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暗黑赤眼蜂低温贮存技术研究 预览
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作者 丁瑞丰 阿克旦·吾外士 +5 位作者 朱晓华 董力辉 司天桃 古丽夏提 张小龙 朱晓玲 《中国农学通报》 2019年第3期139-145,共7页
旨在对暗黑赤眼蜂低温贮存技术进行研究,以期为规模化繁殖的暗黑赤眼蜂低温贮存提供依据。利用清水、0.5%盐水、1.0%盐水、1.5%盐水和直接冷藏等方式处理被暗黑赤眼蜂寄生的麦蛾卵,研究其低温贮藏技术。结果表明:与对照相比较,0.5%、1.0... 旨在对暗黑赤眼蜂低温贮存技术进行研究,以期为规模化繁殖的暗黑赤眼蜂低温贮存提供依据。利用清水、0.5%盐水、1.0%盐水、1.5%盐水和直接冷藏等方式处理被暗黑赤眼蜂寄生的麦蛾卵,研究其低温贮藏技术。结果表明:与对照相比较,0.5%、1.0%和1.5%盐水处理后能够显著提高暗黑赤眼蜂的羽化率、降低其羽化畸形率;45天以内,各浓度盐水处理的暗黑赤眼蜂单雌产卵量与对照之间差异不显著,表明在此时间内利用盐水处理可显著保持暗黑赤眼蜂的单雌产卵量;冷藏90天后,暗黑赤眼蜂雌雄比例开始增大,75天后,暗黑赤眼蜂的雌雄比例失调较为严重。研究表明:冷藏时间的增加不利于暗黑赤眼蜂各项指标的发育,但0.5%、1.0%和1.5%盐水处理后能在一定程度上减少负面影响,是羽化率、羽化畸形率、雌虫寿命、单雌产卵量和雌雄比例等指标的有利因素。 展开更多
关键词 暗黑赤眼蜂 盐水处理 低温贮藏
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现代月季6个品种花粉超低温保存研究 预览
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作者 李泽迪 杜莹 +4 位作者 姜雪茹 鲁月秀 任瑞芬 张逸璇 刘燕 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第6期1376-1382,共7页
【目的】为实现月季花粉长期保存,满足杂交育种和种质资源保存需要,本文以6个现代月季品种的花粉为试验材料,研究其超低温保存技术。【方法】用扫描电子显微镜观察比较6个品种花粉形态、干燥法测定花粉自然含水量、悬滴法检测花粉活力,... 【目的】为实现月季花粉长期保存,满足杂交育种和种质资源保存需要,本文以6个现代月季品种的花粉为试验材料,研究其超低温保存技术。【方法】用扫描电子显微镜观察比较6个品种花粉形态、干燥法测定花粉自然含水量、悬滴法检测花粉活力,筛选出适宜萌发培养液,在此基础上进行了液氮保存,并研究这些因素对超低温保存效果的影响。【结果】6个品种花粉悬滴培养的适宜萌发液为15%蔗糖+0.05%硼酸。不同品种新鲜花粉萌发率不同,春季采收的新鲜花粉萌发率为8.91%~27.07%,秋季为9.95%~24.32%,6个品种春季采集的花粉萌发率均高于秋季,但3个差异显著,3个差异不显著。不同品种新鲜花粉含水量不同,春季采收的花粉含水量为9.6%~11.9%;秋季为9.2%~11.5%,4个品种春、秋两季采收的花粉含水量没有显著差异,另外2个品种春季采收的花粉含水量分别显著高于或低于秋季花粉2.4%或1.6%,含水量变化值差异不大。超低温保存后花粉萌发率变化因品种和花粉采收季节而异,6个月季品种花粉经过液氮保存1个月后萌发率为10.36%~21.28%,为新鲜花粉的59.3%~133.9%。长球形的‘金凤凰’和‘希望’,超低温保存后花粉活力有所下降;而超长球形的‘金玛丽’、‘雨果’、‘伦特娜’和‘仙境’,超低温保存后萌发率基本保持稳定。花粉含水量与花粉超低温保存前后萌发率未显著相关。【结论】不同季节采收的自然成熟散粉的6个月季品种花粉均能实现超低温保存,秋季采收的花粉液氮保存后萌发率较新鲜花粉变化较小,但是春季采收的花粉萌发率更高,更适合超低温保存。超低温保存效果与品种、新鲜花粉萌发率、花粉形状和采收季节有关。 展开更多
关键词 现代月季品种 花粉 超低温保存 花粉形态
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驴精液冷冻保存技术研究进展 预览
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作者 郝志明 陆树林 +4 位作者 杨新军 陆彦名 王愿林 景兆国 沈鸿武 《中国草食动物科学》 CAS 2019年第2期48-51,共4页
驴的精液冷冻保存技术是在马的基础上逐渐发展起来的,特别在近十年来,有关研究明显增多,在诸多方面取得了积极的成果。文章主要以驴精液冷冻保存技术环节的发展为侧重点,就其研究成果进行了总结。
关键词 精液 冷冻保存
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绵羊瘤胃上皮细胞的体外分离培养、冻存及复苏方法
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作者 金鑫 张曼 +3 位作者 王云鹤 魏方 温婧怡 杨银凤 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期57-66,共10页
