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microRNA-10a对肝星状细胞LX-2增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白表达的影响
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作者 王丽 张洪 +1 位作者 吕舰 高洁芳 《中国药师》 CAS 2019年第1期15-19,共5页
目的:探讨微小RNA-10 a(microRNA-10 a,miRNA-10 a)对LX-2细胞株增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的影响。方法:将miRNA-10a模拟物(mimics)、miRNA-10a抑制物(inhibitor)、miRNA-10a模拟物对照物(mimics NC)、miRNA-10a抑制物... 目的:探讨微小RNA-10 a(microRNA-10 a,miRNA-10 a)对LX-2细胞株增殖、凋亡及Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的影响。方法:将miRNA-10a模拟物(mimics)、miRNA-10a抑制物(inhibitor)、miRNA-10a模拟物对照物(mimics NC)、miRNA-10a抑制物对照物(inhibitor NC)分别对LX-2细胞进行转染,Real-time PCR法检测转染后LX-2细胞中CollagenⅠ的表达量,CCK-8法检测转染后LX-2细胞增殖情况,流式细胞术检测转染后LX-2细胞的凋亡率。结果:Real-time PCR结果显示,miRNA-10a mimics能促进CollagenⅠmRNA的表达,miRNA-10a inhibitor抑制了Collagen I mRNA的表达,与其对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);Western Blot结果显示,miRNA-10a mimics与其对照组比较,显著促进CollagenⅠ的表达(P<0.01),miRNA-10a inhibitor与其对照组比较,显著抑制CollagenⅠ的表达(P<0.05);CCK-8结果显示,miRNA-10a mimics促进LX-2细胞的增殖,miRNA-10a inhibitor抑制LX-2细胞增殖,与其对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术结果显示,miRNA-10a mimics抑制LX-2细胞凋亡,miRNA-10a inhibitor促进LX-2细胞凋亡,与其对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miRNA-10a能加速纤维化进程,促进肝星状细胞的增殖,抑制肝星状细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝星状细胞 microRNA-10a 肝纤维化 细胞凋亡
microRNA-10a对脓毒症小鼠脾脏CD4+CD25+Treg免疫功能的影响 被引量:1
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作者 陈隆望 邱俏檬 +4 位作者 连洁 李海啸 洪广亮 卢中秋 赵光举 《中华急诊医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期152-158,共7页
目的探讨脓毒症小鼠CD4+CD25+Treg(regulatory cell)细胞中microRNA-10a(miR-10a)表达规律及与细胞免疫功能的关系。方法采用清沽级雄性Balb/c小鼠建立稳定的小鼠盲肠结扎穿孔( cecal ligation and puncture, CLP )模型,分别... 目的探讨脓毒症小鼠CD4+CD25+Treg(regulatory cell)细胞中microRNA-10a(miR-10a)表达规律及与细胞免疫功能的关系。方法采用清沽级雄性Balb/c小鼠建立稳定的小鼠盲肠结扎穿孔( cecal ligation and puncture, CLP )模型,分别于术后1、3、5、7d处死小鼠,无菌留取脾脏,免疫磁珠法分选CD4+T细胞与CD4+CD25+T细胞(CD4+CD25+Trego流式细胞术检测CD4+CD25+Treg胞内叉头蛋白翼状螺旋转录因子P3( Forkhead/winged helix transcription factor p3, Foxp3 ),CCK-8法检测脾效应T淋巴细胞增殖,实时定量PCR(Real—timePCR)检测Treg中miR-10a的基因表达水平。小鼠尾静脉注射慢病毒下调miR-10a,观察小鼠免疫功能。数据采用SPSS19.0统计软件进行数据处理,两组样本比较采用独立样本t检验,多组均数比较采用单因素方差分析(ANOVA)和Dunnett-t检验。结果正常组小鼠CD4+CD25+Treg细胞在CD4+T细胞中的比例为(7.34±1.2)%,造模后脓毒症小鼠脾脏CD4+CD25+Treg比例1、3、5、7d明显升高(P〈0.05o与假手术组相比,脓毒症小鼠Foxp3的平均荧光强度( mean fluorescence intensity, MFI )也明显高于假手术组(P〈0.05)。Real-imePCR检测CD4+CD25+reg中miR-10a的表达。结果发现假手术组小鼠与正常组小鼠相比差异无统计学意义(P〉0.05)。毒症小鼠Treg中miR-0a表达较假手术组升高(P〈0.05o脓毒症鼠尾静脉注射携带miR-10a抑制序列的慢病毒后,CD4+CD25+Treg/CD4+T比例明显升高(P〈0.05),且Foxp3的平均荧光强度也明显增强(P〈0.05),CD4+T细胞的增殖能力相应减弱(P〈0.05)。结论在脓毒症致病过程Treg中miR-10a表达上调,抑制miR-10a水平能够显著提高Treg的比例和促进免疫抑制功能。鉴于CD4+CD25+Treg在脓毒症免疫功能紊乱中的重要作用,miR-10a可能是脓毒症免疫调理治疗的有效靶点。 展开更多
关键词 调节性T细胞 脓毒症 microRNA-10a 叉头蛋白翼状螺旋转录因子P3 免疫功能 效应T细胞 细胞增殖 平均荧光强度
微小RNA-10a对大鼠心肌缺血再灌注后脑钠肽的影响
