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大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进SKOV3细胞的凋亡
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作者 黄汉陵 李阳 《解剖学研究》 CAS 2019年第2期115-118,共4页
目的探讨大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进卵巢癌细胞凋亡的作用研究。方法浆液性卵巢癌(SKOV3)细胞株给予0、25、50和100μg/mL大蒜素培养12 h、24 h和48 h后,细胞计数CCK-8法检测SKOV3细胞的存活率;流式细胞仪检测检测SKOV3细胞凋亡和细... 目的探讨大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进卵巢癌细胞凋亡的作用研究。方法浆液性卵巢癌(SKOV3)细胞株给予0、25、50和100μg/mL大蒜素培养12 h、24 h和48 h后,细胞计数CCK-8法检测SKOV3细胞的存活率;流式细胞仪检测检测SKOV3细胞凋亡和细胞周期改变;Western blot法检测SKOV3细胞磷酸化蛋白VEGF、PI3K、AKt和Caspase3蛋白表达水平。结果与对照组相比,随着大蒜素给药时间的延长和剂量的增加,细胞存活率显著降低,细胞凋亡明显发生,差异有统计学意义(P<0.05);VEGF、PI3K、AKt蛋白的表达含量均明显下降,Caspase3蛋白含量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论大蒜素调控VEGF/PI3K/AKt促进卵巢癌细胞凋亡,具有时间剂量反应关系。 展开更多
关键词 大蒜素 SKOV3细胞 细胞凋亡 卵巢癌 VEGF/PI3K/AKt
RNA干扰TFF3基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响
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作者 杨雨 李彤 +1 位作者 李岩 李莹莹 《解剖科学进展》 2019年第2期130-132,共3页
目的探讨RNA干扰TFF3基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响。方法取60例卵巢癌患者的肿瘤标本,以相对应的癌旁正常卵巢组织标本作为对照组,免疫组织化学方法和real-time PCR法分别检测TFF3蛋白与mRNA的表达。构建针对人TFF3的shRNA表... 目的探讨RNA干扰TFF3基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响。方法取60例卵巢癌患者的肿瘤标本,以相对应的癌旁正常卵巢组织标本作为对照组,免疫组织化学方法和real-time PCR法分别检测TFF3蛋白与mRNA的表达。构建针对人TFF3的shRNA表达载体,稳定转染卵巢癌SKOV3细胞株后,分别用MTT方法与Transwell细胞侵袭实验检测转染后各组SKOV3细胞的增殖与侵袭能力变化。结果卵巢癌组织TFF3蛋白的阳性率和平均光密度值、TFF3mRNA的相对表达水平明显高于癌旁正常卵巢组织。沉默TFF3基因后,卵巢癌SKOV3细胞株增殖与侵袭能力显著降低(P<0.01)。结论 TFF3在卵巢癌组织过表达,沉默TFF3基因可以降低SKOV3细胞的体外增殖及侵袭能力。 展开更多
关键词 TFF3 卵巢癌 SKOV3细胞 增殖 侵袭
丙泊酚联合紫杉醇经MAPK/ERK信号通路对人卵巢癌细胞调亡机制的研究 预览
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作者 罗蓉 王媛 +1 位作者 惠双 张成辉 《河北医药》 CAS 2019年第7期989-993,共5页
目的探讨丙泊酚联合紫杉醇对Skov3、A2780细胞凋亡的影响,并进一步研究其相关机制。方法将Skov3及A2780细胞各分为紫杉醇组、丙泊酚联合紫杉醇组及对照组。丙泊酚联合紫杉醇作用于Skov3、A2780细胞后,检测其对肿瘤细胞的增殖抑制能力,... 目的探讨丙泊酚联合紫杉醇对Skov3、A2780细胞凋亡的影响,并进一步研究其相关机制。方法将Skov3及A2780细胞各分为紫杉醇组、丙泊酚联合紫杉醇组及对照组。丙泊酚联合紫杉醇作用于Skov3、A2780细胞后,检测其对肿瘤细胞的增殖抑制能力,克隆能力及凋亡的影响。并通过给予MAPK/ERK信号通路抑制剂U0126,检测对于相关蛋白的影响。结果丙泊酚联合紫杉醇组Skov3、A2780的增殖得到明显抑制,死亡率上升,克隆能力下降,并且凋亡细胞明显增多较紫杉醇组和对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时联合U0126后,MAPK/ERK信号通路的关键蛋白p-MAPK及p-ERK得到了明显的抑制,同时凋亡相关蛋白表达明显上升。结论丙泊酚联合紫杉醇可以抑制Skov3、A2780增殖及克隆,通过抑制MAPK/ERK通路,上调Caspase-3蛋白的表达而达到提高肿瘤细胞凋亡的目的。 展开更多
关键词 丙泊酚 SKOV3细胞 A2780细胞 凋亡
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microRNA 138对卵巢癌细胞增殖的影响
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作者 侯杰 席红 +1 位作者 邓晓华 张斌 《解剖科学进展》 2019年第1期49-51,共3页
