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河豚毒素对敏感性钠离子通道的作用及其与疼痛的关系 预览
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作者 邓兴朝 陈欢 +1 位作者 陈静 黄连生 《生物化工》 2019年第1期127-131,共5页
本文主要针对河豚毒素对钠离子通道的作用及河豚毒素能阻断的、在疼痛中有关键作用的钠离子通道的亚型进行综述。
关键词 河豚毒素 钠离子通道 疼痛
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蝎毒素多肽与钠通道特异性结合位点研究进展 预览
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作者 章旭日 白占涛 刘霞 《延安大学学报:自然科学版》 2019年第1期68-72,共5页
蝎毒素多肽是一种通道门控调节剂,早先研究发现其通过与离子通道的电压感受域结合影响通道的门控特性。新近研究表明,门控调解剂毒素与离子通道孔区也具有额外结合位点。因此,本文就蝎毒素多肽与钠通道特异性结合位点相关研究展开综述,... 蝎毒素多肽是一种通道门控调节剂,早先研究发现其通过与离子通道的电压感受域结合影响通道的门控特性。新近研究表明,门控调解剂毒素与离子通道孔区也具有额外结合位点。因此,本文就蝎毒素多肽与钠通道特异性结合位点相关研究展开综述,以梳理门控调节剂毒素的结构与调节功能,为蝎毒素多肽与钠通道结合位点结构与功能的解析提供依据,也为靶向钠通道药物的设计与开发提供参考。 展开更多
关键词 蝎毒素多肽 钠通道 结合位点
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Inhibitory effects of lappaconitine on the neuronal isoforms of voltage-gated sodium channels
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作者 Yan-fen Li Yue-ming Zheng +2 位作者 Yong Yu Yong Gan Zhao-bing Gao 《中国药理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第4期451-459,共9页
Lappac on itine (LA) has bee n widely used for postoperative and can cer pain control. LA exhibits excellent an algesic activity with a Ion ger effective time tha n comm on local an esthetics such as tetracai ne and b... Lappac on itine (LA) has bee n widely used for postoperative and can cer pain control. LA exhibits excellent an algesic activity with a Ion ger effective time tha n comm on local an esthetics such as tetracai ne and bupivacai ne. However, the mecha nisms un derlyi ng the featured analgesic activity of LA remain largely unknown. Here, we report that LA is an inhibitor of voltage-gated sodium channel 1.7 (Navi.7) stably expressed in human embryonic kidney (HEK293) cells. LA inhibited Navi.7 in a voltage-dependent manner with an IC50 value (with 95% confidence limits) of 27.67 (15.68-39.66) pmol/L when the cell was clamped at -70 mV. In comparison with the quick and reversible inhibition of Navi .7 by tetracaine and bupivacaine, the inhibitory effect of LA was rather slow and irreversible. It took more tha n 10 min to achieve steady-state in hibition when LA (300 pmol/L) was admi nistered. Un like tetracai ne and bupivacai n 巳 LA affected neither the voltage-depende nt activati on nor the in activation of the cha nn els. Five residues in domai n III and domain IV have been reported to be critical for the effects of the two local anesthetics on Nav channels. But our mutant study revealed that only two residues (F1737, N1742) located in