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抑制SDF-1α/CXCR4可预防PTOA小鼠小梁骨的丢失并减弱软骨退变
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作者 虎嘉祥 袁磊 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期2799-2805,共7页
SDF-1α是一种能够渗透软骨并降低蛋白多糖含量的代谢因子,并且抑制SDF-1α/CXCR4信号通路可以减少骨关节炎的发病。然而,SDF-1α/CXCR4信号通路在创伤性骨关节炎中的作用尚不明确。为探讨SDF-1α/CXCR4信号通路在创伤性骨关节炎中的作... SDF-1α是一种能够渗透软骨并降低蛋白多糖含量的代谢因子,并且抑制SDF-1α/CXCR4信号通路可以减少骨关节炎的发病。然而,SDF-1α/CXCR4信号通路在创伤性骨关节炎中的作用尚不明确。为探讨SDF-1α/CXCR4信号通路在创伤性骨关节炎中的作用,本研究通过膝盖前交叉韧带切除术(anterior cruciate ligament transaction, ACLT)制备创伤后骨关节炎(post-traumatic osteoarthritis, PTOA)小鼠模型,将小鼠随机分成3组:第1组(n=10)动物进行假手术,第2组(n=10)小鼠接受载体治疗的膝盖前交叉韧带切除术(ACLT)手术,第3组(n=10)动物进行膝盖前交叉韧带切除术(ACLT)手术并输注AMD3100治疗。通过显微计算机断层摄影术(microscopic computed tomography,μCT)对胫骨软骨下骨状态进行量化,膝关节组织学分析检查关节软骨和关节退化,ELISA定量SDF-1α和CTX-Ⅰ水平,骨髓单核细胞(bone marrow mononuclear cells, BMMCs)用于揭示SDF-1α对破骨细胞形成和体内活性的影响。显微计算机断层摄影术(μCT)分析显示,接受膝盖前交叉韧带切除术(ACLT)术后小鼠胫骨软骨下骨显著减少,AMD3100可部分预防骨质流失和关节软骨退变。血清生物标志物显示,SDF-1α和CTX-Ⅰ含量增加,AMD3100可抑制SDF-1α和CTX-Ⅰ的增加。SDF-1α以剂量依赖的方式促进破骨细胞形成,并且AMD3100可以中和这种作用。本研究初步结论表明,抑制SDF-1α/CXCR4信号通路能够预防创伤后骨关节炎(PTOA)小鼠的骨小梁丢失和减弱软骨退变。 展开更多
关键词 SDF-1Α/CXCR4 创伤性关节炎(PTOA) 信号通路 软骨下骨
SDF-1α/CXCR4信号通路在颅内动脉瘤中的研究进展 预览
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作者 闫亚洲 唐海双 黄清海 《中国临床医学》 2019年第1期122-125,共4页
颅内动脉瘤发生的机制未明,可能与血管内皮损伤、内皮炎症反应、血管平滑肌异常、细胞外基质重构、细胞凋亡及血管壁缺失等有关。基质细胞衍生因子-lα(SDF-1α)及其受体CXCR4在机体炎症、血管形成、免疫、造血、神经发生等多种生物学... 颅内动脉瘤发生的机制未明,可能与血管内皮损伤、内皮炎症反应、血管平滑肌异常、细胞外基质重构、细胞凋亡及血管壁缺失等有关。基质细胞衍生因子-lα(SDF-1α)及其受体CXCR4在机体炎症、血管形成、免疫、造血、神经发生等多种生物学过程中发挥重要的作用。SDF-1α/CXCR4轴对炎性细胞具有趋化作用,能促进动脉瘤壁滋养血管生成,促进原始细胞或祖细胞归巢,而这些过程与颅内动脉瘤的形成、发展、破裂及修复等密切相关。 展开更多
关键词 SDF-1Α/CXCR4 颅内动脉瘤 炎性细胞 内皮祖细胞 血管平滑肌细胞
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小鼠心脏侧群细胞在体内的分化迁移及其机制探讨 预览
3
作者 王学哲 张军敏 +1 位作者 王敏 梁迅 《解放军医学院学报》 CAS 2017年第11期1078-1082,F0003共6页
