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电针“神门”与“太渊”对急性心肌缺血模型大鼠心肌组织HCN4表达的研究 预览
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作者 王璐璐 吴子建 +4 位作者 蔡荣林 胡玲 刘磊 余情 何璐 《湖南中医药大学学报》 CAS 2019年第5期623-626,共4页
目的探究电针经穴效应、后效应,比较电针心经原穴“神门”与肺经原穴“太渊”后在急性心肌缺血(AMI)模型大鼠心肌组织内超极化激活的环核苷酸门控通道4(HCN4)mRNA与蛋白表达的影响。方法大鼠随机分为正常组、模型组、电针“神1”组、电... 目的探究电针经穴效应、后效应,比较电针心经原穴“神门”与肺经原穴“太渊”后在急性心肌缺血(AMI)模型大鼠心肌组织内超极化激活的环核苷酸门控通道4(HCN4)mRNA与蛋白表达的影响。方法大鼠随机分为正常组、模型组、电针“神1”组、电针“神2”组、电针“太1”组、电针“太2”组,每组10只。模型组、电针组复制AMI模型,电针组在模型复制后1d予以7d的治疗,电针最后一次即刻和次日同等时间分别取材,每组6只。以RT-qPCR、western-blot法分析心肌组织HCN4mRNA相对表达量及蛋白平均相对表达量。结果HCN4 mRNA和蛋白表达量:与正常组比较,模型组表达量二者显著减少(P<0.01);与模型组比较,“神1”“神2”和“太1”组二者表达量显著增多(P<0.01);与“神1”组比较,“神2”“太1”和“太2”组二者表达量显著减少(P<0.01);与“神2”组比较,HCN4 mRNA相对表达量“太2”组显著减少(P<0.01),HCN4蛋白表达量“太2”组显著减少(P<0.01);与“太1”组比较,“太2”组二者表达量显著减少(P<0.01)。结论电针“神1”“神2”“太1”组在治疗AMI大鼠模型中,能显著增加HCN4mRNA和蛋白表达量,电针“神1”组效果最为显著,电针“神门”和“太渊”均具有后效应,二者具有相对特异性差异且在一定程度上有持续的后效应的表达。 展开更多
关键词 急性心肌缺血 神门穴 太渊穴 相对特异性 超极化激活 环核苷酸门控通道
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大鼠脊髓背角HCN通道的分布及在部分坐骨神经结扎术后的表达变化 预览
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作者 冯小金 程小娥 +3 位作者 马龙先 张达颖 蒋昌宇 柳涛 《广东医学》 CAS 2019年第8期1040-1047,共8页
目的研究超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4种亚型(HCN1~4)在大鼠脊髓背角的分布特点,以及其在部分坐骨神经结扎术(PSNL)所致的慢性神经病理性疼痛动物模型中的表达变化。方法首先,选取SD大鼠(150~250 g)制作L4-5段脊髓横切片,用免疫... 目的研究超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4种亚型(HCN1~4)在大鼠脊髓背角的分布特点,以及其在部分坐骨神经结扎术(PSNL)所致的慢性神经病理性疼痛动物模型中的表达变化。方法首先,选取SD大鼠(150~250 g)制作L4-5段脊髓横切片,用免疫组织化学方法观察HCN1~4在大鼠脊髓背角的分布特点。其次,采用荧光定量PCR技术,检测大鼠L4-5段脊髓背角组织HCN1~4 mRNA的表达特点。另取同龄大鼠,将其随机分为模型组(PSNL组)和假手术组(sham组),每组4只。测定两组大鼠术前,术后1、3、7、10及14 d术侧机械痛阈值(PWT),并于术后14 d取其脊髓背角组织检测HCN1~4 mRNA的表达变化。结果免疫组织化学结果显示,HCN1~4通道蛋白在脊髓背角均有分布,但在Ⅰ~Ⅱ层分布最多,Ⅲ~Ⅵ层分布较少。荧光定量PCR结果显示,生理情况下脊髓背角HCN2 mRNA的表达量最高,其次是HCN1,而HCN3和HCN4表达量较少。与sham组相比,PSNL组PWT显著降低,且术后第14天HCN2 mRNA的表达量显著增加(P<0.05),而HCN1、HCN3及HCN4表达量的变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HCN1~4在正常大鼠脊髓背角具有特异性表达,但仅HCN2 mRNA在PSNL神经病理性疼痛模型后显著增加。 展开更多
关键词 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道 脊髓背角 神经病理性疼痛 免疫组织化学 荧光定量PCR
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大白菜BrCNGC全基因组鉴定及其表达分析 预览
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作者 汪影 张昌伟 +1 位作者 吕善武 侯喜林 《南京农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期994-1002,共9页
