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牙囊细胞成骨分化的研究进展 预览
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作者 杨爽 胡伟平 《口腔医学》 CAS 2018年第10期930-933,946共5页
牙源性干细胞对口腔领域的新型细胞疗法的发展具有重要意义,引起广泛的关注。在牙体组织发育或再生过程中,牙源性干细胞也非常适合研究细胞过程。牙囊中的多能未分化细胞是牙源性干细胞的一种,这些细胞已被用于分化为成牙骨质细胞和成... 牙源性干细胞对口腔领域的新型细胞疗法的发展具有重要意义,引起广泛的关注。在牙体组织发育或再生过程中,牙源性干细胞也非常适合研究细胞过程。牙囊中的多能未分化细胞是牙源性干细胞的一种,这些细胞已被用于分化为成牙骨质细胞和成骨细胞的细胞过程的研究,对于牙周组织具有重要意义。该文关于信号通路、转录因子、细胞外基质蛋白对牙囊细胞成骨分化的研究作一综述。 展开更多
关键词 牙囊细胞 成骨分化 转录因子 信号转导 牙周组织
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果蝇裸露角蛋白2对大鼠牙囊细胞成骨向分化的调控机制研究 预览
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作者 陈婵婵 凌均棨 +1 位作者 丁桂聪 廖志清 《口腔颌面修复学杂志》 2018年第4期246-252,共7页
目的:研究体外果蝇裸露角蛋白2(naked cuticle homolog 2,Nkd2)对大鼠牙囊细胞(rat dental follicle cells,rDFCs)成骨向分化的调控机制。方法:体外培养rDFCs,鉴定其组织来源并进行成骨向分化诱导,茜素红染色验证其成骨向分化能力... 目的:研究体外果蝇裸露角蛋白2(naked cuticle homolog 2,Nkd2)对大鼠牙囊细胞(rat dental follicle cells,rDFCs)成骨向分化的调控机制。方法:体外培养rDFCs,鉴定其组织来源并进行成骨向分化诱导,茜素红染色验证其成骨向分化能力,激光共聚焦检测检测Nkd2在中rDFCs的表达;采用小RNA干扰技术,干扰rDFCs中的Nkd2表达后进行成骨向分化诱导,western blot检测小RNA干扰对rDFCs表达成骨向分化因子Runx2、Col-1和OCN的影响;免疫荧光染色检测β-catenin在rDFCs中的分布变化,western blot检测小RNA干扰对rDFCs表达蓬乱蛋白1(Dishevelled-1,Dvl-1)的表达变化和Wnt/β-catenin信号通路激活剂Wnt3a与阻断剂FH535处理rDFCs后Nkd2的表达改变。结果:获得体外培养的rDFCs,并成功诱导其成骨向分化,茜素红染色显示矿化结节形成。Nkd2在rDFCs中的表达主要分布于胞浆和胞核周围。Nkd2小RNA干扰后的rDFCs中Runx2、Col-1蛋白表达明显下调,Dvl-1的表达下调。同时,Wnt3a处理组rDFCs中Nkd2蛋白表达量升高,而FH535处理组的表达量下降。结论:Nkd2通过Dvl-1调控Wnt/β-catenin信号通路促进rDFCs的成骨向分化;Nkd2是Wnt/β-catenin信号通路的靶基因,对Wnt/β-catenin信号通路起正反馈调节作用。 展开更多
关键词 Nkd2 牙囊细胞 成骨向分化 WNT/Β-CATENIN信号通路
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裸露角质蛋白同源物2正向调控大鼠牙囊细胞的成骨向分化研究 被引量:1
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作者 侯玉峦 凌均棨 +2 位作者 陈婵婵 权晶晶 杜宇 《中华口腔医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第7期432-438,共7页
目的检测裸露角质蛋白同源物2(nakedcuticlehomo/og2,Nkd2)在大鼠牙根形成和牙囊细胞成骨向分化过程中的表达变化,为探讨Nkd2在牙囊细胞成骨向分化中的具体分子机制提供实验基础。方法免疫组化法检测Nkd2在SD大鼠出生后1、3、5、7... 目的检测裸露角质蛋白同源物2(nakedcuticlehomo/og2,Nkd2)在大鼠牙根形成和牙囊细胞成骨向分化过程中的表达变化,为探讨Nkd2在牙囊细胞成骨向分化中的具体分子机制提供实验基础。方法免疫组化法检测Nkd2在SD大鼠出生后1、3、5、7、9、11及13d下颌第一磨牙牙胚近基底侧牙囊组织中的表达。茜素红染色和十六烷基吡啶观察分析大鼠牙囊细胞(dentalfolliclecellsofrat,rDVC)矿化诱导l、2、3周钙化结节形成情况。