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黄连素抑制猪流行性腹泻病毒复制和组装
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作者 叶跃天 郇文彬 +3 位作者 陈欢 钱莺娟 JUNG Yong-sam 戴建君 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1829-1835,共7页
通过Western blot、qRT-PCR、噬斑形成试验等方法检测细胞病变、病毒增殖水平、细胞中病毒蛋白水平与基因水平表达来探究黄连素是否具有抗猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)活性,并通过检测细胞凋亡相关的标志蛋... 通过Western blot、qRT-PCR、噬斑形成试验等方法检测细胞病变、病毒增殖水平、细胞中病毒蛋白水平与基因水平表达来探究黄连素是否具有抗猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)活性,并通过检测细胞凋亡相关的标志蛋白PARP1、caspase7以探究黄连素是否影响病毒引起的细胞凋亡。结果显示,黄连素明显抑制了PEDV在Vero细胞中引起的细胞病变,明显降低了细胞内与上清中的病毒粒子的产生。在后续研究中,发现黄连素抑制了PEDV的复制和组装阶段,对病毒的吸附、入胞、释放的过程并没有明显影响。另外,检测了细胞凋亡的标志蛋白PARP1和caspase7,发现黄连素下调了PARP1、caspase7的剪切,减弱了PEDV诱导的细胞凋亡。结果表明,黄连素具有抗PEDV活性,并抑制PEDV的复制与组装阶段,可作为一种针对PEDV感染的潜在抗病毒药物。 展开更多
关键词 PEDV 黄连素 复制 组装 细胞凋亡
猪流行性腹泻病毒IgA抗体间接ELISA方法的建立 预览
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作者 刘烨 张家林 +5 位作者 王潇博 石达 时洪艳 陈建飞 张鑫 冯力 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期918-923,共6页
为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法,本研究利用融合PCR的方法,将PEDV G2型LNct2a株S蛋白的S1基因片段与人源IgG分子的Fc基因片段融合,克隆于真核表达质粒pAAV-IRES-hr GFP中,构建真核表达质粒pAAV-LNCT... 为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)血清特异性IgA抗体的间接ELISA方法,本研究利用融合PCR的方法,将PEDV G2型LNct2a株S蛋白的S1基因片段与人源IgG分子的Fc基因片段融合,克隆于真核表达质粒pAAV-IRES-hr GFP中,构建真核表达质粒pAAV-LNCT2-S1-Fc并转染293T细胞,表达并纯化了S1蛋白。以纯化的S1蛋白作为包被抗原,以羊抗猪IgA-HRP为二抗,通过优化反应条件,建立了检测PEDV G2型特异性IgA抗体的间接ELISA方法,并对该方法进行了特异性、敏感性及重复性试验。特异性试验结果显示该方法对猪传染性胃肠炎病毒、轮状病毒、猪德尔塔冠状病毒和圆环病毒的阳性血清均无交叉反应;敏感性试验结果显示该方法能够检测出400倍稀释的阳性血清;批内和批间重复性变异系数均小于10%。利用该间接ELISA方法和间接免疫荧光方法(IFA)同时对临床样品检测,结果显示二者总符合率为98.6%。本研究建立的ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,能够用于检测及评价血清中PEDV特异性IgA抗体的水平,为PEDV流行情况及免疫效果评价提供了有效的手段。 展开更多
关键词 PEDV 间接ELISA S1蛋白 IGA抗体
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永胜县仔猪病毒性腹泻感染调查 预览
3
作者 唐俊瑜 杨润焕 +5 位作者 王晓春 曾彩虹 夏桂林 蓝睿 杨贵树 王丽屏 《贵州农业科学》 CAS 2019年第2期64-67,共4页
探明永胜县哺乳仔猪腹泻的病因,为其控制和预防提供参考,对永胜县3个规模化养殖场和散养户共88份出现腹泻症状的仔猪粪便样品进行RT-PCR分子生物学鉴定。结果表明:在88份样品中,有8份猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性,阳性率为9.09%;有4份传... 探明永胜县哺乳仔猪腹泻的病因,为其控制和预防提供参考,对永胜县3个规模化养殖场和散养户共88份出现腹泻症状的仔猪粪便样品进行RT-PCR分子生物学鉴定。结果表明:在88份样品中,有8份猪流行性腹泻病毒(PEDV)阳性,阳性率为9.09%;有4份传染性胃肠炎病毒(TGEV)阳性,阳性率为4.54%;有24份猪轮状病毒(PRoV)阳性,阳性率为27.27%。PRoV是引起当地哺乳仔猪腹泻的主要病原,部分猪场还存在TGEV与PRoV、PEDV与PRoV混合感染。 展开更多
