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进境菜豆种子中南方菜豆花叶病毒的检疫鉴定 认领
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作者 余辛 冯黎霞 +1 位作者 林晓红 章柱 《中国植保导刊》 北大核心 2020年第4期71-73,86,共4页
南方菜豆花叶病毒(Southern bean mosaic virus,SBMV)是我国禁止进境的检疫性有害生物。应用RT-PCR和实时荧光RT-PCR方法,从西班牙进境的菜豆种子中检疫鉴定出该病毒,这是我国首次在西班牙进境菜豆种子中截获该病毒。
关键词 南方菜豆花叶病毒 西班牙 菜豆 RT-PCR 实时荧光RT-PCR
普通型新型冠状病毒肺炎患者咽拭子病毒核酸检测结果复阳情况分析 认领
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作者 梁超 费敏 +4 位作者 凌晓敏 葛峰 罗建飞 仓静 缪长虹 《中国临床医学》 2020年第3期366-368,共3页
目的:探讨普通型新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者住院期间咽拭子新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测转阴后复阳的发生率及可能因素。方法:多次采集2020年2月2日至2020年3月10日武汉大学人民医院东院收治的40例确诊的普通型COVID-19患者... 目的:探讨普通型新型冠状病毒肺炎(COVID-19)患者住院期间咽拭子新型冠状病毒(SARS-CoV-2)核酸检测转阴后复阳的发生率及可能因素。方法:多次采集2020年2月2日至2020年3月10日武汉大学人民医院东院收治的40例确诊的普通型COVID-19患者咽拭子,采用实时反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法进行SARS-CoV-2核酸检测。结果:所有患者在首次RT-PCR检测结果呈阴性后,第2次RT-PCR检测结果为阳性12例(30%),连续2次RT-PCR检测为阴性第3次检测为阳性的患者为13例(32.5%),连续3次RT-PCR检测阴性第4次检测为阳性的患者为3例(7.5%),连续4次RT-PCR检测为阴性第5次检测为阳性的患者为0例。结论:作为COVID-19患者确诊及出院的重要指标,咽拭子核酸检测存在一定的假阴性率。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 新型冠状病毒 咽拭子 核酸 RT-PCR
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利用同源重组技术构建Hoxa5、BMP6真核表达载体及共转染成纤维细胞表达 认领
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作者 李晶 张梦瑶 +2 位作者 刘开东 柳楠 贺建宁 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期187-194,共8页
旨在利用同源重组构建敖汉细毛羊Hoxa5、BMP6基因表达载体及共转染成纤维细胞后通过基因表达量变化研究两基因之间的相互作用关系。以敖汉细毛羊为研究对象,采集30日龄的胎羊。首先,通过RNA的提取反转录成cDNA参照GenBank中Hoxa5、BMP6... 旨在利用同源重组构建敖汉细毛羊Hoxa5、BMP6基因表达载体及共转染成纤维细胞后通过基因表达量变化研究两基因之间的相互作用关系。以敖汉细毛羊为研究对象,采集30日龄的胎羊。首先,通过RNA的提取反转录成cDNA参照GenBank中Hoxa5、BMP6基因序列和pcDNA3.1序列分别设计1对含有同源臂的引物,通过PCR反应扩增获得Hoxa5、BMP6基因片段、利用SoSo试剂盒将目的片段连接到pcDNA3.1真核表达载体上。鉴定构建pcDNA3.1-Hoxa5、pcDNA3.1-BMP6重组表达载体,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞;其次对敖汉细毛羊的成纤维细胞进行分离培养,并将构建的质粒pcDNA3.1-Hoxa5、pcDNA3.1-BMP6共转染至成纤维细胞,采用RT-PCR技术和Western Blot技术检测Hoxa5、BMP6基因单转染和共转染在成纤维细胞中表达量的变化。结果显示:经酶切、测序鉴定质粒pcDNA3.1-Hoxa5、pcDNA3.1-BMP6构建成功,并且共转染成纤维细胞Hoxa5基因的表达量极显著下降,BMP6基因的表达量极显著升高且共转染组的表达量极显著地高于单转染组(P<0.01)。利用同源重组技术成功构建了敖汉细毛羊Hoxa5、BMP6基因的表达载体,并且成功共转染成纤维细胞,BMP6基因的表达量升高,Hoxa5基因的表达量极显著下降,因而初步推断基因BMP6抑制了Hoxa5基因的表达,相反地Hoxa5基因促进了BMP6基因的表达,结果可为进一步研究其功能奠定基础。 展开更多
关键词 同源重组 成纤维细胞 Hoxa5、BMP6质粒共转染 RT-PCR Western Blot
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四川地区猕猴桃病毒1的RT-PCR检测及外壳蛋白基因序列分析 认领