蛋白质印迹法分析rDFC矿化诱导1、2、3周Nkd2蛋白表达变化及其与成骨因子碱性磷酸酶(alkalinephosphatase,ALP)、Runt相关转录因子2(Runt.relatedtranscriptionfactor-2,RUNX2)和骨钙蛋白的关系。小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)沉默rDFC中Nkd2(siRNA干扰组,Si组),经矿化诱导1周,蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR(quantitativereal—timePCR,qPCR)检测Si组、阴性对照组(阴性对照RNA组,negativecontrolRNAgroup,Nc组)和空白对照组(mockcontrolgroup,Mock组)Nkd2及其mRNA与ALP、RUNX2和骨钙蛋白的表达变化。结果免疫组化结果显示,大鼠牙根形成中Nkd2在下颌第一磨牙牙胚基底侧牙囊组织中的表达呈现时间差异。随rDFC成骨诱导时间增加,茜素红染色矿化结节逐渐增多,十六烷基吡啶吸光度值逐渐增高(0、1、2、和3周吸光度值分别为0.017±0.005、0.702±0.044、1.812±0.531及2.767±0.253)。蛋白质印迹法结果显示,矿化诱导早期矿化组Nkd2(1.60±0.23)较对照组(1)表达显著上调(P〈0.05),Nkd2表达趋势与成骨相关因子表达趋势一致。siRNA干扰rDFC矿化诱导1周后si组较Nc、Mock组Nkd2和成骨因子在蛋白和mRNA水平显著降低(P〈O.05),Nc与Mock组Nkd2和成骨因子表达差异无统计学意义(P〉0.05)。Si、Nc和Mock组蛋白相对表达量分别为Nkd2:0.42±0.10、1.12±0.07、1� 展开更多
关键词 牙囊 裸露角质蛋白同源物2 牙囊细胞 成骨向分化
重组pEGFP-N1-IGF-Ⅰ基因表达质粒促进SD大鼠牙囊细胞增殖及早期成骨分化效应的实验研究
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作者 李亚明 田常生 +2 位作者 胡波 曹礼 宋锦璘 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期92-97,共6页
目的:通过胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合表达,构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-Ⅰ。体外实验分析脂质体介导pEGFP-N1-IGF-Ⅰ转染SD大... 目的:通过胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合表达,构建重组质粒pEGFP-N1-IGF-Ⅰ。体外实验分析脂质体介导pEGFP-N1-IGF-Ⅰ转染SD大鼠牙囊细胞(rat dental follicle cells,rDFCs)对其增殖及早期成骨分化效应的影响。方法:体外分离培养rDFCs并分为空白组、pEGFPN1-IGF-Ⅰ组、pEGFP-N1+脂质体组和pEGFP-N1-IGF-Ⅰ+脂质体组。采用荧光显微镜观察绿色荧光表达情况,MTT法检测细胞增殖活性,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测法检测ALP活性,PCR检测Ⅰ型胶原(collagen type 1,Col1)表达情况。结果:荧光显微镜观察结果表明pEGFP-N1-IGF-Ⅰ成功转染入rDFCs。转染后48 h,脂质体处理组(pEGFP-N1+脂质体组和pEGFP-N1-IGF-Ⅰ+脂质体组)转染效率较非脂质体处理组(空白组和pEGFP-N1-IGF-Ⅰ组)高。MTT结果表明,pEGFP-N1-IGF-Ⅰ能增强rDFCs细胞活性,而脂质体毒性对细胞活性具有抑制作用。ALP活性检测结果显示pEGFP-N1-IGF-Ⅰ能增强rDFCs的ALP活性。PCR结果证明pEGFP-N1-IGF-Ⅰ能增加Col1α1及Col1α2的相对表达量。结论:pEGFP-N1-IGF-I能促进rDFCs增殖和早期成骨分化效应,为IGF-Ⅰ基因在牙周组织修复再生中的应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-Ⅰ 牙囊细胞 增殖 早期成骨分化
双向差速法纯化大鼠牙囊细胞 预览 被引量:1
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作者 王丽萍 李伯琦 +2 位作者 铁晓敏 王琪 刘奕杉 《口腔疾病防治》 2016年第3期142-145,共4页
