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Bacillus thuringiensis P34与海泡石联合阻控蔬菜积累铅和改良土壤的作用 预览
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作者 贺卓 殷涂童 +2 位作者 葛占标 盛下放 何琳燕 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1240-1247,共8页
本研究为建立微生物-吸附剂联合钝化修复技术,以期为重金属污染农田的修复和蔬菜安全生产提供试验依据。在南京市栖霞区某矿区周边农田开展田间试验,探究了Bacillus thuringiensis P34及海泡石(S)对辣椒(苏椒五号)和茄子(苏琦一号)的生... 本研究为建立微生物-吸附剂联合钝化修复技术,以期为重金属污染农田的修复和蔬菜安全生产提供试验依据。在南京市栖霞区某矿区周边农田开展田间试验,探究了Bacillus thuringiensis P34及海泡石(S)对辣椒(苏椒五号)和茄子(苏琦一号)的生长、Pb积累和营养品质的影响,评估复配处理(P34+S)改良蔬菜根际土壤理化性质的作用。结果表明,与对照相比,海泡石可显著降低蔬菜果实Pb含量,菌株P34和海泡石复配可进一步显著降低辣椒和茄子果实Pb含量(58%和26%)。与对照相比,复配处理可显著使辣椒果实生物量增加1.5倍,改善蔬菜的营养品质,还能提高根际土壤pH、芽孢细菌数量、蔗糖酶和脲酶活性,显著降低根际土壤DTPA提取态Pb含量,并显著增加>1 mm团聚体的比例、显著减少<0.25 mm团聚体的比例。将B. thuringiensis P34与海泡石联合施用于Pb污染土壤,可显著阻控茄果类蔬菜积累Pb并提高其营养品质,显著改善根际土壤的理化性质,具有修复Pb污染土壤、保障蔬菜安全生产的潜力。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 海泡石 复配菌剂 蔬菜 田间试验
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苏云金芽胞杆菌Vip3Aa11定点突变对棉铃虫杀虫活性的影响 预览
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作者 刘明 孙海燕 郑树生 《黑龙江八一农垦大学学报》 2019年第1期21-27,共7页
为了寻找苏云金芽胞杆菌Vip3Aa11中对杀虫活性有重要影响的氨基酸,为杀虫机理研究和改造杀虫蛋白提供理论依据,通过序列比对,利用PCR方法对Vip3Aa11中7个氨基酸位点进行定点突变,对各突变蛋白杀棉铃虫的生物活性进行测定。结果表明,获得... 为了寻找苏云金芽胞杆菌Vip3Aa11中对杀虫活性有重要影响的氨基酸,为杀虫机理研究和改造杀虫蛋白提供理论依据,通过序列比对,利用PCR方法对Vip3Aa11中7个氨基酸位点进行定点突变,对各突变蛋白杀棉铃虫的生物活性进行测定。结果表明,获得的Vip3Aa11突变体I358V、I362M、K553I、I663T对棉铃虫的杀虫活性明显降低,而突变体I706N对棉铃虫的杀虫活性有所提高,各突变体对胰蛋白酶敏感性基本一致。说明第358位、362位、663位异亮氨酸及553位赖氨酸对Vip3Aa11杀棉铃虫活性有重要影响。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 Vip3Aa 定点突变 棉铃虫
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一株拮抗魔芋软腐病的苏云金芽胞杆菌研究 预览
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作者 李辉 李雷林 +4 位作者 高媛 杨宇纯 刘欢 薛艳红 刘士平 《三峡大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期108-112,共5页
魔芋软腐病严重影响着魔芋的生长,本实验室从魔芋软腐病出发,分离筛选出一株对其具有强拮抗作用的菌株16-4,并测定了其抑菌活性.经过形态观察、显微鉴定和分子鉴定确定该菌株是一株苏云金芽孢杆菌.拮抗实验结果表明16-4对魔芋软腐病具... 魔芋软腐病严重影响着魔芋的生长,本实验室从魔芋软腐病出发,分离筛选出一株对其具有强拮抗作用的菌株16-4,并测定了其抑菌活性.经过形态观察、显微鉴定和分子鉴定确定该菌株是一株苏云金芽孢杆菌.拮抗实验结果表明16-4对魔芋软腐病具有很强的拮抗能力,平板对峙法显示该菌株对魔芋软腐病的抑菌圈达到75.4mm,魔芋块的实验说明16-4菌悬液与病原液3∶1的比例加入能很好地控制魔芋软腐病的发作,模拟田间管理的植株实验,当16-4菌悬液是病原液的3倍时就可达到较理想的防治效果.所有实验结果为魔芋软腐病的生物防治奠定了良好的基础. 展开更多
