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循环miRNAs分析检测方法研究进展
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作者 王晓军 周殿明 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期72-77,共6页
循环miRNAs是重要的毒性标志分子,其含量极低、序列多样和长度较短的特性给分析检测带来挑战,成为决定其应用于新化学物质和材料的毒理学研究和临床应用的关键。该文综述了目前可用于循环miRNA分析检测的方法,包括传统微阵列法、测序法... 循环miRNAs是重要的毒性标志分子,其含量极低、序列多样和长度较短的特性给分析检测带来挑战,成为决定其应用于新化学物质和材料的毒理学研究和临床应用的关键。该文综述了目前可用于循环miRNA分析检测的方法,包括传统微阵列法、测序法、RT-PCR法和生物传感方法,并对这些方法的技术特点和检测中存在的主要问题进行论述。 展开更多
关键词 循环miRNA 毒性标志物 微阵列 测序 RT-PCR 生物传感
双扩增法和real-time RT-PCR法检测手足口病的比较
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作者 马静 马蓓蓓 +2 位作者 李清元 周攀 黄英 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第16期1948-1949,1952共3页
目的开展双扩增法和real-time RT-PCR法检测手足口病的比较性研究,为基层实验室建立手足口病科学快速检测方法提供依据。方法对2016年-2017年宜昌市9县市区采集的205份手足口病患者的咽拭子样本,同时采用双扩增法和real-time RT-PCR法... 目的开展双扩增法和real-time RT-PCR法检测手足口病的比较性研究,为基层实验室建立手足口病科学快速检测方法提供依据。方法对2016年-2017年宜昌市9县市区采集的205份手足口病患者的咽拭子样本,同时采用双扩增法和real-time RT-PCR法检测手足口病通用病毒、CoxA16、EV71,比较2种方法检测结果的差异,对2种方法检测结果相异的标本进行测序。结果双扩增法同real-time RT-PCR法检测结果比较,阳性标本数差异无统计学意义(x^2=0.743,P>0.05);且2种方法与测序方法结果比较,符合数差异无统计学意义(x^2=3.32,P>0.05)。结论双扩增法适合基层实验室推广使用。 展开更多
关键词 手足口病 双扩增 real-time RT-PCR 人肠道病毒71型 柯萨奇病毒A组16型
乳腺癌 Twist 基因表达及与 P53、E-cadherin 联合检测的意义 预览
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作者 周青 盛宇伟 任建强 《医药界》 2019年第5期0008-0009,共2页
目的:观察并记录 Twist、P53 及 E-cadherin mRNA 在乳腺癌患者体内的表达情况,探讨 Twist 在乳腺癌患者体内的表达与 P53 及 E-cadherin 之间的关系。方法 : 本项研究随机选取在我院确诊为乳腺疾病患者 60 例为研究对象,其中包括新发... 目的:观察并记录 Twist、P53 及 E-cadherin mRNA 在乳腺癌患者体内的表达情况,探讨 Twist 在乳腺癌患者体内的表达与 P53 及 E-cadherin 之间的关系。方法 : 本项研究随机选取在我院确诊为乳腺疾病患者 60 例为研究对象,其中包括新发良性乳腺疾病患者 20 例(纤维腺瘤和乳腺病)与新发乳腺癌患者 40 例。收集乳腺癌患者的肿瘤组织标本 40 例为 A 组,相同乳腺癌患者的癌旁组织标本为 B 组,新发良性乳腺疾病患者为 C 组。搜集并详细记录每位患者的临床资料与病例信息。采用 RT-PCR 法检测 Twist mRNA、P53 mRNA、E-cadherin mRNA 表达情况。结果:Twist mRNA 及 P53 mRNA 在癌组织中的表达水平高于良性组织对照组与癌旁组织的 B 组,差异在统计学方面有意义(P<0.05)。E-cadherin mRNA 在癌组织中的表达水平低于对照组(良性组织及癌旁组织),差异在统计学方面有意义(P<0.05)。癌组织中 Twist m RNA 的表达水平与 P53 mRNA 的表达呈正相关关系(r=0.397,P=0.003),癌组织中 Twist mRNA 的表达水平与 E-cadheri mRNA 的表达呈负相关关系(r=-0.422,P=0.001)。癌组织中 Twist mRNA 的表达水平与肿瘤病理分级呈正相关。结论:Twist 可能诱导了乳腺癌体内 P53 的生成,抑制了 E-cadheri 的产生,从而加速乳腺癌病程。 展开更多
关键词 乳腺癌 TwistmRNA P53MRNA E-cadherimRNA RT-PCR
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RT-PCR法应用于50例小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值
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作者 周东梅 《延边大学医学学报》 CAS 2018年第2期142-143,共2页
