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脂肪来源间充质干细胞移植干预系统性红斑狼疮模型小鼠的免疫功能 预览
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作者 叶玲 朱静 何成松 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2696-2702,共7页
背景:虽然间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮已取得临床疗效,但其免疫调节的内源性功能及作用机制有待深入研究。目的:探讨来源的脂肪间充质干细胞对系统性红斑狼疮小鼠(MRL/lpr小鼠)免疫功能的影响及其可能机制。方法:将36只MRL/lpr小鼠... 背景:虽然间充质干细胞治疗系统性红斑狼疮已取得临床疗效,但其免疫调节的内源性功能及作用机制有待深入研究。目的:探讨来源的脂肪间充质干细胞对系统性红斑狼疮小鼠(MRL/lpr小鼠)免疫功能的影响及其可能机制。方法:将36只MRL/lpr小鼠随机分为3组:模型对照组不进行干预、磷酸盐缓冲液对照组尾静脉注射磷酸盐缓冲液、干细胞移植组尾静脉注射脂肪间充质干细胞;另取12只C57BL/6小鼠作为正常对照组。结果与结论:①分离MRL/lpr小鼠脂肪组织获得的细胞具有脂肪间充质干细胞特性;②模型对照组、磷酸盐缓冲液对照组和干细胞移植组的血清尿素氮、肌酐和抗双链DNA抗体水平均高于正常对照组(P <0.01);干细胞移植组的血清尿素氮、肌酐和抗双链DNA抗体水平低于模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组(P <0.05);③模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组的外周血调节性T细胞阳性率低于正常对照组和干细胞移植组,干细胞移植组外周血调节性T细胞阳性率低于正常对照组(P <0.01);④模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组的脾脏树突状细胞阳性率低于正常对照组和干细胞移植组(P <0.01);⑤模型对照组、磷酸盐缓冲液对照组和干细胞移植组的Th2比例高于正常对照组(P <0.05);模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组的Th1比例和Th1/Th2比值低于正常对照组和干细胞移植组(P <0.05);⑥与正常对照组比较,模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组外周血中白细胞介素2、干扰素γ、白细胞介素10和T淋巴细胞产生的淋巴毒素水平降低,白细胞介素4水平升高(P <0.05);与模型对照组和磷酸盐缓冲液对照组比较,干细胞移植组外周血中白细胞介素2、白细胞介素10、干扰素γ和T淋巴细胞产生的淋巴毒素水平升高,白细胞介素4水平降低(P <0.05)。结果表明脂肪间充质干细胞移植可通过提高树突状细胞和调节性T细胞比� 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 系统性红斑狼疮 干细胞移植 尾静脉注射 组织工程 小鼠 脾脏 调节性T细胞 树突状细胞 辅助性T细胞
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单眼感染性角膜炎患者对侧未感染眼活体共聚焦显微镜下改变 预览
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作者 刘馨甜 张红 +2 位作者 金鑫 石妍 姜雪 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期454-459,共6页
目的评价患者单眼发生感染性角膜炎时,其对侧未感染眼角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、树突状细胞及角膜神经的改变。方法采用前瞻性系列病例观察研究设计,纳入2018年1—8月于哈尔滨医科大学附属第一院眼科医院就诊的单眼感染性角膜炎患者7... 目的评价患者单眼发生感染性角膜炎时,其对侧未感染眼角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、树突状细胞及角膜神经的改变。方法采用前瞻性系列病例观察研究设计,纳入2018年1—8月于哈尔滨医科大学附属第一院眼科医院就诊的单眼感染性角膜炎患者78例,其中病毒性角膜炎患者31例,细菌性角膜炎患者30例,真菌性角膜炎患者17例,同期纳入年龄相关性白内障或翼状胬肉患者50例作为对照组。裂隙灯显微镜下观察患者眼前节结构。使用活体共聚焦显微镜(IVCM)观察患者未感染眼角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、树突状细胞形态,并计算3种细胞以及角膜神经总干和分支的数量和密度。结果3个感染组患者对侧未感染眼眼前节均无明显改变。病毒性角膜炎组、细菌性角膜炎组和真菌性角膜炎组患者对侧未感染眼的角膜上皮细胞密度分别为1834(1584,2107)、1905(1651,2332)和1859(1477,1995)个/mm^2,明显低于对照组的3479(3080,3910)个/mm^2,而病毒性角膜炎组和细菌性角膜炎组未感染眼树突状细胞密度分别为175(139,214)个/mm^2和156(118,190)个/mm^2,均大于对照组的69(57,76)个/mm^2,差异均有统计学意义(均P<0.05);病毒性角膜炎组未感染眼的角膜内皮细胞密度为1107(945,1270)个/mm^2,小于细菌性角膜炎组的1905(1651,2332)个/mm^2和真菌性角膜炎组的1859(1477,1995)个/mm^2,差异均有统计学意义(均P<0.05);病毒性角膜炎组未感染眼的角膜神经数量和总神经密度分别为10(7,11)条/mm^2和(1822.85±622.34)μm/mm^2,均小于细菌性角膜炎组的11(9,13)条/mm^2和(2340.91±408.70)μm/mm^2,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.0083)。各角膜感染组角膜上皮细胞和角膜内皮细胞体积均较对照组增大;病毒性和细菌性角膜炎患者对侧眼树突状细胞形态变长,数目增多。结论单眼发生感染性角膜炎时,其对侧未感染眼的角膜上皮细胞、角膜内皮细胞、树突状细胞� 展开更多
