标本13 139份,流感病毒核酸检测阳性标本1 399份,阳性率为10.65%。2016-2017监测年度,流感流行以A(H3N2)为优势毒株,占构成比的86.43%;其次为甲型H1N1,占12.45%。2017-2018监测年度,流感流行以B-Yamagata(BY)系为主,占构成比的56.10%;其次为甲型H1N1,占39.61%。2个监测年度的ILI%分别为0.70%、0.77%,流感病毒核酸阳性率分别为8.39%、12.30%。流行高峰均出现在上年的12月-次年的1月。结论 2016-2018年,宁夏流感以冬春季流行为特征,高发人群主要为青少年和儿童,以A(H3N2)、甲型H1N1、BY亚型毒株交替、混合流行,未发现其他新亚型病毒。 展开更多
关键词 流感 哨点监测 核酸检测
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血源筛查核酸检测体系的发展、应用及监管
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作者 张孝明 杨振 +4 位作者 许四宏 石大伟 孙彬裕 李丽莉 李颖 《中国药事》 CAS 2019年第9期1063-1070,共8页
目的:对我国血源筛查核酸检测体系的研发、应用和监管提供建议。方法:概述血源筛查核酸检测的技术方法,梳理核酸血筛体系的研究进展、应用及监管现状,并结合我国国情提出针对性建议。结果与结论:应用核酸检测试剂检测病原体核酸,可显著... 目的:对我国血源筛查核酸检测体系的研发、应用和监管提供建议。方法:概述血源筛查核酸检测的技术方法,梳理核酸血筛体系的研究进展、应用及监管现状,并结合我国国情提出针对性建议。结果与结论:应用核酸检测试剂检测病原体核酸,可显著缩短病原体检测'窗口期'。近年来,国产核酸检测试剂的灵敏度及检测仪器的自动化水平都有了显著提升,但是国产核酸检测体系质量和性能还有很大进步空间。建议加大对符合我国国情的核酸检测试剂的研究投入;加强核酸检测体系使用的管理;统筹规范检测模式、检验标准和检验参考品。 展开更多
关键词 肝炎 艾滋病 核酸检测 血源筛查 传染病 输血安全
欧盟和美国血筛试剂批签发监管制度研究及启示
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作者 张孝明 杨振 +3 位作者 石大伟 李丽莉 孙彬裕 李颖 《中国药事》 CAS 2019年第9期1071-1078,共8页
目的:对我国血筛试剂的批签发检验和监管思路提出建议。方法:研究欧盟和美国对血筛试剂批签发检验和监管的法规及实施现状,结合我国国情及国外监管经验,对我国血筛试剂监管提出建议。结果与结论:为保证血筛试剂质量,欧盟和美国都制定了... 目的:对我国血筛试剂的批签发检验和监管思路提出建议。方法:研究欧盟和美国对血筛试剂批签发检验和监管的法规及实施现状,结合我国国情及国外监管经验,对我国血筛试剂监管提出建议。结果与结论:为保证血筛试剂质量,欧盟和美国都制定了严格的法律法规,对血筛试剂实施批签发管理。依据《生物制品批签发管理办法》,我国已对血清学检测血筛试剂实施批签发,但核酸检测血筛试剂尚未开展批签发。建议加快推动落实批签发工作,适时增加时限性输血相关传染病标志物的检测试剂批签发项目,指定检验机构开展全部项目检验,以进一步完善我国血筛试剂监管,保障人民用血安全。 展开更多
关键词 血筛试剂 核酸检测 血清学检测 输血 批签发 监管
2015―2017年攀枝花市环境和职业暴露人群禽流感检测结果 被引量:1
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作者 周霞 吴万里 +1 位作者 胡澜怀 李琴 《职业与健康》 CAS 2018年第3期391-394,共4页