[背景]探讨RT-PCR法应用于小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值.[病例报告]采用随机的原则选取行小肠结肠炎耶尔森菌检验的腹泻患者100例(2017年4月—2018年4月),按照随机等量原则分为培养法组和RT-PCR法组,每组各为50例... [背景]探讨RT-PCR法应用于小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值.[病例报告]采用随机的原则选取行小肠结肠炎耶尔森菌检验的腹泻患者100例(2017年4月—2018年4月),按照随机等量原则分为培养法组和RT-PCR法组,每组各为50例.两组分别应用相应方法进行检验,比较两组腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检查率.RT-PCR法组腹泻粪便中耶尔森菌的检查率显著高于培养法组(P〈0.05).[讨论]RT-PCR法检验小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)的临床价值较高,效果满意. 展开更多
关键词 耶尔森菌小肠结肠炎 培养 RT-PCR
不同方法检验腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的价值 预览
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作者 徐石秀 《医疗装备》 2018年第9期70-71,共2页
目的探讨不同方法检验腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的价值。方法选择2016年12月至2017年12月接受检验的50例腹泻患者粪便样本为研究对象,将其随机分为对照组和试验组,每组25例,对照组使用培养法,试验组则应用RT-PCR法,对比两组小... 目的探讨不同方法检验腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的价值。方法选择2016年12月至2017年12月接受检验的50例腹泻患者粪便样本为研究对象,将其随机分为对照组和试验组,每组25例,对照组使用培养法,试验组则应用RT-PCR法,对比两组小肠结肠炎耶尔森菌检验阳性率。结果试验组耶尔森菌检验阳性率60.00%,高于对照组的20.00%,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论腹泻患者粪便中小肠结肠炎耶尔森菌检验采用RT-PCR法与培养法比较,准确率更高,更加有利于病情判断。 展开更多
关键词 培养 RT-PCR 耶尔森菌
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当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响随机平行对照研究 被引量:4
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作者 李秀 初杰 +4 位作者 李影迪 范颖 林庶如 许卓 崔运浩 《实用中医内科杂志》 2017年第5期52-58,共7页
[目的]观察当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响。[方法]使用随机平行对照方法,将60只清洁级C57BL/6小鼠编号按随机数字表法随机分为6组,空白组、模型组、促红细胞生成素组(EPO组)、当归多糖组(当归组)、黄芪多糖组(... [目的]观察当归/黄芪多糖对腹腔注射环磷酰胺小鼠骨髓造血影响。[方法]使用随机平行对照方法,将60只清洁级C57BL/6小鼠编号按随机数字表法随机分为6组,空白组、模型组、促红细胞生成素组(EPO组)、当归多糖组(当归组)、黄芪多糖组(黄芪组)、当归加黄芪多糖组(当归+黄芪组),10只/组。实验第1d,各组小鼠称体重,模型组、EPO组、当归组、黄芪组、当归+黄芪组,腹腔注射环磷酰胺380mg/kg·d~(-1),连续3d,空白组注射等量生理盐水。实验第4d(造模第4d),颈椎脱臼处死小鼠,无菌取股骨和胫骨,置入培养基中,调整细胞浓度为1×10~5/m L,然后将混合液加入96孔板(200u L)/孔和24孔板(1L/孔)中,每组设3个复孔,周围孔分别加入相应量的无菌超纯水,将细胞板置于5%CO_2,37℃孵育箱中培养。实验第4d(造模第4d),各组分别干预。观测外周血象、细胞增殖率(MTT法),EPO、IL-3(免疫蛋白法),细胞内转录因子JAK2、STAT5(RT-PCR法)。[结果]细胞培养24h、48h和72h,细胞增殖率EPO组、当归组、黄芪组、当归+黄芪组均高于空白组(P〈0.05,P〈0.01),组间无显著差异(P〉0.05);模型组低于空白组(P〈0.05,P〈0.01)。细胞培养7d,IL-3、EPO表达模型组低于空白组(P〈0.01),各干预组均高于模型组(P〈0.01),当归+黄芪组高于EPO组(P〈0.01),EPO组高于当归组(P〈0.01),当归组高于黄芪组(P〈0.01)。细胞培养7d,单核细胞STAT5、JAK2m RNA模型组低于空白组(P〈0.01),各干预组高于模型组(P〈0.05或P〈0.01),当归+黄芪组高于EPO组(P〈0.01),EPO组与当归组无显著差异(P〈0.05),当归组高于黄芪组(P〈0.01)。[结论]当归/黄芪多糖、促红细胞生成素干预腹腔注射环磷酰胺小鼠,均可升高骨髓细胞增殖率、IL-3、EPO表达及单核细胞STAT5、JAK2m RNA,当归多糖与黄芪多糖联合应用更明显。 展开更多
关键词 腹腔注射环磷酰胺小鼠 骨髓造血 当归多糖 黄芪多糖 促红细胞生成素(EPO) 细胞增殖率 MTT IL-3 免疫蛋白 细胞内转录因子 JAK2 STAT5 RT-PCR 当归补血汤 实验研究 随机平行对照研究
胶质瘤患者PDCD4、PDCD5mRNA表达的临床意义
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作者 王涛 史航宇 +2 位作者 贺中正 朱莽 杨彦平 《热带医学杂志》 CAS 2017年第5期616-618,共3页
