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环状RNA_0054537联合连翘苷调控肝癌细胞生物学特性的分子机制 认领
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作者 高志强 陈君 +4 位作者 李丁洋 刘兆臣 葛鹏磊 张弓 党晓卫 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1464-1468,共5页
目的探讨连翘苷对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对环状RNA_0054537(circ_0054537)/微小RNA(miRNA,miR)-409-3p的调控作用。方法体外培养肝癌细胞Hep3B,使用不同剂量(5、10、20μmol/L)的连翘苷处理Hep3B细胞;采用细胞计数... 目的探讨连翘苷对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响及其对环状RNA_0054537(circ_0054537)/微小RNA(miRNA,miR)-409-3p的调控作用。方法体外培养肝癌细胞Hep3B,使用不同剂量(5、10、20μmol/L)的连翘苷处理Hep3B细胞;采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡率;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力;采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测circ_0054537、miR-409-3p的表达量;双荧光素酶报告实验检测circ_0054537、miR-409-3p的靶向关系;Hep3B细胞中分别转染si-circ_0054537、pcDNA-circ_0054537,采用上述方法检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭。组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果连翘苷可明显降低细胞活力[(1.276±0.110)个比(1.031±0.090)、(0.637±0.050)、(0.507±0.040)个,F=244.841,P<0.05],增高凋亡率[(7.34±0.62)%比(12.44±1.03)%、(22.86±2.12)%、(28.16±2.71)%,F=244.841,P<0.05],减少迁移细胞数[(154.15±12.76)个比(124.06±10.04)、(78.05±7.25)、(61.13±5.83)个]及侵袭细胞数[(112.04±10.08)个比(89.43±8.13)、(57.11±5.12)、(43.08±4.05)个,F=186.018、166.514,P<0.05],抑制circ_0054537的表达[(1.00±0.10)比(0.40±0.04),t=16.713,P<0.05],促进miR-409-3p的表达[(1.02±0.11)比(3.42±0.31),t=21.889,P<0.05];转染si-circ_0054537可明显抑制细胞活力[(1.264±0.10)比(0.686±0.06)]、迁移[(151.96±11.17)比(79.03±7.21)]及侵袭能力[(115.28±11.05)比(68.14±6.43),t=14.869、16.457、11.062,P<0.05],增高凋亡率[(7.26±0.71)%比(23.79±2.06)%,t=22.759,P<0.05];双荧光素酶报告实验证实circ_0054537可靶向结合miR-409-3p;转染pcDNA-circ_0054537可明显逆转连翘苷对Hep3B细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的调控作用。结论连翘苷可通过下调circ_0054537的表达而上调miR-409-3p的表达从而抑制肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝癌 连翘苷 环状RNA_0054537 微小RNA-409-3p 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路
产地、采收期及干燥方式对连翘药用成分含量的影响 认领
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作者 王琳 贺献林 +3 位作者 张海新 李运朝 李洪涛 及华 《湖南农业科学》 2020年第2期76-78,共3页
为了探明不同产地和不同采收期连翘中药用成分含量的差异,采集了河北、河南和山西连翘主产区的青翘和老翘样品,检测连翘苷和连翘酯苷A这2种药用成分的含量,并在河北涉县从5月下旬至9月下旬每隔10 d采集一次青翘样品,检测自然晾晒和汽蒸... 为了探明不同产地和不同采收期连翘中药用成分含量的差异,采集了河北、河南和山西连翘主产区的青翘和老翘样品,检测连翘苷和连翘酯苷A这2种药用成分的含量,并在河北涉县从5月下旬至9月下旬每隔10 d采集一次青翘样品,检测自然晾晒和汽蒸烘干的不同干燥处理方法下药用成分的含量变化。结果表明:不同产地连翘药用成分含量存在明显的差异,连翘的药用成分含量排序:河北>山西>河南;青翘中药用成分含量高于老翘;采后汽蒸烘干处理较自然晾晒能够更好地保存药用成分。 展开更多
