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采后苯并噻重氮处理对‘玉金香’甜瓜氨基酸代谢酯类香气物质及其代谢机理的影响 预览 被引量:1
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作者 王博 李霁昕 +3 位作者 李经纬 王雨 胡妍芸 蒋玉梅 《食品科学》 CSCD 北大核心 2018年第17期212-220,共9页
以‘玉金香’甜瓜为材料,采后常温贮藏期间分析其氨基酸含量、谷丙转氨酶(glutamate pyruvic transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)、丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase,PDC)、丙酮酸脱氢酶(pyruva... 以‘玉金香’甜瓜为材料,采后常温贮藏期间分析其氨基酸含量、谷丙转氨酶(glutamate pyruvic transaminase,GPT)、谷草转氨酶(glutamic oxaloacetic transaminase,GOT)、丙酮酸脱羧酶(pyruvate decarboxylase,PDC)、丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,PDH)活力及其代谢产物酯类香气物质含量的变化,探讨采后苯并噻重氮(benzothiadiazole,BTH)诱抗处理对酯类香气物质氨基酸代谢途径影响的机理。结果表明:BTH诱抗处理可延迟样品酯类香气物质释放高峰出现,抑制其释放,总含量比CK组(未经任何处理)低19.10%。15种游离氨基酸被分离确定,CK组氨基酸总含量峰值(14 597μg/g)出现在第6天,BTH组峰值出现在第8天,低于CK组9.47%(P<0.05)。BTH处理抑制了贮藏期间GOT、PDC和PDH活力,与CK组相比,BTH处理组果皮GOT、PDC和PDH活力峰值分别降低31.80%、16.86%和24.30%,果肉峰值分别降低19.10%、14.70%和25.56%,果皮GOT活力被显著抑制(P<0.05);不同处理组间GPT活力差异不显著(P>0.05)。氨基酸总含量、GOT活力与酯类香气物质含量呈极显著正相关(P<0.01)。水处理对氨基酸含量、代谢酶活力及其产物酯类香气物质释放均有影响,但无明显作用规律。由此可见,BTH处理会减少氨基酸含量,抑制相关代谢酶活力,进而改变其产物酯类香气物质的释放。 展开更多
关键词 苯并噻重氮 酯类香气物质 氨基酸 转氨酶 丙酮酸脱羧酶 丙酮酸脱氢酶
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曲美他嗪对心力衰竭犬氧化应激状态的影响 预览 被引量:1
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作者 霍红 王凤荣 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第6期908-912,共5页
目的研究曲美他嗪对心衰犬心肌细胞氧化应激状态及形态结构的影响。方法采用快速起搏心室构建心衰犬模型,将模型制造成功的15只犬随机分为3组:假手术组、模型组、曲美他嗪组[灌服曲美他嗪5 mg/(kg·d)],连续6周。实验结束后留取... 目的研究曲美他嗪对心衰犬心肌细胞氧化应激状态及形态结构的影响。方法采用快速起搏心室构建心衰犬模型,将模型制造成功的15只犬随机分为3组:假手术组、模型组、曲美他嗪组[灌服曲美他嗪5 mg/(kg·d)],连续6周。实验结束后留取犬左心室心肌组织,应用硫代巴比妥法测定丙二醛(MDA),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物岐化酶(SOD),RT-PCR技术测定丙酮酸脱氢酶(PDH)mRNA表达,行病理形态学及心肌超微结构观察。结果曲美他嗪组犬心肌组织中SOD活性升高,MDA表达下降。曲美他嗪治疗后PDH mRNA表达上调,高于模型组,差异有统计学意义(P〈0.05)。光镜和电镜下观察曲美他嗪组心肌损伤程度低于模型组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论曲美他嗪能够改善心衰犬心肌细胞氧化应激状态,其机制可能与曲美他嗪减少烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)生成,间接提高PDH mRNA的表达,提高葡萄糖氧化,抑制脂质过氧化反应,改善心肌能量代谢有关。 展开更多
关键词 曲美他嗪 心力衰竭 丙二醛 超氧化物岐化酶 丙酮酸脱氢酶
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大肠杆菌丙酮酸脱氢酶蛋白研究 预览