关键词 魔芋软腐病 苏云金芽孢杆菌 内生细菌 生物防治
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苏云金芽孢杆菌毒性研究 预览
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作者 李依韦 尹萌萌 +1 位作者 《安徽农业科学》 CAS 2019年第20期159-161,共3页
以菜青虫为试验材料,用苏云金芽孢杆菌浸泡过的小白菜饲喂菜青虫,提取菜青虫体内的伴孢晶体,通过生物测定法对苏云金芽孢杆菌的毒性进行研究,并对出发菌株进行紫外诱变筛选高毒性菌株。结果表明,苏云金芽孢杆菌毒性与伴孢晶体含量有关,... 以菜青虫为试验材料,用苏云金芽孢杆菌浸泡过的小白菜饲喂菜青虫,提取菜青虫体内的伴孢晶体,通过生物测定法对苏云金芽孢杆菌的毒性进行研究,并对出发菌株进行紫外诱变筛选高毒性菌株。结果表明,苏云金芽孢杆菌毒性与伴孢晶体含量有关,伴孢晶体含量越多,毒力越高;紫外诱变16min时得到菌株B16,伴孢晶体含量比出发菌株提高8.2%,杀虫效率比出发菌株提高77%。该研究为苏云金芽孢杆菌生产高效率生物农药提供菌种。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 伴孢晶体 毒力测定 紫外诱变
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Cry1Ia和Cry2Ab融合蛋白的表达 预览
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作者 郭小琴 钱红梅 +3 位作者 郭俊佩 史宗勇 高建华 王兴春 《山西农业大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第3期101-105,共5页
[目的]苏云金芽孢杆菌表达的杀虫蛋白Cry1Ia和Cry2Ab对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性。为充分利用已有Cry蛋白,本文构建了两者的融合蛋白,并对融合蛋白的原核表达进行检测。[方法]本文将两个基因的编码基因,按照两种先后顺序拼... [目的]苏云金芽孢杆菌表达的杀虫蛋白Cry1Ia和Cry2Ab对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性。为充分利用已有Cry蛋白,本文构建了两者的融合蛋白,并对融合蛋白的原核表达进行检测。[方法]本文将两个基因的编码基因,按照两种先后顺序拼接起来,获得cry1Ia-cry2Ab融合基因和cry2Ab-cry1Ia融合基因。另外,将Cry1Ia蛋白N端第一个α-螺旋(73个氨基酸)的编码序列删除后,接入cry2Ab基因5'端,获得第三个融合基因cry1IaD73-cry2Ab。将3个基因分别插入pHT304载体,并由cry1Ac基因的启动子和终止子调控其在Bt细胞中表达。[结果]SDS-PAGE结果显示,Cry1Ia-Cry2Ab、Cry2Ab-Cry1Ia和Cry1IaD73-Cry2Ab三个融合蛋白均能够在Bt细胞中表达,其测定分子量与预期大小一致,分别约152kDa、152kDa和144kDa。蛋白印迹法分析发现,在表达过程中,三种融合蛋白均有一定比例的降解。另外,不同温度对融合蛋白的表达也有不同程度的影响。[结论]本研究构建了3种融合杀虫基因并在Bt细胞中成功表达,为进一步解析这类融合蛋白的杀虫活性和机理奠定了基础。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 cry1Ia CRY2AB 融合蛋白 蛋白表达
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苏云金杆菌G033A对萝卜黄曲条跳甲的室内活性及田间药效 预览
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作者 方国斌 王攀 +3 位作者 望勇 孙光忠 匡辉 司升云 《长江蔬菜》 2019年第20期73-75,共3页
针对萝卜黄曲条跳甲,采用浸叶法进行了32000IU/mg苏云金杆菌G033A可湿性粉剂的生物活性测定,并在湖北和云南两地开展了田间药效试验。试验结果表明,32000IU/mg苏云金杆菌G033A可湿性粉剂对黄曲条跳甲的LC50值为26.1451mg/L,LC90值为207.... 针对萝卜黄曲条跳甲,采用浸叶法进行了32000IU/mg苏云金杆菌G033A可湿性粉剂的生物活性测定,并在湖北和云南两地开展了田间药效试验。试验结果表明,32000IU/mg苏云金杆菌G033A可湿性粉剂对黄曲条跳甲的LC50值为26.1451mg/L,LC90值为207.2838mg/L,表现较好的田间防治效果;试验处理条件下,湖北与云南两地的最高防效分别为85.6%和89.2%,且对萝卜均表现安全。该农药田间推荐制剂用量为2250~3000g/hm^2,施药间隔期为7~10d。 展开更多
