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Effects of C-terminal amidation and heptapeptide ring on the biological activities and advanced structure of amurin-9KY,a novel antimicrobial peptide identified from the brown frog,Rana kunyuensis
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作者 Fen Zhang Zhi-Lai Guo +3 位作者 Yan Chen Li Li Hai-Ning Yu Yi-Peng Wang 《动物学研究》 CAS CSCD 2019年第3期198-204,共7页
Rana kunyuensis is a species of brown frog that lives exclusively on Kunyu Mountain,Yantai,China.In the current study,a 279-bp cDNA sequence encoding a novel antimicrobial peptide (AMP),designated as amurin-9KY,was cl... Rana kunyuensis is a species of brown frog that lives exclusively on Kunyu Mountain,Yantai,China.In the current study,a 279-bp cDNA sequence encoding a novel antimicrobial peptide (AMP),designated as amurin-9KY,was cloned from synthesized double-strand skin cDNA of R.kunyuensis.The amurin-9KY precursor was composed of 62 amino acid (aa) residues,whereas the mature peptide was composed of 14 aa and contained two cysteines forming a C-terminal heptapeptide ring (Rana box domain) and an amidated C-terminus.These structural characters represent a novel amphibian AMP family.Although amurin-9KY exhibited high similarity to the already identified amurin-9AM from R.amurensis,little is known about the structures and activities of amurin-9 family AMPs so far.Therefore,amurin-9KY and its three derivatives (amurin-9KY1-3) were designed and synthesized.The structures and activities were examined to evaluate the influence of C-terminal amidation and the heptapeptide ring on the activities and structure of amurin-9KY..Results indicated that C-terminal amidation was essential for antimicrobial activity,whereas both C-terminal amidation and the heptapeptide ring played roles in the low hemolytic activity.Circular dichroism (CD) spectra showed that the four peptides adopted an α-helical conformation in THF/H2O (v/v 1∶1) solution,but a random coil in aqueous solution.Elimination of the C-terminal heptapeptide ring generated two free cysteine residues with unpaired thiol groups,which greatly increased the concentration-dependent anti-oxidant activity.Scanning electron microscopy (SEM) was also performed to determine the possible bactericidal mechanisms. 展开更多
关键词 Antimicrobial peptides RANA kunyuensis' Amurin-9KY Heptapeptide RING C-TERMINAL AMIDATION STRUCTURE activity relati on ship
HSP90靶向抑制剂P7与阿霉素联用对急性髓性白血病细胞凋亡的协同增效作用 预览
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作者 王俊 张逸 +3 位作者 曹明月 黄薇 杨楠 刘雁勇 《基础医学与临床》 CSCD 2019年第6期821-825,共5页