目的分析攀枝花市外环境禽流感病毒分布情况与职业暴露人群感染情况,为禽流感防控提供科学依据。方法 2015年12月、2016年8月和2017年5月分别采集各种环境标本,用荧光定量PCR(Real-time PCR)检测禽流感A型,阳性者进一步检测H5、H7、H... 目的分析攀枝花市外环境禽流感病毒分布情况与职业暴露人群感染情况,为禽流感防控提供科学依据。方法 2015年12月、2016年8月和2017年5月分别采集各种环境标本,用荧光定量PCR(Real-time PCR)检测禽流感A型,阳性者进一步检测H5、H7、H9亚型核酸;职业暴露人群血清标本采用马细胞血凝集抑制试验检测H5、H7、H9抗体。结果 343份环境标本检出核酸阳性63份,阳性率18.37%(其中H9占86.57%,H7占1.59%,H5占31.75%,H5+H9混合占26.57%,A未分型占9.52%)。不同场所和不同类型标本检测阳性率最高为活禽市场和宰杀或摆放禽肉案板表面,分别为20.07%和29.82%;冬春季高于夏季。职业暴露人群75份血清的H5、H7、H9抗体均为阴性。结论攀枝花市外环境中存在H5、H7与H9等多种亚型禽流感病毒,特别是活禽市场,有感染人的风险,需加强冬春季活禽市场监测并做好防控措施。 展开更多
关键词 禽流感病毒 外环境标本 核酸检测
核酸检测与血清学检测在输血传染病筛查中的应用 预览 被引量:3
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作者 张叁涛 彭华丽 +1 位作者 段元山 马杰 《临床输血与检验》 CAS 2018年第6期578-581,共4页
目的 对比分析输血前感染指标的核酸检测和血清学检测结果,探讨相关检测的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验检测本院2016年4月1日~2017年4月1日共4177例接受输血前检查的患者血清中感染性指标(抗-HCV、抗-HIV、抗-TP、HBsAg、HBsAb... 目的 对比分析输血前感染指标的核酸检测和血清学检测结果,探讨相关检测的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验检测本院2016年4月1日~2017年4月1日共4177例接受输血前检查的患者血清中感染性指标(抗-HCV、抗-HIV、抗-TP、HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb),采用核酸检测技术对其中1 509例患者血清中HBV DNA和HCV RNA进行检测,并结合患者年龄、性别对这些结果进行统计和分析. 结果 4177例患者中,检出HBsAg阳性患者376例(9%)、抗-HCV阳性患者5 4例(1.29%)、抗-TP阳性患者118例(2.82%)、抗-HIV阳性患者6例(0.14%).进行核酸检测的1509例患者中,HBsAg阳性者的HBV DNA阳性率为55.56%,HBsAg阴性而HBV DNA阳性者所占比例为0.22%,抗-HCV抗体阳性者的HCV RNA阳性率为80.00%.结论 对拟输血患者进行核酸检测和血清学检测,有利于相关感染性疾病的发现与诊断,也有利于减少因输血和侵入性操作引起感染的发生. 展开更多
关键词 输血 传染病 核酸检测 血清学检测
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核酸检测非重复反应性的HBsAg阴性血液HBV感染的确认 被引量:2
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作者 邓雪莲 李婷婷 +4 位作者 郭笑寒 周磊 臧亮 梁晓华 Daniel Candotti 《中国输血杂志》 2018年第9期962-967,共6页
目的对单个标本核酸检测呈初始反应性(Initial reactive,IR)但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性(NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR),且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus(盖立复... 目的对单个标本核酸检测呈初始反应性(Initial reactive,IR)但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性(NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR),且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus(盖立复)进行单个标本核酸检测(Individual donation nucleic acid testing,ID-NAT)。