目的研究microRNA 138在卵巢癌患者中的表达,探讨microRNA 138对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法收集卵巢癌患者标本38例,同时收集相应的癌旁组织19例。利用荧光定量PCR方法检测各个组织中microRNA 138的表达水平。用脂质体作为载体将m... 目的研究microRNA 138在卵巢癌患者中的表达,探讨microRNA 138对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。方法收集卵巢癌患者标本38例,同时收集相应的癌旁组织19例。利用荧光定量PCR方法检测各个组织中microRNA 138的表达水平。用脂质体作为载体将microRNA 138模拟物转染至SKOV3细胞,CCK-8方法检测细胞增殖能力的变化。结果 microRNA 138在卵巢癌组织中的表达水平明显低于癌旁组织,P<0.01。过表达microRNA 138能够显著抑制SKOV3细胞的增殖。结论 microRNA 138表达上调能够抑制卵巢癌细SKOV3增殖,其可能参与卵巢癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 MICRORNA 138 卵巢癌 增殖 SKOV3细胞
复方大七气汤联合顺铂对卵巢癌SKOV3细胞的抑制作用
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作者 邱文平 兰楠 +2 位作者 严茂铭 易均路 陈蓉 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期373-381,共9页
目的探讨研究复方大七气汤(compound Daqiqi decoction,CDQD)联合顺铂对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用及其相关机制。方法采用人卵巢癌细胞株SKOV3构建60只裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为6组,每组10只,分别为模型组(生理盐水),CDQD低剂量... 目的探讨研究复方大七气汤(compound Daqiqi decoction,CDQD)联合顺铂对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤抑制作用及其相关机制。方法采用人卵巢癌细胞株SKOV3构建60只裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为6组,每组10只,分别为模型组(生理盐水),CDQD低剂量组(15.16 g·kg^-1),CDQD中剂量组(30.33 g·kg^-1),CDQD高剂量组(60.66 g·kg^-1),顺铂组(DDP,3 mg·kg^-1),联合组(30.33 g·kg^-1 CDQD+3 mg·kg^-1 DDP),顺铂3 d·次^-1,其余1 d·次^-1,连续给药14 d,每3 d测瘤体积,治疗结束后剥取瘤体,称瘤重并计算抑瘤率,绘制肿瘤生长曲线。采用HE染色法观测各组肿瘤细胞形态,TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR和Western-blot检测肿瘤组织中miR-939、信号转导子与转录激活子3(STAT3)、血管内皮生长因子A(VEGFA)和血管内皮生长因子受体(EGFR)mRNA及蛋白的表达。结果与模型组相比,治疗组瘤体积、瘤重均减小(P<0.01),联合组瘤体积和瘤重均小于其余各组(P<0.01),联合组细胞凋亡率明显高于其余各组(P<0.01)。与模型组相比,治疗组中MiR-939、STAT3与VEGFA表达均下调,EGFR 表达上升,其中联合组MiR-939、STAT3、VEGFA表达最低(P<0.05),EGFR表达最高(P<0.05)。结论 CDQD对卵巢癌裸鼠皮下移植瘤具有抑制作用,其机制可能与抑制MiR-939/STAT3通路激活,下调VEGFA、上调EGFR表达有关。CDQD对卵巢癌组织的抑制作用具有浓度依耐性,并且与DDP联合用药能增强DDP抗瘤作用,减轻DDP对荷瘤鼠的毒副作用。 展开更多
关键词 卵巢癌 复方大七气汤 顺铂 增殖 裸鼠 SKOV3细胞
高压氧对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制
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作者 王静影 周蓉 +4 位作者 朱华德 陈云 杨亮 梅厚东 付贵峰 《中华航海医学与高气压医学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期41-46,共6页
目的探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法人卵巢癌细胞系SKOV3培养完成后,HBO组和对照组分别应用CCK-8、流式细胞术、Western blotting实验检测HBO对SKOV3细胞增殖活性、凋亡及... 目的探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为的影响及其作用机制。方法人卵巢癌细胞系SKOV3培养完成后,HBO组和对照组分别应用CCK-8、流式细胞术、Western blotting实验检测HBO对SKOV3细胞增殖活性、凋亡及成瘤能力的影响;Western blotting检测HBO对PTEN/PI3K/AKT通路激活的影响。敲减PTEN后,再用上述方法检测HBO对SKOV3细胞增殖和凋亡的影响。采用小鼠荷瘤实验检测HBO抑制卵巢癌荷瘤小鼠肿瘤生长及相关蛋白的表达水平。结果HBO组卵巢癌细胞SKOV3增殖活性明显降低、凋亡率明显提高(均P<0.05);HBO组细胞中抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低,而促凋亡蛋白Bax及caspase-3表达升高(均P<0.05)。HBO组明显提高了卵巢癌SKOV3细胞中PTEN蛋白的表达水平,降低了p-PI3K和p-AKT蛋白的表达水平(P<0.05或P<0.01)。此外,HBO组降低了SKOV3细胞中HIF-1的表达水平;但敲减PTEN后,HBO抑制SKOV3细胞中HIF-1表达的作用明显减弱(P<0.05),HBO+si-PTEN组SKOV3细胞增殖能力提高、凋亡受到明显抑制(均P<0.05)。与对照组相比,HBO组小鼠肿瘤体积及体质量均明显降低(均P<0.05),荷瘤卵巢癌肿瘤组织中HIF-1、p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达降低,而PTEN、caspase-3及Bax表达水平升高(均P<0.05)。结论HBO处理可明显抑制卵巢癌SKOV3细胞恶性生物学行为,其作用机制主要是通过调节PTEN/PI3K/AKT信号通路改善细胞缺氧环境实现的。 展开更多