本研究旨在建立绵羊瘤胃上皮细胞(Ovine rumen epithelial cells,ORECs)的分离培养、冻存和复苏方法,为反刍动物瘤胃功能的研究和相关瘤胃疾病的发病机制研究提供功能性的细胞模型。以绵羊瘤胃为研究对象,采用胰蛋白酶连续消化法对瘤胃... 本研究旨在建立绵羊瘤胃上皮细胞(Ovine rumen epithelial cells,ORECs)的分离培养、冻存和复苏方法,为反刍动物瘤胃功能的研究和相关瘤胃疾病的发病机制研究提供功能性的细胞模型。以绵羊瘤胃为研究对象,采用胰蛋白酶连续消化法对瘤胃组织进行不同时间(40、30、20、10、10、8和5 min)的消化,并对每次消化后的瘤胃组织和消化液分别进行H.E染色分析和显微镜观察,以确定细胞开始收集及终止消化的时间,最后将收集的瘤胃上皮细胞进行原代培养。在传代培养时,运用差时消化法和差速贴壁法对ORECs进行纯化,并从细胞形态学、细胞生长曲线、角蛋白18(CK-18)免疫荧光染色和上皮细胞标志物E-钙黏蛋白和碱性磷酸酶基因表达等方面对ORECs进行鉴定。然后设置不同体积配方的冻存液,将传代细胞进行冻存,通过检测复苏后的细胞活力和24 h贴壁率确定最佳冻存液配方。结果表明:第4次消化后就基本消化到瘤胃组织的棘层,此时即可开始收集细胞;第7次消化完后瘤胃上皮的基底层细胞基本被消化掉,此时即可终止消化细胞。经纯化后传代的细胞呈现均一的"铺路石"形态,生长曲线明显呈"S"形,且经CK-18免疫荧光染色后鉴定为阳性,同时PCR检测到上皮细胞特异性标志蛋白E-钙黏蛋白和碱性磷酸酶均有表达。此外,ORECs经不同体积配方冻存液冻存复苏后发现,冻存液配方为VFBS∶VDMEM∶VDMSO=9∶0∶1时ORECs的细胞活力及贴壁率最高,且传代后的细胞生长状况良好。因此本试验成功建立了ORECs的体外分离培养、冻存和复苏方法。 展开更多
关键词 绵羊 瘤胃上皮细胞 原代培养 传代培养 冻存 复苏
Effect of butylated hydroxytoluene on quality of pre-frozen and frozen buffalo semen
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作者 Asmaa A.Mostafa Mohamed S.El-Belely +2 位作者 Sayed T.Ismail Reda I.El-Sheshtawy Mohamed I.Shahba 《亚太生殖杂志(英文版)》 2019年第1期20-24,共5页
Objective: To clarify the antioxidant effect of butylated hydroxytoulene (BHT) at different concentrations on cooled and post frozen semen diluted in tris-citrate-fructose egg yolk glycerol and lecithin -based extende... Objective: To clarify the antioxidant effect of butylated hydroxytoulene (BHT) at different concentrations on cooled and post frozen semen diluted in tris-citrate-fructose egg yolk glycerol and lecithin -based extenders. Methods: Forty ejaculates were harvested from four buffalo bulls by means of the artificial vagina. Ejaculated semen samples were diluted with each of the tris citrate-fructose egg yolk glycerol and lecithin-based extender diluents. The semen samples diluted with each of the two extenders were added to pre-warmed dried test tubes containing BHT (prepared in ethanol) to get concentrations at 0.5, 1.0, 1.5, 2.0, 2.5 and 3.0 mM/mL BHT. These ingredients were put at 37 ℃ for 5 min to allow the proper BHT spermatozoal permeation. The diluted semen samples were cooled to 5 ℃ and then frozen to -196 ℃ in 0.25 mL ministraws before