目的利用实时荧光定量逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测胶质瘤患者体内PDCD4、PDCD5mRNA表达的临床意义。方法选取2009-2015年在西安市中心医院治疗的胶质瘤患者50例,通过RT-PCR法检测患者体内PDCD4、PDCD5mRNA基因的临床表达... 目的利用实时荧光定量逆转录一聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测胶质瘤患者体内PDCD4、PDCD5mRNA表达的临床意义。方法选取2009-2015年在西安市中心医院治疗的胶质瘤患者50例,通过RT-PCR法检测患者体内PDCD4、PDCD5mRNA基因的临床表达结果。结果PDCD5mRNA在胶质瘤细胞系中表达RT-PCR结果显示,PDCD5可明显抑制胶质瘤细胞的生长,并且能增加对化疗药物的敏感性,抑制胶质瘤细胞的生长,而在肿瘤组织中PDCD4基因的mRNA分子及蛋白水平的表达也低于正常组织,可抑制胶质瘤细胞的生长。结论PDCD4和PDCD5mRNA表达对胶质瘤细胞的生长具有抑制作用,提高患者的存活水平。 展开更多
关键词 RT-PCR 胶质瘤 PDCD4 PDCD5 mRNA
蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血SD大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响随机平行对照研究
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作者 白雪 王蔚 +1 位作者 杜渊 杨思进 《实用中医内科杂志》 2017年第8期40-44,共5页
[目的]观测蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响。[方法]使用随机平行对照方法,45只SD大鼠常规饲料喂养3d,称重后随机数字表法分为5组,假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀低、中、高剂量组(简称"ZL低、中、... [目的]观测蛭龙活血通瘀胶囊对脑出血大鼠AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达影响。[方法]使用随机平行对照方法,45只SD大鼠常规饲料喂养3d,称重后随机数字表法分为5组,假手术组、模型组、蛭龙活血通瘀低、中、高剂量组(简称"ZL低、中、高剂量组"),9只/组。按指标检测时间分为12h、48h、72h三个亚组,3只/组。自体尾部血注入法复制脑出血大鼠模型。灌胃干预:蛭龙活血通瘀胶囊按人体用量(3.6g/d)5倍、10倍、20倍定为低、中、高剂量。RT-PCR法检测AQP-4、MMP-9、TIMP-1 mRNA表达。[结果]AQP-4 mRNA:假手术组有微量表达,12h、48h及72h表达无明显差异(P〉0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P〈0.01);模型组呈进行性升高,72h最为显著;ZL各剂量组表达均低于模型组(P〈0.01);各时间点低、中剂量组均高于ZL高剂量组(P〈0.01)。MP-9 mRNA:假手术组有少量表达,术后12h、48h及72h表达无明显差异(P〉0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P〈0.01);模型组术后48h上升明显并达到高峰,72h略有下降,ZL各剂量组均低于模型组(P〈0.01);ZL低、中剂量组在各时点均明显高于高剂量组(P〈0.01)。TIMP-1 mRNA:假手术组仅有微量表达,术后12h、48h及72h无明显差异(P〉0.05);模型组及ZL低、中、高剂量组各时点均明显高于假手术组(P〈0.01);模型组48h上升明显并达到高峰,72h略有下降;ZL各剂量组各时点均高于模型组(P〈0.01);ZL低、中剂量组各时点均明显高于高剂量组(P〈0.01)。[结论]蛭龙活血通瘀胶囊可明显降低脑出血大鼠脑组织AQP-4、MMP-9 mRNA,升高TIMP-1 mRNA,呈量效关系,ZL高剂量组作用最为明显。 展开更多
关键词 SD大鼠 脑出血 蛭龙活血通瘀胶囊 AQP-4 MMP-9 TIMP-1 MRNA RT-PCR 随机平行对照研究
pN0胃癌淋巴结微转移临床意义的研究 预览
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作者 赵帅 黄允宁 +3 位作者 赵良玉 卢林 李智勇 封存志 《宁夏医学杂志》 CAS 2017年第8期682-684,共3页
目的探索联合使用RT-PCR及免疫组织化学染色法(IHC)同时检测胃癌淋巴结微转移(LNM),分析胃癌淋巴结微转移对胃癌临床诊治的影响。方法选取接受手术的p N0期胃癌患者32例。应用IHC和RT-PCR法联合检测术后淋巴结CK20的表达,分析LNM与... 目的探索联合使用RT-PCR及免疫组织化学染色法(IHC)同时检测胃癌淋巴结微转移(LNM),分析胃癌淋巴结微转移对胃癌临床诊治的影响。方法选取接受手术的p N0期胃癌患者32例。应用IHC和RT-PCR法联合检测术后淋巴结CK20的表达,分析LNM与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、浸润深度、分化程度等临床病理资料的关系。结果经IHC法检测出6例患者、共14个淋巴结中CK20阳性,LNM阳性率为21.87%; 经RT-PCR法检测出10例患者、共23个淋巴结中CK20 mRNA阳性,LNM阳性率为31.25%。两种方法均为阳性的患者7例,RT-PCR法呈阳性而IHC阴性的患者4例,IHC结果阳性而RT-PCR法阴性患者1例。此研究共检出11例患者存在LNM。不同分化程度p N0期胃癌LNM间差异有统计学意义(P〈0.05),低分化胃癌较中-高分化胃癌更易出现LNM。结论胃癌LNM与分化程度有关,低分化胃癌较中-高分化胃癌更易出现微转移,临床医生给低分化胃癌患者采用缩小手术治疗方式时需慎重。IHC和RT-PCR法联合检测胃癌INM可提高微转移的检出率。 展开更多