关键词 连翘 连翘苷 连翘酯苷 产地 采收期
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一测多评法同时测定乳癖消片中5种指标性成分的研究 认领
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作者 邓艳梅 徐建 《中国药师》 CAS 2020年第1期179-182,共4页
目的:建立一测多评(QAMS)法来测定乳癖消片中5种指标性成分的含量。方法:采用HPLC法,以岛津Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈-水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^-1;检测波长为可变波长(0 min,230 nm;... 目的:建立一测多评(QAMS)法来测定乳癖消片中5种指标性成分的含量。方法:采用HPLC法,以岛津Inertsil ODS-3(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱;流动相为乙腈-水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 ml·min^-1;检测波长为可变波长(0 min,230 nm;18 min,203 nm;26.5 min,275 nm;35 min,203 nm);柱温:30℃;进样量:10μl。以连翘苷为参照物建立5种指标性成分之间的相对校正因子,分别采用外标法和一测多评法测定乳癖消片中的5种指标性成分的含量,并对两种方法所得结果进行比较。结果:在一定的线性范围内,连翘苷与芍药苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的相对校正因子为0.411,2.277,3.744,2.776,且在不同试验条件下重现性良好。一测多评法的计算值与外标法测定值间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:所建立的QAMS法可用于测定乳癖消片中5种指标性成分的含量。 展开更多
关键词 一测多评法 乳癖消片 连翘苷 芍药苷 三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷RB1
连翘茎中3种木脂素类化学成分的含量测定 认领
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作者 候玲玲 严文瑞 +1 位作者 席小莉 张立伟 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期287-291,共5页
建立一种用于测定连翘茎中木脂素类成分连翘苷、牛蒡苷元和连翘脂素含量的HPLC方法,并探索不同月份连翘茎中各成分的含量变化规律,为合理开发利用连翘茎资源提供依据。采用Agilent C18柱;流动相为甲醇-0.3%乙酸溶液,流速为0.8 mL·m... 建立一种用于测定连翘茎中木脂素类成分连翘苷、牛蒡苷元和连翘脂素含量的HPLC方法,并探索不同月份连翘茎中各成分的含量变化规律,为合理开发利用连翘茎资源提供依据。采用Agilent C18柱;流动相为甲醇-0.3%乙酸溶液,流速为0.8 mL·min^-1,检测波长为280 nm,柱温为25 ℃,进样量为10 μL。连翘苷在10~300 μg·mL^-1,牛蒡苷元在2~50 μg·mL^-1,连翘脂素在2~50 μg·mL^-1呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.55%,97.55%,98.65%,RSD分别为2.96%,2.27%,2.87%。此外,4月和8月采集的连翘茎中连翘苷含量较高,分别为1.68%和0.72%。本研究建立的方法稳定性好、重复性较好,可用于连翘茎中连翘苷、牛蒡苷元、连翘脂素的含量测定;另外,连翘茎中含有较丰富的连翘苷成分,因此,可作为连翘苷制备的原料来源。 展开更多
关键词 连翘茎 HPLC法 连翘苷 牛蒡苷元 连翘脂素
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超高效液相色谱法分析不同产区青翘主成分含量 认领
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作者 张晓燕 谢勇 +3 位作者 祝宇 余世荣 王娇莉 杜鹏阳 《医药导报》 CAS 北大核心 2020年第3期380-383,共4页
目的建立超高效液相色谱(UPLC)法分析青翘主成分的含量,评价不同产区青翘质量。方法 UPLC法测定18个产区青翘中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁含量,对其重要程度按层次分析法(AHP)进行重要性评判,计算每种成分权重,根据权重计算每个样品综合评... 目的建立超高效液相色谱(UPLC)法分析青翘主成分的含量,评价不同产区青翘质量。方法 UPLC法测定18个产区青翘中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁含量,对其重要程度按层次分析法(AHP)进行重要性评判,计算每种成分权重,根据权重计算每个样品综合评分,一测多评评价各产地青翘综合质量。结果湖北省十堰市郧阳区5批青翘样品综合评分平均89.4,普遍高于其他产区。结论湖北省十堰市是野生青翘药材传统产区,规范采收时间及产地加工工艺能保证该地区青翘药材质量优质及均一。 展开更多