目的探讨小鼠心脏的SCA1^-/CD31^-侧群(cardiac side population,CSP)细胞在体内的分化、迁移及其机制。方法将标记PKH26的SCA1^-/CD31^-CSP细胞注射到小鼠心肌梗死模型心肌内,观察这些细胞的迁移和定位;组织染色、逆转录酶聚合酶链... 目的探讨小鼠心脏的SCA1^-/CD31^-侧群(cardiac side population,CSP)细胞在体内的分化、迁移及其机制。方法将标记PKH26的SCA1^-/CD31^-CSP细胞注射到小鼠心肌梗死模型心肌内,观察这些细胞的迁移和定位;组织染色、逆转录酶聚合酶链反应检测细胞的分化和钙黏蛋白的表达水平;趋化实验检测SDF-1α/CXCR4通路的作用。结果 SCA1^-/CD31^-CSP细胞能够从穿刺部位迁移到缺血区域,荧光标记显示已分化成血管内皮细胞并形成血管样结构。与对照组相比,SCA1^-/CD31^-CSP细胞上表达的钙黏蛋白在心肌梗死后显著下降;SDF-1α诱导迁移反应呈明显的剂量依赖关系且能够被anti-CXCR4抗体阻断。结论在小鼠的心脏中SCA1^-/CD31^-CSP细胞可作为内皮祖细胞。SDF-1α/CXCR4通路在心肌梗死后,对这些细胞的迁移可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 干细胞 侧群细胞 心肌缺血 迁移 钙黏蛋白 SDF-1/CXCR4信号通路
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SDF-1α/CXCR4通路在大鼠弥漫性轴索损伤中的作用 预览 被引量:1
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作者 庞宏刚 宋锦宁 +5 位作者 李丹东 赵永林 赵雅慧 黄廷钦 张斌飞 马旭东 《西安交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期40-44,共5页
目的通过探讨弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后脑组织SDF-1α及CXCR4的表达以及抑制该通路后对外周炎症细胞浸润、轴索损伤和β-APP及MMP-9表达的影响,揭示SDF-1α/CXCR4通路在DAI后炎性损伤中的作用。方法采用大鼠头颅... 目的通过探讨弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后脑组织SDF-1α及CXCR4的表达以及抑制该通路后对外周炎症细胞浸润、轴索损伤和β-APP及MMP-9表达的影响,揭示SDF-1α/CXCR4通路在DAI后炎性损伤中的作用。方法采用大鼠头颅瞬间旋转装置制备大鼠DAI模型,于造模后6、24、48、72h取脑组织,采用Western blot测定脑组织SDF-1α及其受体CXCR4的表达,并且通过给予该通路特异性抑制剂,观察外周炎症细胞浸润后相关蛋白β-APP、MMP-9的表达,及脑脊液中轴索损伤相关蛋白MBP的含量,揭示其在DAI后的炎性损伤中的作用及其机制。结果 DAI模型组皮层SDF-1α及CXCR4的表达量较对照组均显著增加,测定DAI后24h,脑皮层组织中MPO阳性细胞数、β-APP、MMP-9的表达均较对照组显著升高,脑脊液中MBP的水平也较对照组明显升高;给予CXCR4特异性抑制剂AMD3100后,脑皮层组织中MPO阳性细胞数、β-APP、MMP-9的表达较DAI模型组均明显下降,并且脑脊液中MBP水平也较DAI模型组显著下降。结论 SDF-1α/CXCR4通路活化在介导大鼠DAI后脑组织的炎性损伤中具有重要作用。 展开更多
关键词 颅脑损伤 弥漫性轴索损伤 炎症反应 SDF-1Α/CXCR4 Β淀粉样前体蛋白
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川崎病患儿体内趋化因子SDF-1α/CXCR4和MCP-1的表达研究 预览 被引量:4
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作者 熊瑞华 孙继民 吕海涛 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第1期119-121,共3页
目的探讨川崎病患儿体内趋化因子基质细胞衍生因子-l/CXC型趋化因子受体(SDF-1α/CXCR4)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在川崎病(Kawasaki disease,KD)发生过程中及冠状动脉损伤中的作用及意义。方法选取66例KD患者为实验组,其中冠... 目的探讨川崎病患儿体内趋化因子基质细胞衍生因子-l/CXC型趋化因子受体(SDF-1α/CXCR4)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在川崎病(Kawasaki disease,KD)发生过程中及冠状动脉损伤中的作用及意义。方法选取66例KD患者为实验组,其中冠状动脉损害(coronary artery lesions,CAL)17例和无冠状动脉损害(NCA)49例,采用逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)技术和酶联反应吸附(ELISA)方法,分别测定KD 2个时期(缓解期与急性期)时血浆中SDF-1α和MCP-1的浓度及外周血单个核细胞(PBMC)中CXCR4 mRNA和MCP-1 mRNA的表达变化。