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抑制糖酵解活性限制雄性原始生殖细胞的增殖
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作者 徐瑜珊 陈丽 +3 位作者 王娜 臧春燕 彭凡珂 张军 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第10期1823-1828,共6页
目的:雄性原始生殖细胞在植入生殖嵴后,会从有丝分裂退出进入静息状态,在这一过程中伴随着细胞内代谢状态的改变,本研究旨在体解析原始生殖细胞增殖的改变与细胞代谢之间的因果关系。方法:通过体内Brdu掺入实验明确不同时间点雄性生殖... 目的:雄性原始生殖细胞在植入生殖嵴后,会从有丝分裂退出进入静息状态,在这一过程中伴随着细胞内代谢状态的改变,本研究旨在体解析原始生殖细胞增殖的改变与细胞代谢之间的因果关系。方法:通过体内Brdu掺入实验明确不同时间点雄性生殖细胞的增殖状态;分析比较增殖状态和静息状态原始生殖细胞糖酵解相关基因的表达;利用腹腔注射HK2特异性抑制剂2-Deoxy-D-glucose (2-DG),构建糖酵解抑制小鼠模型;通过免疫荧光与qPCR分析抑制糖酵解后原始生殖细胞的表型。结果:免疫荧光结果显示雄性生殖细胞增殖停滞从E13.5开始,至E15.5完全停滞;qPCR和Western Blot显示在此过程中HK2的表达是逐渐降低的;在E11.5抑制小鼠胚胎中的糖酵解过程,可以在E13.5检测到雄性PGCs增殖下降,并且可以抑制多能性基因如Sox2、Oct4的表达。结论:研究发现,E11.5-E13.5雄性原始生殖细胞内增殖与多能性的维持需要糖酵解。改变胚胎糖酵解水平可以影响原始生殖细胞增殖分化进程。 展开更多
关键词 雄性生殖细胞 糖代谢 多能性 分化
SALL4 maintains self-renewal of porcine pluripotent stem cells through downregulation of OTX2
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作者 Ning WANG Sile WANG +3 位作者 Yaxian WANG Yuanxing CAI Fan YANG Huayan WANG 《农业科学与工程前沿:英文版》 2019年第1期81-92,共12页
Sall4 as one of the spalt family members contains several alternative splicing variants, which are differentially expressed and has a key role in maintaining pluripotent stem cells. However, the molecular features and... Sall4 as one of the spalt family members contains several alternative splicing variants, which are differentially expressed and has a key role in maintaining pluripotent stem cells. However, the molecular features and function of SALL4 have not been well elucidated in porcine induced pluripotent stem cells(piPSCs). In this study, we identi?ed SALL4 splice variants and found two SALL4 splicing variants through analysis of the porcine transcriptome data derived from piPSCs. SALL4 A was only detected in piPSCs but SALL4 B was globally expressed in porcine tissues and piPSCs. The level of SALL4 B was signi?cantly reduced when piPSCs differentiation occurred, however, the expression of SALL4 A was not affected, indicating that SALL4 B may be essential for the maintenance of piPSCs self-renewal. Overexpression of SALL4 A and SALL4 B in PEF cells could signi?cantly stimulated expression of endogenous pluripotent genes,when SALL4 B signi?cantly promoted OCT4 expression.Conversely, SALL4 A signi?cantly promoted KLF4 expression. Additionally, both SALL4 A and SALL4 B could repress OTX2 promoter activity in a dose-dependent manner. Conversely, OTX2 also negatively regulated SALL4 expression. These observations indicate that a negative feedback regulatory mechanism may exist between SALL4 and OTX2, which is useful for the maintenance of the self-renewal of piPSCs. 展开更多