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作者 彭期定 吕蕊 +2 位作者 杨婷 林宏辉 席德慧 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期120-126,共7页
为了明确近期新西兰报道的侵染猕猴桃的新病毒——猕猴桃病毒1(Actinidia virus 1,AcV-1)在四川地区猕猴桃上的发生情况及其分子特性,采用RT-PCR对来自四川6个地区疑似感染病毒的90份猕猴桃主栽品种‘红阳’和‘金果’的叶片样品进行检... 为了明确近期新西兰报道的侵染猕猴桃的新病毒——猕猴桃病毒1(Actinidia virus 1,AcV-1)在四川地区猕猴桃上的发生情况及其分子特性,采用RT-PCR对来自四川6个地区疑似感染病毒的90份猕猴桃主栽品种‘红阳’和‘金果’的叶片样品进行检测。结果表明,22份样品为AcV-1阳性,检出率为24.4%。将获得的5个AcV-1分离物和已报道的新西兰分离物K75的外壳蛋白(coatprotein,CP)基因序列进行比对,结果表明,分离物间核苷酸序列和氨基酸序列的相似性分别为84.8%~97.1%和89.7%~99.6%,其中除邛崃分离物HYH5与新西兰分离物K75的核苷酸序列相似性较高(97.1%)外,其余4个分离物均低于91%。系统进化分析结果显示,这些分离物主要聚集在3个分支上,分离物HYH5与新西兰分离物K75位于同一分支,其余分离物位于另外2个分支。 展开更多
关键词 猕猴桃 猕猴桃病毒1 RT-PCR CP基因 分子特征
广东省国兰病毒病害调查及CymMV和ORSV基于cp基因的系统进化分析 认领
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作者 任锐 魏永路 +1 位作者 朱根发 杨凤玺 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期372-383,共12页
为调查广东省国兰病毒病发生情况,采用双抗体夹心-酶联免疫吸附测定(double sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)法对采集自广州市、汕头市和韶关市兰花主产区的53份具有典型病毒病症状的国兰叶片进行检测,选取35份... 为调查广东省国兰病毒病发生情况,采用双抗体夹心-酶联免疫吸附测定(double sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)法对采集自广州市、汕头市和韶关市兰花主产区的53份具有典型病毒病症状的国兰叶片进行检测,选取35份病叶应用RT-PCR技术对检测结果进行验证,并基于cp基因序列对检测到的病毒进行系统进化分析。DAS-ELISA检测结果显示,53份病叶中有44份检出病毒,总检出率为83.02%;其中,有14份仅检出建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CymMV),有19份仅检出齿兰环斑病毒(Odontolossum ring spot virus,ORSV),有11份检出CymMV和ORSV复合侵染,检出率分别为26.42%、35.85%和20.75%。RT-PCR检测结果显示,35份病叶中有30份检出病毒,总检出率为85.71%;其中,有21份仅检出CymMV,有6份仅检出ORSV,有4份检出CymMV和ORSV复合侵染,检出率分别为60.00%、17.14%和11.43%,但未检测到其它病毒。表明广东省国兰病毒病害主要由CymMV和ORSV侵染引起。序列和系统进化分析显示,来源于不同地区和寄主的CymMV和ORSV分离物的cp基因序列极为保守,CP氨基酸序列相似性分别大于97.31%和93.67%,且CymMV和ORSV多样性种群的分化与寄主种属和地理隔离关系不大。 展开更多
关键词 建兰花叶病毒 齿兰环斑病毒 RT-PCR DAS-ELISA 系统进化分析 广东省
胡桃醌对小鼠SH-SY5Y神经母细胞瘤干预后相关差异基因表达变化及通路分析 认领
6
作者 李庆杰 王若汗 +3 位作者 冯佳亮 张行 王法宇 连树林 《吉林中医药》 2020年第6期784-787,共4页
目的探索胡桃醌导致小鼠SH-SY5Y神经母细胞瘤凋亡的机理。方法采用转录组技术,对胡桃醌干预小鼠SH-SY5Y神经母细胞瘤后的差异基因进行分析,并选择其中显著性基因,围绕其信号通路分析促凋亡机理,并采用Westem-blot 及RT-PCR等实验方法进... 目的探索胡桃醌导致小鼠SH-SY5Y神经母细胞瘤凋亡的机理。方法采用转录组技术,对胡桃醌干预小鼠SH-SY5Y神经母细胞瘤后的差异基因进行分析,并选择其中显著性基因,围绕其信号通路分析促凋亡机理,并采用Westem-blot 及RT-PCR等实验方法进行验证。结果采用 Rwith edgeR package进行差异基因分析,共找到821个差异基因。通过KEGG注释,确定了p53信号通路,实验验证表明,不同浓度胡桃醌诱导SH-SY5Y细胞凋亡后p53基因及mRNA表达水平明显增强,其表达量随着胡桃醌浓度的升高而升高。结论胡桃醌导致SH-SY5Y神经母细胞凋亡的机制可能是胡桃醌能明显上调p53 mRNA及p53的表达,从而诱导小鼠SH-SY5Y神经母细胞凋亡。 展开更多