[目的]本文旨在研究大白菜环核苷酸门控离子通道基因(BrCNGC)的进化关系、结构特征、染色体定位及其表达模式。[方法]通过生物信息技术对大白菜BrCNGC进行分子进化分析、功能结构分析、染色体定位分析、保守结构域分析,并且通过荧光定量... [目的]本文旨在研究大白菜环核苷酸门控离子通道基因(BrCNGC)的进化关系、结构特征、染色体定位及其表达模式。[方法]通过生物信息技术对大白菜BrCNGC进行分子进化分析、功能结构分析、染色体定位分析、保守结构域分析,并且通过荧光定量PCR分析该基因家族在脱落酸(ABA)+芜菁花叶病毒(TuMV)、水杨酸(SA)+TuMV、茉莉酸甲酯(MeJA)+TuMV和抗坏血酸(AsA)+TuMV处理下的表达差异。[结果]大白菜BrCNGC家族有26个成员,可分为4个组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ),其中第Ⅳ组又可以分为2个亚组(Ⅳa和Ⅳb)。它们分布在9条染色体上,1号染色体上BrCNGC数量最多(有5个),5号染色体上只有1个BrCNGC基因,而8号染色体上没有BrCNGC基因分布。基因结构分析表明:该家族基因中共鉴定出10种motif,其中有14个BrCNGC蛋白都包含这10种motif,同组成员之间的motif组成相似。荧光定量PCR结果表明:在植物生长调节剂与TuMV相互作用下,大部分BrCNGC的表达量上调,少数BrCNGC的表达量下调。[结论]大白菜BrCNGC结构高度保守,其在大白菜抵御TuMV侵染过程中发挥一定的作用,该发现为以后进一步研究BrCNGC的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 大白菜 环核苷酸门控离子通道基因(CNGC) 全基因组分析 芜菁花叶病毒(TuMV) 荧光定量PCR
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电针心经与肺经对急性心肌缺血模型大鼠心肌组织超极化激活的环核苷酸门控通道2表达的影响 被引量:1
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作者 吴子建 王洁 +2 位作者 段文秀 龚长平 胡玲 《针刺研究》 CSCD 北大核心 2018年第3期175-179,共5页
目的:通过比较电针心经和肺经腧穴对急性心肌缺血(AMI)大鼠心肌组织超极化激活的环核苷酸门控通道2(HCN 2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨电针经穴效应及后效应的相对特异性。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针手少阴心经神门... 目的:通过比较电针心经和肺经腧穴对急性心肌缺血(AMI)大鼠心肌组织超极化激活的环核苷酸门控通道2(HCN 2)mRNA和蛋白表达的影响,探讨电针经穴效应及后效应的相对特异性。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针手少阴心经神门组(简称神门组)、电针手太阴肺经太渊组(简称太渊组),每组12只。采用冠状动脉前降支结扎法复制AMI模型。两电针组分别电针“神门”“太渊”穴,刺激15min,1次/d,共治疗7d。于末次电针治疗后即刻和次日相同时间各取材6只大鼠,分别称为神门8d组、神门9d组、太渊8d组和太渊9d组。采用实时荧光定量PCR法检测心肌组织HCN 2mRNA表达水平,Western blot法检测HCN 2蛋白表达水平。结果:与正常组比较,模型组HCN 2mRNA和蛋白表达水平均显著减少(P〈0.01);与模型组比较,神门组及太渊组HCN 2mRNA和蛋白表达量均显著增多(P〈0.01);与神门8d组比较,神门9d组的HCN 2mRNA和蛋白表达量均显著增多(P〈0.01),但太渊8d组的HCN 2mRNA和蛋白表达量均减少(P〈0.01);与神门9d组比较,太渊9d组的HCN 2mRNA和蛋白表达量均显著减少(P〈0.01);与太渊8d组比较,太渊9d组HCN 2蛋白表达显著增加(P〈0.01)。结论:电针心经和肺经均可以促进AMI模型大鼠心肌组织HCN 2mRNA和蛋白的表达,且具有一定的持续性后效应,电针心经在调整心肌组织HCN 2表达中具有相对特异性。 展开更多
关键词 心肌缺血 电针 心经 肺经 超极化激活的环核苷酸门控通道2
Leber's congenital amaurosis and the role of gene therapy in congenital retinal disorders
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作者 Walid Sharif Zuhair Sharif 《国际眼科杂志:英文版》 SCIE CAS 2017年第3期480-484,共5页