目的利用牙囊细胞和成釉细胞贴壁速度及酶消化分离速度不同的特点,建立一种简便、快速纯化大鼠牙囊细胞的方法。方法取新生5~6 d SD大鼠下颌第一磨牙牙胚,在体视显微镜下剥离牙囊及成釉器,剪碎后酶消化并混合培养,再利用差速贴壁法和差... 目的利用牙囊细胞和成釉细胞贴壁速度及酶消化分离速度不同的特点,建立一种简便、快速纯化大鼠牙囊细胞的方法。方法取新生5~6 d SD大鼠下颌第一磨牙牙胚,在体视显微镜下剥离牙囊及成釉器,剪碎后酶消化并混合培养,再利用差速贴壁法和差速传代法纯化牙囊细胞。结果原代细胞为牙囊细胞和成釉器细胞混合生长,差速传代培养到第2~3代可获得纯化的牙囊细胞。倒置显微镜下观察牙囊细胞呈梭形或三角形,免疫组织化学染色显示抗波形丝蛋白阳性,抗角蛋白阴性。结论双向差速法是一种高效、简便的纯化牙囊细胞的方法。 展开更多
关键词 牙囊细胞 纯化 差速贴壁 差速传代 免疫组织化学
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复合干细胞膜片移植修复后的牙周组织与正常牙周组织对正畸力反应的差异性研究 预览 被引量:4
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作者 吴琼 金作林 +2 位作者 李欣 王丽颖 刘佳 《口腔疾病防治》 2016年第7期395-401,共7页
目的比较在正畸力作用下经牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)与牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)复合细胞膜片诱导再生的牙周组织与正常牙周组织中牙齿移动速率的差异,探讨对再生组织实施正畸牙移动的可行... 目的比较在正畸力作用下经牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)与牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSCs)复合细胞膜片诱导再生的牙周组织与正常牙周组织中牙齿移动速率的差异,探讨对再生组织实施正畸牙移动的可行性。方法选择6只成年雄性比格犬,拔除上下颌双侧第一前磨牙。左上及右下象限为实验组,于拔牙窝远中制造4 mm×4 mm×4 mm骨缺损,移植DFCs/PDLSCs复合细胞膜片修复牙周组织缺损,诱导其重建;左下及右上象限为对照组。移植术后12周,安装正畸加力装置,以尖牙为支抗近中牵引第二前磨牙,力值150 g,牵引4周后测量实验组、对照组第二前磨牙近中移动速率,进行统计学分析。结果 DFCs/PDLSCs复合细胞膜片修复牙周组织缺损形成典型的"牙槽骨—牙周膜—牙骨质"样结构,具有良好的组织学特点,实验组与对照组第二前磨牙近中移动速率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论经复合干细胞膜片修复后的牙周组织对于正畸力刺激有良好反应,正畸牙齿移动速率与正常组织无明显差异。 展开更多
关键词 干细胞 细胞膜片 牙周组织再生 牙囊细胞 正畸
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骨形成蛋白-2和地塞米松对牙囊细胞的联合生物学效应
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作者 常秀梅 张克荣 +1 位作者 齐香薇 王书文 《临床口腔医学杂志》 2014年第7期398-400,共3页
目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)和地塞米松(Dex)联合作用对牙囊细胞(DFCs)增殖和分化的影响。方法:利用四唑盐比色法(MTT),细胞总蛋白考马斯亮蓝测定法,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别测定不同浓度的rhBMP和Dex单独... 目的:探讨重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)和地塞米松(Dex)联合作用对牙囊细胞(DFCs)增殖和分化的影响。方法:利用四唑盐比色法(MTT),细胞总蛋白考马斯亮蓝测定法,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒分别测定不同浓度的rhBMP和Dex单独和联合作用后DFCs的增殖和分化情况。结果:rhBMP对DFC的增殖和ALP的表达均有促进作用,低浓度Dex促进ALP的表达,但高浓度的Dex对DFC有增殖抑制作用,rhBMP和Dex联合作用后DFCs的增殖和ALP活性较单独作用有更明显的升高。结论:rhBMP和Dex联合作用对于促进DFCs的增殖和向成骨细胞分化有协同作用。 展开更多
关键词 牙囊细胞 骨形成蛋白 地塞米松 增殖 分化
颅骨锁骨发育不全患者牙囊细胞的体外生物学特征 预览 被引量:1