关键词 黄曲条跳甲 苏云金杆菌 生物活性 田间药效
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Cry1Ah蛋白标准物质候选物的制备与纯化
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作者 郭林 耿丽丽 +3 位作者 孙晓晓 王美玲 束长龙 张杰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1511-1519,共9页
随着转基因技术的迅猛发展,转基因产品的安全性受到了广泛关注。转基因检测用有证标准物质在确保转基因产品定性、定量检测结果的可比性和可追溯性方面发挥着重要作用。但转基因蛋白质标准物质的开发相对缓慢,其中一个难点是制备高纯度... 随着转基因技术的迅猛发展,转基因产品的安全性受到了广泛关注。转基因检测用有证标准物质在确保转基因产品定性、定量检测结果的可比性和可追溯性方面发挥着重要作用。但转基因蛋白质标准物质的开发相对缓慢,其中一个难点是制备高纯度的转基因蛋白质候选物。苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis cry1Ah1基因因其对亚洲玉米螟等鳞翅目害虫有很好的杀虫活性,已用于转基因抗虫作物的研制,并获得具有较好抗虫性状的转基因株系。为了研发Cry1Ah蛋白有证标准物质,亟需建立其制备及纯化体系。文中优化了利用Bt表达系统制备Cry1Ah蛋白的体系,利用离子交换色谱法和排阻色谱法逐级纯化的方法,获得了高纯度的Cry1Ah蛋白(排阻色谱纯度:99.6%)。生物活性测定结果表明,纯化的Cry1Ah蛋白与原毒素对小菜蛾Plutella xylostella的杀虫活性没有显著差异。最后使用Edman降解法和质谱法确定了Cry1Ah蛋白活化后的氨基酸序列。综上所述,获得的Cry1Ah纯蛋白可用于蛋白质标准物质的研制。 展开更多
关键词 转基因生物 有证标准物质 苏云金芽胞杆菌 Cry1Ah 蛋白
Cry1Ia蛋白的表达与纯化 预览
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作者 郭小琴 钱红梅 +4 位作者 郭星 高佳丽 张义茹 高建华 王兴春 《山西农业科学》 2019年第5期748-750,769共4页
苏云金芽孢杆菌表达的Cry1Ia蛋白对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性。为便于后期评价不同的Cry1Ia蛋白,建立了Cry1Ia蛋白的表达与纯化体系。将一个cry1Ia基因的编码基因接入pET28aDel表达载体,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)star菌... 苏云金芽孢杆菌表达的Cry1Ia蛋白对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性。为便于后期评价不同的Cry1Ia蛋白,建立了Cry1Ia蛋白的表达与纯化体系。将一个cry1Ia基因的编码基因接入pET28aDel表达载体,并将其转化大肠杆菌BL21(DE3)star菌株。在大肠杆菌中诱导Cry1Ia蛋白的表达,并与Bt中的表达产物进行比较。最后,利用Cry1Ia蛋白C端包含的组氨酸标签,对大肠杆菌表达的Cry1Ia蛋白进行纯化。结果显示,大肠杆菌中Cry1Ia蛋白随着表达时间的延长,产物积累显著,并且其表达量高于Bt菌株,因此,其更适宜生产完整的Cry1Ia蛋白。对大肠杆菌表达的Cry1Ia进行纯化,获得了理想的结果。研究构建了Cry1Ia蛋白的大肠杆菌表达体系,并成功对其进行纯化,可为进一步研究此类蛋白的杀虫活性和机制奠定基础。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 大肠杆菌 cry1Ia 蛋白表达 蛋白纯化
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晶胞粘连苏云金芽胞杆菌C15杀线虫毒力因子发掘与功能鉴定 预览
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作者 许园园 余芸 +3 位作者 范雅静 刘华林 孙明 王月莹 《生物资源》 CAS 2019年第4期314-323,共10页
苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)制剂作为一种高效的微生物杀虫剂,在植物病虫害防控领域有着广泛的应用。Bt制剂的主效成分为杀虫晶体和芽胞,其中,杀虫晶体的环境低持久性是Bt农药应用的重要限制因素之一。自然界中存在着一... 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)制剂作为一种高效的微生物杀虫剂,在植物病虫害防控领域有着广泛的应用。Bt制剂的主效成分为杀虫晶体和芽胞,其中,杀虫晶体的环境低持久性是Bt农药应用的重要限制因素之一。自然界中存在着一些Bt菌株,其产生的杀虫晶体位于芽胞外壁和芽胞衣之间,这种特殊的表型被称为晶胞粘连(spore-crystal association,SCA)表型。由于芽胞外壁对晶体的保护作用,SCA表型可以提升晶体抵抗不良环境因素的能力,是开发新型Bt生物囊杀虫剂的有效育种策略。本文选取对线虫具有强毒杀能力的SCA菌株C15作为研究对象。获得了C15菌株的完整基因组序列,包括一个5 637 049 bp的环状染色体和8个不同大小的环形质粒(240 314 bp到3 188 bp)。C15基因编码了5个杀虫蛋白(Cry蛋白)基因:cry21-99、cry21-67、cry21-66、cry21-46和cry-N。在Bt无晶体突变株BMB171中异源表达cry21-99基因,发现其表达产物形成菱形晶体,且对秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)和南方根结线虫(Meloidogyne incognita)均有毒杀活性。同时,还在全基因组范围内预测了Cry毒素以外的杀线虫毒力因子和次生代谢产物。此外,在C15基因组中预测了本团队已报道的苏云金芽胞杆菌幕虫亚种(B. thuringiensis serovar finitimus)菌株YBT-020 SCA表型决定因子的同源基因,缺失后突变体仍然保留稳定的SCA表型,说明C15菌株的SCA表型形成机制与YBT-020不同,该菌株代表了一种新的SCA表型形成机制。本研究为转基因作物防控线虫提供了新的遗传资源,也为研究SCA表型形成机制,开发新型高效Bt制剂提供了新线索。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 晶胞粘连 杀虫晶体 线虫防控
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苏云金芽孢杆菌对PAHs的降解研究 预览
10
作者 雒晓芳 陈丽华 +2 位作者 夏苗苗 许淑娟 熊梅 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期125-133,共9页
为研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在不同温度、pH、多环芳烃(PAHs)质量下对蒽芘芴的降解性能,采用单因素实验和响应面分析结合的方法,以 PAHs 为唯一碳源,活性炭为吸附载体,利用索氏提取法测定降解吸光度值。根据 Design E... 为研究苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在不同温度、pH、多环芳烃(PAHs)质量下对蒽芘芴的降解性能,采用单因素实验和响应面分析结合的方法,以 PAHs 为唯一碳源,活性炭为吸附载体,利用索氏提取法测定降解吸光度值。根据 Design Expert 8.0.6.1 软件中 Box-Behnken design 对实验结果进行分析。结果表明,温度与 pH 交互项对蒽、芘的降解影响显著,温度与 PAHs 质量交互对芴的降解影响显著。在优化实验中,蒽芘芴 3 物质在各自的优化条件下的降解率预期值分别为 92.13%、87.08%、83.56%,与实际试验值 91.60%、86.62%、82.95%相比,相对误差为±0.58%、±0.53%、±0.73%之间。3 个优化模型相对误差均在 2%以内,表明 3 个实验模型均可用于分析及预测苏云金芽孢杆菌对蒽芘芴的降解效果。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 降解性能 响应面分析
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苏云金芽孢杆菌几丁质酶Chi73的特性及生物活性研究 预览
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作者 刘佳 宋萍 +2 位作者 张杰 南宫自艳 王勤英 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期74-81,共8页
