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培养温度对LPS诱导的离体大黄鱼头肾巨噬细胞抗氧化能力和炎性反应的影响 预览
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作者 李庆飞 崔坤 +1 位作者 艾庆辉 麦康森 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期810-819,共10页
为研究温度对离体大黄鱼头肾巨噬细胞抗氧化能力和炎性反应的影响,从大黄鱼头肾组织中分离巨噬细胞结合贴壁筛选法得到细胞单层后,在不同温度(16、22和28℃)下培养备用。使用25μg/mL的脂多糖(LPS)孵育细胞2 h后,测定不同培养温度下离... 为研究温度对离体大黄鱼头肾巨噬细胞抗氧化能力和炎性反应的影响,从大黄鱼头肾组织中分离巨噬细胞结合贴壁筛选法得到细胞单层后,在不同温度(16、22和28℃)下培养备用。使用25μg/mL的脂多糖(LPS)孵育细胞2 h后,测定不同培养温度下离体细胞活力、呼吸爆发活性、抗氧化酶(SOD和CAT)活性以及相关基因(SOD、CAT、Hsp70和IL-1β)表达的情况。结果显示,体外培养细胞36 h后,16℃和22℃条件下培养的细胞活力显著高于28℃处理组;LPS处理组大黄鱼头肾巨噬细胞呼吸爆发活性显著升高,但SOD和CAT酶活性较对照组显著下降。高温(28℃)显著提高了细胞CAT酶的活性和基因表达水平,但SOD酶活性和基因表达变化差异不显著;LPS显著促进了大黄鱼头肾巨噬细胞IL-1β基因的表达,并且随培养温度升高细胞IL-1β基因的表达水平显著降低;但大黄鱼头肾巨噬细胞Nrf2和Hsp70的基因表达量随温度升高而显著增加,且LPS处理组细胞基因表达水平显著高于对照组。研究表明,温度显著影响了离体大黄鱼头肾巨噬细胞的抗氧化能力和LPS所诱导的促炎基因的表达,Nrf2和Hsp70在这一过程中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 大黄鱼 巨噬细胞 细胞培养 脂多糖 抗氧化能力 呼吸爆发 热休克蛋白
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棕点石斑鱼中草药免疫增强剂的快速筛选 预览 被引量:1
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作者 孙晓飞 郭伟良 +5 位作者 谢珍玉 王世锋 胡文婷 李富盛 王文慧 周永灿 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2015年第1期54-60,共7页
采用离体外周血白细胞与中草药水提液共同孵育法,快速筛选棕点石斑鱼中草药免疫增强剂。39种生药量浓度为100 mg/ml的中草药水提液及添加5.0 mg/ml酵母聚糖的中草药水提液分别与棕点石斑鱼外周血白细胞孵育后,采用氮蓝四唑(NBT)还原... 采用离体外周血白细胞与中草药水提液共同孵育法,快速筛选棕点石斑鱼中草药免疫增强剂。39种生药量浓度为100 mg/ml的中草药水提液及添加5.0 mg/ml酵母聚糖的中草药水提液分别与棕点石斑鱼外周血白细胞孵育后,采用氮蓝四唑(NBT)还原法检测各种中草药水提液对棕点石斑鱼外周血白细胞氧呼吸爆发活性的影响,再以吞噬乳胶微球法检测具有显著增强白细胞氧呼吸爆发活性效果的中草药对棕点石斑鱼白细胞吞噬活性的影响,筛选中草药免疫增强剂,并将其拌料饲喂棕点石斑鱼,考察其对棕点石斑鱼外周血和头肾白细胞氧呼吸爆发活性的影响。结果显示,39种中草药中有10种对棕点石斑鱼离体白细胞氧呼吸爆发活性显著提高15%以上,3种酵母聚糖添加组对白细胞氧呼吸爆发活性提高70%以上;筛选出可同时提高棕点石斑鱼离体白细胞的氧呼吸爆发活性和吞噬活性的3种中草药,它们分别为鸡血藤、黄柏和墨旱莲。拌料饲喂实验结果显示,饲喂1%的鸡血藤、黄柏和墨旱莲可显著提高棕点石斑鱼体内外周血和头肾白细胞氧呼吸爆发活性。 展开更多
关键词 棕点石斑鱼 中草药 免疫增强剂 氧呼吸爆发活性 吞噬活性
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南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产胞外多糖对黄盖鲽生长和免疫活性的影响 预览
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作者 李凯 郑风荣 +4 位作者 杜宗军 王波 张宁 齐鲁 林学政 《中国渔业质量与标准》 2015年第2期8-14,共7页