关键词 青翘 连翘苷 连翘酯苷A 色谱法 超高效液相
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连翘苷对非酒精性脂肪肝小鼠模型脂代谢的作用 认领
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作者 王海媛 孙静 +3 位作者 郭红 解文静 尚娟娟 罗冰 《医学分子生物学杂志》 CAS 2020年第5期386-391,共6页
目的探究连翘苷对非酒精性脂肪肝小鼠模型脂代谢的作用.方法采用高脂饲料饲喂将小鼠分为6组:对照组、模型组、连翘苷低、中、高剂量组和烟酸组.油红O染色检测脂质蓄积程度;试剂盒检测血脂指标和血清中转氨酶水平;免疫印迹检测甾醇调节... 目的探究连翘苷对非酒精性脂肪肝小鼠模型脂代谢的作用.方法采用高脂饲料饲喂将小鼠分为6组:对照组、模型组、连翘苷低、中、高剂量组和烟酸组.油红O染色检测脂质蓄积程度;试剂盒检测血脂指标和血清中转氨酶水平;免疫印迹检测甾醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、二酯酰甘油酰基转移酶2(DGAT-2)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)蛋白表达.结果与模型组比较,连翘苷低、中、高剂量组和烟酸组脂质蓄积程度减轻,TC、TG、LDL-C、HDL-C、ALT和AST水平降低,SREBP-1c、DGAT-2蛋白表达降低,ACC、CPT-1蛋白表达升高(P<0.01).结论连翘苷具有治疗非酒精性脂肪肝小鼠模型的作用. 展开更多
关键词 连翘苷 非酒精性脂肪肝 脂肪酸 脂质代谢
消炎止痒浸膏质量标准研究 认领
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作者 吴艳蓉 《中国药业》 CAS 2020年第5期127-129,共3页
目的建立消炎止痒浸膏的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法定性鉴别消炎止痒浸膏制剂中的苦参碱和连翘苷;采用高效液相色谱(HPLC)法测定该制剂中蛇床子素含量,色谱柱为Topsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(63∶37,V... 目的建立消炎止痒浸膏的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法定性鉴别消炎止痒浸膏制剂中的苦参碱和连翘苷;采用高效液相色谱(HPLC)法测定该制剂中蛇床子素含量,色谱柱为Topsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(63∶37,V/V),流速为1.0 m L/min,检测波长为322 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果苦参碱、连翘苷的TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰;蛇床子素质量浓度在5.0~80.0μg/m L范围内与峰面积线性关系良好(r2=0.9996,n=5),平均加样回收率为100.84%,RSD为1.29%(n=6)。结论该方法操作简便,专属性强,样品分离度好,可用于消炎止痒浸膏的质量控制。 展开更多
关键词 消炎止痒浸膏 苦参碱 连翘苷 蛇床子素 薄层色谱法 高效液相色谱法 质量标准
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连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用 认领
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作者 李佳行 杨胜乾 +3 位作者 刘娟娟 罗明明 陈杰 李晓辉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期342-349,共8页
目的探讨连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用及其机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,实验分4组:空白对照组、脂多糖(1μg/mL)处理组、1μmol/L连翘苷加脂多糖处理组和10μmol/L连翘苷加脂多糖处理组。采用MTT法检测HSC... 目的探讨连翘苷对脂多糖诱导肝脏星状细胞活化的抑制作用及其机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,实验分4组:空白对照组、脂多糖(1μg/mL)处理组、1μmol/L连翘苷加脂多糖处理组和10μmol/L连翘苷加脂多糖处理组。采用MTT法检测HSC-T6细胞的增殖;Transwell实验分析细胞的迁移;流式细胞仪检测细胞内的ROS水平;ELISA法检测细胞上清中促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度;Western blot分析细胞内α-SMA、NF-κB p65蛋白表达或蛋白磷酸化水平。结果浓度为1100μmol/L连翘苷对HSC-T6细胞的增殖无明显影响。