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龙岩市239株沙门菌毒力基因检测结果分析 预览
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作者 曹春远 陈前进 +3 位作者 陈小东 钟叶平 李美华 陈海滨 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期720-725,731共7页
目的了解龙岩市沙门菌毒力基因携带与变迁情况,为沙门菌病的防制提供理论依据。方法 对1991-2017年间收集的分离自人体与食品样本的239株沙门菌进行复核鉴定,并用PCR方法检测 invA、sopB、sifA、sscA、sseE、spvB、spvC、spvR、pefA 等... 目的了解龙岩市沙门菌毒力基因携带与变迁情况,为沙门菌病的防制提供理论依据。方法 对1991-2017年间收集的分离自人体与食品样本的239株沙门菌进行复核鉴定,并用PCR方法检测 invA、sopB、sifA、sscA、sseE、spvB、spvC、spvR、pefA 等9个沙门菌毒力基因的片段。结果 龙岩市沙门菌以肠炎沙门菌和鼠伤寒沙门菌为主,占62.3%(149/239),属于SPI1的 invA、sopB 毒力基因检出率为100%,属于SPI2的 sseE、sscA、sifA 毒力基因的检出率分别为99.2%、95.0%、85.4%,毒力质粒基因 spvC 检出率71.1%, pefA、spvB、spvR 检出率均为46.4%。并且其携带数量也随着时间的进程而显著增加;肠炎沙门菌质粒毒力基因携带率显著高于鼠伤寒沙门菌。肠炎沙门菌以检出全部9种毒力基因为主,占83.5%(76/91);鼠伤寒沙门菌以 invA、sopB、sseE、sscA、sifA阳性,spvB、spvR、pefA 阴性结果多见,占77.6%(45/58)。人体与食品样本来源的沙门菌所携带毒力基因数量没有差异。结论 龙岩市沙门菌携带毒力基因数量较多,毒力较强,质粒毒力基因随着时间的进程而累积,人源性与食源性沙门菌交叉污染严重,必须加强人、禽、畜沙门菌病的监测与管理。 展开更多
关键词 毒力 基因 沙门菌毒力岛 沙门菌质粒毒力基因 血清型 携带 变迁
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化脓性链球菌耐药与毒力基因研究 预览
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作者 郑黎黎 徐燕 +2 位作者 张卉 安宁 杨平玲 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第6期722-726,共5页
目的调查一组70株化脓性链球菌耐药与毒力基因存在状况,以及菌株间的亲缘关系。方法70株化脓性链球菌分离自日照市中心医院2012—2017年急性扁桃体炎、急性咽炎患者的咽拭子标本。5种抗菌药物敏感性试验为Kirby-Bauer法。采用聚合酶链反... 目的调查一组70株化脓性链球菌耐药与毒力基因存在状况,以及菌株间的亲缘关系。方法70株化脓性链球菌分离自日照市中心医院2012—2017年急性扁桃体炎、急性咽炎患者的咽拭子标本。5种抗菌药物敏感性试验为Kirby-Bauer法。采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析8种耐药基因和3种毒力基因。检测结果作样本聚类分析(UPGMA法)。结果70株化脓性链球菌对青霉素、苯唑西林、万古霉素敏感性均达100.00%,对红霉素耐药率较高(94.29%)。青霉素耐药基因均为阴性,大环内醋类耐药基因检出ermB和mefA基因,其中ermB和mefA阳性66株(94.29%)。可移动遗传元件标志基因intTN916检出率高(94.29%)。3种毒力基因均有较高的检出率:spyA58株(82.86%)、sagj68株(97.14%)、也64株(91.43%)。样本聚类分析可见,70株化脓性链球菌分为A~N共14个分类单元,根据是否携带e/mS基因,可分为I、II二个群,I群9个分类单元均携带ermB基因,II群5个分类单元均不携带ermB基因。结论70株化脓性链球菌携带的大环内酯类耐药基因和ermB和mefA,以及可移动遗传元件标志基因是对红霉素产生耐药的重要原因。spyA、sagA、slo等3种毒力基因是化脓性链球菌常见的毒力基因,推测它们是化脓性链球菌感染导致感染灶局部炎症和坏死的原因。 展开更多
关键词 化脓性链球菌 耐药 红霉素 可移动遗传元件 毒力 样本聚类分析
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白藜芦醇抑制嗜水气单胞菌毒力作用研究 预览
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作者 谭宏亮 陈凯 +3 位作者 习丙文 秦婷 潘良坤 谢骏 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期861-868,共8页
为探索白藜芦醇(Resveratrol,Res)在水产动物细菌病防控中的应用价值,实验以淡水养殖中重要的细菌病原嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)为研究对象,通过设置药物浓度梯度,检测其对嗜水气单胞菌生长、生物膜形成和溶血活性的抑制作用... 为探索白藜芦醇(Resveratrol,Res)在水产动物细菌病防控中的应用价值,实验以淡水养殖中重要的细菌病原嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)为研究对象,通过设置药物浓度梯度,检测其对嗜水气单胞菌生长、生物膜形成和溶血活性的抑制作用,和对毒力及群感调控系统相关基因表达的影响;同时通过人工感染异育银鲫(Carassius auratus gibelio)试验检测其对鱼体保护作用和对鱼体炎症相关因子基因表达的影响。