应用超高速离心技术(25 0000 g×3 h)与靶向HBV基因BCP/PC、PreCore/Core、pre-S/S和S区段的高灵敏度巢式PCR检测相结合的超离体系对12mL NAT NRR血浆标本进行HBV DNA确认,以获得HBV基因序列作为HBV DNA确认的标准;同时与采用2次联检和1次鉴别试验的推荐流程的确认结果进行比较。NAT NRR标本补充电化学发光法(ECL,罗氏)的HBsAg,抗-HBc和抗-HBc检测。结果 2016年1月至2018年2月间共筛查标本77 556份,检出HBsAg-/NAT NRR标本85份(0. 11%),其中有79份标本进行了确认试验。超离体系确认出HBV感染标本43份,推荐流程确认出32份。配对比较显示超离体系明显优于推荐流程(McNemar test,P〈0. 05):有48份(60. 7%)标本至少被1种流程确认,其中27份(34. 2%)标本同时被2种流程确认,16份(20. 2%)标本单独被超离体系确认,超离体系未能确认的5份(6. 3%)标本被推荐流程确认。HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc+(92%和80%)和抗-HBs+(42%和55%)的占比无统计学差异,但确认组抗-HBs定量值的分布(中位数22 IU/mL,范围10-1 000 IU/mL)明显低于未确认组(P〈0. 05)。在HBV感染确认组中鉴别出血清学阳性型隐匿性乙型肝炎病毒感染(Occult Hepatitis B virus infection,OBI)献血者45位(94%)、血清学阴性OBI献血者1位,2位献血者因未能跟踪而疑似HBV窗口期感染。结论加大核酸提取的血浆体积并结合以高灵敏度巢式PCR的方法能够确认60%的HBsAg-/NAT NRR标本存在HBV DNA。NAT NRR现象与病毒载量极低的OBI有关,抗-HBc检测可有助于此类HBV感� 展开更多
关键词 血液筛查 核酸检测 非重复反应性 隐匿性HBV感染 血液安全 确认试验
无锡市活禽交易市场家禽禽流感监测 被引量:1
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作者 鲍静 马广源 +3 位作者 陈善辉 肖勇 凌霞 钱燕华 《中国热带医学》 CAS 2018年第5期452-455,共4页
目的了解无锡市活禽交易市场中家禽禽流感病毒感染情况,评估人感染禽流感风险。方法采集禽类咽拭子和肛拭子标本,采用荧光定量PCR技术检测禽流感甲型通用及H5、H7、H9亚型病毒核酸,并进行统计学分析。结果 2014年11月—2015年3月共采集... 目的了解无锡市活禽交易市场中家禽禽流感病毒感染情况,评估人感染禽流感风险。方法采集禽类咽拭子和肛拭子标本,采用荧光定量PCR技术检测禽流感甲型通用及H5、H7、H9亚型病毒核酸,并进行统计学分析。结果 2014年11月—2015年3月共采集并检测禽类标本1 962份,甲型流感病毒核酸阳性248份,阳性率为12.64%;检出的禽流感病毒型别以H9亚型194份(9.89%)为主,其次为H5亚型38份(1.94%)、H7亚型8份(0.41%)和混合型8份(0.41%)。阳性率较高的监测场所为城乡活禽市场(24.06%)和农贸市场(14.06%)。监测期间,不同月份禽流感病毒阳性率差异有统计学意义(χ2=74.60,P〈0.01)。不同类型标本中,除混合感染外,咽拭子中禽流感病毒核酸检出率均高于肛拭子。结论无锡市活禽市场禽类禽流感病毒污染较为严重,且型别多样,存在人感染禽流感病毒的风险,应加强禽类及其环境中禽流感病毒的实时监测。 展开更多
关键词 禽流感病毒 禽类监测 核酸检测
核酸扩增法检测细菌的方法研究及其在浓缩血小板制品细菌检测中的初步应用 被引量:1
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作者 刘宇宁 王迅 +3 位作者 费丹娜 郝旭赞 符沙鸥 贾尧 《中国输血杂志》 北大核心 2017年第7期702-704,共3页