脂多糖可明显促进HSC-T6细胞增殖及迁移,1μmol/L和10μmol/L连翘苷均可显著抑制脂多糖诱导的细胞增殖及迁移,分别降低16.13%、17.14%,48.99%、58.86%。脂多糖处理HSC-T6细胞能明显增加细胞内α-SMA蛋白的表达,而10μmol/L连翘苷处理后,细胞内α-SMA的表达量减少27.33%。1μmol/L和10μmol/L连翘苷对脂多糖诱导细胞内ROS含量(30.03%、51.26%)、促炎细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β(25.16%、39.51%,36.57%、43.75%,58.99%、73.01%)的分泌和NF-κB p65蛋白的磷酸化水平(13.90%、24.96%)也具有显著抑制作用。相关性分析表明:连翘苷处理肝星状细胞后,其降低NF-κB p65磷酸化蛋白表达和对ROS、炎症因子(IL-1β、TNF-α)的作用与其抑制肝星状细胞活化标志物α-SMA蛋白表达的作用呈正相关。结论天然产物连翘苷能够显著抑制脂多糖诱导肝星状细胞的活化,其机制可能与其下调NF-κB信号途径介导的炎症反应有关。 展开更多
关键词 连翘苷 脂多糖 肝星状细胞 Α-SMA 炎症反应
HPLC法测定牛黄至宝丸中3种有效成分的含量 认领
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作者 张峰 梁艳 《西北药学杂志》 CAS 2020年第3期349-352,共4页
目的建立能同时测定牛黄至宝丸中3种有效成分含量的HPLC法。方法采用Waters XBriage C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-1 mL·L^-1磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1;柱温为35℃;检测波长0~10 min... 目的建立能同时测定牛黄至宝丸中3种有效成分含量的HPLC法。方法采用Waters XBriage C 18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-1 mL·L^-1磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1;柱温为35℃;检测波长0~10 min为239 nm,10~40 min为277 nm。结果连翘苷、橙皮苷和栀子苷分别在0.0202~0.5055,0.1005~2.5055和0.1007~2.5175μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为98.04%,98.03%和98.57%(n=6),RSD值分别为0.62%,0.73%和0.57%。结论该方法操作简便,结果准确,灵敏度高,可用于牛黄至宝丸的质量控制。 展开更多
关键词 牛黄至宝丸 连翘苷 橙皮苷 栀子苷 含量测定
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利用发酵法提高连翘叶中连翘脂素含量的方法研究 认领 被引量:1
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作者 汪青波 张济世 +2 位作者 闫珍 王玲芝 张立伟 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期143-149,共7页
利用植物自身酶对苷类化合物的酶解转化能力,采用发酵技术研究了连翘叶中连翘苷酶解转化为连翘脂素的较适宜发酵条件。首先考察了连翘叶含水量、发酵温度和发酵时间等单因素对连翘脂素转化生成量的影响,然后利用响应面优化法进一步优化... 利用植物自身酶对苷类化合物的酶解转化能力,采用发酵技术研究了连翘叶中连翘苷酶解转化为连翘脂素的较适宜发酵条件。首先考察了连翘叶含水量、发酵温度和发酵时间等单因素对连翘脂素转化生成量的影响,然后利用响应面优化法进一步优化了发酵转化条件。结果表明,在水分含量50%,发酵时间100 min,发酵温度30℃条件下,连翘叶中连翘苷可有效转化生成连翘脂素,且连翘脂素含量从1.67 mg·g^-1提高到46.40 mg·g^-1。本研究确定的方法可为利用连翘叶资源制备连翘脂素提供基础。 展开更多
关键词 连翘叶 连翘脂素 连翘苷 发酵
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HPLC波长切换法同时测定黄金连清解片中有效主成分的含量 认领
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作者 祝芳 陈顺 《山西医科大学学报》 CAS 2020年第10期1123-1127,共5页