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作者 陶施淼 王盼星 +1 位作者 薛藩 王进军 《科教导刊》 2018年第32期29-30,共2页
原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种慢性疾病,PBC患者体内大肠杆菌增多并且粪便中大肠杆菌出现变异。本 文对PBC患者大肠杆菌中丙酮酸脱氢酶蛋白的变化及大肠杆菌诱发PBC分子机制研究进展进行综述。
关键词 大肠杆菌 丙酮酸脱氢酶 分子模拟机制 分子克隆技术
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四君子汤对慢性心衰大鼠心肌组织蛋白质组学影响的研究 被引量:9
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作者 方焕松 刘友章 +2 位作者 邱俊 冼绍祥 丁玲 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期152-156,共5页
目的:探讨四君子汤对慢性心衰大鼠心肌组织蛋白质表达变化的影响。方法:SD雄性大鼠42只,随机取6只作为正常组,其余36只复制慢性心力衰竭大鼠模型,造模成功后,分为四君子汤高、低剂量组(11.88,2.97 g·kg^-1·d^-1),卡托普... 目的:探讨四君子汤对慢性心衰大鼠心肌组织蛋白质表达变化的影响。方法:SD雄性大鼠42只,随机取6只作为正常组,其余36只复制慢性心力衰竭大鼠模型,造模成功后,分为四君子汤高、低剂量组(11.88,2.97 g·kg^-1·d^-1),卡托普利组(100 mg·kg^-1·d^-1),正常组和模型组分别给予相同体积生理盐水,连续灌胃给药1月。分别留取各组左心室组织,双向凝胶电泳分离心肌蛋白,分析差异显示的蛋白,并对有显著差异的蛋白点进行胶内酶切和质谱鉴定。结果:与模型组比较,四君子汤组有31种蛋白质表达上调,28种蛋白质表达下调,各选取8个差异显著(Volume值相差≥1.5倍)的蛋白进行质谱鉴定,通过整合去重,鉴定出4个蛋白:与能量代谢相关的Suclg2蛋白、丙酮酸脱氢酶复合体;与心肌细胞收缩功能相关的肌球蛋白轻链2;与心肌细胞重构相关的丝氨酸蛋白酶抑制剂A3N。结论:四君子汤可调节慢性心衰大鼠心肌组织多种蛋白表达,可能通过调节能量代谢、减少心肌重构、提高收缩功能而改善心功能。 展开更多
关键词 四君子汤 慢性心衰 心肌蛋白质组学 Suclg2 丝氨酸蛋白酶抑制剂 丙酮酸脱氢酶 肌球蛋白轻链
孤独症患者小脑中有氧糖酵解酶的表达 预览 被引量:1
5
作者 程培培 禹顺英 《中国神经精神疾病杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期284-288,共5页
目的研究孤独症患者小脑中有氧糖酵解酶表达水平及其与孤独症发病的关系。方法用Western Blotting方法定量检测8例孤独症患者和8名年龄相匹配的对照者尸脑小脑组织中有氧糖酵解酶己糖激酶Ⅰ型及Ⅱ型同工酶(hexokinase isozyme,HK-Ⅰ、... 目的研究孤独症患者小脑中有氧糖酵解酶表达水平及其与孤独症发病的关系。方法用Western Blotting方法定量检测8例孤独症患者和8名年龄相匹配的对照者尸脑小脑组织中有氧糖酵解酶己糖激酶Ⅰ型及Ⅱ型同工酶(hexokinase isozyme,HK-Ⅰ、HK-Ⅱ)、血小板型磷酸果糖激酶(platelet-type phosphofructokinase,PFKP)、丙酮酸激酶M型同工酶(pyruvate kinase M isozyme,PKM1/2)、丙酮酸激酶M2亚型同工酶(pyruvate kinase M2 isoform,PKM2)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase,GAPDH)、丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase,PDH)及乳酸脱氢酶A型同工酶(lactate dehydrogenase A isozyme,LDHA)的表达水平。结果孤独症患者与对照相比,小脑中PDH表达减少[(0.715±0.342)vs.(1.028±0.203),P=0.043],其他7种有氧糖酵解酶的表达水平组间差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论孤独症患者小脑中有氧糖酵解途径PDH表达减少,可能参与孤独症的病理过程。 展开更多
关键词 孤独症 小脑 有氧糖酵解 丙酮酸脱氢酶
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丙酮酸脱氢酶活性缺失与疾病发生的研究进展
6
作者 陈伟才 欧文斌 《生命的化学》 CAS CSCD 2017年第5期751-760,共10页
丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydrogenase complex,PDH_C)主要由丙酮酸脱氢酶(E1)、二氢硫辛酸乙酰转移酶(E2)、二氢硫辛酸脱氢酶(E3)和E3结合蛋白(E3BP)组成,绝大多数的丙酮酸脱氢酶系缺失都是由丙酮酸脱氢酶E1α亚基突变或... 丙酮酸脱氢酶系(pyruvate dehydrogenase complex,PDH_C)主要由丙酮酸脱氢酶(E1)、二氢硫辛酸乙酰转移酶(E2)、二氢硫辛酸脱氢酶(E3)和E3结合蛋白(E3BP)组成,绝大多数的丙酮酸脱氢酶系缺失都是由丙酮酸脱氢酶E1α亚基突变或者磷酸化引起,仅有少数突变发生在E2、E3和E3BP上。本文就PDHC的结构与功能,PDHA1基因突变和E1α磷酸化与其功能的关系,及在相关疾病包括肿瘤的发生、发展和转移中的分子机制的研究进展做一总结,以期对因E1α功能丧失引起的疾病的诊断与治疗有所借鉴意义。 展开更多
关键词 丙酮酸脱氢酶 突变 磷酸化 疾病 肿瘤
代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生成丙酮酸 预览 被引量:1
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作者 于莹 许湄雪 +3 位作者 刘金雷 范荣 冯惠勇 李天明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期226-232,共7页
旨在增加谷氨酸棒杆菌代谢过程中丙酮酸的积累、减少副产物的生成,利用同源重组的方法,敲除了丙酮酸代谢过程中支流代谢途径的关键基因:丙酮酸醌氧化还原酶pqo基因、丙酮酸脱氢酶pdh基因和乳酸脱氢酶lldh基因,获得了基因缺失工程菌株... 旨在增加谷氨酸棒杆菌代谢过程中丙酮酸的积累、减少副产物的生成,利用同源重组的方法,敲除了丙酮酸代谢过程中支流代谢途径的关键基因:丙酮酸醌氧化还原酶pqo基因、丙酮酸脱氢酶pdh基因和乳酸脱氢酶lldh基因,获得了基因缺失工程菌株。利用4.5%的葡萄糖复合培养基,工程菌经摇瓶发酵48 h,丙酮酸的浓度达到14.6 g/L,而野生菌株仅为0.45 g/L;工程菌的糖酸转化率为33.18%,比野生菌提高了32.5倍。 展开更多
关键词 丙酮酸 谷氨酸棒状杆菌 丙酮酸醌氧化还原酶 丙酮酸脱氢酶 乳酸脱氢酶
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牛支原体pdhα和pdhβ基因的克隆、原核表达及亚细胞的定位 被引量:4
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作者 苏炜德 李娜 +6 位作者 薛慧文 邢小勇 郝宝成 伏小平 温峰琴 项海涛 包世俊 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期567-575,共9页
牛支原体(Mycoplasma bovis,M.b)是牛(Bos taurus)的一种重要致病性支原体,感染后可引起牛多种疾病。丙酮酸脱氢酶复合体E1(pyruvate dehydrogenase E1,PDHc E1)是参与生物体糖代谢过程的一个限速酶,广泛存在于微生物、哺乳动物... 牛支原体(Mycoplasma bovis,M.b)是牛(Bos taurus)的一种重要致病性支原体,感染后可引起牛多种疾病。丙酮酸脱氢酶复合体E1(pyruvate dehydrogenase E1,PDHc E1)是参与生物体糖代谢过程的一个限速酶,广泛存在于微生物、哺乳动物及高等植物中,其直接影响丙酮酸向乙酰辅酶A的转化。本研究参照Gen Bank中M.b PG45株的PDHc E1α亚基基因pdhα和PDHc E1β亚基基因pdhβ序列设计引物,通过PCR扩增获得M.b武威株的pdhα(Gen Bank登录号:KU355295)及pdhβ基因(Gen Bank登录号:KU355296),在序列测定的基础上应用重叠延伸PCR(Overlap PCR)技术完成基因优化并构建原核表达质粒p ET-pdhα和p ET-pdhβ。表达质粒分别转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)后经异丙基硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达重组PDHc E1α亚基融合蛋白PDHA及PDHc E1β亚基蛋白PDHB。纯化表达产物并分别免疫新西兰兔(Oryctolagus cuniculus)制备多克隆抗体,进而应用Western blot及酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)对M.b PDHc E1α亚基和PDHc E1β亚基在细胞内的分布进行了初步研究。结果表明,经IPTG的诱导,pdhα与pdhβ基因在大肠杆菌BL21(DE3)中均成功表达,重组蛋白r PDHA及r PDHB的分子量分别约为40和37 k D,且均有良好的免疫原性,而Western blot及ELISA结果证实E1α和E1β在牛支原体细胞膜上和胞浆中均有分布且分布量相当。本研究结果为进一步研究M.b生物学功能提供了基础资料。 展开更多