关键词 仔猪 腹泻 PEDV TGEV PRoV 永胜县
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2014-2017年中国部分地区PEDV流行株S基因遗传进化分析
4
作者 郑慧华 张鸿鑫 +3 位作者 韩昊莹 乔涵 赵宇 陈红英 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2019年第2期249-255,共7页
参考GenBank中PEDV经典CV777毒株基因组序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法对临床采集的疑似PEDV样品进行S基因扩增、克隆和测序,拼接获得30条完整S基因序列,并进行遗传进化及同源性分析。结果显示,获得的30条PEDV S基因与25个参考株S... 参考GenBank中PEDV经典CV777毒株基因组序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法对临床采集的疑似PEDV样品进行S基因扩增、克隆和测序,拼接获得30条完整S基因序列,并进行遗传进化及同源性分析。结果显示,获得的30条PEDV S基因与25个参考株S基因的核苷酸相似性介于93.6%~99.8%;且各流行毒株与经典毒株比较,具有多处的点突变、插入和缺失。与其他参考株相比,S1区存在157个氨基酸突变位点,占总数的65.7%(157/239),暗示PEDV的S1区域比S2区域易发生变异;表明目前中国PEDV流行株已经发生了变异,在一定程度揭示了免疫猪群仍然发病的原因。 展开更多
关键词 PEDV S基因 遗传进化分析 变异
STAT3在猪流行性腹泻病毒感染的作用及机制初步探索 预览
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作者 杨丽君 张健 +4 位作者 许嘉宇 张璐 冯力 陈洪岩 王玉娥 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期3-7,共5页
为探究信号传导及转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染过程中的作用,采用STAT3特异性siRNA处理HEK293和IPEC细胞,作用24 h后,通过... 为探究信号传导及转录激活因子3(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)在猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染过程中的作用,采用STAT3特异性siRNA处理HEK293和IPEC细胞,作用24 h后,通过荧光定量PCR和Western Blot试验显示,其能够明显降低STAT3的mRNA水平和蛋白水平;在此条件下接种PEDV,通过荧光定量PCR试验,显示当STAT3的mRNA水平降低时能够显著抑制PEDV的RNA水平,Western Blot试验结果也证实抑制STAT3内源性表达能够显著抑制PEDV复制。为进一步研究STAT3的作用机制,采用STAT3特异性siRNA处理这两种细胞,24 h后经过荧光定量PCR检测发现敲低STAT3后,干扰素刺激基因MxA、ISG15以及IFN-β,IFN-λ的mRNA水平均显著升高。本研究对于进一步阐明STAT3参与PEDV感染引发的IFN抗病毒反应提供了试验依据。 展开更多
关键词 STAT3 PEDV IFN
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基于Taqman探针三重Real-Time RT-PCR检测PEDV、TGEV、PoRV方法的建立与应用 预览
6
作者 李儒曙 苏惠龙 +4 位作者 蒋郁明 邓湘辉 黄铮 赵福振 罗宝正 《广东畜牧兽医科技》 2019年第5期41-44,共4页
为研究能够同时检测PEDV、TGEV、PoRV三种猪病毒性腹泻病原的方法,分别设计三套特异性的引物和探针,建立了基于Taqman探针的三重Real-Time RT-PCR检测方法,实验结果表明,该方法特异性好,灵敏度高,检测最低浓度为10 copies/μL数量级.应... 为研究能够同时检测PEDV、TGEV、PoRV三种猪病毒性腹泻病原的方法,分别设计三套特异性的引物和探针,建立了基于Taqman探针的三重Real-Time RT-PCR检测方法,实验结果表明,该方法特异性好,灵敏度高,检测最低浓度为10 copies/μL数量级.应用该方法对广东11个地市的44份猪腹泻样品进行检测,其中PEDV阳性率为100%,TGEV、PoRV阳性率为0,证明PEDV是引起广东地区猪病毒性腹泻的重要病原. 展开更多
关键词 三重Real-TimeRT-PCR PEDV TGEV PoRV
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河南部分地区猪流行性腹泻病毒流行病学调查 预览
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作者 李凡 赵坤坤 刘守川 《养猪》 2019年第5期113-117,共5页