为了明确苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)几丁质酶Chi73的特性和功能,本研究从Bt kurstaki HD-73菌株中克隆了几丁质酶基因chi73,并对其进行了原核表达;随后对表达的重组几丁质酶Chi73的酶学特性、杀虫活性和抑菌活性开展... 为了明确苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, Bt)几丁质酶Chi73的特性和功能,本研究从Bt kurstaki HD-73菌株中克隆了几丁质酶基因chi73,并对其进行了原核表达;随后对表达的重组几丁质酶Chi73的酶学特性、杀虫活性和抑菌活性开展了研究。结果表明,在大肠杆菌中正确表达了大小为77 kDa的重组几丁质酶Chi73。以胶体几丁质为底物时,该酶的最适反应温度为60℃,最适pH为7.0,Zn2+和SDS对酶活力有明显的抑制作用。Chi73能显著抑制棉铃虫2龄幼虫的生长,其抑制率为94.37%。同时,对Bt Cry1Ac毒素有明显的增效作用,使Bt Cry1Ac毒素对棉铃虫2龄幼虫的LC50由27.39μg/mL降低至14.49μg/mL。此外,Chi73对白菜黑斑病菌、葡萄白腐病菌和棉花枯萎病菌均表现出明显的抑制作用。可见,Bt几丁质酶在杀虫增效和抑制真菌方面具有一定的应用潜力。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 几丁质酶 酶活性 杀虫活性 抑菌活性
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苏云金芽胞杆菌Vip3Aa11和Vip3Aa39片段置换对其杀虫活性的影响 预览
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作者 张悠然 史琛琛 +2 位作者 李帅 尹彦力 李海涛 《厦门大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期692-700,共9页
为了寻找苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)Vip3Aa11和Vip3Aa39蛋白与杀虫活性相关的关键氨基酸片段,通过基因水平上的分子操作对其蛋白氨基酸片段分别进行置换,成功获得8个置换体蛋白:11N-39C、39N-11C、11N-11M-39C、39N-39M-11... 为了寻找苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)Vip3Aa11和Vip3Aa39蛋白与杀虫活性相关的关键氨基酸片段,通过基因水平上的分子操作对其蛋白氨基酸片段分别进行置换,成功获得8个置换体蛋白:11N-39C、39N-11C、11N-11M-39C、39N-39M-11C、11N-39M-39C、39N-11M-11C、11N-39M-11C和39N-11M-39C.将vip3Aa11、vip3Aa39和置换体基因在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)菌株中诱导表达,得约88 ku的蛋白片段.对小菜蛾(Plutella xyllostella)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)分别进行室内生物活性测定,结果显示相较于Vip3Aa11和Vip3Aa39蛋白,除39N-11M-39C杀虫活性升高外,其他置换体蛋白对小菜蛾、甜菜夜蛾和棉铃虫的杀虫活性均呈现不同程度的降低,其中对棉铃虫的杀虫活性相对变化不明显.胰蛋白酶消化结果显示,Vip3Aa11和Vip3Aa39蛋白以及置换体蛋白11N-39C、39N-11C、11N-39M-11C、39N-11M-39C均可被消化成约62 ku的抗性核心多肽.上述置换体蛋白的构建为进一步研究Vips蛋白的杀虫机制提供了参考. 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 Vip3Aa11 Vip3Aa39 片段置换 杀虫活性
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四种生物农药对荔枝秋梢害虫的防效试验 预览
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作者 郭义 赵灿 +3 位作者 郑苑 王成兴 李君摘 李敦松 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期185-190,166共7页