关键词 胡桃醌 免疫蛋白印迹法 RT-PCR 细胞凋亡
2016-2017年四川地区规模化猪场常见病原流行病学调查 认领
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作者 江地科 项明源 +5 位作者 王印 姚学萍 杨泽晓 张鹏飞 廖倡宇 邬旭龙 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期186-192,共7页
【目的】为了解四川省地区规模化猪场病原流行情况。【方法】本研究采用细菌分离鉴定、RT-PCR和PCR方法,对采集的283份样品(组织、精液、死胎等)做相应病原检测。【结果】106份病死猪病变组织中CSFV、PRRSV、PRRSV NADC30-Like、PCV2、... 【目的】为了解四川省地区规模化猪场病原流行情况。【方法】本研究采用细菌分离鉴定、RT-PCR和PCR方法,对采集的283份样品(组织、精液、死胎等)做相应病原检测。【结果】106份病死猪病变组织中CSFV、PRRSV、PRRSV NADC30-Like、PCV2、PRV、APP、Pm、SS2病原阳性率分别为7.55%(8/106)、40.57%(43/106)、20.75%(22/106)、34.91%(37/106)、16.04%(17/106)、9.43%(10/106)、19.81%(21/106)、4.72%(5/106),其中病原混合感染率为60.49%(49/81)。PRRSV或PCV2病原一年四季均可感染,并以混合其他病原感染形式最为常见,细菌感染在夏季最为常见。68份公猪精液中CSFV、PRRSV、PCV2、PRV病原阳性率分别为10.29%(7/68)、30.88%(21/68)、20.59%(14/68)、20.59%(14/68),以单一病原感染为主,感染率为52.63%(20/38)。63份流产胎、死胎病料中CSFV、PRRSV、PCV2、PRV病原阳性率分别为6.35%(4/63)、46.03%(29/63)、38.10%(24/63)、30.16%(19/63)。混合感染率为74.50%(38/51),以PRRSV病原混合其他病原感染形式最为常见,且一年四季均可感染。46份腹泻猪肠黏膜和粪便中PEDV、PoRV病原阳性率分别为56.52%(26/46)、26.09%(12/46),春季、秋季和冬季最易感染。【结论】四川地区规模化猪场中PRRSV、PCV2、PRV和PEDV仍是防控的重点,同时多种病原混合感染和新变异株PRRSV NADC30-Like出现也是猪群疫病难预防、难控制的主要原因之一。 展开更多
关键词 四川省 常见病原调查 PCR RT-PCR
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喉鳞癌组织中CBLL1蛋白表达变化及意义 认领
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作者 侯思哲 王雪峰 《医学信息》 2020年第5期5-8,共4页
目的分析喉鳞状细胞癌组织中E3泛素连接酶CBLL1的表达及其临床意义。方法选取2017年9月~2019年7月我院60例喉鳞状细胞癌石蜡组织切片及对应30例癌旁石蜡组织切片,采用免疫荧光法检测喉癌组织及癌旁组织中CBLL1蛋白的表达,比较喉癌组织... 目的分析喉鳞状细胞癌组织中E3泛素连接酶CBLL1的表达及其临床意义。方法选取2017年9月~2019年7月我院60例喉鳞状细胞癌石蜡组织切片及对应30例癌旁石蜡组织切片,采用免疫荧光法检测喉癌组织及癌旁组织中CBLL1蛋白的表达,比较喉癌组织和癌旁组织、不同性别、年龄、临床分期、淋巴结转移、组织分化程度及肿瘤分型患者中CBLL1蛋白的表达;另选取10例冰冻喉癌组织及对应癌旁组织,应用实时定量PCR方法检测CBLL1蛋白中mRNA的表达。结果喉癌组织中CBLL1的表达高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤分型及组织分化程度的患者喉癌组织中CBLL1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同临床分期、淋巴结转移的患者喉癌组织中CBLL1蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);喉癌组织中CBLL1蛋白mRNA的相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论喉癌组织中CBLL1蛋白表达异常与喉鳞状细胞癌的发生、发展、侵润及转移密切相关,其可能作为喉癌未来治疗的新靶点。 展开更多
关键词 E3泛素连接酶CBLL1 喉鳞状细胞癌 免疫荧光 RT-PCR
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水稻OPR基因的克隆及其在烟草中抗镉性分析 认领
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作者 夏凡 代婷婷 +1 位作者 姚新转 吕立堂 《种子》 北大核心 2020年第5期53-58,共6页
