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二烯丙基二硫化物体内抗鸡马立克氏病毒的研究 预览
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作者 张佩琪 王宜平 +5 位作者 孙若兰 胡雨菡 刘恩琪 罗毅峰 尹航 纪春晓 《经济动物学报》 CAS 2019年第1期17-22,28共7页
为探究大蒜中抗病毒的活性成分二烯丙基二硫化物(Diallyl disulfide,DADS)在体内抗鸡马立克氏病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)的效果,以弱毒疫苗株CVI988/Rispens接种鸡胚成纤维细胞(CEFS)获取大量的MDV,感染雏鸡建立模型。主要通过... 为探究大蒜中抗病毒的活性成分二烯丙基二硫化物(Diallyl disulfide,DADS)在体内抗鸡马立克氏病毒(Marek’s Disease Virus,MDV)的效果,以弱毒疫苗株CVI988/Rispens接种鸡胚成纤维细胞(CEFS)获取大量的MDV,感染雏鸡建立模型。主要通过病理组织切片的观察、血清生化指标的检测以及实时荧光定量QPCR等方法,探讨DADS在鸡体内抗鸡马立克氏病毒的有效浓度范围以及作用效果。结果表明:DADS浓度为250,500,750μmol/m L时能有效降低雏鸡血清中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)以及甘油三酯(TG)的水平,同时也有降低病毒拷贝数的作用。所以3种浓度的DADS能在疾病早期有效抑制患马立克氏病鸡肝脏肿瘤生长并具有体内抗病毒的效果。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫化物 鸡马立克氏病毒 抗病毒 疾病防治
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Chk1与Chk2高表达对DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期的影响 预览
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作者 王莉 曾颖 +5 位作者 夏红 刘芳 苏波 曾希 凌晖 苏琦 《中国医药导刊》 2019年第2期99-103,共5页
目的:在建立Chk1/2基因高表达人胃癌BGC823细胞的基础上,探讨Chk1/2基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法:采用流式细胞术检测DADS作用于Chk1/2高表达BGC823细胞周期分布情况。Westernblot检测Chk1、p... 目的:在建立Chk1/2基因高表达人胃癌BGC823细胞的基础上,探讨Chk1/2基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法:采用流式细胞术检测DADS作用于Chk1/2高表达BGC823细胞周期分布情况。Westernblot检测Chk1、p-Chk1、Chk2、p-Chk2、Cdc25C与CyclinB1表达变化。结果:流式细胞术显示,Chk1高表达组G2/M期细胞较对照组与空载体组增加(P<0.05)。而15mg·L^-1DADS处理后,各组G2/M期细胞较处理前增加,Chk1高表达组较空载体组差异有统计学意义(P<0.05)。Chk2高表达组G2/M期细胞较对照组与空载体组差异无统计学意义(P>0.05)。而DADS处理Chk2高表达组后,G2/M期细胞较对照组与空载体组差异有统计学意义(P<0.05)。Westernblot显示,Chk1/2蛋白及p-Chk2表达水平不受DADS的影响,但p-Chk1呈时间依赖性上调(P<0.05)。DADS处理Chk1高表达BGC823细胞12、24、36、48h后,Cdc25C磷酸酶与CyclinB1表达较对照组呈时间依赖性下降(P<0.05)。结论:DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期与激活Chk1/Cdc25C/CyclinB1通路有关。Chk1高表达可增强DADS阻滞G2/M期细胞的作用,而Chk2高表达对DADS无影响。 展开更多
关键词 人胃癌BGC823细胞 二烯丙基二硫 Chk1/Chk2高表达 G2/M期
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二烯丙基二硫诱导人胃癌MGC803细胞的差异microRNA表达 预览
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作者 唐仪 唐云云 +4 位作者 刘芳 苏坚 夏红 曾希 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期782-786,共5页
