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痛风宁含药血清对尿酸盐诱导THP-1中NALP3炎性体相关蛋白及炎症因子表达的影响
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作者 苏友新 滕方舟 +7 位作者 蔡唐彦 郭洁梅 李保林 王建辉 朱亚菊 赖兴泉 黄露露 张艺强 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期323-329,共7页
目的通过检测痛风宁含药血清对尿酸盐(monosodium urate,MSU)诱导人单核细胞株THP-1(human monocytic cell line,THP-1)中NALP3炎性体相关蛋白与mRNA及上清液中IL-1β、PGE2表达的影响,探讨痛风宁对痛风性关节炎的抗炎机制。方法制备低... 目的通过检测痛风宁含药血清对尿酸盐(monosodium urate,MSU)诱导人单核细胞株THP-1(human monocytic cell line,THP-1)中NALP3炎性体相关蛋白与mRNA及上清液中IL-1β、PGE2表达的影响,探讨痛风宁对痛风性关节炎的抗炎机制。方法制备低、中、高剂量痛风宁含药血清。将THP-1随机分为空白组和MSU干预组,MSU干预组予200 mg/L MSU混悬液诱导12 h建立炎症细胞模型,模型鉴定成功后采用随机数字表法分为模型组及低、中、高剂量痛风宁含药血清组(以下简称低、中、高剂量痛风宁组)、阳性对照组,分别予10%空白血清,10%低、中、高剂量痛风宁含药血清,10%空白血清+Caspase-1抑制剂干预,无MSU干预的空白组予10%空白血清干预。24 h后,离心收集各组THP-1及细胞上清液。采用ELISA检测各组细胞上清液中IL-1β、PGE2含量,Western Blot、RT-qPCR分别检测各组THP-1中NALP3、Caspase-1、ASC蛋白及mRNA表达。结果与空白组比较,模型组NALP3、Caspase-1、ASC蛋白与mRNA表达及IL-1β、PGE2含量均升高(P<0.01);各剂量痛风宁组所有指标均低于模型组及阳性对照组(P<0.01),同时低、高剂量痛风宁组所有指标水平均高于中剂量痛风宁组(P<0.05,P<0.01);阳性对照组Caspase-1蛋白表达及IL-1β、PGE2含量低于模型组(P<0.01),Caspase-1 mRNA、NALP3、ASC蛋白及mRNA表达与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。结论痛风宁对AGA的抗炎机制可能与抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达,减少炎症因子IL-1β、PGE2的产生有关。 展开更多
关键词 痛风宁含药血清 尿酸盐 THP-1细胞株 NALP3炎性体 炎症因子
三氧化二砷对白血病细胞EVI-1基因作用的研究 被引量:1
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作者 周凌云 陈芳源 +3 位作者 沈莉菁 万海霞 钟济华 蔡佳翌 《诊断学理论与实践》 2014年第1期54-60,共7页
目的:探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As203)对白血病细胞中EVI.1基因的作用。方法:采用1μmol/L的As2O3处理1例高表达EVI.1基因的急性单核细胞白血病患者的原代细胞,并用反转录聚合酶链反应(reveYsetranscription-polyITIer... 目的:探讨三氧化二砷(arsenictrioxide,As203)对白血病细胞中EVI.1基因的作用。方法:采用1μmol/L的As2O3处理1例高表达EVI.1基因的急性单核细胞白血病患者的原代细胞,并用反转录聚合酶链反应(reveYsetranscription-polyITIerasechajnreaction.RT-PCR)检测细胞的EVI-1mRNA表达率;同时采用RT—PCR检测人白血病细胞株K562、HL-60、U937和THP-1中EVI-1mRNA基因的相对表达量。选取EVI-1mRNA表达量最高的THP-1细胞株作为研究对象.经多位点PCR测序确认其包含EVI-1基因全长片段后,分别以1、3、5μmol/L的As2O3处理THP-1细胞株。观察细胞形态变化,CCK8检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR检测EVI-1mRNA表达率,蛋白质印迹法检测细胞内EVI-1蛋白的表达情况。结果:As2O3能下调原代细胞中EVI-1mRNA,抑制THP-1细胞株增殖、诱导其凋亡,且呈剂量、时间依赖性;As2O3能下调THP-1细胞株EVI-1mRNA、EVI-1蛋白的表达。结论:As2O3通过抑制白血病细胞EVI-1mRNA、EVI-1蛋白的表达,从而促进其凋亡。 展开更多
关键词 三氧化二砷 EVI-1基因 凋亡 THP-1细胞株
雷公藤内酯醇抗单核细胞白血病细胞株THP-1的实验研究 预览 被引量:1