目的建立HPLC波长切换法同时测定黄金连清解片中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱5个成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C 18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗... 目的建立HPLC波长切换法同时测定黄金连清解片中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱5个成分的含量。方法采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C 18(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0-7 min,5%-15%A;7-25 min,15%-23%A;25-30 min,23%-8%A);检测波长:0-10 min,327 nm;10-20 min,280 nm;20-25 min,277 nm;25-30 min,345 nm;流速为1.0 ml/min;柱温30℃;进样量10μl。在此色谱条件下测定黄金连清解片中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱5个成分的含量。结果黄芩苷、绿原酸、连翘苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的线性范围分别是0.143-2.856μg(r=0.9998),0.038-0.755μg(r=0.9998),0.031-0.623μg(r=0.9997),0.015-0.305μg(r=0.9999),0.074-1.489μg(r=0.9996);平均加样回收率(n=6)分别为97.86%,97.49%,97.80%,97.75%,97.49%,RSD分别为1.45%,1.23%,1.34%,1.40%和1.40%。3批样品中上述5个成分的含量范围分别为36.281-39.478 mg/g,9.680-10.071 mg/g,7.853-8.253 mg/g,3.928-4.042 mg/g,18.252-18.927 mg/g。结论该方法可用于黄金连清解片中黄芩苷、绿原酸、连翘苷、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量测定。 展开更多
关键词 黄金连清解片 高效液相色谱 波长切换法 黄芩苷 绿原酸 连翘苷 盐酸巴马汀 盐酸小檗碱
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连翘苷的提取工艺优化及其抑菌活性 认领
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作者 张俊顺 骆嘉原 +2 位作者 姜喆卉 包怡红 包洪涛 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2020年第7期193-201,104,共10页
本研究以连翘叶为原料,采用超声辅助半仿生法提取连翘苷,在单因素实验的基础上,设计四因素三水平的响应面试验,确定最佳提取工艺条件。通过滤纸片法测定其抑菌活性,并研究了温度、pH以及紫外对连翘苷抑菌保持率的影响。方差分析结果表明... 本研究以连翘叶为原料,采用超声辅助半仿生法提取连翘苷,在单因素实验的基础上,设计四因素三水平的响应面试验,确定最佳提取工艺条件。通过滤纸片法测定其抑菌活性,并研究了温度、pH以及紫外对连翘苷抑菌保持率的影响。方差分析结果表明:回归模型较好的反映了连翘苷得率与乙醇体积分数、液料比、提取温度以及提取时间之间的关系,得到最佳提取工艺条件:乙醇体积分数为40%,液料比为36:1(m L/g),提取温度为48℃,提取时间为100 min。在此工艺条件下,连翘苷得率为4.42%,高于其他提取方法。抑菌活性试验表明连翘苷对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、沙门氏菌和枯草芽孢杆菌均有抑制作用,对四种供试菌种的抑菌圈直径分别为8.33、9.85、8.85、和8.81mm。高温以及强酸、强碱会减弱连翘苷的抑菌效果,而紫外对连翘苷的抑菌效果基本没有影响。 展开更多
关键词 连翘叶 连翘苷 超声辅助半仿生法 响应面 抑菌活性
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连翘酯苷-溶菌酶-KGM复合保鲜膜在鸡蛋保鲜中的应用研究 认领
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作者 谢倩 张晓虎 潘存丽 《中国农学通报》 2020年第22期136-142,共7页
以商洛连翘果实连翘酯苷、溶菌酶、壳聚糖及魔芋葡甘聚糖为原料制备复合保鲜膜,以期延长鸡蛋的贮藏期。以鸡蛋哈夫单位、蛋黄指数为主要新鲜度评价指标,考察不同浓度连翘酯苷、溶菌酶、壳聚糖及魔芋葡甘聚糖对鸡蛋新鲜度影响。在单因素... 以商洛连翘果实连翘酯苷、溶菌酶、壳聚糖及魔芋葡甘聚糖为原料制备复合保鲜膜,以期延长鸡蛋的贮藏期。以鸡蛋哈夫单位、蛋黄指数为主要新鲜度评价指标,考察不同浓度连翘酯苷、溶菌酶、壳聚糖及魔芋葡甘聚糖对鸡蛋新鲜度影响。在单因素实验基础上,采用响应面法优化复合保鲜膜配方,以鸡蛋哈夫单位为响应值进行保鲜研究。结果表明,复合保鲜膜的最佳配比为连翘酯苷浓度1.64%、溶菌酶浓度2.10%、魔芋葡甘聚糖浓度2.03%、壳聚糖浓度1.5%;用制备的最佳配方复合保鲜膜在37℃恒温贮藏新鲜鸡蛋15天,鸡蛋哈夫单位达74.86±2.31。所研制的复合保鲜膜配方能够作为鸡蛋保藏的技术参考。 展开更多
关键词 连翘酯苷 溶菌酶 魔芋葡甘聚糖 复合保鲜膜 哈夫单位
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连翘苷通过APPL1对缺氧/复氧诱导心肌细胞损伤的影响 认领
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作者 刘晓东 闫业军 《微循环学杂志》 2020年第2期12-19,共8页