12-氧-植物二烯酸还原酶是茉莉酸生物合成途径的一个关键性酶,广泛参与植物生长过程中生物与非生物胁迫。本研究主要探讨OPR基因在植物非生物胁迫中的作用。从水稻中克隆了OPR基因,该基因的cDNA编码区全长1 203 bp,编码400个氨基酸,将... 12-氧-植物二烯酸还原酶是茉莉酸生物合成途径的一个关键性酶,广泛参与植物生长过程中生物与非生物胁迫。本研究主要探讨OPR基因在植物非生物胁迫中的作用。从水稻中克隆了OPR基因,该基因的cDNA编码区全长1 203 bp,编码400个氨基酸,将其连接到植物表达载体pSH 737上,通过农杆菌介导的方法,将含有目的基因的载体遗传转化烟草,获得31株转基因植株。选取生长状况基本一致的8株不同转基因株系和4株野生型烟草,在非生物胁迫下,用300μmol·L^-1 CdCl2溶液浇灌处理,观察植株生长并对抗镉能力进行初步分析;选取T 1代3个转基因株系(TP 7、TP 8和TP 12)和野生型烟草的种子,放入含有3个不同浓度CdCl2溶液的滤纸上萌发进行镉胁迫并统计发芽率。在300μmol·L^-1 CdCl2溶液胁迫15 d后,种子发芽率比野生型高40%以上,转基因烟草的抗氧化酶活性显著高于野生型,丙二醛的含量显著低于野生型植株。利用RT-PCR方法分析相关基因表达情况,结果表明,在Cd2+胁迫下,OPR,Snakin-2和GRP-2基因表达均上调,因此推测OPR基因的高表达是其具有高抗性的主要原因。OPR基因的过量表达使烟草提高了对重金属Cd2+的抗逆性能力。 展开更多
关键词 烟草 OPR基因 抗镉性 酶活性 RT-PCR
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流行性出血病病毒血清分型RT-PCR方法的建立及应用 认领
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作者 杨振兴 李占鸿 +4 位作者 宋子昂 李卓然 朱建波 廖德芳 杨恒 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期85-92,共8页
以决定流行性出血病病毒(EHDV)血清型的第二基因节段(Seg-2)为检测靶基因,设计7对特异性引物,建立用于鉴定EHDV血清型的RT-PCR检测方法,并通过对扩增产物的测序,进一步了解病毒Seg-2的遗传特性。特异性试验结果显示,该检测方法可准确鉴... 以决定流行性出血病病毒(EHDV)血清型的第二基因节段(Seg-2)为检测靶基因,设计7对特异性引物,建立用于鉴定EHDV血清型的RT-PCR检测方法,并通过对扩增产物的测序,进一步了解病毒Seg-2的遗传特性。特异性试验结果显示,该检测方法可准确鉴定不同血清型的EHDV毒株,与蓝舌病病毒、中山病病毒、阿卡斑病毒均无交叉反应;灵敏度试验结果显示,对不同血清型EHDV核酸的检测下限均可达102拷贝;对我国不同时间与不同地域分离的EHDV毒株进行血清型RT-PCR鉴定,结果显示分离的31株EHDV分属EHDV-1、-5、-6、-7与-10型等5种血清型,与血清中和试验的鉴定结果完全吻合。以上结果表明,该方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,可快速准确地鉴定EHDV毒株的血清型。 展开更多
关键词 流行性出血病病毒(EHDV) 血清型 Seg-2 RT-PCR 检测方法 分子诊断
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细菌NDM-1质粒耐药表型与其表达的相关性研究 认领
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作者 冯伟 欧阳净 +3 位作者 程林 袁慊 王瑜 孙凤军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2020年第5期477-481,共5页
目的探讨NDM-1质粒携带菌株耐药表型与其基因表达的相关性,为临床抗菌药物选择提供理论参考。方法携带NDM-1的质粒电转化入大肠埃希菌TOP10,采用琼脂平板倍比稀释法测定碳青霉烯类药物对野生株和电转化子的最低抑菌浓度(minimal inhibit... 目的探讨NDM-1质粒携带菌株耐药表型与其基因表达的相关性,为临床抗菌药物选择提供理论参考。方法携带NDM-1的质粒电转化入大肠埃希菌TOP10,采用琼脂平板倍比稀释法测定碳青霉烯类药物对野生株和电转化子的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC),TaqMan RT-PCR检测碳青霉烯类耐药菌株的blaNDM-1基因表达及亚-MIC亚胺培南诱导对blaNDM-1基因表达的影响。结果12株产NDM-1菌株中共有8株电转化成功,电转化子对碳青霉烯类药物的耐药性与野生菌株基本一致。细菌对碳青霉烯类的耐药性与blaNDM-1基因表达成正比。亚-MIC亚胺培南诱导后菌株对碳青霉烯类药物的MIC值和blaNDM-1基因表达均显著高于野生株。结论碳青霉烯类耐药菌株耐药表型与blaNDM-1基因表达具有正相关性,TaqMan RT-PCR检测可快速准确地为临床治疗提供依据。 展开更多
关键词 NDM-1 质粒 碳青霉烯酶 TaqMan RT-PCR 耐药
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猪流行性腹泻病毒河南分离株全基因扩增及序列分析 认领
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作者 李岚 李晓成 +2 位作者 段纲 谢琳娟 杨春艳 《畜牧与兽医》 北大核心 2020年第2期91-96,共6页