关键词 高压氧 卵巢癌 SKOV3细胞 恶性生物学行为 增殖 凋亡
氯化钴对人卵巢癌SKOV3细胞顺铂敏感性的影响 预览
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作者 于洋 张岳培 +3 位作者 王润泽 刘师兵 徐路 徐冶 《吉林大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期1-6,217共7页
目的:观察氯化钴(CoCl2)作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响,并阐述其可能机制。方法:体外培养SKOV3细胞株,随机分为对照组、CoCl2组、顺铂(DDP)组和CoCl2联用DDP(联合)组,CoCl2组细胞以200μmol·L^-1CoCl2作... 目的:观察氯化钴(CoCl2)作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响,并阐述其可能机制。方法:体外培养SKOV3细胞株,随机分为对照组、CoCl2组、顺铂(DDP)组和CoCl2联用DDP(联合)组,CoCl2组细胞以200μmol·L^-1CoCl2作用4h后换普通细胞培养基培养20h,DDP组细胞以含10mg·L^-1DDP的细胞培养基培养24h,联合组细胞以200μmol·L^-1CoCl2作用4h后更换含10mg·L^-1DDP的细胞培养基继续培养20h。MTT法检测各组细胞存活率,免疫荧光法检测各组细胞中低氧诱导因子1α(HIF-1α)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)阳性表达强度,Rhod2-AM荧光探针检测各组细胞线粒体钙离子(Ca^2+)水平,免疫蛋白印迹(Western blotting)法观察凋亡相关蛋白细胞色素C(cytoC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)和活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cleaved caspase 3)蛋白表达水平,Muse■凋亡试剂盒检测各组细胞凋亡率。结果:与对照组比较,CoCl2组细胞存活率无明显变化(P>0.05),其余2组细胞存活率明显下降(P<0.05);且联合组高于DDP组(P<0.05)。与对照组比较,CoCl2组和联合组细胞中HIF-1α阳性表达强度明显增强(P<0.05);DDP组和联合组细胞中iNOS阳性表达强度明显增强(P<0.05)。与对照组比较,DDP组和联合组细胞Ca^2+水平升高(P<0.05);且DDP组高于联合组(P<0.05)。与对照组比较,CoCl2组细胞中cytoC、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平无明显变化(P>0.05),DDP组细胞中cytoC、caspase 3和cleaved caspase 3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);且联合组低于DDP组(P<0.05)。与对照组比较,DDP组细胞凋亡率明显升高(P<0.05);联合组细胞凋亡率较DDP组降低(P<0.05)。结论:CoCl2可以通过抑制DDP诱导的人卵巢癌SKOV3细胞株iNOS表达增强来减少线粒体途径凋亡的发生,降低其顺铂敏感性。 展开更多
关键词 低氧诱导因子1Α 氯化钴 诱导型一氧化氮合酶 钙离子 顺铂敏感性 SKOV3细胞
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下调C2CD3通过抑制Hedgehog通路调控上皮性卵巢癌增殖、侵袭和迁移 预览
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作者 蔡留芸 罗小东 +1 位作者 梁皓 胡建国 《上海交通大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第12期1414-1419,共6页
目的·研究含C2钙依赖性结构域蛋白3(C2 calcium dependent domain containing protein 3,C2CD3)在卵巢癌组织中的表达与临床病理参数的关系,及其对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移的影响和可能机制。方法·免疫组织化学方法... 目的·研究含C2钙依赖性结构域蛋白3(C2 calcium dependent domain containing protein 3,C2CD3)在卵巢癌组织中的表达与临床病理参数的关系,及其对卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭及迁移的影响和可能机制。方法·免疫组织化学方法检测卵巢癌组织及正常卵巢组织中C2CD3的表达水平,分析C2CD3表达水平与卵巢癌临床病理参数的相关性。