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丹参水提取物成分的定性与半定量研究
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作者 张伟涛 李德坤 +3 位作者 岳洪水 侯建 刘丽芳 鞠爱春 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期3598-3606,共9页
目的利用Q-TOF-MS技术对丹参水提取物中的成分进行定性研究,并且利用Q-Trap-MS技术对部分未知成分进行半定量研究。方法采用Waters Acquity UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水体系梯度洗脱,体积流量0.3 m... 目的利用Q-TOF-MS技术对丹参水提取物中的成分进行定性研究,并且利用Q-Trap-MS技术对部分未知成分进行半定量研究。方法采用Waters Acquity UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水体系梯度洗脱,体积流量0.3 mL/min,柱温30℃。Q-TOF-MS检测采用负离子ESI模式,电压2.5 kV,离子源温度110℃,雾化气温度350℃,雾化气流量800 L/h。Q-Trap-MS检测采用负离子ESI模式,离子喷射电压:-4 500 V;温度450℃;源内气体1(GS1,N2)压力310 kPa;源内气体2(GS2,N2)压力310 kPa;气帘气体(N2)压力138 kPa;应用多重反应监测(MRM)模式进行半定量分析。结果鉴定出丹参水提取物中成分26个,其中有15个为常见的酚酸类物质,另有11个含量较低且研究较少的已知物质;在Q-Trap-MS中进行了方法学的考察,并测定出了11种未知成分的含量。结论实现了对丹参水提取物高效快速的物质定性,同时也为无对照品且含量较低的成分的含量测定提供了新的思路。 展开更多
关键词 丹参水提取物 丹酚酸 液质联用 定性 半定量
胶体金标记法半定量比较植物韧皮部和叶肉组织中细胞壁的纤维素含量 预览
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作者 谢礼 李云琴 洪健 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期165-170,共6页
植物细胞壁由多种多糖成分构成,不同类型细胞的细胞壁结构和成分略有不同。本研究利用纤维素酶探针对水稻三种类型细胞壁,包括筛管细胞壁、韧皮部薄壁细胞细胞壁和叶肉细胞细胞壁分别做胶体金标记,半定量比较细胞壁区域内金颗粒的面密度... 植物细胞壁由多种多糖成分构成,不同类型细胞的细胞壁结构和成分略有不同。本研究利用纤维素酶探针对水稻三种类型细胞壁,包括筛管细胞壁、韧皮部薄壁细胞细胞壁和叶肉细胞细胞壁分别做胶体金标记,半定量比较细胞壁区域内金颗粒的面密度,间接反映三种类型细胞壁的纤维素含量。利用IMARIS软件对金标图像做金颗粒的分割、细胞壁区域面积测算和细胞壁区域内金颗粒的筛选等一系列图像处理技术,可以半自动化对较大批量的图像进行处理,利于统计分析。经过每组30个重复的测算,结果发现筛管细胞壁的纤维素含量显著高于韧皮部薄壁细胞和叶肉细胞。 展开更多
关键词 细胞壁 纤维素 胶体金标记 半定量 图像处理
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2709例泌尿生殖道支原体培养及耐药性分析 预览 被引量:8
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作者 张扬丽 蒋明栋 +1 位作者 王智华 李静梅 《微生物学免疫学进展》 2015年第5期45-48,共4页