为进一步了解我国猪流行性腹泻病毒(PEDV)的分子流行病学特征,从阳性病料中分离得到1株河南毒株(命名为HeN17-2011),设计13对引物,对分离株HeN17-2011的基因序列进行RT-PCR扩增和全基因组3′Race、5′Race扩增,通过产物回收、转化和测序... 为进一步了解我国猪流行性腹泻病毒(PEDV)的分子流行病学特征,从阳性病料中分离得到1株河南毒株(命名为HeN17-2011),设计13对引物,对分离株HeN17-2011的基因序列进行RT-PCR扩增和全基因组3′Race、5′Race扩增,通过产物回收、转化和测序,经生物软件拼接,成功获得其全基因序列,并与近十几年的流行毒株进行了序列比对分析。结果显示:分离株HeN17-2011基因组全长为28038 bp(不含polyA尾),基因组结构为5′UTR-ORF1-S-ORF3-E-M-N-3′UTR,与PEDV基因组的结构特征相符;通过与GenBank中已发表的国内外毒株ZJCZ4、CV777、DR13等26株PEDV序列进行比对发现,HeN17-2011与NW8的同源性最高为99.4%,与标准株CV777、韩国毒株DR13(JQ023161.1)和DR13(JQ023162.1)、美国毒株Illinois261、意大利毒株PEDV-1842-2016-ITA的同源性分别为96.9%,97.7%和97.3%,99.2%,98.7%,与SD-M的同源性最低为96.4%;PEDV分离株HeN17-2011与标准株CV777、韩国毒株DR13处于不同的分支上,遗传关系较远,属变异毒株,但与我国的流行毒株CH-SCZY103-2017、NW8等遗传关系较近;通过对全基因组序列分析发现,我国PEDV流行株在ORF1b、ORF3、E基因、M基因和N基因上的长度是保守的,它们虽然均存在点突变,但没有碱基的插入和缺失,我国流行株基因组长度变化主要与5′UTR、ORF1a、S基因、ORF3和3′UTR的碱基插入、缺失密切相关。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 基因 序列 RT-PCR 分子流行病学
长链非编码RNA-lncRNA2在食管癌中高表达 认领
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作者 杜雪莲 张美英 郭明洲 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2020年第3期259-261,共3页
目的探讨lncRNA2在食管癌中的表达情况,及lncRNA2异常表达作为食管癌的潜在诊断标志物和治疗靶标的可能。方法应用lncRNA表达芯片技术对14对配对的食管癌和癌旁组织进行分析,获得在癌组织和癌旁组织中差异表达>10倍的lncRNA 134个。... 目的探讨lncRNA2在食管癌中的表达情况,及lncRNA2异常表达作为食管癌的潜在诊断标志物和治疗靶标的可能。方法应用lncRNA表达芯片技术对14对配对的食管癌和癌旁组织进行分析,获得在癌组织和癌旁组织中差异表达>10倍的lncRNA 134个。应用RT-PCR技术在食管癌细胞系进行验证,并分析43对配对的癌及癌旁组织中的表达情况。结果在14个食管癌细胞系中,lncRNA2在10个食管癌细胞系中高表达,而在4个食管癌细胞系中缺失表达。在43对配对的食管癌及癌旁组织中,lncRNA2在26例癌组织中高表达,在癌旁组织中缺失表达或低表达;11例在癌组织中缺失表达或低表达,而在癌旁组织中高表达;另外6例在癌组织和癌旁组织中均缺失表达。lncRNA2在60.47%(26/43)的食管癌组织中高表达,而在25.58%(11/43)的癌旁组织中高表达,差异有统计学意义(P<0.01)。lncRNA2高表达与患者年龄、性别、TNM分期、肿瘤大小、吸烟史、饮酒史、家族史等临床因素无相关性(P均>0.05)。结论lncRNA2在食管癌中表达明显升高,是食管癌潜在的诊断标志物和治疗靶标。 展开更多
关键词 食管癌 长链非编码RNA RT-PCR
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对775份毛皮动物样品检测未发现新型冠状病毒(SARS⁃CoV⁃2)核酸阳性 认领
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作者 白雪 胡博 +2 位作者 张海玲 鲁荣光 刘昊 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期692-693,共2页
目前,2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在我国各地暴发和流行,但其主要来源尚不清楚。曾有报道称该病毒来源于野生动物,如蝙蝠。而有关SARS-CoV-2在我国北方地区人工养殖的水貂、狐狸和貉等毛皮动物中的溯源性研究尚未见报道。本研究收集20... 目前,2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在我国各地暴发和流行,但其主要来源尚不清楚。曾有报道称该病毒来源于野生动物,如蝙蝠。而有关SARS-CoV-2在我国北方地区人工养殖的水貂、狐狸和貉等毛皮动物中的溯源性研究尚未见报道。本研究收集2016~2019年吉林、黑龙江、辽宁、河北和山东5个省份14个地区的不明原因死亡的水貂、狐狸和貉的625份组织样品,以及2019年8~12月在吉林省采集的水貂、狐和貉的150份粪便样品,通过WHO推荐的Real-time RT-PCR检测方法对上述组织及粪便样品中SARS-CoV-2进行检测。结果显示,上述775份样品中SARS-CoV-2核酸检测结果均为阴性。 展开更多