下调SKOV3细胞中C2CD3基因,EdU检测细胞增殖能力,Transwell检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blotting检测C2CD3、Shh、Ptch1、Smo及Gli1蛋白水平。结果·C2CD3表达于卵巢癌细胞质,在卵巢癌组织中C2CD3呈强阳性表达,正常卵巢组织中呈弱阳性表达或不表达。与正常卵巢组织比较,C2CD3在卵巢癌中表达明显增高(P<0.05)。C2CD3表达与肿瘤分期及分级相关,分期越高,表达越强(P<0.05);分级越高,表达越强(P<0.05)。在不同年龄及组织类型中表达差异无统计学意义。下调卵巢癌SKOV3细胞C2CD3基因后,卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移能力均降低(均P<0.05);C2CD3、Shh、Ptch1、Smo及Gli1蛋白水平均下降。结论·C2CD3在卵巢癌组织中表达上升。下调C2CD3基因后,卵巢癌SKOV3细胞增殖、侵袭和迁移能力均下降,可能与抑制Hedgehog通路中Shh、Ptch1、Smo及Gli1蛋白相关。 展开更多
关键词 含C2钙依赖性结构域蛋白3(C2CD3) 卵巢癌 HEDGEHOG通路 SKOV3细胞 侵袭 迁移
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CD146过表达对SKOV3细胞在裸鼠体内成瘤能力的影响
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作者 范丽 刘莹 龚宝兰 《南京医科大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2018年第1期44-48,共5页
目的:研究CD146基因在卵巢癌细胞SKOV3中过表达对其接种裸鼠皮下生成肿瘤能力的影响。方法:以脂质体介导的CD146基因转染卵巢癌细胞SKOV3,G418筛选阳性克隆细胞,并经Western blot鉴定其过表达CD146蛋白。分别应用MTT与软琼脂克隆形成... 目的:研究CD146基因在卵巢癌细胞SKOV3中过表达对其接种裸鼠皮下生成肿瘤能力的影响。方法:以脂质体介导的CD146基因转染卵巢癌细胞SKOV3,G418筛选阳性克隆细胞,并经Western blot鉴定其过表达CD146蛋白。分别应用MTT与软琼脂克隆形成试验评价过表达CD146克隆细胞对细胞增殖与体外集落形成能力的影响,并将这些细胞接种裸鼠皮下组织,每周观察、记录肿瘤的生长状况至裸鼠处死,称量肿瘤重量并对肿瘤组织进行免疫组织化学染色观察。结果:SKOV3细胞经脂质体转染与G418筛选后,可获得过表达CD146的阳性克隆细胞。CD146过表达明显抑制了SKOV3细胞的体外增殖能力与集落形成能力,亦明显抑制了裸鼠皮下的肿瘤生成能力,其肿瘤重量与体积明显比对照组小(P〈0.05)。免疫组织化学染色结果表明过表达CD146的SKOV3细胞接种裸鼠生成的肿瘤组织仍可高表达CD146蛋白分子。结论:CD146过表达明显抑制卵巢癌细胞SKOV3的体外增殖能力与裸鼠体内的致瘤性,可能是卵巢癌预后的一个潜在分子标记。 展开更多
关键词 卵巢癌 CD146 细胞黏附分子 SKOV3细胞 肿瘤生成
KDM2B过表达慢病毒载体构建及其在人卵巢癌细胞中的表达 预览
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作者 蒙家华 况燕 +2 位作者 卢芳芳 易叶叶 徐红 《山东医药》 2018年第5期5-8,共4页
目的构建赖氨酸特异性脱甲基酶2B(KDM2B)过表达慢病毒载体,并探讨其是否能在人卵巢癌细胞A2780及SKOV3中稳定表达。方法根据Gen-Bank数据库提供的KDM2B基因序列,用限制性内切酶获得线性化载体,制备目的基因片段并用GV慢病毒载体改造... 目的构建赖氨酸特异性脱甲基酶2B(KDM2B)过表达慢病毒载体,并探讨其是否能在人卵巢癌细胞A2780及SKOV3中稳定表达。方法根据Gen-Bank数据库提供的KDM2B基因序列,用限制性内切酶获得线性化载体,制备目的基因片段并用GV慢病毒载体改造和包装病毒,对阳性克隆重组产物进行测序及鉴定。用LV-KDM2B过表达慢病毒感染A2780、SKOV3细胞(LV-KDM2B感染组),同时感染LV-CON作为阴性对照(LV-CON感染组),未感染的A2780、SKOV3细胞作为空白对照组。采用RT-PCR和Western blotting法分别检测细胞中KDM2B mRNA及蛋白表达。结果慢病毒阳性克隆载体测序结果与目标序列完全一致。LV-KDM2B感染组A2780、SKOV3细胞中KDM2B mRNA及蛋白表达均较LV-CON感染组、空白对照组高,比较差异均有统计学意义(P均〈0.05)。结论 KDM2B过表达慢病毒载体构建成功,且其可在人卵巢癌细胞A2780、SKOV3中稳定表达。 展开更多
关键词 卵巢癌 赖氨酸特脱甲基酶2B A2780细胞 SKOV3细胞
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杨梅素通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡 预览
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作者 于洋 徐路 +2 位作者 刘师兵 李松岩 徐冶 《吉林大学学报:医学版》 CSCD 北大核心 2018年第5期903-907,共5页