目的 研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达。方法 采用miRNAs芯片与qRT-PCR检测DADS诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达。结果 microRNA芯片检测显示,30 mg·L ^-1 DADS处理24 h后,M... 目的 研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达。方法 采用miRNAs芯片与qRT-PCR检测DADS诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达。结果 microRNA芯片检测显示,30 mg·L ^-1 DADS处理24 h后,MGC803细胞的差异miRNAs表达中,miR-200b、miR-22、miR-7、miR-143、miR-138、miR-34a、miR-150等7个miRNA表达明显上调,miR-222、miR-21、miR-15b、miR-182、miR-18a 等5个miRNA下调。qPCR证实,30 mg·L ^-1 DADS处理MGC803细胞后,miR-200b、miR-22、miR-7、miR-143、miR-138、miR-34a、miR-150等表达较未处理组明显上调( P <0.05)。且qPCR检测显示,miR-200b与miR-22在MGC-803、BGC-823、MKN-28、SGC-7901、HGC-27等各种人胃癌细胞表达较正常人胃癌GES-1细胞明显下调( P <0.05)。miR-200b与miR-22在胃癌组织中表达较正常胃组织明显下调( P <0.05)。结论 DADS诱导人胃癌MGC803细胞的差异miRNAs表达有7个miRNA明显上调,5个miRNA下调。miR-200b与miR-22在胃癌组织与细胞中表达下调。DADS可上调MGC803细胞miR-200b与miR-22表达。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌细胞 MGC803细胞 miRNAs芯片 MIRNA 差异表达
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二烯丙基二硫醚对蜂房哈夫尼菌群体感应的抑制作用 预览
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作者 王一芳 侯红漫 +2 位作者 张公亮 卢美杉 王越 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期161-165,共5页
以从海参中分离的优势腐败菌蜂房哈夫尼菌为对象,研究了二烯丙基二硫醚(DADS)对受其群体感应调控的生物膜及泳动性的抑制作用。采用CV026报告菌定性检测DADS的抗群体感应活性,利用96微孔板法、扫描电镜(SEM)和琼脂扩散法分析DADS对蜂房... 以从海参中分离的优势腐败菌蜂房哈夫尼菌为对象,研究了二烯丙基二硫醚(DADS)对受其群体感应调控的生物膜及泳动性的抑制作用。采用CV026报告菌定性检测DADS的抗群体感应活性,利用96微孔板法、扫描电镜(SEM)和琼脂扩散法分析DADS对蜂房哈夫尼菌生物膜及泳动性的抑制作用。结果表明,DADS作用于蜂房哈夫尼菌和CV026的最低抑菌浓度是48 mmol/L。在亚抑菌浓度下,与未处理对照组相比,DADS能够抑制由群体感应调控的CV026中紫色素的分泌而不抑制其生长。在0~12 mmol/L,随着浓度增加,DADS对生物膜的抑制率可达49.6%,对泳动性的抑制率达到73.5%。在12 mmol/L时,DADS能够抑制生物膜的形成。DADS能够抑制蜂房哈夫尼菌的群体感应活性、生物膜及泳动性,从而发挥防腐功效。 展开更多
关键词 蜂房哈夫尼菌 二烯丙基二硫醚 生物膜 泳动性
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RORα高表达对二烯丙基二硫抑制人胃癌细胞增殖与迁移侵袭的影响 预览
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作者 苏坚 夏红 +5 位作者 曾颖 苏波 刘芳 凌晖 曾希 苏琦 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第3期228-235,共8页
目的观察高表达RORα对二烯丙基二硫(DADS)抑制人胃癌MGC803细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法集落形成实验与流式细胞术检测细胞增殖与细胞周期;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。RT-PCR与Western blot分别检测RORα、M... 目的观察高表达RORα对二烯丙基二硫(DADS)抑制人胃癌MGC803细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法集落形成实验与流式细胞术检测细胞增殖与细胞周期;细胞划痕和Transwell实验分别检测细胞迁移与侵袭。RT-PCR与Western blot分别检测RORα、MMP-9和TIMP3 mRNA与蛋白表达水平。结果RT-PCR与Western blot检测显示,RORα高表达与DADS处理较对照组与空载体组RORαmRNA与蛋白表达明显上调,DADS+RORα高表达组上调更为显著(P<0.05)。与对照组和空载体组比较,RORα高表达与DADS处理组MMP-9表达下调,TIMP3表达上调,DADS+RORα高表达组改变最为显著。集落形成实验显示,RORα高表达与DADS处理组较对照组与空载体组的集落形成率明显降低。流式细胞术显示,与对照组和空载体组比较,RORα高表达与DADS处理组G2/M期细胞比率明显升高。细胞划痕和Transwell实验显示,RORα高表达与DADS处理组细胞迁移与侵袭能力明显降低。结论RORα高表达可通过上调TIMP3与下调MMP-9促进DADS阻滞MGC803细胞G2/M期和抑制增殖与迁移侵袭。 展开更多
关键词 RORα 二烯丙基二硫 人胃癌MGC803细胞 增殖 迁移 侵袭
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DADS对DJ-1核定位高表达人白血病HL-60细胞的影响(英文)
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作者 岳海燕 秦晶 +7 位作者 王文松 杨叶宁 易岚 王娟 唐玉娴 何洁 苏琦 谭晖 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第2期201-210,共10页
