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丝瓜籽油索氏提取工艺的优化及理化特性研究 预览
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作者 陈晖 江苗 刘雪锋 《粮食与油脂》 北大核心 2019年第1期43-45,共3页
采取索氏抽提法提取丝瓜籽油,考察丝瓜籽粉碎粒度、提取时间及含水量对出油率的影响。测定丝瓜籽油的理化常数,并通过气相色谱法(GC-MS)对脂肪酸组成进行分析。试验结果表明:以石油醚(60~90℃)为提取溶剂,在丝瓜籽粉碎粒度为0.425mm,含... 采取索氏抽提法提取丝瓜籽油,考察丝瓜籽粉碎粒度、提取时间及含水量对出油率的影响。测定丝瓜籽油的理化常数,并通过气相色谱法(GC-MS)对脂肪酸组成进行分析。试验结果表明:以石油醚(60~90℃)为提取溶剂,在丝瓜籽粉碎粒度为0.425mm,含水量为7%,提取温度85℃,提取时间6h的条件下,出油率为34.61%,且品质较优;丝瓜籽油脂中脂肪酸组成主要为棕搁酸、硬脂酸、油酸、亚油酸。 展开更多
关键词 丝瓜籽油 索氏提取 工艺优化 理化特性
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舌苔细菌PCR-DGGE分析条件的建立与优化
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作者 方玲 夏永军 +2 位作者 刘罡 艾连中 熊智强 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2019年第7期793-799,共7页
目的针对口腔舌苔细菌16S rDNA序列进行变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)适用序列的筛选及电泳条件的优化。方法以DGGE图谱的高分辨率为指标,选择舌苔细菌DGGE分离最适的16S rDNA高变区、电泳电压和电... 目的针对口腔舌苔细菌16S rDNA序列进行变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)适用序列的筛选及电泳条件的优化。方法以DGGE图谱的高分辨率为指标,选择舌苔细菌DGGE分离最适的16S rDNA高变区、电泳电压和电泳时间,并采用优化的条件分析健康青年人舌苔细菌群落的分布。结果舌苔细菌16S rDNA V3高变区引物序列能获得更加丰富清晰的DGGE条带;基于该区,当变性剂浓度为30%~60%、电泳温度60℃、电压60 V和电泳时间14 h时能得到分辨率最佳的DGGE图谱。运用此优化条件对12个样本舌苔细菌群落的分析表明,舌苔微生物主要由厚壁菌门、梭杆菌门、拟杆菌门和变形菌门等组成。优化后的DGGE技术对舌苔细菌多样性的分析具有准确性、灵敏性和可重复性。结论DGGE图谱显示,不同分析条件对图谱类型和细菌多样性指数均有所差异。利用优化的DGGE条件能有效分离舌苔细菌16S rDNA V3区序列,为口腔微生物群落结构分析提供可靠的技术支持,也为其他不同生态细菌的多样性分析提供参考。 展开更多
关键词 PCR-DGGE 舌苔细菌 16S RDNA 条件优化
平菇高丝氨酸乙酰基转移酶基因的克隆及异源表达优化 预览
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作者 左泽红 魏韬 +2 位作者 郭丽琼 林俊芳 张中浩 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第13期64-70,77共8页
目的:为进一步提高酶法合成蛋氨酸的产量,从平菇中克隆获得蛋氨酸酶法合成的备选基因。方法:提取平菇菌丝球总RNA作为模板,通过反转录PCR获得高丝氨酸乙酰基转移酶基因(homoserine acetyltransferase gene,hta),利用酶切连接法构建含ht... 目的:为进一步提高酶法合成蛋氨酸的产量,从平菇中克隆获得蛋氨酸酶法合成的备选基因。方法:提取平菇菌丝球总RNA作为模板,通过反转录PCR获得高丝氨酸乙酰基转移酶基因(homoserine acetyltransferase gene,hta),利用酶切连接法构建含hta基因的表达载体pET32a-hta,转化至大肠杆菌BL21诱导表达并对诱导条件进行优化,同时,将表达载体pET32a-hta和pET22b-hta分别转入大肠杆菌工程菌Rosetta、Origami B和Rosetta gami plysS,探究该酶在不同载体及宿主组合中的表达情况。