关键词 感染性角膜炎 激光扫描共焦显微镜 角膜上皮细胞 树突状细胞 角膜神经密度 角膜内皮细胞
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炎症性肠病的免疫调控研究进展 预览
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作者 陈策 黄功华 刘新光 《医学综述》 2019年第11期2081-2085,2091共6页
炎症性肠病(IBD)是一类高发、病因尚未明确的慢性自身免疫性疾病,在全世界范围内发病率呈上升趋势。肠道微环境稳态失衡、免疫功能失调、环境变化或遗传因素都可能导致疾病的发生。免疫细胞,如巨噬细胞、树突状细胞、固有淋巴细胞以及T... 炎症性肠病(IBD)是一类高发、病因尚未明确的慢性自身免疫性疾病,在全世界范围内发病率呈上升趋势。肠道微环境稳态失衡、免疫功能失调、环境变化或遗传因素都可能导致疾病的发生。免疫细胞,如巨噬细胞、树突状细胞、固有淋巴细胞以及T细胞、B细胞在IBD中发挥重要作用。巨噬细胞或树突状细胞通过上调炎症细胞因子表达,T细胞、B细胞通过分泌细胞因子或抗体参与IBD免疫调控。阐明IBD免疫作用的机制,可能为IBD的治疗提供新靶点。 展开更多
关键词 炎症性肠病 巨噬细胞 树突状细胞 T细胞 B细胞
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树突细胞源性外泌体在免疫治疗中应用的研究进展
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作者 何鑫 任伟宏 +4 位作者 桑锋 邓博文 荣昊 刘朝阳 郭慧玲 《中华实用诊断与治疗杂志》 2019年第4期406-409,共4页
外泌体是体液中广泛分布的纳米级生物活性胞外囊泡,其携带母体细胞物质,介导细胞间信息交流,参与对靶细胞功能的调节。树突细胞源性外泌体是由树突细胞分泌的直径为30~150 nm的囊泡,可执行树突细胞的抗原处理与提呈功能。树突细胞源性... 外泌体是体液中广泛分布的纳米级生物活性胞外囊泡,其携带母体细胞物质,介导细胞间信息交流,参与对靶细胞功能的调节。树突细胞源性外泌体是由树突细胞分泌的直径为30~150 nm的囊泡,可执行树突细胞的抗原处理与提呈功能。树突细胞源性外泌体通过对T细胞、自然杀伤细胞、树突细胞进行调节,发挥免疫抑制与活化效应,并可用于自身免疫性疾病、损伤组织修复、器官移植、肿瘤、感染等疾病的治疗。本文就树突细胞源性外泌体的免疫调节作用及其应用的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 树突细胞 外泌体 树突细胞源性外泌体 免疫调节 免疫治疗
调节性T淋巴细胞在HER2阳性乳腺癌免疫机制中的作用 预览
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作者 刘济铭 潘桃 全瑶 《重庆医学》 CAS 2019年第10期1720-1723,共4页
目的探讨调节性T淋巴细胞(Treg细胞)在人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌患中的免疫作用机制。方法梯度离心方法分离健康献血者(对照组)、HER2阳性未转移乳腺癌患者、HER2阳性转移乳腺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)。各组均加入刀豆... 目的探讨调节性T淋巴细胞(Treg细胞)在人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌患中的免疫作用机制。方法梯度离心方法分离健康献血者(对照组)、HER2阳性未转移乳腺癌患者、HER2阳性转移乳腺癌患者外周血单个核细胞(PBMC)。各组均加入刀豆蛋白A(ConA)刺激增殖分化(5μg/mL)。各组作用60h后采用EdU检测各组细胞增殖情况,流式细胞学检测各组CD4^+CD25^+FOXP3^+Treg细胞比例和树突状细胞(DC)比例,实时荧光定量聚合酶链反应检测每组细胞中FoxP3 mRNA的表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组上清液中细胞因子血清转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素-10(IL-10)的水平。结果 ConA可以刺激各组细胞增加,与对照组相比,HER2阳性未转移乳腺癌组、HER2阳性转移乳腺癌组细胞增殖显著(P<0.01),CD4^+CD25^+FOXP3^+ Treg细胞占CD4^+T淋巴细胞的比例和FoxP3mRNA的表达增加(P<0.01)。与对照组相比,HER2阳性未转移乳腺癌组、HER2阳性转移乳腺癌组DC中CD86分子表达下调(P<0.01)。与对照组相比,HER2阳性未转移乳腺癌组、HER2阳性转移乳腺癌组上清液中TGF-β和IL-10的水平明显升高(P<0.01)。结论通过促进Treg细胞及细胞因子的高表达,从而HER2阳性乳腺癌患者发挥免疫抑制作用。 展开更多
关键词 树突细胞 T淋巴细胞 调节性 细胞因子类 人外周血单个核细胞
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晚期非小细胞肺癌DC-CIK细胞免疫治疗联合化疗的临床疗效观察
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作者 于溪 马怡 +3 位作者 张志强 王晓舟 李洪石 赫丽杰 《中国实用乡村医生杂志》 2019年第2期66-68,共3页