结果显示:白藜芦醇对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)>1024 μg/mL;浓度低于64 μg/mL时,对菌株生长影响不显著;浓度≥32 μg/mL时,对病原菌株生物膜形成和溶血活性具有显著抑制作用(P<0.05),且随剂量增加而增强。荧光定量RT-PCR结果分析发现白藜芦醇能引起嗜水气单胞菌群感调控系统中luxR和luxS基因分别显著上调和下调表达;外膜蛋白基因omp表达显著下降。人工感染试验发现攻毒前两小时腹腔注射25、50和100 mg/kg白藜芦醇处理组的异育银鲫死亡率显著下降,鱼体炎症相关的肿瘤坏死因子(TNF-α)和Ⅱ型干扰素(IFN-γ)的mRNA表达量也显著下降。研究表明药用植物大黄、虎杖等所含白藜芦醇成分能有效抑制嗜水气单胞菌毒力,降低鱼体炎症反应的功效;腹腔注射25—100 mg/kg白藜芦醇对感染病原菌的异育银鲫有一定保护作用。 展开更多
关键词 中草药 白藜芦醇 嗜水气单胞菌 毒力
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A review of Behcet’s disease from the perspectives of both Western and Chinese Medicine
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作者 Zhang Jing Tang Yuping +5 位作者 Liu Pei Zhou Guisheng Kang An Yue Shijun Chen Yanyan Duan Jinao 《中医杂志:英文版》 SCIE CAS CSCD 2019年第1期139-148,共10页
Behcet’s disease is a condition with a complicated and unclear etiology that comprises multi-systemic, chronic, inflammatory vasculitis. Behcet’s disease can affect every tissue and organ in the body,and is characte... Behcet’s disease is a condition with a complicated and unclear etiology that comprises multi-systemic, chronic, inflammatory vasculitis. Behcet’s disease can affect every tissue and organ in the body,and is characterized by recurrent oral and genital ulcers, ocular inflammation, skin lesions, and other manifestations. The incidence of Behcet’s disease has a distinct regional specificity, and is most prevalent along the Silk Road, a route that stretched between the Mediterranean, Middle East and Far East.This article reviews the recent literature to evaluate the prevalence, clinical manifestations, pathogenesis and mechanism, and current treatments of Behcet’s disease. Furthermore, the etiology of Behcet’s disease will be evaluated from the aspect of Traditional Chinese Medicine(TCM) syndrome differentiation. As Behcet’s disease is complex and intractable, its treatment warrants further research.Traditionally, Behcet’s disease is treated with Western Medicine(WM) via medications that act locally and systemically;this WM treatment protocol usually has a good effect, but relapse can occur after reducing the dosage. Thus, it may be ideal to treat Behcet’s disease via a combination of WM and TCM.Recent studies have indicated that such a combination of Chinese and Western treatments has a better effect than either treatment alone. The aim of the present review is to describe the clinical features of Behcet’s disease, and to outline its possible pathogenesis in terms of both TCM and WM. Based on these findings, the present review proposes a Behcet’s disease treatment protocol composed of a combination of Chinese and WM that can effectively improve the occurrence of relapse caused by the reduction of the dosage of Western medication. 展开更多