目的 建立符合自动化检测要求的核酸扩增法检测细菌的方法,并初步应用于手工浓缩血小板制品的细菌检测。方法 对细菌DNA提取方法进行自动化改造,使用不同菌株评估改良后的方法的灵敏度和特异性,并将该方法应用于100例手工浓缩血小板的... 目的 建立符合自动化检测要求的核酸扩增法检测细菌的方法,并初步应用于手工浓缩血小板制品的细菌检测。方法 对细菌DNA提取方法进行自动化改造,使用不同菌株评估改良后的方法的灵敏度和特异性,并将该方法应用于100例手工浓缩血小板的检测。结果 对细菌DNA提取方法进行改造,满足了自动化检测的要求,该方法对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌的灵敏度分别可达10、150、65、15 CFU/m L。使用灭菌水检测50次,均未发现非特异性检测产物。该方法和细菌培养方法同时能从100例手工浓缩血小板中检出1例细菌阳性标本。结论 细菌基因组16S DNA检测方法能快速灵敏地检出血小板制品中常见的污染细菌,应用于手工浓缩血小板检测能获得与细菌培养相同的效果。 展开更多
关键词 细菌污染 浓缩血小板 核酸检测 自动化检测
惠州市无偿献血者血液HBV、HCV及HIV(1+2型)酶免联合核酸检测结果分析
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作者 万小春 钟展华 +3 位作者 严凤好 曾演强 曾少丽 湛玉武 《医学检验与临床》 2017年第4期47-49,46共4页
目的:分析酶免检测联合核酸检测2016年惠州市无偿献血人群HBV、HCV、HIV(1+2型)的筛查结果.方法:先采用2种不同厂家ELISA试剂对采集的2016年惠州市无偿献血者血液标本进行感染性标志物筛查,再用苏州华益美生物科技有限公司生产的... 目的:分析酶免检测联合核酸检测2016年惠州市无偿献血人群HBV、HCV、HIV(1+2型)的筛查结果.方法:先采用2种不同厂家ELISA试剂对采集的2016年惠州市无偿献血者血液标本进行感染性标志物筛查,再用苏州华益美生物科技有限公司生产的乙型肝炎病毒、 丙型肝炎病毒、 人类免疫缺陷病毒(1+2型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光法),对ELISA筛查合格的标本进行HBV、HCV、HIV(1+2型)核酸筛查.结果:54905人份血液标本中,经过血清学检测,HBsAg、 抗-HCV、 抗-HIV以及抗-TP均合格的血液共53476份.在进行核酸检测的53476例献血者标本中,100个核酸汇集检测呈阳性,阳性率为1.87‰.在核酸汇集检测阳性标本中,49例为核酸拆分检测病毒核酸阳性、51例为核酸拆分检测病毒核酸阴性.在拆分检测病毒核酸阳性标本中,HBV DNA阳性为49例(0.92‰)、HCV RNA阳性为0例(0%)和HIV(1+2型)RNA阳性为0例(0%).结论:在酶免检测的基础上应用核酸检测能有效避免HBV、HCV、HIV(1+2型)的漏检,降低输血传播相关病毒的风险;而献血人群中检出病毒核酸阳性主要为HBV DNA阳性而HBsAg无反应性的标本. 展开更多
关键词 酶免检测 核酸检测 血液筛查 血液安全
重庆地区无偿献血人群隐匿性乙型肝炎病毒感染的特征 预览 被引量:8
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作者 张涛 廖红梅 +3 位作者 张春红 谭茜茜 毛伟 黄霞 《传染病信息》 2017年第1期44-47,共4页
目的了解重庆地区无偿献血人群中隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)情况,分析其血清学和病毒学特征。方法应用酶联免疫法(筛查HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV)及核酸检测(nucleic acid testing,NAT)法(筛... 目的了解重庆地区无偿献血人群中隐匿性乙型肝炎病毒感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)情况,分析其血清学和病毒学特征。方法应用酶联免疫法(筛查HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV)及核酸检测(nucleic acid testing,NAT)法(筛查HBV、HCV、HIV)筛查重庆地区93 625份初筛合格的无偿献血者血液标本。