目的研究树突状细胞(DC和细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法回顾性分析2014年1月—2016年4月就诊于辽宁省人民医院初治的Ⅲb/Ⅳ期非小细胞肺癌患者95例,分为联合组50例和化疗组45例,比较两组患者... 目的研究树突状细胞(DC和细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效。方法回顾性分析2014年1月—2016年4月就诊于辽宁省人民医院初治的Ⅲb/Ⅳ期非小细胞肺癌患者95例,分为联合组50例和化疗组45例,比较两组患者的治疗结局。结果联合组客观缓解率(ORR和疾病控制率(DCR)分别为44%和N74%,化疗组分别为24.4%和N53.5%,差异均有统计学意义P=0.046、0.036)。联合组的中位无进展生存时间(VFS)为7.7个月,化疗组为6.4个月,差异无统计学意义p=0.092)。结论CD-CIK细胞免疫治疗联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌,DCR、ORR均优于单纯化疗,因此其可作为晚期非小细胞肺癌患者的一线治疗选择。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 树突状细胞 细胞因子诱导杀伤细胞 免疫治疗 化疗
肿瘤抗原负载的DC-CIK细胞增殖能力及对肝癌细胞HepG2的杀伤活性研究
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作者 王福立 孙银萍 +4 位作者 魏本尊 秦杰 刘振国 李岩 邱菊 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2019年第1期1-5,共5页
目的观察肿瘤抗原负载的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养后的增殖能力及对肝癌细胞HepG2的杀伤活性。方法采用液氮反复冻融法制备肝癌细胞HepG2抗原。应用血细胞分离机采集健康供血者单个核细胞,诱导并分离出DC、CIK... 目的观察肿瘤抗原负载的树突状细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养后的增殖能力及对肝癌细胞HepG2的杀伤活性。方法采用液氮反复冻融法制备肝癌细胞HepG2抗原。应用血细胞分离机采集健康供血者单个核细胞,诱导并分离出DC、CIK,用肿瘤抗原冲击DC获得Ag-DC,将CIK分为3组,一组为单纯CIK,二组以DC∶CIK=1∶5比例混合,三组以Ag-DC∶CIK=1∶5比例混合。3组细胞分别记作:CIK组、DC-CIK组和Ag-DC-CIK组。观察3组细胞的增殖能力和细胞表型,并用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定3组细胞对肝癌细胞HepG2的杀伤活性。结果3组细胞随着培养时间的延长增殖速度逐渐增快,在共同培养的第9天、第12天和第15天时Ag-DC-CIK的增殖倍数(61.32±1.72、190.83±3.53、399.09±5.60)均明显高于同时间CIK的增殖倍数(22.47±2.07、55.91±1.81、83.20±2.34)和DC-CIK的增殖倍数(40.26±2.49、125.03±4.16、251.55±3.25),3组间差异有统计学意义(F=185.78,P=0.033;F=297.35,P=0.018;F=455.37,P<0.001),进一步两两比较发现,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。Ag-DC-CIK对HepG2细胞的杀伤活性在效靶比为5∶1、10∶1和20∶1时分别为31.71%±0.29%、42.43%±1.86%和57.69%±1.11%,均显著高于CIK组(12.11%±1.14%、21.30%±0.52%和30.71%±1.26%)和DC-CIK组(20.06%±0.67%、29.89%±1.37%和39.11%±0.92%),3组间差异有统计学意义(F=159.64,P=0.037;F=199.36,P=0.025;F=302.08,P<0.001),进一步两两比较发现,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。CIK、DC-CIK和Ag-DC-CIK 3组细胞培养至第15天,流式细胞仪分析表明3组细胞均表达CD3^+CD8^+、CD3^+CD56^+双阳性细胞,且Ag-DC-CIK组CD3^+CD8^+、CD3^+CD56^+双阳性细胞的含量(88.12%±1.24%、61.35%±2.63%)明显高于CIK组(54.37%±3.08%、18.22%±1.83%)和DC-CIK组(69.80%±1.46%、39.51%±2.17%),3组间差异有统计学意义(F=414.32,P<0.001;F=378.60,P<0.001),进一步两两比较发现,差异均具有统计学意义(均P<0.001)。结论肿瘤抗 展开更多
关键词 树突细胞 杀伤细胞 细胞系 肿瘤
HepG2细胞外泌体冲击树突状细胞介导的抗肿瘤作用 预览
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作者 章菊 叶书来 +1 位作者 张昌龙 周倩 《癌变.畸变.突变》 CAS 2019年第1期29-34,共6页
目的:分析来源于肝癌HepG2细胞外泌体的免疫原性物质,为基于树突状细胞(DCs)的肝癌免疫治疗寻找合适的肿瘤抗原提供思路。方法:用透射电镜和Western blot方法鉴定肝癌HepG2细胞外泌体的形态和蛋白表达;用终浓度为8μg/mL的外泌体冲击DCs... 目的:分析来源于肝癌HepG2细胞外泌体的免疫原性物质,为基于树突状细胞(DCs)的肝癌免疫治疗寻找合适的肿瘤抗原提供思路。方法:用透射电镜和Western blot方法鉴定肝癌HepG2细胞外泌体的形态和蛋白表达;用终浓度为8μg/mL的外泌体冲击DCs,流式细胞术检测DCs表面分子的变化;将外泌体冲击的DCs与T淋巴细胞共培养5 d,采用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)荧光染色法检测淋巴细胞增殖,Annexin-V/PI双染法检测淋巴细胞对肿瘤的杀伤效应。结果:肝癌HepG2细胞的外泌体表达CD63、CD81标志性蛋白,同时携带大量的肿瘤抗原甲胎蛋白(AFP)和热休克蛋白HSP70、HSP90,不表达细胞蛋白calnexin。与未成熟DCs组比较,外泌体冲击DCs后上调其表面分子如CD83、CD80、CD86的表达(P<0.01);且可促进T淋巴细胞增殖(P<0.01),增加T细胞介导的肿瘤特异性和非特异性杀伤效应(P<0.01)。结论:肝癌HepG2细胞外泌体可能携带大量肿瘤抗原,刺激DCs成熟,可能是基于DCs的肝癌或其他肿瘤免疫治疗潜在的抗原谱。 展开更多