关键词 牛支原体(M.b) 丙酮酸脱氢酶 原核表达 膜定位
猪氨基酸代谢节俭机制新假说 预览
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作者 孙志洪 李貌 +4 位作者 许庆庆 印遇龙 朱伟云 江青艳 黄飞若 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期3369-3376,共8页
猪尿氮排放量为总氮排放量的60%-70%,而尿素是尿液中的主要含氮物,其合成速率在很大程度上决定着尿氮以及总氮的排放量。因此,降低猪肝脏尿素合成速率是减少氮排放量的根本途径。本文首先介绍了当前猪氮减排常用的营养调控技术,然后分... 猪尿氮排放量为总氮排放量的60%-70%,而尿素是尿液中的主要含氮物,其合成速率在很大程度上决定着尿氮以及总氮的排放量。因此,降低猪肝脏尿素合成速率是减少氮排放量的根本途径。本文首先介绍了当前猪氮减排常用的营养调控技术,然后分别就肝脏尿素合成的直接前体物(氨)与间接前体物(如甘氨酸和丙氨酸)以及氨基酸代谢燃料功能替代机制进行论述,在此基础上提出猪氨基酸代谢节俭机制新假说,即促进丙酮酸/葡萄糖等物质的供能效率,以降低谷氨酸等氨基酸的代谢速率,从而达到减少门静脉尿素前体物净流量、肝脏尿素合成以及尿氮排放量的目的。 展开更多
关键词 氮排放 氨基酸 代谢节俭 丙酮酸脱氢酶
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Expression of pyruvate dehydrogenase is an independentprognostic marker in gastric cancer 预览
10
作者 Sun, Xu-Ren Sun, Zhe +8 位作者 Zhu, Zhi Guan, Hai-Xia Li, Chen-Yan Zhang, Jun-Yan Zhang, Yi-Ning Zhou, Huan Zhang, Hui-Jing Xu, Hui-Mian Sun, Ming-Jun 《世界胃肠病学杂志:英文版(电子版)》 SCIE CAS 2015年第17期5336-5344,共9页
AIM: To investigate the expression and prognostic roleof pyruvate dehydrogenase (PDH) in gastric cancer(GC).METHODS: This study included 265 patients (194 male,71 female, mean age 59 years (range, 29-81 years... AIM: To investigate the expression and prognostic roleof pyruvate dehydrogenase (PDH) in gastric cancer(GC).METHODS: This study included 265 patients (194 male,71 female, mean age 59 years (range, 29-81 years) withGC who underwent curative surgery at the First AffiliatedHospital of China Medical University from January 2006to May 2007. All patients were followed up for morethan 5 years. Patient-derived paraffin embedded GCspecimens were collected for tissue microarrays (TMAs).We examined PDH expression by immunohistochemistryin TMAs containing tumor tissue and matched nonneoplasticmucosa. Immunoreactivity was evaluatedindependently by two researchers. Overall survival (OS)rates were determined using the Kaplan-Meier estimator.Correlations with other clinicopathologic factors wereevaluated by two-tailed χ 2 tests or a two-tailed t -test.The Cox proportional-hazard model was used inunivariate analysis and multivariate analysis to