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作者 戈杰 张娟 +2 位作者 郭松松 傅瑜 江宏兵 《口腔生物医学》 2014年第4期169-173,共5页
目的:在成功分离培养正常同龄人牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)与颅骨锁骨发育不全(cleidocranial dysplasia, CCD)患者牙囊细胞(DFCs-CCD)的基础上,研究其一般体外生物学特征,包括增殖、克隆、成骨及破骨能力。方法... 目的:在成功分离培养正常同龄人牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)与颅骨锁骨发育不全(cleidocranial dysplasia, CCD)患者牙囊细胞(DFCs-CCD)的基础上,研究其一般体外生物学特征,包括增殖、克隆、成骨及破骨能力。方法:采用 BrdU细胞增殖实验与倍增法研究两种来源 DFCs 增殖能力;用结晶紫染液染色培养12 d 的两种 DFCs,分析其克隆形成能力;并用成骨诱导液诱导两种 DFCs 成骨,用 Western blot 和茜素红染色法分析成骨能力,用实时定量 PCR 方法研究其破骨基因表达差异。结果:DFCs-CCD 的 BrdU 阳性率高于 DFCs,同时 DFCs 的群体倍增时间为(1.834±0.093)d,而 DFCs-CCD 的则为(1.394±0.028)d,差异具有统计学意义(P <0.05);DFCs-CCD 的克隆集落多于 DFCs,但 Runt 相关转录因子2(Runt-related transcrip-tion factor 2,Runx2)、成骨细胞特异性转录因子 Osterix、骨钙素(osteocalcin,Ocn)等成骨相关蛋白表达水平低,而其茜素红染色所示钙化结节同样较少;同时,DFCs-CCD 高表达核因子-κB 受体活化因子(receptor activator for nuclear factor-κB,RANK)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)等破骨相关基因(P <0.05),而核因子-κB 受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)水平无统计学差异(P >0.05)。结论:相比 DFCs,DFCs-CCD 具有更强的增殖、克隆能力和更弱的成骨能力,而破骨基因表达紊乱。 展开更多
关键词 颅骨锁骨发育不全 牙囊细胞 增殖 成骨 破骨
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LIM矿化蛋白1在成骨分化前后人牙囊细胞中的表达 被引量:2
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作者 常秀梅 张克荣 +1 位作者 王书文 齐香微 《临床口腔医学杂志》 2014年第6期336-339,共4页
目的:研究人牙囊细胞成骨分化前后LIM矿化蛋白-1的表达。探讨LIM矿化蛋白-1在牙囊细胞向牙周组织分化过程中的作用。方法:组织块加酶消化法分离培养人牙囊细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养4周后,免... 目的:研究人牙囊细胞成骨分化前后LIM矿化蛋白-1的表达。探讨LIM矿化蛋白-1在牙囊细胞向牙周组织分化过程中的作用。方法:组织块加酶消化法分离培养人牙囊细胞,实验组培养液中加入矿化诱导剂,对照组不加矿化诱导剂。培养4周后,免疫细胞化学检测骨涎蛋白的表达;Von Kossa染色检测矿化结节的形成。矿化诱导前后,采用RT-PCR技术检测LIM矿化蛋白-1。结果:培养4周,实验组矿化结节形成,骨涎蛋白免疫细胞化学呈阳性表达, Von Kossa染色阳性;对照组未形成矿化结节,骨涎蛋白表达弱阳性,Von Kossa染色阴性。 RT-PCR结果显示LIM矿化蛋白-1在实验组强阳性表达,对照组弱表达。结论:LIM矿化蛋白-1与胚胎期人牙囊细胞的体外矿化过程相关,提示LIM矿化蛋白-1可能在胚胎期牙囊细胞的分化、矿化中发挥一定作用。 展开更多
关键词 牙囊细胞 分化 矿化 LIM矿化蛋白-1
携带RUNX2基因突变的人牙囊细胞的分离培养及鉴定 预览
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作者 轩东英 陈沛 +2 位作者 魏迪欣 谢宝仪 章锦才 《口腔生物医学》 2013年第2期57-60,共4页