以65例非感染患儿作为对照组进行比较。结果 KD组急性期患者血浆SDF-1α水平和PBMC中CXCR4 mRNA表达水平均明显高于对照组(P〈0.01),而缓解期与对照组比较差异无统计学意义;CAL患者与NCA患者血浆中SDF-1α水平差异无统计学意义。KD组急性期患者血浆MCP-1水平与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平均明显高于对照组(P〈0.01);CAL患者和NCA患者血浆中MCP-1水平与PBMC中MCP-1 mRNA表达水平差异有统计学意义(P〈0.05)。结论SDF-1α/CXCR4可能参与了KD发病过程,但可能与冠状动脉损害无关。川崎病患儿体内MCP-l呈持续增高状态,尤其是CAL患者,因此该趋化因子可用于判断KD的病情及冠状动脉损害程度。 展开更多
关键词 川崎病 SDF-1Α/CXCR4 MCP-1 趋化因子
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SDF-1α/CXCR4轴对脑缺血再灌注后微血管生成机制的研究进展
6
作者 陶录岭 刘轲 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期665-669,共5页
SDF-1α/CXCR4轴的生物学功能在血管生成过程中发挥着重要而复杂的调控作用,与脑缺血再灌注后微血管生成密切相关,对其进一步深入研究有助于为临床相关治疗手段提供新的理论依据。本文从SDF-1α/CXCR4轴的结构、分布、功能、表达、... SDF-1α/CXCR4轴的生物学功能在血管生成过程中发挥着重要而复杂的调控作用,与脑缺血再灌注后微血管生成密切相关,对其进一步深入研究有助于为临床相关治疗手段提供新的理论依据。本文从SDF-1α/CXCR4轴的结构、分布、功能、表达、转导途径、相关趋化细胞及调节因子等方面,就近几年有关SDF-1α/CXCR4轴对脑缺血再灌注后微血管生成机制的研究做一综述,并对存在的问题进行讨论。 展开更多
关键词 SDF1α CXCR4 脑缺血再灌注 微血管生成 综述
影响子宫内膜癌预后的肿瘤微环境研究进展 被引量:3
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作者 徐玮 杨艳(综述) 滕银成(审校) 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期547-549,共3页
子宫内膜癌的手术-病理分期i病理类型、组织学分级、肌层浸润深度、淋巴转移等与预后密切相关。近来研究发现,肿瘤微环境中相关基质细胞的信号表达异常对肿瘤的增殖、侵袭转移具有重要影响,与疾病的预后密切相关。本文拟对肿瘤微环境... 子宫内膜癌的手术-病理分期i病理类型、组织学分级、肌层浸润深度、淋巴转移等与预后密切相关。近来研究发现,肿瘤微环境中相关基质细胞的信号表达异常对肿瘤的增殖、侵袭转移具有重要影响,与疾病的预后密切相关。本文拟对肿瘤微环境中肝细胞生长因子及其受体(HGF/c-Met)、基质细胞衍生因子1α/CXC族趋化因子受体4(SDF-1αCXCR4)和血管内皮生长因子A(VEGF-A)作为内膜癌的独立预后指标的研究进展及应用前景作简要综述。 展开更多
关键词 肿瘤微环境 子宫内膜癌 HGF/C-MET SDF-1Α/CXCR4 血管内皮生长因子A
HIF-1α与SDF-1α/CXCR4在星形胶质细胞缺氧应激过程中的调控机制与作用 预览 被引量:1
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作者 黄生炫 安宇 +6 位作者 李静 熊云彪 许长平 杨恒 杨承勇 谭新杰 刘窗溪 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期676-679,共4页