dipping in liquid nitrogen pending its evaluation. Sperm motility, viability, morphology, intact acrosome and membrane integrity were tested. Visual motility was tested using a high power ordinary microscope (at 400 × ) with closed circuit television, and sperm concentration was tested using Neubauer haemocytometer and abnormality % using eosin-nigrosin stain. Spermatozoal membrane integrity was tested using the hypo-osmotic swelling test. The sperm with swollen twisting tail was normally intact. Sperm acrosomal integrity % was tested as mentioned by Watson. Results: Addition of BHT improved (P<0.01) progressive motility, viability, morphology and acrosome as well as plasma membrane integrities at 0.5-2.0 mM/mL depending upon types of used extenders and stages of pre-and post-freezing process. Higher levels of 2.5 and 3.0 mM/mL BHT had a deteriorating (P<0.01) result if compared to the control and all extenders assayed. Conclusions: BHT addition at lower concentration can improve pre-frozen and post-thawed buffalo sperm quality. 展开更多
关键词 Butylated hydroxytoulene LECITHIN Egg YOLK BUFFALO SEMEN CRYOPRESERVATION
猪精液超低温冷冻保存研究进展 预览
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作者 吴梦 刘雪芹 +4 位作者 刘子嘉 肖普英 丁玉春 刘作华 葛良鹏 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期35-40,共6页
猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,... 猪人工授精(AI)技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 精液 冷冻保存
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人耳软骨细胞冻存复苏后的体外成软骨能力及体内转归的研究 预览
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作者 于瑶 殷宗琦 +3 位作者 李丹 周广东 曹谊林 刘豫 《组织工程与重建外科》 2019年第3期137-141,共5页
目的以无支架软骨膜片为模型,研究冻存对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力的影响。方法将小耳畸形患者术中废弃的残耳软骨,以胶原酶消化、分离,得到原代软骨细胞。将软骨细胞扩增至第1代(P1)后,分为实验组及对照组... 目的以无支架软骨膜片为模型,研究冻存对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力的影响。方法将小耳畸形患者术中废弃的残耳软骨,以胶原酶消化、分离,得到原代软骨细胞。将软骨细胞扩增至第1代(P1)后,分为实验组及对照组。实验组(Exp)以含有FBS和DMSO的冻存液,经程控降温仪和液氮冻存1个月后复苏,高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨;对照组(Ctrl)不经冻存继续扩增至第3代(P3),高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨。通过光学显微镜、CCK-8、活/死细胞染色、HE和阿利新蓝染色等,检测细胞形态、活力、增殖能力及软骨特异基质(ECM)的表达能力。通过每组体外软骨膜片的湿重、体积及生化成分定量检测,确定软骨细胞的体外成软骨能力。将每组软骨膜片制成新生软骨颗粒(可注射软骨),注射至裸鼠皮下(n=5),8周后取材,行大体观察、HE染色和生化成分定量检测,比较每组软骨细胞的体内成软骨能力。结果两组细胞的形态、活力、增殖能力和软骨特异的糖胺聚糖(GAG)形成能力无明显差异。相比对照组,实验组体外再生软骨的湿重及总胶原表达升高;但体内软骨再生能力两组亦无明显差异。结论细胞冻存复苏对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力无明显影响。 展开更多