关键词 毛皮动物 2019新型冠状病毒(SARS-CoV-2) Real-time RT-PCR
猪繁殖与呼吸综合征的监测及其防控 认领
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作者 李艳晖 《福建畜牧兽医》 2020年第3期8-10,14,共4页
为评价ELISA抗体检测对蓝耳病疫情预警以及相应防控方案的可行性,对疑似存在蓝耳病疫情风险的某规模化猪场进行抗体检测。结果显示:该场猪蓝耳病抗体离散度大,S/P值≥2.6的比例占检测数的30.4%,表明该场存在蓝耳病感染风险,并通过RT-PC... 为评价ELISA抗体检测对蓝耳病疫情预警以及相应防控方案的可行性,对疑似存在蓝耳病疫情风险的某规模化猪场进行抗体检测。结果显示:该场猪蓝耳病抗体离散度大,S/P值≥2.6的比例占检测数的30.4%,表明该场存在蓝耳病感染风险,并通过RT-PCR检测病原得到证实。对该场母猪群及其仔猪采取活苗紧急免疫防控后,该场疫情得到有效缓解,仔猪存活率由原来的48%提高到88%。结论:蓝耳病抗体ELISA检测具有监测预警作用,采用活疫苗免疫防控蓝耳病方案是可行的。 展开更多
关键词 猪蓝耳病 ELISA RT-PCR 防控
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马麝病毒性出血症RT-PCR诊断方法的建立及初步应用 认领
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作者 王倩 陈文哲 +2 位作者 党清清 孙继文 包世俊 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期945-950,共6页
马麝病毒性出血症(Moschus chrysogaster (sifanicus) viral hemorrhagic disease, McVHD)为马麝的一种病毒性传染病,发病急、病死率高,严重威胁我国马麝种群的健康和安全。该病病原马麝出血症病毒(Moschus chrysogaster (sifanicus) he... 马麝病毒性出血症(Moschus chrysogaster (sifanicus) viral hemorrhagic disease, McVHD)为马麝的一种病毒性传染病,发病急、病死率高,严重威胁我国马麝种群的健康和安全。该病病原马麝出血症病毒(Moschus chrysogaster (sifanicus) hemorrhagic disease virus, McHDV)与杯状病毒科(Caliciviridae)兔病毒属(Lagovirus)的兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV)高度同源。为建立该病快速简便的诊断方法,本研究对病原基因组序列及兔出血症病毒基因组序列进行比对分析,设计并合成引物McVHDF/R,在反应条件优化及特异性和敏感性分析的基础上,建立马麝病毒性出血症的反转录PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)诊断方法。结果表明,所建立的RT-PCR方法可在目标病毒基因组上扩增出1条448 bp的目的片段,而与沙门氏菌(Salmonella)、巴氏杆菌(Pasteurella multocida)、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)等10种病原微生物均无交叉反应,且病毒RNA最低检测量为10-5 ng/μL (2.38×103拷贝/μL)。临床病料检测结果表明,该方法可快速、有效检出临床病料中的病毒核酸,且检测结果与病原分离结果一致。本研究建立的方法为马麝出血症的诊断和分子流行病学调查提供了技术支持。 展开更多
关键词 马麝病毒性出血症(McVHD) RT-PCR 诊断
余姚市麻疹流行趋势及应用RT-PCR的重要性 认领
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作者 袁士杰 罗学辉 《中国卫生检验杂志》 CAS 2020年第10期1252-1254,1257,共4页
目的了解余姚市2012年-2018年麻疹流行趋势及应用RT-PCR的重要性,为防治麻疹提供科学依据。方法采用ELISA法和RT-PCR法对余姚市2012年-2018年麻疹疑似病例进行实验室检测,对检测结果进行统计分析。结果7年共检测疑似血清标本和咽拭子标... 目的了解余姚市2012年-2018年麻疹流行趋势及应用RT-PCR的重要性,为防治麻疹提供科学依据。方法采用ELISA法和RT-PCR法对余姚市2012年-2018年麻疹疑似病例进行实验室检测,对检测结果进行统计分析。结果7年共检测疑似血清标本和咽拭子标本各717份,其中麻疹阳性数197份,总阳性率为27.48%;8月-23月儿童阳性病例的接种率为52.7%,20岁~29岁组、30岁~39岁组及>40岁组在0剂组的总占比高达58.95%。结论余姚市2012年-2018年麻疹发病年龄主要集中在0月~23月和20岁~39岁。应加强此年龄段的常规免疫规划管理和对非典型临床病例的诊断,如有必要可对<8月的儿童进行提前初免。 展开更多