identifyfactors significantly correlated with prognosis.RESULTS: Immunohistochemistry showed that 35.47%of total cancer tissue specimens had cytoplasmicPDH staining. PDH expression was much higher innormal mucosa specimens (75.09%; P = 0.001). PDH expression was correlated with Lauren grade (70.77%in intestinal type vs 40.0% in diffuse type; P = 0.001),lymph node metastasis (65.43% with no metastasisvs 51.09% with metastasis; P = 0.033), lymphaticinvasion (61.62% with no invasion vs 38.81% withinvasion; P = 0.002), histologic subtypes (70.77% inintestinal type vs 40.0% in diffuse type; P = 0.001)and tumor-node-metastasis (TNM) stage (39% inpoorly differentiated vs 65.91% in well differentiatedand 67.11% in moderately differentiated; P = 0.001) inGC. PDH expression in cancer tissue was significantlyassociated with higher OS (P 〈 0.001). The multivariateanalysis adjusted for age, Lauren classification, TNMstage, lymph node metastasis, histological type, tumorsize, depth of invasion and lymphatic invasion showedthat the PDH expres 展开更多
关键词 PYRUVATE DEHYDROGENASE Gastric carcinoma Tissue MICROARRAY PROGNOSIS Immunohistochemicalanalysis
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细粒棘球绦虫丙酮酸脱氢酶的重组表达及生物信息学分析
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作者 陈英 奥·乌力吉 +4 位作者 张颋 吴群峰 党志胜 陈军虎 胡薇 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期376-380,共5页
目的克隆表达细粒棘球绦虫丙酮酸脱氢酶(EgPDH)基因,并对其进行生物信息学预测与分析。方法提取细粒棘球绦虫Total-RNA并反转录成c DNA,以此为模板扩增目的基因。将目的基因连接至p ET28b构建重组质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行... 目的克隆表达细粒棘球绦虫丙酮酸脱氢酶(EgPDH)基因,并对其进行生物信息学预测与分析。方法提取细粒棘球绦虫Total-RNA并反转录成c DNA,以此为模板扩增目的基因。将目的基因连接至p ET28b构建重组质粒并转化大肠杆菌BL21(DE3)进行重组表达。采用Signal P4.1、TMHMM sever v.2.0和Target P1.1对EgPDH编码蛋白序列分别进行信号肽、跨膜区及亚细胞定位的预测。采用SMART分析EgPDH编码蛋白结构域,用BLASTP和Gene Doc进行EgPDH同源序列比对及保守位点分析,并采用MEGA6软件邻接法构建系统进化树。结果成功克隆并构建重组质粒p ET28bEgPDH,目的基因大小约1 080 bp,重组蛋白以可溶性形式表达。EgPDH为信号肽的分泌蛋白,并含转酮酶结构域,其高度保守酶活性位点分别为Glu57、Leu72、Ile86、Phe114。系统进化树分析显示EgPDH与多房棘球绦虫PDH亲缘关系最近。结论成功克隆表达了细粒棘球绦虫EgPDH基因并进行了生物信息学预测分析,为进一步研究该蛋白功能奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 丙酮酸脱氢酶 克隆 表达 生物信息学
丙酮酸脱氢酶与肿瘤 预览 被引量:1