domain IV were necessary for the inhibitory activity of LA. The slow onset, irreversibility, and lack of influe nee on cha nnel activati on and in activati on accompa nied with the differe nt molecular determi nants suggest that LA may in hibit Nav1.7 cha nnels in a manner differe nt from local an esthetics. These results may help to un dersta nd the featured an algesic activity of LA, thus ben efiti ng its applicatio n in the clinic and future drug developme nt. 展开更多
关键词 VOLTAGE-GATED sodium channel 1.7 ANALGESICS LAPPACONITINE TETRACAINE BUPIVACAINE
大豆苷元对大鼠心室肌细胞INa的影响 预览
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作者 匡怡 沙毛毛 +5 位作者 马宏昕 任静娜 饶本龙 薛文君 王嘉仪 许正新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期71-77,共7页
目的观察大豆苷元对大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响,探讨其抗心律失常的机制。方法MTT比色法检测大豆苷元对心室肌细胞活力的影响;单酶解法分离大鼠单个心室肌细胞;全细胞膜片钳技术观察、记录、分析大豆苷元给药前后大鼠心室肌细... 目的观察大豆苷元对大鼠心室肌细胞钠通道电流(INa)的影响,探讨其抗心律失常的机制。方法MTT比色法检测大豆苷元对心室肌细胞活力的影响;单酶解法分离大鼠单个心室肌细胞;全细胞膜片钳技术观察、记录、分析大豆苷元给药前后大鼠心室肌细胞INa及其动力学特征的变化。结果MTT实验表明,大豆苷元的IC 50 30~100μmol·L^-1,由此选定用于后续实验的药物浓度为0.3~10μmol·L^-1。膜片钳实验结果表明,当给予终浓度为0.3、1、3、10μmol·L^-1大豆苷元后,药物对I Na呈浓度依赖性抑制现象;大豆苷元0.3μmol·L^-1时对INa作用的时间过程也具有一定影响,随时间推移缓慢减小;1、3、10μmol·L^-1大豆苷元使I-U曲线上移;在此同等条件下,激活曲线向去极化方向移动、稳态失活曲线向超极化方向移动和失活后恢复曲线的τ值延长。结论大豆苷元对大鼠心室肌Na+通道有明显的抑制作用,这可能是其抗心律失常的机制之一。 展开更多
关键词 乳鼠 大豆苷元 全细胞膜片钳技术 钠离子通道 心室肌细胞 心律失常
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骨髓间充质干细胞条件培养基对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制 预览
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作者 周祉妤 昌建鈞 +2 位作者 候亚鹏 丁炎 聂宏光 《山东医药》 2018年第20期5-8,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培... 目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高。当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM。将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组。对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养。培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率。将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENa C)相对表达量。结果无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P〈0.05或〈0.01)。对照组α-ENa C相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P〈0.05。结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可能与促进肺泡Ⅱ型细胞α-ENa C表达有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 肺泡Ⅱ型细胞 骨髓间充质干细胞条件培养基 钠通道 钠通道蛋白α 小鼠
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17-甲氧基-7-羟基-苯骈呋喃查耳酮对小鼠心室肌细胞膜钠电流的影响
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作者 李映新 黄媛恒 +2 位作者 林兴 黄晓亮 黄仁彬 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1185-1188,共4页