关键词 Behcet SYNDROME SYNDROME differentiation treatment VIRULENCE RECURRENCE THERAPEUTICS Review
水溶性氟乐灵纳米制剂对向日葵列当的毒力及田间药效 预览
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作者 路伟 李琳 +1 位作者 李世奎 赵娜娜 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期237-240,248共5页
向日葵列当 Orobanche cumana 是一种检疫性恶性寄生杂草。本研究采用透析法制备了一种水溶性氟乐灵纳米制剂(Tf-OR-CC),评价其对向日葵列当的室内毒力和田间药效。种子发芽毒力测定结果表明:在独脚金内酯类似物GR24的诱导下,用5 μg/mL... 向日葵列当 Orobanche cumana 是一种检疫性恶性寄生杂草。本研究采用透析法制备了一种水溶性氟乐灵纳米制剂(Tf-OR-CC),评价其对向日葵列当的室内毒力和田间药效。种子发芽毒力测定结果表明:在独脚金内酯类似物GR24的诱导下,用5 μg/mL Tf-OR-CC处理向日葵列当种子,7 d后表现出良好的抑制发芽活性,列当种子发芽率为28.5%,与对照相比差异显著。消解动态试验表明,Tf-OR-CC消解半衰期比48%氟乐灵乳油延长6.56 d,说明Tf-OR-CC具有一定的缓释作用。田间药效试验结果表明,滴灌施用有效成分含量为75 g/667 m 2Tf-OR-CC 45 d后,向日葵列当寄生率为32.1%,寄生强度为5.3,Tf-OR-CC制剂对向日葵列当的田间防效为36.3%。该方法可为向日葵滴灌施药技术防治向日葵列当提供科学依据。 展开更多
关键词 氟乐灵 向日葵列当 毒力 消解动态 田间药效
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UL46基因移码突变对PRV毒力的影响 预览
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作者 程雪飞 徐晶晶 +6 位作者 武吉强 童武 刘宇婷 朱豪杰 郑浩 童光志 李国新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期17-22,共6页
伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(JS-2012株)在Vero细胞上40℃传代培养120代后,获得了1株弱毒株(JS-2012-F120株)。该毒株UL46基因3'端有29个碱基插入,导致了130个氨基酸突变。为了研究UL46基因移码突变对PRV生物学特... 伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(JS-2012株)在Vero细胞上40℃传代培养120代后,获得了1株弱毒株(JS-2012-F120株)。该毒株UL46基因3'端有29个碱基插入,导致了130个氨基酸突变。为了研究UL46基因移码突变对PRV生物学特性的影响,本研究用JS-2012-F120的ΔUL46基因替换了JS-2012的UL46基因,构建了重组病毒JS-2012-ΔUL46,并对该重组病毒、高温传代毒株(JS-2012-F120)及其亲本强毒株(JS-2012)在细胞上的生长特性和对小鼠的毒力进行了比较分析。结果显示,与亲本毒株(JS-2012)相比,传代毒株(JS-2012-F120)病毒滴度明显提高,对小鼠的毒力明显减弱;重组病毒(JS-2012-ΔUL46)在Vero细胞上的生长趋势没有明显改变,对小鼠的毒力减弱。因此,UL46基因移码突变对PRV在Vero细胞上的复制没有明显影响,但减弱了PRV对小鼠的毒力。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 UL46基因 毒力
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单增李斯特菌srtA基因缺失株的构建及srtA基因对其毒力的影响研究 预览
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作者 张奇文 凌晨 +2 位作者 吴学林 马勋 薄新文 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2019年第4期23-31,共9页
为了研究srtA 基因对单增李斯特菌LM90SB2毒力的影响,本研究利用同源重组技术构建了LM90SB2 srtA 基因缺失株LM90SB2-ΔsrtA,比较分析了亲本株LM90SB2与缺失株LM90SB2-ΔsrtA对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC 4种细胞系的粘附、侵袭、胞... 为了研究srtA 基因对单增李斯特菌LM90SB2毒力的影响,本研究利用同源重组技术构建了LM90SB2 srtA 基因缺失株LM90SB2-ΔsrtA,比较分析了亲本株LM90SB2与缺失株LM90SB2-ΔsrtA对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC 4种细胞系的粘附、侵袭、胞内增值能力及LM90SB2和LM90SB2-ΔsrtA 感染小鼠后,小鼠的LD50及肝脏、脾脏、脑载菌量变化差异。结果显示,本研究成功构建了srtA 基因缺失株;与亲本株LM90SB2比较,缺失株LM90SB2-ΔsrtA 对RAW264.7和SIEC的粘附率、侵袭率及胞内细菌数量均下降,且差异具有显著统计学意义(p <0.05);小鼠 LD50降低了21.38倍,肝脏、脾脏载菌量降低,差异具有显著统计学意义(p <0.05)。本研究结果表明,srtA 基因对单增李斯特菌LM90SB2的毒力具有关键作用,参与粘附、侵袭BMEC,该研究结果为进一步阐明单增李斯特菌毒力因子的致病机制提供理论依据。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 srtA基因 毒力 粘附 侵袭