目的探讨热休克蛋白HSP90靶向抑制多肽LPLTPLP(P7)与临床标准化疗药物阿霉素(DOX)联用对急性髓性白血病细胞系NB4的影响。方法多肽P7与DOX单药或两药联合处理NB4细胞系48 h后,CCK-8法检测细胞的存活,并用等效图解法解析其作用;流式细胞... 目的探讨热休克蛋白HSP90靶向抑制多肽LPLTPLP(P7)与临床标准化疗药物阿霉素(DOX)联用对急性髓性白血病细胞系NB4的影响。方法多肽P7与DOX单药或两药联合处理NB4细胞系48 h后,CCK-8法检测细胞的存活,并用等效图解法解析其作用;流式细胞计量术检测NB4细胞凋亡水平;蛋白免疫印迹检测NB4细胞凋亡蛋白PARP的表达水平及剪切水平。结果 P7与DOX对细胞存活具有协同抑制作用;P7与DOX联合用药组细胞凋亡率为63.9%,约等于P7和DOX两药单独用药时凋亡率之和;两药联用组凋亡相关蛋白PARP总蛋白表达显著下调(P<0.01),cleaved-PARP的水平显著上调(P<0.01)。结论 P7协同DOX能显著提高NB4细胞的凋亡比例,其机制可能与DNA修复酶PARP的失活有关。 展开更多
关键词 急性髓性白血病 细胞凋亡 阿霉素 多肽 协同作用
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HSP90靶向抑制剂P7与多西紫杉醇联用对三阴性乳腺癌细胞的协同抗肿瘤作用 预览 被引量:2
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作者 范姝婕 刘俊雅 +4 位作者 王俊 刘娜斯 黄薇 杨楠 刘雁勇 《基础医学与临床》 CSCD 2018年第5期659-663,共5页
目的探讨双功能小分子多肽LPLTPLP(P7)和化疗药物多西紫杉醇(DTX)联用对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231的影响。方法多肽P7与DTX两药联合处理三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231 48 h后,用SRB法检测细胞存活;用等效图解法分析其作用;用流... 目的探讨双功能小分子多肽LPLTPLP(P7)和化疗药物多西紫杉醇(DTX)联用对三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231的影响。方法多肽P7与DTX两药联合处理三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231 48 h后,用SRB法检测细胞存活;用等效图解法分析其作用;用流式细胞计量术检测多肽P7、化疗药DTX及两药联用后MDA-MB-231细胞凋亡率;用蛋白免疫印迹技术检测多肽P7、化疗药DTX及两药联用后MDA-MB-231细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 P7与DTX对细胞存活具有协同作用;联合用药组细胞凋亡率为60.6%,是DTX单药组凋亡率(34.5%)的1.8倍;P7与DTX联合用药干预48 h后,凋亡相关蛋白Bcl-2与Bax表达量的比值显著下调。结论P7协同化疗药物DTX能显著提高细胞的凋亡率,其机制可能与两药联合后调控促凋亡蛋白Bax和凋亡蛋白Bcl-2表达相关。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 细胞凋亡 多西紫杉醇 多肽 协同作用
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Optimization of Adsorption Conditions of Papain on Cross-Linked Phage-Displayed Heptapeptide Matrix Using Response Surface Methodology 预览
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作者 杨慧琴 陈天翔 +5 位作者 刘琳 陈德强 李树白 权静 朱利民 聂华丽 《东华大学学报:英文版》 EI CAS 2017年第1期111-117,共7页
A new cross-linked heptapeptide matrix(CHM)was prepared and the adsorption performance for papain was investigated.Firstly,a phage-displayed heptapeptide(Ile-Gln-SerPro-His-Phe-Phe)with high affinity to papain was fou... A new cross-linked heptapeptide matrix(CHM)was prepared and the adsorption performance for papain was investigated.Firstly,a phage-displayed heptapeptide(Ile-Gln-SerPro-His-Phe-Phe)with high affinity to papain was found.Secondly,the heptapeptide was cross-linked to a matrix for papain adsorption.Finally,the adsorption conditions were optimized by response surface methodology.The results indicated that the optimum adsorptionconditionsweredeterminedasinitialpH 6.9,temperature 40℃,and the adsorption capacity of CHM for papain was found to be 55.52 mg/g.Moreover,the papain was purified 78-fold in a single step determined by affinity precipitation.More than87%of the adsorbed papain was desorbed using the eluent solventtriethylamine at pH 7.4.The results show that the CHM is a promising adsorbent for papain purification from crude papaya powder. 展开更多