结果:经ExPAS-ProtParamtool、PSIPRED、SWISS-MODEL等软件分析表明,hta基因编码的多肽由445个氨基酸组成,等电点为5.93,二级结构主要有螺旋、无规则卷曲和延伸链。SDS-PAGE分析表明,IPTG终浓度为0.2mmol/L,诱导温度为25℃,诱导时间为16h时,工程菌BL21/pET32a-hta的可溶性高丝氨酸乙酰基转移酶(HTA)表达量最高。HPLC结果表明,当表达载体为pET32a-hta,表达宿主为Rosetta时,工程菌Rosetta/pET32a-hta诱导表达的HTA比活力最高为2.2mU/mg。结论:经诱导条件和表达系统优化后,HTA的表达量提高且比活力增强,为进一步大规模生产蛋氨酸打下基础。 展开更多
关键词 高丝氨酸乙酰基转移酶 基因克隆 原核表达 表达优化
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气相色谱-质谱法/同位素内标法测定白酒中16种邻苯二甲酸酯的优化研究 预览
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作者 苏占元 张宿义 +7 位作者 赵金松 张良 黄小军 杨晓军 许愿 吴卫宇 杨平 秦辉 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第8期173-177,共5页
参照国家标准GB 5009.271—2016《食品安全国家标准食品中邻苯二甲酸酯的测定》中的方法,对气相色谱及质谱条件进行优化,并利用与气相色谱仪匹配的自动液体进样器自动添加内标,对白酒中的16种邻苯二甲酸酯进行测定。结果表明,条件优化... 参照国家标准GB 5009.271—2016《食品安全国家标准食品中邻苯二甲酸酯的测定》中的方法,对气相色谱及质谱条件进行优化,并利用与气相色谱仪匹配的自动液体进样器自动添加内标,对白酒中的16种邻苯二甲酸酯进行测定。结果表明,条件优化后能使白酒中16种邻苯二甲酸酯得到较好的分离,在一定质量浓度范围内(0.02~0.20 mg/L),16种邻苯二甲酸酯具有良好的线性关系,R2≥0.998。邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)的定量检出限为6.6×10^-3 mg/kg,其余15种均小于3.0×10^-2 mg/kg,平均回收率为88.6%~106.1%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~4.3%。优化条件后,能够节省内标使用量,并且具有较高的准确度和灵敏度,能够满足上述国标对白酒中邻苯二甲酸酯检测的要求。 展开更多
关键词 气相色谱-质谱联用法 条件优化 白酒 邻苯二甲酸酯 测定
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一株高产内切纤维素酶贝莱斯芽孢杆菌的产酶条件优化及酶学性质分析 预览
5
作者 陈龙 吴兴利 +8 位作者 李立佳 魏炳栋 于维 闫晓刚 谷巍 徐海燕 刘臣 刘洪亮 张芳毓 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1353-1361,共9页
试验旨在对一株杜仲树皮内生菌贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的内切纤维素酶(CMCase)进行产酶条件优化及酶学性质分析,为探究贝莱斯芽孢杆菌CMCase的相关特性提供参考依据。采用单因子试验设计,分别优化pH、接种量、温度、时间... 试验旨在对一株杜仲树皮内生菌贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的内切纤维素酶(CMCase)进行产酶条件优化及酶学性质分析,为探究贝莱斯芽孢杆菌CMCase的相关特性提供参考依据。采用单因子试验设计,分别优化pH、接种量、温度、时间、碳源和氮源等发酵条件,并探讨温度、pH、底物专一性、金属离子及表面活性剂对CMCase的影响。结果表明,以玉米秸秆为碳源(30 g/L)、豆粕为氮源(30 g/L)、3%接菌量、pH 7.0的条件下37℃培养48 h,贝莱斯芽孢杆菌157的CMCase最高可达(5.14±0.18) U/mL。经CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157的最适酶反应温度为60℃,最适pH为5.0;温度稳定性试验发现,在40和50℃时,相对剩余酶活力均高于80%,随着温度的升高,酶活力逐渐降低,当温度高于55℃,相对剩余酶活力约为50%;pH稳定性试验发现,在pH 5.0~10.0之间耐受性良好,相对剩余酶活力均高于90%,随作用时间的延长,相对剩余酶活力变化不大。贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase属于典型内切型纤维素酶。Na^+、Mg^2+、Ca^2+可促进贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase酶活力,而Co^2+、Hg^2+、Fe^2+、Cu^2+和SDS抑制CMCase酶活力;表面活性剂Tween-80、Tween-20、Triton X-100对贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase无影响。本试验通过对贝莱斯芽孢杆菌157进行产酶条件优化及CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase具有产酶量高,耐受pH范围广的特点,在饲料添加剂、洗涤剂和造纸领域中具有一定的应用价值。 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌157 内切纤维素酶 产酶 条件优化 酶学性质
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山西老陈醋高产糖化酶霉菌的筛选、鉴定及产酶条件优化 预览
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作者 王佳丽 朗繁繁 +2 位作者 陈旭峰 王如福 许女 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第4期100-105,共6页
从山西老陈醋大曲中共分离出75株霉菌,对高产糖化酶霉菌进行筛选、鉴定及产酶条件优化。结果表明,筛选出1株优良黑曲霉(Aspergillus niger)186,在麸皮固态培养基中其糖化酶、蛋白酶和纤维素酶酶活分别为3963.79U/g、368.80U/g和4476.60... 从山西老陈醋大曲中共分离出75株霉菌,对高产糖化酶霉菌进行筛选、鉴定及产酶条件优化。结果表明,筛选出1株优良黑曲霉(Aspergillus niger)186,在麸皮固态培养基中其糖化酶、蛋白酶和纤维素酶酶活分别为3963.79U/g、368.80U/g和4476.60U/g。糖化酶基因聚合酶链反应(PCR)测序结果显示,该酶脱氧核糖核酸(DNA)序列编码区长1449bp,共编码482个氨基酸,预测酶的分子质量为51.75kDa,等电点为3.99。最佳产酶条件为:麸皮4%,硫酸铵0.5%,初始pH值为7.0,接种量8%,装液量100mL/250mL,转速145r/min,培养7d。在此优化条件下,黑曲霉186糖化酶活力可达892.98U/mL,是优化前的1.77倍。 展开更多
关键词 山西老陈醋 霉菌 筛选 鉴定 糖化酶 条件优化
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木薯MeAHL31基因克隆及其在原核细胞中的表达与优化
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作者 王元元 刘姣 +5 位作者 王硕 符少萍 李瑞梅 姚远 胡新文 郭建春 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1430-1437,共8页
AT-hook是一类含有AT-hook基序的核定位蛋白,被命名为AHL蛋白(AT-hook nuclear localized proteins),在植物生长发育、器官建成以及对激素信号和逆境胁迫响应中起重要作用。本研究通过RT-PCR克隆获得木薯MeAHL31基因,全长为1 189 bp,其... AT-hook是一类含有AT-hook基序的核定位蛋白,被命名为AHL蛋白(AT-hook nuclear localized proteins),在植物生长发育、器官建成以及对激素信号和逆境胁迫响应中起重要作用。