目的:研究连翘苷通过转接蛋白APPL1对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡的影响。方法:将大鼠心肌细胞H9C2分为Con组、H/R组、H/R+连翘苷低剂量组、H/R+连翘苷中剂量组、H/R+连翘苷高剂量组、H/R+pcDNA组、H/R+pcDNA-APPL1组、... 目的:研究连翘苷通过转接蛋白APPL1对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡的影响。方法:将大鼠心肌细胞H9C2分为Con组、H/R组、H/R+连翘苷低剂量组、H/R+连翘苷中剂量组、H/R+连翘苷高剂量组、H/R+pcDNA组、H/R+pcDNA-APPL1组、H/R+连翘苷+si-NC组和H/R+连翘苷+si-APPL1组。ELISA检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blot)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及APPL1蛋白;实时荧光定量PCR(qPCR)检测APPL1 mRNA表达。采用单因素方差分析和多重两两比较t检验进行统计学分析。结果:与Con组比较,H/R组心肌细胞MDA含量、凋亡率和Bax蛋白表达明显增加,SOD、GSH-Px活性、Bcl-2蛋白水平、APPL1 mRNA和蛋白表达显著降低(均P<0.01)。与H/R组比较,H/R+连翘苷各剂量组心肌细胞MDA含量、凋亡率、Bax蛋白表达明显减少,SOD、GSH-Px活性、Bcl-2蛋白水平、APPL1 mRNA和蛋白表达显著升高(均P<0.01)。连翘苷各剂量组APPL1 mRNA和蛋白表达高于H/R组(P<0.01)。与H/R+pcDNA组比较,H/R+pcDNA-APPL1组心肌细胞SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白水平显著升高,MDA含量、凋亡率、Bax蛋白表达显著降低(均P<0.01)。H/R+连翘苷+si-APPL1组与H/R+连翘苷+si-NC组比较,心肌细胞中MDA含量、凋亡率、Bax蛋白显著升高,SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论:连翘苷可能通过提高H/R心肌细胞的APPL1表达实现对H/R心肌细胞损伤的治疗作用。 展开更多
关键词 连翘苷 APPL1 缺氧/复氧 心肌细胞 氧化应激 凋亡
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清瘟败毒颗粒中连翘苷的薄层色谱鉴别和含量测定试验 认领
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作者 赵玉丛 李艳玲 +1 位作者 郑瑞锦 张远方 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期90-93,I0009,共5页
为了建立清瘟败毒颗粒中连翘苷的薄层色谱(TLC)鉴别方法和含量测定方法,TLC鉴别方法采用硅胶G薄层板,三氯甲烷-甲醇(8∶1)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂;含量测定采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱条件为:采用LabTech-C18(150 mm×... 为了建立清瘟败毒颗粒中连翘苷的薄层色谱(TLC)鉴别方法和含量测定方法,TLC鉴别方法采用硅胶G薄层板,三氯甲烷-甲醇(8∶1)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂;含量测定采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱条件为:采用LabTech-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水-冰醋酸(27∶73∶0.1),流速1.0 mL/min,UV检测波长277 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果显示:本试验建立的连翘苷TLC鉴别方法操作简便,专属性强;HPLC含量测定方法专属性强,连翘苷在0.025~0.8 mg/mL内线性良好(r=0.9999),日内精密度和日间精密度分别小于0.9%和1.8%,平均回收率范围在96.4%~103.2%。比较了连翘苷从连翘药材到清瘟败毒散、从连翘药材到清瘟败毒颗粒中的转移率,两者并无显著差异。表明本试验建立的清瘟败毒颗粒中连翘苷的TLC鉴别方法和含量测定方法,可用于清瘟败毒颗粒中连翘苷的质量控制及清瘟败毒颗粒制备工艺的优化。 展开更多
关键词 清瘟败毒颗粒 连翘苷 TLC HPLC
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连翘苷调控炎症的抑制作用及机制研究 认领
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作者 杨本军 武明飞 徐涛 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第7期1093-1097,共5页
