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AlCoCrCuFeTix高熵合金细胞毒性评价及对L929细胞凋亡与Ⅰ型胶原合成的影响 预览
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作者 肖睿 孙宇 +4 位作者 喻望清 焦二龙 汪伟佳 张兆钰 张雪 《口腔医学》 CAS 2019年第6期500-504,共5页
目的评价AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性。方法对AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金进行MTT毒性实验评价其细胞毒性;流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法评价其对L929细胞凋亡的影响;免疫荧光染色检测各组L... 目的评价AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性。方法对AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金进行MTT毒性实验评价其细胞毒性;流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法评价其对L929细胞凋亡的影响;免疫荧光染色检测各组L929细胞Ⅰ型胶原的合成水平来评价该系列材料对细胞增殖的影响。结果随着Ti元素的递增,AlCoCrCuFeTix(x=0,0.25,0.5,1)系列高熵合金细胞毒性增大,凋亡率呈上升趋势,而L929细胞的Ⅰ型胶原蛋白表达水平下降。实验表明AlCoCrCuFe具有良好的细胞相容性,细胞毒性各时间点评级均为1级,且凋亡率及Ⅰ型胶原蛋白表达水平与空白对照组无明显差异。结论 AlCoCrCuFeTix系列高熵合金中的AlCoCrCuFe具有良好的细胞相容性,可初步满足医疗器械使用的基本要求。 展开更多
关键词 高熵合金 细胞毒性 L929细胞 流式细胞术 免疫荧光
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常见毛囊细胞角蛋白在毛囊周期中的表达研究 预览
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作者 燕荣帅 裴卓 +2 位作者 马小艮 张一鸣 李玉红 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》 2019年第1期7-12,共6页
目的探讨常见毛囊细胞角蛋白在毛囊周期中的表达特征。方法取毛囊发育期、生长期启动、生长期、退化期和静止期的小鼠皮肤,石蜡切片后通过免疫荧光的方法,检测细胞角蛋白Krt5、Krt6、Krt10、Krt14、Krt15和Krt19的表达情况。结果Krt5在... 目的探讨常见毛囊细胞角蛋白在毛囊周期中的表达特征。方法取毛囊发育期、生长期启动、生长期、退化期和静止期的小鼠皮肤,石蜡切片后通过免疫荧光的方法,检测细胞角蛋白Krt5、Krt6、Krt10、Krt14、Krt15和Krt19的表达情况。结果Krt5在静止期和生长期启动表达于所有毛囊上皮细胞,在其他时期表达不一致;Krt6表达于所有时期的外根鞘细胞和内根鞘细胞;Krt10表达于生长期和退化期的毛母质和内根鞘细胞,在其他时期表达不一致;Krt14在生长期和退化期表达于所有毛囊上皮细胞,在其他时期表达不一致;Krt15和Krt19表达于毛囊发育期、生长期启动和静止期的毛囊隆突区细胞,在生长期和退化期表达不一致。结论角蛋白作为毛囊结构或毛囊干细胞标记物仅适用于特定的毛囊周期。研究者在使用毛囊角蛋白作为标记物时,应首先明确其在毛囊周期中的表达情况。 展开更多
关键词 角蛋白 毛囊 细胞周期 免疫荧光
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呼吸道九联检与七联检在500例患者中的检测结果分析 预览
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作者 谷雷 谷峰 +4 位作者 陈璐璐 解燕川 李武威 齐媛媛 李晶晶 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第13期1612-1614,共3页
目的对患者同时进行呼吸道血清中病原体特异性抗体IgM检测(九联检)与鼻咽部分泌物脱落细胞病毒抗原检测(七联检),对比分析检测结果,探讨临床检测方法的合理应用及价值。方法选取呼吸道感染患者500例为研究对象,同时采用九联检与七联检... 目的对患者同时进行呼吸道血清中病原体特异性抗体IgM检测(九联检)与鼻咽部分泌物脱落细胞病毒抗原检测(七联检),对比分析检测结果,探讨临床检测方法的合理应用及价值。方法选取呼吸道感染患者500例为研究对象,同时采用九联检与七联检对其进行检测,并将2种检测结果进行统计分析。结果2种检测方法的阳性符合率依次为腺病毒(30.8%),呼吸道合胞病毒(12.2%),甲型流感病毒(57.7%),乙型流感病毒(60.0%),副流感病毒1、2、3型(23.8%)。检测结果总符合率为36.2%。九联检的检测阳性率明显低于七联检,差异有统计学意义(P<0.05)。结论呼吸道九联检与七联检2种检测方法联合应用对提高病原体检出率具有非常重要的临床价值。 展开更多