Leber's congenital amaurosis(LCA)and recent gene therapy advancement for treating inherited retinopathies were extensive literature reviewed using MEDLINE,Pub Med and EMBASE. Adeno-associated viral vectors were th... Leber's congenital amaurosis(LCA)and recent gene therapy advancement for treating inherited retinopathies were extensive literature reviewed using MEDLINE,Pub Med and EMBASE. Adeno-associated viral vectors were the most utilised vectors for ocular gene therapy. Cone photoreceptor cells might use an alternate pathway which was not reliant of the retinal pigment epithelium(RPE)derived retinoid isomerohydrolase(RPE65)to access the 11-cis retinal dehydechromophore. Research efforts dedicated on the progression of a gene-based therapy for the treatment of LCA2. Such gene therapy approaches were extremely successful in canine,porcine and rodent LCA2 models. The recombinant AAV2.h RPE65v2 adenoassociated vector contained the RPE65 cDNA and was replication deficient. Its in vitro injection in target cells induced RPE65 protein production. The gene therapy trials that were so far conducted for inherited retinopathies have generated promising results. Phase I clinical trials to cure LCA and choroideremia demonstrated that adeno-associated viral vectors containing RPE genes and photoreceptors respectively,could be successfully administered to inherited retinopathy patients. A phase III trial is presently ongoing and if successful,it will lead the way to additional gene therapy attempts to cure monogenic,inherited retinopathies. 展开更多
腺病毒介导的hHCN4表达载体的构建及其转染人胚肾细胞
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作者 曹程 王高频 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1492-1495,共4页
目的构建人超极化激活环核甘酸门控通道基因4(hHCN4)的重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP,并对其进行鉴定、包装。方法利用Gateway技术构建pAV-hHCN4-IRES/eGFP,酶切鉴定并进行阳性克隆测序。将构建好的质粒转染人胚肾细胞HEK293,检... 目的构建人超极化激活环核甘酸门控通道基因4(hHCN4)的重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP,并对其进行鉴定、包装。方法利用Gateway技术构建pAV-hHCN4-IRES/eGFP,酶切鉴定并进行阳性克隆测序。将构建好的质粒转染人胚肾细胞HEK293,检测病毒液滴度。结果测序符合Genbank中的hHCN4的编码序列。转染HEK293细胞见绿色荧光蛋白表达,病毒滴度为1.26×108 pfu/ml。结论成功构建了重组腺病毒载体pAV-hHCN4-IRES/eGFP。 展开更多
关键词 腺病毒 人超极化激活环核甘酸门控通道基因4 人胚肾细胞
转基因间充质干细胞自体移植治疗猪完全性房室传导阻滞 被引量:1
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作者 李树春 张浩 +3 位作者 段炼 龚德军 袁扬 徐志云 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期465-468,共4页