目的观察17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查耳酮(YLSC)对小鼠心室肌细胞膜上钠电流的影响。方法采用Langendorff逆行主动脉灌流法急性分离昆明小鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞膜钠电流(INa)在灌流YLSC前后的变化情况。结... 目的观察17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查耳酮(YLSC)对小鼠心室肌细胞膜上钠电流的影响。方法采用Langendorff逆行主动脉灌流法急性分离昆明小鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞膜钠电流(INa)在灌流YLSC前后的变化情况。结果 YLSC灌流可使INa的电流幅值减小,I-V曲线上移,但I-V曲线形状、最大激活电位和反转电位基本不变。INa的电流密度在膜电位-40 m V达到最大峰值,给药前的峰电流密度值为(-22.31±2.20)p A/p F,400μmol·L^-1 YLSC灌流给药后为(^-10.64±0.97)p A/p F,与给药前比较有显著差异(n=5,P〈0.05),对钠电流的抑制率为(48.9±3.6)%;400μmol·L^-1 YLSC给药前后的半数激活电压分别为(-49.51±1.22)m V和(-48.13±2.34)m V,斜率因子分别为2.43±0.36和3.39±0.64,给药前后无显著差异(n=5)。YLSC使失活曲线左移,给药前后半数失活电压分别为(-73.29±1.09)m V和(-76.79±1.62)m V,斜率因子分别为^-12.13±2.15和^-11.45±1.91,给药前后有显著差异(n=5,P〈0.05)。结论 YLSC能通过降低钠通道失活电压,促进钠通道失活而抑制钠通道电流。 展开更多
关键词 玉郎伞查耳酮 心肌细胞 钠通道 全细胞膜片钳技术
粘虫对高效氯氰菊酯抗性机制的初步研究
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作者 赵玉玉 李伯辽 +2 位作者 李梅梅 仵均祥 李怡萍 《应用昆虫学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期857-864,共8页
【目的】通过粘虫高效氯氰菊酯抗性、敏感品系生化及分子机制研究,明确与抗药性产生相关的具体机制。【方法】采用室内生物测定、生化分析和分子技术,研究粘虫抗、感品系增效剂的增效作用、解毒酶活性变化及钠离子通道序列变化。【结果... 【目的】通过粘虫高效氯氰菊酯抗性、敏感品系生化及分子机制研究,明确与抗药性产生相关的具体机制。【方法】采用室内生物测定、生化分析和分子技术,研究粘虫抗、感品系增效剂的增效作用、解毒酶活性变化及钠离子通道序列变化。【结果】增效剂胡椒基丁醚(PBO)和磷酸三苯酯(TPP)对高效氯氰菊酯的增效作用明显,抗敏增效比分别为5.50和3.40。粘虫高效氯氰菊酯抗性品系酯酶(EST)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和多功能氧化酶(MFOs)活性均高于敏感品系,其比活力分别为2.45、1.73和1.70,其中抗、感品系的酯酶和多功能氧化酶比活力差异都达到了显著水平(P<0.05)。通过比较粘虫抗性和敏感品系钠离子通道基因ⅡS4-S6片段,未发现与击倒抗性有关的突变。【结论】酯酶和多功能氧化酶可能在粘虫对高效氯氰菊酯的抗性发展中起着重要的作用。 展开更多
关键词 粘虫 高效氯氰菊酯 抗性机制 解毒酶 钠离子通道
德国小蠊菊酯抗性与钠离子通道机制研究进展
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作者 龙再浩 谭曜 俞雪钧 《中国国境卫生检疫杂志》 CAS 2018年第4期299-302,共4页
菊酯杀虫剂长期使用会导致昆虫产生抗性,严重影响德国小蠊等有害昆虫的治理。德国小蠊产生菊酯击倒抗性(kdr)与钠离子通道发生kdr突变有关。本文介绍了德国小蠊钠离子通道的跨膜分子结构、功能和基因表达调节方式,同时讨论了钠离子通... 菊酯杀虫剂长期使用会导致昆虫产生抗性,严重影响德国小蠊等有害昆虫的治理。德国小蠊产生菊酯击倒抗性(kdr)与钠离子通道发生kdr突变有关。本文介绍了德国小蠊钠离子通道的跨膜分子结构、功能和基因表达调节方式,同时讨论了钠离子通道kdr突变导致德国小蠊产生菊酯抗性的机制。理解钠离子通道kdr突变机制,不仅为德国小蠊种群抗性监控提供有效分子靶标,还可为新型杀虫剂研制提供思路。 展开更多
关键词 德国小蠊 抗性 钠离子通道
Na+通道基因SCN2A变异致新生儿抽搐一例及文献复习 预览
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作者 李荣业 王柱 +4 位作者 杜岚岚 杨洋 张巍 唐雯 杨杰 《发育医学电子杂志》 2018年第1期50-53,共4页
目的探讨Na~+通道基因SCN2A变异致新生儿抽搐的临床特征及基因检测结果,为临床提供参考。方法 2016年5月,广东省妇幼保健院收治1例SCN2A基因变异致新生儿抽搐的女性患儿,采用高通量测序检测方法对患儿及父母进行基因检测。回顾性分析... 目的探讨Na~+通道基因SCN2A变异致新生儿抽搐的临床特征及基因检测结果,为临床提供参考。方法 2016年5月,广东省妇幼保健院收治1例SCN2A基因变异致新生儿抽搐的女性患儿,采用高通量测序检测方法对患儿及父母进行基因检测。回顾性分析其临床特征、辅助检查结果、基因检测结果,并对相关文献进行复习。结果患儿生后第13天无明显诱因出现短暂舞蹈样抽搐,可自行缓解,1天发作达数十次。电解质提示血钠轻度下降,脑电图提示爆发-抑制改变。先后采用苯巴比妥、左乙拉西坦、丙戊酸钠治疗无明显效果。基因检测结果提示患儿SCN2A基因发生错义变异c.1261T〉G(p.Leu421Val),患儿父母均不携带此变异。改用奥卡西平口服,同时予以生酮饮食,2周后抽搐逐渐减少至消失,脑电图较前改善。随访至1.5岁,患儿仍伴有严重的生长发育迟缓和智力障碍。结论对于抽搐原因不明确的患儿,应尽快完善基因检测,根据发病机制精准用药。 展开更多