关键词 呼吸道感染 九联检 七联检 免疫荧光法 抗原抗体
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苯乙醇胺A荧光免疫层析试纸条的制备及特性 预览
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作者 郭会灿 李君华 +1 位作者 王丽君 李春生 《肉类研究》 北大核心 2019年第1期55-59,共5页
为通过荧光免疫层析技术制备一种快速、灵敏、特异性强的尿液中苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PEAA)的检测方法,采用重氮化法合成PEAA人工抗原,并通过免疫、融合、有限稀释法获得特异性抗PEAA的单克隆抗体,通过将量子点微球与PEAA偶联... 为通过荧光免疫层析技术制备一种快速、灵敏、特异性强的尿液中苯乙醇胺A(phenylethanolamine A,PEAA)的检测方法,采用重氮化法合成PEAA人工抗原,并通过免疫、融合、有限稀释法获得特异性抗PEAA的单克隆抗体,通过将量子点微球与PEAA偶联,制备荧光免疫层析试纸条。结果表明:PEAA免疫荧光层析试纸条的检测限为0.496μg/L,回收率在80%~120%之间,批内、批间变异系数均小于10%,与其他类似物的交叉反应率小于5%,特异性良好。说明将荧光免疫层析技术应用到PEAA检测中是可行的,且制备的PEAA荧光免疫层析试纸条灵敏度高、准确性好、特异性好,应用前景广阔。 展开更多
关键词 苯乙醇胺A 荧光免疫层析 免疫抗原 偶联比 量子点微球
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大鼠心肌细胞和心肌细胞系H9C2表达弹性蛋白
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作者 韩贝 任明芬 +1 位作者 常玉巧 郭志坤 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期292-296,共5页
目的检测弹性蛋白在大鼠心肌细胞和H9C2心肌细胞系内的表达。方法取新生和成年SD大鼠各5例的新鲜心脏,冷冻切片;取20只新生3 d SD大鼠心脏,通过0.05%胰蛋白酶和0.075%Ⅱ型胶原酶消化法,获取原代心肌细胞;免疫组织化学和免疫荧光技术检... 目的检测弹性蛋白在大鼠心肌细胞和H9C2心肌细胞系内的表达。方法取新生和成年SD大鼠各5例的新鲜心脏,冷冻切片;取20只新生3 d SD大鼠心脏,通过0.05%胰蛋白酶和0.075%Ⅱ型胶原酶消化法,获取原代心肌细胞;免疫组织化学和免疫荧光技术检测大鼠心肌组织、原代心肌细胞和H9C2心肌细胞系的弹性蛋白表达;ELISA法检测培养的H9C2心肌细胞系上清中的弹性蛋白。结果在大鼠心肌细胞、H9C2心肌细胞系和新生、成年大鼠心肌组织上均发现心肌肌钙蛋白T和弹性蛋白的共表达。免疫组织化学结果发现,弹性蛋白在成纤维细胞、平滑肌细胞和细胞间质内均有表达。H9C2心肌细胞培养液的上清中检测到少量的弹性蛋白。结论大鼠心肌细胞表达弹性蛋白,可能参与心肌细胞的势能和细胞间质弹性纤维的构建。 展开更多
关键词 弹性蛋白 心肌细胞 心肌细胞系H9C2 免疫组织化学 免疫荧光 酶联免疫吸附测定 大鼠
红鳍东方鲀精原干细胞鉴定、分离及纯化 预览
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作者 任玉芹 周勤 +5 位作者 孙朝徽 宋立民 于清海 姜秀凤 王玉芬 王青林 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期797-804,共8页
为获得高比例精原干细胞,开展了不同月龄红鳍东方鲀精原干细胞分离纯化研究。采用组合酶消化法制备不同月龄的精巢单细胞悬液,通过形态学观察和生殖细胞特异基因vasa免疫荧光鉴别精原干细胞,Percoll不连续梯度(10%、30%和50%)纯化精原... 为获得高比例精原干细胞,开展了不同月龄红鳍东方鲀精原干细胞分离纯化研究。采用组合酶消化法制备不同月龄的精巢单细胞悬液,通过形态学观察和生殖细胞特异基因vasa免疫荧光鉴别精原干细胞,Percoll不连续梯度(10%、30%和50%)纯化精原干细胞。结果显示: 14月龄雄鱼精巢生殖细胞主要为A型精原细胞,精原干细胞占比极显著性地高于22月龄(P<0.05)。纯化后精原干细胞主要分布在10%—30%Percoll梯度带中,14月龄雄鱼生殖细胞主要分布在此层,且纯化后精原干细胞占比远高于纯化前以及22月龄纯化前后。结果表明,14月龄更适用组合酶消化分离,并通过Percoll梯度离心法获得高比例的红鳍东方鲀精原干细胞。 展开更多