目的将携带人超极化激活环核苷酸门控通道2(hHCN2)基因的自体间充质干细胞(MSCs)移植入完全性房室传导阻滞(CHB)猪模型的希氏束中,探讨构建自体生物起搏器的可行性。方法构建包含hHCN2基因的重组腺病毒,转染猪MSCs。构建猪的CHB... 目的将携带人超极化激活环核苷酸门控通道2(hHCN2)基因的自体间充质干细胞(MSCs)移植入完全性房室传导阻滞(CHB)猪模型的希氏束中,探讨构建自体生物起搏器的可行性。方法构建包含hHCN2基因的重组腺病毒,转染猪MSCs。构建猪的CHB模型。将转基因的MSCs移植入希氏束后,观察其心率变化及对儿茶酚胺的反应性。对移植部位的心肌行组织学及免疫荧光检查。结果成功构建重组腺病毒pAd.hHCN2并转染猪MSCs。自体移植于CHB动物模型希氏束后,与对照组相比,转基因MSCs显著提升了实验组的心率(P〈0.01),且其心律具有儿茶酚胺反应性。移植部位心肌取样检查显示MSCs在心肌中存活并且表达hHCN2蛋白。结论在猪CHB模型中,移植入希氏束的转hHCN2基因的自体MSCs短期内可以发挥生物起搏器的功能。 展开更多
关键词 间充质干细胞 人超极化激活环核苷酸门控通道2 自体移植 完全性房室传导阻滞
超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道与疾病关系的研究进展 预览
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作者 刘翠英(综述) 林春(审校) 《医学综述》 2009年第7期 972-974,共3页
随着对超极化激活电流和超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道研究的不断深入,人们对超极化激活电流特性和超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道的结构特征、调节、分布有了进一步的了解。近年来,发现除心律失常之外,超极化激活电流异... 随着对超极化激活电流和超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道研究的不断深入,人们对超极化激活电流特性和超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道的结构特征、调节、分布有了进一步的了解。近年来,发现除心律失常之外,超极化激活电流异常和超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道的机能障碍还与其他多种疾病有关。本文就超极化激活电流特性、超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道的特点及二者功能异常与疼痛等神经系统疾病关系的最新研究进展予以综述。 展开更多
关键词 超极化激活环核苷酸门控的阳离子通道 超极化激活电流 疾病
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HCN2在胃的分布及与递质共存的关系 预览 被引量:8
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作者 严慧 王景杰 +1 位作者 李强 黄裕新 《山西医科大学学报》 CAS 2009年第11期 961-963,1055,共4页
目的研究超极化激活的环化核苷酸门控通道亚型2(HCN2)在胃中存在的状况以及与神经递质的共存情况,为探讨胃肠动力的调节提供理论依据。方法采用免疫荧光组织化学双标记的方法,在大鼠胃中对PGP9.5与HCN2进行双标记、对HCN2分别与SP... 目的研究超极化激活的环化核苷酸门控通道亚型2(HCN2)在胃中存在的状况以及与神经递质的共存情况,为探讨胃肠动力的调节提供理论依据。方法采用免疫荧光组织化学双标记的方法,在大鼠胃中对PGP9.5与HCN2进行双标记、对HCN2分别与SP、CGRP以及VIP进行双标记。结果HCN2是以串珠样结构分布于胃黏膜间神经纤维末梢。HCN2与SP、CGRP和VIP在胃黏膜和平滑肌间隙中存在双标记。结论发现HCN2在胃黏膜和平滑肌间隙中存在,并与神经递质共存,提示HCN2可能在胃肠道的动力调节方面起着较为重要的作用。 展开更多
关键词 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道 蛋白基因产物9.5 血管活性肠肽 P物质 降钙素基因相关肽 大鼠
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人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4基因体外转染乳鼠心肌细胞 预览 被引量:1
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作者 张翩 林国生 +4 位作者 蔡军 马金安 曹庭家 曾彬 郭军 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 北大核心 2009年第1期 47-50,共4页