关键词 冻存复苏 人残耳软骨细胞 无支架软骨膜片 可注射软骨
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影响马精液冷冻保存效率的因素分析 预览
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作者 段洪云 +1 位作者 邓亮 韩国才 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期45-49,共5页
马精液冷冻保存技术对提高马的繁殖效率有重要意义,多种因素会对冷冻保存精液的精子造成损害。本文综述了精清、抗冻剂、微生物、过氧化作用、渗透压、冷冻和解冻等影响马精子冷冻保存的因素,旨在为提高马精液冷冻保存技术的效率、促进... 马精液冷冻保存技术对提高马的繁殖效率有重要意义,多种因素会对冷冻保存精液的精子造成损害。本文综述了精清、抗冻剂、微生物、过氧化作用、渗透压、冷冻和解冻等影响马精子冷冻保存的因素,旨在为提高马精液冷冻保存技术的效率、促进我国马产业更快发展提供理论依据。 展开更多
关键词 精子 冷冻保存 因素
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低温冻存对幽门螺杆菌阿莫西林耐药表型的影响分析
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作者 张艺瑶 何利华 +5 位作者 胡源 尤元海 孙路 韩秀瑞 宫雅楠 张建中 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第5期497-500,共4页
目的探讨低温冻存对耐阿莫西林(AMX)的幽门螺杆菌(Hp)阿莫西林耐药表型(AMXR)稳定性的影响。方法以国际标准菌株ATCC 43504及11株中国临床分离株作为出发菌株,经体外压力筛选传代50~60代后成功诱导AMXR,检测其最小抑菌浓度(MIC)。将获... 目的探讨低温冻存对耐阿莫西林(AMX)的幽门螺杆菌(Hp)阿莫西林耐药表型(AMXR)稳定性的影响。方法以国际标准菌株ATCC 43504及11株中国临床分离株作为出发菌株,经体外压力筛选传代50~60代后成功诱导AMXR,检测其最小抑菌浓度(MIC)。将获得的耐药克隆置-80℃冻存1~3个月后再复苏,比较冻存前后MIC的变化。药敏试验重复2~3次。结果共得到46个AMXR克隆(MIC≥0.5μg/ml)。经-80℃冻存后,其中19个(41.3%)克隆耐药水平显著下降,MIC变化最大者下降率在98%以上。这一变化在各地分离株具有普遍性,在不同耐药水平菌株之间具有差异性。结论AMXR耐药Hp经低温冻存后耐药性下降,且这一现象在高耐药菌株尤为明显。提示在临床上以冻存标本进行的Hp分离培养中,可能存在AMX耐药率和耐药水平的低估。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 阿莫西林 冻存 耐药
超低温保存下藓类植物孢子萌发率的变化:以6种藓类植物为例 预览
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作者 孙莉玮 高雪笛 +3 位作者 许丹尔 王书琴 杨卓筠 王健 《华东师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期138-143,154共7页
为了检验苔藓植物孢子超低温保存方法的适用性,该文对采自不同生境中的6种藓类孢子超低温保存前的干燥时间和低温预处理进行探索,并在最适处理条件下对其中5种藓类孢子进行不同时间梯度(1 d、15d、30 d、90 d和180 d)的超低温保存研究.... 为了检验苔藓植物孢子超低温保存方法的适用性,该文对采自不同生境中的6种藓类孢子超低温保存前的干燥时间和低温预处理进行探索,并在最适处理条件下对其中5种藓类孢子进行不同时间梯度(1 d、15d、30 d、90 d和180 d)的超低温保存研究.结果表明:①经过干燥和低温预处理后,6种藓类孢子的最高萌发率均维持在较高水平(87.25%~96.21%);②与低温预处理相比,干燥处理在孢子超低温保存中更为关键.孢子在只进行干燥处理情况下其最高平均萌发率为74.97%~96.21%,而只对其进行低温预处理时的最高平均萌发率变化较大,从21.73%到90.94%;③5种藓类孢子在液氮保存1d后的平均萌发率均最高(87.25%~96.21%),且随着保存时间的延长,所有藓类孢子的萌发率都有所下降,但仍维持在相对较高的水平(73.69%~86.60%);④葫芦藓、丝瓜藓和长蒴藓孢子在保存30d后萌发率分别为86.49%、86.60%和84.98%,卵蒴真藓和丛生真藓孢子在保存180d后萌发率仍可达到73.69%和84.17%.研究表明,藓类孢子非常适合于超低温保存,而且可能代表一种简单、稳定、高效的苔藓植物种质资源保存材料. 展开更多