关键词 胃癌 微转移 CK20 免疫组化 RT-PCR
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血清miR系列基因表达水平与非小细胞肺癌预后的相关性研究 预览
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作者 陈群 石琴 《中国现代医生》 2017年第4期16-18,共3页
目的 探讨血清mi R系列基因表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)预后的相关性。方法 分别收集2010年4月~2013年4月收治的250例NSCLC患者冰冻组织和血清样本,25例NSCLC及其癌旁组织,25例未经手术治疗的晚期NSCLC患者化疗前和3个疗程后的血... 目的 探讨血清mi R系列基因表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)预后的相关性。方法 分别收集2010年4月~2013年4月收治的250例NSCLC患者冰冻组织和血清样本,25例NSCLC及其癌旁组织,25例未经手术治疗的晚期NSCLC患者化疗前和3个疗程后的血清样本,200例未经任何抗癌治疗的NSCLC患者血清,作为NSCLC组;选取100例健康志愿者的血清样本,作为对照组。采用q RT-PCR方法检测NSCLC组和对照组中血清mi R系列基因表达水平,判断血清mi R系列基因表达水平与预后的关系。结果 NSCLC组化疗3个疗程的患者的血清mi R系列基因表达与化疗前存在明显差异(P〈0.05);对照组的血清mi R系列基因表达与化疗前患者存在明显差异(P〈0.05),与化疗后指标比较无统计学意义(P〉0.05)。结论 血清mi R系列基因表达水平在NSCLC患者明显升高,治疗后mi R系列基因表达明显下降,血清mi R系列基因有可能成为预测NSCLC预后的分子标志物。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 miR系列基因 Q RT-PCR 基因表达
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自然早产胎盘中细胞凋亡抑制因子survivin表达水平的定量检测及其临床研究 预览 被引量:1
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作者 徐小华 郑双云 金亚玲 《中国医学工程》 2017年第9期42-44,共3页
目的分析自然早产胎盘中细胞凋亡抑制因子生存素(survivin)表达水平及其定量检测在自然早产中的诊断价值。方法选择2015年12月‐2016年12月福田医院住院部分娩的60例胎盘,其中自然早产30例(观察组),足月产30例(对照组)。采集胎盘... 目的分析自然早产胎盘中细胞凋亡抑制因子生存素(survivin)表达水平及其定量检测在自然早产中的诊断价值。方法选择2015年12月‐2016年12月福田医院住院部分娩的60例胎盘,其中自然早产30例(观察组),足月产30例(对照组)。采集胎盘,对两组分别采用细胞凋亡抑制因子survivin免疫检测和survivin m RNA定量测定逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法并进行比较。结果观察组胎盘survivin因子阳性表达率为26.67%(8/30),survivin-m RNA基因阳性表达率为16.67%(5/30),对照组分别为53.33%(16/30)、50.00%(15/30),差异具有统计学意义(P〈0.05)。观察组胎盘survivin因子阳性细胞百分比为(57.10±4.82)%,survivin-m RNA相对表达量(0.68±0.23),对照组分别为(72.06±7.59)%、(2.09±0.47),差异具有统计学意义(t分别为11.102、4.910,P〈0.05)。结论适时监测诱发孕妇早产的survivin因子,及早治疗干预,有助于避免早产的发生,提高新生儿的生存质量。 展开更多
关键词 生存素 自然早产胎盘 细胞凋亡抑制因子 免疫组化 RT-PCR
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X射线辐照后肝癌细胞HepG2人宫颈癌基因及其相关基因关系的研究 被引量:1
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作者 舒婷婷 缪国英 +2 位作者 张红 赵邱越 卢启明 《现代生物医学进展》 CAS 2016年第1期50-53,共4页