目的观察人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(hHCN4)基因对大鼠心肌细胞搏动的影响,初步探讨hHCN4转染心肌细胞构建生物起搏器的可行性。方法胰酶消化法分离培养原代乳鼠心肌细胞,随机分为实验组、空病毒对照组、空白对照组,转... 目的观察人超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(hHCN4)基因对大鼠心肌细胞搏动的影响,初步探讨hHCN4转染心肌细胞构建生物起搏器的可行性。方法胰酶消化法分离培养原代乳鼠心肌细胞,随机分为实验组、空病毒对照组、空白对照组,转染时分别加入带hHCN4和绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒、带GFP的腺病毒、PBS,观察分析心肌细胞转染前,转染后2天和3天的搏动情况;采用逆转录聚合酶链式反应和免疫荧光检测各组心肌细胞hHCN4mRNA和通道蛋白的表达。结果hHCN4重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞后2天和3天较转染前搏动频率明显增加,频率高于对照组;hHCN4重组腺病毒转染乳鼠心肌细胞后,可检测到hHCNmRNA和通道蛋白表达,而对照组无表达。结论hHCN4转染心肌细胞的搏动频率增加,hHCN4基因转导人心肌细胞构建生物起搏器的方法具有初步可行性。 展开更多
关键词 心血管病学 心肌细胞 HCN4基因 腺病毒 生物起搏器
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HCN4基因在大鼠心脏不同发育时期的表达 被引量:1
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作者 周立 王庆志 +2 位作者 王志勇 郭义威 孙永琨 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期1514-1516,共3页
目的探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)基因在大鼠心脏发育过程中心房、心室中的表达及其在心脏发育过程中的意义。方法取妊娠15、19d(E15、E19)胎鼠和出生2、10、35、90d(P2、P10、P35、P90)幼鼠心脏,于体视显微镜下... 目的探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)基因在大鼠心脏发育过程中心房、心室中的表达及其在心脏发育过程中的意义。方法取妊娠15、19d(E15、E19)胎鼠和出生2、10、35、90d(P2、P10、P35、P90)幼鼠心脏,于体视显微镜下分离其心房和心室。抽提总RNA,应用RT-PCR法对HCN基因mRNA表达进行半定量分析;抽提膜蛋白,应用Westernblot方法对HCN蛋白的表达进行半定量分析,应用SPSS11.5软件进行统计学分析。结果HCN4基因mRNA和HCN4基因蛋白在大鼠各时间点心房和心室中均有表达。心房或心室内HCN4基因mRNA在P10、P35、P90时两两比较均无显著性差异(Pa〉0.05);E15、E19、P2、P10两两比较均有显著性差异(Pa〈0.05)。心房HCN4基因mRNA及其蛋白相对表达量(HCN4/β-actin)均较同日龄心室高,差异均有统计学意义(Pa〈0.05)。心房或心室内HCN4基因mRNA在E15时均表达最高,在E19、P2、P10时表达逐渐降低,与E15比较差异有统计学意义(P〈0.05)。心脏发育后期(P35、P90)表达量趋于平衡。Westernblot与RT-PCR结果基本一致。结论随着大鼠心脏的发育成熟,HCN4基因在心房和心室的表达呈逐渐下调趋势,可能与大鼠心脏的发育成熟密切相关。 展开更多
关键词 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4基因 心脏 胚胎 发育 大鼠
大鼠心室肌HCN4质粒在HEK293细胞的表达及电流特征 预览
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作者 刘丹妮 高小方 +1 位作者 姚成立 李泱 《宁夏医学院学报》 2008年第2期 146-149,F0002,共5页
目的研究大鼠心室肌细胞超极化环核苷酸门控阳离子通道(HCN4)基因瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293)表达和通道电流特征。方法利用脂质体介导大鼠HCN4基因pTracer—CMV—GFP穿梭载体,转染HEK293细胞进行扩增,用逆转录-聚合酶链反应(R... 目的研究大鼠心室肌细胞超极化环核苷酸门控阳离子通道(HCN4)基因瞬时转染人胚胎肾细胞(HEK293)表达和通道电流特征。方法利用脂质体介导大鼠HCN4基因pTracer—CMV—GFP穿梭载体,转染HEK293细胞进行扩增,用逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)检测HCN4 mRNA表达,采用全细胞膜片钳技术记录HEK293细胞上HCN4电流。结果大鼠起搏通道基因瞬时转染HEK293细胞,记录到一系列超极化内向离子流,该电流呈电压、时间依赖性,没有明显的失活,在-150mV时电流幅值为(540±24.1)pA,电流密度为(9.6±0.7)pA/pF(n=12),半激活电压(V1/2)为(-105.7±12.0)mV,稳态激活曲线斜率(k)为-15.7mV,HCN4电流翻转电位为(-84.0±7.9)mV。结论应用脂质体转染方法成功进行了起搏通道HCN4基因的异源性表达。 展开更多