目的:观察杨梅素与mdivi-1分别或联合作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞凋亡和线粒体分裂情况,探讨杨梅素诱导SKOV3细胞凋亡的机制。方法:体外培养SKOV3细胞,随机分为对照组、mdivi-1组、杨梅素组和联合给药组,mdivi-1组以50μmol·L-1... 目的:观察杨梅素与mdivi-1分别或联合作用于人卵巢癌SKOV3细胞后细胞凋亡和线粒体分裂情况,探讨杨梅素诱导SKOV3细胞凋亡的机制。方法:体外培养SKOV3细胞,随机分为对照组、mdivi-1组、杨梅素组和联合给药组,mdivi-1组以50μmol·L-1mdivi-1作用1h后更换普通细胞培养液继续培养23h,杨梅素组以50g·L-1杨梅素作用24h,联合给药组以50μmol·L-1mdivi-1作用1h后更换含50g·L-1杨梅素的细胞培养液继续培养23h。MTT法检测各组细胞存活率;Muse○R凋亡检测试剂盒检测各组细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(Westernblotting)观察细胞色素C(CytC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)、动力相关蛋白1(DRP1)和分裂蛋白1(FIS1)表达水平;MitoTracker○RRed荧光探针特异性标记线粒体观察各组细胞线粒体分裂情况。结果:与对照组比较,杨梅素组细胞存活率明显降低(P<0.05);与杨梅素组比较,联合给药组细胞存活率明显升高(P<0.05)。与对照组比较,杨梅素组细胞凋亡率升高(P<0.05);与杨梅素组比较,联合用药组细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与对照组比较,杨梅素组细胞中CytC和caspase3蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与杨梅素组比较,联合用药组CytC和caspase3蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与对照组比较,杨梅素组细胞线粒体分裂程度增强;与杨梅素组比较,联合用药组线粒体分裂程度下降。与对照组比较,杨梅素组细胞中DRP1和FIS1蛋白表达水平升高(P<0.05);与杨梅素组比较,联合用药组DRP1和FIS1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:杨梅素可通过促进DRP1依赖性线粒体分裂诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡。 展开更多
关键词 杨梅素 mdivi-1 动力相关蛋白1 线粒体分裂 细胞凋亡 SKOV3细胞
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过表达miR-17-5p对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及可能机制
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作者 孙连碧 曹东华 +1 位作者 王立华 赵阔 《解剖科学进展》 2018年第4期347-349,共3页
目的探讨miR-17-5p对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及可能机制。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为miR-17-5p模拟物组、miR-17-5p阴性对照组及空白对照组,将miR-17-5p模拟物转染至miR-17-5p模拟物组细胞,阴性对照组细胞转染无关序列,空白对照组细... 目的探讨miR-17-5p对卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响及可能机制。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为miR-17-5p模拟物组、miR-17-5p阴性对照组及空白对照组,将miR-17-5p模拟物转染至miR-17-5p模拟物组细胞,阴性对照组细胞转染无关序列,空白对照组细胞不作任何处理,采用real time PCR方法验证其转染效率,用MTT方法检测转染后各组SKOV3细胞的增殖能力变化。采用双荧光素酶报告基因验证P21是否为miR-17-5p的靶基因,real-time PCR与Western blot实验分别检测各组细胞P21m RNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,miR-17-5p模拟物组SKOV3细胞miR-17-5p表达水平显著升高,但细胞增殖能力显著降低。双荧光素酶报告基因分析结果显示,P21为miR-17-5p的靶基因;过表达miR-17-5p后,P21m RNA及蛋白表达水平显著降低(P〈0.01)。结论 miR-17-5p抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖可能与下调P21的表达相关。 展开更多
关键词 miR-17-5p P21 卵巢癌 SKOV3细胞 增殖
过表达miR-101对卵巢癌SKOV3细胞增殖和迁移的影响及可能机制
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作者 孙连碧 曹东华 +1 位作者 任忠名 王立华 《解剖学研究》 CAS 2018年第5期385-389,共5页