目的探讨连翘苷(PHN)对脂多糖(LPS)诱导的炎症反应的抑制作用及机制。方法建立体外LPS诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型研究炎性细胞因子的分泌及相关通路蛋白的表达。实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的PHN对小鼠巨噬细... 目的探讨连翘苷(PHN)对脂多糖(LPS)诱导的炎症反应的抑制作用及机制。方法建立体外LPS诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)炎症模型研究炎性细胞因子的分泌及相关通路蛋白的表达。实验采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度的PHN对小鼠巨噬细胞活性的影响,采用Griess法检测细胞上清液中一氧化氮(NO)释放量,ELISA法检测白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达量,Western blot法检测TLR4信号通路相关蛋白的表达,分子对接验证结合模式。并且建立体内LPS诱导的急性肺损伤(ALI)模型,通过观察组织病理学变化,研究PHN的保护作用。结果 PHN在30μmol/L以下浓度范围对细胞增殖无明显抑制作用。并且PHN对LPS诱导的巨噬细胞细胞分泌NO、TNF-α和IL-6具有抑制作用。进一步的研究表明,PHN通过抑制TLR4信号通路抑制巨噬细胞的细胞因子分泌,并且分子对接显示PHN与TLR4蛋白直接有较好的亲和力。另外,PHN在LPS诱导的急性肺损伤模型中显示出良好的体内抗炎活性。结论 PHN可以有效地调控LPS诱导的炎症,其机制可能是阻断TLR4信号通路,从而减少炎性因子的表达。 展开更多
关键词 连翘苷 脂多糖 小鼠巨噬细胞 急性肺损伤 炎症因子 分子对接
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HPLC同时测定清热解毒注射液中的黄芩苷和连翘苷 认领
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作者 姜锋卫 董智攀 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期313-315,共3页
目的采用HPLC法同时测定清热解毒注射液中黄芩苷和连翘苷的含量。方法采用WAT054275 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长278 nm,流动相为乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱,进样量10μL。结果黄芩苷、连翘苷的线性范围分别为0.522~5... 目的采用HPLC法同时测定清热解毒注射液中黄芩苷和连翘苷的含量。方法采用WAT054275 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),检测波长278 nm,流动相为乙腈-0.2%磷酸,梯度洗脱,进样量10μL。结果黄芩苷、连翘苷的线性范围分别为0.522~5.22μg(r=0.9996)、0.0402~0.402μg(r=0.9991),平均回收率分别为100.6%(RSD=1.2%,n=6)、99.0%(RSD=1.5%,n=6)。结论所用方法简便、结果准确、重复性好,可用于清热解毒注射液的质量控制。 展开更多
关键词 清热解毒注射液 黄芩 连翘 黄芩苷 连翘苷 高效液相色谱 含量测定 质量控制
HPLC波长切换法同时测定健儿清解液中9种成分的含量 认领 被引量:1
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作者 程侯连 杜学勤 +2 位作者 甄会贤 王增仙 武敏霞 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期679-685,共7页
目的建立HPLC同时测定健儿清解液中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、陈皮苷、连翘苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法采用Dikma C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-体积分数为0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流... 目的建立HPLC同时测定健儿清解液中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、陈皮苷、连翘苷、木犀草素、芹菜素的含量。方法采用Dikma C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-体积分数为0.1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^-1,柱温:30℃,波长切换325 nm(0~25 min,测定绿原酸、咖啡酸)、254 nm(25~36 min,测定芦丁、金丝桃苷、木犀草苷)、280 nm(36~50 min,测定陈皮苷、连翘苷)、347 nm(50~60 min,测定木犀草素、芹菜素)。