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作者 牛少辉 张丽华 +2 位作者 简立国 汪涛 李恩 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1272-1274,共3页
目的 观察大鼠缺血再灌注后组蛋白去乙酰化酶2基因(HDAC2) mRNA、脑钠肽(BNP)的表达,并用微小RNA(miRNA,miR)-10a激动剂(agomirs)对其干预,探讨其与心肌重塑的关系.方法 45只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(A组,n=15)和缺血... 目的 观察大鼠缺血再灌注后组蛋白去乙酰化酶2基因(HDAC2) mRNA、脑钠肽(BNP)的表达,并用微小RNA(miRNA,miR)-10a激动剂(agomirs)对其干预,探讨其与心肌重塑的关系.方法 45只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(A组,n=15)和缺血再灌注组(n=30),通过结扎左冠状动脉前降支(LAD)制作缺血再灌注模型.模型制作成功24 h后,心肌梗死组再随机分为缺血再灌注对照组(B组,n=15)和miR-10a agomirs干预组(C组,n=15).miR-10a agomirs干预组予以尾静脉注射miR-10a agomirs(80 mg/kg),A组和B组给以阴性对照试剂尾静脉注射,每周1次,持续4周.利用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测缺血再灌注区HDAC2 mRNA的表达,Western blot法测定BNP蛋白的含量.结果 miR-10a agomirs干预4周后,A、B、C3组心肌HDAC2mRNA相对表达量[HDAC2mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH) mRNA]分别为6.58±0.23×10-5、14.29±2.16×10-5、10.11±1.55 ×10-5.左心重量指数分别为2.10±0.26、2.61±0.11、2.41±0.12.A组缺血再灌注区心肌中HDAC2 mRNA的表达,BNP蛋白含量,左心重量指数与B、C组比较显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);B组与C组比较,缺血再灌注区心肌中HDAC2 mRNA的表达,BNP蛋白含量,左心室重量指数显著升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 miR-10a可能通过抑制HDAC2 mRNA的表达来抑制BNP的产生,从而改善大鼠缺血再灌注后心肌重塑. 展开更多
关键词 微小RNA-10a 组蛋白去乙酰化酶2基因 脑钠肽 心肌缺血 再灌注损伤 心肌重塑
MicroRNA-10a通过调控MMP的表达促进胶质瘤细胞侵袭 被引量:3
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作者 范立刚 吴德刚 +4 位作者 孙立华 王颖毅 梅赞 尤永平 刘宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期 617-623,共7页
目的:研究microRNA-10a(miR-10a)对人脑胶质瘤细胞系U87MG侵袭性的影响。方法:脂质体包被miR-10a反义寡聚核苷酸(miR-10a antisense oligodeoxynucleotide,miR-10a-anti—ODN),转染胶质瘤U87MG细胞,并设无义miRNA转染组和空... 目的:研究microRNA-10a(miR-10a)对人脑胶质瘤细胞系U87MG侵袭性的影响。方法:脂质体包被miR-10a反义寡聚核苷酸(miR-10a antisense oligodeoxynucleotide,miR-10a-anti—ODN),转染胶质瘤U87MG细胞,并设无义miRNA转染组和空白对照组,流式细胞术和荧光显微镜检测miR-10a-anti-ODN对U87MG细胞的转染效率,流式细胞术检测转染miR-10a-anti-ODN后U87MG细胞的凋亡和细胞周期,MTF法检测U87MG细胞的增殖,Transwell实验检测miR—10a-anti-ODN对U87MG细胞迁移和侵袭的影响;RT-PCR和Western blotting法分别检测U87MG细胞中MMP-2、MMP-9、MMP-14mRNA及蛋白的表达。结果:转染miR-10a—anti-ODN后,U87MG细胞的增殖、周期和凋亡无明显改变,U87MG细胞的侵袭[(87±7.1)135(155±3.7)、(149±6.6)个细胞,P〈0.05]和迁移[(78.0±5.2)vs(150.3±3.7)、(147.3±6.6)个细胞,P〈0.05]能力明显下降,侵袭相关因子MMP-2、MMP-9、MMP-14的mRNA及蛋白表达水平也明显下降。结论:miR-10a通过调控MMP-2、MMP-9、MMP-14的表达促进胶质瘤U87MG细胞的侵袭,miR-10a可能是胶质瘤治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 microRNA-10a 反义寡聚核苷酸 胶质瘤 侵袭 迁移 基质金属蛋白酶
microRNA-10a对胃癌细胞系BGC823迁移和侵袭能力的影响 预览 被引量:11
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作者 彭亮 潘健 +4 位作者 胡海 孙力超 周转 冉宇靓 杨治华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期 417-421,共5页