关键词 外泌体 肝癌 树突状细胞 HEPG2细胞
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乙型肝炎病毒对NK 细胞免疫活性的影响作用分析 预览
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作者 黄红连 《实验与检验医学》 CAS 2019年第4期606-609,共4页
目的研究乙型肝炎病毒对NK细胞免疫活性的影响作用并予以分析,目的在于为临床乙型肝炎病毒感染的防治提供参考依据。方法选取2015年1月-2017年12月于我院进行体检的健康人员120例为研究对象,采集所有研究对象的外周血。并分别对外周血... 目的研究乙型肝炎病毒对NK细胞免疫活性的影响作用并予以分析,目的在于为临床乙型肝炎病毒感染的防治提供参考依据。方法选取2015年1月-2017年12月于我院进行体检的健康人员120例为研究对象,采集所有研究对象的外周血。并分别对外周血来源的NK细胞进行单独培养,或与浆样树突状细胞(pDC)共同培养,或加入来源于HepG2.2.15细胞的乙型肝炎病毒。分析乙型肝炎病毒对NK细胞分泌IFNγ的影响、乙型肝炎病毒对pDC诱导的NK细胞分泌IFNγ的影响、乙型肝炎病毒对pDC诱导的NK细胞杀伤靶细胞K562的影响。结果纯化NK细胞、IL-12与IL-18刺激后的NK细胞分泌IFNγ量分别为(9.92±1.35)ng/ml、(10.15±1.38)ng/ml,组间对比差异无统计学意义(P>0.05)。CpG寡脱氧核酸刺激、疱疹病毒刺激后的pDC诱导的NK细胞分泌IFNγ量分别为(1.22±0.42)ng/ml、(1.34±0.41)ng/ml,均明显高于单纯pDC诱导NK细胞分泌IFNγ量(0.43±0.04)ng/ml,而单纯pDC诱导NK细胞分泌IFNγ量又明显高于乙型肝炎病毒刺激后的pDC诱导的NK细胞分泌IFNγ量(0.21±0.01)ng/ml,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。pDC诱导的NK细胞以及乙型肝炎病毒刺激+pDC诱导的NK细胞组的靶细胞K562死亡率分别为(71.52±4.31)%、(70.87±4.28)%,均明显高于纯化NK细胞的(38.54±3.25)%,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);而pDC诱导的NK细胞与乙型肝炎病毒刺激+pDC诱导的NK细胞组的靶细胞K562死亡率相比不明显,组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论乙型肝炎病毒对pDC所诱导的NK细胞分泌IFNγ具有明显的抑制作用,从而在一定程度上增加了乙型肝炎病毒持续感染的风险。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 自然杀伤细胞 干扰素Γ 树突细胞 免疫活性
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自然杀伤细胞通过树突状细胞调控衣原体肺部感染中Th17/Treg免疫应答平衡
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作者 周小青 李静 +3 位作者 赵蕾 唐伟 杨熙 王红 《山东大学学报:医学版》 CAS 北大核心 2019年第4期15-19,共5页
目的探索鼠衣原体(Cm)肺部感染中自然杀伤(NK)细胞调节Th17/Treg应答的作用机制。方法建立鼠Cm肺部感染模型,采用CD11c~+磁珠分选NK细胞去除鼠和同型对照抗体处理鼠的脾树突状细胞(DCs),转输至野生鼠体内,对应小鼠分为NK~-DCs组(n=13)和... 目的探索鼠衣原体(Cm)肺部感染中自然杀伤(NK)细胞调节Th17/Treg应答的作用机制。方法建立鼠Cm肺部感染模型,采用CD11c~+磁珠分选NK细胞去除鼠和同型对照抗体处理鼠的脾树突状细胞(DCs),转输至野生鼠体内,对应小鼠分为NK~-DCs组(n=13)和NK~+DCs组(n=13)。经Cm攻击感染后,比较两组小鼠疾病严重程度;流式细胞术分析脾和肺中Th17及Treg应答变化。结果与转输NK~+DCs小鼠相比,转输NK~-DCs的小鼠病情加重,表现为体质量下降、肺载菌量增加及病理损伤加重,同时脾和肺中Th17应答降低,Treg应答增强,Th17/Treg应答失衡,差异均有统计学意义。结论在Cm肺部感染中,NK细胞能够通过调控DCs有效启动Th17应答,抑制Treg应答,发挥抗感染免疫保护作用。 展开更多
关键词 衣原体 自然杀伤细胞 树突状细胞 Th17/Treg应答 肺部感染
DC-CIK与化疗、射频消融联用治疗结直肠癌术后肝转移疗效 预览
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作者 赵海燕 云升 +2 位作者 李超 苏乌云 张雪琳 《现代仪器与医疗》 CAS 2019年第2期57-61,共5页