关键词 SCN2A 新生儿 抽搐 钠通道
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新颖高效手性杀虫剂茚虫威的研究进展
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作者 班华卓 张大永 《农药》 CSCD 北大核心 2018年第12期864-869,共6页
旨在通过作用机制、合成方法及检测方法3个方面,对茚虫威目前的研究进展进行总结与分析。对于合成方法方面则着重于探讨目前最适用的茚虫威合成工艺,并提出对应的意见与展望,同时在β-酮酯的α-不对称羟基氧化反应方面,也针对不同类型... 旨在通过作用机制、合成方法及检测方法3个方面,对茚虫威目前的研究进展进行总结与分析。对于合成方法方面则着重于探讨目前最适用的茚虫威合成工艺,并提出对应的意见与展望,同时在β-酮酯的α-不对称羟基氧化反应方面,也针对不同类型的催化剂对该类反应的催化效果进行相应的归纳,为手性杀虫剂茚虫威的合成奠定基础,以对未来致力于茚虫威开发的研究人员提供适当的参考。 展开更多
关键词 茚虫威 二嗪类 杀虫剂 钠离子通道 不对称合成 β-酮酯 α-不对称羟基氧化反应 手性
CC chemokine ligand 2 (CCL2)enhances TTX-sensitive sodium channel activity of primary afferent neurons in the complete Freud adjuvant-induced inflammatory pain model
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作者 Ping Luo Jiayun Shao +2 位作者 Yingfu Jiao Weifeng Yu Weifang Rong 《生物化学与生物物理学报:英文版》 SCIE CAS CSCD 2018年第12期1219-1226,共8页
CC chemokine ligand 2 (CCL2)has been implicated in pathological pain,but the mechanism underlying the pronociceptive effect of CCL2 is not fully understood.Voltage-gated sodium (Nav)channels are important determinants... CC chemokine ligand 2 (CCL2)has been implicated in pathological pain,but the mechanism underlying the pronociceptive effect of CCL2 is not fully understood.Voltage-gated sodium (Nav)channels are important determinants of the excitability of sensory neurons.Hence we tested the hypothesis that CCL2 contributes to inflammatory pain via modulating Nay channel activity of primary afferent neurons. Chronic inflammatory pain was induced in rats by intraplantar injection of the complete Freud adjuvant (CFA)to one of the hind paws.Control rats received intraplantar injection of equal volume of saline.A significant increase of CCL2 mRNA and CCL2 receptor (CCR2)protein expression was detected in the ipsilateral dorsal root ganglion (DRG)in CFA-treated rats.lntrapiantar injection of CCL2 protein in the control rats had minimal effect on the paw withdrawal threshold (PWT)in response to mechanical stimulation.However,in CFA-treated rats,intraplantar CCL2 led to an increase in pain responses.Patchclamp recording of acutely dissociated DRG neurons revealed that CCL2 had minimum effect on the excitability of sensory neurons from control rats.However,CCL2 directly depolarized a large proportion of small to medium-sized sensory neurons from CFA-treated rats.In addition,CCL2 was found to enhance whole-cell TTX-sensitive sodium currents without significantly affecting the TTX-resistant sodium currents and the potassium currents.These results are in agreement with previous reports concerning the involvement of CCL2-CCR2 signaling in inflammatory hyperalgesia and further indicate that enhanced TTX-sensitive channel activity may partly underlie the pronociceptive effects of CCL2. 展开更多