关键词 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道 异源性表达 膜片钳 大鼠
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Mink相关肽1对超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道4电生理特性的调节 预览 被引量:2
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作者 余强 刘廷容 +4 位作者 肖俊 邓松柏 夏爽 杨海燕 张玉 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2008年第3期225-227,共3页
目的:评价Mink相关肽1(KCNE2或MiRP1)对异源转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上的超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道(HCN)4电生理特性的影响。方法:将成功转染HCN4的CHO细胞(n=12)及共转染HCN4+KCNE2的CHO细胞(n=13),即将... 目的:评价Mink相关肽1(KCNE2或MiRP1)对异源转染的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞上的超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道(HCN)4电生理特性的影响。方法:将成功转染HCN4的CHO细胞(n=12)及共转染HCN4+KCNE2的CHO细胞(n=13),即将KCNE2质粒脱氧核糖核酸(DNA)单独转染或和HCN4质粒DNA共转染CHO—K1细胞,用标准微电极全细胞膜片钳记录细胞膜上的HCN4电流。结果:KCNE2对HCN4电流大小的影响:无论是在单独转染HCN4,还是HCN4和KCNE2共转染的CHO细胞中,均能检测到电流的表达。HCN4和KCNE2共转染的细胞中所检测到的电流密度,显著大于单独的HCN4转染细胞中的电流密度,差异有统计学意义(P〈0.01)。KCNE2对HCN4激活动力学的影响:KCNE2和HCN4共转染后,其代表通道激活动力学的指标:激活时间常数(Tau)较单独转染HCN4时明显减小,差异有统计学意义(P〈0.05)。KCNE2对HCN4激活的电压依赖性的影响:从稳态激活曲线中发现,无论是通道激活50%时的脉冲电压(V1/2)还是倾斜因子(S),在HCN4与HCN4+KCNE2两组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:KCNE2对HCN4通道有明显的调控作用。 展开更多
关键词 超极化激活的环核苷酸门控的阳离子通道 膜片钳 Mink相关肽1
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腰5脊神经结扎大鼠腰4背根神经节神经元超极化激活电流的变化 预览
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作者 梅其勇 邢国刚 +1 位作者 李杰 万有 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期 218-221,共4页
目的:研究腰5脊神经结扎(L5 spinal nerve ligation,SNL)神经病理痛大鼠腰4背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元超极化激活电流(Ih)及其通道超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)发生的可塑性变化。方法:以单侧L5... 目的:研究腰5脊神经结扎(L5 spinal nerve ligation,SNL)神经病理痛大鼠腰4背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元超极化激活电流(Ih)及其通道超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)发生的可塑性变化。方法:以单侧L5SNL制备神经病理痛大鼠模型,运用全细胞膜片钳技术记录和分析背根神经节神经元Ih的表达和激活特性。结果:L5SNL之后,腰4DRG神经元厶的电流密度降低,单位电导下降,而翻转电位及电压依赖特性未发生显著性改变。结论:腰4DRG神经元Ih的这些变化可能贡献于L5SNL大鼠的神经病理痛。 展开更多