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合成七肽在牛种布鲁氏菌RB51株侵染人单核细胞系THP-1过程中对MAPK通路的影响 被引量:3
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作者 牟路萌 张亚丽 +7 位作者 王丽娜 杜景云 王杰 陈创夫 赵姗姗 郭利萍 李红雨 王远志 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第2期103-106,121共5页
目的观察七肽LPAAQKT在布鲁氏菌侵染人单核细胞系THP-1过程中对MAPK通路的影响。方法通过MTT法检测合成七肽对THP-1的毒性;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测七肽对感染细胞凋亡的影响;通过CFU计数分析七肽对感染细胞内细菌数量的影响;采... 目的观察七肽LPAAQKT在布鲁氏菌侵染人单核细胞系THP-1过程中对MAPK通路的影响。方法通过MTT法检测合成七肽对THP-1的毒性;采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测七肽对感染细胞凋亡的影响;通过CFU计数分析七肽对感染细胞内细菌数量的影响;采用qRT-PCR和Western blot检测牛种布鲁氏菌RB51感染THP-1不同阶段MAPK通路中ERK1/2、JNK1/2、P38的mRNA和蛋白活化及表达情况。结果合成七肽对THP-1无毒性作用;流式细胞术检测七肽对THP-1细胞凋亡作用的影响为:感染复数50∶1组4h时对细胞凋亡有促进作用,48h时对细胞凋亡有抑制作用;CFU计数显示在感染前预先加入七肽导致THP-1细胞内布鲁氏菌数少于未加七肽组;qRTPCR和磷酸化Western blot显示,感染4h时,七肽降低感染组中erk1的转录与蛋白活化,感染48h时七肽降低jnk1/2的转录与蛋白活化。结论环化七肽CLPAAQKTC参与感染细胞的凋亡过程,因此有望用于布鲁氏菌病治疗药物的研发。 展开更多
关键词 布鲁氏菌RB51 THP-1 七肽 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 细胞凋亡
传染性法氏囊病毒基因组、蛋白和分子致病机理研究进展 预览 被引量:3
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作者 朱桂银 王旭东 朱建波 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2007年第3期 448-451,共4页
近年来,由于分子生物学技术的发展,传染性法氏囊病(IBD)的得到了较好的控制。但传染性法氏囊病是一种主要传染幼鸡和雏火鸡的急性、高度接触性、杀淋巴细胞性疾病,可引起免疫抑制进而混合感染或继发感染其它传染性疾病。因此,该... 近年来,由于分子生物学技术的发展,传染性法氏囊病(IBD)的得到了较好的控制。但传染性法氏囊病是一种主要传染幼鸡和雏火鸡的急性、高度接触性、杀淋巴细胞性疾病,可引起免疫抑制进而混合感染或继发感染其它传染性疾病。因此,该病仍引起有关学者的关注。该病由传染性法氏囊病毒(IBDV)引起。主要对该病毒的基因、蛋白及其分子致病机理研究的最新进展进行综述。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 基因组 蛋白质 分子致病机理 七肽区
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抗纤维蛋白β链N端七肽抗体的制备
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作者 赵晓瑜 静天玉 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第2期 219-223,共5页
编码纤维蛋白β链N末端七肽的寡核苷酸片段,通过基因重组技术插入到金葡核酸酶基因的5’端,在PRPL启动子的调控下,β七肽以融合蛋白的形式在E.coli细胞中得到高效表达,以纯化的融合蛋白为免疫原,制备出抗β七肽抗体,... 编码纤维蛋白β链N末端七肽的寡核苷酸片段,通过基因重组技术插入到金葡核酸酶基因的5’端,在PRPL启动子的调控下,β七肽以融合蛋白的形式在E.coli细胞中得到高效表达,以纯化的融合蛋白为免疫原,制备出抗β七肽抗体,纤维蛋白原抑制实验证明,该抗体对纤维蛋白(FP)有特异性反应。 展开更多
关键词 β七肽 抗β七肽抗体 抗纤维蛋白 特异性抗体
1株鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的克隆及其分子流行病学分析 预览 被引量:2
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作者 冯金芳 何海汛 +1 位作者 孙国鹏 王选年 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第1期109-113,133共6页