研究了在基础饲料中添加不同含量(0、0.5、1.0、1.5和2.0g/kg)南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产胞外多糖(EPS)对黄盖鲽(Pseudopleuronectesyokohamae)生长和免疫活性的影响。结果表明,当基础饲料中EPS添加量为1... 研究了在基础饲料中添加不同含量(0、0.5、1.0、1.5和2.0g/kg)南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产胞外多糖(EPS)对黄盖鲽(Pseudopleuronectesyokohamae)生长和免疫活性的影响。结果表明,当基础饲料中EPS添加量为1.5g/kg时,试验组黄盖鲽的体重和体长均高于对照组,呈显著性差异(P〈0.05)。添加量为1.0和1.5g/kg试验组的脾脏和后肠淋巴细胞呼吸爆发能力和对照组相比有明显提高,呈极显著性差异(P〈0.01);脾脏淋巴细胞增殖能力也有明显提高,呈显著性差异(P〈0.05)。和对照组相比,添加量为1.5g/kg试验组的脾脏蛋白含量明显提高,呈显著性差异(P〈0.05);脾脏和肝脏酸性磷酸酶(ACP)活力明显提高,呈显著性差异(P〈0.05)。添加量为1.5和2.0s/kg试验组的肝脏蛋白含量和总超氧化物歧化酶(T—SOD)活力明显提高,呈显著差异(P〈0.05)。攻毒实验表明,试验组黄盖鲽均获得了一定的免疫保护,且添加量为1.5∥kg试验组的免疫保护率最高(50.O%)。由此得出,在基础饲料中添加南极细菌Pseudoalteromonassp.3—3—1—2产EPS可促进黄盖鲽生长,提高特异性免疫活力和非特异性免疫活力,提高黄盖鲽抗病能力,且添加量以1.5g/kg效果最佳。 展开更多
关键词 黄盖鲽 胞外多糖 生长 呼吸爆发 淋巴细胞增殖 非特异性免疫
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3种壳聚糖对团头鲂体外头肾吞噬细胞呼吸爆发功能的影响 预览 被引量:3
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作者 郗明君 刘立春 +3 位作者 张涓 汤孝成 刘小玲 林蠡 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期72-77,共6页
采用51%Percoll非连续密度梯度离心法分离团头鲂头肾吞噬细胞,在光镜和电镜下观察所分离细胞的显微、超微结构及吞噬作用;以二氢罗丹明(DHR123)为荧光探针,流式细胞仪检测细胞在佛波豆蔻酸乙酯(PMA)刺激下产生的呼吸爆发活动;光... 采用51%Percoll非连续密度梯度离心法分离团头鲂头肾吞噬细胞,在光镜和电镜下观察所分离细胞的显微、超微结构及吞噬作用;以二氢罗丹明(DHR123)为荧光探针,流式细胞仪检测细胞在佛波豆蔻酸乙酯(PMA)刺激下产生的呼吸爆发活动;光镜下观察壳聚糖对吞噬细胞吞噬功能的影响。结果表明:分离得到的细胞具有吞噬细胞(巨噬细胞与中性粒细胞)的形态学及功能特征;3种壳聚糖组(100μg/mL)均能提高吞噬细胞的呼吸爆发功能,在发荧光细胞比例及细胞发荧光强度上均极显著高于对照组。其中水溶性壳聚糖组的发荧光细胞比例显著高于其他试验组,而在细胞发荧光强度上,普通壳聚糖作用相对较高;同时壳寡糖能增强吞噬细胞的吞噬活性。 展开更多
关键词 团头鲂 吞噬细胞 呼吸爆发 壳寡糖 水溶性壳聚糖 普通壳聚糖 吞噬作用
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猪血多肽对草鱼离体培养免疫细胞活性的影响 预览 被引量:1
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作者 贾睿 杜金梁 +6 位作者 曹丽萍 徐跑 王佳豪 刘英娟 殷国俊 蒋火金 柏爱旭 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1084-1088,共5页
【目的】评估猪血多肽对草鱼的免疫增强作用,为进一步推广猪血多肽在水产养殖中的应用提供参考依据。【方法】采用密度梯度离心技术分离纯化草鱼头肾细胞、巨噬细胞和外周血白细胞,分别体外暴露在不同质量浓度的猪血多肽(0、10、20... 【目的】评估猪血多肽对草鱼的免疫增强作用,为进一步推广猪血多肽在水产养殖中的应用提供参考依据。【方法】采用密度梯度离心技术分离纯化草鱼头肾细胞、巨噬细胞和外周血白细胞,分别体外暴露在不同质量浓度的猪血多肽(0、10、20、40、80μg/mL)中作用24h,然后测定草鱼外周血白细胞增殖、巨噬细胞呼吸爆发活性和头肾细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,以探讨猪血多肽对草鱼体外培养免疫细胞活性的影响。【结果】猪血多肽体外作用24h后,有效促进了草鱼体外培养免疫细胞的免疫活性,且以80μg/mL猪血多肽的增效作用最明显,能极显著促进外周血白细胞增殖和增强巨噬细胞氧呼吸爆发活性(P〈0.01),显著提高巨噬细胞氮呼吸爆发活性和头肾细胞SOD活性(P〈0.05)。【结论】猪血多肽对草鱼非特异性免疫具有促进作用,且作用效果呈剂量依赖性。实际生产中,可将猪血多肽开发成一种免疫添加剂,以增强水产动物对疾病的抵抗能力,提高水产养殖效益。 展开更多