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不同温度、保湿时间对西兰花主要采后病害发生的影响 预览
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作者 彭光华 赵安娜 +3 位作者 涂贻轩 严守雷 李洁 王清章 《长江蔬菜》 2019年第14期72-76,共5页
为了解西兰花采后病害发生的影响因素,选取温度和湿度2个重要的环境因子,探究在不同温度和保湿时间条件下,病原菌对西兰花的侵染能力。结果表明,在低温5℃和10℃条件下,保湿0~72 h内,西兰花接种致病菌株后均未发病。建议在西兰花贮藏运... 为了解西兰花采后病害发生的影响因素,选取温度和湿度2个重要的环境因子,探究在不同温度和保湿时间条件下,病原菌对西兰花的侵染能力。结果表明,在低温5℃和10℃条件下,保湿0~72 h内,西兰花接种致病菌株后均未发病。建议在西兰花贮藏运输过程中,保持低温,并采取保湿措施,能起到显著的保鲜效果,并抑制病害发生。 展开更多
关键词 西兰花 采后病害 致病力 控制
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蛋白乙酰化酶GNAT调控水稻细菌性条斑病菌的致病力 预览
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作者 马畅 李婷 +5 位作者 刘士尧 牛晓磊 李春霞 陈银华 何朝族 陶均 《海南大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第1期29-33,共5页
赖氨酸乙酰化是生物体内最广泛的翻译后修饰之一,负责乙酰化的乙酰转移酶在真核生物中有5类,但在原核生物中只发现了GNAT(Gcn5-related N-acetyltransferases)一类,其具体作用机制未明.本研究对细菌,特别是病原细菌的GNAT蛋白进行了系... 赖氨酸乙酰化是生物体内最广泛的翻译后修饰之一,负责乙酰化的乙酰转移酶在真核生物中有5类,但在原核生物中只发现了GNAT(Gcn5-related N-acetyltransferases)一类,其具体作用机制未明.本研究对细菌,特别是病原细菌的GNAT蛋白进行了系统的进化分析及结构预测,并就GNAT在致病过程中的作用进行了探讨. GNAT蛋白在进化上相对保守,可分为3个亚类(Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ),一个细菌可能编码1~3个GNAT蛋白,但多数只有1个,不同亚类的GNAT蛋白可能有不同的底物特异性,突变的GNAT可导致水稻细菌性条斑病的致病力降低,说明蛋白乙酰化影响了此病原菌的致病过程,这些发现为进一步研究细菌中GNAT蛋白及乙酰化的功能提供了理论基础. 展开更多
关键词 水稻细菌性条斑病菌 赖氨酸乙酰化 GNAT 致病性
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MarR家族转录因子HpaR和XC0449协同调控野油菜黄单胞菌致病性
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作者 李雅君 李爱宁 +4 位作者 孟繁凡 张宏宇 钱韦 贺伟 邓超颖 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1500-1510,共11页
MarR家族转录因子广泛存在于细菌及古生菌中,并灵活、精细地调控多种毒力、抗胁迫及抗生素相关的生理生化途径。在野油菜黄单胞菌中,MarR家族转录因子HpaR (XC2827)的失活会显著降低细菌对于寄主甘蓝的致病力,同时会导致胞外蛋白酶的过... MarR家族转录因子广泛存在于细菌及古生菌中,并灵活、精细地调控多种毒力、抗胁迫及抗生素相关的生理生化途径。在野油菜黄单胞菌中,MarR家族转录因子HpaR (XC2827)的失活会显著降低细菌对于寄主甘蓝的致病力,同时会导致胞外蛋白酶的过量表达。本研究进一步发现,Xcc 8004基因组一共编码9个MarR家族转录因子。表达并纯化其中的HpaR (XC2827)和XC0449,体外微量热泳动(MST)实验及 Pull-down 实验证明二者可以在体外特异性结合。同时,表型检测发现XC0449突变会导致细菌致病力显著下降。通过体外凝胶迁移阻滞试验(EMSA)、体内qRT-PCR和GUS检测证明,XC0449和HpaR均作为转录激活子协同调控下游致病相关基因XC0705的表达,最终调控细菌毒力及胞外酶合成。 展开更多
关键词 转录调控 MARR 家族转录因子 野油菜黄单胞菌 致病性
棉花黄萎病菌鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白基因VdOAZ的功能分析 预览
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作者 宋雯 王春巧 +2 位作者 俞燕 高峰 黄家风 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2019年第2期101-113,共13页