目的探讨星形胶质细胞缺氧模型中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)与基质衍生因子-1α/趋化因子受体(stromal cell derived factor 1α/chemokine receptor 4、SDF-1α/CXCR4)通路在缺氧应激过程中的调控机... 目的探讨星形胶质细胞缺氧模型中缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)与基质衍生因子-1α/趋化因子受体(stromal cell derived factor 1α/chemokine receptor 4、SDF-1α/CXCR4)通路在缺氧应激过程中的调控机制与作用。方法原代培养SD大鼠星形胶质细胞并构建缺氧模型,采用不同浓度梯度与时间CoCl2处理后,使用RT-PCR检测缺氧前后HIF-1α和SDF-1α的mRNA表达情况,并采用ELISA的方法检测SDF-1α的分泌情况。针对HIF-1α基因序列设计siRNA,诱导星形胶质细胞缺氧模型内HIF-1α基因沉默并检测HIF-1α、SDF-1α的mRNA表达情况与SDF-1α的分泌水平的变化情况。结果研究显示星形胶质细胞在CoCl2模拟的缺氧环境下HIF-1α和SDF-1αmRNA表达的水平均上调。另一方面,沉默HIF-1α基因的星形胶质细胞在缺氧环境中SDF-1α的表达水平无显著性升高。结论缺氧刺激上调星形胶质细胞SDF-1α的表达是通过上调HIF-1α表达介导的。HIF-1α与SDF-1α/CXCR4之间可能存在调控关系。 展开更多
关键词 缺氧HIF-1α SDF-1Α/CXCR4 星形胶质细胞
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LRRC4通过SDF-1α/CXCR4生物学轴抑制脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力 预览 被引量:7
9
作者 陈琼 武明花 +4 位作者 周艳宏 唐运莲 黄琛 李小玲 李桂源 《中南大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期 735-741,共7页
目的:探讨LRRC4(1eucine-rich repeats containing4)通过SDF-1α/CXCR4(stromal cell-derived factor-1α/CXC receptor4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将LRRc4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验... 目的:探讨LRRC4(1eucine-rich repeats containing4)通过SDF-1α/CXCR4(stromal cell-derived factor-1α/CXC receptor4)对脑胶质瘤细胞侵袭迁移能力的影响。方法:将LRRc4基因转入脑胶质母细胞瘤U251细胞,分别通过RT-PCR实验、黏附实验、侵袭实验、细胞运动试验、划痕标记荧光染料示踪实验.研究SDF-1α干预前后LRRC4对U251细胞迁移能力的影响。结果:将LRRC4基因转入脑胶质瘤细胞U251,通过RT-PCR实验发现CXCR4的表达下调。用CXCR4的特异配体SDF-1α干预后,肿瘤黏附内皮实验、侵袭实验、细胞迁移实验、划痕标记染料示踪实验表明脑胶质瘤细胞迁移能力增强,LRRC4可以抑制细胞的这种侵袭迁移能力。SDF-1α能够改善细胞间的通讯能力,LRRC4可以进一步增强这种通讯能力。结论:SDF-1α/CXCR4的相互作用可以增强脑胶质瘤细胞U251的运动迁移能力,LRRC4基因可以通过调控SDF-1α/CXCR4生物学轴有效地抑制肿瘤细胞的侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 LRRC4 SDF-1Α/CXCR4 脑胶质瘤 侵袭
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SDF-1α/CXCR4轴通过诱导胰腺癌上皮-间充质转化促进肿瘤迁移和侵袭 预览
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作者 李若梦 邹金茂 +5 位作者 李雅晴 陈少杰 练国达 陈茵婷 苏红 黄开红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期273-279,共7页
目的:探讨SDF-1α/CXCR4轴对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测4种胰腺癌细胞株CXCR4 mRNA的表达。Transwell实验检测外源性SDF-1α及其受体CXCR4靶向抑制剂AMD3100对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。... 目的:探讨SDF-1α/CXCR4轴对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响及其作用机制。方法:应用RT-qPCR检测4种胰腺癌细胞株CXCR4 mRNA的表达。