关键词 猪血多肽 草鱼 外周血白细胞 巨噬细胞 头肾细胞 细胞增殖 呼吸爆发活性 SOD活性
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水体pH胁迫对异育银鲫皮质醇激素和非特异性免疫的影响 预览 被引量:12
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作者 李文祥 谢骏 +3 位作者 宋锐 邹红 吴山功 王桂堂 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期 256-261,共6页
实验比较了不同pH胁迫对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)皮质醇激素和非特异性免疫的影响。3个实验组水质的pH分别为6.0、8.5、9.5,对照组是pH为7.4的曝气自来水。分别在实验的第0、14和30天采血,血浆用于测定皮质醇含量和溶菌... 实验比较了不同pH胁迫对异育银鲫(Carassius auratus gibelio)皮质醇激素和非特异性免疫的影响。3个实验组水质的pH分别为6.0、8.5、9.5,对照组是pH为7.4的曝气自来水。分别在实验的第0、14和30天采血,血浆用于测定皮质醇含量和溶菌酶活性;分离的白细胞,采用流式细胞术测定吞噬活性和呼吸暴发。在实验的第4天多取1次血样,用于皮质醇含量测定。在实验的第31天,测量鱼的体重,并用柱状黄杆菌(Flavobacterium columnare)浸泡攻毒,7d后统计死亡情况。结果显示:在pH 6.0的胁迫下,白细胞的吞噬活性在第14、30天显著降低,而呼吸暴发和皮质醇含量没有显著变化,溶菌酶活性和生长与对照组没有显著差异,用黄杆菌攻毒也没有出现死亡。而在pH 8.5和9.5的胁迫下,皮质醇含量在第14、30天显著升高,白细胞的吞噬活性、呼吸暴发显著降低;在pH 9.5胁迫下的溶菌酶活性显著降低,用柱状黄杆菌攻毒两组都出现死亡。实验表明pH为8.5和9.5的胁迫严重影响了异育银鲫的非特异性免疫功能,流式细胞术能较客观测定白细胞的吞噬活性和呼吸暴发,可用于评价胁迫对鱼类健康的影响。 展开更多
关键词 PH胁迫 异育银鲫 皮质醇 溶菌酶活性 吞噬活性 呼吸暴发 流式细胞术
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香菇多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响 预览 被引量:8
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作者 白东清 吴旋 +1 位作者 朱国霞 宁博 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第9期 1855-1858,共4页
试验选取540尾黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),对其连续投喂含不同水平香菇多糖(Lentinan,LNT)的配合饲料8周。采用Percoll密度梯度离心等技术,对黄颡鱼头肾巨噬细胞与外周血白细胞进行分离纯化,使用NBT还原法、Griesse试剂显色法... 试验选取540尾黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),对其连续投喂含不同水平香菇多糖(Lentinan,LNT)的配合饲料8周。采用Percoll密度梯度离心等技术,对黄颡鱼头肾巨噬细胞与外周血白细胞进行分离纯化,使用NBT还原法、Griesse试剂显色法与MTT法测定头肾巨噬细胞呼吸爆发活性与外周血白细胞的增殖能力,以探讨香菇多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响。结果表明香菇多糖各水平组均能提高黄颡鱼头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性,且1200~1500mg/kg水平组提高作用极显著(P〈0.01);香菇多糖各水平组能提高黄颡鱼头肾巨噬细胞氮呼吸爆发活性,其中600 mg/kg水平组活性显著提高(P〈0.05),900~1 500 mg/kg水平组活性提高效果极显著(P〈0.01);投喂香菇多糖还能显著提高黄颡鱼外周血白细胞的增殖能力(P〈0.05),且600~1500mg/kg水平组促进作用极显著(P〈0.01)。可见,香菇多糖可以有效地提高黄颡鱼免疫细胞的活性。 展开更多
关键词 黄颡鱼 香菇多糖 免疫细胞活性 呼吸爆发 细胞增殖