目的:对门诊2709例病例的支原体培养标本进行泌尿生殖道解脲脲原体( Ureaplasma urealyticum ,Uu)与人型支原体( Mycoplasma hominis,Mh)感染情况及耐药性的分析,为临床的诊断及治疗提供参考依据。方法采用商品化试剂盒对2709... 目的:对门诊2709例病例的支原体培养标本进行泌尿生殖道解脲脲原体( Ureaplasma urealyticum ,Uu)与人型支原体( Mycoplasma hominis,Mh)感染情况及耐药性的分析,为临床的诊断及治疗提供参考依据。方法采用商品化试剂盒对2709例标本进行Uu、Mh半定量培养及药物敏感试验。结果2709例标本中总阳性率为56.15%,其中Uu占比39.87%、Mh占比8.08%、Uu和Mh共同阳性者占比8.19%,男性标本阳性率为47.78%、女性标本阳性率为66.26%。药敏结果显示,单独Uu感染者对喹诺酮类(5.00%~34.40%)、红霉素(42.80%)敏感率较低,而对四环素类(88.90%~95.00%)、交沙霉素(97.30%)敏感率较高。单独Mh感染者与Uu和Mh混合感染者耐药情况均较为严重,除四环素、强力霉素、交沙霉素、美满霉素敏感率在50%以上,对其余药物的敏感率均在50%以下。结论泌尿生殖道支原体感染以Uu感染为主,其中女性感染率高于男性;药敏结果显示感染者对四环素、强力霉素、交沙霉素、美满霉素敏感率较高,单独Mh感染者与Uu和Mh混合感染者耐药情况更为严重。 展开更多
关键词 解脲脲原体 人型支原体 混合感染 药敏试验 半定量计数
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烟叶中高效氯氟氰菊酯残留半定量ELISA检测方法的建立 预览 被引量:1
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作者 刘媛 孙立荣 +5 位作者 方敦煌 宋春满 余向阳 王冬兰 张存政 刘贤进 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第3期 623-626,共4页
以高效氯氟氰菊酯为供试药剂,分别建立了烟叶基质和PBS缓冲液中高效氯氟氰菊酯的ELISA检测标准曲线。并在线性检测范围内,连续3 d添加3个浓度的高效氯氟氰菊酯,研究烟叶基质对ELISA检测的影响。结果表明,烟叶基质和缓冲液中高效氯氟氰... 以高效氯氟氰菊酯为供试药剂,分别建立了烟叶基质和PBS缓冲液中高效氯氟氰菊酯的ELISA检测标准曲线。并在线性检测范围内,连续3 d添加3个浓度的高效氯氟氰菊酯,研究烟叶基质对ELISA检测的影响。结果表明,烟叶基质和缓冲液中高效氯氟氰菊酯的回收率分别在94%~157%和87%~118%,变异系数分别是6.8%~22.1%和3.5%~6.6%。这表明烟叶基质对ELISA检测干扰较大,在净化的条件下,定位为高效氯氟氰菊酯的半定量筛选检测较为合理。以空白烟叶添加适当浓度的高效氯氟氰菊酯(如设定的超标限量)为对照,间接竞争ELISA法检测待测样品,建立了烟叶中高效氯氟氰菊酯的半定量ELISA筛选方法,制定了结果判断标准。对50个高效氯氟氰菊酯施药后的烤烟烟叶同时采用ELISA法和气相色谱法(GC)分析,结果表明,ELISA法检测样本超标检出率为34%,GC法检出率为22%。以GC法为参照,ELISA法假阳性率为12%,假阴性率为0,表明该方法可以用于大量烟叶样本中的高效氯氟氰菊酯快速筛查。 展开更多
关键词 烟叶 氯氟氰菊酯 半定量 ELISA
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木材中挥发性有机酸的SPME-GC/MS分析研究 预览
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作者 周新光 吴来明 宋国新 《文物保护与考古科学》 2009年第S1期30-32,共3页
采用木材制作的藏展空间,木材释放出的挥发性有机酸,在一定的温湿度条件下,会对文物造成不良的影响,因此需要建立一套对木材挥发性有机酸测定的方法。为此,采用固相微萃取(SPME)样品预处理技术,分离富集木材中的挥发性有机物,结合气相... 采用木材制作的藏展空间,木材释放出的挥发性有机酸,在一定的温湿度条件下,会对文物造成不良的影响,因此需要建立一套对木材挥发性有机酸测定的方法。为此,采用固相微萃取(SPME)样品预处理技术,分离富集木材中的挥发性有机物,结合气相色谱-质谱(GC/MS)联用技术对木材中挥发性有机酸进行半定量分析,研究了9种木材中挥发性有机酸的挥发量和分布规律。结果表明,不同木材有机酸的挥发量差别较大。实验结果可为博物馆在装修和储藏中对材料的筛选提供科学依据。 展开更多
关键词 挥发性有机酸 SPME-GC/MS 木材 半定量
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用PCR法快速半定量阴道分泌物中的乳酸杆菌 预览 被引量:2