【目的】明确棉花黄萎病菌中鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白(OAZ)基因(VdOAZ)的功能。【方法】以大丽轮枝菌野生型菌株V592的基因组DNA和cDNA为模板,对VdOAZ基因全长进行克隆并测序。构建针对VdOAZ基因的敲除载体和互补载体,通过农杆菌介导的遗... 【目的】明确棉花黄萎病菌中鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白(OAZ)基因(VdOAZ)的功能。【方法】以大丽轮枝菌野生型菌株V592的基因组DNA和cDNA为模板,对VdOAZ基因全长进行克隆并测序。构建针对VdOAZ基因的敲除载体和互补载体,通过农杆菌介导的遗传转化筛选VdOAZ基因敲除菌株和和互补菌株。以野生型菌株V592为对照,对VdOAZ基因敲除突变体和互补菌株的菌落生长速率、产孢量、微菌核产量及对棉花的致病力进行测定;通过实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应测定致病相关的其他基因在VdOAZ基因敲除突变体中的表达量,及亚精胺诱导条件下,V592菌株中VdOAZ基因及致病相关的其他基因的相对表达量。【结果】从棉花黄萎病菌中克隆到VdOAZ基因的全长为1 006 bp,具有2个开放阅读框(Open reading frame,ORF),ORF2编码的蛋白具有OAZ所特有的ODC-AZ保守结构域。与野生型菌株V592和互补菌株相比,VdOAZ基因敲除突变体的菌落生长速率降低、微菌核产量及产孢量明显减少,对棉花的致病力下降,表明VdOAZ基因与大丽轮枝菌分生孢子和微菌核的产生有关,并参与大丽轮枝菌致病。在VdOAZ基因敲除突变体中,VdPKAC1、VMK1、VdNLP1、VdNLP2和VdSge1基因表达量显著上调;V592菌株经亚精胺诱导培养后,VdOAZ基因的表达量显著上调,而上述5个致病相关基因的表达量均明显下调,表明VdOAZ基因对其表达具有负调控作用。【结论】VdOAZ基因响应多胺水平改变,通过调控VdPKAC1、VMK1、VdNLP1、VdNLP2、VdSge1的表达影响大丽轮枝菌孢子产生、微菌核形成和致病过程。 展开更多
关键词 大丽轮枝菌 鸟氨酸脱羧酶抗酶蛋白基因(OAZ) 产孢 微菌核 致病力
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牛源金黄色葡萄球菌凝固酶分型与致病因子检测 预览
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作者 徐结 侯晓 +1 位作者 张雪婧 蒲万霞 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期196-199,共4页
为了解青海和甘肃地区奶牛养殖场的金黄色葡萄球菌(S.aureus)基因型分布状况,本研究对来自该两个地区的210份奶样进行了S.aureus的分离与鉴定,利用凝固酶基因(Coa)扩增和限制性内切酶AluⅠ酶切方法对所有分离株进行了凝固酶多态性分型... 为了解青海和甘肃地区奶牛养殖场的金黄色葡萄球菌(S.aureus)基因型分布状况,本研究对来自该两个地区的210份奶样进行了S.aureus的分离与鉴定,利用凝固酶基因(Coa)扩增和限制性内切酶AluⅠ酶切方法对所有分离株进行了凝固酶多态性分型。并对不同凝固酶基因型的S.aureus进行了白细胞毒素F (LukF)、白细胞毒素S (LukS)、α溶血素(α-hemolysin)、β溶血素(β-hemolysin)等主要致病因子检测。结果显示,共分离鉴定出35株S.aureus (青海13株,甘肃22株),所有分离株均能够扩增出Coa基因片段,并有5种PCR分型结果(本文简称PCR1~PCR5型),其中PCR 1、4和5型只有1种亚型,而PCR 2型有3种亚型,PCR 3型有2种亚型。PCR3型是青海(6/13)和甘肃地区(8/22)主要流行的基因型。致病因子检测结果显示,所有分离株均携带致病因子LukS和α溶血素;致病因子LukF和β溶血素检出率也很高,分别是30株(85.7%)和31株(88.6%)。β溶血素基因在甘肃地区检出率为95.5%(21/22),青海地区检出率为76.9%(10/13),致病因子LukF在甘肃地区检出率为91.0%(20/22),青海地区检出率为76.9%(10/13),且在各基因型中均有分布,甘肃地区S.aureus致病因子LukF和β溶血素检出率高于青海地区。本研究首次对青海和甘肃地区致奶牛乳房炎S.aureus进行了鉴定分析,为这两个地区奶牛乳房炎的防治提供了参考依据。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎 金黄色葡萄球菌 凝固酶分型 致病因子
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肠炎沙门菌sipC缺失株构建及部分生物学特性分析
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作者 张钰 陈阳 +2 位作者 徐琪 朱国强 陈国宏 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期330-336,共7页
肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis, SE)可长期定植于家禽的肠道与生殖道组织,造成禽蛋的直接污染和垂直传播,难于清除与预防,不仅影响产蛋量,还造成环境污染,危害人类健康。Ⅲ型分泌系统(type secretion system, T3SS)的效应蛋白在肠... 肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis, SE)可长期定植于家禽的肠道与生殖道组织,造成禽蛋的直接污染和垂直传播,难于清除与预防,不仅影响产蛋量,还造成环境污染,危害人类健康。Ⅲ型分泌系统(type secretion system, T3SS)的效应蛋白在肠炎沙门菌与宿主细胞表面黏附时至关重要。为研究肠炎沙门菌T3SS1主要效应蛋白SipC (type secretion system-1 effector SipC, T3SS1-SipC)在感染中的作用,本研究利用λRed同源重组系统构建肠炎沙门菌MY1的sipC基因缺失株MY1ΔsipC,同时将sipC基因克隆至载体质粒pBR322,构建回补株MY1ΔsipC/psipC。比较分析了野生株MY1、缺失株MY1ΔsipC以及回补株MY1ΔsipC/psipC在生长特性、对人(Homo sapiens)结肠细胞(human colorectaladeno carcinoma cell line,Caco-2)、鸭(Anas platyrhynchos)卵泡颗粒细胞(duck granulosa cells, dGCs)的黏附和侵袭能力,以及雏鸭半数致死量的差异。结果显示,缺失sipC基因后,肠炎沙门菌生长特性不变;感染2 h后,对Caco-2黏附和侵袭数量分别下降44.9%和34.5%;对dGCs黏附和侵袭数量分别下降37.9%和30.4%;对雏鸭的致病性显著降低(P<0.05)。本研究初步证实sipC参与肠炎沙门菌的致病力,为进一步探索sipC在肠炎沙门菌黏附宿主的分子机制提供实验材料。 展开更多