试验对临床上可引起腹泻的部分病原进行了检测,并对河南部分地区的猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)进行了分子流行性病学调查。对从河南地区5个规模化猪场获得的10份腹泻病料进行了反转录PCR,并对检出的8份PEDV... 试验对临床上可引起腹泻的部分病原进行了检测,并对河南部分地区的猪流行性腹泻病毒(Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)进行了分子流行性病学调查。对从河南地区5个规模化猪场获得的10份腹泻病料进行了反转录PCR,并对检出的8份PEDV的S基因部分序列进行测序、同源性和遗传进化分析。结果显示,临床的腹泻病例部分为混合感染,作为主要病原的PEDV、猪A群轮状病毒(PoRV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的检出率有所不同。将8株PEDV的S基因与参考毒株CV777进行比较,S基因存在不同位点和不同程度的氨基酸突变。S基因的同源性比较和遗传进化分析表明:河南地区的8株PEDV毒株属于不同的分支,且181737-1、181737-2和180278-1为流行株,180276-3、180276-6、180435-1和181753-1更接近于经典株,181212-1更接近于疫苗株。结果表明,河南地区现阶段流行的PEDV毒株复杂多样,优势毒株可能发生了变化。 展开更多
关键词 猪腹泻 PEDV 分子流行病学 S基因 遗传进化分析
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10株猪流行性腹泻病毒云南分离株的S基因克隆及分子特征 被引量:1
8
作者 钱祁昇 朱丽 +6 位作者 苏琳琳 张天羽 赵翔玥 郑晓林 吕念词 柴俊 张以芳 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第5期101-107,共7页
自2013年来,猪流行性腹泻病(PED)的暴发给云南省养猪业带来严重的经济损失。本研究对2018年来自云南4个地区的42份病料中分离出的6株猪流行性腹泻病毒(PEDV)的部分S基因进行扩增,并结合在2013年所分离到的来自云南4个地区的4株PEDV流行... 自2013年来,猪流行性腹泻病(PED)的暴发给云南省养猪业带来严重的经济损失。本研究对2018年来自云南4个地区的42份病料中分离出的6株猪流行性腹泻病毒(PEDV)的部分S基因进行扩增,并结合在2013年所分离到的来自云南4个地区的4株PEDV流行株,进行分子特征和遗传进化分析。结果显示:这2年的分离株和CV777株相比,2018年分离株的核苷酸和氨基酸突变位点增加了12个和7个,且有3个丝氨酸突变都是在COE结构域(69、101和146)。系统发育分析表明,2018和2013年分离株的核苷酸和氨基酸的同源性为95.6%~98.8%,95%~98.8%;分别与CV777株相比,核苷酸和氨基酸的同源性差异较小(94.9%~95.5%和92.7%~95.4%;94.5%~95.2%和93.4%~94.2%),亲缘关系都较远。2013年的分离株主要分布在G2b亚群,而2018年的分离株主要分布在G2a和G2c亚群,具有遗传多样性。N-糖基化和磷酸化位点预测分析显示,在216位上预测的N-糖基化位点由NSSI→NSSF,尤其是COE结构域中的丝氨酸取代而导致其可预测磷酸化。这些变异很可能会影响其抗原性和疫苗效果,导致PEDV控制效果不好。本研究阐明了云南部分地区PEDV流行毒株的分子流行病学和遗传特征,为该地区PED的防控奠定理论基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PEDV S基因 分子特征 系统发育分析
基因组2b灭活疫苗、美国棘波插入、干扰素λ对猪流行性腹泻病毒感染力的影响 预览
9
作者 董稼诗 李鹏 《现代畜牧兽医》 2019年第2期39-44,共6页
干扰素λ为干扰素家族Ⅱ中的一种。干扰素λ与IFN-alpha相比表现出更为强大的抗病毒活性并主要作用于黏膜上皮。基因组2b(genogroup 2b)分离株比基因组1b(genogroup 1b)分离株具有更高的感染力和致病性。基因组2b(genogroup 2b)灭活疫... 干扰素λ为干扰素家族Ⅱ中的一种。干扰素λ与IFN-alpha相比表现出更为强大的抗病毒活性并主要作用于黏膜上皮。基因组2b(genogroup 2b)分离株比基因组1b(genogroup 1b)分离株具有更高的感染力和致病性。基因组2b(genogroup 2b)灭活疫苗的研发使猪流行性腹泻病毒基因组2b分离株得到有效的预防。美国棘波插入lowa106(S-INDEL)对猪流行性腹泻病毒(PC21A)的部分保护可能提示我们不同核苷酸的作用。猪流行性腹泻病的流行正是因为猪流行性腹泻病毒毒株的基因变异导致变异株毒力增强以及现有疫苗难以有效免疫。猪流行性腹泻病毒感染力太强。本文将从基因组2b灭活疫苗、美国棘波插入、干扰素λ三个方面进行讨论。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 基因组2b灭活疫苗 干扰素λ 美国棘波插入