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作者 李亚青 樊慧杰 +3 位作者 张明智 钟亚莉 李小丽 索振河 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1040-1044,共5页
丙酮酸脱氢酶是丙酮酸生成乙酰辅酶A的关键酶,而乙酰辅酶A是葡萄糖进入三羧酸循环有氧氧化的首要原料。丙酮酸脱氢酶激酶可以抑制丙酮酸脱氢酶的活性。肿瘤细胞的总体丙酮酸脱氢酶激酶表达增加,造成丙酮酸脱氢酶活性降低,导致肿瘤细胞... 丙酮酸脱氢酶是丙酮酸生成乙酰辅酶A的关键酶,而乙酰辅酶A是葡萄糖进入三羧酸循环有氧氧化的首要原料。丙酮酸脱氢酶激酶可以抑制丙酮酸脱氢酶的活性。肿瘤细胞的总体丙酮酸脱氢酶激酶表达增加,造成丙酮酸脱氢酶活性降低,导致肿瘤细胞主要通过糖酵解的方式获取能量。恶性肿瘤糖酵解活跃能促进细胞增殖和抑制细胞凋亡,而形成肿瘤细胞糖酵解的微环境可保护肿瘤细胞逃避宿主免疫杀伤并减轻化疗药物损伤,还有利于肿瘤细胞的侵袭和转移。因此,丙酮酸脱氢酶在肿瘤的发生发展过程中起作用。事实上胚胎干细胞以及成体干细胞也主要是以糖酵解的方式获取能量。由此推断,丙酮酸脱氢酶的活性可能与肿瘤细胞的干性相关。 展开更多
关键词 丙酮酸脱氢酶 糖酵解 肿瘤 丙酮酸 三羧酸循环
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石斛合剂对HepG2细胞葡萄糖激酶与丙酮酸脱氢酶活性的影响 预览 被引量:3
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作者 张捷平 秦崇涛 施红 《海峡药学》 2012年第3期 34-36,共3页
目的探讨石斛合剂促进葡萄糖代谢的酶学机制。方法①以5%、10%、15%石斛合剂的含药血清培养HepG2细胞24h,测定葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶活性;②以高浓度胰岛素培养HepG2细胞24h,继10%含药血清干预24h,测定葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活... 目的探讨石斛合剂促进葡萄糖代谢的酶学机制。方法①以5%、10%、15%石斛合剂的含药血清培养HepG2细胞24h,测定葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶活性;②以高浓度胰岛素培养HepG2细胞24h,继10%含药血清干预24h,测定葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活性。结果石斛合剂的含药血清能提高HepG2细胞葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活性(P〈0.05);高浓度胰岛素能降低葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶活性(P〈0.05),石斛合剂的治疗能增加葡萄糖激酶、丙酮酸脱氢酶的活性(P〈0.05)。结论高浓度胰岛素能诱发胰岛素抵抗,石斛合剂能提高葡萄糖代谢关键酶活性,缓解胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 石斛合剂 胰岛素抵抗 糖代谢 已糖激酶 丙酮酸脱氢酶
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二氯醋酸钠激活C6细胞线粒体代谢途径的体外作用
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作者 赵欣 王欣 +5 位作者 余克富 段瑀 李捷思 赵炳祥 张烜 张强 《中国药学:英文版》 CAS 2011年第5期460-465,共6页
肿瘤细胞线粒体代谢途径已成为抗肿瘤的关注点。二氯醋酸钠(DCA)是作用于线粒体的小分子物质,显示出一定的抗肿瘤作用。因此,本文考察DCA对C6脑胶质瘤细胞线粒体代谢途径的影响。实验结果显示,DCA可显著增加C6细胞丙酮酸脱氢酶(PD... 肿瘤细胞线粒体代谢途径已成为抗肿瘤的关注点。二氯醋酸钠(DCA)是作用于线粒体的小分子物质,显示出一定的抗肿瘤作用。因此,本文考察DCA对C6脑胶质瘤细胞线粒体代谢途径的影响。实验结果显示,DCA可显著增加C6细胞丙酮酸脱氢酶(PDH)的活性、诱导C6细胞氧活性物质(ROS)的生成,显著降低C6细胞线粒体膜电位(MMP)。上述结果表明,DCA可通过激活C6细胞线粒体代谢途径产生抗肿瘤作用。线粒体代谢途径将成为抗肿瘤治疗的新靶点。 展开更多
关键词 线粒体代谢 二氯醋酸钠 C6脑胶质瘤细胞 丙酮酸脱氢酶 氧活性物质 线粒体膜电位
具有丙酮酸脱氢酶功能的家蚕Bm-l(1)基因的克隆及序列结构与表达研究 被引量:2
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作者 王更先 司马杨虎 +2 位作者 周嫣娜 季明明 徐世清 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期759-765,共7页