关键词 红鳍东方鲀 精原干细胞 PERCOLL 免疫荧光
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大鼠皮质神经元的体外培养及不同浓度尿激酶干预后的观察 预览
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作者 葛汝村 吕涌涛 +3 位作者 魏巍 陈平 冯肖亚 徐林 《神经损伤与功能重建》 2019年第6期271-274,共4页
目的:建立科学简易的大鼠皮质神经元的体外培养方法,观察尿激酶对其干预后的表现。方法:取24h内新生Wistar大鼠脑皮质,用浓度为2mg/mL的木瓜酶和适量DNaseI酶共同消化,并用配置好的无血清Neurobasal培养基接种培养,6d后免疫荧光法鉴定... 目的:建立科学简易的大鼠皮质神经元的体外培养方法,观察尿激酶对其干预后的表现。方法:取24h内新生Wistar大鼠脑皮质,用浓度为2mg/mL的木瓜酶和适量DNaseI酶共同消化,并用配置好的无血清Neurobasal培养基接种培养,6d后免疫荧光法鉴定神经元纯度;分别配置含尿激酶终浓度为5000U/mL、8000U/mL、10000U/mL、15000U/mL和20000U/mL的Neurobasal培养基并进行全量换液,镜下观察不同浓度尿激酶干预后神经元的变化。结果:培养6d,神经元分化成熟,胞质丰富,树突及轴突舒展延长,可见密集的神经纤维网络,免疫荧光鉴定神经元纯度为88.2%;尿激酶干预后,发现尿激酶浓度在5000~10000U/mL时,2h内镜下观察培养体系无明显变化,但随时间的延长,尿激酶浓度为10000U/mL作用4h时,可见少量神经元细胞破碎崩解,细胞间网状结构减少。尿激酶浓度在15000U/mL及20000U/mL时,干预2h发现神经元细胞崩解,网状结构消失。结论:本实验建立了一种简易、高效的体外培养新生大鼠皮质神经元的方法,尿激酶浓度在5000~10000U/mL时,2h内对体外神经元培养体系是安全的。 展开更多
关键词 神经元 细胞培养 培养基 免疫荧光 尿激酶
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免疫荧光法联合免疫胶体金法在尿生殖道沙眼衣原体感染诊断中的应用及其临床价值 预览
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作者 陈明星 《中国医学创新》 CAS 2019年第15期131-134,共4页
目的:探讨免疫荧光法联合免疫胶体金法在尿生殖道沙眼衣原体感染诊断中的应用及其临床价值。方法:选取2017年1月-2018年8月来本院接受沙眼衣原体感染检测的疑似尿生殖道沙眼衣原体感染患者1 100例,分别采用免疫荧光法和免疫胶体金法进... 目的:探讨免疫荧光法联合免疫胶体金法在尿生殖道沙眼衣原体感染诊断中的应用及其临床价值。方法:选取2017年1月-2018年8月来本院接受沙眼衣原体感染检测的疑似尿生殖道沙眼衣原体感染患者1 100例,分别采用免疫荧光法和免疫胶体金法进行检测,分析不同检测方法的诊断价值。结果:最终确诊有70例患者为阳性;免疫荧光法、免疫胶体金法、联合检测阳性检出率分别为6.2%、5.5%、6.4%,三组比较差异无统计学意义(P>0.05);联合检测的灵敏度、特异度、诊断符合度均高于单一检测,且免疫荧光法上述指标均高于免疫胶体金法,差异均有统计学意义(P<0.05);联合检测的Youden指数均高于单一检测,且免疫荧光法高于免疫胶体金法(P<0.05);阳性患者发病情况会受到避孕方式、宫颈情况、性伴侣个数的影响(P<0.05)。结论:在对沙眼衣原体感染的诊断过程中,免疫荧光法的诊断价值高于免疫胶体金法,且免疫荧光法与免疫胶体金法联合检测的诊断价值高于单一检测,临床上应当进一步推广应用。 展开更多
关键词 免疫荧光法 免疫胶体金法 沙眼衣原体感染 检出率
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缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞损伤的动态观察
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作者 张怡 周晓红 +2 位作者 靳晓飞 张颖 高维娟 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期13-17,共5页