目的:研究携带RUNX2基因突变位点的人牙囊细胞的分离、鉴定及意义。方法:收集颅骨锁骨发育不良(cleidocranial dysplasia,CCD)患者,鉴定其致病基因RUNX2的突变位点,通过离体培养CCD患者的未萌牙牙囊细胞,检测其携带的基因突变位点,... 目的:研究携带RUNX2基因突变位点的人牙囊细胞的分离、鉴定及意义。方法:收集颅骨锁骨发育不良(cleidocranial dysplasia,CCD)患者,鉴定其致病基因RUNX2的突变位点,通过离体培养CCD患者的未萌牙牙囊细胞,检测其携带的基因突变位点,鉴定RUNX2+/m牙囊细胞。结果:全血基因组测序结果发现,患者RUNX2基因第2外显子插入TG突变,该突变型为c.309_310insTG,成功分离培养及鉴定RUNX2+/m牙囊细胞,并发现RUNX2基因突变减少了牙囊细胞中此蛋白的表达水平。结论:成功分离培养携带RUNX2基因突变位点的人牙囊细胞,为进一步研究RUNX2基因在牙囊及牙齿萌出中的作用提供实验模型。 展开更多
关键词 RUNX2基因 牙囊细胞 基因突变
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SV40Tag基因片段转染SD大鼠牙囊细胞后相关生物学特性初步研究 预览 被引量:2
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作者 杨尊 刘婷 +2 位作者 郑鸿 邓锋 宋锦璘 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期4-7,12共5页
目的转染猿肾病毒SV40Tag基因片段至SD大鼠牙囊细胞,获取具有无限增殖能力和稳定生物学性状的牙囊细胞用于牙周组织工程的研究。方法利用293细胞包装病毒构建含SV40Tag的逆转录病毒载体,制备重组逆转录病毒并转染至sD大鼠牙囊细胞。... 目的转染猿肾病毒SV40Tag基因片段至SD大鼠牙囊细胞,获取具有无限增殖能力和稳定生物学性状的牙囊细胞用于牙周组织工程的研究。方法利用293细胞包装病毒构建含SV40Tag的逆转录病毒载体,制备重组逆转录病毒并转染至sD大鼠牙囊细胞。以正常牙囊细胞为对照,倒置显微镜下观察细胞形态及活力,分析细胞端粒酶活性,并检测其成骨分化及增殖特性。结果转染SV40Tag基因后,SD大鼠牙囊细胞传代至60代,生长依然旺盛,存在较强活力;牙囊细胞端粒酶活性显著增强,与对照组有统计学差异(P=-0.033);牙囊细胞成骨分化相关基因(碱性磷酸酶、骨钙素、骨形态发生蛋白、Runx2基因)、促有丝分裂相关基因(碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子)的电泳条带与对照组均无统计学差异(P〉0.05)。结论SV40Tag基因片段转染SD大鼠牙囊细胞后具有无限传代增殖和抗衰老的潜在能力,其细胞生物学特性相对稳定,可为牙周组织工程提供较理想的种子细胞来源。 展开更多
关键词 牙囊细胞 基因转染 端粒酶 成骨分化 增殖
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白细胞介素-1α和集落刺激因子-1对大鼠牙囊细胞骨保护素的影响 预览
12
作者 谢楠 杜宇 +1 位作者 谷海晶 凌均棨 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期417-421,共5页
目的:研究白细胞介素(IL)-1α和集落刺激因子(CSF)-1对体外培养大鼠牙囊细胞骨保护素(OPG)表达的影响。方法:组织块结合酶消化法体外培养原代牙囊细胞并传代。取50 ng/ml IL-1α或CSF-1刺激第4代牙囊细胞,western blot检测第0、... 目的:研究白细胞介素(IL)-1α和集落刺激因子(CSF)-1对体外培养大鼠牙囊细胞骨保护素(OPG)表达的影响。方法:组织块结合酶消化法体外培养原代牙囊细胞并传代。取50 ng/ml IL-1α或CSF-1刺激第4代牙囊细胞,western blot检测第0、1、3、6、12 h OPG表达。采用不同浓度(0、4、10、50、250 ng/ml)的IL-1α或CSF-1孵育第4代牙囊细胞12 h,western blot检测OPG表达。结果:western blot结果显示随着IL-1α刺激时间和浓度的增加,OPG条带逐渐加深。随着CSF-1刺激时间的增加,OPG条带变浅但高于对照组;各CSF-1浓度组OPG条带无明显变化趋势,但高于对照组。结论:IL-1α、CSF-1均可上调大鼠牙囊细胞内OPG蛋白水平。 展开更多
关键词 牙囊细胞 白细胞介素-1Α 集落刺激因子-1 骨保护素
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甲状旁腺激素对人牙囊前体细胞核因子κB受体激活因子配体和骨保护素mRNA表达的影响 预览
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作者 荆晓艳 贾智 +1 位作者 刘大勇 赵梦明 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2011年第11期 615-619,共5页