关键词 OTX2 PLURIPOTENCY pig SALL4 TRANSCRIPTION regulation
Single-cell sequencing: New insights into pre-implantation development, pluripotency, and germ cells
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作者 李琳 高帅 《中国科学基金:英文版》 CAS 2019年第2期52-65,共14页
Early mammalian embryonic development is a complex,dynamic,and heterogeneous process.Although numerous efforts have been made to delineate the mechanism underlying embryonic development,many questions still remain una... Early mammalian embryonic development is a complex,dynamic,and heterogeneous process.Although numerous efforts have been made to delineate the mechanism underlying embryonic development,many questions still remain unanswered because of the scarcity of available human materials and the minute amounts of DNA and RNA.In recently years,technical developments in high-throughput single cell sequencing have revolutionized biology and provided a novel and powerful tool to investigate the dynamics of early embryo development in a quantitative and systematic manner.Gene expression networks,epigenetic modification(including DNA methylation and chromatin accessibility),and genetic variation can be recorded simultaneously in a single cell at single base resolution.The present review highlights how the single cell sequencing has provided new insights into mammalian pre-implantation development,embryonic stem cell biology,and germline development. 展开更多
关键词 SINGLE-CELL SEQUENCING Early EMBRYONIC DEVELOPMENT PLURIPOTENCY GERM cells
PHC1基因敲降对小鼠胚胎干细胞多能干性的影响 预览
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作者 文欢 曾建平 《中南医学科学杂志》 CAS 2019年第2期125-129,共5页
探讨多梳家族蛋白PHC1敲降后对小鼠胚胎干细胞(mESCs)多能干性的影响,并探索其与多能干性基因nanog的转录调控机制。对mESCs细胞系进行PHC1蛋白沉默处理并设置阴性对照组(control组)和空白对照组(Empty vector组),采用qRT-PCR、Western ... 探讨多梳家族蛋白PHC1敲降后对小鼠胚胎干细胞(mESCs)多能干性的影响,并探索其与多能干性基因nanog的转录调控机制。对mESCs细胞系进行PHC1蛋白沉默处理并设置阴性对照组(control组)和空白对照组(Empty vector组),采用qRT-PCR、Western blot、免疫荧光染色检测PHC1的表达量;荧光素酶报告基因技术(Luciferase Reporter)检测PHC1与nanog reporter之间的转录活性。结果提示:实验组mESCs呈现分化状态,多能干性基因nanog、oct4、sox2的表达下调,且nanog下调最显著;荧光素酶报告基因结果提示PHC1和nanog可能会形成复合物参与nanog的转录调控( P <0.05)。实验表明,敲降PHC1基因后可能通过影响nanog转录调控,从而参与核心转录调控“铁三角”(nanog、oct4、sox2)之间的相互转录调控机制,导致mESCs出现分化,进而参与mESCs多能干性的维持。 展开更多
关键词 小鼠胚胎干细胞 PHC1基因 转录调控 多能干性
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Primate stem cells: bridge the translation from basic research to clinic application
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作者 Tianqing Li Zongyong Ai Weizhi Ji 《中国科学:生命科学英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期12-21,共10页