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作者 袁国林 徐珺 +1 位作者 田小龙 黄莹 《临床血液学杂志》 2009年第5期495-496,共2页
目的:探讨雷公藤内酯醇对人类单核细胞白血病细胞株THP-1增殖和凋亡的影响。方法:运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术(FCM)等检测雷公藤内酯醇对THP-1细胞株增殖和凋亡的影响。结果:雷公藤内酯醇能明显抑制THP-1细胞的增殖... 目的:探讨雷公藤内酯醇对人类单核细胞白血病细胞株THP-1增殖和凋亡的影响。方法:运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术(FCM)等检测雷公藤内酯醇对THP-1细胞株增殖和凋亡的影响。结果:雷公藤内酯醇能明显抑制THP-1细胞的增殖,呈时间与剂量依赖性,作用48h时其半数抑制浓度IC50为18nmol/L,且经雷公藤内酯醇处理后THP-1细胞G1/S期所占的百分比较对照组上升(P〈0.05)。雷公藤内酯醇作用后48h的变化与THP-1细胞凋亡率具有相关性,r=0.97,P〈0.05,而作用24h,其无明显诱导凋亡的作用。结论:雷公藤内酯醇有明确的抗白血病细胞增殖的能力,干扰THP-1细胞周期,上调细胞G1/S期检测点,并具有促进细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 雷公藤 THP-1细胞株 细胞增殖 细胞凋亡
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CRP促进THP-1来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1的表达 预览 被引量:1
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作者 王悦 陈连凤 +2 位作者 王晋峰 方全 严晓伟 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第12期 1377-1380,共4页
目的探讨C反应蛋白(CRP)对单核细胞株(THP-1)来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)蛋白和mRNA的表达及相关信号转导通路的影响。方法用佛波醇脂诱导THP-1分化为巨噬细胞。用不同浓度CRP在体外干预,分别采用RT-... 目的探讨C反应蛋白(CRP)对单核细胞株(THP-1)来源的巨噬细胞血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)蛋白和mRNA的表达及相关信号转导通路的影响。方法用佛波醇脂诱导THP-1分化为巨噬细胞。用不同浓度CRP在体外干预,分别采用RT-PCR和细胞酶联免疫测定干预后巨噬细胞LOX-1抗原蛋白和mRNA的表达。同时观察当NF-κB、AP-1和MARK信号通路抑制剂存在时,CRP对LOX-1抗原和mRNA表达的影响。结果CRP促进巨噬细胞LOX-1蛋白和mRNA表达增加。NF-KB的抑制剂BAY11-7085能抑制CRP对LOX-1蛋白和mRNA表达的诱导作用。结论CRP能在转录及转录后水平诱导THP-1来源的巨噬细胞表达LOX-1,这种调节作用可能是通过NF-κB信号传导通路实现的。 展开更多
关键词 CRP 巨噬细胞 THP-1细胞株 NF—κB
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FLT3靶向短发夹状干扰RNA体外转录合成及作用 预览 被引量:1
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作者 卢洁 盛光耀 +6 位作者 邹湘 方营旗 赵晓明 徐学聚 白松婷 许培荣 王建人 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期 839-844,共6页
FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)是一种酪氨酸激酶受体,在大多数急性髓系白血病(AML)患者中持续激活,与患者预后差密切相关。为探讨3种FLT3靶向短发夹状干扰RNA(shRNA)对急性髓系白血病细胞株THP-1的沉默效应,设计和体外转录合成3个FLT3靶... FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)是一种酪氨酸激酶受体,在大多数急性髓系白血病(AML)患者中持续激活,与患者预后差密切相关。为探讨3种FLT3靶向短发夹状干扰RNA(shRNA)对急性髓系白血病细胞株THP-1的沉默效应,设计和体外转录合成3个FLT3靶向shRNA(shRNA1、shRNA2、shRNA3),体外转染THP-1细胞;以RT-PCR法检测FLT3mRNA水平表达,用流式细胞术、免疫荧光测定法检测FLT3蛋白的表达。结果显示:shRNA1、shRNA3可显著下调FLT3mRNA的表达,其中shRNA1的抑制作用较强。25nmol/LshRNA1转染48小时对FLT3mRNA的抑制率是(72.95±2.07)%,作用可达72小时。5nmol/L及以上浓度的shRNA1对FLT3mRNA表达有下调作用,作用存在量-效关系。15nmol/LshRNA1的抑制率是(67.53±0.66)%。FLT3蛋白位于细胞膜上,shRNA1对其有较强的抑制作用,转染72小时蛋白抑制率达(79.67±0.66)%。结论:FLT3-shRNA1具有较好的FLT3基因靶向抑制作用,可作为进一步研究该基因作用机制及靶向治疗可能性的工具。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 FLT3 FLT3-shRNA RNA干扰 THP-1细胞株