目的:研究不同浓度、不同作用时间的甲状旁腺激素(Parathyroid Hormone,PTH)对体外培养的人牙囊前体细胞表达核因子κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,... 目的:研究不同浓度、不同作用时间的甲状旁腺激素(Parathyroid Hormone,PTH)对体外培养的人牙囊前体细胞表达核因子κB受体激活因子配体(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA的影响。方法:原代培养和纯化人牙囊前体细胞,取生长状况良好的第3~5代人牙囊前体细胞,与不同浓度(0.1、1、10、100 ng/mL)重组人PTH共孵育,分别用RT-PCR检测不同浓度PTH作用2 h和100 ng/mL PTH作用不同时间点人牙囊前体细胞RANKL、OPG的mRNA表达,以GAPDH作为内参,进行灰度值比较。结果:随着PTH浓度(0.1、1、10、100 ng/mL)和PTH作用时间(2、4、8 h)的增加,人牙囊前体细胞RANKL mRNA的表达逐渐增高,OPG mRNA的表达逐渐降低。不同浓度组间和不同时间之间相比,RANKL和OPG mRNA表达量均有显著性差异(P〈0.05)。结论:PTH可增强体外培养的人牙囊前体细胞RANKL mRNA的表达,降低OPG mRNA的表达。 展开更多
关键词 甲状旁腺激素 牙囊前体细胞 核因子κB受体激活因子配体 骨保护素
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牙囊细胞与纳米晶羟基磷灰石/胶原复合材料体外相容性研究 预览
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作者 叶国 董伟 +1 位作者 吴亚菲 付钢 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第17期 2189-2190,2193,F0002,共4页
目的探讨大鼠牙囊细胞(DFCs)与纳米晶羟基磷灰石/胶原复合材料(nHAC)的相容性,为二者在牙周组织工程中的应用提供依据。方法将大鼠DFCs与nHAC在体外复合培养,通过倒置显微镜、扫描电镜观察细胞与材料的复合情况,用MTT法、碱性... 目的探讨大鼠牙囊细胞(DFCs)与纳米晶羟基磷灰石/胶原复合材料(nHAC)的相容性,为二者在牙周组织工程中的应用提供依据。方法将大鼠DFCs与nHAC在体外复合培养,通过倒置显微镜、扫描电镜观察细胞与材料的复合情况,用MTT法、碱性磷酸酶活性检测法检测材料对细胞增殖分化的影响。结果DFCs可以在nHAC材料表面及孔隙中良好的黏附、增殖和分化,复合培养5d后nHAC对DFCs的增殖分化表现出一定的促进作用。结论DFCs与nHAC具有良好的生物相容性。 展开更多
关键词 牙囊细胞 纳米羟基磷灰石/胶原复合材料 生物相容性
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白细胞介素-10对体外培养人牙囊细胞MCP-1表达的影响 预览
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作者 钱红 桑韩飞 +2 位作者 金作林 段银钟 胡静 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2009年第11期613-615,623共4页
目的:研究白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)表达的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取第5代细胞加入25ng/mL IL-10分别作用0、1、3、6、9、12h,... 目的:研究白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)表达的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取第5代细胞加入25ng/mL IL-10分别作用0、1、3、6、9、12h,用RT-PCR法检测MCP-1mRNA表达的变化。取第5代人牙囊细胞加入25ng/mL IL-10分别作用0、2、4、6、8h,用ELISA法检测上清液中MCP-1蛋白的含量。结果:MCP-1mRNA表达在1-6h降低(P〈0.05),蛋白分泌在4-8h减少(P〈0.05)。结论:IL-10抑制体外培养人牙囊细胞中MCP-1的表达。MCP-1是重要的单核细胞趋化因子,因此IL-10通过降低MCP-1的表达对单核细胞进入牙囊发挥抑制作用。 展开更多
关键词 牙囊细胞 白细胞介素-10 单核细胞趋化蛋白-1 牙齿萌出
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白细胞介素-10对体外培养人牙囊细胞集落刺激因子-1表达的影响 预览 被引量:4