目的:利用不同剂量X射线对体外培养肝癌细胞HepG2进行照射,研究人宫颈癌基因(HCCR)及其相关基因对于细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法:采用0、1.0、2.0、4.0 Gy的吸收剂量X射线照射细胞,用克隆形成法观察细胞的存活情况;光... 目的:利用不同剂量X射线对体外培养肝癌细胞HepG2进行照射,研究人宫颈癌基因(HCCR)及其相关基因对于细胞增殖的影响及其可能的分子机制。方法:采用0、1.0、2.0、4.0 Gy的吸收剂量X射线照射细胞,用克隆形成法观察细胞的存活情况;光镜下观察细胞形态变化;同时在辐照24 h后用RT-PCR法检测细胞中HCCR、p53、Bax mRNA的表达情况。结果:1.0、2.0、4.0 Gy吸收剂量时克隆形成率分别为(76.13±3.52)%、(62.22±2.17)%、(25.35±3.10)%,随着辐射剂量的增加细胞存活率显著下降(P〈0.05)。HCCR mRNA相对表达量分别为0.95±0.04、0.8±0.07、0.45±0.03;p53 mRNA相对表达量分别为1.07±0.22、2.02±0.34、2.90±0.52;Bax mRNA相对表达量分别为1.12±0.11、1.63±0.36、2.48±0.27。较空白对照组,2Gy、4Gy剂量照射组HCCR mRNA相对表达量显著降低(P〈0.05),而p53、Bax mRNA相对表达量显著增加(P〈0.05)。结论:X射线照射可下调肝癌细胞HepG2的HCCR-1表达,抑制细胞增殖,作用机制可能与其相关基因p53、Bax表达升高有关。 展开更多
关键词 克隆形成 RT-PCR HCCR-1 P53 BAX
PTEN和Ki-67在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:4
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作者 刘志春 赵亮 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2016年第11期1348-1352,共5页
目的 检测PTEN和Ki-67在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 收集甘肃省天水市第一人民医院2012年9月至2015年3月期间手术切除后经病理证实为原发性甲状腺癌的石蜡包埋组织40例及术后离体组织14例,分别应用免疫组织化学SP法和RT-PC... 目的 检测PTEN和Ki-67在甲状腺癌组织中的表达及其临床意义。方法 收集甘肃省天水市第一人民医院2012年9月至2015年3月期间手术切除后经病理证实为原发性甲状腺癌的石蜡包埋组织40例及术后离体组织14例,分别应用免疫组织化学SP法和RT-PCR法检测PTEN和Ki-67蛋白和m RNA在甲状腺癌组织及其相应癌旁组织中的表达,并分析PTEN和Ki-67蛋白表达与甲状腺癌患者临床病理指标之间的关系。结果1 PTEN蛋白表达阳性率在甲状腺癌组织中明显低于其在相应癌旁组织中的表达阳性率〔35.0%(14/40)比60.0%(24/40),P〈0.05〕,Ki-67蛋白表达阳性率在甲状腺癌组织中明显高于其在相应癌旁组织中的表达阳性率〔72.5%(29/40)比42.5%(17/40),P〈0.05〕。2 PTEN m RNA表达相对灰度值在14例甲状腺癌标本中明显低于其在相应癌旁组织中的表达(0.225 7±0.036 3比0.503 6±0.037 5,P〈0.05);Ki-67 m RNA表达相对灰度值在14例甲状腺癌标本中明显高于其在相应癌旁组织中的表达(1.212 1±0.042 1比0.293 6±0.027 4,P〈0.05)。3 PTEN和Ki-67蛋白表达与甲状腺癌的组织学分级、病理类型、肿瘤分期及有无区域淋巴结转移有关(P〈0.05),而与甲状腺癌患者的性别、年龄及肿瘤包膜是否完整无关(P〉0.05)。4 PTEN蛋白和Ki-67蛋白在甲状腺癌中的表达呈明显负相关(rs=-0.605,P=0.000),而其在相应癌旁组织中的表达无相关性(rs=-0.021,P=0.899)。结论 PTEN和Ki-67基因在甲状腺癌组织中异常表达,其可能与甲状腺癌的发生、发展及其机制有一定关系,二者联合可能有助于甲状腺癌病理类型的鉴别、生物学行为的判断和临床分期,可能作为甲状腺癌基因诊断、治疗的新靶点。 展开更多
关键词 甲状腺癌 PTEN KI-67 免疫组织化学 RT-PCR
长白猪不同时期和不同组织中GSK3基因的表达研究
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作者 张建斌 白立景 +1 位作者 秦顺义 李千军 《黑龙江畜牧兽医:下半月》 北大核心 2016年第10期78-79,共2页
为了研究糖原合成酶激酶3(GSK3)在长白猪不同时期和器官/组织中的表达情况,试验采用RT-PCR方法对长白猪不同时期器官/组织中GSK3进行测定。结果表明:GSK3在e50和e80时期均有高表达,且随着时间的延长表达量越来越低,在不同器官/组织... 为了研究糖原合成酶激酶3(GSK3)在长白猪不同时期和器官/组织中的表达情况,试验采用RT-PCR方法对长白猪不同时期器官/组织中GSK3进行测定。结果表明:GSK3在e50和e80时期均有高表达,且随着时间的延长表达量越来越低,在不同器官/组织中的表达也不相同,在肾脏、脾脏、肝脏中高表达,而在肌肉中低表达。说明其表达存在器官/组织和时间特异性,从而构建了GSK3在长白猪中的时空表达谱。 展开更多
关键词 糖原合成酶激酶3 RT-PCR 长白猪 肌肉 基因表达
CXCL12/CXCR4与T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病预后的相关性 被引量:4
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作者 于转转 郗彦凤 +3 位作者 李静 白文启 高宁 步鹏 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期838-843,共6页