A growing body of literature has shown that stem cells are very effective for the treatment of degenerative diseases in rodents but these exciting results have not translated to clinical practice. The difference resul... A growing body of literature has shown that stem cells are very effective for the treatment of degenerative diseases in rodents but these exciting results have not translated to clinical practice. The difference results from the divergence in genetic, metabolic, and physiological phenotypes between rodents and humans. The high degree of similarity between non-human primates(NHPs) and humans provides the most accurate models for preclinical studies of stem cell therapy. Using a NHP model to understand the following key issues, which cannot be addressed in humans or rodents, will be helpful for extending stem cell applications in the basic science and the clinic. These issues include pluripotency of primate stem cells, the safety and efficiency of stem cell therapy, and transplantation procedures of stem cells suitable for clinical translation. Here we review studies of the above issues in NHPs and current challenges of stem cell applications in both basic science and clinical therapies. We propose that the use of NHP models, in particular combining the serial production and transplantation procedures of stem cells is the most useful for preclinical studies designed to overcome these challenges. 展开更多
关键词 non-human PRIMATE PLURIPOTENT STEM cells MONKEY disease model STEM cell therapy PLURIPOTENCY state transition transplantation procedures
甲基结合蛋白1对小鼠胚胎干细胞增殖及克隆形态的影响 预览
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作者 张鹏 杨红兰 +5 位作者 刘含 周艳华 杨燕 范安然 何志旭 舒莉萍 《贵州医科大学学报》 CAS 2019年第6期621-625,共5页
目的:研究甲基结合蛋白1(Mbd1)对小鼠胚胎干细胞克隆形态及增殖的影响。方法:设计针对Mbd1转录起始位点的gRNA,将表达有gRNA和Cas9蛋白的质粒使用脂质体转染方法转入小鼠胚胎干细胞(J1);使用抗生素将未转染成功的细胞杀死后,细胞继续培... 目的:研究甲基结合蛋白1(Mbd1)对小鼠胚胎干细胞克隆形态及增殖的影响。方法:设计针对Mbd1转录起始位点的gRNA,将表达有gRNA和Cas9蛋白的质粒使用脂质体转染方法转入小鼠胚胎干细胞(J1);使用抗生素将未转染成功的细胞杀死后,细胞继续培养7d,挑取单克隆细胞,采用PCR法筛选敲除Mbd1的纯合子细胞,观察Mbd1缺失对小鼠胚胎干细胞克隆形态的影响;使用细胞计数法检验Mbd1对胚胎干细胞增殖的影响。结果:通过Cripsr/Cas9成功获得敲除Mbd1的胚胎干细胞,Mbd1缺失后的小鼠胚胎干细胞丧失了常规小鼠胚胎干细胞的3D克隆形态,细胞呈现单层扁平克隆;Mbd1缺失后小鼠胚胎干细胞增殖速率变慢。结论:Mbd1通过影响小鼠胚胎干细胞克隆形态和增殖而影响胚胎干细胞的多能性。 展开更多
关键词 甲基结合蛋白 胚胎干细胞 多能性 细胞增殖 神经前体细胞 基因敲除
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RNA腺嘌呤6-甲基化修饰调控干细胞分化的研究进展 预览
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作者 武云舒 袁泉 《国际口腔医学杂志》 CSCD 2018年第3期272-275,共4页
腺嘌呤甲基化形成6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物中最为常见的一种RNA转录后修饰,参与众多基因的表达及细胞活动中复杂而精细的生物学调控。腺嘌呤的6-甲基化是一种动态可逆性过程,甲基转移酶Mettl3、Mettl14和Wtap催化m6A的生成,而去甲... 腺嘌呤甲基化形成6-甲基腺嘌呤(m6A)是真核生物中最为常见的一种RNA转录后修饰,参与众多基因的表达及细胞活动中复杂而精细的生物学调控。腺嘌呤的6-甲基化是一种动态可逆性过程,甲基转移酶Mettl3、Mettl14和Wtap催化m6A的生成,而去甲基化酶FTO和ALKBH5可以催化m6A去除甲基。近年来的研究发现,甲基转移酶和去甲基化酶可以通过在RNA上“书写”或“擦除”m6A标记来调控干细胞的多能性和分化,为RNA表观遗传学调控干细胞命运提供了新的研究角度。 展开更多