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虹鳟中草药免疫增强剂体外快速筛选研究 预览
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作者 董春燕 姚丽 +3 位作者 邵俭 安苗 文明 姜海波 《饲料工业》 北大核心 2019年第10期53-56,共4页
实验以虹鳟为研究对象,选取17种中草药开展中草药免疫增强剂的体外快速筛选研究。采用Percoll密度梯度离心方法,对虹鳟外周血白细胞进行分离纯化实验。结果表明:白头翁、桂桔、白芨、大黄、贯众、红景天6种中草药的SPO显著高于对照组(P&... 实验以虹鳟为研究对象,选取17种中草药开展中草药免疫增强剂的体外快速筛选研究。采用Percoll密度梯度离心方法,对虹鳟外周血白细胞进行分离纯化实验。结果表明:白头翁、桂桔、白芨、大黄、贯众、红景天6种中草药的SPO显著高于对照组(P<0.05),且 NBTN显著提高[NBTB(%)>15%];白芨、厚朴、麻黄、丹参、大黄、马齿苋、泽泻、黄柏、苍耳子、贯众、红景天组的吞噬活性(PA)值显著高于对照组(P<0.05),蒲公英组的吞噬指数(PI)值显著高于对照组(P<0.05)。综合上述评价指标:白芨、大黄、贯众、红景天可作为虹鳟免疫增强剂的备选中草药。 展开更多
关键词 中草药 虹鳟 免疫增强剂 氧呼吸爆发活性 吞噬活性
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皮质醇对黄颡鱼成鱼吞噬细胞和补体活性的影响 预览 被引量:1
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作者 田珍 刘小玲 +1 位作者 丁益群 刘旭博 《现代农业科技》 2009年第9期 232-233,235,共3页
采用皮质醇混饲投喂的方法.模拟自然条件下的慢性应激,研究皮质醇对黄颡鱼咸鱼吞噬细胞呼吸暴发和血清补体旁路溶血活性(ACH50)的影响。研究结果与结论如下。皮质醇混饲投喂可使血清皮质醇浓度持续显著升高,各周对照组血清皮质醇... 采用皮质醇混饲投喂的方法.模拟自然条件下的慢性应激,研究皮质醇对黄颡鱼咸鱼吞噬细胞呼吸暴发和血清补体旁路溶血活性(ACH50)的影响。研究结果与结论如下。皮质醇混饲投喂可使血清皮质醇浓度持续显著升高,各周对照组血清皮质醇含量均无显著性差异,证明采用皮质醇混饲投喂的方法可模拟自然慢性应激情况下的血清皮质醇浓度持续显著升高。从第2周开始头肾吞噬细胞的呼吸暴发功能显著下降(P〈0.05),证明皮质醇对头肾吞噬细胞的杀菌能力产生显著抑制作用。10mg/kg剂量组,ACH50在投喂第2、第5、第6周显著低于对照组(P〈0.05),100mg/kg剂量组,ACH50从第2周开始一直都极显著低于同期对照组(P〈0.01),证明皮质醇显著抑制血清补体旁路溶血活性,且血清皮质醇浓度越高其抑制作用越强。 展开更多
关键词 皮质醇 黄颡鱼 头肾吞噬细胞 呼吸暴发 血清补体旁路活性
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“血必净”注射液对急性炎症反应综合征患者中性粒细胞功能的影响 预览 被引量:27
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作者 林福清 邓小明 朱科明 《同济大学学报:医学版》 2007年第6期 86-89,共4页
目的研究中药“血必净”注射液对全身炎症反应综合征(systemic inflammatory respose syndrome,SIRS)患者中性粒细胞功能的影响。方法40例SIRS患者,随机分为血必净治疗组(n=20)和常规治疗对照组(n=20)。两组患者均于治疗前,治... 目的研究中药“血必净”注射液对全身炎症反应综合征(systemic inflammatory respose syndrome,SIRS)患者中性粒细胞功能的影响。方法40例SIRS患者,随机分为血必净治疗组(n=20)和常规治疗对照组(n=20)。两组患者均于治疗前,治疗3d、7d、10d时,取外周静脉血采用流式细胞仪检测中性粒细胞趋化、吞噬和氧化呼吸爆发功能并通过软件分析两组患者急性生理与慢性健康状况评估Ⅲ评分。并测定10例健康志愿者中性粒细胞功能作为正常值参照。结果治疗前SIRS患者的中性粒细胞功能显著高于健康者(P〈0.01);与常规治疗对照组相比,“血必净”治疗组患者中性粒细胞功能显著下降(P〈0.05),APACHEⅢ评分也逐渐降低(P〈0.05)。结论中药“血必净”注射液可降低SIRS患者中性粒细胞活性,减少自身组织细胞的破坏,改善患者的预后。 展开更多
关键词 血必净注射液 全身炎性反应综合征 中性粒细胞 趋化功能 吞噬功能 氧化呼吸爆发功能
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