目的探讨缺氧缺糖/复氧复糖不同时间点小鼠海马神经元细胞系HT22细胞损伤情况。方法取对数生长期的HT22细胞,随机分为6组:正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R) 0 h组(OGD/R 0 h)、缺氧缺糖/复氧复糖12 h组(OGD/R 12 h)、缺氧缺糖/复... 目的探讨缺氧缺糖/复氧复糖不同时间点小鼠海马神经元细胞系HT22细胞损伤情况。方法取对数生长期的HT22细胞,随机分为6组:正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R) 0 h组(OGD/R 0 h)、缺氧缺糖/复氧复糖12 h组(OGD/R 12 h)、缺氧缺糖/复氧复糖24 h组(OGD/R 24 h)、缺氧缺糖/复氧复糖48 h组(OGD/R 48 h)、缺氧缺糖/复氧复糖72 h组(OGD/R 72 h)。除正常对照组外,其余各组细胞均在缺氧缺糖6 h后进行复氧复糖。倒置显微镜下观察细胞形态,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤情况,Bax、Bcl-2免疫荧光染色检测细胞凋亡情况。结果正常组HT22细胞呈两极或多极,突起明显,突起之间相互交织成网状,细胞膜光滑且完整,胞体折光性强,OGD/R各组细胞胞体轴突减少,细胞皱缩,胞质凝聚。与正常组比较,OGD/R各组细胞存活率均显著降低(P<0.05),OGD/R 12 h至OGD/R 24 h达到最低(P<0.05);OGD/R 12 h及OGD/R 24 h组LDH显著升高(P<0.05),OGD/R 0 h、48 h、72 h组均有升高趋势。除OGD/R 0 h组和OGD/R 72 h组外,OGD/R各组Bax/Bcl-2比值均较正常组显著升高(P<0.05),峰值出现于OGD/R 24 h。结论缺氧缺糖/复氧复糖细胞损伤是一个复杂的动态过程,随着复氧复糖时间的延长,细胞损伤不断加重,24 h达到顶峰,随后细胞损伤情况逐渐缓解。 展开更多
关键词 缺氧缺糖/复氧复糖 细胞损伤 动态观察 免疫荧光 HT22细胞
优化建立猪多能性细胞及向神经谱系细胞特异性分化
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作者 李雪 张犇 +6 位作者 牛淑冬 王玉阁 文丽波 梁晨 齐晓娟 李宇 雷蕾 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期24-28,共5页
目的探讨建立猪多能性细胞(iPPCs)的优化方案,并探求其向神经谱系细胞特异性分化的方法。方法利用经典的Yamanaka方法,联合应用组蛋白乙酰化酶抑制剂丙戊酸(VPA)、甲基转移酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-AZA)及Oct4病毒的重复感染,优化... 目的探讨建立猪多能性细胞(iPPCs)的优化方案,并探求其向神经谱系细胞特异性分化的方法。方法利用经典的Yamanaka方法,联合应用组蛋白乙酰化酶抑制剂丙戊酸(VPA)、甲基转移酶抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(5-AZA)及Oct4病毒的重复感染,优化重编程方案,诱导巴马小型猪胚胎成纤维细胞为诱导的iPPCs。通过Real-time PCR检测重编程过程中多能性基因的分子表达。通过维甲酸(RA)及细胞外基质(ECM)的联合培养,诱导iPPCs向神经谱系细胞特异性分化,免疫荧光细胞化学方法检测神经特异性标记物表达。结果应用优化方案,将猪胚胎成纤维细胞重编程为iPPCs。Real-time PCR显示,VPA和Oct4病毒的重复感染可显著促进重编程过程中多潜能基因的表达。5-AZA未显著提高多潜能基因的表达。RA及ECM的联合培养可诱导iPPCs向神经谱系细胞分化,并表达神经特异性标志基因神经元类型Ⅲβ-微管蛋白(Tuj1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)。结论在利用优化方案建立猪多能性细胞的基础上,将其向神经谱系细胞特异性分化,对人类神经性疾病的细胞替代治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 胚胎成纤维细胞 重编程 诱导多能性细胞 神经分化 维甲酸 免疫荧光
黑皮质素4型受体在绵羊下丘脑区域的定位
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作者 郭凤英 潘登 +4 位作者 范奎奎 李强 杨文雅 钱英红 杜晨光 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期507-511,共5页
黑皮质素4型受体(melanocortin 4 receptor,MC4R)作为下丘脑参与能量调控过程中的关键性受体,在动物能量代谢调节中被广泛关注。目前,关于该受体在绵羊下丘脑中分布区域的相关报道较少。针对试验过程中MC4R免疫荧光结果不稳定,分布区域... 黑皮质素4型受体(melanocortin 4 receptor,MC4R)作为下丘脑参与能量调控过程中的关键性受体,在动物能量代谢调节中被广泛关注。目前,关于该受体在绵羊下丘脑中分布区域的相关报道较少。针对试验过程中MC4R免疫荧光结果不稳定,分布区域不明显的特点,本研究在改进现有MC4R免疫荧光试验方法基础上,对MC4R在绵羊下丘脑的分布区域进行了观察。结果显示,分别经过4%多聚甲醛长时间固定(6 d),Triton X-100(pH≈8.68)长时间通透(2 d),以及3%过氧化氢和0.2 mol/L甘氨酸+0.3%SDS+20%甲醇的预处理后,可以获得稳定且饱满的MC4R免疫荧光结果。MC4R主要分布在绵羊下丘脑的室旁核(arcuate nucleus,ARC)区域,但在弓状核区域并无类似分布。 展开更多