目的:研究人微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对胃癌细胞系BGC823迁移和侵袭能力的影响。方法:利用Transwell小室对胃癌细胞系BGC823进行侵袭筛选,获得高侵袭能力的BGC823-P3亚系;通过miRNA芯片差异分析发现miR-10a在高侵袭能力BG... 目的:研究人微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对胃癌细胞系BGC823迁移和侵袭能力的影响。方法:利用Transwell小室对胃癌细胞系BGC823进行侵袭筛选,获得高侵袭能力的BGC823-P3亚系;通过miRNA芯片差异分析发现miR-10a在高侵袭能力BGC823-P3细胞的表达显著高于BGC823细胞。通过化学方法合成成熟型的人miR-10a,以脂质体包裹合成的miR-10a(25、50、100、150nmol/L)转染BGC823细胞,并设空白转染、无关序列转染对照组;Real-timePCR分别检测以上各组细胞miR-10a的表达。采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测miR-10a对细胞增殖的影响,流式分析检测miR-10a对细胞凋亡的影响,Transwell小室检测miR-10a对细胞的迁移和侵袭能力的影响。结果:化学合成的成熟型miR-10a转染后,BGC823细胞miR-10a表达的提高以100nmol/LmiR-10a转染组最佳,较无关序列转染组提高了2.06倍。miR-10a(100nmol/L)的转染对胃癌细胞系BGC823的增殖和凋亡无明显影响,但对BGC823的迁移和侵袭能力有明显的促进作用,促进率分别为(88.34±0.61)%和(56.02±3.13)%。结论:转染成熟型人miR-10a能使胃癌细胞系BGC823中miR-10a的表达提高,并能显著促进胃癌细胞系BGC823的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胃癌细胞 微小RNA-10a 迁移 侵袭
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MicroRNA-10a promotes granulosa cells tumor development
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作者 Jia-jie TU Wei WEI 《中国药理学与毒理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期973-973,共1页
微小RNA-10b靶向蛋白去乙酰化酶4调控雌激素受体阳性MCF-7乳腺癌细胞他莫昔芬耐药性
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作者 张建祥 马艳梅 +1 位作者 王芳 李建华 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2018年第6期1009-1012,共4页
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-10b靶向蛋白去乙酰化酶4(HDACA)调控雌激素受体阳性(ER+)MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性。方法建立ER+且他莫昔芬耐药的MCF-7细胞株MCF...7TR,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检... 目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-10b靶向蛋白去乙酰化酶4(HDACA)调控雌激素受体阳性(ER+)MCF-7乳腺癌细胞对他莫昔芬的耐药性。方法建立ER+且他莫昔芬耐药的MCF-7细胞株MCF...7TR,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测MCF-7细胞和MCF-7-TR细胞miR-10b表达水平。分别采用噻唑蓝(MTr)法和锥虫蓝法检测转染pre-miR-10b、miR-10b抑制物、siHDACA的MCF-7细胞、MCF-7-TR细胞在不同他莫昔芬浓度下(0、5、10、15、20、30μmol/L)的增殖能力和活性。采用Westernblot检测HDACA蛋白表达情况。结果以MCF-7乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力作为标准,MCF-7-TR细胞乳腺癌细胞miR-10b表达水平和侵袭能力较MCF-7乳腺癌细胞分别为7.2±1.1和5.3±1.3。随着他莫昔芬浓度增加,各细胞增殖率均呈下降趋势,其中以MCF-7细胞最为明显,其次为MCF-7-TR+miR-10b抑制物+siHDAC4细胞以及MCF-7+pre-miR-10b+HDACA细胞,而MCF-7-TR+siHDACA细胞和MCF-7-TR细胞增殖率下降程度最低。MCF-7细胞和MCF-7-TR+miR-10b抑制物细胞的迁移能力下降最多,而MCF-7+pre-miR-10b+他莫昔芬(10μmol/L)细胞和MCF-7-TR+他莫昔芬(10μmol/L)细胞的迁移能力比较差异无统计学意义(t=1.116,P=0.272),但显著高于MCF-7细胞和MCF-7-TR+miR.10b抑制物细胞(t=0.124、10.769、14.569、11.577,P均为0.000)。MCF-7+pre-miR-10b细胞HDACA蛋白表达水平低于MCF-7细胞,MCF-7-TR细胞HDACA蛋白表达水平MCF-7-TR+miR-10b抑制物细胞,MCF-7+siHDAC4细胞HDAC4蛋白表达水平低于MCF-7细胞。结论miR-lOb-HDAC4信号通路可能作为乳腺癌他莫昔芬耐药的一种分子机制。 展开更多
关键词 乳腺癌 雌激素受体阳性 他莫昔芬耐药 微小RNA-10b 蛋白去乙酰化酶4
微小RNA-10b-3p对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 预览
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作者 张超 张洁 +8 位作者 高鹏 王欢 曹春晓 刘美月 陈思远 杨朝 缐丽歌 张立新 孙国贵 《临床肿瘤学杂志》 CAS 北大核心 2018年第11期961-966,共6页