关键词 神经病理痛 脊神经结扎 IH 背根神经节 全细胞膜片钳
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起搏通道基因亚型HCN4重组腺病毒载体的构建及通道电流检测 预览 被引量:15
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作者 李继文 郭继鸿 +3 位作者 张萍 李春 刘元伟 周春燕 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 2006年第1期 58-62,共5页
目的 旨在构建超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型4(HCN4)重组腺病毒载体并鉴定其离子通道功能。方法 全长人HCN4基因酶切后亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV,形成含目的基因和绿色荧光蛋白基因的穿梭载体。穿梭载体和病... 目的 旨在构建超极化激活环核苷酸门控阳离子通道基因亚型4(HCN4)重组腺病毒载体并鉴定其离子通道功能。方法 全长人HCN4基因酶切后亚克隆到腺病毒穿梭载体pAdTrack—CMV,形成含目的基因和绿色荧光蛋白基因的穿梭载体。穿梭载体和病毒骨架载体pAdEasy-1经电穿孔法在BJ5183大肠杆菌中同源重组,重组后的腺病毒载体经Pad酶切线性化后,利用脂质体介导转染到HEK293细胞进行病毒的包装和扩增。用多聚酶链反应(PCR)方法对病毒上清中的HCN4进行检测,并将重组腺病毒感染COS-7细胞,用免疫荧光染色检测HCN4蛋白质的表达,利用全细胞膜片钳方法测定转HCN4基因细胞的电生理功能。结果 通过酶切、测序、PCR等证实HCN4通道基因重组腺病毒载体构建正确,免疫荧光检测证实转染AdHCN4的COS-7细胞中HCN4通道基因的表达,膜片钳实验也在转基因细胞中检测到超极化激活的非选择眭内向阳离子电流(If)。结论 HCN4通道基因重组腺病毒载体的构建成功为进一步研究该离子通道的电生理功能及在心律失常疾病基因治疗方面的潜在应用价值奠定了基础。 展开更多
关键词 分子生物学 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道 起搏电流 腺病毒
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蛛网膜下腔注射ZD7288对神经病理痛大鼠机械性痛敏的影响 预览 被引量:5
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作者 涂会引 姜玉秋 +6 位作者 刘风雨 邢国刚 石玉顺 李潭 姚磊 韩济生 万有 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期 228-233,共6页
目的:观察蛛网膜下腔注射(i.t.)ZD7288对模型大鼠痛行为的影响。方法:采用L5/L6脊神经紧结扎的方法制备大鼠神经病理痛模型,通过蛛网膜下腔插管给药。结果:ZD728830g明显升高50%缩足阈值(P〈0.05),表现出明显的镇痛作用... 目的:观察蛛网膜下腔注射(i.t.)ZD7288对模型大鼠痛行为的影响。方法:采用L5/L6脊神经紧结扎的方法制备大鼠神经病理痛模型,通过蛛网膜下腔插管给药。结果:ZD728830g明显升高50%缩足阈值(P〈0.05),表现出明显的镇痛作用,而更低剂量的15μg和7.5μg的镇痛效果不明显。在神经损伤后的5d和14d给予ZD7288,其镇痛效果明显好于损伤后第28d给药(P〈0.05)。这三个剂量的ZD7288并不影响大鼠的运动功能。结论:ZD7288对脊神经结扎大鼠的机械性痛敏有缓解作用,这种作用在结扎后早期比晚期更强。从行为药理学的角度证明脊髓背角超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN)可能参与了神经病理痛的形成。 展开更多
关键词 神经病理痛 超激化激活阳离子通道 ZD7288 蛛网膜下腔注射 大鼠
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视锥细胞环核苷酸门控通道研究进展 预览
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作者 徐建华(综述) 张兆奉 杜晶(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期573-576,共4页
环核苷酸门控(CNG)通道是由环核苷酸活化的离子通道,其在视觉和嗅觉信号传导过程中发挥重要作用。CNG通道蛋白由6个不同基因编码,包含4个A亚单元(A1~A4)和2个B亚单元(B1和B3),其中CNGA3和CNGB3基因突变与全色盲发病相关。近... 环核苷酸门控(CNG)通道是由环核苷酸活化的离子通道,其在视觉和嗅觉信号传导过程中发挥重要作用。CNG通道蛋白由6个不同基因编码,包含4个A亚单元(A1~A4)和2个B亚单元(B1和B3),其中CNGA3和CNGB3基因突变与全色盲发病相关。近年来,大量研究表明对全色盲动物模型进行基因治疗后视网膜功能恢复效果明显。就视锥细胞CNG通道的功能研究和CNG通道缺陷小鼠模型的发病机制和基因治疗研究进行综述。 展开更多