关键词 麻疹 Ig M抗体 RNA RT-PCR
COVID 19 Diagnostic Tests: A Study of 12,270 Patients to Determine Which Test Offers the Most Beneficial Results 认领
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作者 Ali Mahmood Charisma Gajula Prianka Gajula 《外科学(英文)》 2020年第4期82-88,共7页
COVID 19 has caused capitulation from healthcare entities all over the world. First described in Hubei, China, the virus has spread to 185 countries, showing little signs of eradication or eradication. There does not ... COVID 19 has caused capitulation from healthcare entities all over the world. First described in Hubei, China, the virus has spread to 185 countries, showing little signs of eradication or eradication. There does not exist a medical treatment regimen or a vaccine to address COVID 19 definitively. The best response, to date, has been early diagnosis and immediate isolation or quarantine of the patient, with supportive care. As medical institutions all around the world struggle to keep up with this pandemic, there is not a consensus amongst medical professionals in the rapid diagnosis of this disease entity. Purpose: The purpose of our study was to review the literature and establish a test, or tests, that would aid the clinician in attaining a swift, yet accurate diagnosis. Methods: We searched PubMed and Google scholar and reviewed 32 articles. Keyword searches consisted of COVID 19, pandemic, diagnoses, diagnostic testing, pandemic amongst others. We compared the data obtained from these studies in an effort to find the best diagnostic test. Results: There were a total of 12,270 patients that were in our study [1]-[32]. This is the largest study to date in the literature addressing diagnosis of COVID 19. Fever, cough and fatigue, in that respective order were the most common clinical symptoms. Laboratory findings consisted of leukopenia, elevated erythrocyte sedimentation (ESR) and elevated C-reactive protein, CRP. The gold standard test described in multiple studies was the RT-PCR. Serum assays of IgM and IgG were also drawn and found to be accurate in 93% of the time. CT Chest was both sensitive and specific, 90% and 86%. This diagnostic imaging was even more successful when coupled with clinical symptoms and approaching days 7 - 12 since the onset of clinical symptoms. Discussion: This is the largest study compiled to address diagnostic testing in COVID 19 patients. The patient population is spread vastly around the world, with access to many reported tests limited in certain countries. Given the significant 展开更多