关键词 黑皮质素4型受体 免疫荧光 绵羊 下丘脑
细胞因子bFGF和NF-κB在腰椎黄韧带肥厚中的表达及意义 预览
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作者 林伟文 凌华军 +5 位作者 钟思龙 罗鹏刚 吴增志 夏雄超 赖茂松 熊浩 《海南医学》 CAS 2019年第7期824-828,共5页
目的了解成纤维细胞生长因子(bFGF)和核转录因子kappaB (NF-κB)的表达水平,并探讨其在腰椎黄韧带肥厚中的作用机制,为临床治疗提供理论基础。方法选取佛山市高明区人民医院骨科2017年1月至2018年6月收治的15例影像学显示黄韧带厚度符... 目的了解成纤维细胞生长因子(bFGF)和核转录因子kappaB (NF-κB)的表达水平,并探讨其在腰椎黄韧带肥厚中的作用机制,为临床治疗提供理论基础。方法选取佛山市高明区人民医院骨科2017年1月至2018年6月收治的15例影像学显示黄韧带厚度符合相应分组的临床标本,其中对照组(下腰椎骨折需行后路椎板及黄韧带切除术或反复盘源性腰痛行固定术黄韧带切除患者) 5例,突出组(单纯腰椎间盘突出症患者行黄韧带切除术患者) 5例,腰椎管狭窄组(黄韧带肥厚型腰椎管狭窄行黄韧带切除患者) 5例,对其组织进行培养,分离出成纤维细胞通过CCK8检测其增殖活性。使用ELISA试剂盒检测培养基上清中细胞因子浓度。将培养基上清加入巨噬细胞中通过实时荧光定量PCR (PT-qPCR)及免疫荧光检测巨噬细胞活化情况。结果对照组、突出组、腰椎管狭窄组患者黄韧带厚度分别为(2.26±0.31) mm、(3.52±0.45) mm、(4.56±0.51) mm,腰椎管狭窄组患者黄韧带较对照组及突出组肥厚,差异均有统计学意义(P<0.05);3 d和7 d成纤维细胞密度及成纤维细胞增殖CCK8结果显示,椎管狭窄组的细胞增殖速度较其他两组均明显增快,差异均有统计学意义(P<0.05);对照组、突出组、腰椎管狭窄组成纤维细胞上清中bFGF细胞因子浓度分别为(0.72±0.04) ng/mL、(0.81±0.06) ng/mL、(1.16±0.15) ng/mL,培养基上清中NF-κB浓度分别为(0.81±0.07) ng/mL、(1.09±0.14) ng/mL、(1.27±0.13) ng/mL,腰椎管狭窄组3 d后的细胞培养基中bFGF和NF-κB浓度较对照组及突出组均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);通过RT-qPCR及免疫荧光检测表明,加入腰椎管狭窄组成纤维细胞上清的巨噬细胞系(RAW2647)细胞高表达促炎指标iNOS、低表达抗炎指标Arg,分别与对照组及突出组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论细胞因子bFGF和NF-κB可能通过刺激成纤维细胞增生、促进巨噬细胞活化 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子 核转录因子KAPPAB 黄韧带肥厚 腰椎 免疫荧光
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抑制水通道蛋白4可降低脊髓后角胶质细胞细胞外调节蛋白激酶信号的活化改善坐骨神经损伤导致的神经病理性疼痛
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作者 赵亮 李丹 +2 位作者 刘囡 刘璐 李洪鹏 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期35-39,共5页
目的探讨腰椎间盘突出引起的坐骨神经痛中,抑制水通道蛋白4(AQP4)对脊髓胶质细胞以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路活化的影响。方法取8周龄雄性SD大鼠90只,分为假手术组18只,坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)+DMSO组36只,CCI+TGN-020组(A... 目的探讨腰椎间盘突出引起的坐骨神经痛中,抑制水通道蛋白4(AQP4)对脊髓胶质细胞以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路活化的影响。方法取8周龄雄性SD大鼠90只,分为假手术组18只,坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)+DMSO组36只,CCI+TGN-020组(AQP4抑制剂) 36只。CCI模型应用动物行为学,Western blotting方法,免疫荧光(双重染色)等方法检测。