关键词 苔藓植物 藓类 生境 孢子 超低温保存
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卵低温保存过程中透明带提早硬化的影响因素和调控机制
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作者 石晓卫 胡焕焕 +1 位作者 姬国杰 李明文 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期156-160,共5页
人卵低温保存是女性生育力保存和不育症治疗的重要辅助生殖技术,但其导致的透明带提早硬化使体外受精率显著降低,且其机制尚不明确。本文对透明带在卵低温保存过程中发生提早硬化的影响因素和调控机制进行了综述,有助于加强研究以提高... 人卵低温保存是女性生育力保存和不育症治疗的重要辅助生殖技术,但其导致的透明带提早硬化使体外受精率显著降低,且其机制尚不明确。本文对透明带在卵低温保存过程中发生提早硬化的影响因素和调控机制进行了综述,有助于加强研究以提高卵低温保存技术和辅助生殖技术的有效性和安全性。 展开更多
关键词 受精 体外 低温保存 透明带提早硬化
冷冻保存新生牛睾丸组织中支持细胞的分离纯化
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作者 姜禹 赵欣欣 +6 位作者 安星兰 蔡宁宁 张胜 王添 唐博 李子义 张学明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期158-162,共5页
睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)是生精上皮中的多功能体细胞,其分离培养对体外探讨精子发生机理至关重要。因牛新鲜睾丸组织取材不便,本试验在前期基础上探讨了从冷冻保存的新生牛睾丸组织中分离纯化SCs的可行性。将冻存的1日龄牛睾... 睾丸支持细胞(sertoli cells,SCs)是生精上皮中的多功能体细胞,其分离培养对体外探讨精子发生机理至关重要。因牛新鲜睾丸组织取材不便,本试验在前期基础上探讨了从冷冻保存的新生牛睾丸组织中分离纯化SCs的可行性。将冻存的1日龄牛睾丸组织复苏,进行形态学检查和SCs分离培养。石蜡切片苏木精-伊红(HE)染色显示,曲细精索及睾丸间质保存完好。二步酶消化结果显示,生精上皮解离良好。利用差异贴壁法将原代细胞纯化后扩大培养,绝大多数细胞呈不规则多边形,3d即可生长至汇合。RT-PCR分析显示,贴壁细胞表达SCs阳性分子标记胶质细胞源神经营养因子(GDNF)和雄性激素结合蛋白(ABP)而不表达精原细胞分子标记PLZF。流式细胞术检测显示,所获细胞中ABP和GDNF阳性细胞数分别为99.7%和99.8%。以上结果表明,从冻存的新生牛睾丸组织中可获高纯度的SCs。本试验结果为后续相关试验奠定了基础。 展开更多
关键词 新生牛 睾丸组织 冷冻保存 支持细胞 差异贴壁
褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响
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作者 霍敏 栗瑞兰 +5 位作者 海日汗 林奕全 王瑞军 刘志红 李金泉 张家新 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第3期58-62,179共6页
为了研究褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响,在冷冻稀释液中外源补充不同浓度(0.125,0.250,0.500,1.000mg/mL)的褪黑素进行冷冻试验,冷冻解冻采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测精子活率、质膜完整率、顶体完... 为了研究褪黑素对绒山羊精液冷冻保存效果的影响,在冷冻稀释液中外源补充不同浓度(0.125,0.250,0.500,1.000mg/mL)的褪黑素进行冷冻试验,冷冻解冻采用计算机辅助精液分析系统(CASAS)和流式细胞仪分别检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率以及精子细胞中活性氧(ROS)的含量。结果表明:在冷冻稀释液中添加褪黑素能够显著降低精子细胞中ROS的含量,而且在冷冻稀释液中添加浓度为0.500mg/mL的试验组绒山羊精子活率(53.3%)、质膜完整率(44.6%)、顶体完整率(77.9%)均显著高于空白对照组(47.8%、36.3%和53.2%)(P<0.05)。说明在绒山羊精液冷冻稀释液中添加0.500mg/mL褪黑素能够显著提高绒山羊精子抗氧化能力和冷冻保存效果。 展开更多
关键词 褪黑素 抗氧化能力 绒山羊 精液 精子质量 冷冻保存
最小体积玻璃化冻存技术在生物医学领域的进展和应用