关键词 INFLAMMATORY pain CCL2 CCR2 VOLTAGE-GATED sodium channel potassium channe
蜘蛛多肽毒素JZTX-51和JZTX-26的重组表达和纯化
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作者 邵婕 潘娇 +5 位作者 瞿芳 刘子昊 丁易颖 罗莎 张学文 陈金军 《生物工程学报》 CSCD 北大核心 2018年第10期1668-1678,共11页
为建立一种简便、快速且能大量获得富含二硫键的蜘蛛多肽毒素JZTX-26 (35 aa)和JZTX-51 (27 aa)的有效方法,利用PCR的方法克隆成熟肽编码基因并插入至大肠杆菌Escherichia coli表达载体pMAL-p2x中与MBP(麦芽糖结合蛋白)标签融合,... 为建立一种简便、快速且能大量获得富含二硫键的蜘蛛多肽毒素JZTX-26 (35 aa)和JZTX-51 (27 aa)的有效方法,利用PCR的方法克隆成熟肽编码基因并插入至大肠杆菌Escherichia coli表达载体pMAL-p2x中与MBP(麦芽糖结合蛋白)标签融合,构建重组表达质粒pMAL-jz26和pMAL-jz51。在受体菌TB1和BL21(DE3)中对两个重组表达质粒分别进行IPTG诱导表达,通过Amylose亲和层析柱纯化并进行SDS-PAGE分析;采用因子X对融合蛋白进行酶切后通过分子筛以及反相高效液相色谱对两种重组蛋白进行纯化。通过MALDI-TOF-TOF质谱鉴定,表达产物的分子量与预期的多肽理论分子量一致。1L表达培养液中能获得大约5mg纯化的目的蛋白JZTX-26或JZTX-51。结果表明利用该原核表达体系可对蜘蛛毒素基因jztx-26和jztx-51进行融合表达,并对重组蛋白进行亲和层析,为采用基因工程的手段大量获得蜘蛛多肽毒素奠定了基础。 展开更多
关键词 蜘蛛毒素 原核表达 融合蛋白 DRG细胞 钠离子通道
离子通道作为糖尿病神经性疼痛药物靶点的现状研究 被引量:2
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作者 周宇 王晓良 于海波 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期355-361,共7页
糖尿病神经性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)是糖尿病最常见的慢性并发症,严重影响人们的生活质量。研究表明离子通道在DNP的发生中具有非常重要的作用,本综述将对离子通道在糖尿病神经病理性疼痛发生中的作用以及靶向离子通道... 糖尿病神经性疼痛(diabetic neuropathic pain,DNP)是糖尿病最常见的慢性并发症,严重影响人们的生活质量。研究表明离子通道在DNP的发生中具有非常重要的作用,本综述将对离子通道在糖尿病神经病理性疼痛发生中的作用以及靶向离子通道的糖尿病神经性疼痛的治疗进行总结。 展开更多
关键词 糖尿病神经性疼痛 离子通道 钾通道 钠通道 钙通道
中药甘松对感觉神经损伤性盐敏感高血压大鼠心肌钠离子的影响 被引量:1
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作者 江春媛 葛郁芝 +3 位作者 刘燕锋 王云霞 吴志婷 盛珊慧 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2017年第12期2855-2858,共4页
目的 研究感觉神经损伤性盐敏感高血压(简称盐敏感高血压)大鼠心肌细胞钠离子内向电流(INa)以及中药甘松挥发油对其产生的影响。方法 建立感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型,应用膜片钳记录每组大鼠心肌INa电流,并观察甘松挥发... 目的 研究感觉神经损伤性盐敏感高血压(简称盐敏感高血压)大鼠心肌细胞钠离子内向电流(INa)以及中药甘松挥发油对其产生的影响。方法 建立感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型,应用膜片钳记录每组大鼠心肌INa电流,并观察甘松挥发油对INa的影响。结果 模型组第4周以后血压明显升高,10周、24周模型组心肌INa电流密度对比10周正常对照组大鼠,无明显变化(n=6,P〉0.05);34周模型组心肌INa电流密度升高,具有统计学意义。10ppm甘松挥发油干预各组34周大鼠心室肌细胞,可明显抑制INa电流。结论 模型组从4周开始血压升高。34周以内INa电流密度无明显变化,34周后明显增加,而甘松挥发油可明显抑制INa,使I-V曲线上移。 展开更多
关键词 甘松 膜片钳 钠通道 高血压 心肌细胞 辣椒素
Platinum-induced neurotoxicity:A review of possible mechanisms 预览