结果 Western blotting显示,细胞外调节蛋白激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK信号通路及星形胶质细胞在神经损伤之后活化;免疫荧光在AQP4的表达被TGN-020抑制之后,胶质细胞及ERK、JNK、p38MAPK信号通路的活化被削弱,p-ERK和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)共定位的细胞数量在损伤后明显增多,而TGN-020可减少之。结论抑制AQP4可抑制坐骨神经损伤引发的脊髓后角星形胶质细胞活化及MAPK信号通路活化,且可以通过抑制脊髓后角ERK通路的活化来抑制星形胶质细胞的活化,从而改善坐骨神经损伤所致神经病理性疼痛。 展开更多
关键词 坐骨神经损伤 星形胶质细胞 水通道蛋白4 丝裂原活化蛋白激酶信号通路 细胞外调节蛋白激酶信号通路 免疫荧光 大鼠
刺梨黄酮对阿霉素所致心肌细胞毒性的保护作用
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作者 院慧芳 张永春 +2 位作者 蔡新华 徐萍 陈辉 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期49-55,共7页
目的探讨刺梨黄酮(FRRT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的影响及机制。方法利用1~3 d新生大鼠(每次26只)原代分离培养心肌细胞和H9C2心肌细胞系,5μmol/L DOX孵育心肌细胞,建立心肌细胞毒性模型,并用FRRT干预,透射电子显微镜观察各组H9C... 目的探讨刺梨黄酮(FRRT)对阿霉素(DOX)所致心肌细胞凋亡的影响及机制。方法利用1~3 d新生大鼠(每次26只)原代分离培养心肌细胞和H9C2心肌细胞系,5μmol/L DOX孵育心肌细胞,建立心肌细胞毒性模型,并用FRRT干预,透射电子显微镜观察各组H9C2心肌细胞株超微结构。利用免疫荧光技术和Western blotting检测Bax、P53和Bcl-2蛋白的表达,并对Western blotting检测结果进行半定量分析。结果透射电子显微镜观察显示,DOX组细胞内呈现大量的自噬泡和脂褐素,细胞状态差;FRRT干预后,心肌细胞未见脂褐素的结构,有少量自噬泡。免疫荧光检测显示,DOX组Bax和P53呈阳性表达,Bcl-2呈弱阳性表达;FRRT+DOX组Bax和P53表达不明显,Bcl-2呈强阳性表达。Western blotting检测结果显示,5μmol/L DOX孵育心肌细胞18 h时,Bax蛋白表达水平达到最高,组间比较,差异有统计学意义(*P<0.01)。Bax蛋白在DOX组表达增加,FRRT+DOX组表达减少,组间比较,差异具有统计学意义(*P<0.05);P53蛋白在DOX组表达增加,FRRT+DOX组表达减少,组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);Bcl-2蛋白在DOX组表达减少,FRRT+DOX组表达增加,组间比较,差异具有统计学意义(*P<0.05,**P<0.01)。结论 FRRT通过下调DOX引起的心肌细胞凋亡作用,进而发挥对心肌细胞的保护作用。 展开更多
关键词 心肌细胞 刺梨黄酮 阿霉素 免疫荧光 免疫印迹法 大鼠
γ-分泌酶抑制剂对脑缺血大鼠神经干细胞移植后神经保护作用
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作者 刘宗秀 张紫微 +2 位作者 周晓红 成媛 高维娟 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期145-151,共7页
目的探讨γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)对脑缺血大鼠神经干细胞(NSCs)移植后的神经保护作用。方法 SD大鼠33只,脑缺血模型制造成功后,随机平均分为3组:模型组、神经干细胞移植组(移植组)、D... 目的探讨γ-分泌酶抑制剂(3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)对脑缺血大鼠神经干细胞(NSCs)移植后的神经保护作用。方法 SD大鼠33只,脑缺血模型制造成功后,随机平均分为3组:模型组、神经干细胞移植组(移植组)、DAPT+移植组。另假手术组11只仅在麻醉状态下分离暴露血管。NSCs移植后7 d观察各组大鼠神经行为学改变;TTC染色观察脑梗死体积;尼氏染色观察脑组织病理形态学变化;免疫荧光双标检测Brd U/神经元核抗原(Neu N)阳性细胞表达。结果假手术组神经功能学评分为零,无脑梗死灶,细胞形态完好,尼氏小体丰富,Brd U/Neu N阳性细胞表达阴性;与假手术组相比,模型组神经功能学评分增加,有明显神经功能缺损症状,可见明显脑梗死灶,神经细胞排列紊乱,可见核固缩,尼氏小体稀少,存活神经元数量显著减少(P<0. 05),有少量Brd U/Neu N阳性细胞表达(P<0. 05);与模型组比较,移植组和DAPT+移植组都有不同程度神经功能评分减低,脑梗死体积缩小,神经细胞存活数量增加(P<0. 05),Brd U/Neu N阳性细胞表达增多(P<0. 05),以DAPT+移植组各项指标恢复最为明显。结论 DAPT能够促进移植的NSCs向神经元分化,对脑缺血大鼠神经干细胞移植后有神经保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 神经干细胞移植 DAPT 神经保护 免疫荧光 大鼠