关键词 6-甲基腺嘌呤 甲基转移酶 去甲基化酶 干细胞分化 多能性
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人诱导多能干细胞来源间充质干细胞与骨髓间充质干细胞的生物学性状比较
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作者 毕冉冉 白睿 +1 位作者 刘志强 刘惠亮 《军事医学》 CSCD 北大核心 2018年第12期941-948,共8页
目的比较人诱导多能干细胞(hi PSC)来源的间充质干细胞(hi MSC)与人骨髓来源间充质干细胞(h BMSC)的生物学性状。方法流式鉴定hi MSC和h BMSC表面标志物CD11b、CD19、CD90、CD73、CD105、CD34、CD45、HLA-DR;显微镜观察比较hi MSC与h B... 目的比较人诱导多能干细胞(hi PSC)来源的间充质干细胞(hi MSC)与人骨髓来源间充质干细胞(h BMSC)的生物学性状。方法流式鉴定hi MSC和h BMSC表面标志物CD11b、CD19、CD90、CD73、CD105、CD34、CD45、HLA-DR;显微镜观察比较hi MSC与h BMSC早期代数的形态学性状;CCK8 (Cell Counting Kit-8)检测比较hi MSC与h BMSC早期及长期增殖能力;油红O染色、茜素红染色、qRT-PCR检测比较hi MSC与h BMSC多能性;qRT-PCR检测比较hi MSC与h BMSC旁分泌功能。结果 hi MSC和h BMSC表面标志物CD105、CD90、CD73均是阳性表达,而CD11b、CD19、CD34、CD45、HLA-DR均为阴性表达;h BMSC早期代数细胞呈长梭形,而hi MSC早期代数细胞呈短梭形;h BMSC与hi MSC P6代之前细胞增殖能力基本一致,P6代之后hi MSC细胞增殖能力要强于h BMSC细胞;hi MSCs和h BMSC都具有成骨、成脂多能性,hi MSC比h BMSC成骨诱导能力强,而成脂诱导能力不如h BMSC;h BMSC分泌PLGF、HIF-1α、SDF-1、SCF、b FGF生长因子的能力强于hi MSC,而分泌VEGF的能力较hi MSC弱。结论流式鉴定显示hi MSC与h BMSC都符合间充质干细胞表面标志物的特征;hi MSC与h BMSC早期细胞形态相似,均呈梭形;P6代细胞之后hi MSC增殖能力强于h BMSC且两者都具有多能性;hi MSC与h BMSC旁分泌能力有差异,hi MSC可作为h BMSC的良好替代细胞。 展开更多
关键词 干细胞 人诱导多能干细胞 间充质干细胞 多能性 旁分泌 细胞增殖
明胶对鸡胚盘细胞的增殖和多功能性的影响 预览
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作者 李荣阳 唐小川 +3 位作者 徐世永 陈清 吴望军 刘红林 《南京农业大学学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期364-369,共6页
[目的]本试验旨在解决鸡胚盘细胞(c BC)不易贴壁的问题及应用E8培养基建立新的鸡胚盘细胞培养体系。[方法]在E8培养基基础上,应用10 g·L^-1明胶和人重组玻连蛋白(h VTN)包被培养板,对比其在促进鸡胚盘细胞贴壁速度、促进增殖... [目的]本试验旨在解决鸡胚盘细胞(c BC)不易贴壁的问题及应用E8培养基建立新的鸡胚盘细胞培养体系。[方法]在E8培养基基础上,应用10 g·L^-1明胶和人重组玻连蛋白(h VTN)包被培养板,对比其在促进鸡胚盘细胞贴壁速度、促进增殖和维持多功能性方面的差异。[结果]使用10 g·L^-1明胶包被培养板后,鸡胚盘细胞12 h内即可迅速贴壁。10 g·L^-1明胶处理组中5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)阳性细胞率显著高于对照组(P〈0.01),并且能够抑制凋亡基因P21、Fas的mRNA表达(P〈0.05),进而促进细胞增殖,并且能够促进多功能基因Nanog、PouV的表达来维持c BC的多功能性。[结论]10 g·L^-1明胶可以作为一种新的包被试剂来进行cBC的培养,与人重组玻连蛋白相比,明胶体现了更高的性价比,具有较高的应用价值。 展开更多
关键词 鸡胚盘细胞 明胶 增殖 多功能性
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TRPC3 is required for the differentiation of mouse survival, pluripotency and neural embryonic stem cells (mESCs)
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作者 Helen Baixia Hao Sarah E. Webb +3 位作者 Jianbo Yue Marc Moreau Catherine Leclerc Andrew L. Miller 《中国科学:生命科学英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期253-265,共13页
关键词 神经原 干细胞 老鼠 胚胎 apoptosis 星形细胞 受体 亚科
非编码RNA在胚胎干细胞中的研究进展
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作者 李莎莎 左祥 +3 位作者 颜学军 彭开元 蒋星军 任彩萍 《生命科学研究》 CAS CSCD 2018年第1期67-73,86共8页