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作者 汪艳 唐立 +1 位作者 文妹 张婵 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期 457-459,共3页
目的 通过对PCR引物、反应条件及样本处理条件的摸索,建立一种不经过分离培养和DNA提取纯化步骤,直接用乳酸杆菌特异性引物快速定性、半定量妇女阴道分泌物标本中乳酸杆菌的方法.方法 设计乳酸杆菌属特异性引物;对样本处理方法和PCR反... 目的 通过对PCR引物、反应条件及样本处理条件的摸索,建立一种不经过分离培养和DNA提取纯化步骤,直接用乳酸杆菌特异性引物快速定性、半定量妇女阴道分泌物标本中乳酸杆菌的方法.方法 设计乳酸杆菌属特异性引物;对样本处理方法和PCR反应条件进行摸索;比较用PCR法定量阴道分泌物中乳酸杆菌的结果和稀释滴种法定量结果的相关性.结果 (1)用浓度为2%的Tritonx-100处理阴道标本后可在220 bp的位置得到最佳的特异性扩增区带;(2)将MgCl2在PCR反应体系中的终浓度调节至2.5 mmol/L时,可以产生最强的特异性反应扩增带;(3)用PCR法分析阴道分泌物所得菌数与培养所得菌数之间明显相关(P<0.05);用PCR法分析阴道分泌物所得灰度值与培养所得菌数之间明显相关(P<0.05).结论 将阴道分泌物标本经过简单的离心、洗涤处理后,直接应用PCR法,就可以快速地定性和半定量妇女阴道分泌物标本中的乳酸杆菌. 展开更多
关键词 乳酸杆菌 PCR 定性 半定量
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实验操作敏捷性定量评价的研究 预览
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作者 夏遵义 《齐齐哈尔大学学报:自然科学版》 2003年第3期 88-91,共4页
物理实验是从事物理学研究的基本方法。实验水平的高低往往能表明一个物理工作者研究水平的高低。物理实验教学首先就是要培养学生从事科学研究所要具备的基本实验能力。本文根据教学目标及实验本身的特征。分析实验能力的结构,建立起... 物理实验是从事物理学研究的基本方法。实验水平的高低往往能表明一个物理工作者研究水平的高低。物理实验教学首先就是要培养学生从事科学研究所要具备的基本实验能力。本文根据教学目标及实验本身的特征。分析实验能力的结构,建立起客观测量和评价实验能力的模型。 展开更多
关键词 实验能力 结构模型 敏捷性 半量化
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尿中百草枯半定量试验对急性百草枯中毒患者的预后评估 预览
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作者 张立春 刘伟 +1 位作者 刘振宁 王煜 《实用药物与临床》 CAS 2017年第6期683-686,共4页
目的研究尿中百草枯(Paraquat,PQ)半定量试验对急性PQ中毒严重程度评估的意义。方法依据尿中PQ半定量试验结果,将186例PQ中毒病例分为+组(37例)、++组(25例)、+++组(27例)和++++组(97例),比较四组病例的临床特征、... 目的研究尿中百草枯(Paraquat,PQ)半定量试验对急性PQ中毒严重程度评估的意义。方法依据尿中PQ半定量试验结果,将186例PQ中毒病例分为+组(37例)、++组(25例)、+++组(27例)和++++组(97例),比较四组病例的临床特征、肝肾损害及呼吸衰竭的情况,用Kaplan-Meier法进行生存率分析。结果 186例PQ中毒患者死亡92例,病死率为49.46%。+组病例无严重并发症,++++组病例急性呼吸、肝肾衰竭发生率明显高于其他组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。尿中PQ浓度和肝、肾功能异常显著相关(r肾脏功能=0.756,r肝功能=0.574,P〈0.001)。Kaplan-Meier生存分析显示,++++组病死率(78.35%)明显高于+++组(55.56%)、++组(4.0%)和+组(0%),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论尿PQ半定量试验可较好判断急性PQ中毒的严重程度,可对急性PQ中毒患者指导治疗,预测预后。 展开更多