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西立伐他汀对THP-1细胞CD40和基质金属蛋白酶9表达的影响 预览 被引量:6
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作者 李江 赵水平 +2 位作者 彭道泉 李全忠 聂赛 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2003年第6期 533-536,共4页
通过观察他汀类药物对单核细胞CD40和基质金属蛋白酶9的表达是否存在抑制作用,初步探讨他汀类药物可能的非调脂的抗动脉粥样硬化机制.将培养的THP-1细胞中加入不同浓度的西立伐他汀,运用RT-PCR法检测CD40及基质金属蛋白酶9 mRNA,酶联免... 通过观察他汀类药物对单核细胞CD40和基质金属蛋白酶9的表达是否存在抑制作用,初步探讨他汀类药物可能的非调脂的抗动脉粥样硬化机制.将培养的THP-1细胞中加入不同浓度的西立伐他汀,运用RT-PCR法检测CD40及基质金属蛋白酶9 mRNA,酶联免疫吸附测定法测定培养基的基质金属蛋白酶9的浓度.结果发现,西立伐他汀抑制THP-1细胞CD40和基质金属蛋白酶9 mRNA的表达,并呈浓度依赖性.西立伐他汀在0.01 μmol/L时,CD40及基质金属蛋白酶9的表达无明显降低,但在1和10 μmol/L时,CD40 mRNA的表达下调55%、89%,基质金属蛋白酶9 mRNA的表达亦明显下降(0.453±0.13比0.073±0.01和0.009±0.001).培养基的基质金属蛋白酶9浓度在西立伐他汀1和10 μmol/L时分别从0.469±0.06降低至0.243±0.04和0.039±0.01(P<0.05).结果提示,西立伐他汀能抑制THP-1细胞CD40表达以及基质金属蛋白酶的表达和分泌,提示他汀类药物可减轻动脉粥样斑块炎症,防止斑块破裂,从而减少急性冠状动脉事件的发生. 展开更多
关键词 药理学 西立伐他汀 逆转录-聚合酶链反应 CD40 基质金属蛋白酶9 THP-1细胞株 动脉粥样硬化
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蓝桉油对单核细胞THP-1核因子-κB核转位活化的影响 预览 被引量:7
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作者 周建娅 唐法娣 +3 位作者 毛国根 邵杰 王砚 卞如濂 《浙江大学学报:医学版》 CAS CSCD 2003年第4期 315-318,326,共5页
目的:探讨蓝桉油对人单核细胞THP-1细胞株核因子-κB(NF-κB)核转位活化的影响.方法:蓝桉油(1、10、100 mg/L,30 min)预处理THP-1细胞,经脂多糖(LPS,1 mg/L,30 min)刺激后,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜,测定THP-... 目的:探讨蓝桉油对人单核细胞THP-1细胞株核因子-κB(NF-κB)核转位活化的影响.方法:蓝桉油(1、10、100 mg/L,30 min)预处理THP-1细胞,经脂多糖(LPS,1 mg/L,30 min)刺激后,采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光扫描共聚焦显微镜,测定THP-1细胞NF-κB p65亚基(NF-κB/p65)定位;Western-blot法分析细胞核内NF-κB/p65水平.结果:免疫荧光分析显示,正常细胞NF-κB/p65荧光标记主要分布于胞浆区,核区很少,LPS刺激后NF-κB/p65荧光标记浓集于核区,胞浆区少见;但经蓝桉油(100 mg/L)预处理后,LPS刺激的THP-1细胞NF-κB/p65荧光标记则主要位于胞浆区;Western-blot分析显示,在正常THP-1细胞核蛋白中有低水平的NF-κB/p65表达,经LPS刺激,核内NF-κB/p65表达明显增高;蓝桉油预处理后,可以抑制LPS诱导的核内NF-κB/p65高水平表达,且呈剂量依赖关系.结论:蓝桉油预处理阻止了LPS诱导的NF-κB/p65核转位,从而抑制了其活性功能的发挥.蓝桉油可抑制LPS刺激引起的NF-κB核转位活化. 展开更多
关键词 脂多糖类 核因子-ΚB 单核细胞 蓝桉油 显微镜检查 共焦 THP一1细胞株 WESTERN-BLOT法
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