非编码RNA (non-coding RNAs, ncRNAs)通常因不能编码蛋白质而被误认为是一类无用序列。近年来, 随着基因组测序等相关技术的发展, 对ncRNAs的研究越来越受到人们的重视, 更多的ncRNAs及其生物学功能被揭示, 其广泛参与细胞生长、增... 非编码RNA (non-coding RNAs, ncRNAs)通常因不能编码蛋白质而被误认为是一类无用序列。近年来, 随着基因组测序等相关技术的发展, 对ncRNAs的研究越来越受到人们的重视, 更多的ncRNAs及其生物学功能被揭示, 其广泛参与细胞生长、增殖、分化、凋亡等一系列生命进程的调控。胚胎干细胞(embryonic stem cells, ESCs)研究是现代生物学发展最受关注的领域之一, 其多能性的维持机制与分化的调控网络一直都是有待突破的核心问题, 也成为了其应用于临床的主要障碍。ncRNAs在ESCs的许多生物学过程, 特别是自我更新和多能性维持的过程中, 发挥着重要的调控作用。ncRNAs的研究对于了解ESCs自我更新和多向分化的机制具有重要意义, 关于ncRNAs与ESCs的研究是当前生命科学研究的前沿热点之一。现就ncRNAs及其在ESCs中的研究进展予以综述。 展开更多
关键词 非编码RNA(ncRNAs) 胚胎干细胞(ESCs) 自我更新 多能性 细胞分化
Acquisition of pluripotency in the chick embryo occurs during intrauterine embryonic development via a unique transcriptional network 预览
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作者 Jae Yong Han Hyo Gun Lee +5 位作者 Young Hyun Park Young Sun Hwang Sang Kyung Kim Deivendran Rengaraj Byung Wook Cho Jeong Mook Lim 《畜牧与生物技术杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期574-584,共11页
Background:Acquisition of pluripotency by transcriptional regulatory factors is an initial developmental event that is required for regulation of cell fate and lineage specification during early embryonic development.... Background:Acquisition of pluripotency by transcriptional regulatory factors is an initial developmental event that is required for regulation of cell fate and lineage specification during early embryonic development.The evolutionarily conserved core transcriptional factors regulating the pluripotency network in fishes,amphibians,and mammals have been elucidated.There are also species-specific maternally inherited transcriptional factors and their intricate transcriptional networks important in the acquisition of pluripotency.In avian species,however,the core transcriptional network that governs the acquisition of pluripotency during early embryonic development is not well understood.Results:We found that chicken NANOG(cNANOG)was expressed in the stages between the pre-ovulatory follicle and oocyte and was continuously detected in Eyal-Giladi and Kochav stage I(EGK.I)to X.However,cPOUV was not expressed during folliculogenesis,but began to be detectable between EGK.V and VI.Unexpectedly,cSOX2 could not be detected during folliculogenesis and intrauterine embryonic development.Instead of cSOX2,cSOX3 was maternally inherited and continuously expressed during chicken intrauterine development.In addition,we found that the pluripotency-related genes such as cENS-1,cKIT,cLIN28A,cMYC,cPRDM14,and cSALL4 began to be dramatically upregulated between EGK.VI and VIII.Conclusion:These results suggest that chickens have a unique pluripotent circuitry since maternally inherited cNANOG and cSOX3 may play an important role in the initial acquisition of pluripotency.Moreover,the acquisition of pluripotency in chicken embryos occurs at around EGK.VI to VIII. 展开更多