本研究通过RT-PCR克隆获得木薯MeAHL31基因,全长为1 189 bp,其中开放阅读框(ORF)为1 014 bp,编码337个氨基酸,蛋白质分子量为35.69 k D,理论等电点为5.55,GRAVY为-0.74,是一个不稳定的亲水性蛋白,在128~264 aa区间存在一个AT-hook蛋白的保守结构域PPC domain,属于AT-hook蛋白家族。我们分别将全长MeAHL31(1~1 014)和MeAHL31 (370~742)基因片段构建到pET28a原核表达载体和含麦芽糖结合蛋白(maltose binding protein, MBP)标签的pET28a-MBP载体上,并转化至E. coli BL21 (DE3)中进行诱导表达和表达条件优化。结果表明,最佳诱导表达条件是OD600=0.6,IPTG浓度为1.0 mmol/L,15℃培养16 h;含MBP融合伴侣的pET28a-MBP载体更有利于Me AHL31蛋白的可溶性表达;在同种载体中预测可溶性高的MeAHL31(370~742)区段序列较MeAHL31 (1~1 014)全长基因的可溶性蛋白表达水平更高。本研究优化高效诱导表达条件获得MeAHL31融合蛋白,为探究MeAHL31基因的生物学功能提供理论依据。 展开更多
关键词 木薯 AT-HOOK 基因克隆 原核表达 条件优化
产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化 预览
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作者 周敏 冷凯良 +4 位作者 王致鹏 苗钧魁 刘小芳 高华 王海英 《青岛大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第1期37-45,共9页
为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibriosp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件... 为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibriosp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件和发酵培养基进行优化,获得发酵培养基的最适碳源为褐藻酸钠10g/L,最适氮源为(NH4)2SO410g/L,最适发酵条件为温度30℃,接种量1%,培养基初始pH6.0。在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman(PB)筛选出3个影响产酶活力的显著因素:(NH4)2SO4浓度、pH、接种量。通过响应面进一步分析优化,得到最佳的发酵培养基为褐藻酸钠10g/L,(NH4)2SO410.91g/L,NaCl10g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,CaCl20.2g/L,FeSO4·7H2O0.02g/L,最佳发酵条件为温度30℃,接种量1.1%,起始pH6.07。在最佳培养条件下,褐藻胶裂解酶活力可达19.09U/mL,比基础培养条件下提高了3.67倍。该菌经过产酶发酵条件的优化,酶活力得到较大幅度的提高,且其发酵产酶时间短,可为褐藻胶裂解酶的进一步研究应用提供参考。 展开更多
关键词 褐藻胶裂解酶 弧菌 鉴定 响应面分析 条件优化
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高效脱氨氮菌的分离纯化及降解条件的响应面法优化 预览
9
作者 宦臣臣 梁引库 闫志英 《中国沼气》 2018年第6期14-20,共7页
文章从堆肥和活性污泥中分离得到一株能高效降解氨氮的菌株DNF2。对分离菌株进行形态观察,革兰氏染色以及16SrRNA基因序列分析,经鉴定为粪产碱杆菌(Alcaligenesfaecalis subsp.Phenolicus)。在单因素实验的基础上应用响应面法对氨氮降... 文章从堆肥和活性污泥中分离得到一株能高效降解氨氮的菌株DNF2。对分离菌株进行形态观察,革兰氏染色以及16SrRNA基因序列分析,经鉴定为粪产碱杆菌(Alcaligenesfaecalis subsp.Phenolicus)。在单因素实验的基础上应用响应面法对氨氮降解菌株DNF2降解条件进行方法设计、优化并验证降解方案,以提高其降解氨氮的能力。得到优化后的降解条件如下:温度为34.3℃,pH值为7.63,接种微生物浓度为4.60%。此条件下菌株对氨氮浓度降解的理论值可达到92.54%,验证实验的平均浓度为92.05%,比优化之前提高了12.85%。根据优化后的最佳条件,将菌株DFN2接种到沼液废水中,96h可将416.23mg·L^-1氨氮降解至2.41mg·L^-1,降解效率为99.42%。 展开更多