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作者 钱红 金作林 +3 位作者 顾泽旭 段银钟 陈学鹏 毕迎春 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期 393-396,共4页
目的:研究白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞集落刺激因子-1(colony stimulating factor-1,CSF-1)表达的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取第5代细胞加入25ng/ml IL-10作用0、1、3、6、9、12h,用RT-PCR法... 目的:研究白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞集落刺激因子-1(colony stimulating factor-1,CSF-1)表达的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取第5代细胞加入25ng/ml IL-10作用0、1、3、6、9、12h,用RT-PCR法检测CSF-1 mRNA表达的变化。然后取第5代细胞,加入25ng/ml IL-10作用0、2、4、6、8h,用ELISA法检测上清液中CSF-1蛋白的含量。结果:牙囊细胞经IL-10作用后,CSF-1 mRNA表达在3~12h降低,蛋白分泌在6~8h减少。结论:IL-10通过降低CSF-1的表达,间接地对单核细胞进入牙囊并在其中聚集发挥抑制作用,从而抑制破骨细胞吸收牙槽骨和牙齿萌出通道的形成。 展开更多
关键词 牙囊细胞 白细胞介素-10 集落刺激因子-1 牙齿萌出
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胰岛素对高糖条件下体外培养的大鼠牙囊细胞增殖、分化的影响 被引量:1
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作者 鄂玲玲 刘洪臣 +2 位作者 徐璐璐 王东胜 吕娇 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2008年第4期425-429,共5页
目的:探讨胰岛素对高糖条件下体外培养的大鼠牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)增殖、分化的影响。方法:取出生7d的SD大鼠上、下颌磨牙牙囊.原代培养牙囊细胞,选取生长状态良好的第4代细胞.在糖生理浓度(5.5mmol/L)和... 目的:探讨胰岛素对高糖条件下体外培养的大鼠牙囊细胞(dental follicle cells,DFCs)增殖、分化的影响。方法:取出生7d的SD大鼠上、下颌磨牙牙囊.原代培养牙囊细胞,选取生长状态良好的第4代细胞.在糖生理浓度(5.5mmol/L)和高糖条件下(16.5mmol/L和49.5mmol/L)与6μg/mL胰岛素共同孵育,分别于培养1、3、7、9d时采用M1Tr法和1-7d采用碱性磷酸酶试剂盒检测胰岛素对高糖条件下体外培养的大鼠牙囊细胞增殖、分化的影响。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:所培养的细胞波形丝蛋白阳性,角蛋白阴性。在第1、3天,16.5mmol/L葡萄糖促进第4代大鼠牙囊细胞的增殖,而49.5mmol/L葡萄糖抑制牙囊细胞的增殖,胰岛素下调16.5mmol/L葡萄糖下牙囊细胞的增殖,上调49.5mmol/L葡萄糖下牙囊细胞增殖;在第7、9天,高糖促进牙囊细胞增殖,胰岛素上调高糖下牙囊细胞的增殖。在1-7d内,高糖提高第4代大鼠牙囊细胞碱性磷酸酶活性,胰岛素下调高糖下牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P〈0.05)。结论:本实验培养的细胞是来源于外胚层间充质的牙囊细胞。实验结果表明,胰岛素能纠正急性高糖对大鼠牙囊细胞增殖和分化的影响。 展开更多
关键词 牙囊细胞 葡萄糖 胰岛素 细胞培养 大鼠
白细胞介素-10对体外培养人牙囊细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响 预览 被引量:1
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作者 钱红 金作林 +3 位作者 段银钟 顾泽旭 陈学鹏 毕迎春 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2008年第11期618-621,共4页