关键词 COVID 19 DIAGNOSTIC TEST RT-PCR IgM-IgG CHEST CT PANDEMIC
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余姚市2012-2018年麻疹、风疹疑似病例实验室检测结果分析 认领
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作者 袁士杰 罗学辉 《中国公共卫生管理》 2020年第2期264-267,273,共5页
目的了解余姚市2012-2018年麻疹、风疹流行趋势,为防治麻疹、风疹提供科学依据。方法采用ELISA法和荧光定量RT-PCR法对余姚市2012-2018年麻疹、风疹疑似病例进行实验室检测,对检测结果进行统计分析,采用χ^2检验,以P<0.05为差异有统... 目的了解余姚市2012-2018年麻疹、风疹流行趋势,为防治麻疹、风疹提供科学依据。方法采用ELISA法和荧光定量RT-PCR法对余姚市2012-2018年麻疹、风疹疑似病例进行实验室检测,对检测结果进行统计分析,采用χ^2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 2012-2018年共检测疑似病例血清标本和咽拭子标本共717份,其中麻疹阳性数197份,总阳性率为27.48%,不同年份之间麻疹抗体阳性率差异有统计学意义(χ^2=39.480,P<0.01),麻疹病毒RNA阳性率差异有统计学意义(χ^2=29.683,P<0.01);风疹阳性数30份,总阳性率为4.18%,不同年份之间风疹抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.05),风疹病毒RNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。麻疹发病年龄主要分布在20~39岁成年人和0~23月龄儿童,各年龄段麻疹阳性率差异有统计学意义(χ^2=29.128,P<0.01),IgM+RNA+组阳性病例在<8月龄的儿童中占比最高(25.32%);风疹发病年龄段分布与麻疹一致,各年龄段风疹阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 2012-2018年,余姚市麻疹发病年龄主要分布在0~23月龄和20~39岁两个年龄段,采样时间点的提前或延迟易造成麻疹和风疹IgM或RNA假阴性。建议加强上述两个年龄段的常规免疫规划管理和对非典型临床病例的诊断,如有必要,可对<8月龄的儿童进行提前初免。 展开更多
关键词 麻疹 风疹 IGM抗体 RT-PCR
天津市新型冠状病毒肺炎确诊病例病原学检测结果及影响因素分析 认领
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作者 李晓燕 高鑫 +7 位作者 郭丽茹 吕莉琨 雷玥 董晓春 孔梅 邹明 李闻 苏旭 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期330-335,共6页
目的研究天津市新型冠状病毒肺炎确诊病例实验室检测结果特征及影响因素。方法按照标准操作流程完成患者样本采集,使用天隆自动磁珠核酸提取试剂完成核酸提取,使用4种已获得审批的新型冠状病毒核酸检测试剂盒进行实时荧光RT-PCR核酸检测... 目的研究天津市新型冠状病毒肺炎确诊病例实验室检测结果特征及影响因素。方法按照标准操作流程完成患者样本采集,使用天隆自动磁珠核酸提取试剂完成核酸提取,使用4种已获得审批的新型冠状病毒核酸检测试剂盒进行实时荧光RT-PCR核酸检测,收集患者相关流行病学资料,使用SPSS25.0软件完成单因素方差分析和非参数检验进行组间差异性分析。结果共完成123例新型冠状病毒肺炎确诊病例的核酸检测,PCR检测次数共162次,11次单靶标阳性结果中有10次为核衣壳蛋白基因(nucleocapsid protein gene,N gene)单靶标阳性;同时使用2种试剂盒对19例确诊病例进行检测,结果显示不同试剂盒检测效果存在差异;采集多种样本类型对13例患者进行检测,痰样本Ct值普遍低于咽拭子样本。不同临床症状分型患者咽拭子Ct值之间差异无统计学意义(PCt-N=0.797;PCt-ORF1a/b=0.551)。根据发病日期与首次检测病毒核酸阳性日期之间的间隔时间分组,不同分组咽拭子Ct值之间差异无统计学意义(PCt-N=0.373;PCt-ORF1a/b=0.058)。结论痰液样本相比上呼吸道样本病毒核酸检测更易检出。N基因检测灵敏度更高,N基因单靶标阳性结果应重新采样检测。应根据实际需求选择合适的检测试剂盒,多时间点、多样本类型、多部位采集样本开展检测。 展开更多
关键词 COVID-19 新型冠状病毒 RT-PCR
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