最近研究表明,DJ-1在许多肿瘤中过表达,而且DJ-1的核表达与肿瘤的生物学行为有关.本文主要研究二烯丙基二硫(DADS)对DJ-1核定位高表达人白血病HL-60细胞生物行为学的影响,阐明DJ-1在细胞核内的功能,为临床诊断及治疗过程提供一个潜在的... 最近研究表明,DJ-1在许多肿瘤中过表达,而且DJ-1的核表达与肿瘤的生物学行为有关.本文主要研究二烯丙基二硫(DADS)对DJ-1核定位高表达人白血病HL-60细胞生物行为学的影响,阐明DJ-1在细胞核内的功能,为临床诊断及治疗过程提供一个潜在的治疗靶点.通过基因转染技术建立核内高表达HL-60细胞株(DJ-1/HL-60),利用软琼脂集落形成实验、 MTT法、间接免疫荧光细胞化学实验、硝基蓝四氮唑(NBT)还原比色实验评估HL-60细胞的增殖与分化,DJ-1核定位过表达促进HL-60细胞的增殖并抑制其分化. Transwell迁移侵袭小室实验表明DJ-1核定位过表达可以促进HL-60的迁移和侵袭能力. Western blot结果表明DADS具有抑制HL-60细胞中核内DJ-1蛋白表达的能力.说明DJ-1核定位高表达具有促进HL-60细胞增殖和迁移侵袭及抑制HL-60细胞分化的作用,DADS可以诱导DJ-1核定位高表达HL-60细胞分化及抑制迁移侵袭, DJ-1核定位高表达可减弱DADS抑制HL-60细胞增殖的作用. 展开更多
关键词 HL-60细胞 二烯丙基二硫 DJ-1 细胞核定位 分化
HPLC用于大蒜及其制品中三种重要功效成分的同时测定
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作者 杨亮 李贝贝 +3 位作者 刘棋玮 尚文娟 李新霞 关明 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期284-289,共6页
建立一种以羟苯乙酯为替代对照品,同时检测大蒜及其制品中大蒜辣素、大蒜素、二烯丙基二硫醚3种重要功效成分的高效液相色谱(HPLC)方法。采用反相C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),乙腈-0. 02%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长... 建立一种以羟苯乙酯为替代对照品,同时检测大蒜及其制品中大蒜辣素、大蒜素、二烯丙基二硫醚3种重要功效成分的高效液相色谱(HPLC)方法。采用反相C18色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),乙腈-0. 02%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长:242 nm,流速:1. 0 mL/min,柱温24℃。结果表明,通过优化流动相组成、洗脱方式、检测波长及柱温等参数,可使包括羟苯乙酯在内的4种物质在64 min内实现基线分离,并在一定质量浓度范围内呈现良好的线性关系(r≥0. 9996),不同条件下相对校正因子的重现性良好,加标回收率为98. 5%~103. 3%,定量限为2. 5~10. 0 mg/kg。该方法为开发利用药用大蒜的植物资源和完善药用大蒜质量分析体系提供了技术支持。 展开更多
关键词 高效液相色谱(HPLC) 替代对照品法 大蒜辣素 大蒜素 二烯丙基二硫醚
二烯丙基二硫化物诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响 预览
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作者 张瑞涛 史惠蓉 +2 位作者 任芳 刘哲颖 姬鹏程 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期43-52,共10页
目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将不同浓度的DADS分别处理卵巢癌SK-OV-3和OVCAR-3细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠移植模型观察体... 目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)诱导G2/M期阻滞对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的分子机制。方法将不同浓度的DADS分别处理卵巢癌SK-OV-3和OVCAR-3细胞,采用MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,裸鼠移植模型观察体内抑瘤效果。进而应用流式细胞术检测细胞周期分布的变化,Westernblot检测细胞中G2/M检验点相关信号通路、增殖和凋亡相关蛋白的表达。结果MTT法检测显示,不同浓度的DADS作用SK-OV-3(F=247.86,P=0.000)和OVCAR-3细胞(F=302.54,P=0.000)后,随着DADS浓度增高,细胞增殖抑制率明显升高,呈浓度依赖性。DADS处理24h时SK-OV-3(F=335.12,P=0.000)和OVCAR-3细胞(F=347.43,P=0.000)的增殖抑制率明显高于处理12h和48h时的细胞抑制率,呈明显的时间依赖性。流式细胞术检测结果显示,不同浓度的DADS作用SK-OV-3、OVCAR-3细胞后,随着DADS浓度的增高,细胞凋亡率明显升高,呈明显的浓度依赖性(P<0.05)。DADS处理24h时SK-OV-3和OVCAR-3细胞的凋亡率明显高于处理12和48h时,呈明显的时间依赖性(P<0.05)。