关键词 AVIAN EMBRYONIC development NANOG PLURIPOTENCY TRANSCRIPTIONAL factor
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Wdr82调控小鼠胚胎干细胞体外的增殖和分化
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作者 张薇 刘露露 +4 位作者 惠心慧 万晓玲 周培培 张岩 陈红霞 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第8期1312-1318,共7页
Setd1a复合物和Setd1b复合物(Setd1a/b)是进化上功能高度保守的表观遗传调控因子,主要包括Setd1a/b、Wdr82、Wdr5、Rbbp5、Ash2L、Dpy-30、Hcf-1等,催化组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)的甲基化,进而激活基因转录。Wdr82是Setd1a/b复合... Setd1a复合物和Setd1b复合物(Setd1a/b)是进化上功能高度保守的表观遗传调控因子,主要包括Setd1a/b、Wdr82、Wdr5、Rbbp5、Ash2L、Dpy-30、Hcf-1等,催化组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)的甲基化,进而激活基因转录。Wdr82是Setd1a/b复合物中特有的非催化亚基,其在胚胎发育过程中的作用尚不清楚。该研究利用小鼠胚胎干细胞(moue embryonic stem cells,m ESCs)的体外培养和分化系统发现,在m ESCs分化过程中,Wdr82的表达水平显著降低。在m ESCs中敲低Wdr82后,m ESCs的增殖速度显著减缓,而其多能性不受影响。利用拟胚体分化体系发现,Wdr82敲低后,拟胚体的形成速度变慢,自主搏动的时间明显滞后。综上所述,该结果揭示了Wdr82在m ESCs体外增殖和分化过程中的重要作用。 展开更多
关键词 Wdr82 小鼠胚胎干细胞 细胞增殖 细胞分化 多能性
Regulation of mitochondrial function and endoplasmic reticulum stress by nitric oxide in pluripotent stem cells 预览
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作者 Estefania Caballano-Infantes José Terron-Bautista +5 位作者 Amparo Beltrán-Povea Gladys M Cahuana Bernat Soria Hajji Nabil Francisco J Bedoya Juan R Tejedo 《世界干细胞杂志:英文版(电子版)》 2017年第2期26-36,共11页
Mitochondrial dysfunction and endoplasmic reticulum stress (ERS) are global processes that are interrelated and regulated by several stress factors. Nitric oxide (NO) is a multifunctional biomolecule with many varieti... Mitochondrial dysfunction and endoplasmic reticulum stress (ERS) are global processes that are interrelated and regulated by several stress factors. Nitric oxide (NO) is a multifunctional biomolecule with many varieties of physiological and pathological functions, such as the regulation of cytochrome c inhibition and activation of the immune response, ERS and DNA damage; these actions are dose-dependent. It has been reported that in embryonic stem cells, NO has a dual role, controlling differentiation, survival and pluripotency, but the molecular mechanisms by which it modulates these functions are not yet known. Low levels of NO maintain pluripotency and induce mitochondrial biogenesis. It is well established that NO disrupts the mitochondrial respiratory chain and causes changes in mitochondrial Ca2+ flux that induce ERS.Thus, at high concentrations, NO