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作者 Ozkan Kanat Hulya Ertas Burcu Caner 《世界临床肿瘤学杂志》 2017年第4期329-335,共7页
Patients treated with platinum-based chemotherapy frequently experience neurotoxic symptoms,which may lead to premature discontinuation of therapy.Despite discontinuation of platinum drugs,these symptoms can persist ... Patients treated with platinum-based chemotherapy frequently experience neurotoxic symptoms,which may lead to premature discontinuation of therapy.Despite discontinuation of platinum drugs,these symptoms can persist over a long period of time.Cisplatin and oxaliplatin,among all platinum drugs,have significant neurotoxic potential.A distal dose-dependent symmetrical sensory neuropathy is the most common presentation of platinum neurotoxicity.DNA damage-induced apoptosis of dorsal root ganglion(DRG)neurons seems to be the principal cause of neurological symptoms.However,DRG injury alone cannot explain some unique symptoms such as cold-aggravated burning pain affecting distal extremities that is observed with oxaliplatin administration.In this article,we briefly reviewed potential mechanisms for the development of platinum drugs-associated neurological manifestations. 展开更多
关键词 CISPLATIN DORSAL root GANGLION Mechanism OXALIPLATIN NEUROTOXICITY NEUROPATHIC pain Sodium channel
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Dravet综合征SCN1A基因3′端非翻译区变异位点的筛查及其功能分析
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作者 曾涛 肖旋浩 +6 位作者 民福利 陈树达 李泽 潘小平 周进 龙跃生 廖卫平 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期261-265,共5页
目的对SCN1A基因编码区及启动子区突变阴性的Dravet综合征患者3′端非翻译区变异位点进行筛查及功能分析。方法对在SCN1A基因编码区及启动子区未发现突变的28例Dravet综合征患者扩增SCN1A基因3′端非翻译区并进行直接测序分析,对检测... 目的对SCN1A基因编码区及启动子区突变阴性的Dravet综合征患者3′端非翻译区变异位点进行筛查及功能分析。方法对在SCN1A基因编码区及启动子区未发现突变的28例Dravet综合征患者扩增SCN1A基因3′端非翻译区并进行直接测序分析,对检测到的突变通过荧光素酶实验、mRNA稳定性检测及RNA电泳迁移阻滞实验进行功能分析。结果在Dravet综合征患者中发现1个新生的SCN1A 3′端非翻译区变异(c.*20A〉G),功能分析发现这个变异位点增强了NT2细胞质蛋白的结合,降低了荧光素酶报告基因的mRNA的半衰期,从而导致荧光素酶报告基因表达下降30%(t=8.5,P〈0.01)。结论在Dravet综合征患者中发现1个功能变异,这个变异可能会通过增强胞质蛋白的结合、降低mRNA稳定性,导致SCN1A基因表达下调,引起Dravet综合征的发生。 展开更多
关键词 DRAVET综合征 钠通道 SCN1A基因 3’端非翻译区 突变
MassARRAY质谱分析婴儿重症肌阵挛癫痫基因检测与位点突变方法的建立与应用
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作者 王波 马启玲 +3 位作者 陈光福 黄建林 操德智 刘荣添 《深圳中西医结合杂志》 2017年第21期1-5,共5页
目的:Mass ARRAY质谱iPLEX分析技术为平台建立适合中国婴儿重症肌阵挛癫痫(SMEI)人群基因检测的方法。方法:通过文献检索并结合国内外研究进展,确定与中国SMEI人群发病密切相关的靶基因。对目的基因突变进行筛选并确定热点突变。按M... 目的:Mass ARRAY质谱iPLEX分析技术为平台建立适合中国婴儿重症肌阵挛癫痫(SMEI)人群基因检测的方法。方法:通过文献检索并结合国内外研究进展,确定与中国SMEI人群发病密切相关的靶基因。对目的基因突变进行筛选并确定热点突变。按Mass ARRAY突变位点标示方法和引物设计固定格式,引物设计软件在线设计正、反向扩增引物和延伸引物各24条。收集2014年1月至2017年8月深圳市第二人民医院临床3例确诊SMEI患儿外周血样本建立检测方法,与现有聚合酶链式反应(PCR)方法对比。扩大检测25例可疑临床诊断SMEI样本,与直接测序法比较敏感度与特异度。结果:使用本方法检测SMEI细胞系的基因突变,其他结果与SCN1A=NAV1.1试剂盒一致。与直接测序法相比较灵敏度为100%,特异度为96.3%。结论:成功建立Mass ARRAY质谱分析SMEI基因SCN1A突变检测方法,适合中国SMEI人群且具有临床应用前景。 展开更多