目的:观察树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)联合化疗、射频消融治疗结直肠癌术后肝转移疗效。方法:回顾性分析我院2012年8月至2015年8月收治的结直肠癌术后肝转移患者临床资料,全身化疗联合射频消融治疗者归入对照组,化疗、射... 目的:观察树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)联合化疗、射频消融治疗结直肠癌术后肝转移疗效。方法:回顾性分析我院2012年8月至2015年8月收治的结直肠癌术后肝转移患者临床资料,全身化疗联合射频消融治疗者归入对照组,化疗、射频之外再联合DCCIK治疗者归入观察组,比较两组患者肝转移灶切除率、治疗效果以及治疗前后T细胞亚群变化情况、生存率及生活质量。结果:治疗后观察组肝转移灶切除率24.66%高于对照组的10.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组客观控制率(ORR)64.38%高于对照组的29.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前T细胞亚群各指标组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组CD4+与CD4+/CD8+均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后CD8+组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前两组肿瘤标志物水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组CEA及CA125水平较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组1年生存率、2年生存率及3年生存率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组情感功能、生理功能、社会生活与日常生活评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:常规治疗基础上联合DC-CIK治疗可提高结直肠癌术后肝转移患者免疫功能及肝转移灶切除率,改善生存率及生活质量。 展开更多
关键词 结直肠癌 肝转移 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 化疗
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Wnt5a对成熟树突状细胞诱导初始性T细胞向记忆性T细胞分化的作用
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作者 罗蕾 李震宇 +4 位作者 罗光恒 黄山 黄延彪 夏旻 邬卫东 《武汉大学学报:医学版》 CAS 2019年第2期173-180,共8页
目的:利用负载供者抗原的未成熟或成熟树突状细胞(imDCs或mDCs)体外诱导受者初始性T细胞(TNs)的活化、增殖和分化,并研究Wnt5a基因在这一过程中的可能的作用及其机制。方法:构建高表达Wnt5a基因的重组腺病毒,转染imDCs。建立同种异体小... 目的:利用负载供者抗原的未成熟或成熟树突状细胞(imDCs或mDCs)体外诱导受者初始性T细胞(TNs)的活化、增殖和分化,并研究Wnt5a基因在这一过程中的可能的作用及其机制。方法:构建高表达Wnt5a基因的重组腺病毒,转染imDCs。建立同种异体小鼠皮肤移植模型,分选培养受体小鼠的imDCs,mDCs和T_Ns。在96孔板中用负载供者抗原的imDCs、转染腺病毒Ad/CMV/Wnt5a的imDCs、转染腺病毒Ad/CMV/LacZ的imDCs,和正常mDCs与记忆性T细胞(TMs)进行混合淋巴细胞反应。流式细胞术检测T_Ns向T_Ms分化的情况。ELISA检测共培养上清中IL-2,IL-10,IFN-γ细胞因子的浓度。RT-PCR检测T细胞中Wnt/β-catenin通路相关的基因表达情况。双荧光素酶报告基因检测混合淋巴细胞反应中T_Ns的β-catenin/TCF信号通路转录活性。结果:RT-PCR和免疫荧光检测发现mDCs中的Wnt5a的表达水平显著高于imDCs(P<0.05)。与负载供者抗原的mDCs相比,imDCs组可显著诱导T_Ns向T_Ms的分化,上调IL-2和IFN-γ细胞因子的分泌(P<0.05)。双荧光素酶报告系统检测显示mDCs共培养TNs可显著增强β-catenin/TCF信号通路转录活性(P<0.05)。此外,imDCs通过转染高表达Wnt5a基因的重组腺病毒,也显著提高了其诱导TNs向T_Ms的分化的能力,同时也显著活化了Wnt/β-catenin信号通路(P<0.05)。结论 :在负载供者抗原的DCs与受者T_Ns混合淋巴细胞反应过程中,可诱导T_Ms分化形成,其中DCs的Wnt5a基因介导的T_Ns内β-catenin/TCF信号通路转录激活可能是其中一条重要的途径。 展开更多
关键词 树突状细胞 记忆性T细胞 Wnt基因 β-catenin/TCF信号通路
脓毒症患者免疫紊乱中树突细胞与T细胞分化及表型研究 预览
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作者 曲冰杰 郭剑颖 王宏伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1487-1490,共4页
目的:观察脓毒症患者T细胞及树突细胞(DCs)的分化及表型,探讨调节性DCs(DCregs)诱导脓毒症免疫功能障碍的机制。方法:收集脓毒症患者和健康对照者各10例。脓毒症患者根据病程分为脓毒症早期(1~2 d)和脓毒症后期(7~8 d)两个阶段,分离外... 目的:观察脓毒症患者T细胞及树突细胞(DCs)的分化及表型,探讨调节性DCs(DCregs)诱导脓毒症免疫功能障碍的机制。方法:收集脓毒症患者和健康对照者各10例。脓毒症患者根据病程分为脓毒症早期(1~2 d)和脓毒症后期(7~8 d)两个阶段,分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测CD4~+与CD8~+T细胞亚群比例及程序性细胞死亡分子-1(PD-1)表达,以及髓系和类浆系DCs亚群及HLA-DR、程序性细胞死亡分子配体-1(PD-L1)表达。结果:脓毒症组Lin~-CD33~+HLA-DR~+髓系DCs持续下降,且均显著低于对照组(P<0.05),而脓毒症组Lin~-CD33~+PD-L1~+髓系DCs持续升高,且后期显著高于对照组(P<0.05);脓毒症组Lin~-CD123~+HLA-DR~+类浆系DCs呈持续下降,在后期显著低于对照组(P<0.05);脓毒症组早期LinCD123~+PD-L1~+类浆系DCs显著高于对照组(P<0.05),而后期较早期出现显著下降(P<0.05)。脓毒症组CD4~+/CD8~+T细胞比例较对照组显著降低(P<0.05),并且后期较早期进一步下降(P<0.05)。脓毒症组CD4~+T细胞PD-1表达均较对照组升高(P>0.05),CD8~+T细胞PD-1表达在脓毒症早期升高(P>0.05),后期进一步上升且显著高于对照组及脓毒症早期(P<0.05)。结论:脓毒症出现T细胞免疫功能下降与DCregs分化密切相关,PD-1/PD-L1通路参与了脓毒症免疫抑制的发生过程。 展开更多