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沈阳地区1株猪流行性腹泻病毒S1基因序列测定与分析 预览 被引量:1
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作者 王宏燕 《现代畜牧兽医》 2019年第4期6-11,共6页
利用PEDV的S1基因的特异性引物,克隆了沈阳地区1株PEDV流行毒株(LNSY-2017)的S1基因,并通过S1基因序列比对,分析了此病毒株与其他相关毒株的亲缘关系。结果显示:LNSY-2017株S1基因(2 372 bp)与我国疫苗株CV777(2 364 bp)相比,存在16个... 利用PEDV的S1基因的特异性引物,克隆了沈阳地区1株PEDV流行毒株(LNSY-2017)的S1基因,并通过S1基因序列比对,分析了此病毒株与其他相关毒株的亲缘关系。结果显示:LNSY-2017株S1基因(2 372 bp)与我国疫苗株CV777(2 364 bp)相比,存在16个核苷酸的插入和8个核苷酸的缺失,导致推导的氨基酸序列存在6个氨基酸的插入(56G、59QGVN62和69G)和6个氨基酸的缺失(73N、157FA158、380YL381和521G),且在2个主要中和抗体表位(aa499~637和aa763~770)有11处氨基酸的突变。遗传进化分析结果显示,LNSY-2017与主要的疫苗株同源性较低(91.4%~92.5%),而与2012年韩国毒株、美国2013年毒株以及中国近年来流行毒株同源性最高(97.0%~98.7%),属于基因G2b型。结果表明,沈阳地区的PEDV流行株已经发生很大变异,因此很有必要加强对PEDV变异的监测。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 S1基因 序列分析 遗传进化分析
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2种猪冠状病毒双重RT-PCR检测方法的建立与应用 预览
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作者 温海京 贾超伟 +3 位作者 刘芊麟 张喜喜 刘鑫宇 周双海 《北京农学院学报》 2019年第1期51-55,共5页
【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RT-PCR进行条件优化并进... 【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RT-PCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验,然后用单项RT-PCR方法和双重RT-PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重RT-PCR检测方法的PEDV与TGEV的检测敏感度分别为59、49copies/μL,该方法对当前常见猪源RNA病毒的检测结果都为阴性。该方法对2013-2016年18个猪场的235份仔猪腹泻样品的检测结果显示,PEDV和TGEV的个体阳性率分别为73.6%和2.1%,与单项RTPCR方法检测结果无显著性(P>0.05)差异,临床样品中PEDV的猪场阳性率与个体阳性率都极显著(P<0.01)高于TGEV。【结论】建立了一种有较高灵敏性与特异性的PEDV与TGEV的双重RT-PCR检测方法,近年来猪传染性腹泻样品中PEDV检出率极显著高于TGEV。 展开更多
关键词 猪冠状病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪流行性腹泻病毒 双重RT-PCR
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Construction of multiple shRNA vectors targeting PEDV and TGEV and production of transgenic SCNT porcine embryos in vitro
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作者 Jianwen CHEN Kaiyuan PAN +4 位作者 Zhen CHEN Biao DING Dandan SONG Wenbin BAO Yunhai ZHANG 《农业科学与工程前沿:英文版》 2019年第1期66-72,共7页