为了解河南地区鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)的流行特征,研究了分离于河南新乡地区某发病鸡场的1株IBDV(XX511毒株)VP2基因的分子流行病学特征。根据Gen Bank公布的IBDV基因组序列信息,设计合成特异性引物,应用RT-PCR方法对分离于新乡... 为了解河南地区鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)的流行特征,研究了分离于河南新乡地区某发病鸡场的1株IBDV(XX511毒株)VP2基因的分子流行病学特征。根据Gen Bank公布的IBDV基因组序列信息,设计合成特异性引物,应用RT-PCR方法对分离于新乡某发病鸡场的IBDV野毒株XX511的VP2高变区进行克隆及分析,并将XX511毒株的VP2高变区中与毒力相关的2个亲水区及七肽区与国内外其他参考毒株进行序列比对,绘制进化树。结果显示,XX511毒株与超强毒株D49706、AJ878898的VP2基因高变区氨基酸序列的同源性均为96.8%,与广东地区JQ911703毒株具有100%的同源性。与参照的经典毒株相比,XX511毒株在第一亲水区发生了1个氨基酸位点的突变。通过与国内外(包括河南地区)其他流行毒株的比对及进化分析发现,XX511毒株与2012年广东流行JQ911703毒株处于同一分支。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病毒 遗传进化 VP2高变区 七肽区 分子流行病学
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环七肽PT-141的固相合成工艺研究 预览 被引量:1
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作者 宋芸 李瑞敏 宋扬 《广州化工》 CAS 2016年第17期61-63,共3页
PT-141可有望作为治疗性功能障碍的环七肽药物。本文研究了固相合成法合成PT-141的路线及工艺,氨基酸的α-氨基采用9-芴甲氧羰基(Fmoc)保护,以HBTU/HOBT/NMM为肽合成试剂,用高压制备液相色谱对粗品进行纯化,用质谱仪对合成的多肽进行... PT-141可有望作为治疗性功能障碍的环七肽药物。本文研究了固相合成法合成PT-141的路线及工艺,氨基酸的α-氨基采用9-芴甲氧羰基(Fmoc)保护,以HBTU/HOBT/NMM为肽合成试剂,用高压制备液相色谱对粗品进行纯化,用质谱仪对合成的多肽进行结构鉴定。多肽合成的收率可达58%,纯化后可得纯度为98%的目标环七肽。与文献方法相比,该法简便、环境友好,并大幅降低了合成成本,适合产业化生产。 展开更多
关键词 环七肽 固相合成 9-芴甲氧羰基 固相环合
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KGD环七肽的分子设计及性质研究 预览 被引量:1
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作者 井健 《北京师范大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期 417-419,共3页
通过化学合成方法合成线性长度七肽分子CKGDWDC,进而通过在(1,7)位形成二硫键构成共价闭合环状结构,最终形成KGD环七肽。结构计算结果显示,KGD环七肽中的KGD序列表现出功能构象,具有较强的抗血小板聚集活性,能够专一性识别与结... 通过化学合成方法合成线性长度七肽分子CKGDWDC,进而通过在(1,7)位形成二硫键构成共价闭合环状结构,最终形成KGD环七肽。结构计算结果显示,KGD环七肽中的KGD序列表现出功能构象,具有较强的抗血小板聚集活性,能够专一性识别与结合血小板膜上纤原受体,具有较强的抑制血栓形成的能力。KGD环七肽具有较强的实际应用价值和广阔的应用前景。 展开更多
关键词 环七肽 Lys—Gly—Asp序列 血小板聚集抑制活性 纤原受体
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噬菌体展示技术筛选bFGF模拟短肽 预览 被引量:2
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作者 黄慧贤 邱斌 +2 位作者 吴晓萍 蔡绍晖 李校堃 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期 7-10,共4页
目的:通过噬菌体展示技术筛选得到与FGFR结合的bFGF模拟短肽,为bFGF肽类抑制剂的研发提供实验基础。方法:以Balb/c 3T3细胞为靶标,以COS-7细胞作消减,对噬菌体随机七肽库进行4轮生物淘洗,再采用ELISA检测单克隆噬菌体对Balb/c ... 目的:通过噬菌体展示技术筛选得到与FGFR结合的bFGF模拟短肽,为bFGF肽类抑制剂的研发提供实验基础。方法:以Balb/c 3T3细胞为靶标,以COS-7细胞作消减,对噬菌体随机七肽库进行4轮生物淘洗,再采用ELISA检测单克隆噬菌体对Balb/c 3T3亲和性和特异性,选取阳性克隆进行DNA测序分析。结果:从富集的噬菌体中获得12个阳性克隆,获得一组疏水性七肽及共同基序PR。结论:利用肽类新药开发的重要工具——噬菌体展示技术,得到2段bFGF的受体结合模拟肽,可望作为bFGF抑制剂的先导肽。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 成纤维细胞生长因子受体(FGFR) 噬菌体展示技术七肽
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Studies on Synthesis of a Cycloheptapeptide and Effects of Different Metal Ions on the Cyclization