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作者 张淇 赵国旭 +1 位作者 刘艺 张晓慧 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第1期41-58,共18页
细胞和组织的生物保存在辅助生殖医学、再生医学和器官移植等领域均具有至关重要的作用,对公共健康具有广泛影响.生物保存方法主要包括传统的程序化慢冻法(slow freezing)和玻璃化冻存技术(vitrification).玻璃化冻存技术可通过降低或... 细胞和组织的生物保存在辅助生殖医学、再生医学和器官移植等领域均具有至关重要的作用,对公共健康具有广泛影响.生物保存方法主要包括传统的程序化慢冻法(slow freezing)和玻璃化冻存技术(vitrification).玻璃化冻存技术可通过降低或避免结晶的产生而显著提高细胞解冻后的活性和功能.但玻璃化冻存技术通常采用较高浓度的冷冻保护剂(cryoprotectant agent, CPA),会对细胞和组织产生一定的毒性和渗透压力.研究显示,通过减小玻璃化冻存中样品的体积(<1μL)可显著提高冷却速率,从而降低玻璃化冻存所需的CPA浓度.而微纳技术的迅速发展使得皮升至纳升量级样本的操作成为可能.因此,微纳技术与低温学的有机结合将为未来生物保存技术的发展提供巨大的潜能. 展开更多
关键词 冷冻保存 冷冻保护剂 微液滴玻璃化冻存 最小体积玻璃化冻存
基于主成分分析法分析壳聚糖/纳米二氧化钛协同蔗糖酯对香蕉低温贮藏品质影响
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作者 周强 刘蒙佳 谭属琼 《生物数学学报》 2019年第1期111-124,共14页
本文采用福建漳州巴西蕉为原料,采用2%壳聚糖/1%纳米二氧化钛、1.5%蔗糖酯对香蕉进行涂膜处理并低温冷库贮藏,并设立对照组(12.5°).通过跟踪测定香蕉贮藏期内失重率、呼吸强度、可溶性固形物、总酸、丙二醛、硬度及a*值,探讨壳聚糖... 本文采用福建漳州巴西蕉为原料,采用2%壳聚糖/1%纳米二氧化钛、1.5%蔗糖酯对香蕉进行涂膜处理并低温冷库贮藏,并设立对照组(12.5°).通过跟踪测定香蕉贮藏期内失重率、呼吸强度、可溶性固形物、总酸、丙二醛、硬度及a*值,探讨壳聚糖/纳米二氧化钛协同蔗糖酯涂膜处理对香蕉冷藏品质的影响,在此基础上进行主成分分析并拟定主成分线性回归函数.研究结果表明:香蕉失重率、可溶性固形物、丙二醛、a*值与贮藏时间呈高度正相关,而其总酸与硬度与贮藏时间呈高度负相关,且有统计学意义(P<0.01);与对照组比较,处理组A(蔗糖酯组)与处理组B(壳聚糖/纳米二氧化钛协同蔗糖酯组)能有效抑制香蕉失重率、可溶性固形物、丙二醛、a*值的升高,并延緩其总酸与硬度下降(P <0.05),在贮藏后期,处理组B效果要优于处理组A;通过对7个指标进行主成分分析可知,失重率、可溶性固形物、丙二醛、a*值指标呈现正相关性,上述指标均与总酸、硬度呈负相关,且有统计学意义(P<0.01),7个检测指标可简化为2个主成分,其方差总贡献率为91.946%,能较好地反映原始信息.第1主成分主要反映营养成分及感官品质变化程度,其线性回归函数为:Y1=-0.057X1+0.165X2+0.181X3-0.170X4+0.180X5-0.170X6+0.178X7;第2主成分主要反映其呼吸作用程度,其线性回归函数为:第2主成分提取为:Y2=0.918X1+0.080X2+0.095X3-0.221X4-0.170X5-0.170X6-0.076X7,本研究为香蕉的复合涂膜处理及低温贮藏提供理论依据. 展开更多
关键词 壳聚糖/纳米二氧化钛 蔗糖酯 低温贮藏 香蕉 品质 主成分分析
兰州市RhD(-)冰冻红细胞库运行情况调查分析
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作者 关晓梅 谢英 《中国输血杂志》 CAS 2019年第3期283-285,共3页
目的了解兰州市RhD(-)冰冻红细胞库建立以来运行情况,以便提高性改进,更好保障临床RhD(-)血型患者用血。方法调查2011—2016年本中心所有RhD(-)血液采供血数据,统计分析RhD(-)血型检出率、RhD(-)RBC临床应用情况及冰冻红细胞库发展动态... 目的了解兰州市RhD(-)冰冻红细胞库建立以来运行情况,以便提高性改进,更好保障临床RhD(-)血型患者用血。方法调查2011—2016年本中心所有RhD(-)血液采供血数据,统计分析RhD(-)血型检出率、RhD(-)RBC临床应用情况及冰冻红细胞库发展动态。结果兰州市2011—2016年无偿献血检验合格的RhD(-)RBC,81.60%入(4±2)℃动态贮存库供应临床日常所需,18.40%制备成冰冻红细胞入RhD(-)冰冻红细胞库,RhD(-)冰冻红细胞入库量呈逐年下降趋势,解冻去甘油红细胞出库量则大幅增长。结论兰州市RhD(-)冰冻红细胞库2011—2013年运行良好,完全可以保障临床RhD(-)血型患者急救用血,2014年开始进入入不敷出的状态,需采取各种措施来保障RhD(-)冰冻红细胞库的健康发展。 展开更多