目的 探讨微小RNA-10b-3p(miR-10b-3p)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 采用QPCR检测miR-10b-3p在ESCCTE-1、EC109、KYSE30、KYSE150、KYSE180、KYSE450和KYSE510细胞株中的相对表达量,选取相对表达水平最高和最... 目的 探讨微小RNA-10b-3p(miR-10b-3p)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法 采用QPCR检测miR-10b-3p在ESCCTE-1、EC109、KYSE30、KYSE150、KYSE180、KYSE450和KYSE510细胞株中的相对表达量,选取相对表达水平最高和最低的细胞株分别转染miR-10b-3p抑制剂和模拟物,并设转染对照载体的对照组。采用MTS实验、克隆集落形成实验及Transwell趋化小室实验检测miR-10b-3p对ESCC细胞增殖,克隆形成及侵袭、迁移能力的影响。结果 miR-10b-3p在TE-1、EC109、KYSE30、KYSE150、KYSE180、KYSE450以及KYSE510细胞株中的相对表达量分别为0.14、0.27、0.66、0.10、0.12、0.08和0.78。选取miR-10b-3p相对表达量最低的KYSE450细胞株和相对表达量最高的KYSE510细胞进行后续实验。MTS检测显示,与对照组比较,模拟物组KYSE450细胞的增殖能力显著上调(P<0.05),抑制剂组KYSE510细胞的增殖能力显著降低(P<0.05)。克隆集落形成实验显示,模拟物组KYSE450细胞的集落数为(613.7±41.1)个,高于对照组的(243.7±25.3)个(P<0.05);抑制剂组KYSE510细胞的集落数为(90.3±11.0)个,低于对照组的(247.0±14.7)个(P<0.05)。Transwell小室实验显示,模拟物组穿过迁移小室的KYSE450细胞数为(211.1±27.3)个,高于对照组的(151.7±15.3)个(P<0.05);模拟物组穿过侵袭小室的细胞数为(183.3±15.5)个,高于对照组的(133.5±8.8)个(P<0.05)。抑制剂组穿过迁移小室的KYSE510细胞数为(50.0±6.7)个,低于对照组的(83.3±12.9)个(P<0.05);抑制剂组穿过侵袭小室的KYSE510细胞数为(38.8±8.5)个,低于对照组的(66.7±7.3)个(P<0.05)。结论 miR-10b-3p可以促进ESCC细胞的增殖、侵袭和迁移,可能作为ESCC基因治疗的有效靶点。 展开更多
关键词 食管鳞癌(ESCC) 微小RNA-10b-3p(miR-10b-3p) 侵袭 迁移 增殖
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microRNA-10b与胰腺癌吉西他滨耐药的相关性及机制研究 被引量:1
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作者 顾燊 邵欣宇 邹晓平 《南京医科大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2017年第7期830-835,共6页
目的:探讨microRNA-10b(miR-10b)与胰腺癌细胞吉西他滨(gemcitabine,GEM)化疗耐药的相关性及可能机制。方法:RT-qPCR检测吉西他滨相对耐药的胰腺癌细胞株PANC-1及吉西他滨相对敏感的CFPAC-1中miR-10b的表达情况;用不同浓度的吉西... 目的:探讨microRNA-10b(miR-10b)与胰腺癌细胞吉西他滨(gemcitabine,GEM)化疗耐药的相关性及可能机制。方法:RT-qPCR检测吉西他滨相对耐药的胰腺癌细胞株PANC-1及吉西他滨相对敏感的CFPAC-1中miR-10b的表达情况;用不同浓度的吉西他滨作用于上述细胞,RT-qPCR检测二者miR-10b的表达变化;CFPAC-1细胞转染miR-10b mimics上调miR-10b表达量,CCK-8法及流式细胞仪检测细胞对吉西他滨药物敏感性的变化,Western blot检测抗凋亡相关蛋白(如PI3K、p-Akt、Bcl-2、Survivin)的表达,RT-qPCR检测PTEN基因的表达变化。结果:PANC-1细胞中miR-10b的表达显著高于CFPAC-1细胞,且上述两种细胞中miR-10b的表达量与吉西他滨呈浓度梯度依赖;高表达miR-10b后CFPAC-1细胞对吉西他滨的敏感性下降,PI3K、p-Akt、Bcl-2、Survivin蛋白的表达升高,PTEN mRNA的表达水平降低。结论:miR-10b可能通过负性调控PTEN的表达水平,从而增加PI3K、p-Akt、Bcl-2、Survivin蛋白的表达,减少凋亡来降低CFPAC-1对吉西他滨的敏感性,最终导致胰腺癌细胞对吉西他滨化疗耐受。 展开更多
关键词 microRNA-10b 胰腺癌 吉西他滨 化疗耐药
48例肺磨玻璃结节患者血浆中miR-10b的表达及意义 预览
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作者 陈兴隆 董明 《临床肺科杂志》 2017年第10期1863-1865,共3页
目的 探讨肺磨玻璃结节患者血浆中miR-10b作为诊断标记物的可能性。方法 收集48例肺磨玻璃结节患者血浆,经术后病理证实良性病变16例,癌前病变(AAH,AIS)16例,微浸润性腺癌(MIA)8例,浸润性腺癌(IA)8例,采用实时荧光定量PCR检测各... 目的 探讨肺磨玻璃结节患者血浆中miR-10b作为诊断标记物的可能性。方法 收集48例肺磨玻璃结节患者血浆,经术后病理证实良性病变16例,癌前病变(AAH,AIS)16例,微浸润性腺癌(MIA)8例,浸润性腺癌(IA)8例,采用实时荧光定量PCR检测各组血浆miRNA-10b水平,分析miRNA-10b与肺磨玻璃结节不同病理类型之间的关系。绘制ROC曲线,评估其诊断意义。结果 肺癌相关组血浆miR-10b水平(RQ=0.828(0.485,1.700))较良性病变组(RQ=0.458(0.271,0.698))上调1.808倍,差异具有统计学意义(P=0.007);血浆miR-10bRQ值为0.731时,诊断微浸润腺癌(MIA)的AUC为0.827,敏感性为100%,特异性为67.5%;RQ值为1.137时,诊断浸润性腺癌(IA)的AUC为0.853,敏感性为75%,特异性为87.5%。结论GGO结节患者肺癌相关病变血浆miR-10b显著上调,特别是对微浸润腺癌和浸润性腺癌有一定诊断意义,有望成为GGO结节诊断标记物。 展开更多
关键词 microRNA-10b 肺磨玻璃结节 诊断标记物
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MicroRNA-10b与早期乳腺浸润性导管癌的临床及预后研究 预览
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作者 陈亚勇 郭晨明 +3 位作者 迪丽米娜·伊拉木 付明刚 吴楠 郭丽英 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期40-45,共6页