关键词 脓毒症 T细胞 树突细胞 HLA-DR PD-1 PD-L1
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DC-CIK细胞联合125I粒子组织间植入治疗中晚期肝癌的临床研究 预览
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作者 吴念 冯虎翼 +3 位作者 刘桦 陈元文 曹阳 余福财 《现代医药卫生》 2019年第10期1488-1492,共5页
目的探讨树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)即DC-CIK细胞联合125I放射性粒子植入治疗中晚期肝癌的疗效。方法将2013年10月至2017年6月该院收治的80例中晚期肝癌患者动态随机分为联合组(A组)、125I粒子组(B组)、DC-CIK组(C组)... 目的探讨树突状细胞(DC)-细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)即DC-CIK细胞联合125I放射性粒子植入治疗中晚期肝癌的疗效。方法将2013年10月至2017年6月该院收治的80例中晚期肝癌患者动态随机分为联合组(A组)、125I粒子组(B组)、DC-CIK组(C组)和对照组(D组),每组20例。A组行125I粒子植入后即开始给予DC-CIK细胞治疗,B组仅给予粒子植入治疗,C组仅给予DC-CIK免疫细胞治疗,D组给予常规对症治疗。治疗结束后比较各组患者免疫功能、生活质量、生存率等。结果A组患者治疗后CD3^+、CD4^+、CD16^+CD56^+、CD3^+CD56^+、CD4^+/CD8^+比值明显上升,CD8^+效应细胞比例有所下降,与治疗前及其他3组治疗后比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组患者中生活质量改善者明显多于其他3组,3、6、12个月生存率均明显高于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论DC-CIK细胞联合125I粒子植入治疗中晚期肝癌安全、有效,对提高患者免疫功能、改善生活质量、延长生存率、提高疗效均具有重要作用。 展开更多
关键词 树突细胞 细胞因子类 杀伤细胞 淋巴因子激活 肝细胞 碘放射性同位素
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慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中树突状细胞、辅助性T细胞17/调节性T细胞的表达及其意义
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作者 张兰英 陈杰 +3 位作者 张奕 顾延会 饶习敏 欧阳瑶 《中华内科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期125-132,共8页
目的通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织中成熟树突状细胞、未成熟树突状细胞、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞的变化,探讨树突状细胞经Th17/调节性T细胞途径在COPD发病机制中的作用。方法取2015年9月至2016年3月因肺癌行肺... 目的通过观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺组织中成熟树突状细胞、未成熟树突状细胞、辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞的变化,探讨树突状细胞经Th17/调节性T细胞途径在COPD发病机制中的作用。方法取2015年9月至2016年3月因肺癌行肺叶切除术患者的肺组织,依据其病史资料分为无吸烟无COPD组(20例)、吸烟无COPD组(22例)、吸烟COPD组(20例)。免疫组化法检测3组患者肺组织CD80、趋化因子受体6(CCR6)、白细胞介素-17A(IL-17A)、叉头状转录因子P3(FoxP3)表达,流式细胞技术检测肺组织悬液中成熟树突状细胞、未成熟树突状细胞、Th17、调节性T细胞的变化,并进行相关性分析。结果(1)免疫组化显示,吸烟COPD组肺组织CD80(2.31±1.61)、FoxP3(2.20±1.38)阳性表达细胞数减少,CCR6(8.74±4.63)、IL-17A(9.43±3.81)阳性表达细胞数增多(P值均<0.05);(2)流式细胞术显示,吸烟COPD组肺组织悬液中成熟树突状细胞(0.55±0.15)、调节性T细胞(0.60±0.18)降低,未成熟树突状细胞(4.20±0.21)、Th17(4.79±1.16)增多(P值均<0.05);(3)吸烟COPD组,Th17、Th17/调节性T细胞比值与第1秒用力呼气容积(FEV1)占预计值百分比、用力肺活量(FVC)占预计值百分比、FEV1/FVC呈负相关(r分别为-0.902、-0.905、-0.474、-0.935、-0.869、-0.491,P值均<0.05),调节性T细胞与FEV1占预计值百分比、FVC占预计值百分比、FEV1/FVC呈正相关(r分别为0.747、0.716、0.274,P值均<0.05)。结论COPD中树突状细胞成熟障碍,且存在Th17/调节性T细胞失衡,倾向Th17介导的促炎性反应,可能参与了COPD的发病机制。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 树突细胞 辅助性T细胞17 T淋巴细胞 调节性