结果绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、陈皮苷、连翘苷、木犀草素、芹菜素9个成分的进样量分别在绿原酸23.09~161.6 mg·L^-1(r=0.9999)、咖啡酸1.400~9.802 mg·L^-1(r=0.9995)、芦丁1.667~11.67 mg·L^-1(r=0.9996)、金丝桃苷2.546~17.82 mg·L^-1(r=0.9998)、木犀草苷4.454~31.18 mg·L^-1(r=0.9999)、陈皮苷8.790~61.53 mg·L^-1(r=0.9997)、连翘苷3.516~24.61 mg·L^-1(r=0.9995)、木犀草素0.3900~2.730 mg·L^-1(r=0.9996)、芹菜素0.4404~3.080 mg·L^-1(r=0.9995)与峰面积呈良好的线性关系;加样回收率(n=3)分别为99.6%(RSD=1.1%)、98.3%(RSD=1.3%)、98.7%(RSD=1.6%)、99.5%(RSD=1.1%)、100.1%(RSD=1.0%)、100.0%(RSD=1.1%)、98.6%(RSD=1.2%)、98.2%(RSD=1.4%)、99.3%(RSD=1.2%)。结论本法可用于健儿清解液的质量控制。 展开更多
关键词 健儿清解液 绿原酸 咖啡酸 芦丁 金丝桃苷 木犀草苷 陈皮苷 连翘苷 木犀草素 芹菜素 高效液相色谱
UPLC波长切换法同时测定银花感冒颗粒中5种成分的含量 认领
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作者 于世海 马丽 +1 位作者 李振宇 周春玲 《中国药师》 CAS 2020年第6期1220-1222,共3页
目的:建立超高效液相色谱波长切换法同时测定银花感冒颗粒中绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、甘草酸铵、5-O-甲基维斯阿米醇苷5种成分的含量。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)... 目的:建立超高效液相色谱波长切换法同时测定银花感冒颗粒中绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、甘草酸铵、5-O-甲基维斯阿米醇苷5种成分的含量。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以乙腈(A)-0.1%甲酸溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,波长为327 nm(0~3.0 min)、330 nm(3.0~7.0 min)、254 nm(7.0~8.5 min)、277 nm(8.5~10.0 min)、237 nm(10.0~13.0 min),流速为0.4 ml·min^-1,柱温为25℃。结果:绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、甘草酸铵、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.009~0.452,0.005~0.234,0.005~0.228,0.013~0.645,0.005~0.276μg(r≥0.9994)范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.9%~102.4%,RSD≤1.5(n=6)。结论:建立的UPLC方法操作简单,重复性好,可用于银花感冒颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 银花感冒颗粒 超高效液相色谱法 波长切换法 绿原酸 连翘苷 连翘酯苷A 甘草酸铵 5-O-甲基维斯阿米醇苷
清瘟解毒口服液质量控制试验 认领
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作者 王彬 章荣叶 +3 位作者 汤赛飞 罗成江 陈晓林 林仙军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期101-104,共4页
为完善清瘟解毒口服液质量控制方法,建立了HPLC-DAD法同时测定清瘟解毒口服液中黄芩苷、栀子苷和连翘苷的含量方法。采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05%磷酸-乙腈溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/m... 为完善清瘟解毒口服液质量控制方法,建立了HPLC-DAD法同时测定清瘟解毒口服液中黄芩苷、栀子苷和连翘苷的含量方法。采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05%磷酸-乙腈溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,进样量10μL,柱温30℃,用二极管阵列检测器进行扫描,扫描波长范围为190~400 nm,检测波长为230 nm。检查保留时间和光谱相似度对3种有效成分进行确证认。结果表明,3种有效成分在3.7~106.5μg/mL浓度范围内线性关系良好(r≥0.9995),加样回收率在98.1%~99.5%,RSD≤1.2%。本方法操作简便快捷,定性定量准确性好,专属性强,重现性好,能满足清瘟解毒口服液中3种有效成分含量检测的要求。 展开更多
关键词 清瘟解毒口服液 黄芩苷 栀子苷 连翘苷 高效液相色谱-二极管阵列检测器法
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