Transwell实验检测外源性SDF-1α及其受体CXCR4靶向抑制剂AMD3100对胰腺癌细胞迁移和侵袭能力的影响。MTS法检测外源性SDF-1α及AMD3100对胰腺癌细胞活力的影响。Western blot法检测外源性SDF-1α及AMD3100对胰腺癌细胞上皮-间充质转化(EMT)相关标志物表达的影响。结果:(1)4种胰腺癌细胞株均不同程度地表达CXCR4mRNA,其中PANC-1细胞株表达量最高。(2)外源性SDF-1α可增强PANC-1细胞的迁移和侵袭能力,该作用可被AMD3100所阻断。(3)外源性SDF-1α处理PANC-1细胞72h可增强细胞活力,该作用可被AMD3100阻断。(4)外源性SDF-1α通过上调SNAIL和TWIST促使PANC-1细胞发生EMT,该作用可被AMD3100所阻断。结论:SDF-1/CXCR4轴通过促进胰腺癌细胞发生EMT而促进肿瘤迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胰腺癌 SDF-1α/CXCR4 上皮-间充质转化
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AMD3100阻断SDF-1/CXCR4信号通路对白血病细胞与成骨龛黏附及耐药性的影响 被引量:2
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作者 沈照华 曾东风 +6 位作者 邹仲敏 朱丽丹 马颖 张曦 张诚 李佳丽 孔佩艳 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期413-417,共5页
目的 探讨CXCR4阻断剂AMD3100对白血病细胞与成骨龛黏附的影响及逆转白血病细胞耐药的作用.方法 在生物衍生骨上接种白血病患者骨髓来源的间充质细胞,并诱导其分化为成骨细胞,构建一种仿生性的成骨龛,并用ELISA法检测培养上清中SDF-1的... 目的 探讨CXCR4阻断剂AMD3100对白血病细胞与成骨龛黏附的影响及逆转白血病细胞耐药的作用.方法 在生物衍生骨上接种白血病患者骨髓来源的间充质细胞,并诱导其分化为成骨细胞,构建一种仿生性的成骨龛,并用ELISA法检测培养上清中SDF-1的表达水平;然后在成骨龛中接种FLT3-ITD突变阳性的白血病细胞株MV4-l1细胞,构建三维共培养体系,流式细胞术检测CXCR4的表达水平;在此共培养体系中加入AMD3100后,应用BCECF荧光标记测定白血病细胞的黏附率,流式细胞术分析阿糖胞苷(Ara-C)作用前后白血病细胞凋亡的变化.结果 ①白血病骨髓成骨细胞培养7、14、21d上清中SDF-1含量分别为(304± 18)、(410±28)和(396± 16)pg/ml,第14天达高峰;MV4-11细胞CXCR4表达水平为(72±16)%.②AM D3100作用 24 h,成骨龛对MV4-11细胞黏附率为(40.1±8.1)%,而不加药物的对照组为(65.6± 12.1)%,差异有统计学意义(P<0.05).③加入Ara-C前,AMD3100作用组细胞的凋亡率为(5.6±0.8)%,对照组为(2.5±0.5)%.加入0.02、0.20、2.00 μg/mlAra-C后,AMD3100作用组细胞凋亡率增加为(10.0±2.4)%、(17.8±2.3)%和(25.1±2.4)%,明显高于对照组[分别为(6.7±1.0)%、(10.3±1.5)%、(16.2±3.1)%](P值均<0.05).结论 AMD3100能够阻断骨髓成骨细胞龛和白血病细胞的相互作用,在逆转白血病细胞耐药中起重要作用. 展开更多
关键词 成骨龛 SDF-1/CXCR4信号通路 三维培养 抗药性
干细胞动员在缺血性疾病中的应用 被引量:4
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作者 陈海旭 李艳华 裴雪涛 《中国基础科学》 2012年第2期3-8,共6页
缺血性疾病是临床上一种严重危害健康,降低患者生活质量,致死、致残率高的疾病,主要包括肢体缺血、糖尿病坏疽、缺血性心肌梗塞及缺血性脑梗塞等。骨髓干细胞(bonemarrowderivedstem cells,BMSCs)具有多向分化潜能,已成为缺血性... 缺血性疾病是临床上一种严重危害健康,降低患者生活质量,致死、致残率高的疾病,主要包括肢体缺血、糖尿病坏疽、缺血性心肌梗塞及缺血性脑梗塞等。骨髓干细胞(bonemarrowderivedstem cells,BMSCs)具有多向分化潜能,已成为缺血性疾病领域的研究热点,通过应用干细胞动员剂动员骨髓干细胞至缺血损伤组织诱使血管新生,改善血流灌注和氧供,修复损伤组织,为缺血性疾病的再血管化治疗提供了新策略。骨髓干细胞动员具有操作简便、安全有效、无创伤以及避免干细胞移植引起的免疫排斥反应的特点,应用骨髓干细胞动员的方法和干预策略具有较好的发展潜力。 展开更多