半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对脑缺血再灌注大鼠脑皮质中热休克蛋白70、微管相关蛋白轻链3蛋白表达和神经元超微结构的影响
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作者 陈萌 杜超 +2 位作者 田焕娜 王爱乐 夏晓晓 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期158-165,共8页
目的应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注... 目的应用不同浓度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)干预脑缺血再灌注大鼠,检测热休克蛋白70(HSP70)和微管相关蛋白轻链3(LC3)蛋白的表达,观察其对神经元超微结构的影响。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分成5组:假手术组(sham)、缺血再灌注组(IR),Cys C低浓度组(Cys C1)、Cys C中浓度组(Cys C2)、Cys C高浓度组(Cys C3),每组12只。采用线栓法制备脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h再灌注24 h后进行改良神经功能损伤严重程度评分(m NSS)。Western blotting半定量检测损伤中心脑皮质组织中HSP70、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达;免疫组织化学法检测HSP70、LC3的阳性细胞个数;免疫荧光双标记法检测皮质神经元自噬相关蛋白LC3和神经元核抗原(Neu N)共染的阳性细胞平均吸光度值;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的变化。结果与IR组相比,Cys C1、Cys C2组m NSS评分明显减少(P<0. 05),HSP70的表达较IR组明显升高(P<0. 01);而Cys C3组m NSS评分升高,与IR组差别无显著性(P>0. 05);Cys C3组HSP70的表达明显降低(P<0. 01);Cys C各浓度组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达有不同程度的升高(P<0. 01);LC3和Neu N共染阳性细胞平均吸光度逐渐增强(P<0. 05);透射电子显微镜结果显示,Cys C1、Cys C2组神经细胞的超微结构有所改善,而Cys C3组脑皮质神经细胞损伤较重。结论 Cys C可能在一定浓度范围内对缺血再灌注损伤神经细胞有保护作用。浓度过高则导致神经细胞自噬性死亡。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 自噬 热休克蛋白70 微管相关蛋白轻链3 免疫印迹法 免疫荧光 大鼠
敲减钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ抑制干扰素-γ诱导C2C12细胞免疫分子的表达
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作者 李俊桦 马永能 +1 位作者 谷瑞彩 廖华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期166-172,共7页
目的探究敲减钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ(Ca MKⅣ)基因对炎性培养条件下C2C12细胞免疫分子表达的影响。方法采用慢病毒基因干扰技术敲减C2C12细胞的Ca MKⅣ基因,以2%马血清将C2C12细胞分化成肌管,以干扰素-γ(IFN-γ)刺激C2C12细胞,采... 目的探究敲减钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ(Ca MKⅣ)基因对炎性培养条件下C2C12细胞免疫分子表达的影响。