与空白处理组相比,腹腔注射DADS溶液可明显抑制卵巢癌细胞的裸鼠移植瘤体积(F=548.23,P=0.000;F=311.84,P=0.000)。将30mg/L的DADS作用于SK-OV-3和OVCAR-3细胞24h后,与空白处理细胞相比,DADS处理后的SK-OV-3和OVCAR-3细胞中处于G2期的细胞百分率明显增加(F=375.11,P=0.000;F=256.48,P=0.000)。将30mg/LDADS分别作用于SK-OV-3和OVCAR-3细胞24h后,p-Chk1(ser345)(F=108.89,P=0.013;F=97.58,P=0.018)、p-CDC25C(ser216)(F=87.25,P=0.025;F=114.25,P=0.009)、p-P53(ser15)(F=112.41,P=0.011;F=255.87,P=0.000)、P21WAF1(F=246.38,P=0.001;F=141.36,P=0.005)和p-CDK1(Thr14/Tyr15)蛋白(F=298.12,P=0.000;F=233.15,P=0.000)的表达明显增加,CDK1(F=308.24,P=0.000;F=257.55,P=0.000)和CyclinB1蛋白(F=223.15,P=0.001;F=241.28,P=0.000)的表达明显减少,增殖和凋亡相关蛋白PCNA(F=77.36,P=0.031;F=157.28,P=0.001)、Ki-67(F=205.64,P=0.007;F=315.22,P=0.000) 展开更多
关键词 二烯丙基二硫化物 卵巢上皮性癌 G2/M期阻滞 增殖 凋亡
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大蒜挥发油提取工艺优化及GC-MS分析 预览
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作者 刘阳 李莎莉 +3 位作者 吴琦 王丽虹 许悦 段金辉 《中国调味品》 北大核心 2018年第8期118-121,共4页
目的:优化大蒜挥发油提取工艺并分析其化学成分,为大蒜的开发利用提供依据。方法:通过正交试验确定水蒸气蒸馏法提取大蒜挥发油的工艺条件,并利用GC-MS进行成分分析。结果:大蒜挥发油提取的最佳工艺为超声时间35min、浸泡温度35℃、... 目的:优化大蒜挥发油提取工艺并分析其化学成分,为大蒜的开发利用提供依据。方法:通过正交试验确定水蒸气蒸馏法提取大蒜挥发油的工艺条件,并利用GC-MS进行成分分析。结果:大蒜挥发油提取的最佳工艺为超声时间35min、浸泡温度35℃、料液比1∶4、蒸馏时间2h,挥发油的实际提取率为0.280%。从该法提取的大蒜挥发油中鉴定出了32种成分,其中含硫化合物29种,占挥发油总量的88.15%,主要为二烯丙基二硫醚(35.11%)和二烯丙基三硫醚(26.15%)等烯丙基硫醚类化合物。结论:该法工艺简单、绿色环保,制备的大蒜挥发油含硫化合物含量高,有助于提高其药用价值。 展开更多
关键词 大蒜挥发油 水蒸气蒸馏 GC-MS 二烯丙基二硫醚 二烯丙基三硫醚
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沉默Chk2基因对DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期的影响 预览
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作者 谭亚丽 夏红 +4 位作者 曾颖 刘芳 苏波 曾希 苏琦 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第6期603-607,共5页
细胞周期检测点激酶1/2(Chk1/2)在参与G2/M期起着重要作用,本研究探讨沉默Chk2基因对二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞的影响。采用RNAi 技术沉默BGC823细胞Chk2基因,q-PCR与Western blot检测Chk2 mRNA与蛋白表... 细胞周期检测点激酶1/2(Chk1/2)在参与G2/M期起着重要作用,本研究探讨沉默Chk2基因对二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞的影响。采用RNAi 技术沉默BGC823细胞Chk2基因,q-PCR与Western blot检测Chk2 mRNA与蛋白表达。流式细胞术检测DADS与Chk2沉默BGC823细胞周期分布情况。Western blot检测Cdc25C与cyclin B1表达。流式细胞术显示,DADS作用BGC823细胞后,G2/M期细胞呈时间依赖性增加 ( P 〈0.05)。Chk2沉默BGC823细胞Chk2 mRNA与蛋白表达下调 ( P 〈0.05)。Chk2沉默组G2/M期细胞较对照组差异无显著性 ( P 〉0.05)。DADS处理Chk2沉默组与对照组后,两者G2/M期细胞差异无显著性( P 〉0.05),而较未处理前有明显差异 ( P 〈0.05)。Chk2沉默后,CDC25C和CyclinB1表达较对照组无明显差异 ( P 〉0.05)。但是, DADS处理对照组与Chk2沉默组后,CDC25C和CyclinB1表达较处理前明显降低 ( P 〈0.05)。表明Chk2 沉默对DADS阻滞BGC823细胞G2/M作用没有影响,DADS阻滞G2/M的检查点可能不是Chk2。 展开更多
关键词 人胃癌BGC823细胞 二烯丙基二硫 CHK2 基因沉默 G2/M期
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二烯丙基二硫对人白血病细胞增殖和钙网蛋白表达的影响 预览
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作者 陈歆 黄磊 +6 位作者 王学锋 尹艳华 熊炜 邓雪冰 阳海华 苏琦 伍世葵 《中南医学科学杂志》 CAS 2018年第1期23-27,共5页