关键词 骨髓干细胞 干细胞动员 SDF-1α/CXCR4 缺血性疾病
SDF-1α及其受体在糖尿病大鼠肾病中的作用 预览
13
作者 刘芬芬 吕学爱 《泰山医学院学报》 2010年第4期 313-316,共4页
据世界流行病学报道,全球有1.8亿糖尿病患者,至2030年总数将翻倍。而糖尿病发生肾脏病变为30%-40%,我国大约有4千万糖尿病患者,1/3的人最终会发展为糖尿病肾病(DN)。糖尿病肾病是糖尿病患者最主要的微血管病变之一,成为导致... 据世界流行病学报道,全球有1.8亿糖尿病患者,至2030年总数将翻倍。而糖尿病发生肾脏病变为30%-40%,我国大约有4千万糖尿病患者,1/3的人最终会发展为糖尿病肾病(DN)。糖尿病肾病是糖尿病患者最主要的微血管病变之一,成为导致终末期肾病的主要原因之一。由于糖尿病肾病患者机体存在极其复杂的代谢紊乱,一旦发展到终末阶段,往往比其他肾脏疾病更加棘手,因此进一步探索其发病机制,以便制定更加有效的防治措施, 展开更多
关键词 糖尿病肾病 基质细胞衍生因子-1Α SDF—1α/CXCR4 血管内皮生长因子
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SDF-1α/CXCR4轴在干/祖细胞“归巢”治疗缺血性心脏病中的作用及其调控 预览 被引量:3
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作者 高永兴(综述) 钱菊英(校审) 《中国分子心脏病学杂志》 2009年第3期 177-182,共6页
基质细胞衍生因子1α(stromal derived factor 1α,SDF-1α)和其受体CXCR4构成的SDF-1α/ CXCR4轴在调节干/祖细胞"归巢"受损心肌中起关键作用。深入研究此轴的启动和调控机制,对干/祖细胞治疗缺血性心脏病有重要意义。
关键词 SDF-1α/CXCR4 归巢 心肌缺血
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胆囊癌CD133阳性细胞侵袭机制的实验研究
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作者 俞远林 姜波健 +2 位作者 陆瑞褀 王守练 俞继卫 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2014年第2期156-161,共6页
目的研究胆囊癌CDl33阳性细胞侵袭能力的产生机制。方法Yranswell法检测CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹法、细胞免疫荧光法分别检测CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞中CX... 目的研究胆囊癌CDl33阳性细胞侵袭能力的产生机制。方法Yranswell法检测CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法、蛋白免疫印迹法、细胞免疫荧光法分别检测CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞中CXCR4的表达。分别用SDF-let、AMD3100作用GBC-SD细胞后,Transwell法检测CDl33阳性细胞和CDl33阴性细胞的迁移和侵袭能力。半定量RT-PCR法检测GBC-SD细胞中CDl33mRNA表达,蛋白免疫印迹法检测GBC.SD细胞中CDl33蛋白表达。结果①CDl33阳性细胞中穿膜细胞数明显多于CDl33阴性细胞(23.78±8.74比6.564-3.09,P=0.0007)。②CDl33阳性细胞中CXCR4mRNA相对灰度值明显高于CDl33阴性细胞(0.6424+0.0204比0.3359±0.0432,P=0.004);CDl33阳性细胞中CXCR4蛋白表达相对灰度值明显高于CDl33阴性细胞(0.7650±0.1066比0.4094±0.0195,P=0.013);CDl33阳性细胞中CXCR4荧光蛋白表达明显强于CDl33阴性细胞。③细胞侵袭能力:穿膜细胞数量在CDl33阳性细胞中,与空白对照组(23.78±8.74)相比,SDF-1et组(62.89±15.27)明显增加(P=0.0006),AMD3100组(10.33±2.00)明显减少(P=0.0002);在CDl33阴性细胞中,与空白对照组(6.59±3.09)相比,SDF-let组(6.89±4.23)无明显变化(P=0.41),AMD3100组(6.11±2.67)亦无明显变化(P=0.38)。④细胞迁移能力:迁移细胞数量,在CDl33阳性细胞中,与空白对照组(35.56±10.97)相比,SDF-1et组(74.56±15.80)明显增加(P=0.0003),AMD3100组(12.67±2.40)明显减少(P=O.0002);在CD133阴性细胞中,与空白对照组(9.56±1.74)相比,SDF-let组(9.78±2.04)无明显变化(P=0.43),AMD3100组(9.54±1.74)亦无明显变化(P=0.42)。⑤在GBC.SD细胞中CDl33mRNA表达:与空白对照组(0.4500±0.0243)相比,SDF.1et组明显� 展开更多