方法采用慢病毒基因干扰技术敲减C2C12细胞的Ca MKⅣ基因,以2%马血清将C2C12细胞分化成肌管,以干扰素-γ(IFN-γ)刺激C2C12细胞,采用Real-time PCR和Western blotting检测Ca MKⅣ的表达,采用Western blotting和免疫荧光检测免疫分子主要组织相容性复合体(MHC) classⅠ(H-2Kb)、MHC classⅡ(H2-Ea)、Toll样受体3(TLR3)的表达,采用Real-time检测肌细胞分泌型促炎性细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-1α和单核细胞趋化因子(MCP)-1的基因表达。结果 IFN-γ可诱导成肌干细胞以及分化肌管表达或上调表达免疫分子MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、TLR3,同时上调C2C12细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、MIP-1α和MCP-1的基因表达量;敲减Ca MKⅣ基因导致上述上调趋势被抑制。结论敲减Ca MKⅣ基因可有效抑制IFN-γ诱导的免疫分子的表达,可能提示Ca MKⅣ参与调节肌细胞的免疫学特性。 展开更多
关键词 钙离子/钙调蛋白依赖性激酶Ⅳ 免疫分子 C2C12细胞 shRNA转染 实时定量聚合酶链反应 免疫印迹法 免疫荧光
沙门氏菌检测的研究进展 预览
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作者 郭耀东 韩晓江 +1 位作者 张英华 岳田利 《农产品加工》 2019年第9期75-78,共4页
沙门氏菌是一种能引起人畜共患病的病原菌,由其引起的食物中毒事件屡居首位,在食品致病菌的检测中,沙门氏菌的检测尤为重要。沙门氏菌的传统检测方法耗时较长,虽然成本较低,但检测过程也比较复杂,影响事件的结果。近几年随着科学技术的... 沙门氏菌是一种能引起人畜共患病的病原菌,由其引起的食物中毒事件屡居首位,在食品致病菌的检测中,沙门氏菌的检测尤为重要。沙门氏菌的传统检测方法耗时较长,虽然成本较低,但检测过程也比较复杂,影响事件的结果。近几年随着科学技术的发展及分子生物学的兴起,各种试剂盒和PCR技术用于沙门氏菌的检测,还包括荧光定量法、基因芯片技术等。对沙门氏菌的检测方法进行综述。 展开更多
关键词 沙门氏菌 检测 基因芯片 免疫荧光
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大鼠毛囊神经嵴干细胞分离培养及鉴定
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作者 刘维海 王鹏 杨军 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期207-211,共5页
目的:采用显微分离+组织块贴壁法培养大鼠毛囊神经嵴干细胞(hf NCSC)。方法:显微分离SD大鼠触须部毛囊膨凸部(bugle),采用组织块贴壁法培养毛囊神经嵴干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。采用免疫荧光多重标记法检测Nestin和神经营养素受... 目的:采用显微分离+组织块贴壁法培养大鼠毛囊神经嵴干细胞(hf NCSC)。方法:显微分离SD大鼠触须部毛囊膨凸部(bugle),采用组织块贴壁法培养毛囊神经嵴干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态。采用免疫荧光多重标记法检测Nestin和神经营养素受体p75(p75NTR)的表达。结果:用显微分离+组织块贴壁法可成功获得毛囊神经嵴干细胞,倒置显微镜下观察细胞活性好,形态多样,以梭形为主,也可见三角形、椭圆形细胞,核大而明显,多居于胞质一侧。免疫荧光鉴定显示细胞Nestin和p75NTR双阳性。结论:从SD大鼠触须部毛囊bugle区成功分离到毛囊神经嵴干细胞。 展开更多
关键词 毛囊神经嵴干细胞 显微分离 免疫荧光 大鼠
一种小型化低成本免疫荧光分析仪的设计 预览
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作者 沈增贵 邓红玉 林学祥 《中国医疗设备》 2019年第5期54-57,64共5页
目的研制一款小型化、低成本、带自动抛样功能的免疫荧光分析仪。方法该免疫荧光分析仪采用非共聚焦方式的光路设计。光源位于光模块两侧,光电二极管位于试纸条正上方。光模块使用微动开关作为插入检测,使用推杆电机控制测试卡的移动,... 目的研制一款小型化、低成本、带自动抛样功能的免疫荧光分析仪。方法该免疫荧光分析仪采用非共聚焦方式的光路设计。光源位于光模块两侧,光电二极管位于试纸条正上方。光模块使用微动开关作为插入检测,使用推杆电机控制测试卡的移动,配合硅光二极管实现对测试卡的扫描。结果实践表明,该仪器精密度上CV值不大于5%,低值与中值的准确性方面偏差不大于5%,在线性范围内梯度液相关系数大于0.99,光路零部件固定良好,运动机构简单,带有插卡自动检测、废卡抛样等功能。结论仪器采用的新设计是有效的,在食品安全、动物疫病等免疫荧光实验领域可广泛应用。 展开更多
关键词 免疫荧光 光学模块 体外诊断 即时检测
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