becomes a potential differentiation agent due to the relationship between ERS and the unfolded protein response in many differentiated cell lines. Nevertheless, many studies have demonstrated the need for physiological levels of NO for a proper ERS response. In this review, we stress the importance of the relationships between NO levels, ERS and mitochondrial dysfunction that control stem cell fate as a new approach to possible cell therapy strategies. 展开更多
关键词 Endoplasmic reticulum stress MITOCHONDRIAL function NITRIC oxide PLURIPOTENCY Cell DIFFERENTIATION MITOCHONDRIAL BIOGENESIS
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Fluorescent nanoswitch for monitoring specific pluripotency-related microRNAs of induced pluripotent stem cells: Development of polyethyleneimine- oligonucleotide hybridization probes
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作者 Seungmin Han Hye Young Son +8 位作者 Byunghoon Kang Eunji Jang Jisun Ki Na Geum Lee Jongjin Park Moo-Kwang Shin Byeonggeol Mun Jeong-Ki Min Seungjoo Haam 《纳米研究:英文版》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第8期2545-2559,共15页
隔离高级(即 high-pluripotency ) 人的导致的 pluripotent 干细胞(hiPSCs ) 是为提高 hiPSC 人口或区别效率的纯净的一个明确的因素。能监视 microRNA (miRNA ) 的一个非侵略的成像系统表达式提供一个有用工具识别并且分析特定的房间... 隔离高级(即 high-pluripotency ) 人的导致的 pluripotent 干细胞(hiPSCs ) 是为提高 hiPSC 人口或区别效率的纯净的一个明确的因素。能监视 microRNA (miRNA ) 的一个非侵略的成像系统表达式提供一个有用工具识别并且分析特定的房间人口。然而,由 miRNA 表示监视器 / 隔离 hiPSCs 上的以前的研究与 miRNA 成像 probe-nanocarriers 由于长期的孵化限制了 hiPSCs 区别系统。因此,我们集中了于没有影响 hiPSCs 的 pluripotency,监视高级 hiPSCs。我们减少了 nanoparticle transfection 时间,因为 hiPSCs 在孵化期间对在外部因素下面的自发的区别敏感。荧光灯 nanoswitch (在上与目标 miRNA ) ,它能被申请由荧光的成像或排序的特定的房间发信号,包含一根 miRNA 成像探针(miP ) 和 PEI 木钉 nanoparticle (miP-P ) 。因而,这 nanoswitch 能在 vitro 在 30 min 以内察觉到各种各样的内长的目标 miRNAs,并且没有影响 pluripotency,为不仅成像而且排序的 pluripotent hiPSCs 表明强壮的潜力。而且, miP-P-treated hiPSCs 区分很好进 endothelial 房间,显示那 miP-P 不改变 hiPSCs 的 pluripotency。我们想象那这个 miRNA 成像系统能为为改进实际应用程序识别并且排序高级 hiPSCs 是珍贵的。 展开更多
关键词 microRNA 多能干细胞 寡核苷酸探针 纳米开关 荧光信号 多能性 聚乙烯亚胺 诱导
表观遗传调控在胚胎干细胞命运决定中的作用及机制 被引量:1
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作者 肖峰 金颖 《生命科学》 CSCD 2017年第10期1025-1032,共8页
胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)具有无限自我更新和发育多能性两大特性,可为基础研究、药物筛选及再生医学等提供无限的细胞来源。ESC的命运决定受多个层次的调控,主要包括信号通路、转录因子和表观遗传。越来越多的研究表明... 胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)具有无限自我更新和发育多能性两大特性,可为基础研究、药物筛选及再生医学等提供无限的细胞来源。ESC的命运决定受多个层次的调控,主要包括信号通路、转录因子和表观遗传。越来越多的研究表明,表观遗传调控在ESC命运决定中发挥着重要作用,然而,其中的分子机制仍不是十分清楚,需要进一步揭示。以基金委重大研究计划"细胞编程和重编程的表观遗传机制"为依托,金颖实验室从表观遗传角度揭示ESC自我更新和发育多能性的分子调控机制,取得了多项重要进展。现主要对此研究计划中金颖实验室的原创性工作进行综述。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 自我更新 发育多能性 表观遗传