关键词 粪产碱杆菌 响应面分析 培养条件优化 回归模型分析 氨氮降解
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多粘菌素E降解酶产生菌的筛选及其产酶条件的研究 预览 被引量:1
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作者 王刚 余志良 裘娟萍 《发酵科技通讯》 CAS 2018年第1期21-26,共6页
多粘菌素类抗生素在畜牧业中广泛使用,其药物残留给环境及人类健康带来了严重影响.从实验室保藏的若干蛋白酶产生菌中筛选得到高效降解多粘菌素的菌株DC-01,经形态观察和16S rRNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)... 多粘菌素类抗生素在畜牧业中广泛使用,其药物残留给环境及人类健康带来了严重影响.从实验室保藏的若干蛋白酶产生菌中筛选得到高效降解多粘菌素的菌株DC-01,经形态观察和16S rRNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).采用抑菌圈法测定菌株B.licheniformis DC-01在各种产酶条件下的发酵液对多粘菌素E的降解能力,结果表明:该菌株最佳产酶条件为温度37~44℃,初始pH值7.0~8.0,接种量8%,250mL烧瓶装液量50mL,发酵培养基中碳氮源组合为5.2%蔗糖和4.0%大豆蛋白胨.在最适发酵培养基中,37℃,200r/min摇床振荡培养24h产生的粗酶液37℃下对10 000U/mL多粘菌素E作用1h的降解率达92.1%,为多粘菌素E的残留处理提供了良好的菌种资源. 展开更多
关键词 多粘菌素降解菌 筛选鉴定 产酶条件优化 降解特性
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富硒酵母的分离鉴定及富硒条件的优化 预览 被引量:1
11
作者 蔡飞 高飞飞 +2 位作者 王斌 史学伟 肖婧 《中国酿造》 北大核心 2018年第6期103-108,共6页
富硒酵母生产发酵食品是补充硒元素的有效方法,以实验室保存的酵母菌为材料,通过选择培养基平板稀释法,分离纯化得到四株富硒酵母,经形态学和分子生物学鉴定,初步鉴定菌株Z4、Z5、Z7、Z9均为库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。通过... 富硒酵母生产发酵食品是补充硒元素的有效方法,以实验室保存的酵母菌为材料,通过选择培养基平板稀释法,分离纯化得到四株富硒酵母,经形态学和分子生物学鉴定,初步鉴定菌株Z4、Z5、Z7、Z9均为库德毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。通过对比四株菌的生长曲线及富硒能力,发现Z5菌株生长状况最好,选取接种量、碳源(葡萄糖)和氮源(蛋白胨)添加量作为单一因素,通过单因素试验和正交试验,探究各影响因素对菌株Z5富硒能力的影响。结果表明,Z5菌株的最佳富硒发酵条件为接种量10%,葡萄糖2.4%,蛋白胨1.8%。在此最佳条件下,菌株Z5生物量为9.63 g/L,总硒含量可达到862μg/g。 展开更多
关键词 富硒酵母 菌株鉴定 条件优化 菌体生物量 富硒能力
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灰树花液态深层发酵条件研究 预览
12
作者 李炳功 耿伟涛 +2 位作者 赵琰明 王金菊 王艳萍 《中国酿造》 北大核心 2018年第4期61-65,共5页
以菌丝体生物量和多糖含量为评价指标,通过单因素试验研究了灰树花的液态深层发酵条件,并考察不同发酵罐类型对灰树花生长的影响,在此基础上利用50 L发酵罐进行了扩大培养。结果表明,利用7L搅拌式发酵罐,灰树花的最优液体深层发酵条件... 以菌丝体生物量和多糖含量为评价指标,通过单因素试验研究了灰树花的液态深层发酵条件,并考察不同发酵罐类型对灰树花生长的影响,在此基础上利用50 L发酵罐进行了扩大培养。结果表明,利用7L搅拌式发酵罐,灰树花的最优液体深层发酵条件为培养温度23℃;,搅拌速度120 r/min,通气量3 L/min。在此优化条件下,菌丝体生物量和发酵液中多糖含量分别为11.659 g/L和3.658 g/L,且高于气升式发酵罐。在50 L搅拌式发酵罐中成功实现了扩大培养,其菌丝体生物量和多糖含量分别为13.238 g/L和3.178 g/L。 展开更多