丙酮酸脱氢酶(PDH)是丙酮酸脱氢酶复合体(PDC)中的前件酶,参与生成柠檬酸循环(TCA)的起始物乙酰辅酶A,决定生物体内营养成分的分配。利用电子克隆、RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)等方法克隆了与果蝇lethal(1)G0334基因类似... 丙酮酸脱氢酶(PDH)是丙酮酸脱氢酶复合体(PDC)中的前件酶,参与生成柠檬酸循环(TCA)的起始物乙酰辅酶A,决定生物体内营养成分的分配。利用电子克隆、RT-PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)等方法克隆了与果蝇lethal(1)G0334基因类似的具有丙酮酸脱氢酶功能的家蚕Bm-l(1)基因。Bm-l(1)基因的cDNA全长为1 630 bp,由1 200 bp的完整ORF序列、186 bp的5'-UTR和207 bp的3'-UTR组成,含8个外显子和7个内含子,编码蛋白为399个氨基酸残基,分子质量43.93kD,pI 8.07。Bm-l(1)基因编码蛋白的69-365氨基酸残基为E1-dh结构域,该结构域为硫胺素焦磷酸依赖性脱氢酶所特有。蛋白质二级结构预测结果表明α螺旋占28.8%,β折叠占12.0%。采用Clustal W进行多序列比对发现,Bm-l(1)基因编码蛋白与赤拟谷盗等昆虫的PDH具有63%以上的序列相似性,且保守区域高度一致。Bm-l(1)基因mRNA在家蚕整个卵期、幼虫期、蛹期和刚羽化的成虫中,以及5龄3 d幼虫的头部、丝腺、生殖腺、脂肪体、中肠和血液6种组织中都有较高的转录水平,且存在较小的组织差异性。 展开更多
关键词 家蚕 Bm-l(1)基因 丙酮酸脱氢酶 基因克隆 序列分析 基因表达
重组苏云金芽孢杆菌丙酮酸脱氢酶克隆及表达条件的优化 预览 被引量:2
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作者 杨迪 李艳 +2 位作者 张喜红 袁均林 贺红武 《化学与生物工程》 CAS 2009年第4期 39-42,共4页
根据Bcl4579丙酮酸脱氢酶基因序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌BMB171菌株总DNA中扩增得到相应的丙酮酸脱氢酶基因DNA片段。将DNA片段装载到大肠杆菌构建pET—E1表达系统,再通过优化重组菌的表达条件获得有生物活性的丙酮酸脱氢酶。结... 根据Bcl4579丙酮酸脱氢酶基因序列设计引物,从苏云金芽孢杆菌BMB171菌株总DNA中扩增得到相应的丙酮酸脱氢酶基因DNA片段。将DNA片段装载到大肠杆菌构建pET—E1表达系统,再通过优化重组菌的表达条件获得有生物活性的丙酮酸脱氢酶。结果表明,pET—E1表达系统构建获得成功;优化的表达条件如下:培养基为TB+M9(体积比1:1)、起始菌体密度OD600为4~5.5、诱导剂IPTG浓度为0.04mmol·L^-1。 展开更多
关键词 丙酮酸脱氢酶 表达 克隆 苏云金芽孢杆菌
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膦酸酯单钠盐对丙酮酸脱氢酶活性的影响 预览 被引量:4
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作者 谭宏亮 袁均林 +1 位作者 贺红武 王涛 《化学与生物工程》 CAS 2005年第6期 4-5,20,共3页
以不同浓度(10-3~10-7g·mL-1)的O-甲基α-(2,4-二氯苯氧基乙酰氧基)甲基膦酸酯单钠盐(以下简称WT)分别在体外处理水稻幼芽和从水稻线粒体中提取的丙酮酸脱氢酶复合体,结果显示随着WT浓度的逐渐降低,其细胞相对存活率逐渐升高;随... 以不同浓度(10-3~10-7g·mL-1)的O-甲基α-(2,4-二氯苯氧基乙酰氧基)甲基膦酸酯单钠盐(以下简称WT)分别在体外处理水稻幼芽和从水稻线粒体中提取的丙酮酸脱氢酶复合体,结果显示随着WT浓度的逐渐降低,其细胞相对存活率逐渐升高;随着WT浓度的逐渐增高,对丙酮酸脱氢酶的抑制活性也逐渐增强.WT对丙酮酸脱氢酶的抑制活性的I50为29.14 μmol·L-1.由此说明化合物WT是丙酮酸脱氢酶的强抑制剂. 展开更多
关键词 膦酸酯 丙酮酸脱氢酶复合体 抑制作用 细胞相对存活率
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丙酮酸脱氢酶活性的基础研究 预览 被引量:1
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作者 王琦环 肖水芳 +1 位作者 任爱萍 赵宏宇 《包头钢铁学院学报》 2005年第2期 188-190,共3页
用分子生物学及酶学的方法,以pQE9-6h为载体质粒,对丙酮酸脱氢酶的功能特性,尤其是酶的活性进行研究,发现丙酮酸脱氢酶活性的变异幅度很大.