Porcine viral diarrhea is an acute and highly contagious enteric disease of pigs that causes huge economic losses worldwide. Porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) and transmissible gastroenteritis virus(TGEV) are the ... Porcine viral diarrhea is an acute and highly contagious enteric disease of pigs that causes huge economic losses worldwide. Porcine epidemic diarrhea virus(PEDV) and transmissible gastroenteritis virus(TGEV) are the main pathogens responsible for piglet viral diarrhea. However, currently there is no speci?c drug available for the effective treatment of viral diarrhea.Therefore, it is necessary to seek an effective method to diminish PEDV and TGEV infection rates. RNA interference has been applied successfully to inhibit the virus replication. It provides a potential strategy for breeding resistant pigs. In this study, four promoters and four short hairpin RNA(shRNA) vectors with LoxP sites at each end of the selectable marker genes were constructed to target PEDV and TGEV. These vectors were then transfected into porcine fetal ?broblasts, G418 resistant transfectants were con?rmed by PCR and transgenic SCNT porcine blastocysts were obtained. These results have paved the way for future production of marker-free transgenic resistant to PEDV and TEGV pigs by SCNT. 展开更多
关键词 PIGLET diarrhea RNAi PEDV TGEV TRANSGENIC resistance breeding
我国猪流行性腹泻病毒分子遗传变异研究浅析 预览
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作者 张智刚 魏启超 范学伟 《中国猪业》 2019年第5期55-57,共3页
猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起猪的一种急性、 高度传播的肠道疾病.近年来PEDV基因变异毒株不断出现,造成了猪流行性腹泻防疫失败现象不断增多,导致其流行趋势增强.阐述了近年来国内有关PEDV的S1、M和ORF3基因的研究进展,从分... 猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒引起猪的一种急性、 高度传播的肠道疾病.近年来PEDV基因变异毒株不断出现,造成了猪流行性腹泻防疫失败现象不断增多,导致其流行趋势增强.阐述了近年来国内有关PEDV的S1、M和ORF3基因的研究进展,从分子生物学角度对PEDV进行遗传进化分析总结,为该病的防控以及流行病学研究提供参考. 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 PEDV S1基因 M基因 ORF3基因
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规模猪场哺乳仔猪混合感染PEDV和PDCoV暴发腹泻的综合防控 预览
14
作者 陈志雄 王洪海 张峰 《中国猪业》 2019年第5期85-88,共4页
报道了一例规模化猪场哺乳仔猪混合感染PEDV和PDCoV后发生腹泻的病例。通过流行病学、病理变化以及实验室PCR/RT-PCR检测结果予以确诊,并及时采取紧急免疫,停用霉变饲料原料,添加保肝解毒、提高机体免疫功能的药物等综合防控措施,控制... 报道了一例规模化猪场哺乳仔猪混合感染PEDV和PDCoV后发生腹泻的病例。通过流行病学、病理变化以及实验室PCR/RT-PCR检测结果予以确诊,并及时采取紧急免疫,停用霉变饲料原料,添加保肝解毒、提高机体免疫功能的药物等综合防控措施,控制了该猪场腹泻病情的扩散。 展开更多
关键词 仔猪 腹泻 PEDV PDCoV 霉菌毒素
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一例猪流行性腹泻的诊断 预览
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作者 陈静 何广霞 +8 位作者 麻胜红 路美兰 曾智勇 梁海英 张爱琼 何小莉 咸文 陈娟 吴好叶 《猪业科学》 2019年第5期140-141,共2页