关键词 婴儿重症肌阵挛癫痫 突变基因检测 钠通道 MassARRAY
多奈哌齐抑制钠通道和N-甲基-D-天冬氨酸受体通道保护神经元的机制
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作者 郭婷婷 王伟平 王晓良 《中国药学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第24期2166-2171,共6页
目的研究多奈哌齐(donepezil)对谷氨酸诱导的神经元损伤的保护作用与对钠电流和N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体介导电流的影响。方法原代培养出生12h的Wistar乳鼠皮层和海马神经元,分别取8~12d的皮层和海马... 目的研究多奈哌齐(donepezil)对谷氨酸诱导的神经元损伤的保护作用与对钠电流和N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体介导电流的影响。方法原代培养出生12h的Wistar乳鼠皮层和海马神经元,分别取8~12d的皮层和海马神经元,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察多奈哌齐对谷氨酸损伤神经元的保护作用,以选择性Na+通道阻断剂河豚毒素(TTX)和选择性NMDA受体阻断剂地佐环平(MK-801)为阳性药;应用手动膜片钳,观察多奈哌齐对海马和皮层神经元Na+电流以及NMDA受体介导电流的影响。结果多奈哌齐和MK.801对谷氨酸诱导的神经元损伤均具有保护作用,TTX可一定程度上增强MK-801的保护作用;电生理研究发现,1μmol·L^-1多奈哌齐对海马以及皮层神经元Na+电流和NMDA受体介导的电流均有轻微的抑制作用,10μmol.L^-1多奈哌齐对海马以及皮层神经元Na+电流和NMDA受体介导的电流均有明显的抑制作用。结论多奈哌齐对谷氨酸损伤的神经元具有保护作用,其作用机制可能与其抑制Na+通道和NMDA受体通道电流有关。 展开更多
关键词 多奈哌齐 谷氨酸 钠通道 N-甲基-D-天冬氨酸受体 神经保护
神经前体细胞表达发育调控蛋白4与盐敏感性高血压 预览
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作者 孟庆滔 陈晓平 《心血管病学进展》 CAS 2017年第2期239-242,共4页
原发性高血压是一种主要的心血管危险因素,其发病率高,并会导致一系列严重并发症。该病病因复杂,众多遗传和环境因素共同参与发病。与摄盐有关的高血压被称作盐敏感高血压,无关的则称为盐抵抗高血压,二者在基因水平上具有差异。神经前... 原发性高血压是一种主要的心血管危险因素,其发病率高,并会导致一系列严重并发症。该病病因复杂,众多遗传和环境因素共同参与发病。与摄盐有关的高血压被称作盐敏感高血压,无关的则称为盐抵抗高血压,二者在基因水平上具有差异。神经前体细胞表达发育调控蛋白4(NEDD4L)可使上皮细胞钠通道被降解,从而参与血压调节。除去上皮细胞钠通道之外,NEDD4L还与其他肾脏钠通道的调节有关。因而可推知,NEDD4L与盐敏感性高血压密切相关,现对近年来这方面的研究证据进行综述。 展开更多
关键词 盐敏感性高血压 钠通道 神经前体细胞表达发育调控蛋白4
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香叶醇对神经痛模型大鼠的镇痛作用及机制研究 预览
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作者 邢自力 韩琪园 +2 位作者 冯兆贺 许长江 贾韦国 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期535-541,共7页
目的研究香叶醇对神经病理性疼痛的镇痛效用,并初步研究其发挥效用的可能机制。方法制作大鼠保留性神经痛(spared nerve injury,SNI)模型,在行为学水平检测给药前后大鼠机械痛阈的变化;体外急性分离SNI模型大鼠背根神经节细胞(dorsal... 目的研究香叶醇对神经病理性疼痛的镇痛效用,并初步研究其发挥效用的可能机制。方法制作大鼠保留性神经痛(spared nerve injury,SNI)模型,在行为学水平检测给药前后大鼠机械痛阈的变化;体外急性分离SNI模型大鼠背根神经节细胞(dorsal root ganglion,DRG),膜片钳检测Na通道的活性变化;体外采用膜片钳技术分别检测稳定转染h Nav1.7通道和TRPA1通道的HEK293细胞,记录给药前后通道的活性变化。结果香叶醇能够快速发挥对SNI模型大鼠机械痛敏的镇痛效应,对急性分离的SNI模型大鼠DRG细胞Na通道表现明显抑制作用,对HEK293细胞株表达的h Nav1.7通道表现明显抑制作用,对HEK293细胞株表达的h TRPA1通道无抑制作用,高浓度下表现促进AITC激活h TRPA1通道作用。结论香叶醇可能通过抑制DRG细胞的Nav1.7通道起到对SNI大鼠机械痛敏的镇痛作用。 展开更多
关键词 香叶醇 神经性疼痛 保留性神经痛模型 背根神经节 钠通道 膜片钳
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