猪外周血及骨髓源树突状细胞分化方法的建立 预览
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作者 赵文影 姜一峰 +9 位作者 虞凌雪 赵款 朱豪杰 高飞 李国新 张玉娇 李丽薇 周艳君 刘雪兰 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第2期61-65,共5页
本研究对猪源树突状细胞(dendritic cell,DC)的分化条件进行了摸索,通过对试验猪只日龄的选择、刺激物浓度和刺激时间的比较以及DC表面分子标记的选择,确定了猪外周血和骨髓源DC的分化条件。静脉采集15日龄猪只抗凝血分离获得外周血单... 本研究对猪源树突状细胞(dendritic cell,DC)的分化条件进行了摸索,通过对试验猪只日龄的选择、刺激物浓度和刺激时间的比较以及DC表面分子标记的选择,确定了猪外周血和骨髓源DC的分化条件。静脉采集15日龄猪只抗凝血分离获得外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),贴壁12h后,用终浓度80ng/mL的GM-CSF和40ng/mL的IL-4共同刺激7d,用CD152作为DC的表面分子标志,试验结果显示:贴壁的单核细胞在GM-CSF和IL-4的共同刺激下,7d后能够将超过60%的单核细胞刺激分化为CD152^+的DC。取15日龄猪只的股骨和胫骨并冲洗骨髓腔,参考外周血来源DC的分化方法,结果显示:可以获得约63%的骨髓源单核细胞刺激分化为CD152^+的DC。本研究建立的DC分化方法为进一步研究病毒感染后猪体建立获得性免疫应答的机制奠定了平台基础。 展开更多
关键词 外周血单核细胞 树突状细胞 细胞分化
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重组腺相关病毒介导B细胞表面分化成熟抗原269基因转染树突状细胞治疗多发性骨髓瘤的体外实验研究 预览
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作者 陈海梅 徐运孝 +2 位作者 李清照 沈婵娟 胡国瑜 《临床内科杂志》 CAS 2019年第1期51-54,共4页
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导B细胞表面分化成熟抗原269(CD269)基因转染树突状细胞(DCs)对多发性骨髓瘤(MM)的治疗作用。方法取中南大学湘雅二医院健康人外周血单个核细胞,采用含粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(... 目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导B细胞表面分化成熟抗原269(CD269)基因转染树突状细胞(DCs)对多发性骨髓瘤(MM)的治疗作用。方法取中南大学湘雅二医院健康人外周血单个核细胞,采用含粒细胞.巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4的培养液进行体外诱导,并设置转染组、空载组和对照组,转染组培养第1d加入rAAV/CD269病毒液,空载组培养第1d加入rAAV病毒液,对照组培养第1d加入等量磷酸缓冲盐溶液,3组均于培养第5 d加入肿瘤坏死因子(TNF)-α仪诱导树突状细胞(DCs)成熟。观察分化细胞的形态学变化,检测3组DCs的CD269表达。将3组DCs分别加入自体T淋巴细胞,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTLs),检测CTLs中干扰素(IFN)-γ的表达,并检测3组中CTLs分别对人U266细胞、人MM原代细胞和阴性对照细胞的杀伤率和转染组不同效靶比下的杀伤率。结果细胞逐渐发生形态学改变且符合DCs形态特征。转染组DCs中CD269表达明显高于空载组和对照组(P<0.05)。转染组IFN-γ的表达率高于空载组和对照组(P<0.05)。转染组CTLs对人MM细胞株U226和人MM原代细胞的杀伤率均高于空载组和对照组(P<0.05)。当效靶比为1:1、5:1、10:1、20:1、50:1时,CTLs对人MM原代细胞的杀伤率分别为(13.24±1.29)%、(17.68±1.96)%、(25.66±2.17)%、(33.14±2.33)%、(39.74±2.56)%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论rAAV介导CD269基因转染DCs能够获得CTLs,上调IFN-γ表达,增强对人MM细胞株U226的杀伤作用,且效靶比越高,杀伤率也越高。 展开更多
关键词 重组腺相关病毒 B细胞表面分化成熟抗原269 基因转染 树突状细胞 多发性骨髓瘤
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健康人外周静脉血树突状细胞瘤苗诱导系统免疫效应细胞对BxPC-3的抑制与凋亡
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作者 杨秋喜 孙峥科 +8 位作者 李凯 徐亚晨 王海艳 龙平 陈有科 高良辉 Emmanuel CM 黄海溶 孙早喜 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期264-267,共4页