关键词 丙酮酸脱氢酶 酶活性
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PDH调控的糖代谢途径对缺氧后复氧的大鼠肥大心肌细胞凋亡的影响 预览 被引量:3
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作者 刘伟 何作云 +4 位作者 冯兵 林大梁 周圣华 徐静 杨胜利 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期 126-129,共4页
目的探讨丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase, PDH)介导糖代谢途径对缺血再灌注肥大心肌细胞凋亡的影响.方法应用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, Ang Ⅱ)+去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)诱导体外培养的大鼠心肌细胞肥大,采用[3H]-Le... 目的探讨丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase, PDH)介导糖代谢途径对缺血再灌注肥大心肌细胞凋亡的影响.方法应用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ, Ang Ⅱ)+去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)诱导体外培养的大鼠心肌细胞肥大,采用[3H]-Leu掺入法和测定细胞表面积来鉴定心肌细胞肥大;通过体外培养心肌细胞的缺氧复氧模拟缺血再灌注模型;分别以二氯乙酸(dichloroacetate, DCA)和抗阿霉素A(Antimycin A)干预并采用同位素液闪记数法测定PDH活性;流式细胞术测定细胞caspase-3表达; TUNEL检测细凋亡率.结果①AngⅡ 0.1 μmol/L +NE 1 μmol/L使心肌细胞体积增大49.73%,[3H]-Leu掺入量增加115.17%, P<0.05.② DCA和Antimycin A分别增强和抑制PDH活性,呈量效关系,而无明显时间依赖性.③ DCA各组100 μmol/L,1 000 μmol/L,10 000 μmol/L均能抑制caspase-3表达和降低细胞凋亡率,出现量效反应和时间依赖性.④ Antimycin A各组0.1 μmol/L,1 μmol/L,10 μmol/L均增强caspase-3表达和增加凋亡率,也出现量效反应和时间依赖性.结论 caspase-3表达和细胞凋亡率与PDH活性呈反向变化,PDH介导的糖代谢途径参与了缺氧后复氧的肥大心肌细胞的凋亡过程. 展开更多
关键词 心肌肥大 细胞凋亡 能量代谢 丙酮酸脱氢酶
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丙酮酸脱氢酶复合酶系研究进展 预览 被引量:7
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作者 王琦环 《包头钢铁学院学报》 2004年第1期 93-96,共4页
对丙酮酸脱氢酶复合酶系的组成、功能及特性进行了简要的综述.丙酸酸脱氢酶系是1个定位在线粒体中的多酶复合体.它是由3种酶:丙酮酸脱氢酶(E1)、二氢硫辛酸乙酰转移酶(E2)、二氢硫辛酸脱氢酶(E3)和调节它的活性的丙酮酸脱氢酶激酶、一... 对丙酮酸脱氢酶复合酶系的组成、功能及特性进行了简要的综述.丙酸酸脱氢酶系是1个定位在线粒体中的多酶复合体.它是由3种酶:丙酮酸脱氢酶(E1)、二氢硫辛酸乙酰转移酶(E2)、二氢硫辛酸脱氢酶(E3)和调节它的活性的丙酮酸脱氢酶激酶、一种丙酮酸脱氢酶磷酸酶以及功能未知的蛋白X,还有一些辅助因子组成.在能量代谢调控过程中,丙酮酸脱氢酶系是1个主要的酶系.丙酸脱氢酶转化来自于碳水化合物和一些氨基酸的丙酮酸成为乙酰辅酶A.乙酰辅酶A是三羧酸循环的底物.丙酮酸脱氢酶系活性的调节可以通过PDH的磷酸化和脱磷酸化来调节平衡在许多组织中的源于碳水化合物和脂肪酸的乙酰辅酶A.丙酮酸脱氢酶发生突变后而不能行使正常功能,乳酸集结引起乳酸中毒. 展开更多
关键词 丙酮酸脱氢酶复合酶系 乳酸中毒
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