关键词 环核苷酸门控通道 视锥细胞 基因敲除
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环核苷酸门控通道与精子功能 被引量:1
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作者 徐建华(综述) 杜晶(审校) 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2013年第3期270-273,共4页
环核苷酸门控通道(CNG)是非选择性阳离子通道,直接由环核苷酸活化,是Ca2+进入细胞内的主要通道之一。CNG通道蛋白由6个不同基因编码,4个A亚单位和2个B亚单位。CNG通道受ca2+/钙调蛋白和磷酸化/去磷酸化作用所调控。近年来,CN... 环核苷酸门控通道(CNG)是非选择性阳离子通道,直接由环核苷酸活化,是Ca2+进入细胞内的主要通道之一。CNG通道蛋白由6个不同基因编码,4个A亚单位和2个B亚单位。CNG通道受ca2+/钙调蛋白和磷酸化/去磷酸化作用所调控。近年来,CNG通道在生殖系统方面的研究受到了广泛关注。大量研究表明,CNG通道在精子运动、获能和顶体反应中起着重要的作用。本文对CNG通道与精子功能的关系进行综述。 展开更多
关键词 环核苷酸门控通道 钙离子 精子功能
重组腺相关病毒介导遗传性色盲基因治疗的研究进展 预览 被引量:1
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作者 杨红霞 邱一果(综述) 雷博(审校) 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期881-884,共4页
色盲是缺乏或完全没有辨色能力的一类遗传性疾病,长期被认为是不可治愈性疾病。近年来以腺相关病毒(AAV)为载体介导的基因疗法主要用于对由视蛋白缺乏引起的红绿色盲及由视锥细胞环核苷酸门控离子通道A3(CNGA3)A或B(CNGB3)亚单... 色盲是缺乏或完全没有辨色能力的一类遗传性疾病,长期被认为是不可治愈性疾病。近年来以腺相关病毒(AAV)为载体介导的基因疗法主要用于对由视蛋白缺乏引起的红绿色盲及由视锥细胞环核苷酸门控离子通道A3(CNGA3)A或B(CNGB3)亚单位基因缺失引起的全色盲的治疗,已在动物实验中获得成功。人类色盲患者与一些实验动物存在着相同的基因缺陷,因此相关的动物实验研究结果用AAV介导的基因疗法为色盲患者进行治疗提供了有用的信息。 展开更多
关键词 色盲 基因疗法 视锥细胞 视网膜 环核苷酸门控离子通道 腺相关病毒
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The Role of Cyclic Nucleotide-Gated Ion Channels in Plant Immunity
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作者 Wolfgang Moeder William Urquhart +1 位作者 Huoi Ung Keiko Yoshioka 《分子植物:英文版》 SCIE CAS CSCD 2011年第3期442-452,共11页
因为第一种周期的核苷酸门离子隧道(CNGC ) , HvCBT1,作为 calmodulin 绑定蛋白质被识别,超过一十年过去了,工作的大量的数量被做了理解这些隧道蛋白质的分子的性质和函数。基于 electrophysiological 和 heterologous 表达式分析... 因为第一种周期的核苷酸门离子隧道(CNGC ) , HvCBT1,作为 calmodulin 绑定蛋白质被识别,超过一十年过去了,工作的大量的数量被做了理解这些隧道蛋白质的分子的性质和函数。基于 electrophysiological 和 heterologous 表达式分析,工厂 CNGC 功能作为非选择的阳离子隧道并且,到目前为止,他们的生物角色在防卫回答,开发,和离子动态平衡被报导了。向前基因的途径识别了四 AtCNGCs (AtCNGC2, 4, 11,和 12 ) 作为为 AtCNGC2 的空异种, 4, 11,和 12 象 gain-of- 一样工作涉及工厂免疫为在防卫回答的 AtCNGC11 和 12 展出改变变异。因为离子流动变化是被报导了,在病原体识别之上并且也的早事件之一是为防卫回答的激活的一个必要部件,在这些离子流动变化的 CNGC 的参与被建议了。然而,空异种的最近的详细描述建议了这个隧道家庭的更复杂的参与。在这评论,我们集中于这些 CNGC 异种的发现和描述并且在工厂免疫作为部件讨论 CNGC 的可能的角色。 展开更多
关键词 非选择性阳离子通道 植物免疫力 环核苷酸 门控 防御反应 组成部分 生物学作用 突变体
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