关键词 胆囊癌 侵袭 CD133 SDF-1αCXCR4
四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化模型中SDF-1/αCXCR4的表达及其意义 预览 被引量:4
16
作者 王庆国 严福华 +2 位作者 徐鹏举 周梅玲 李清海 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2009年第5期 384-387,I0002,共5页
目的检测四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化小鼠模型肝脏SDF-1/αCXCR4的表达,评价SDF-1/αCXCR4轴与肝纤维化的关系,为研究肝纤维化肝损伤发生及损伤修复机制研究提供基础。方法选用6周龄雌性纯系C57小鼠,采用40%的CCl4/橄榄油溶液腹腔注... 目的检测四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化小鼠模型肝脏SDF-1/αCXCR4的表达,评价SDF-1/αCXCR4轴与肝纤维化的关系,为研究肝纤维化肝损伤发生及损伤修复机制研究提供基础。方法选用6周龄雌性纯系C57小鼠,采用40%的CCl4/橄榄油溶液腹腔注射,剂量为1 mL/kg,每周2次,共4周,制成肝纤维化模型,取肝纤维化及正常对照组小鼠肝脏标本,采用RT-PCR及免疫组化检测SDF-1α的表达,采用RT-PCR及Western检测CXCR4受体的表达。结果与对照组相比,SDF-1α及CXCR4在肝纤维化模型小鼠肝脏组织中的表达较对照组明显上调,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论肝纤维小鼠肝组织的SDF-1/αCXCR4受体表达上调,为研究肝纤维化肝损伤机制及干细胞移植治疗提供理论基础。 展开更多
关键词 肝纤维化 SDF-1Α CXCR4
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细胞内趋化因子重组突变体SDF-1α/54/KDEL的构建及其对CXCR4受体在细胞膜表面表达的抑制作用 预览
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作者 陈宏远 谭毅 +6 位作者 郭芝刚 马伟峰 蔡绍皙 杜军 黄俊 胡厚稳 蔡绍晖 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期,共6页
构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/... 构建人基质细胞衍生因子(SDF-1)突变体SDF-1α/54/KDEL重组真核表达质粒,并考察其对T细胞性白血病细胞株Molt-4细胞表面受体CXCR4表达的影响,为尝试表型敲除肿瘤细胞CXCR4以抑制肿瘤的转移提供理论和实验依据。以SDF-WT-Gly×4-Dec/PET30a(+)质粒为模板,用PCR法扩增出SDF-1α/54并将其亚克隆至真核表达质粒pEGFP-C3构建成真核表达载体pEGFP-C3/SDF-1α/54/KDEL。经酶切及测序验证后,脂质体介导转染入COS-7细胞,通过Western blot检测SDF-1α/54/KDEL的表达。电穿孔法将重组载体瞬时转染CXCR4高表达的Molt-4,并用流式细胞仪检测CXCR4含量的变化。DNA测序证明:读码框完全正确,重组真核表达载体含有SDF-1α/54基因和编码4肽KDEL的基因,Western blot证明融合蛋白能在COS-7细胞表达。电穿孔转染Molt-4细胞后发现,SDF-1α/54/KDEL可以显著降低胞膜表面CXCR4表达量。由此提示:KDEL介导的SDF-1α/54对Molt-4细胞CXCR4具有表型敲除作用,且此效应不受SDF... 展开更多
关键词 人基质细胞衍生因子(SDF-1) SDF-1α/54 CXCR4 表型敲除
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