目的:研究白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞增殖和牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取生长状态良好的第5代细胞,用四甲基偶氮唑蓝法(MTF法)检测IL-10对细胞增殖的作用;用碱... 目的:研究白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)对体外培养人牙囊细胞增殖和牙囊细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法:体外培养人牙囊细胞,取生长状态良好的第5代细胞,用四甲基偶氮唑蓝法(MTF法)检测IL-10对细胞增殖的作用;用碱性磷酸酶试剂盒检测IL-10及其抑制剂对细胞碱性磷酸酶活性的作用。结果:0、1、10、25、50、100rig/mL IL-10对人牙囊细胞的增殖影响无显著性差异(P〉0.05);10mg/mL IL-10作用0、1、3、5、7d对人牙囊细胞的增殖影响无显著性差异(P〉0.05)。10mg/mLIL-10作用3~7d降低人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P〈0.05),10ng/mL IL-10抑制剂作用5~7d增加人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性(P〈0.05)。结论:IL—10对人牙囊细胞的增殖无影响。IL-10降低人牙囊细胞的碱性磷酸酶活性,说明IL—10抑制人牙囊细胞向成骨方向分化。 展开更多
关键词 牙囊细胞 白细胞介素-10 增殖 碱性磷酸酶
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大鼠牙囊细胞培养方法的探讨 预览 被引量:4
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作者 谷海晶 凌均棨 杜宇 《中山大学学报:医学科学版》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期 586-589,共4页
【目的】探讨大鼠牙囊细胞体外培养的方法。【方法】分离出大鼠牙囊组织,分别采用组织块培养法、细胞消化分散法、及改良组织块法进行牙囊细胞原代及传代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学观察,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】... 【目的】探讨大鼠牙囊细胞体外培养的方法。【方法】分离出大鼠牙囊组织,分别采用组织块培养法、细胞消化分散法、及改良组织块法进行牙囊细胞原代及传代培养,倒置相差显微镜下进行细胞形态学观察,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养至第3天,倒置相差显微镜观察发现,采用组织块培养法,见少数细胞从组织块爬出;而细胞消化分散法则可获得数量多的牙囊细胞,但与杂质细胞混杂生长;改良组织块法见量多、相对纯的牙囊细胞。电镜下牙囊细胞无桥粒,胞浆中含有高密度电子颗粒和大量粗面内质网。组织块法、细胞消化分散法和改良组织块法牙囊细胞培养成功率分别为80%、60%和100%;分别于10 d、7 d和6 d左右进行第一次传代。【结论】改良组织块法是一种良好的大鼠牙囊细胞培养方法。 展开更多
关键词 牙囊细胞 细胞培养 方法学
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差速传代纯化大鼠牙囊细胞 预览 被引量:4
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作者 刘晓辉 文玲英 +3 位作者 方军 林成 刘源 金岩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期 12-14,共3页
目的:建立一种简捷的分离培养和纯化大鼠牙囊细胞的方法。方法:分离出生后6dSD大鼠上下颌第一和第二磨牙完整牙胚,剥离牙囊和成釉器,剪碎后酶消化并混合培养,再利用多次差速传代纯化牙囊细胞。结果:原代细胞为牙囊细胞和成釉器细... 目的:建立一种简捷的分离培养和纯化大鼠牙囊细胞的方法。方法:分离出生后6dSD大鼠上下颌第一和第二磨牙完整牙胚,剥离牙囊和成釉器,剪碎后酶消化并混合培养,再利用多次差速传代纯化牙囊细胞。结果:原代细胞为牙囊细胞和成釉器细胞混合生长,差速传代培养到第4代可获得纯化的牙囊细胞。倒置显微镜下观察牙囊细胞呈长梭形或三角形,免疫组化染色抗波形丝蛋白阳性,抗角蛋白阴性。结论:利用多次差速传代可从混合培养的原代细胞中获得纯化的牙囊细胞。 展开更多
关键词 差速传代 牙囊细胞 SD大鼠
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