目的探讨miR-101对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移的影响及可能机制。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为miR-101模拟物组、miR-101阴性对照组及空白对照组,将miR-101模拟物转染至miR-101模拟物组细胞,阴性对照组细胞转染无关序列,空白对照组细胞不... 目的探讨miR-101对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移的影响及可能机制。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为miR-101模拟物组、miR-101阴性对照组及空白对照组,将miR-101模拟物转染至miR-101模拟物组细胞,阴性对照组细胞转染无关序列,空白对照组细胞不作任何处理,采用Real time PCR方法验证其转染效率,分别用MTT方法与Transwell实验检测转染后各组SKOV3细胞的增殖与迁移能力变化。采用双荧光素酶报告基因验证Girdin是否为miR-101的靶基因,Real-time PCR与Western blot实验分别检测各组细胞Girdin mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组相比,miR-101模拟物组SKOV3细胞miR-101表达水平显著升高(P〈0.01)。与对照组相比,miR-101模拟物组SKOV3细胞增殖、迁移能力显著降低(P〈0.01)。双荧光素酶报告基因分析结果显示,Girdin为miR-101的靶基因;过表达miR-101后,Girdin mRNA及蛋白表达水平显著降低(P〈0.01)。结论 miR-101可能通过下调Girdin的表达抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移。 展开更多
关键词 卵巢癌 miR-101 Girdin SKOV3细胞 增殖 迁移
VEGF、MMP-9在卵巢癌组织中的表达及贝伐单抗联合顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的作用 预览 被引量:1
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作者 刘端 李红雨 +3 位作者 臧星卉 鱼志琪 孙玮 李玉光 《郑州大学学报:医学版》 北大核心 2018年第4期516-520,共5页
目的:探讨卵巢癌组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达及贝伐单抗联合顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的作用机制。方法:收集41例上皮性卵巢恶性肿瘤组织、30例卵巢良性肿瘤组织、30例正常卵巢组织,采用免疫组化法检测卵巢组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达... 目的:探讨卵巢癌组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达及贝伐单抗联合顺铂对卵巢癌细胞SKOV3的作用机制。方法:收集41例上皮性卵巢恶性肿瘤组织、30例卵巢良性肿瘤组织、30例正常卵巢组织,采用免疫组化法检测卵巢组织中VEGF、MMP-9蛋白的表达情况。MTT实验检测2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 mg/L的贝伐单抗对卵巢癌细胞SKOV3的体外增殖抑制作用;流式细胞仪检测5 mg/L贝伐单抗、3 mg/L顺铂单独及联合使用对卵巢癌细胞凋亡的影响;Western blot法检测5 mg/L贝伐单抗、3 mg/L顺铂单独及联合使用对VEGF下游信号通路中关键蛋白AKT、Bad和MMP-9表达的影响。结果:卵巢癌、卵巢良性肿瘤、正常卵巢组织中VEGF蛋白阳性表达率分别为75.6%、40.0%、6.7%;MMP-9蛋白阳性表达率分别为70.7%、20.0%、3.3%,卵巢癌组与卵巢良性肿瘤组和对照组相比均升高(P均〈0.001)。贝伐单抗在体外可浓度依赖性地抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖,其IC50为(8.89±0.27)mg/L。贝伐单抗、顺铂可联合诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡(P〈0.001);贝伐单抗联合顺铂处理组与单独药物处理组相比,可减弱磷酸化AKT和MMP-9蛋白的表达,增强促凋亡蛋白Bad的表达。结论:VEGF、MMP-9在卵巢癌组织中呈共同高表达状态;贝伐单抗联合顺铂通过对VEGF下游信号通路的调控以及MMP-9蛋白的影响,发挥协同抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 卵巢癌 血管内皮生长因子 基质金属蛋白酶-9 贝伐单抗 顺铂 SKOV3细胞
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miR-130a靶向调节SMAD4基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖和侵袭的影响 被引量:2
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作者 马向薇 曹东华 仲美琦 《解剖科学进展》 2018年第2期118-121,共4页
目的 探讨miR-130a对卵巢癌SKOV3细胞增殖及侵袭能力的影响。方法 将卵巢癌SKOV3细胞分为miR-130a抑制剂组、miR-130a模拟物组和对照组,分别将miR-130a抑制剂或miR-130a模拟物转染至miR-130a抑制剂组或miR-130a模拟物组细胞,对照组细胞... 目的 探讨miR-130a对卵巢癌SKOV3细胞增殖及侵袭能力的影响。方法 将卵巢癌SKOV3细胞分为miR-130a抑制剂组、miR-130a模拟物组和对照组,分别将miR-130a抑制剂或miR-130a模拟物转染至miR-130a抑制剂组或miR-130a模拟物组细胞,对照组细胞转染无关序列,Real-time PCR法检测各组细胞miR-130a表达水平,分别用MTT方法与Transwell细胞侵袭实验检测转染后各组SKOV3细胞的增殖与侵袭能力变化。Real-time PCR与Western blot实验分别检测各组细胞SMAD4 mRNA和蛋白表达水平。结果 转染miR-130a模拟物后,SKOV3细胞miR-130a的表达水平显著升高,SKOV3细胞的增殖与侵袭能力显著降低,SMAD4 mRNA及蛋白的表达水平显著降低(P&lt;0.01);转染miR-130a抑制剂后,SKOV3细胞miR-130a的表达水平显著降低,SKOV3细胞的增殖与侵袭能力显著升高,SMAD4 mRNA及蛋白的表达水平显著升高(P&lt;0.01)。结论 miR-130a抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖和侵袭可能与下调SMAD4的表达相关。 展开更多