关键词 肠炎沙门菌 sipC基因 缺失株 毒力
2017-2018年江西地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行特征 预览
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作者 曾凌 邓琼 +3 位作者 刘洋 张杰 曾婷 曹先伟 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期835-841,共7页
目的了解江西各地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子特征及主要流行克隆型别,探讨流行克隆可能的竞争优势,为后续的机制研究提供资料。方法收集2017年1月-2018年12月江西省11个地市11所三甲医院临床分离的MRSA,同时应用mecA+femB... 目的了解江西各地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子特征及主要流行克隆型别,探讨流行克隆可能的竞争优势,为后续的机制研究提供资料。方法收集2017年1月-2018年12月江西省11个地市11所三甲医院临床分离的MRSA,同时应用mecA+femB双重PCR法鉴定为MRSA菌株后纳入研究,应用spa分型、SCCmec分型、PFGE和MLST进行分子分型,采用PCR方法检测杀白细胞素(PVL)毒力基因。结果spa分型主要为t437(74株,占31.22%)、t030(32株,占13.50%);不同地区的spa型存在很大差异,南昌地区以t030为主,其余地区以t437为主。SCCmecIVa为优势型别(占66.67%),SCCmecⅢ占15.19%;除南昌地区以SCCmecⅢ为主要型别外(占59.38%),其余各地区均以SCCmecIVa为主要优势型别。经PFGE分型和MLST,优势克隆型别为ST239、ST59、ST1和ST338;优势克隆群为CC239、CC59和CC1。共检出32株(13.19%)PVL阳性菌,其中鹰潭地区PVL检出率最高(29.63%,8/27),其次为景德镇地区(26.32%,5/19)。结论ST59-MRSA-IVa-t437为江西地区的主要优势流行克隆型,且各地区之间存在一定程度的克隆播散。ST239-MRSA-Ⅲ-t30为次要优势流行克隆型,主要在南昌地区多见,其他地区散发。江西地区PVL阳性菌株的主要型别为ST59-MRSA-t437-IVa型。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 MRSA 分子特征 克隆群 毒力
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sRNA_EsR240调控迟缓爱德华菌胞内生存及其毒力 预览
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作者 张圆圆 夏养敏 +5 位作者 贾莹婷 朱运霈 王燕 房正邹 高大庆 陆承平 《东南大学学报:医学版》 CAS 2019年第4期563-571,共9页
目的:探讨非编码小RNA(sRNA_EsR240)调控迟缓爱德华菌( Edwardsiella tarda , Et )胞内生存和毒力的作用。方法:根据转录组测序,结合生物信息学方法分析ET13菌sRNA。采用RT - PCR检测在不同应激(低酸、营养缺乏、氧化和高盐)条件下sRNA... 目的:探讨非编码小RNA(sRNA_EsR240)调控迟缓爱德华菌( Edwardsiella tarda , Et )胞内生存和毒力的作用。方法:根据转录组测序,结合生物信息学方法分析ET13菌sRNA。采用RT - PCR检测在不同应激(低酸、营养缺乏、氧化和高盐)条件下sRNA的转录水平,筛选高表达的sRNA;Northern blotting和RACE试验检测EsR240的长度及转录起始和终止位点。采用BLAST软件对EsR240的保守性进行分析;IntaRNA软件预测EsR240靶基因;qRT - PCR检测这些靶基因的表达水平。采用自杀质粒同源重组的方法构建ET13菌的EsR240缺失株和互补株。比较野生株ET13、EsR240缺失株和互补株在胞外不同应激条件下的存活率,及其在巨噬细胞胞内存活能力和对小鼠毒力的差异。结果:根据ET13菌RNA测序的结果,与蛋白库注释基因相比对;比对不上的候选sRNA与sRNA库比对;用软件发现13个具有启动子和ρ-非依赖型终止子新的sRNA,RT - PCR显示其中8个sRNA在各种应激条件下的转录水平不一,EsR128、EsR139和EsR240转录水平均较高。Northern blotting验证了EsR240在 Et 生长期和稳定期均转录,大小是596 bp。RACE试验确定了EsR240的转录起始和终止位点。BLAST软件分析显示,EsR240在 Et 中普遍存在,符合sRNA的特征。 IntaRNA软件预测EsR240靶基因及qRT - PCR结果显示,EsR240调控大部分预测靶基因的表达,这些靶基因注释可能为三磷酸腺苷结合盒(ATP binding cassette,ABC)- F转运体、FtsH蛋白酶的调控子YccA、Na +/H +反向转运体和糖苷水解酶等;在不同条件下,EsR240调控靶基因数目不同。EsR240的缺失明显影响 Et 在胞外不同应激条件下存活率和胞内生存能力,而且影响 Et 对小鼠的毒力。结论: EsR240通过调控靶基因影响 Et 的胞内生存,是一个正调控 Et 对小鼠毒力的sRNA。 展开更多