关键词 灰树花 多糖 生物量 液态深层发酵 条件优化 扩大培养
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水体系中硫代氯甲酸苯酯的无碱合成 预览
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作者 孙莉萍 刘清玲 +1 位作者 吴珊 夏然 《化学研究与应用》 CSCD 北大核心 2018年第1期169-172,共4页
以 H 2O/CHCI3 为混合溶剂, 苯酚钠和CSC12在无碱条件下反应得到硫代氯甲酸苯酯, 收 率 8 5%.考察 了碱、溶剂、原料配比、反应时间、反应温度和反应规模等因素对产物收率的影响,得到了最佳的反应条件:( 苯酚钠):n(CSCl2)=1 : 1.... 以 H 2O/CHCI3 为混合溶剂, 苯酚钠和CSC12在无碱条件下反应得到硫代氯甲酸苯酯, 收 率 8 5%.考察 了碱、溶剂、原料配比、反应时间、反应温度和反应规模等因素对产物收率的影响,得到了最佳的反应条件:( 苯酚钠):n(CSCl2)=1 : 1.2 ,室温反应5 h, F( H 2O) : F (CHCl3) = 1 : 1.反应规模可扩大到500 g ,收率 81 %,具有潜在的应用价值. 展开更多
关键词 硫代氯甲酸苯酯 水体系 无碱合成 条件优化
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斯鲁菲亚海洋红酵母培养基优化 预览
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作者 张川 徐志进 +5 位作者 柳敏海 章霞 殷小龙 李伟业 傅荣兵 油九菊 《安徽农业科学》 CAS 2018年第28期1-3,17共4页
[目的]比较不同的碳源、氮源、无机盐对斯鲁菲亚海洋红酵母(Rhodotorula slooffiae)菌株产量的影响,确定培养基最优组分。[方法]通过葡萄糖、酵母浸粉、硫酸铵、磷酸二氢钾4因素3水平的正交试验,确定斯鲁菲亚海洋红酵母的最优... [目的]比较不同的碳源、氮源、无机盐对斯鲁菲亚海洋红酵母(Rhodotorula slooffiae)菌株产量的影响,确定培养基最优组分。[方法]通过葡萄糖、酵母浸粉、硫酸铵、磷酸二氢钾4因素3水平的正交试验,确定斯鲁菲亚海洋红酵母的最优培养基。[结果]斯鲁菲亚海洋红酵母的最优培养基各成分质量分数为:葡萄糖2%,酵母浸粉0.75%,硫酸铵0.5%,磷酸二氢钾1%。接种量6%,500mL三角锥形瓶,装液量100mL,培养温度30℃,经过48h培养,菌种量最大可达8.6×108CFU/mL,比优化前的发酵培养基产量(6.6×108CFU/mL)提升了30%。[结论]培养条件和工艺的优化可以显著提高海洋红酵母菌量和类胡萝卜素含量。 展开更多
关键词 海洋红酵母 发酵 培养条件优化
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栅藻作为生物指示剂的生物延迟发光研究 预览
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作者 张玉风 杨美娜 +2 位作者 庞靖祥 周宝宸 韩金祥 《生物医学工程研究》 2018年第1期116-120,共5页
通过测量不同实验条件下栅藻的延迟发光动力学行为,确定最优实验条件,为栅藻作为生物指示剂奠定基础。用YPMS-2生物光子测量仪检测栅藻延迟发光,将测得的数据用Statistica 10.0软件进行拟合、处理,得到表征栅藻性质的可靠参数斜率k。栅... 通过测量不同实验条件下栅藻的延迟发光动力学行为,确定最优实验条件,为栅藻作为生物指示剂奠定基础。用YPMS-2生物光子测量仪检测栅藻延迟发光,将测得的数据用Statistica 10.0软件进行拟合、处理,得到表征栅藻性质的可靠参数斜率k。栅藻的最佳使用浓度为2.5~3.5 xlO7个/m L,栅藻使用的最佳生长阶段为40~60d,加入不同中药煎煮液的栅藻斜率k值有较大差异,为研究中药药性提供了新的方向。 展开更多
关键词 栅藻 生物光子 延迟发光 生物指示剂 条件优化 中药
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烟管菌M-1菌株对油菜核盘菌的生防作用研究 预览