目的探讨CXCL12/CXCR4与T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病(T-LBL/ALL)预后的相关性。方法选取72例T-LBL/ALL及30例淋巴结反应性增生(LH)患者标本作为对照,进行CXCL12、CXCR4和Ki-67等免疫组织化学(IHC)检测,并采用real-time RT-PC... 目的探讨CXCL12/CXCR4与T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病(T-LBL/ALL)预后的相关性。方法选取72例T-LBL/ALL及30例淋巴结反应性增生(LH)患者标本作为对照,进行CXCL12、CXCR4和Ki-67等免疫组织化学(IHC)检测,并采用real-time RT-PCR法测量CXCL12和CXCR4 mRNA表达量。结果(1)IHC结果:T-LBL/ALL中CXCL12和CXCR4表达阳性率分别为84.7%(61/72)和91.6%(66/72),与LH组相比,差异无统计学意义。Ki-67〈80%和≥80%分别为34.7%(25/72)和65.3%(47/72)。(2)real-time RT-PCR结果:T-LBL/ALL中CXCL12和CXCR4的mRNA相对表达量分别是LH组的62.4%和71.5%,差异有统计学意义(P〈0.05)。(3)单因素分析结果:在T-LBL/ALL中,CXCL12 mRNA表达量与Ann Arbor分期、卡氏评分呈正相关(P〈0.05)。CXCL12蛋白与脾肿大呈正相关(P〈0.05)。CXCR4 mRNA表达量与国际预后指数评分、临床症状、纵隔增宽、骨髓侵犯呈正相关(P〈0.05)。CXCR4蛋白与纵隔增宽呈正相关(P〈0.05)。CXCL12 mRNA表达量与CXCL12蛋白、CXCR4蛋白表达呈正相关(P〈0.05)。(4)多因素COX回归分析结果:CXCR4蛋白高表达、肝脾肿大和骨髓累犯均为影响T-LBL/ALL预后的危险因素。结论CXCL12/CXCR4表达与T-LBL/ALL的进展、纵隔增宽、骨髓侵犯和预后差等有关,提示趋化轴CXCL12/CXCR4在T-LBL/ALL的发生发展中起着必不可少的作用。然而,CXCL12和CXCR4的蛋白表达并不能完全由mRNA转录水平来反映,可能存在其他分子参与CXCL12/CXCR4的表达和调控。随着CXCR4拮抗剂进入临床试验,CXCL12/CXCR4可能成为改善T-LBL/ALL患者预后的治疗靶点。 展开更多
关键词 T淋巴母细胞淋巴瘤 国际预后指数 相关性 白血病 MRNA表达量 CXCL12 RT-PCR CXCR4
A pilot study of microRNAs as a new potential biomarkers for hypertension
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作者 LI Jie HUANG Yu-qing +4 位作者 HUANG Cheng CAI An-ping YU Xue-ju WU Ying FENG Ying-qing 《岭南心血管病杂志:英文版》 CAS 2016年第2期73-80,共8页
Background Micro RNAs have recently been considered as biomarkers in several different cardiovascular diseases,however,so far there are no circulating miRNAs data about hypertension.Therefore,the aim of the present pi... Background Micro RNAs have recently been considered as biomarkers in several different cardiovascular diseases,however,so far there are no circulating miRNAs data about hypertension.Therefore,the aim of the present pilot study was to identify circulating miRNAs for hypertension biomarkers.Methods Using an Agilent microarray,plasma miRNAs were profiled from plasma samples of 10 patients with untreated essential hypertension and 10 healthy controls.Candidate biomarkers identified in the profiles were subjected to validation by using quantitative PCR in an independent sample set of 20 patients with untreated essential hypertension and 20 healthy controls.Then,we assessed the selected miRNAs for the detection and diagnosis of hypertension from plasma samples of 70 patients with untreated essential hypertension and 20 healthy controls.The Spearman correlation coefficient was used to assessed the selected miRNAs correlations with blood pressure.The area under the receiver operating characteristic curve(AUC) was used to evaluate diagnostic accuracy.Results The expressions