关键词 红细胞血型 RhD(-)红细胞 深低温贮存 临床应用 发展动态
不同冻存时间对人颗粒脂肪活性影响的实验研究 预览
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作者 魏国茜 顾洛莎 +5 位作者 伍明政 白洁 顾劲松 于江 闫润虎 张怡 《中国医药导报》 CAS 2019年第6期16-19,F0004共5页
目的探索不同冻存时间对人颗粒脂肪活力的影响,寻求更为满意的颗粒脂肪冻存时间,为临床自体脂肪移植提供理论依据。方法收集2016年6~10月广州广美整形美容医疗门诊部20~40岁行大腿内侧自体脂肪抽吸移植术女性41例的脂肪标本,经生理盐水... 目的探索不同冻存时间对人颗粒脂肪活力的影响,寻求更为满意的颗粒脂肪冻存时间,为临床自体脂肪移植提供理论依据。方法收集2016年6~10月广州广美整形美容医疗门诊部20~40岁行大腿内侧自体脂肪抽吸移植术女性41例的脂肪标本,经生理盐水漂洗2次静置分离后加入相应留存脂肪量等体积的低温冻存保护液于-196℃(液氮)冻存。选择冻存3个月(A组)和6个月(B组)的标本复温,通过苏木精-伊红(HE)及台盼蓝染色观察冻存脂肪细胞形态并计算脂肪细胞存活率,肌酸激酶测定酶活力、免疫组化CD105检测脂肪干细胞(ADSCs)数量,比较A、B两组脂肪细胞活力变化情况。结果脂肪细胞计数分析脂肪细胞存活率及肌酸激酶测定结果显示,在相同低温条件下两组脂肪细胞活力差异无统计学意义(P>0.05);HE染色显微镜下比较脂肪细胞形态发现,A、B两组脂肪细胞形态基本正常,仅于A组见少数ADSCs。结论使用液氮冻存人颗粒脂肪组织安全有效,于-196℃下冻存6个月,甚至更长时间,是较理想的冻存条件。 展开更多
关键词 颗粒脂肪 冷冻保存 储存时间 脂肪细胞活力
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RHO/ROCK信号通路在精子抗冷冻损伤中的作用
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作者 田稼 张绍华 +8 位作者 马珂 赵宝运 颜贝 裴成斌 周岳 王红红 王红燕 马良宏 张欣宗 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期322-328,共7页
目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子... 目的:探讨RHO/ROCK信号通路在人精子抗冷冻损伤中的作用,为高效精液冷冻保护剂的研制提供理论依据。方法:选取健康精液25份,每份精液分为新鲜组、对照组与RHO通路抑制剂组(抑制剂组)。检测冷冻前后各组精液精子活力、精子存活率、精子膜完整率、正常形态精子百分率、精子DNA碎片指数(DFI)、精子顶体酶活性及精子线粒体膜电位变化;免疫荧光染色检测RHOa/ROCK蛋白在精子中的表达。结果:抑制剂组精液冷冻复苏后精子活力[(57.50±6.83)%vs(51.20±7.70)%,P=0.002]、精子存活率[(60.24±5.53)%vs(52.87±5.07)%,P=0.001]、精子膜完整率[(67.10±4.43)%vs(59.78±5.56)%,P=0.001]、正常形态精子百分率[(7.46±1.28)%vs(4.83±1.11)%,P=0.001]、精子DFI[(18.87±4.07)%vs(27.64±6.64)%,P=0.001]、精子线粒体膜电位(63.11±2.97 vs 56.30±4.28,P=0.001)指标均明显优于对照组;抑制剂组冷冻后精子顶体酶活性与对照组差异无统计学意义(98.30±11.33 vs 97.65±9.31,P>0.05)。免疫荧光染色显示RHOa/ROCK蛋白在精子头、颈部广泛表达。结论:RHO/ROCK信号通路在精子冷冻损伤中具有一定作用,抑制其通路活性可明显提高精子抗冷冻损伤的能力。 展开更多
关键词 RHO/ROCK信号通路 抑制剂 精子 冷冻保存
花楸花粉超低温保存及再生 预览
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作者 于琦 杨雨荷 +4 位作者 刘欢 郑昕雨 孔繁秋 张海莹 宋红 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期409-415,共7页