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作者 张红楠 张旭辉 +1 位作者 吴頔 李勇 《草业学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期78-89,共12页
以自主分离的烟管菌(Bjerkandera adusta)M-1为拮抗菌株,首次探究其对油莱核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的抑制作用,优化其液体培养条件以提升代谢液抑菌效果,为油菜菌核病的生物防治提供新思路。通过菌饼对峙抑菌试验和液... 以自主分离的烟管菌(Bjerkandera adusta)M-1为拮抗菌株,首次探究其对油莱核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)的抑制作用,优化其液体培养条件以提升代谢液抑菌效果,为油菜菌核病的生物防治提供新思路。通过菌饼对峙抑菌试验和液体培养液抑菌试验测定菌株M-1抑菌效果,并在显微镜下观察其对核盘菌的重寄生作用;以不同温度水浴处理该菌株代谢液探究其热稳定性。采用单因素试验和响应曲面法确定其最适液体培养条件。在此基础上,通过温室盆栽试验调查菌株M-1对油菜菌核病的防病效果。结果表明,菌饼对峙抑菌试验中菌株M-1对油莱核盘菌的抑菌率达到67.9%,显著高于多菌灵(22.7%)和甲基托布津(31.4%),而液体培养液抑菌试验中其无菌代谢液对油菜核盘菌的抑菌率为51.8%,分别是多菌灵处理和甲基托布津处理的1.3和2.2倍。显微观察发现该菌株对油莱核盘菌具有明显的拮抗作用,在拮抗区两者菌丝形态均发生变化,扫描电镜下则清晰地观察到菌株M-1菌丝直接穿插、刺透油菜核盘菌菌丝,使后者菌丝膨大、变形甚至裂解,表现出强烈的重寄生作用。经过80℃甚至100℃水浴后,菌株M-1代谢液抑菌率仍在35%以上,显示出一定的热稳定性。对该菌株液体培养条件优化后确定了最佳条件组合:C/N为7.5,pH为4.7,装瓶量为33%,时间为22d,转速为180r·min-1,温度为32℃,优化后其代谢液抑菌率能够提升到80.9%。温室盆栽试验调查发现其对油菜菌核病的防病效果达到71.4%,高于多菌灵处理(53.2%)。烟管菌M-1作为生防真菌对油菜核盘菌具有很好的抑制作用,条件优化后进一步提升了生防效果,在油菜菌核病的生物防治中具有广阔应用前景。 展开更多
关键词 烟管菌 核盘菌 生物防治 重寄生 条件优化
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气质联用法同时测定土壤中多环芳烃和有机氯 预览
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作者 张静 《中国环境管理干部学院学报》 CAS 2018年第2期86-90,共5页
建立了加速溶剂萃取和GC-MS同时检测土壤中多环芳烃和有机氯的方法,对提取条件和净化条件进行了优化。本方法可以实现多环芳烃和有机氯的完全分离,线性范围广,相关系数均大于0.999,检出限范围0.01~0.10mg/kg,低于标准方法的检出限,适用... 建立了加速溶剂萃取和GC-MS同时检测土壤中多环芳烃和有机氯的方法,对提取条件和净化条件进行了优化。本方法可以实现多环芳烃和有机氯的完全分离,线性范围广,相关系数均大于0.999,检出限范围0.01~0.10mg/kg,低于标准方法的检出限,适用于土壤中批量样品的快速、同时分析。 展开更多
关键词 多环芳烃 有机氯 条件优化 土壤
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木薯MeCREB基因的分子克隆及其在原核细胞中的表达和优化 被引量:2
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作者 王硕 刘姣 +5 位作者 符少萍 段瑞军 李瑞梅 姚远 胡新文 郭建春 《分子植物育种》 CSCD 北大核心 2018年第10期3168-3173,共6页