of selected 8 miRNAs were investigated independently in plasma samples from 10 hypertension patients and 10 healthy subjects.The levels of circulating miR-30c-5p,miR-133 b,miR-29b-3p,miR-29a-3p,miR-29c-3p,miR-30a-3p,miR-let7b-3p expression were significantly down regulated in hypertension group compared with healthy group and the level of hsa-miR-92b-3p was significantly unregulated between the groups.We used q RT-PCR assay to confirm the expression of 8 candidate miRNAs,miR-30c-5p(P < 0.001),miR-29b-3p(P < 0.001),miR-29a-3p(P = 0.027),miR-29c-3p(P < 0.001),miR-92b-3p(P = 0.003),miR-30a-3p(P = 0.704),miR-133b(P =0.346),andmiR-let7b(P = 0.161).The diagnostic accuracy of miR-30c-5p,miR-29b-3p,miR-29a-3p,miR-29c-3p and miR-92b-3p,as measured by AUC,were 0.897,0.90,0.829,0.825 and 0.832,respectively,with all P <0.001.Conclusions The plasma levels of miR-30c-5p,miR-29b-3p,miR-29a-3p,miR-29c-3p and miR-92b-3p associated with hypertension which provide an imp 展开更多
关键词 生物标志物 高血压病 microRNA MIRNAS 高血压患者 RT-PCR 治疗效果 独立样本
Development and Application of an RT-PCR Method for Differentiation of PEDV Variant Strains and Classical Strains 预览
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作者 Qin Yibin Lu Bingxia +8 位作者 Zhao Wu He Ying Li Yingying Li Bin Liang Jiaxing Liang Baozhong Su Qianlian Jiang Dongfu Zhou Yingning 《动物与饲料科学:英文版》 CAS 2015年第1期21-24,60共5页
In order to establish a rapid RT-PCR assay for detection of porcine epidemic diarrhea virus(PEDV),a pair of special primers was designed based on S gene sequence of PEDV published in Gen Bank.After optimization of the... In order to establish a rapid RT-PCR assay for detection of porcine epidemic diarrhea virus(PEDV),a pair of special primers was designed based on S gene sequence of PEDV published in Gen Bank.After optimization of the reaction system,a rapid RT-PCR method was established.Results showed that a fragment of 826 bp was successfully amplified only from the variant PEDV by RT-PCR,while the expected target fragment could not be amplified from TGEV,porcine rotavirus,porcine kobuvirus,PRRSV,PRV,CSFV,PPV.Sensitivity test of RT-PCR indicated that only 11.3 pg nuclear acids could be detected accurately and rapidly.A total of 123 samples collected from different farms in Guangxi Province were detected by the established RT-PCR,the positive rate of PEDV was 67.5%,and the positive rate of new PEDV was 86.7%(72/83).Therefore,the RT-PCR could be used as an effective tool for differentiating diagnosis of the highly pathogenic PEDV in epidemiological investigations. 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 PCR检测方 RT-PCR检测 变异株系 RT-PCR 猪传染性胃肠炎 PEDV 应用