【目的】探讨花楸(Sorbus pohuashanensis)花粉超低温保存及再生的方法,以延长其花粉保存时间,为科研、生产提供理论和实践依据。【方法】分别设置不同培养基配方、不同光照、不同采集时间处理,进行花楸花粉离体萌发试验,测定各试验处... 【目的】探讨花楸(Sorbus pohuashanensis)花粉超低温保存及再生的方法,以延长其花粉保存时间,为科研、生产提供理论和实践依据。【方法】分别设置不同培养基配方、不同光照、不同采集时间处理,进行花楸花粉离体萌发试验,测定各试验处理的花粉萌发率;设置不同冷冻方式和化冻方式处理,测定两种方式不同处理的花粉萌发率;制备不同含水率的花粉,分别测定其在超低温保存前、后的萌发率。【结果】(1)培养基为100g·L^-1蔗糖+100 mg·L^-1硼酸的处理,花粉萌发率最高,达72.42%;(2)黑暗处理花粉萌发率为77.24%,比光照处理高8.96个百分点;(3)一天中,10∶00和14∶00采集的花粉,其活力显著高于其他时间采集的花粉;(4)-20℃预冷冻培养30min后投入液氮保存24h的处理效果最好,花粉萌发率达43.15%;(5)超低温保存后40℃水浴解冻5min处理比其他解冻方式处理的花粉活力高,萌发率为35.70%;(6)花楸花粉超低温保存最适含水率为7.72%,此含水率下花粉超低温保存后萌发率最高,为31.53%。【结论】花楸花粉采用超低温技术保存24h后仍具有活力,黑暗条件、花粉采集时间、花粉萌发培养基、花粉含水率、冷冻与化冻方式均会对花楸花粉超低温保存效果产生显著影响。 展开更多
关键词 花楸 花粉 超低温保存 种质资源保护
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Antioxidant effects of quercetin in freeze-thawing process of mouse spermatogonialstem cells
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作者 Fardin Amidi Zahra Rashidi +4 位作者 Zahra Khosravizadeh Kajal Khodamoradi Ali Talebi Shadan Navid Mehdi Abbasi 《亚太生殖杂志(英文版)》 2019年第1期7-12,共6页
Objective: To evaluate the antioxidant effect of quercetin on cell viability, reactive oxygen species (ROS) contents and apoptosis of cryopreserved mouse spermatogonial stem cells (mSSCs). Methods: mSSCs were isolated... Objective: To evaluate the antioxidant effect of quercetin on cell viability, reactive oxygen species (ROS) contents and apoptosis of cryopreserved mouse spermatogonial stem cells (mSSCs). Methods: mSSCs were isolated from neonate mice and cultivated in culture medium containing 30 μM quercetin for 48 h and then frozen for 2 weeks. After thawing, MTT assay was carried out to analyze the cell viability. Moreover, intracellular ROS levels were measured by flow cytometery and apoptosis was evaluated by detection of phosphatidylserine externalization assay and also real-time polymerase chain reaction. Results: Pre-treatment of mSSCs by 30 μM quercetin significantly decreased intracellular ROS content and apoptotic cell numbers and improved viability of mSSCs. Moreover, the gene expression of Bcl-2 and Bax significantly increased and decreased respectively after the freeze-thawing process. Conclusions: Pre-treatment of mSSCs with quercetin can improve cell viability and reduce apoptosis during freeze-thawing process. It can be a promising way to improve the quality and efficiency of cryopreservation protocols used in fertility preservation strategies. 展开更多
关键词 Spermatogonial STEM cell CRYOPRESERVATION OXIDATIVE stress QUERCETIN
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