关键词 百草枯 中毒 百草枯半定量试验 预后评价
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大鼠死后骨骼肌DNA降解规律与晚期死亡时间的关系 被引量:2
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作者 王勇 杨雅丽 +2 位作者 王晶 李海龙 陈彻 《中国法医学杂志》 CSCD 2015年第4期354-357,共4页
目的 探讨大鼠死后骨骼肌细胞核DNA降解与晚期死亡时间的关系。方法 54只SD大鼠随机均分为0d、1d、3d、7d、21d、28d、35d、42d时间点组,采用断颈法处死后,在相应时间点采用常规HE染色观察和采用Hoechst33258荧光染色法检测DNA浓度、进... 目的 探讨大鼠死后骨骼肌细胞核DNA降解与晚期死亡时间的关系。方法 54只SD大鼠随机均分为0d、1d、3d、7d、21d、28d、35d、42d时间点组,采用断颈法处死后,在相应时间点采用常规HE染色观察和采用Hoechst33258荧光染色法检测DNA浓度、进行看家基因GAPDH PCR半定量,对骨骼肌DNA降解情况进行分析。结果 HE染色结果显示,随着死后时间的延长,骨骼肌的自溶程度增加,在死后7d,细胞核HE切片中细胞核基本消失。Hoechst 33258荧光定量和GAPDH PCR半定量分析显示,大鼠死后21d以内,DNA浓度及GAPDH的表达量迅速下降,期间各时间点之间均存在显著性差异(P=0.000),而在之后至42d期间,数值维持在一个较低的水平,组间无显著性差异。上述实验结果可相互印证。结论 大鼠骨骼肌组织DNA含量死后21d内呈明显下降趋势,其变化规律可尝试用于晚期死亡时间推断。 展开更多
关键词 法医病理学 细胞核DNA降解 死亡时间 荧光DNA定量 PCR半定量
AnnexinⅡ基因在肺癌组织中的表达分析 预览 被引量:2
10
作者 贾晋伟 郭述良 +1 位作者 钱桂生 黄桂君 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 2010年第4期 9-11,共3页
目的分析AnnexinⅡ基因mRNA在肺癌组织及癌旁正常肺组织中的表达情况。方法分别提取10例人肺癌组织及5例癌旁正常肺组织总RNA,逆转录后分别对AnnexinⅡ和β-肌动蛋白行聚合酶链式反应(PCR)扩增。测定电泳图像中各条带光密度值,以同... 目的分析AnnexinⅡ基因mRNA在肺癌组织及癌旁正常肺组织中的表达情况。方法分别提取10例人肺癌组织及5例癌旁正常肺组织总RNA,逆转录后分别对AnnexinⅡ和β-肌动蛋白行聚合酶链式反应(PCR)扩增。测定电泳图像中各条带光密度值,以同一泳道中AnnexinⅡ和β-肌动蛋白产物条带积分光密度值之比作数据分析,以此反映AnnexinⅡ基因mRNA的表达程度。结果肺癌组织中AnnexinⅡ基因mRNA表达量较癌旁正常肺组织明显增加(P〈0.05)。结论AnnexinⅡ表达增加在肺癌的发生发展中可能具有重要作用。 展开更多
关键词 AnnexinⅡ 肺癌 mRNA表达半定量分析
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氧化应激环境下猪胸膜肺炎放线杆菌ohr基因转录活性的变化 预览
11
作者 段丽丽 文心田 +1 位作者 曹三杰 黄小波 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期 561-565,共5页
使用异丙苯化过氧氢(Cumene hydroperoxide,CHP)模拟体内氧化应激环境,给予猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillμs pleuropnepmoniae,APP)血清1型菌不同浓度CHP或相同浓度CHP不同时间的刺激,使细胞处于氧化应激状态,采用半定量RT... 使用异丙苯化过氧氢(Cumene hydroperoxide,CHP)模拟体内氧化应激环境,给予猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillμs pleuropnepmoniae,APP)血清1型菌不同浓度CHP或相同浓度CHP不同时间的刺激,使细胞处于氧化应激状态,采用半定量RT-PCR方法,以看家基因recF为内参对照,观察ohr基因的转录活性,并进一步分析刺激强度、刺激时间与ohr基因转录活性的关系。