目的 体外观察诱导扩增的健康人或正常人(统称为健康人)外周静脉血树突状细胞(DCs)杂交瘤苗诱导系统免疫效应细胞(SIECs)对原位胰腺癌细胞株(BxPC-3)的抑制与凋亡作用。方法 以淋巴细胞分离液梯度离心获得健康人外周静脉血单核细胞(PBMC... 目的 体外观察诱导扩增的健康人或正常人(统称为健康人)外周静脉血树突状细胞(DCs)杂交瘤苗诱导系统免疫效应细胞(SIECs)对原位胰腺癌细胞株(BxPC-3)的抑制与凋亡作用。方法 以淋巴细胞分离液梯度离心获得健康人外周静脉血单核细胞(PBMCs),贴壁法获取DCs和去DCs的单核细胞(即SIECs),并分别用人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)、BxPC-3肿瘤特异性抗原(BxPC-3TSA)培养DCs和SIECs。5 d后收集DCs并计数,用PEG+10%二甲基亚砜(DMSO)做为融合剂,按10∶1、5∶1、1∶5将BxPC-3TSA致敏的DCs(简称敏DCs)、DCs分别与BxPC-3进行融合,获得敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3融合瘤苗。第7天,SIECs分别和敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3、敏DCs、DCs以40∶1混合培养1 d,分别收集混合培养细胞,并以混合细胞中的SIECs∶BxPC-3=10∶1的效靶比对BxPC-3进行膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法凋亡实验和细胞计数试剂盒(CCK-8)法毒性实验。结果 敏DCs、DCs与BxPC-3融合,以1∶1的比例融合时融合效果最好,融合率为40.0%。CCK-8法实验显示:敏DCs-BxPC-3、DCs-BxPC-3、敏DCs诱导SIECs对BxPC-3抑制率分别为53.1%、45.3%、78.8%,吸光度(A)值Dunnett T3检验显示组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。凋亡实验显示:敏DCs瘤苗、DCs瘤苗、敏DCs、DCs诱导SIECs对BxPC-3的凋亡率分别为24.17%, 11.43%, 85.87%, 29.94%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 肿瘤抗原序贯法致敏DCs使其获取抗原时出现叠加效应,从而发挥更好的抗肿瘤结果;早期DCs融合瘤苗在一定程度上可诱导SIECs抑制肿瘤细胞效果。 展开更多
关键词 树突状细胞 序惯法致敏 胰腺癌 瘤苗 细胞抑制 细胞凋亡
NB-UVB通过调节树突状细胞功能抑制特应性皮炎Th2炎症反应
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作者 黄海艳 李子卓 +3 位作者 刘小明 邹彦芬 于波 窦侠 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期638-643,共6页
目的探讨树突状细胞(DCs)参与窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗特应性皮炎(AD)可能的免疫学机制。方法在DC2.4细胞系中以TSLP刺激诱导树突状细胞活化继而用NB-UVB照射,观察Th2细胞因子的表达情况,并采用T/B缺陷的Rag1^-/-小鼠制备MC903诱导... 目的探讨树突状细胞(DCs)参与窄谱中波紫外线(NB-UVB)治疗特应性皮炎(AD)可能的免疫学机制。方法在DC2.4细胞系中以TSLP刺激诱导树突状细胞活化继而用NB-UVB照射,观察Th2细胞因子的表达情况,并采用T/B缺陷的Rag1^-/-小鼠制备MC903诱导的AD小鼠模型进行验证。结果在体外DCs培养中,TSLP可促进DCs细胞活化并上调Th2细胞因子表达,经NB-UVB照射后,DCs活化程度降低,Th2细胞因子IL-4(P<0.01)和IL-13(P=0.03)相对表达量下降。在AD小鼠模型中,NB-UVB照射可减轻MC903诱导的AD样皮炎,并且Th2细胞因子IL-4(P<0.01)及IL-13(P<0.01)mRNA相对表达量均显著下调,差异具有统计学意义。在DCs(P<0.01)及小鼠(P<0.01)中,NB-UVB照射所致的免疫抑制作用均伴随着TSLP受体TSLPR表达水平下调,差异均有统计学意义。结论体外实验和动物研究结果提示NB4JVB通过下调TSLPR、抑制DCs细胞活化从而抑制Th2炎症反应是其治疗AD的可能机制之一。 展开更多
关键词 特应性皮炎 树突状细胞 窄谱中波紫外线 胸腺基质淋巴细胞生成素
健脾益肠散对LPS诱导树突状细胞成熟标志CD83表达的影响 预览
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作者 蔺晓源 古娟 +4 位作者 钟日君 张嘉伦 赵应松 王敏 刘杰民 《中国中医急症》 2019年第8期1317-1320,1330共5页
目的观察健脾益肠散对体外脂多糖(LPS)诱导的树突状细胞(DC)成熟标志CD83表达的影响。方法原代分离、培养C57BL/6小鼠DC细胞,采用流式细胞术对DC细胞的主要标记物CDla进行鉴定,LPS诱导细胞构建DC细胞成熟模型。将培养的DC细胞随机分为... 目的观察健脾益肠散对体外脂多糖(LPS)诱导的树突状细胞(DC)成熟标志CD83表达的影响。方法原代分离、培养C57BL/6小鼠DC细胞,采用流式细胞术对DC细胞的主要标记物CDla进行鉴定,LPS诱导细胞构建DC细胞成熟模型。将培养的DC细胞随机分为空白对照组、模型组、中药含药血清组、空白血清组和IL-10组。干预24 h后,采用Western blotting、RT-PCR技术分别检测各组DC细胞中CD83的蛋白和mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组DC细胞CD83的蛋白和mRNA表达均明显增多(P <0.05或P <0.01);中药含药血清组DC细胞CD83的蛋白和m RNA表达减少,与模型组和空白血清组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论健脾益肠散对LPS诱导的DC细胞成熟标志CD83的蛋白和mRNA表达具有明显的抑制作用,可能是其发挥免疫耐受作用治疗溃疡性结肠炎(UC)的重要机制。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 健脾益肠散 树突状细胞 CD83 小鼠
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