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EML4-ALK融合基因变体1和变体3质控品的建立
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作者 曲守方 于婷 +3 位作者 郭李平 赵金银 高尚先 黄杰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期500-505,共6页
目的:建立EML4-ALK融合基因质控品,用于评价人类EML4-ALK融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类EML4-ALK融合基因序列,合成EML4-ALK融合基因变体1(V1)和变体3(V3)的基因序列。采用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ对带有目的基... 目的:建立EML4-ALK融合基因质控品,用于评价人类EML4-ALK融合基因突变检测试剂盒的性能。方法:根据人类EML4-ALK融合基因序列,合成EML4-ALK融合基因变体1(V1)和变体3(V3)的基因序列。采用限制性内切酶KpnⅠ和HindⅢ对带有目的基因的质粒和表达载体分别进行酶切,将目的基因与载体连接,转化DH5α感受态细胞,筛选阳性菌落进行测序。将测序结果正确的单个菌落进行超声诱导,制备假病毒溶液,并用荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果:对人类EML4-ALK融合基因V1和V3质控品进行序列测定和荧光定量RT-PCR检测,结果表明成功建立了人类EML4-ALK融合基因V1和V3假病毒质控品。结论:本研究建立了人类EML4-ALK融合基因变体假病毒质控品的方法。可为药物靶向治疗基因检测试剂质量控制提供参考。 展开更多
关键词 靶向药物 分子靶向治疗 棘皮动物微管相关蛋白样4(EML4) 融合基因变体 RNA检测 RT-PCR 基因检测试剂 质控品建立 标准物质研究
Nedd9在宫颈癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 赵静妮 王慧君 杨永秀 《中国优生与遗传杂志》 2015年第10期20-22,共3页
目的本研究的目的旨在评估神经前体发育下调9细胞(NEDD9)在宫颈癌组织中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。NEDD9的表达在许多人类恶性肿瘤中都被检测到,并与疾病的进展和不良预后相关。方法通过RT-PCR法分析各组组织中NEDD9... 目的本研究的目的旨在评估神经前体发育下调9细胞(NEDD9)在宫颈癌组织中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。NEDD9的表达在许多人类恶性肿瘤中都被检测到,并与疾病的进展和不良预后相关。方法通过RT-PCR法分析各组组织中NEDD9的表达量。计算各组表达量采用相对定量法,检测的组织分类为正常宫颈组10/49,宫颈上皮内瘤变组13/49、癌症组26/49。结果 NEDD9的表达量随着癌症的进展明显上升,运用统计学软件和方法比较差异性表达是否有统计学意义,结果显示,宫颈上皮内瘤变组与正常组统计学比较有意义(P〈0.05),癌症组与宫颈上皮内瘤变组和正常组比较均具有统计学意义(P〈0.05)。分析癌症组与某些临床特征之间的关系显示,NEDD9与肿瘤细胞分化程度有关(P〈0.05),与患者年龄、临床分期无关(P〉0.05)。结论 NEDD9与宫颈癌的发生发展有一定的关系,我们的研究暗示NEDD9可以作为预测指标和潜在分子治疗靶点用于高表达NEDD9的宫颈癌患者。 展开更多
关键词 RT-PCR 宫颈组织 NEDD9
PLK1mRNA在宫颈组织中的表达与临床意义
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作者 王慧君 赵静妮 +1 位作者 杨永秀 刘丽娜 《中国优生与遗传杂志》 2015年第6期19-20,共2页
目的 探讨PLK1基因在宫颈组织中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测各组m RNA的表达量。计算各组表达量采用相对定量法,检测的组织中正常宫颈组(10例),宫颈上皮内瘤变组(12例),癌症组(26... 目的 探讨PLK1基因在宫颈组织中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系。方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测各组m RNA的表达量。计算各组表达量采用相对定量法,检测的组织中正常宫颈组(10例),宫颈上皮内瘤变组(12例),癌症组(26例)。结果 随着癌的进展,各组表达量具有上升趋势,运用统计学软件和方法比较差异性表达是否有意义,结果显示,宫颈上皮内瘤变组与正常组统计学比较有意义(P〈0.05),癌症组与宫颈上皮内瘤变组和正常组比较均具有统计学意义(P〈0.05)。分析癌症组与某些临床特征之间的关系显示,PLK1与肿瘤细胞分化程度有关(P〈0.05),与患者年龄、临床分期无关(P〉0.05)。结论 PLK1与宫颈癌的发生有一定的作用,有望成为协助诊断宫颈癌的一个预测指标,并为癌的靶基因治疗提供了帮助。 展开更多
关键词 RT-PCR 宫颈组织 PLK1
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