结果表明,模拟的氧化应激环境明显增加了ohr基因的转录活性,该基因在转录水平上受到氧化应激调控。ohrmRNA的转录在一定范围内(CHP浓度不大于300μmol/L时)与氧化物刺激的强度具有时间依赖和浓度依赖关系。模拟的氧化应激促进了ohr基因的转录活性,由此可推知ohr基因可能是APP潜在的毒力基因,在APP致病过程中具有潜在的促进作用。 展开更多
关键词 半定量RT-PCR 猪胸膜肺炎放线杆菌 ohr基因 氧化应激
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猪胸膜肺炎放线杆菌ArcA基因在低氧环境下的转录变化 预览
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作者 段丽丽 文心田 +1 位作者 曹三杰 黄小波 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期 1388-1394,共7页
为研究低氧条件对猪胸膜肺炎放线杆菌(Acfinobacillus pleuropneumaniae,APP)血清1型ArcA基因表达的影响,并探讨ArcA在低氧环境中的作用机制,作者建立了体外培养模型,在低氧环境中培养APP,采用半定量RT-PCR方法,以看家基因recF... 为研究低氧条件对猪胸膜肺炎放线杆菌(Acfinobacillus pleuropneumaniae,APP)血清1型ArcA基因表达的影响,并探讨ArcA在低氧环境中的作用机制,作者建立了体外培养模型,在低氧环境中培养APP,采用半定量RT-PCR方法,以看家基因recF为内参,检测ArcA基因在低氧条件下的表达水平。结果表明ArcA基因在常氧条件下不转录或低转录,而在低氧环境下高转录,并呈现转录量先升高后降低的趋势。这表明ArcA基因可能是胸膜肺炎放线杆菌潜在的毒力基因,在致病过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 半定量RT-PCR 猪胸膜肺炎放线杆菌 ArcA基因 缺氧
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家蚕细胞色素P450基因CYP9A22的克隆及在中肠和脂肪体的诱导转录 预览 被引量:8
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作者 赵华强 王东 +2 位作者 李兵 许雅香 沈卫德 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期 634-641,共8页
细胞色素P450对昆虫的生长发育、环境适应性以及抗药性具有重要作用。为了探讨氯氰菊酯对家蚕(Bombyx mori)细胞色素P450基因转录的诱导作用,采用RT-PCR技术和cDNA末端快速扩增(RACE)策略,从家蚕5龄幼虫克隆到细胞色素P450基因CYP... 细胞色素P450对昆虫的生长发育、环境适应性以及抗药性具有重要作用。为了探讨氯氰菊酯对家蚕(Bombyx mori)细胞色素P450基因转录的诱导作用,采用RT-PCR技术和cDNA末端快速扩增(RACE)策略,从家蚕5龄幼虫克隆到细胞色素P450基因CYP9A22(GenBank登录号:EF535804)。CYP9A22基因的cDNA编码区长1596bp,编码531个氨基酸,推定的蛋白质分子质量为61kD,等电点为7.71。将该基因的cDNA和家蚕基因组序列比对,有9个内含子;与已知的CYP9家族的棉铃虫(Helicoverpa armigera)CYP9A14基因的相应氨基酸同源性达到62.3%。用半定量RT-PCR方法分析氯氰菊酯诱导家蚕CYP9A22表达水平,结果表明:CYP9A22的mRNA转录表达具有组织特异性,在中肠的表达量高于脂肪体;氯氰菊酯诱导家蚕24h,在其脂肪体的表达量是未诱导家蚕脂肪体的3.1倍,初步推测CYP9A22的过量表达可能与抗药性有一定关系。 展开更多
关键词 家蚕 细胞色素P450 CDNA末端快速扩增 基因克隆 半定量RT-PCR