为了明确生物农药对危害荔枝秋梢害虫的防效,采用喷雾方法测试了3种苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)类农药和1种球孢白僵菌Beauveria bassiana在不同浓度下对鳞翅目害虫的防治效果,以20%除虫脲稀释1500倍为药剂对照,清水为空... 为了明确生物农药对危害荔枝秋梢害虫的防效,采用喷雾方法测试了3种苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)类农药和1种球孢白僵菌Beauveria bassiana在不同浓度下对鳞翅目害虫的防治效果,以20%除虫脲稀释1500倍为药剂对照,清水为空白对照。结果表明,生物农药中Bt B稀释2000倍或1500倍和Bt C稀释1000倍时的防效较好,3 d时虫口减退率分别为77.98%、69.45%、59.32%,均显著高于药剂对照组(50.58%);尽管7 d时的虫口减退率86.87%(Bt B2000)、78.67%(Bt B1500)、79.58%(Bt B1000)略低于药剂对照组的91.82%,但差异不显著。以上3种处理组老熟叶片被害指数均显著低于空白对照组,叶片危害率与空白对照组相比均未达到显著差异。相对于白僵菌处理组,Bt类生物药剂具有防效快且不易受外界环境干扰的优点。因此,建议采用Bt B和Bt C两种生物农药来替代除虫脲防治危害荔枝秋梢的鳞翅目害虫,同时要注意药剂的浓度和施药时机。 展开更多
关键词 生物农药 荔枝秋梢 苏云金芽胞杆菌 球孢白僵菌
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对葱黄寡毛跳甲高毒力Bt菌株的鉴定及效果评价 预览
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作者 宋健 曹伟平 +1 位作者 张晓 杜立新 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期197-202,共6页
本研究筛选到一株对葱黄寡毛跳甲具有较高杀虫活性的菌株DK49,利用菌株DK49 gyr B基因序列和pho R基因序列分别在Gen Bank中进行同源性比较,两种基因序列均与苏云金芽胞杆菌的相应基因序列同源性最高,达到99%;同时分别构建系统发育树,... 本研究筛选到一株对葱黄寡毛跳甲具有较高杀虫活性的菌株DK49,利用菌株DK49 gyr B基因序列和pho R基因序列分别在Gen Bank中进行同源性比较,两种基因序列均与苏云金芽胞杆菌的相应基因序列同源性最高,达到99%;同时分别构建系统发育树,发现菌株DK49均与苏云金芽胞杆菌聚合在一起,说明菌株DK49属于苏云金芽胞杆菌。Biolog表型分析结果显示菌株DK49可有效利用14种碳源,对二甲胺四环素等10种化学物质敏感,对利福霉素等11种化学物质不敏感。通过室内生物活性评价,明确菌株DK49对葱黄寡毛跳甲成虫3 d的LC50为0.8161×107 cfu/mL。田间小区结果显示,菌株DK49在1×107 cfu/mL浓度下,连续施药3次后对葱黄寡毛跳甲的虫口减退率达到92.31%,防治效果达到96.81%。可见,菌株DK49能有效地控制葱黄寡毛跳甲的发生为害,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 葱黄寡毛跳甲 苏云金芽胞杆菌 分子鉴定 活性评价
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Bt蛋白对杨扇舟蛾连续世代存活与发育的影响 预览
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作者 王留成 刘洁 +4 位作者 高佳敏 孟丹阳 姚彤 孙天骅 高宝嘉 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1021-1029,共9页
旨在探讨杨扇舟蛾(Clostera anachoreta)在BtCry1Ac杀虫蛋白处理后耐药性的产生及形成规律。以转基因‘741’杨高抗品系‘Pb29’叶片及浸泡不同梯度Cry1Ac杀虫蛋白原毒素的‘741’杨树叶片对杨扇舟蛾存活和生长发育进行室内生测,分析3... 旨在探讨杨扇舟蛾(Clostera anachoreta)在BtCry1Ac杀虫蛋白处理后耐药性的产生及形成规律。以转基因‘741’杨高抗品系‘Pb29’叶片及浸泡不同梯度Cry1Ac杀虫蛋白原毒素的‘741’杨树叶片对杨扇舟蛾存活和生长发育进行室内生测,分析3代幼虫存活与发育趋势。结果表明:(1)高质量浓度Bt对低龄幼虫有着较强的毒杀作用,且致死效果随着代数延长没有明显减弱;幼虫对低质量浓度Bt及转基因Pb29杨耐受性提高,死亡速度减慢,校正死亡率降低。(2)幼虫取食Bt叶片后发育受到抑制,第1代和第2代历期较对照组明显延长,停止胁迫后对老龄幼虫龄期影响不明显。(3)Bt能显著降低蛹质量,但随着代数延长而逐渐回升,且亚致死剂量增幅最高。随着杨扇舟蛾的世代延续,Cry1Ac蛋白对其致死效果和抑制发育能力逐渐降低,存在杨扇舟蛾世代种群对转Bt植物耐受性累积发展的风险。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 杨扇舟蛾 存活率 发育历期 连续世代