观察二烯丙基二硫(DADS)对人白血病HL-60细胞增殖和钙网蛋白(CRT)表达的影响。DADS(1.25 mg/L)处理HL-60细胞24、48和72 h,siRNA抑制CRT的表达,采用MTT法检测细胞活力,实时定量PCR和Western blot检测CRT的表达。与对照组比较,DADS处理24... 观察二烯丙基二硫(DADS)对人白血病HL-60细胞增殖和钙网蛋白(CRT)表达的影响。DADS(1.25 mg/L)处理HL-60细胞24、48和72 h,siRNA抑制CRT的表达,采用MTT法检测细胞活力,实时定量PCR和Western blot检测CRT的表达。与对照组比较,DADS处理24、48和72 h组HL-6细胞的增殖水平均显著性降低,呈现时间依赖性(均P<0.05)。与对照组比较,siRNA瞬时转染显著降低了CRT mRNA的表达(P<0.05),也显著降低了细胞的增殖水平(P<0.05),与DADS具有协同效应。DADS抑制了HL-60细胞增殖,其机制可能与下调钙网蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 钙网蛋白 人白血病HL-60细胞 细胞增殖
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AD模型小鼠脑组织AQP4、SNTA1表达水平的变化及DADS的干预研究
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作者 蒋聪敏 詹志鹏 +3 位作者 张静竹 赵越 李玉婷 安丽 《营养学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期266-271,共6页
目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的干预作用,为AD的防治提供理论依据。方法将20只5月龄APPswe/PS1d E9双转基因鼠按窝别和体质量分为AD模型组和AD干预组,同时将野生型小鼠分为野生对照组和野生干预组,每... 目的探讨二烯丙基二硫化物(DADS)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠的干预作用,为AD的防治提供理论依据。方法将20只5月龄APPswe/PS1d E9双转基因鼠按窝别和体质量分为AD模型组和AD干预组,同时将野生型小鼠分为野生对照组和野生干预组,每组10只。干预组小鼠每日1次灌胃给予50 mg/kg DADS,AD模型组小鼠和野生对照组小鼠每日1次灌胃等量溶媒,连续处理6月。采用水迷宫和旷场实验测定小鼠神经行为学变化。免疫组化法分析大脑皮质β-淀粉样蛋白(Aβ)沉积情况,q RT-PCR和Western blot法分别检测大脑皮质水通道蛋白4(AQP4)、α-互养蛋白(SNTA1)m RNA及蛋白的表达水平。结果与对照组相比,AD模型组小鼠水迷宫实验中定位航行逃避潜伏期延长、穿越平台次数减少,在旷场实验中中央停留时间延长、穿格次数和直立次数减少,大脑皮质Aβ沉积数量增多,AQP4m RNA及蛋白表达升高,SNTA1m RNA及蛋白的表达水平下降,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。与AD模型组相比,DADS干预组小鼠的定位航行逃避潜伏期缩短、穿越平台次数增多,中央停留时间缩短、穿格次数和直立次数增多,大脑皮质Aβ沉积数量减少,AQP4及SNTA1 m RNA及蛋白的表达水平上调,差异均有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。结论 AD模型小鼠大脑皮质AQP4表达升高,但SNTA1表达的降低可改变AQP4极性分布而影响AQP4的功能。DADS可明显减少AD模型小鼠大脑皮质Aβ沉积,改善认知能力,其作用机制可能与DADS调节AQP4表达及其极性分布有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫化物 阿尔茨海默病 Β-淀粉样肽 水通道蛋白4 α-互养蛋白
沉默Chkl基因对DADS阻滞人胃癌BGC823细胞G2/M期的影响 预览 被引量:2
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作者 谭亚丽 夏红 +4 位作者 曾颖 刘芳 苏波 凌晖 苏琦 《中国医药导刊》 2018年第6期346-350,共5页
目的:探讨沉默Chkl基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法:采用RNAi技术沉默BGC823细胞Chkl基因,q-PCtl与Westernblot检测ChklmRNA与蛋白表达。流式细胞术检测DADS作用与Chkl基因沉默BGC823细胞... 目的:探讨沉默Chkl基因在二烯丙基二硫(DADS)诱导人胃癌BGC823细胞G2/M期阻滞中的作用。方法:采用RNAi技术沉默BGC823细胞Chkl基因,q-PCtl与Westernblot检测ChklmRNA与蛋白表达。流式细胞术检测DADS作用与Chkl基因沉默BGC823细胞周期分布情况。Westernblot检测Cdc25C与cyclinBl表达。结果:流式细胞术显示,15mg·L^-1DADS作用BGC823细胞12、24、36、48h后,G2/M期细胞呈时间依赖性增加(P〈0.05)。Chkl沉默BGC823细胞ChklmRNA与蛋白表达下调(P〈0.05)。沉默Chkl后,G2/M期细胞较对照组降低(P〈0.05)。DADS处理后,对照组G2/M细胞高于Chkl沉默组(P〈0.05)。Chkl基因沉默后Cdc25C和CyclinBl表达较对照组增加(P〈0.05)。DADS处理对照组后,Cdc25C和CyelinBl表达较未处理组降低(P〈0.05)。DADS处理Chkl沉默组Cdc25C和CyelinBl表达较Chkl沉默下调(P〈0.05)。结论:Chkl沉默可通过促进Cde25C和CyelinBl表达减弱DADS阻滞G2/M的作用,DADS阻滞G2/M的检查点是Chkl。 展开更多