对其中HBs Ag(-)但HBV DNA(﹢)的标本进行抗-HBs、抗-HBc、HBe Ag、抗-HBe 4项血清学标志物测定,进一步对抗-HBc(﹢)标本做病毒载量测定以及基因分型。结果 93 625份标本中HBs Ag(-)但HBV DNA(﹢)的检出率为0.097%(91/93 625)。91份阳性标本中79份为抗-HBc(﹢),检出率为0.084%(79/93 625)。该部分标本阳性者被视为OBI献血者。OBI献血者的血清学特征可以分为4种模式:单抗-HBc(﹢)、抗-HBc(﹢)/抗-HBs(﹢)、抗-HBc(﹢)/抗-HBe(﹢)以及抗-HBc(﹢)/抗-HBs(﹢)/抗-HBe(﹢)。病毒载量为0~1056.8IU/ml(中位数为108.6 IU/ml),基因型以B型为主。结论重庆地区无偿献血者中OBI检出率较高,其血清学和病毒学特征具有地区性。NAT能提高OBI检出的灵敏度,但也存在一定的假阳性,对血液安全具有重要影响。 展开更多
关键词 核酸检测 隐匿性乙型肝炎病毒感染 血清学特征 病毒学特征
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溶血、脂肪血及保存条件对HBVDNA、HIVRNA核酸检测的影响 预览 被引量:7
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作者 庄养林 熊丽红 +2 位作者 张鹏飞 王芳 陈丹 《天津医药》 CAS 2017年第10期1025-1028,共4页
目的 研究溶血、 脂肪血、 不同保存温度和保存时间对血液 HIVRNA、 HBVDNA 核酸检测 (NAT) 的影响.方法 应用罗氏 MPXV2.0 试剂, 分别于 4 ℃、 25 ℃、 37 ℃及-30 ℃下进行保存的 12~30 倍试剂检测下限 (LOD)浓度的 HIVRNA、 HBV... 目的 研究溶血、 脂肪血、 不同保存温度和保存时间对血液 HIVRNA、 HBVDNA 核酸检测 (NAT) 的影响.方法 应用罗氏 MPXV2.0 试剂, 分别于 4 ℃、 25 ℃、 37 ℃及-30 ℃下进行保存的 12~30 倍试剂检测下限 (LOD)浓度的 HIVRNA、 HBVDNA 标本, 对所有标本于 4 h、 1 d、 2 d、 3 d、 1 周及 4 周后, 采用 6 混样模式进行 NAT 检测; 对含终浓度为 2~5 倍 LOD 的 HIVRNA、 HBVDNA 标本的 6 组溶血标准样本 [血红蛋白 (Hb) 浓度分别为 97、 34、 17、 8、5 及 3 g/L]、 5 组脂肪血标准 [三酰甘油 (TG) 浓度分别为 7.93、 3.80、 2.63、 1.83 及 1.49 mmol/L]、 1 组无溶血正常三酰甘油浓度 (Hb 及 TG 浓度分别为 0 g/L、 0.95 mmol/L) 的对照样本进行 NAT 检测.结果 在 25 ℃及以下温度保存 4 h至 4 周, HIVRNA、 HBVDNA 检测循环阈值 (Ct 值) 差异均无统计学意义 (P〉0.05), HBVDNA 在 37 ℃条件下保存,3 d 及 1 周检测 Ct 值分别与 4 h、 1 d、 2 d 比较差异有统计学意义 (P〈0.05); Hb 浓度为 97 g/L 时 HBVDNA 和 HIVRNA 均未能被检出, 当 Hb 浓度〈34 g/L 时, HBVDNA、 HIVRNA 检测 Ct 值分别与其对照组相比较差异无统计学意义 (P〉0.05); TG≤7.93 mmol/L 时, HIVRNA、 HBVDNA 各组检测 Ct 值与对照组比较差异无统计学意义 (P〉0.05).结论 使用罗氏 MPXV2.0 试剂检测的 HIVRNA、 HBVDNA 标本, 在 25 ℃及以下最长可以放置 4 周; Hb〈34 g/L 以及 TG≤7.93 mmol/L 时, 对罗氏 MPXV2.0 试剂检测HIVRNA、 HBVDNA 没有显著性影响. 展开更多
关键词 血液保存 因素分析 统计学 乙肝病毒脱氧核糖核酸 人类免疫缺陷病毒核糖核酸 核酸检测技术 Ct值 溶血 脂肪血
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