An inducible CRISPR-ON system for controllable gene activation in human pluripotent stem cells
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作者 Jianying Guo Dacheng Ma +5 位作者 Rujin Huang Jia Ming Min Ye Kehkooi Kee Zhen Xie Jie Na 《蛋白质与细胞:英文版》 SCIE CAS CSCD 2017年第5期379-393,共15页
LPA对猪孤雌胚胎早期发育的影响
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作者 朱秀生 高邦君 +6 位作者 伊善宝 付念文 邓彬 朱露露 李兰玉 石德顺 黄奔 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2017年第5期93-95,共3页
为了研究Hippo信号通路对猪胚胎早期胚层分化的影响,试验采用QRT—PCR方法测定了孤雌囊胚多能性以及胚层标志基因SOX2、OCT4、KLF4、CDX2、NANOG和GATE4的表达变化。结果表明:Lysophosphatidic acid(LPA)处理后滋养层标志基因CDX2上... 为了研究Hippo信号通路对猪胚胎早期胚层分化的影响,试验采用QRT—PCR方法测定了孤雌囊胚多能性以及胚层标志基因SOX2、OCT4、KLF4、CDX2、NANOG和GATE4的表达变化。结果表明:Lysophosphatidic acid(LPA)处理后滋养层标志基因CDX2上调2.15倍,内胚层标志基因GATE4显著下调,多能性基因OCT4上调2.3倍,而SOX2、NANOG以及KLF4没有显著变化。 展开更多
关键词 Hippo信号通路 LPA QRT-PCR 孤雌胚胎 多能性 外胚层 内胚层 滋养层
小鼠上胚层多能干细胞研究进展
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作者 陈杨林 刘悦石 +1 位作者 李喜和 包斯琴 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第7期931-938,共8页
小鼠上胚层干细胞(mouse epiblast stem cell,mEpiSC)是一种来自于5.5天~7.5天小鼠胚胎上胚层(epiblast)组织的多能性干细胞。EpiSC自我更新能力和多能性的维持主要依赖激活素(Activin/Nodal)和成纤维细胞生长因子(fibroblast gr... 小鼠上胚层干细胞(mouse epiblast stem cell,mEpiSC)是一种来自于5.5天~7.5天小鼠胚胎上胚层(epiblast)组织的多能性干细胞。EpiSC自我更新能力和多能性的维持主要依赖激活素(Activin/Nodal)和成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)信号,Activin和FGF信号对细胞多能网络进行调控,EpiSC培养体系和分离方法目前仍处于不断优化的过程。相比于处于"幼稚(na?ve)"状态的小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cell,mESC),mEpiSC被认为处于"待发(primed)"状态。虽然mEpiSC被注射入囊胚后,细胞嵌合效率较低,但是当其被移植入着床后胚胎时,却比mESC更容易与受体胚胎发生嵌合。因此,来源于小鼠着床后胚胎的EpiSC与来自于着床前胚胎的ESC相比,在多能性维持、发育潜能和诱导方法等方面存在本质区别。该文对小鼠EpiSC和ESC进行比较,并综述目前小鼠EpiSC的研究进展。 展开更多
关键词 EpiSC mESC 多能性 发育潜能
不同胚期分离的鸡原始生殖细胞(PGCs)遗传与培养特性比较
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作者 陈志胜 张晓芳 +3 位作者 李东升 王丙云 陈胜锋 陈金顶 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第9期1778-1784,共7页
根据家禽原始生殖细胞(PGCs)的迁移路径,分别从孵化24h的鸡胚生殖新月(gcPGC)、2.5d的胚血(cPGC)和5.5d的生殖腺(gPG(:)中分离PGCs,置于完全培养基中培养,表达干细胞标志物SSEA-1和生殖细胞特异标志物DAZI。免疫荧光染... 根据家禽原始生殖细胞(PGCs)的迁移路径,分别从孵化24h的鸡胚生殖新月(gcPGC)、2.5d的胚血(cPGC)和5.5d的生殖腺(gPG(:)中分离PGCs,置于完全培养基中培养,表达干细胞标志物SSEA-1和生殖细胞特异标志物DAZI。免疫荧光染色鉴定结果,表明纯化的细胞为PGCs。CCK-8法细胞增殖检测显示,BRI,-3A饲养层细胞能明显促进PGCs的体外增殖,与无饲养层条件培养的PGCs间有显著性差异(P〈0.05),但不同来源PGCs间无增殖速度的差异。检测这3种不同来源PGCs的集落形成能力,结果显示cPGCs的集落形成率最高,集落体积最大。realtime-PCR结果显示多能性相关基因nanogv和pouV在gcPGCs中的表达量最高,而生殖相关基因dazl和cvh在cPGCs中的表达量最高。结果表明,体外培养的PGCs保持其体内遗传状况,即gcPGC的多能性最好.cPGC开始进入生殖系分化,而gPGC可能已部分进入减数分裂。而从培养特性上来看,gcPGC由于数量过少难以扩大培养,而gPGC混合的分化细胞过多,cPGC是体外培养和增殖分化研究的最佳细胞来源。 展开更多
关键词 原始生殖细胞 体外培养 增殖 多能性
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