关键词 迟缓爱德华菌 RNA测序 胞内生存 非编码小RNA 毒力
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产气荚膜梭菌α毒素突变体的表达及免疫保护力评价
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作者 杜吉革 薛麒 +5 位作者 朱真 李启红 印春生 姚文生 康凯 陈小云 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期265-270,280共7页
对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56和130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变,经人工合成获得基因片段Gcpam4。将Gcpam4克隆至... 对已知的产气荚膜梭菌CPA编码基因进行优化设计,同时引入包括第56和130位的天冬氨酸(D)突变为甘氨酸(G),及第275位的酪氨酸(Y)和第336位的天冬氨酸(D)突变为天冬酰胺(N)的4个氨基酸突变,经人工合成获得基因片段Gcpam4。将Gcpam4克隆至原核表达载体pET-30a(+)中进行表达与纯化,获得重组蛋白rCPAm4。利用Western blot方法检测rCPAm4与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清的反应性,并采用小鼠检测纯化蛋白的毒力。随后,将rCPAm4与Montanide ISA 201佐剂以1∶1的比例混合乳化制备疫苗,免疫家兔,按照《中华人民共和国兽药典》(2015年版)规定的方法检测兔血清的中和抗体效价。二免后21d,对家兔通过耳缘静脉注射1个家兔MLD剂量的A型产气荚膜梭菌毒素,以检测rCPAm4对家兔的免疫保护效果。结果表明,rCPAm4主要以包涵体的形式表达,且能与产气荚膜梭菌A型毒素抗血清反应;小鼠安全性试验显示,5.5mg/kg剂量的rCPAm4对小鼠仍无致死性;免疫rCPAm4后,每毫升的一免抗血清可中和10~20个小鼠MLD、二免抗血清可中和30~50个小鼠MLD的A型产气荚膜梭菌毒素;1个家兔MLD的A型产气荚膜梭菌毒素攻毒后,对照组家兔100%死亡,免疫组家兔得到了100%的保护。以上结果表明,rCPAm4具有良好的安全性和免疫原性,从而为A型产气荚膜梭菌基因工程亚单位疫苗的研制提供了重要的试验数据。 展开更多
关键词 A型产气荚膜梭α毒素 突变 重组表达 毒力 抗原性
三种李氏杆菌的Sigma B基因分析及动物致病性试验 预览
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作者 杜秀嫒 曲志强 +3 位作者 王文青 谢军军 苟惠天 薛惠文 《动物医学进展》 北大核心 2019年第3期14-19,共6页
为研究产单核细胞李氏杆菌、伊氏李氏杆菌和韦氏李氏杆菌的致病性差异与Sigma B基因的关系,分别对其Sigma B基因进行克隆、测序。扩增出Sigma B基因780bp,编码260个氨基酸,核酸序列同源性在87.4%~91.2%之间,氨基酸序列的同源性为99.2%,... 为研究产单核细胞李氏杆菌、伊氏李氏杆菌和韦氏李氏杆菌的致病性差异与Sigma B基因的关系,分别对其Sigma B基因进行克隆、测序。扩增出Sigma B基因780bp,编码260个氨基酸,核酸序列同源性在87.4%~91.2%之间,氨基酸序列的同源性为99.2%,碱基两两比对有48~49个碱基突变位点,且各有2个氨基酸发生变化。腹腔感染昆明系小鼠建立人工感染小鼠模型,对其精神状态、食欲及其皮毛的光泽度进行观察,死后小鼠的肝、脾、肺、肾等组织取样制作石蜡切片,在显微镜下进行观察。通过腹腔注射感染的小鼠,表现出典型症状的时间为感染后2d~5d,但7d后基本恢复正常。通过比较,产单核细胞李氏杆菌感染小鼠的肾、肝病变最为严重,伊氏李氏杆菌感染小鼠的肝和肺病变较为严重,韦氏李氏杆菌感染小鼠的脾和肺病变略为严重。3种李氏杆菌在基因和动物试验方面的研究,可以推测基因差异可能与细菌致病性或毒力有一定关系。 展开更多
关键词 李氏杆菌 毒力 序列分析 病理观察
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Screening of High Virulent Isolate of Beauveria spp. against Helicoverpa assulta and Changes in Protective Enzymes Activities of Infected Larvae 预览
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作者 Zhang Guochao Liu Mingke +5 位作者 Zhou Jianyun Chen Dexin Yan Fangfang Xu Chuangtao Jiang Lianqiang Li Maoye 《Plant Diseases and Pests(植物病虫害研究:英文版)》 CAS 2019年第2期15-18,21共5页