关键词 人胃癌BGC823细胞 二烯丙基二硫 Chkl 基因沉默 G2/M期
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二烯丙基二硫对小鼠生精细胞的辐射防护作用 预览
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作者 许帅 李细霞 +2 位作者 王敏 李署平 廖伟雄 《中国比较医学杂志》 北大核心 2018年第4期27-32,共6页
目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对小鼠生精细胞的辐射防护效应。方法利用4 Gy剂量X射线建立动物辐射损伤模型。观察辐照小鼠睾丸组织变化、精子活力及精子畸形率,检测蛋白质羰基含量、丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OH... 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对小鼠生精细胞的辐射防护效应。方法利用4 Gy剂量X射线建立动物辐射损伤模型。观察辐照小鼠睾丸组织变化、精子活力及精子畸形率,检测蛋白质羰基含量、丙二醛(MDA)及8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,评估生精细胞的辐照损伤程度及DADS对生精细胞的防护效果。测定睾丸组织抗氧化酶系超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及谷胱甘肽(GSH)含量,western blot检测Nrf2信号蛋白表达,探讨DADS的辐射防护机制。结果与单纯照射组相比,DADS预处理组睾丸组织损伤较轻,精子活力显著提高(P<0.05),精子畸形率降低(P<0.05),蛋白质羰基含量、MDA及8-OHdG水平明显下降(P<0.05)。SOD、CAT、GSH-Px及GSH等抗氧化指标显著提升(P<0.05),Nrf2表达明显增强。结论DADS通过其抗氧化能力对雄性小鼠生精细胞急性辐射损伤具有一定的防护效应。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 X射线 小鼠 生精细胞 辐射防护剂
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二烯丙基二硫下调MCL-1诱导K562细胞G2/M阻滞及其机制 被引量:1
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作者 吉晓霞 刘芳 +4 位作者 夏红 何洁 谭晖 易岚 苏琦 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第3期750-755,共6页
目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)下调MCL-1诱导人白血病K562细胞周期阻滞及其机制。方法:采用CCK-8检测DADS对K562细胞增殖的作用;流式细胞术观察DADS与沉默MCL-1对K562细胞周期的影响;Western blot检测MCL-1、PCNA... 目的:研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)下调MCL-1诱导人白血病K562细胞周期阻滞及其机制。方法:采用CCK-8检测DADS对K562细胞增殖的作用;流式细胞术观察DADS与沉默MCL-1对K562细胞周期的影响;Western blot检测MCL-1、PCNA和CDK1表达;免疫共沉淀方法分析MCL-1与PCNA及CDK1结合作用。结果:15、30、60、120、240μmol/L DADS对K562细胞增殖抑制率分别为32.48%、59.34%、66.42%、77.06%和81.05%(P〈0.05)。60和120μmol/L DADS分别作用K562细胞24和48 h后,G2/M期细胞分别增加到18.6%与34.4%和17.5%与28.5%(P〈0.05)。沉默MCL-1可阻滞K562细胞于G2/M,沉默MCL-1加DADS(60μmol/L)较单独DADS和沉默MCL-1明显增强(P〈0.05)。DADS可明显下调MCL-1、PCNA与CDK1表达(P〈0.05)。DADS处理K562细胞8 h,MCL-1与结合的PCNA和CDK1较对照组显著下调(P〈0.05)。结论:DADS可通过下调MCL-1继而降低PCNA与CDK1表达,抑制K562细胞增殖,细胞阻滞于G2/M期,沉默MCL-1可增强DADS的作用。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人白血病K562细胞 MCL-1 G2/M期阻滞 SIRNA
大蒜内烯丙基硫在恶性肿瘤中的作用
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作者 陈雪艳 熊婷 +5 位作者 刘晓旺 陈霄霄 李丽丁 田雯 谢伟全 涂剑 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2017年第2期122-124,共3页
大量流行病学研究显示,大蒜可以降低多种恶性肿瘤的发生率和死亡率,包括结肠癌、前列腺癌和胃癌等.大蒜的抗癌主要有效成分为烯丙基硫,其抗癌机制可能涉及调节信号转导通路、调控细胞周期、诱导细胞凋亡和分化,抑制肿瘤致癌基因的表达等.