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传统发酵食品臭鳜鱼中分离的苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis29.118)的毒理学评价 预览
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作者 杨培周 朱星星 +3 位作者 操丽丽 郑志 程杰顺 姜绍通 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期186-193,共8页
参与臭鳜鱼特色风味物质形成的微生物菌群源自环境,该微生物菌群的安全性正引起消费者和社会的关注。苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis29.118)是从臭鳜鱼发酵菌群中分离的一种主要微生物,但其毒性仍不清楚。通过急性经口毒性、遗... 参与臭鳜鱼特色风味物质形成的微生物菌群源自环境,该微生物菌群的安全性正引起消费者和社会的关注。苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis29.118)是从臭鳜鱼发酵菌群中分离的一种主要微生物,但其毒性仍不清楚。通过急性经口毒性、遗传毒性实验、30d喂养以及结肠显微观察评估其毒性。结果表明:小鼠口服半数致死量大于4000mg/kgmb,剂量2000mg/kgmb未引起急性毒性症状,苏云金芽孢杆菌29.118对小鼠没有明显的遗传毒性症状;30日粮后小鼠生长良好;7项血清指标和3项肝指标均无显著差异(P>0.05);结肠和肝脏组织没有表现出明显的病理症状。实验采用的苏云金芽孢杆菌29.118的剂量远高于现实存在的剂量,因此,菌株苏云金芽孢杆菌29.118在毒理学上是安全的。 展开更多
关键词 臭鳜鱼 苏云金芽孢杆菌 毒性评估 安全评价 发酵
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苏云金芽胞杆菌XL6 BTXL6_11095基因对生物被膜相关表型的调控 预览
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作者 马胜龙 凡肖 +7 位作者 姚俊敏 吴华川 束长龙 商铭达 张韶芮 杨郑豪 关雄 黄天培 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期53-62,共10页
在细菌生物被膜(bacterial biofilm, BBF)状态下,细菌往往具有更强的抗紫外线能力、环境适应性和耐药性。本课题组在前期工作中通过转座子插入突变强生物被膜产生菌苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)XL6,筛选出了一个可能调控... 在细菌生物被膜(bacterial biofilm, BBF)状态下,细菌往往具有更强的抗紫外线能力、环境适应性和耐药性。本课题组在前期工作中通过转座子插入突变强生物被膜产生菌苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)XL6,筛选出了一个可能调控生物被膜的基因BTXL611095。本文以该基因为研究对象,通过生物信息学手段分析该基因功能,构建了BTXL611095基因敲除菌株,并对其生物被膜相关表型进行了分析。生物信息学分析结果表明BTXL611095基因的结构域为PAS-GGDEF-GGDEF-EAL。生物被膜相关表型分析表明,与野生菌株相比,基因敲除菌株的生长曲线基本不变,群游能力上升,生物被膜形成能力减弱、UV-B抗性降低。本研究通过对BTXL611095基因表型变化综合评估,从功能角度揭示此基因对Bt XL6生物被膜相关表型的影响,为进一步解析Bt XL6生物被膜调控网络和构建高抗UV的工程生物被膜奠定了基础。 展开更多
关键词 生物被膜 苏云金芽胞杆菌 基因敲除 生物信息学分析
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苏云金芽胞杆菌制剂及其与小卷蛾斯氏线虫对腰果重要害虫的作用效果 预览
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作者 张中润 高燕 +1 位作者 黄伟坚 黄海杰 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期530-534,共5页