关键词 miR-130a SMAD4 卵巢癌 SKOV3细胞 增殖 侵袭
3种转染试剂在SKOV3细胞中转运大质量质粒的效率比较 预览
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作者 朱国念 倪银芸 吴思思 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期27-29,33共4页
以pAdeasy-1-EGFP作为外源转入质粒,表达绿色荧光蛋白的融合基因,分别用3种转染试剂Lipofectamine 3000、DNA-In CRISPR和FuGENE HD转染SKOV3细胞,比较3种转染试剂在SKOV3细胞中转染大质量质粒的转染效率,以此选择合适的转染试剂解决携... 以pAdeasy-1-EGFP作为外源转入质粒,表达绿色荧光蛋白的融合基因,分别用3种转染试剂Lipofectamine 3000、DNA-In CRISPR和FuGENE HD转染SKOV3细胞,比较3种转染试剂在SKOV3细胞中转染大质量质粒的转染效率,以此选择合适的转染试剂解决携带大片段质粒转染效率低的问题。通过观察GFP绿色荧光评估转染效率,并用CCK8法测定3种转染试剂对细胞存活率的影响。实验结果显示Lipofectamine 3000转染效率大于50%,FuGENE HD转染效率约20%,DNA-In CRISPR的转染效率小于5%。Lipofectamine 3000转染SKOV3细胞24 h后细胞活性达到(97.5±2.52)%,FuGENE HD和DNA-In CRISPR转染试剂的细胞活性分别为(89.5±2.43)%和(95.5±3.48)%。对比分析表明,转染试剂Lipofectamine 3000转染效率较高且细胞毒性低,适用于SKOV3细胞进行大质量质粒的转染。 展开更多
关键词 LIPOFECTAMINE 3000 FuGENE HD DNA-In CRISPR pAdeasy-1-EGFP SKOV3细胞 大片段质粒
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抑制miRNA-301a表达对卵巢癌中SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭的影响 预览 被引量:1
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作者 曾小芳 熊艳杰 +4 位作者 乌日娜 傅彩虹 张春香 冉淑玲 赵俊暕 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第1期92-94,共3页
目的 探讨抑制miRNA-301a表达对卵巢癌中SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法 转染miRNA-301a抑制剂抑制SKOV3细胞中miRNA-301a表达,采用CCK8法、划痕实验和Transwell实验分别检测SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭;应用Western blot检测p-P... 目的 探讨抑制miRNA-301a表达对卵巢癌中SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭的影响。方法 转染miRNA-301a抑制剂抑制SKOV3细胞中miRNA-301a表达,采用CCK8法、划痕实验和Transwell实验分别检测SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭;应用Western blot检测p-PI3K、p-AKT和p-mTOR蛋白水平。结果 增殖实验、划痕实验、Transwell实验显示,抑制miRNA-301a表达能显著抑制SKOV3细胞的增殖、迁移及侵袭(P〈0.05),减少p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白水平(P〈0.05)。结论 抑制miRNA-301a表达能有效抑制SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,其可能通过影响PI3K/AKT/mTOR信号通路的激活发挥作用。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 miRNA-301a SKOV3细胞 PI3K/AKT/mTOR信号通路
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晶状体蛋白αB对卵巢癌细胞恶性行为的影响
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作者 张文君 刘斌 令狐华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期223-228,共6页