关键词 大蒜 肿瘤 烯丙基硫 二烯丙基二硫 二烯丙基三硫
二烯丙基二硫在RORα抑制人胃癌细胞上皮间质转化中的作用 预览
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作者 刘芳 苏坚 +5 位作者 曾颖 夏红 苏波 凌晖 曾希 苏琦 《中国现代医学杂志》 北大核心 2017年第18期7-14,共8页
目的探讨二烯丙基二硫(DADS)是否上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)抑制人胃癌细胞株MGC803细胞上皮-间质转化(EMT)。方法相差显微镜观察MGC803细胞形态的改变。逆转录PCR(RTPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光与... 目的探讨二烯丙基二硫(DADS)是否上调维甲酸相关孤核受体α(RORα)抑制人胃癌细胞株MGC803细胞上皮-间质转化(EMT)。方法相差显微镜观察MGC803细胞形态的改变。逆转录PCR(RTPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT的相关分子表达。裸鼠实验检测DADS与沉默RORα对移植瘤生长的影响。结果相差显微镜显示,沉默RORα细胞较MGC803细胞大小与形状差异更明显。DADS作用后,细胞大小较一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞减少,异型性下降。RT-PCR与Westernblot显示,DADS处理后较处理前各组RORαmRNA与蛋白表达上调(P<0.05)。DADS作用对照组与空载体组较沉默组效果更为明显(P<0.05)。RORα沉默较对照组和空载体组细胞锌指转录因子(Snail)和波形蛋白(Vimentin)mRNA与蛋白表达上调,而E-钙黏蛋白(E-cadherin)mRNA与蛋白下调(P<0.05)。DADS处理后,各组Snail蛋白下调、VimentinmRNA与蛋白下调和E-cadherinmRNA与蛋白上调(P<0.05)。免疫荧光显示,沉默组细胞Snail与Vimentin阳性表达较对照组增强,而E-cadherin阳性表达减弱。DADS作用后,结果相反。裸鼠移植瘤实验显示,RORα沉默组移植瘤较对照组生长加快和体重增加(P<0.05),增殖细胞核抗原(Ki-67)、Snail、CD34及Vimentin阳性表达较对照组增加,而E-cadherin阳性降低。DADS处理各组移植瘤生长与体积减慢与减小,Ki-67、Snail、CD34与Vimentin阳性表达较对照组减弱,而E-cadherin阳性表达增强。结论DADS通过上调RORα可体内外抑制人胃癌MGC803细胞EMT。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 维甲酸相关孤核受体α 人胃癌MGC803细胞 上皮-间质转化
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二烯丙基二硫上调miR-22通过Wnt-1通路抑制人胃癌细胞增殖与迁移侵袭 预览 被引量:1
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作者 唐云云 唐仪 +5 位作者 刘芳 苏坚 夏红 苏波 曾希 苏琦 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1141-1147,共7页
目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)上调miR-22是否通过Wnt-1通路抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭。方法 MTT、细胞划痕实验、侵袭实验分别检测DADS与miR-22对MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。在线预测软件寻找miR-2... 目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)上调miR-22是否通过Wnt-1通路抑制人胃癌MGC803细胞增殖与迁移侵袭。方法 MTT、细胞划痕实验、侵袭实验分别检测DADS与miR-22对MGC803细胞增殖与迁移侵袭的影响。在线预测软件寻找miR-22调控的靶基因,荧光素酶报告基因检测miR-22对Wnt-1 3'UTR荧光酶活性的影响。qRT-PCR检测Wnt-1mRNA表达变化。Western blot检测Wnt-1、β-catenin与TCF-4蛋白表达。结果MTT显示,DADS与miR-22可明显抑制MGC803细胞增殖(P〈0.05)。划痕实验显示,DADS与miR-22可明显抑制MGC803细胞迁移,而miR-22+DADS更为明显(P〈0.05)。侵袭实验显示,miR-22可抑制人胃癌MGC803细胞侵袭,而miR-22+DADS更为明显(P〈0.05)。在线预测软件寻找miR-22调控的靶基因显示,Wnt-1可能是miR-22的靶基因,荧光素报告基因检测证实Wnt-1是miR-22直接调控的靶基因;qRT-PCR显示,DADS与miR-22能下调Wnt-1 mRNA表达,而miR-22+DADS更为明显(P〈0.05)。Western blot显示,DADS与miR-22能下调Wnt-1、β-catenin与TCF-4蛋白表达,而miR-22+DADS尤为明显(P〈0.05)。结论 DADS可上调miR-22通过Wnt-1通路明显抑制MGC803细胞增殖与迁移侵袭。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌细胞 miR-22 WNT通路 迁移 侵袭
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二烯丙基二硫上调RORα抑制人胃癌细胞Wnt/β-catenin通路靶基因 预览