猪流行性腹泻(PorcineEpidemicDiarrhea,简称PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的,一种以患病猪食欲下降、呕吐及严重腹泻等为主要临床特征的急性、接触性肠道传染性疾病[1]。该病在寒冷季节多发,特别是冬春交替时节。
关键词 猪流行性腹泻病毒 诊断 PEDV 传染性疾病 食欲下降 临床特征 寒冷季节 接触性
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云南部分地区猪流行性腹泻病毒S基因克隆与序列分析 预览
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作者 周玉照 张小苗 +2 位作者 赵天智 普星星 张以芳 《上海畜牧兽医通讯》 2019年第1期10-12,共3页
为了解云南省不同地区猪流行性腹泻病毒( Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)S基因的核苷酸序列和氨基酸序列与疫苗毒株和早期分离株 S 基因的差异性,本实验分别从云南安宁、宣威、昆明、师宗、陆良、富民、临沧、曲靖8个地区采集... 为了解云南省不同地区猪流行性腹泻病毒( Porcine Epidemic Diarrhea Virus,PEDV)S基因的核苷酸序列和氨基酸序列与疫苗毒株和早期分离株 S 基因的差异性,本实验分别从云南安宁、宣威、昆明、师宗、陆良、富民、临沧、曲靖8个地区采集疑似感染PEDV仔猪的小肠及粪便样品46份,采用RT-PCR方法进行PEDV S基因的扩增、测序分析。结果显示:云南安宁、宣威、临沧、富民的PEDV阳性率分别为83.33%、57.14%、100%、62.50%, 46份样品中有21份样品为PEDV阳性,阳性检出率高达45.65%;将云南安宁、宣威、临沧、富民检测到的 PEDV 的S基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列与 PEDV 标准株CV777、韩国DR13株及其致弱株、国内早期的甘肃株、上海株、2010年至2012年的各地分离株进行比较分析,发现这次从云南检测到的PEDV毒株均为同一株毒株,此毒株与浙江株、黑龙江株、河南株、广东株、北京株、湖北株和福建株相似,与疫苗毒株和早期分离株的S基因相比发生了明显的变化。 展开更多
关键词 PEDV S基因 氨基酸突变 同源性
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猪流行性腹泻的治疗与防控 预览
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作者 王浩先 刘孟宇 +2 位作者 陈宇 魏欣宇 倪宏波 《江西畜牧兽医杂志》 2019年第5期37-40,共4页
仔猪在饲养过程中有很多种病毒或细菌在感染仔猪后造成仔猪的腹泻,并给养殖户带来一定的经济损失。流行性腹泻就是仔猪腹泻病的一种,因为腹泻脱水导致仔猪的死亡和生长停滞。何启盖等2016年1~7月共检测来自全国不同省份的133家猪场腹泻... 仔猪在饲养过程中有很多种病毒或细菌在感染仔猪后造成仔猪的腹泻,并给养殖户带来一定的经济损失。流行性腹泻就是仔猪腹泻病的一种,因为腹泻脱水导致仔猪的死亡和生长停滞。何启盖等2016年1~7月共检测来自全国不同省份的133家猪场腹泻样品1195份,结果显示:PEDV阳性样品数为558份,阳性率为46.7%;TGEV阳性样品数为21份,阳性率为1.8%;PoRV阳性样品数为31份,阳性率为2.6%[1]。这个结果说明,猪流行性腹泻的爆发率还是很高的。而且在匈牙利、泰国、德国、韩国、日本、美国等国家都发现并报道了本病。猪流行性腹泻造成的危害非常严重,此外2010~2011年,仅仅两年我国有100多万头猪死于猪流行性腹泻,2013年美国爆发猪流行性腹泻,当年损失的仔猪是当时中国的7倍[2]。因此养殖户有必要加强对本病的防控。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 仔猪腹泻病 阳性样品 养殖户 TGEV PEDV 生长停滞
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猪流行性腹泻病毒(PEDV)荧光定量RT-PCR检测方法的建立 预览
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作者 羊雪芹 申世川 +1 位作者 袁秀芳 李斐雪 《吉林畜牧兽医》 2019年第10期112-113,共2页
猪流行性腹泻是猪养殖业常见的疾病之一,此病多发生于每年12月至翌年2月的寒冬季节,在夏季也可发病,由猪流行性腹泻病毒引起。该病是一种接触性急性猪肠道传染病,以水样腹泻、呕吐和脱水为主要症状。各种日龄的猪均易感,年龄越小死亡率... 猪流行性腹泻是猪养殖业常见的疾病之一,此病多发生于每年12月至翌年2月的寒冬季节,在夏季也可发病,由猪流行性腹泻病毒引起。该病是一种接触性急性猪肠道传染病,以水样腹泻、呕吐和脱水为主要症状。各种日龄的猪均易感,年龄越小死亡率高,其中哺乳仔猪受害最为严重。该病70年代初首先发现于英国,我国从80年代初开始陆续有本病的报道,给养猪业造成了重大的经济损失。所以及早确诊对于该病的诊治显得尤为重要,因此建立一种快速、高灵敏度的鉴别诊断PED的方法是十分必要的。同常规PCR法相比,荧光定量PCR技术可靠性和特异性强,加之具有操作方便及耗时短等特点而广泛应用于多种传染病的诊断,如牛病毒性腹泻、猪瘟、禽流感、鸭瘟等的诊断。本研究拟根据Genebank数据库序列设计特异性引物,建立一种灵敏稳定的针对猪流行性腹泻检测的定量PCR方法,为猪流行性腹泻的快速诊断、检疫防疫及分子流行病学研究提供手段。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PCR检测方法 荧光定量PCR PEDV 肠道传染病 鉴别诊断 牛病毒性腹泻 分子流行病学