室内测定了苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对腰果重要害虫腰果细蛾(Acrocercops syngramma)和腰果云翅斑螟(Nephopteryx sp.)幼虫的作用效果。研究表明,在500或1000倍浓度下,Bt对低龄(1~3龄)腰果细蛾幼虫的致死作用较强,致... 室内测定了苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)对腰果重要害虫腰果细蛾(Acrocercops syngramma)和腰果云翅斑螟(Nephopteryx sp.)幼虫的作用效果。研究表明,在500或1000倍浓度下,Bt对低龄(1~3龄)腰果细蛾幼虫的致死作用较强,致死率为70%~100%,但对高龄(4龄和5龄)腰果细蛾幼虫致死作用较低(20.0%~52.5%)。Bt对腰果云翅斑螟3龄幼虫的致死作用相对较慢,在500倍浓度下作用120 h后致死率为75%。2000倍Bt与200 IJs/皿小卷蛾斯氏线虫Steinernema carpocapsae All对腰果云翅斑螟联合作用48 h后表现为增效作用,致死率达90%。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 小卷蛾斯氏线虫 腰果云翅斑螟 腰果细蛾 致死率
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苏云金芽胞杆菌cry8Ea启动子区orf1片段缺失增强启动子活性 预览
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作者 崔婷婷 杜立新 +3 位作者 彭琦 张杰 高继国 宋福平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期30-36,共7页
本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,... 本文分别构建了cry8E基因上游的启动子(Porf18E)和其上游缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)融合lacZ基因的表达载体,通过β-半乳糖苷酶活性的分析,发现PΔorf18E的转录活性高于Porf18E。分别用PΔorf18E和Porf18E指导cry1Ac基因的表达,通过光学显微镜观察,发现两个启动子指导表达的Cry1Ac蛋白均可形成双锥形晶体;通过总蛋白定量分析发现,缺失orf1基因的启动子(PΔorf18E)指导的Cry1Ac蛋白表达量高于Porf18E启动子指导的Cry1Ac蛋白表达量;生物活性测定表明:PΔorf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾Plutella xylostella 具有杀虫活性,高于Porf18E指导的Cry1Ac晶体蛋白对小菜蛾的杀虫活性。本文获得的强活性的启动子PΔorf18E是目前已报道的转录活性最高的cry基因启动子,该启动子为Cry蛋白的表达和遗传工程菌株构建提供了重要元件。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 cry基因启动子 转录活性 Cry晶体蛋白 晶体蛋白表达
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茶小绿叶蝉转录组Bt潜在受体分析 预览
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作者 陈明峰 林桂芳 +6 位作者 蒋晓燕 王瑞 许瑾 刘文诚 Khadija BATOOL 关雄 张灵玲 《福建农林大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第1期1-5,共5页
Bt杀虫最重要的2个环节是原毒素在昆虫中肠的有效酶解和酶解后活性片段与中肠受体的特异性结合.在前期工作中已发现部分Bt毒素可被茶小绿叶蝉肠液有效酶解成相应活性片段.为进一步了解茶小绿叶蝉是否存在相应受体或受体是否能与毒素结合... Bt杀虫最重要的2个环节是原毒素在昆虫中肠的有效酶解和酶解后活性片段与中肠受体的特异性结合.在前期工作中已发现部分Bt毒素可被茶小绿叶蝉肠液有效酶解成相应活性片段.为进一步了解茶小绿叶蝉是否存在相应受体或受体是否能与毒素结合,从受体的角度展开研究.首先,分析前期获得的茶小绿叶蝉转录组数据,发现该虫存在大量ALP、APN和Cadherin潜在受体基因,筛选部分候选基因,通过RT-qPCR验证表达量差异,结果显示其与转录组数据一致;其次,通过表达分析数据中的FPKM值,筛选出这3类潜在受体基因中表达量高且在肠内外表达差异显著的基因,有8个ALP、7个APN、8个Cadherin;再次,通过构建NJ进化树对这23个候选基因种内同源性进行分析,为该虫的生物防治提供一定理论基础. 展开更多
关键词 苏云金杆菌 潜在受体 茶小绿叶蝉 转录组分析
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