本研究以木薯为材料,通过RT-PCR克隆出了MeCREB基因,核酸序列分析表明,所克隆的基因与phytozome数据库收录的MeCREB基因(Manes.04G058300.1)序列基本一致。MeCREB基因全长968 bp,其中开放性阅读框(ORF)为747 bp,编码248个氨基酸,预... 本研究以木薯为材料,通过RT-PCR克隆出了MeCREB基因,核酸序列分析表明,所克隆的基因与phytozome数据库收录的MeCREB基因(Manes.04G058300.1)序列基本一致。MeCREB基因全长968 bp,其中开放性阅读框(ORF)为747 bp,编码248个氨基酸,预测得出MeCREB蛋白是一个不稳定的亲水性蛋白,编码蛋白质的分子量为26.26 kD,理论等电点为5.99,GRAVY为-0.667。构建MeCREB-pGEX-6p-1表达载体,在大肠杆菌中进行诱导表达,并对影响重组蛋白表达的4个主要因素(诱导温度,诱导起始菌量,IPTG浓度及诱导时间)进行优化,确定GST-MeCREB融合蛋白的最适表达条件。结果表明:重组工程菌生长至OD600=0.8时加入终浓度为0.1 mmol/L的IPTG,在28℃下诱导6 h,最适合GST-MeCREB融合蛋白的表达。本研究为高效诱导获得GST-MeCREB融合蛋白用于下游实验提供了最优方案,并为进一步研究MeCREB基因的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 木薯 MeCREB 基因克隆 原核表达 条件优化
1株野生海带内生真菌W-1的分离鉴定和发酵条件优化 预览
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作者 刘佳 田淑娟 +1 位作者 仇宏伟 王凤舞 《青岛农业大学学报:自然科学版》 2018年第2期131-137,共7页
以威海海域野生海带为原材料,对其内生真菌进行分离纯化,寻找具有抗老年痴呆的活性菌株。采用DTNB显色法测定分离菌株发酵液抑制乙酰胆碱酯酶活性及抗氧化活性,对筛选得到的活性最高的菌株进行形态学和18SrDNA分子生物学鉴定,并以发酵... 以威海海域野生海带为原材料,对其内生真菌进行分离纯化,寻找具有抗老年痴呆的活性菌株。采用DTNB显色法测定分离菌株发酵液抑制乙酰胆碱酯酶活性及抗氧化活性,对筛选得到的活性最高的菌株进行形态学和18SrDNA分子生物学鉴定,并以发酵液的乙酰胆碱酯酶抑制率为指标,采用单因素和正交试验对发酵条件进行优化。结果表明:从野生海带中分离获得8株内生真菌,活性最高的菌株为W-1,经形态学和分子生物学鉴定为链格孢菌属。该菌株的最佳发酵条件为:培养基为海水察氏培养基,接种量为培养基的15%,初始pH值6.0的条件下28℃发酵8d,装液量250mL/500mL锥形瓶,此条件下其次生代谢产物对乙酰胆碱酯酶(AChE)的抑制率最高为77.17%,比优化前提高了13.01%;对DPPH自由基清除率为66.12%,超氧阴离子清除率为35.88%,比优化前分别提高了21.42%和8.45%。 展开更多
关键词 野生海带 内生真菌 乙酰胆碱酯酶 条件优化 抗氧化活性
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产脂肪酶重组菌SRI-01随机突变及诱导表达条件的研究 预览
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作者 尹金凤 李泓全 吴欣森 《中国酿造》 北大核心 2018年第8期56-61,共6页
采用大引物全质粒法(MEGAWHOP)随机突变,快速有效地对研究室前期构建的一株脂肪酶重组菌株SRI-01进行分子改造,通过对易错聚合酶链反应(ep-PCR)获得的2300个突变株进行96孔板高通量筛选,得到一株优良突变株SRM08。通过单因素试验,优化... 采用大引物全质粒法(MEGAWHOP)随机突变,快速有效地对研究室前期构建的一株脂肪酶重组菌株SRI-01进行分子改造,通过对易错聚合酶链反应(ep-PCR)获得的2300个突变株进行96孔板高通量筛选,得到一株优良突变株SRM08。通过单因素试验,优化诱导前的菌体生物量、诱导剂异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度、CaCl2的浓度、诱导温度。通过比较3种不同破碎缓冲液浓度和缓冲液pH对脂肪酶活力的影响,选择最优的破碎缓冲液。确定突变株SRM08最佳诱导表达条件为菌液生物量OD600nm值为0.7,IPTG的浓度为0.1mmol/L,CaCl2浓度为4mmol/L,诱导温度为25℃,采用5mmol/L磷酸钠缓冲液为破碎缓冲液,pH值为7.0。在此优化条件下,脂肪酶活达到88508U/L,为原重组菌株SRI-01的2.84倍。 展开更多
关键词 产脂肪酶重组菌 随机突变 诱导表达 脂肪酶活力 条件优化
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