目的研究晶状体蛋白αB(αB-crystallin)在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞SKOV3增殖及迁移侵袭能力的影响。方法免疫组织化学法检测人正常卵巢组织和上皮性卵巢癌组织中αB-crystallin表达;针对蛋白αB-crystallin的基因(CRYAB基因... 目的研究晶状体蛋白αB(αB-crystallin)在卵巢癌组织中的表达及其对卵巢癌细胞SKOV3增殖及迁移侵袭能力的影响。方法免疫组织化学法检测人正常卵巢组织和上皮性卵巢癌组织中αB-crystallin表达;针对蛋白αB-crystallin的基因(CRYAB基因)设计合成靶向小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)重组慢病毒,并感染人卵巢浆液性乳头状囊腺癌细胞株SKOV3;流式细胞仪、平板克隆、MTT检测细胞凋亡和增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达。结果αB-crystallin在卵巢癌组织中表达高于正常卵巢组织,在Ⅱ型卵巢癌组织中呈明显高表达(P<0.01),稳转CRYAB si RNA慢病毒后SKOV3细胞内αB-crystallin蛋白表达降低64%,其凋亡和增殖无明显改变,但SKOV3细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制(P<0.01),同时蛋白MMP-2和MMP-9表达下调(P<0.01)。结论αB-crystallin能够影响卵巢癌SKOV3细胞浸润转移,其在Ⅱ型卵巢癌组织中的高表达可能与其高侵袭潜能相关。 展开更多
关键词 卵巢癌 晶状体蛋白αB SKOV3细胞 细胞凋亡 细胞增殖 细胞迁移 肿瘤侵袭
白藜芦醇对人上皮性卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:4
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作者 李研 《中医学报》 CAS 2017年第2期166-170,共5页
目的:研究白藜芦醇抑制人上皮性卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡的作用及机制。方法:将人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞随机分为5组,即正常对照组、白藜芦醇高剂量组(40mg·L-1)、白藜芦醇中剂量组(20mg·L-1)、白藜芦醇低剂... 目的:研究白藜芦醇抑制人上皮性卵巢癌细胞增殖并促进其凋亡的作用及机制。方法:将人上皮性卵巢癌细胞株SKOV3细胞随机分为5组,即正常对照组、白藜芦醇高剂量组(40mg·L-1)、白藜芦醇中剂量组(20mg·L-1)、白藜芦醇低剂量组(10mg·L-1)和顺铂组(40mg·L-1)。干预48h后,通过光学显微镜观察各组细胞形态,MTT比色法检测各组细胞增值抑制率。通过流式细胞仪分析细胞周期的改变、流式细胞术检测细胞凋亡并计算细胞凋亡率,采用RTPCR法检测细胞Bcl2mRNA和BaxmRNA表达并计算Bax/Bcl2比值,Westernblot法检测细胞caspase3蛋白表达。结果:与正常对照组比较,白藜芦醇高、中剂量组细胞出现变圆、脱壁、细胞间接触松散等状态,细胞抑制作用明显、增殖抑制率显著升高(P〈0.01);白藜芦醇各剂量组细胞周期被阻滞于G2/M期,白藜芦醇高、中剂量组细胞凋亡率显著升高(P〈0.01),同时可明显下调Bcl2mRNA而上调BaxmRNA表达,显著提高Bax/Bcl2值(P〈0.05,P〈0.01),上调caspase3蛋白表达(P〈0.01)。结论:白藜芦醇能够通过抑制增殖并促进凋亡对人上皮性卵巢癌SKOV3细胞生长起到一定的抑制作用,其机制可能与白藜芦醇调节凋亡相关基因蛋白表达有关。 展开更多
关键词 人上皮性卵巢癌 SKOV3细胞 白藜芦醇 肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡 中药
Lgr5、β-catenin在卵巢上皮性癌组织中的表达及对SKOV3细胞增殖迁移的影响 预览 被引量:4
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作者 张展 朱海 +1 位作者 宋华 王金铭 《郑州大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2017年第2期138-142,共5页
目的:探讨G蛋白偶联受体家族Lgr5和β-catenin在卵巢上皮性癌中的表达及对SKOV3细胞增殖和迁移能力的影响。方法:收集卵巢正常、良性肿瘤及上皮性癌组织标本各30例,采用免疫组化法检测Lgr5和β-catenin蛋白的表达情况。用Lgr5 shRNA、... 目的:探讨G蛋白偶联受体家族Lgr5和β-catenin在卵巢上皮性癌中的表达及对SKOV3细胞增殖和迁移能力的影响。方法:收集卵巢正常、良性肿瘤及上皮性癌组织标本各30例,采用免疫组化法检测Lgr5和β-catenin蛋白的表达情况。用Lgr5 shRNA、NC shRNA转染卵巢癌SKOV3细胞,同时以未转染细胞作空白对照,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测3组细胞中lgr5、β-catenin蛋白和mRNA的表达水平,分别采用CCK-8和划痕实验检测3组细胞的增殖和迁移能力。结果:卵巢上皮性癌组织中Lgr5、β-catenin阳性表达率分别为63.3%(19/30)、83.3%(25/30),二者表达水平均较良性肿瘤、正常卵巢组织升高(P〈0.05),且两者表达呈正关联(rp=0.373,P=0.028)。与空白对照组、NC shRNA转染组比较,Lgr5 shRNA转染组SKOV3细胞中Lgr5、β-catenin蛋白和mRNA的表达均显著降低(P〈0.05),细胞的增殖能力和迁移能力显著降低(P〈0.05)。结论:Lgr5可能通过增强Wnt/β-catenin信号通路参与卵巢癌细胞增殖、迁移能力的调控。 展开更多
关键词 LGR5 WNT/Β-CATENIN信号通路 卵巢上皮性癌 细胞增殖 细胞迁移 SKOV3细胞
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