目的 探讨早期乳腺浸润性导管癌中microRNA-10b(miR-10b)表达与临床指标及预后关系。方法 采用原位分子杂交技术,检测305例中早期乳腺浸润性导管癌组织miR-10b表达,采用Pearson χ2检验分析miR-10b表达在不同临床指标间的差异性;采用S... 目的 探讨早期乳腺浸润性导管癌中microRNA-10b(miR-10b)表达与临床指标及预后关系。方法 采用原位分子杂交技术,检测305例中早期乳腺浸润性导管癌组织miR-10b表达,采用Pearson χ2检验分析miR-10b表达在不同临床指标间的差异性;采用Spearman秩和相关分析早期乳腺浸润性导管癌中miR-10b、年龄、淋巴结、雌激素受体α(ERα)、孕激素受体(PR)及人类表皮生长因子受体2(HER-2)之间的相关性。采用Kaplan-Meier法计算累计无瘤生存时间,应用Log-rank检验比较miR-10b不同表达组间无瘤生存时间的差异。结果 早期乳腺浸润性导管癌中miR-10b表达与年龄、肿瘤大小和复发转移,差异具有统计学意义(P〈0.05);与月经状态、临床分期、化疗、放疗及内分泌治疗比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。miR-10b阳性表达与HER-2阳性表达呈正相关,差异有统计学意义(P〈0.05)。miR-10b表达阴性中位无瘤生存时间较miR-10b表达阳性时间长,两者比较差异有统计学意义(P〈0.05);淋巴结阴性时miR-10b阴性表达的中位无瘤生存时间较阳性表达长,两者比较差异有统计学意义(P〈0.05);相反,miR-10b表达在淋巴结阳性中位无瘤生存时间无统计学意义(P〉0.05)。结论 miR-10b表达水平与早期乳腺浸润性导管癌复发转移相关,特别在无淋巴结转移且miR-10b阳性表达组的中位无瘤生存时间短,预后差。miR-10b阳性表达是早期乳腺浸润性导管癌的预后因素。 展开更多
关键词 早期乳腺浸润性导管癌 microRNA-10b 临床 预后
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microRNA-10b及靶基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及侵袭能力的影响 预览
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作者 熊建宁 胡立春 +1 位作者 王亚兵 段雪飞 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第6期11-14,共4页
目的探讨micro RNA-10b(miR-10b)及其靶基因同源异性盒基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及转染mi R-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法分析HOXD10基因在3种肝癌细胞株Huh7、HepG2、SMMC-7721中的基础表达量,筛选出HOXD10基础表达量高... 目的探讨micro RNA-10b(miR-10b)及其靶基因同源异性盒基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及转染mi R-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法分析HOXD10基因在3种肝癌细胞株Huh7、HepG2、SMMC-7721中的基础表达量,筛选出HOXD10基础表达量高的Hep G2作为后续研究对象。设计合成外源性miR-10b序列,用脂质体瞬时转染肝癌细胞株,设置miR-10b转染组、无关序列转染组(阴性对照组)和未处理组(对照组)。用RT-PCR及Western blot检测肝癌细胞转染miR-10b后HOXD10基因及蛋白表达量的变化,细胞侵袭实验研究转染miR-10b对肝癌细胞侵袭能力。结果在基因水平和Western blot分析蛋白水平HOXD10基因表达量2-ΔΔCT分别是(1.24±0.23)、(1.00±0.02),P〉0.05差异无统计学意义。在蛋白分析Hep G2细胞灰度计算值是值分别是653.492和1 968.742,蛋白水平表达降低。HOXD10基因在肝癌细胞株HepG2的表达量显著高于Huh7和SMMC-7721;miR-10b成功转染Hep G2后,HOXD10基因表达水平与对照组比较无明显变化,但HOXD10蛋白表达量与对照组比较下降及侵袭性也增强。结论 miR-10b可能通过抑制靶基因HOXD10表达发挥作用,促进肝癌细胞的侵袭。 展开更多
关键词 肝癌细胞 microRNA-10b HOXD10 侵袭
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微小RNA-10b对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 郑岩松 向春晖 石铮 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2196-2198,共3页
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-10b对入胰腺癌细胞AsPC-1细胞(AsPC-1)增殖凋亡的影响.方法 重组真核表达载体pPG-CMV-EGFP-miR-10b(实验组)及空载体(对照组)转染AsPC-1细胞株.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和荧光显微... 目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-10b对入胰腺癌细胞AsPC-1细胞(AsPC-1)增殖凋亡的影响.方法 重组真核表达载体pPG-CMV-EGFP-miR-10b(实验组)及空载体(对照组)转染AsPC-1细胞株.