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作者 刘勉 叶蕴华 《中国化学:英文版》 SCIE CAS CSCD 2002年第11期1347-1353,1131
周期的 heptapeptide, c (Gly-Ile-Pro-Tyr-Ile-Ala-Ala ) 从 Stellaria yumumensis 法语(M) 被孤立并且识别,被答案方法第一次综合。保护的 heptapeptide Z-Gly-Ile-Pro-Tyr-Ile-Ala-Ala-OBzl 与 3-(diethoxy-phosphoryloxy ) 被综合... 周期的 heptapeptide, c (Gly-Ile-Pro-Tyr-Ile-Ala-Ala ) 从 Stellaria yumumensis 法语(M) 被孤立并且识别,被答案方法第一次综合。保护的 heptapeptide Z-Gly-Ile-Pro-Tyr-Ile-Ala-Ala-OBzl 与 3-(diethoxy-phosphoryloxy ) 被综合 -l,2,3-benzotriazin-4(3H)-one (DEPBT ) 作为 a coupling 试剂。在本甲基和 benzyloxycarbonyl 组的 deprotection 以后,免费线性 heptapeptide H-Gly-Ile-Pro-Tyr-Ile-Ala-Ala-OH 是在 DMF 的 cyclized ( 2 ?楤琭牥?畢祴??票牤硯批湥祺楬敤敮浡湩??????楌汁????ㄠ戭湩灡?票????????????┶?┴?????????????攠??┱?┹??吗????楤瑥票穬湩????????????? 展开更多
关键词 LINEAR heptapeptide CYCLIC heptapeptide DEPBT METAL ION CYCLIZATION
全文增补中
去B链羧端七肽人胰岛素的分离纯化及性质研究 预览 被引量:1
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作者 陈来同 扬志茹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期 440-443,共4页
在大肠杆菌温度诱导体系中以非融合方式进行去B链羧端七肽人胰岛素原基因的表达,获得去B链羧端七肽人胰岛素原,表达产物占细胞总蛋白量的13%,表达产物经SephadexG-50柱层析分离及胰蛋白酶和羧肽酶B的酶促转化等步... 在大肠杆菌温度诱导体系中以非融合方式进行去B链羧端七肽人胰岛素原基因的表达,获得去B链羧端七肽人胰岛素原,表达产物占细胞总蛋白量的13%,表达产物经SephadexG-50柱层析分离及胰蛋白酶和羧肽酶B的酶促转化等步骤,可得到纯度达94%以上的去B链羧端七肽人胰岛素,其氨基酸组成与预期值相符,受体活性是标准猪胰岛素的1%。 展开更多
关键词 去B链羧端七肽 人胰岛素 受体相互作用
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琥珀酰CCK—7对小鼠记忆的影响 预览
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作者 郑元林 张维宁 +1 位作者 吴馥梅 陈钧辉 《南京大学学报:自然科学版》 CSCD 1994年第2期 263-268,共6页
琥珀酰CCK-7是对CCK-8进行分子改构后获得的一种新药,本实验以一次被动回避反应模型观察比较了这种改构物与CCK-8对小鼠记忆巩固过程的影响,同时探讨了suc-CCK-7影响记忆过程的剂量-效应关系以及时相-效应... 琥珀酰CCK-7是对CCK-8进行分子改构后获得的一种新药,本实验以一次被动回避反应模型观察比较了这种改构物与CCK-8对小鼠记忆巩固过程的影响,同时探讨了suc-CCK-7影响记忆过程的剂量-效应关系以及时相-效应关系。结果表明:(1)suc-CCK-7促进记忆的有效剂量为100-200μg/kg,小于100μg/kg无明显效应。(2)suc-CCK-7增强小鼠记忆的效应在电击后48h最明显,7 展开更多
关键词 琥珀酰 丙谷酰胺 记忆 胆衰收缩素
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人类免疫缺陷病毒(HIV-1)整合酶抑制剂筛选及其活性测定 预览 被引量:2
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作者 邹媛 詹金彪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期 965-970,共6页
整合酶作用的病毒DNA整合进宿主DNA的过程是反转录病毒在宿主细胞中增殖的关键步骤.由于在正常人类细胞中不存在相似的功能蛋白,其抑制剂对人体的副作用可能很小,相对于经典AIDS治疗药物的毒副作用,整合酶抑制剂理论上要具有优势.... 整合酶作用的病毒DNA整合进宿主DNA的过程是反转录病毒在宿主细胞中增殖的关键步骤.由于在正常人类细胞中不存在相似的功能蛋白,其抑制剂对人体的副作用可能很小,相对于经典AIDS治疗药物的毒副作用,整合酶抑制剂理论上要具有优势.在线性七肽库中筛选与整合酶有特异结合作用的噬菌体展示肽,选取TPSHSSR和HPERATL2条肽,它们可以竞争性地抑制展示相应肽段的噬菌体与整合酶的结合,同时它们对整合酶的整合活性也有一定程度的抑制,半数抑制率分别为IC50=(54.56±5.18)μmol/L,IG50=(28.29±1.32)μmol/L.这些多肽可用于治疗艾滋病新药的开发应用及整合酶结构及作用机制的研究. 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒(HIV-1)整合酶 抑制剂 七肽 噬菌体展示
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