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作者 苏坚 赵晓红 +6 位作者 向姝霖 刘芳 夏红 苏波 凌晖 曾希 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期522-528,共7页
目的观察DADS上调RORα对人胃癌MGC803细胞Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达的影响。方法RT-PCR、Western blot与免疫共沉淀检测Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达。荧光素酶报告基因检测c-Myc基因启动子活性。结果 RT-PCR... 目的观察DADS上调RORα对人胃癌MGC803细胞Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达的影响。方法RT-PCR、Western blot与免疫共沉淀检测Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达。荧光素酶报告基因检测c-Myc基因启动子活性。结果 RT-PCR与Western blot显示,DADS处理后各组RORαmRNA与蛋白表达上调(P〈0.05),而沉默RORα较对照组明显下调(P〈0.05)。DADS处理后各组Wnt1 mRNA与蛋白表达下调(P〈0.05)。沉默RORα较对照组Wnt1 mRNA与蛋白明显上调(P〈0.05)。DADS处理前后各组β-catenin mRNA与蛋白表达差异无显著性(P〉0.05)。免疫共沉淀显示,DADS处理组RORα与β-catenin结合明显增加,而沉默组与β-catenin结合明显减少(P〈0.05)。DADS可明显下调核内β-catenin与p-β-catenin(P〈0.05),而沉默RORα可明显上调β-catenin与p-β-catenin(P〈0.05)。同时,DADS可明显下调TCF-4表达(P〈0.05),而沉默RORα可明显上调TCF-4(P〈0.05)。DADS可明显下调Axin、c-Myc、c-Jun mRNA与蛋白表达(P〈0.05),而沉默RORα作用相反(P〈0.05)。荧光素酶报告基因检测显示,DADS处理后,各组c-Myc启动子活性明显低于处理前(P〈0.05)。沉默组c-Myc启动子活性明显高于对照组(P〈0.05)。结论 DADS可上调RORα抑制Wnt/β-catenin通路相关分子与靶基因表达。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌细胞 RORα Wnt/β-catenin信号通路 相关分子 靶基因 启动子活性
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RORα高表达对二烯丙基二硫抑制人胃癌MGC803细胞上皮-间质转化的影响 预览 被引量:2
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作者 夏红 苏坚 +5 位作者 赵晓红 刘芳 苏波 凌晖 曾希 苏琦 《中国癌症杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期359-367,共9页
背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抗肿瘤的作用。该研究在DADS上调人胃癌MGC803细胞RORα的基础上,观察DADS与RORα高表达对MGC803细胞上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transformation,EMT)的影响。方法... 背景与目的:二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抗肿瘤的作用。该研究在DADS上调人胃癌MGC803细胞RORα的基础上,观察DADS与RORα高表达对MGC803细胞上皮-间质转化(epithelialmesenchymal transformation,EMT)的影响。方法:相差显微镜观察MGC803细胞形态的影响。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)、蛋白[质]印迹法(Western blot)、免疫荧光与免疫组织化学检测EMT相关分子表达。裸鼠实验检测对移植瘤生长的影响。结果:相差显微镜显示,DADS组与RORα高表达组细胞大小较MGC803细胞一致,呈圆形或椭圆形,梭形细胞少见,异型性降低。RORα高表达加DADS后,上述改变更为明显。Western blot检测结果显示,DADS组与RORα高表达组Snail蛋白表达明显下调,DADS+RORα高表达组更明显(P〈0.05)。RT-PCR与Western blot检测显示,DADS与RORα高表达可明显下调Vimentin和上调E-cadherin mRNA与蛋白表达,DADS+RORα高表达组更为显著(P〈0.05)。免疫荧光显示,DADS组与RORα高表达组细胞Snail与Vimentin表达较对照组明显减弱和E-cadherin表达显著增强,DADS+RORα高表达组更为显著,与Western blot结果一致。裸鼠实验显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组移植瘤较对照组生长减慢(P〈0.05),并且,移植瘤体重较对照组明显降低,抑瘤率分别为15.07%、26.55%与49.27%(P〈0.05)。免疫组织化学检测结果显示,DADS组、RORα高表达组与RORα高表达+DADS组较对照组的Ki-67、CD34与Vimentin表达均明显降低,E-cadherin表达明显增强。结论:RORα高表达可增强DADS体内外抑制人胃癌细胞EMT的作用。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 RORα 人胃癌MGC803细胞 上皮-间质转化 SNAIL VIMENTIN E-cadherin
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