实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和荧光显微镜检测载体瞬时表达的效率;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞生长曲线;流式细胞仪检测不同组间细胞的凋亡;Western blot检测细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2蛋白家族促凋亡调节蛋白(Bim)、髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白的表达.结果 与对照组(0.002 529±0.000 339)比较,实验组miR-10b表达量(0.020 500±0.007700)增加10倍,差异有统计学意义(P<0.05).细胞生长曲线提示,实验组细胞增殖活性较对照组增高24%,差异有统计学意义(P<0.05);实验组细胞凋亡率为3.0%,对照组为10.1%,差异有统计学意义(P<0.05);实验组细胞Bim蛋白的相对表达水平(0.256 ±0.012)低于对照组(0.652±0.042),差异有统计学意义(P<0.05);实验组细胞MCL-t蛋白的相对表达水平(0.515±0.025)高于对照组(0.154 ±0.068),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-10b过表达可调控胰腺癌细胞Bim、MCL-1蛋白的表达,促进细胞增殖,抑制凋亡. 展开更多
关键词 微小RNA-10b 胰腺癌 增殖
Effects of MicroRNA-10b on lung cancer cell proliferation and invasive metastasis and the underlying mechanism 被引量:1
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作者 Qiao-Li Su Shuang-Qing Li +2 位作者 Duo-Ning Wang Feng Liu Bo Yuan 《亚太热带医药杂志:英文版》 SCIE CAS 2014年第5期364-367,共4页
Objective:To study the influence of MicroRNA-lOb on proliferation and invasion of human low metastatic lung cancer cell 95-C and its mechanism.Methods:Lipofectamine MicroRNA-lOb eukaryotic expression plasmid was tran... Objective:To study the influence of MicroRNA-lOb on proliferation and invasion of human low metastatic lung cancer cell 95-C and its mechanism.Methods:Lipofectamine MicroRNA-lOb eukaryotic expression plasmid was transfected into 9S-C.The experiment group was divided into blank control group,empty vector transfected group and MicroRNA-lOb transfected group.Real time quantitative RT-PCR was used to detect the expression of MicroRNA-lOb and KLF4mRNA expression.Proliferations of cells were detected by cell proliferation assay,invasion of the delected the cell Transwell experiments,the expression of KLF4 protein was detected in Western blotting cells.Results:The proliferation rate of MicroRNA-lOb piasmid transfection group increased significantly after transfection,invasion and migration ability enhancement,by comparison,there are statistically significant differences in the blank control group and negative control group(P【0.05);the expression of MicroRNA-lOb piasmid transfection group KLF4protein decreased,the difference was statistically significant(P【0.05);reduce the expression of MicroRNA-l0b piasmid transfection group KLF4mRNA,but no significant differences(P】0.05).Conclusions:MicroRNA-l0b may promote proliferation and invasion of 95-C cells by down regulating the expression of KLF4 protein. 展开更多
关键词 MicroRNA-10b LUNG cancer 95-C PROLIFERATION INVASION
MicroRNA-10b对人低转移肺癌细胞株95-C增殖和侵袭的作用及其机制的研究 预览 被引量:3
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作者 刘翼 李明慧 +2 位作者 张国庆 庞作良 郭文佳 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第9期928-931,共4页