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近年广西猪流行性腹泻的流行特点与防控存在问题分析 预览
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作者 赵武 秦毅斌 +12 位作者 何颖 段群棚 卢冰霞 陈忠伟 蒋冬福 梁家幸 杨思仪 李斌 闭柄芬 周英宁 刘磊 苏乾莲 卢敬专 《广西畜牧兽医》 2019年第1期24-27,共4页
猪流行性腹泻(Poiineepidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrheaviru—PEDV)引細-种|性高度接触性肠道传染病。以呕吐、水样腹泻和脱水为特征,发病仔猪死亡率高。当前由PEDV主导的猪群腹泻是猪场重点防控... 猪流行性腹泻(Poiineepidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrheaviru—PEDV)引細-种|性高度接触性肠道传染病。以呕吐、水样腹泻和脱水为特征,发病仔猪死亡率高。当前由PEDV主导的猪群腹泻是猪场重点防控的重要疫病之一,严重影响猪场经济效益及养猪业健康发展,其防控形势依然严峻。1971年英国首次报道PED,1977年比利时分离到病毒(经典代表毒株CV777)。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 防控 流行特点 广西 PEDV 肠道传染病 水样腹泻 经济效益
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猪流行性腹泻病毒流行株S蛋白高变区B细胞线性表位肽的鉴定
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作者 刘英杰 李凤平 +4 位作者 董世娟 王瑞阳 于瑞嵩 王燕 李震 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1772-1784,共13页
【背景】对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)经典毒株与流行毒株S蛋白氨基酸序列比对显示,变异位点主要集中在S蛋白的N端。【目的】鉴定PEDV流行毒株S蛋白高变区(S10A,1-496 aa)的B细胞线性表位肽,特别是流行毒... 【背景】对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)经典毒株与流行毒株S蛋白氨基酸序列比对显示,变异位点主要集中在S蛋白的N端。【目的】鉴定PEDV流行毒株S蛋白高变区(S10A,1-496 aa)的B细胞线性表位肽,特别是流行毒株特异性B细胞表位肽。【方法】以SDS-PAGE割胶纯化大肠杆菌表达的PEDV流行株SD2014 S蛋白高变区片段(S10A^SD2014),免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体;在E.coli中谷胱甘肽巯基转移酶(Glutathione S-transferase,GST)融合表达覆盖S10A^SD2014序列全长且彼此重叠8个氨基酸残基的系列16肽。以制备的抗S10A^SD2014多抗为一抗,通过Western blot筛选系列16肽中的阳性反应性16肽,鉴定S10A^SD2014上的B细胞线性表位肽;利用抗PEDV经典毒株(CV777)S蛋白高变区片段(S10A^CV777)多抗血清鉴定S10A^SD2014上的保守性B细胞线性表位肽。【结果】重组表达的S10A^SD2014相对分子质量约为72 kD;纯化的S10A^SD2014表位肽能被PEDV阳性血清识别。制备的抗S10A^SD2014多抗可以识别PEDV DR13弱毒株。利用抗S10A^SD2014血清和抗S10A^CV777血清从61个GST融合表达的16肽中鉴定到28个阳性反应16肽,其中13个为2种血清共同识别16肽。对24株PEDV不同亚群代表毒株的对应区域进行同源性分析表明2个阳性16肽为保守性表位肽。【结论】确定了PEDV流行株SD2014 S蛋白高变区的B细胞线性表位肽,B细胞线性表位肽,特别是流行毒株特异性表位肽的确定有助于了解S蛋白的结构与功能,为建立以表位为基础的PEDV感染检测方法打下良好基础。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 纤突蛋白高变区 多克隆抗体 B细胞线性表位
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