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荧光原位杂交和基因组半定量法检测乳腺癌组织中c—erbB-2基因扩增 预览 被引量:5
14
作者 仇丽红 史宏灿 +1 位作者 钱建军 陈建民 《实用临床医药杂志》 CAS 2007年第6期 27-31,共5页
目的利用荧光原位杂交(FISH)与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织,抽提收集样品基因组DNA并扩增c—erbB-2的特异序列构建转化子,以c-erbB-2的特异序列为... 目的利用荧光原位杂交(FISH)与基因组半定量法检测乳腺正常良性和恶性组织中原癌基因c-erbB-2的扩增情况。方法收集50例临床切除的乳腺肿瘤组织,抽提收集样品基因组DNA并扩增c—erbB-2的特异序列构建转化子,以c-erbB-2的特异序列为探针进行间期核FISH检测乳腺肿瘤组织中c-erbB-2基因的扩增,并采用基因组半定量法比较不同组别乳腺组织中c-erbB-2基因的扩增。结果FISH检测发现正常乳腺组织中未出现c-erbB-2扩增,而良性与恶性组织中有不同程度的扩增,基因组半定量分析显示恶性肿瘤组织中c-erbB-2扩增程度高于良性与正常组织。结论c-erbB-2扩增是乳腺癌变的可靠的分子指标。可用荧光原位杂交与基因组半定量法对乳腺癌进行分子生物学诊断,且前者的敏感性与稳定性优于后者。 展开更多
关键词 FISH 基因组半定量法 C-ERBB-2 乳腺癌
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过度训练对大鼠睾丸AQP9表达的影响 预览 被引量:1
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作者 张忠芳 赵丹 +1 位作者 赵雪俭 罗基花 《北华大学学报:自然科学版》 CAS 2006年第5期 407-410,共4页
目的探讨过度训练对大鼠睾丸水通道蛋白AQP9表达的影响以及睾酮和人参二醇皂甙对过度训练的影响.方法半定量RT—PCR.结果与对照组相比,过度训练大鼠睾丸的AQP9表达下降,而外源睾酮及人参二醇皂甙可以使过度训练大鼠睾丸的AQP9表达... 目的探讨过度训练对大鼠睾丸水通道蛋白AQP9表达的影响以及睾酮和人参二醇皂甙对过度训练的影响.方法半定量RT—PCR.结果与对照组相比,过度训练大鼠睾丸的AQP9表达下降,而外源睾酮及人参二醇皂甙可以使过度训练大鼠睾丸的AQP9表达增强.结论过度训练抑制大鼠睾丸AQP9的表达,而外源睾酮及人参二醇皂甙可以增强大鼠睾丸AQP9的表达. 展开更多
关键词 水通道蛋白AQP9 半定量RT-PCR 过度训练
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半定量RT-PCR测定中药成分对小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平的影响 预览 被引量:14
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作者 储岳峰 颜新敏 +1 位作者 李祥瑞 胡元亮 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期 1911-1916,共6页
应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响.结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂... 应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响.结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂甙、淫羊藿黄酮不能影响细胞内IL-2mRNA丰度;中药成分体外诱导时与体内应用时的作用效应相同,但与对照相比较,蜂胶多糖在体外能够显著促进IL-2mRNA的诱生,与体内不同. 展开更多
关键词 小鼠 中药成分 半定量RT-PCR IL-2mRNA T细胞 半定量RT-PCR MRNA水平 中药成分 IL-2 T细胞 小鼠 脾脏 测定 RT-PCR方法
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