目的:微小RNA(microRNA, miRNA)-10b被证实可促进多种肿瘤细胞的生长及增强其侵袭能力。文中旨在研究miRNA-10b对人低转移肺癌细胞95-C的增殖及侵袭力的影响及其作用机制。方法用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,... 目的:微小RNA(microRNA, miRNA)-10b被证实可促进多种肿瘤细胞的生长及增强其侵袭能力。文中旨在研究miRNA-10b对人低转移肺癌细胞95-C的增殖及侵袭力的影响及其作用机制。方法用脂质体法将miRNA-10b真核表达质粒瞬时转染入95-C,实验设置空白对照组、阴性对照组和miRNA-10b质粒转染组,实时定量荧光PCR(Real-Time PCR, RT-PCR,)检测各组细胞miRNA-10b的表达及KLF4mRNA的表达,细胞增殖实验检测各组细胞的增殖情况, Transwell实验检测各组细胞侵袭能力,Western blot检测各组细胞KLF4蛋白的表达。结果转染后48 h,RT-PCR检测,miRNA-10b质粒转染组miRNA-10b表达(1.61±0.12)较空白对照组(1.01±0.08)、阴性对照组(0.86±0.07)明显上调(P<0.05),阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05)。生长曲线反映miRNA-10b质粒转染组细胞生长速度明显高于空白对照组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),空白对照组和阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);Transwell结果显示, miRNA-10b质粒转染组[(188.0±15.1)/高倍显微镜]较空白对照组[(151.0±11.3)/高倍显微镜]、阴性对照组[(136.0±10.8)/高倍显微镜]有更多的细胞迁移到Transwell膜的另一侧(P<0.05),空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义(P>0.05);转染后48 h,miRNA-10b质粒组KLF4蛋白表达(0.86±0.06)较空白对照组(1.48±0.05)和阴性对照组(1.54±0.08)降低(P<0.05);各组细胞KLF4 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miRNA-10b可能过下调KLF4蛋白的表达促进95-C细胞的增殖及侵袭能力。 展开更多
关键词 MicroRNA-10b 95-C KLF4 细胞增殖 侵袭能力
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肺腺癌患者血浆microRNA-10b表达及临床意义 被引量:3
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作者 刘菲 潘旭峰 +5 位作者 周琳 周健 张铎 施建新 高文 路丽明 《中华实用诊断与治疗杂志》 2014年第9期846-848,共3页
目的 探讨肺腺癌患者血浆microRNA-10b(miR-10b)与临床特征的关系及其作为肺腺癌肿瘤标志物的可行性。方法 46例肺腺癌患者(肺腺癌组)与42例体检健康者(对照组),采用实时荧光定量PCR检测2组血浆miR-10b水平,分析miR-10b与肺腺癌... 目的 探讨肺腺癌患者血浆microRNA-10b(miR-10b)与临床特征的关系及其作为肺腺癌肿瘤标志物的可行性。方法 46例肺腺癌患者(肺腺癌组)与42例体检健康者(对照组),采用实时荧光定量PCR检测2组血浆miR-10b水平,分析miR-10b与肺腺癌临床特征间关系。绘制ROC曲线,评估miR-10b的诊断效能。结果 肺腺癌组血浆miR-10b水平(1.632(0.836,2.313))较对照组(0.497(0.221,0.766))上调3.284倍(P〈0.01);miR-10b表达在淋巴结转移上差异有统计学意义(P〈0.05),在肿瘤原发灶情况、TNM分期上差异无统计学意义(P〉0.05);miR-10b为1.212时,诊断肺腺癌的敏感性为64.3%,特异性为82.4%,AUC为0.765。结论 肺腺癌患者血浆miR-10b表达明显上调,miR-10b有望成为肺腺癌的早期诊断标志物。 展开更多
关键词 肺腺癌 microRNA-10b 肿瘤标志物
MicroRNA-10a通过靶向作用E2F3抑制肝癌细胞的增殖 被引量:1
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作者 赵锴 王春梅 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期383-388,共6页
目的:探讨微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本,Real-ti... 目的:探讨微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本,Real-time PCR法分析144例肝癌组织及癌旁组织中miR-10a的表达量。在肝癌细胞(QGY-7701、Huh7、PCL/PRF/5)中转染miR-10a模拟物,Real-time PCR法检测转染后细胞miR-10a的表达水平;CCK-8法检测过表达miR-10a的肝癌细胞的增殖水平,流式细胞术检测过表达miR-10a的肝癌细胞的凋亡和细胞周期;生物信息学预测并以Western blotting检测过表达miR-10a的肝癌细胞中转录因子E2F3的表达量。结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中的miR-10a显著低表达[(-9.89±1.68)vs(-7.84±1.97),P=0.000]。转染miR-10a模拟物后肝癌细胞系中miR-10a的表达量是转染对照小RNA组或空白组细胞的16倍左右。过表达miR-10a可显著抑制7种肝癌细胞(QGY-7701、QGY-7703、Huh7、PCL/PRF/5、HepG2、BeL-7402、SMMC-7721)的增殖(均P〈0.05),并引起肝癌细胞细胞周期G1/S期阻滞,但并不能诱导肝癌细胞发生凋亡。生物信息学预测显示E2F3是miR-10a可能的靶分子,Western blotting检测显示过表达miR-10a可明显抑制肝癌细胞中E2F3的表达[(0.50±0.12)vs(0.79±0.21),P〈0.05]。结论:人肝癌组织中低表达miR-10a,转染miR-10a模拟物后多种肝癌细胞的增殖均受到明显抑制,其机制可能与miR-10a靶向作用转录因子E2F3并阻滞肝癌细胞细胞周期于G1/S期有关。 展开更多
关键词 肝癌 微小RNA-10a 增殖 转录因子 E2F3 G1 S期阻滞
微小RNA—10b沉默对人三阴性乳腺癌细胞生物学行为的影响及其机制 被引量:2
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作者 田南南 孙国栋 +1 位作者 郑名华 杨建新 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期932-934,共3页
目的观察微小RNA-10b(miR-10b)沉默对人三阴性乳腺癌MDA—MB-231细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法用人工合成的miR-10binhibitor转染MDA—MB-231细胞,同时设空白细胞组和无义序列转染组为对照组,实时定量聚合酶链反应(Rea... 目的观察微小RNA-10b(miR-10b)沉默对人三阴性乳腺癌MDA—MB-231细胞生物学行为的影响,并探讨其机制。方法用人工合成的miR-10binhibitor转染MDA—MB-231细胞,同时设空白细胞组和无义序列转染组为对照组,实时定量聚合酶链反应(Real—timePCR)检测转染后miR-10b的表达,以检验沉默效果。CCK-8法、流式细胞术、Transwell侵袭实验分析细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移能力变化。Real—timePCR和Westernblot法分别检测T淋巴细胞侵袭转移诱导因子1(TIAM1)mRNA和蛋白的表达。结果与对照组比较,miR-10binhibitor转染组的2^-△△cr。值(0.26±0.01)明显下调(P〈0.01),表明成功沉默miR-10b的表达。miR-10b沉默后,48h和72h细胞增殖率分别为(409.10±8.38)%和(610.70±17.59)%,均明显上调(P〈0.01),增殖效应在48h之后出现,并一直维持到72h;早期和晚期细胞凋亡比例分别为1.77%和1.61%,均明显下调(P〈0.05);穿过基质膜的侵袭和迁移细胞数分别为(212.17±13.57)个和(322.67±8.62)个,均明显上调(P〈0.01)。TIAM1基因在mRNA水平变化不大(P〉0.05),在蛋白水平表达上调(P〈0.05)。结论miR,10b沉默可以促进MDA—MB-231细胞的增殖、侵袭和迁移,并抑制凋亡,其机制可能与miR-10b沉默后在转录后水平上调TIAM1蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 微小RNA—10b T淋巴瘤侵袭转移诱导因子1 侵袭
微小RNA-10b在不同分化程度胃癌细胞株中的表达
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作者 任辉 史莹 +1 位作者 林巍 姜涛 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1942-1943,共2页
目的 观察微小RNA-10b(miR-10b)在不同分化程度的胃癌细胞株中的表达水平.方法 选择5种胃癌细胞株,根据其不同分化程度分为3组,即高分化组(AGS)、中分化组(N87、SGC-7901)、低分化组(MKN-45、BGC-823),以胃黏膜上皮永生化细胞GE... 目的 观察微小RNA-10b(miR-10b)在不同分化程度的胃癌细胞株中的表达水平.方法 选择5种胃癌细胞株,根据其不同分化程度分为3组,即高分化组(AGS)、中分化组(N87、SGC-7901)、低分化组(MKN-45、BGC-823),以胃黏膜上皮永生化细胞GES-1为第4组,即正常组,通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和荧光素酶报告基因定量检测,观察miR-10b在6种不同分化水平的细胞株中的表达.结果 miR-10b在正常组及高分化组中几乎不存在表达,设定其在GES-1中的表达量为1.0,高分化组相对表达量为2.5,中分化组弱表达,相对表达量为7.5、7.0,在包括BGC-823、MKN45这种具有高度转移倾向的低分化组中明显高表达,相对表达量为10.5、12.5.结论 miR-10b在低分化胃癌细胞株中过表达,同时其表达水平与胃癌细胞侵袭转移能力呈正相关. 展开更多
关键词 胃癌细胞株 微小RNA—10b 实时定量聚合酶链反应
微小RNA-10b对胶质瘤细胞增殖能力的影响 被引量:3
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作者 孙利波 刘莉 +2 位作者 梁华新 付超 赵丛海 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1514-1516,共3页
目的 观察微小RNA-10b(miR-10b)在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞增殖能力的影响。方法 利用TaqMan?实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测77例不同级别胶质瘤组织、15例正常脑组织及胶质瘤细胞株中miR-10b的表达。采用噻唑... 目的 观察微小RNA-10b(miR-10b)在胶质瘤中的表达及其对胶质瘤细胞增殖能力的影响。方法 利用TaqMan?实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测77例不同级别胶质瘤组织、15例正常脑组织及胶质瘤细胞株中miR-10b的表达。采用噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪检测转染miR-10b模拟物对胶质瘤A172细胞增殖能力及细胞周期分布的影响。结果 miR-10b在胶质瘤细胞和胶质瘤组织中的表达水平明显高于正常脑组织(4.46±0.24比0.44±0.10,P〈0.01),且miR-10b的表达水平与胶质瘤组织病理分级呈正相关(I级:2.10±0.27,Ⅱ级:3.58±0.35、Ⅲ级:4.85±0.38、Ⅳ级:6.38±0.37,P〈0.01)。过表达miR-10b能够促进A172细胞的体外增殖能力,并使A172细胞处于G0/G1期的细胞减少,进入S期的细胞明显增多。结论 miR-10b在胶质瘤中过表达,加速胶质瘤细胞进入S期,促进增殖。 展开更多
关键词 微小RNA-10b 胶质瘤 增殖
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