Eleven isolates of Beauveria spp., including B. bassiana (Bb062) newly isolated from Helicoverpa assulta, and other seven B. bassiana isolates and three B. brongniartii isolates that were originally isolated from diff... Eleven isolates of Beauveria spp., including B. bassiana (Bb062) newly isolated from Helicoverpa assulta, and other seven B. bassiana isolates and three B. brongniartii isolates that were originally isolated from different geographic origins and various hosts, were tested against the 3rd instar larvae of H. assulta. The protective enzyme activity in the 3rd larvae of H. assulta infected by highly virulent isolate was also assayed. The results showed that the isolate Bb062 had the highest virulence to the 3rd instar larvae among eleven isolates of Beauveria spp., with a corrected mortality reaching 91.07% within 10 d post treatment, and the LT50 was 4.67 d. After inoculated with three concentrations (1.0×10^6, 1.0×10^7 and 1.0×10^8 conidia/mL) of Bb062 conidial suspension, the accumulative mortality of H. assulta larvae increased with the increase of concentration and observation time, and the LC50 was 1.82×10^7 conidia/mL. Activities of superoxide dismutase (SOD), peroxidase (POD) and catalase (CAT) in H. assulta larvae first increased rapidly then dropped sharply within 72 h. Bb062 showed high virulence to H. assulta and could inhibit activities of protective enzymes. Therefore, it will be a promising biocontrol agent against H. assulta. 展开更多
关键词 HELICOVERPA assulta BEAUVERIA spp. VIRULENCE Protective enzymes
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不同新型作用机制杀菌剂对梨树主要病菌毒力及防治流程应用
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作者 毕秋艳 赵建江 +3 位作者 韩秀英 王文桥 路粉 吴杰 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期539-551,共13页
为明确多种新型作用机制杀菌剂与引起梨树褐斑病、黑星病、白粉病等病原菌的有效对靶关系及制定梨树主要病害防治流程,采用菌丝生长速率法、离体叶片法与田间药效方法研究新型杀菌剂对靶标病原菌的毒力、对靶标病害的防效及其田间有效应... 为明确多种新型作用机制杀菌剂与引起梨树褐斑病、黑星病、白粉病等病原菌的有效对靶关系及制定梨树主要病害防治流程,采用菌丝生长速率法、离体叶片法与田间药效方法研究新型杀菌剂对靶标病原菌的毒力、对靶标病害的防效及其田间有效应用,建立替代梨树主要病害传统化学杀菌剂的防治流程技术。结果显示,双胍三辛烷基苯磺酸盐在离体叶片法下对褐斑病的防效大于85%,田间药效验证3次用药后7 d防效大于85%、30 d防效大于80%、90 d防效仍大于60%,兼治轮纹病菌其毒力EC50值均小于1μg·mL-1。双胍三辛烷基苯磺酸盐、辛菌胺醋酸盐、吩嗪α-2羧酸在离体叶片法下对黑星病防效大于90%且毒力EC50值小于1μg·mL-1;田间药效验证1次用药后7 d防效大于80%、30 d防效仍大于75%。噻肟菌酯、硝苯菌酯、丙硫菌唑在离体叶片法下对白粉病的防效大于85%;田间药效验证3次用药后7 d铲除效果大于70%、30 d仍大于60%。丙硫菌唑对黑斑、轮纹病菌毒力EC50值均小于1μg·mL-1;吩嗪α-2羧酸同时对褐斑、黑斑、轮纹病菌毒力EC50值小于1μg·mL-1。针对梨树主要病害发生期,选用新型杀菌剂替代传统杀菌剂制定防治技术流程,其综合防效达到88.94%。不同新型作用机制杀菌剂在防治梨树主要病害上的应用,能够降低抗药性产生,同时达到有效防治的目的。 展开更多
关键词 梨树主要病害 新型机制杀菌剂 毒力 防效 流程应用
鼠伤寒沙门菌中甲基化修饰调控PhoP活性的机制研究 预览
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作者 李建辉 苏杨 +1 位作者 姚玉峰 倪进婧 《上海交通大学学报:医学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期827-833,共7页
目的·探究鼠伤寒沙门菌转录调控因子PhoP的甲基化修饰与其活性的相关性,筛选PhoP的甲基转移酶。方法·Westernblotting检测不同培养条件下鼠伤寒沙门菌中PhoP的甲基化水平变化。通过生物信息学预测候选的甲基转移酶,体内过表... 目的·探究鼠伤寒沙门菌转录调控因子PhoP的甲基化修饰与其活性的相关性,筛选PhoP的甲基转移酶。方法·Westernblotting检测不同培养条件下鼠伤寒沙门菌中PhoP的甲基化水平变化。通过生物信息学预测候选的甲基转移酶,体内过表达预测的甲基转移酶后检测phoP及其下游基因的转录水平变化,找到可能的PhoP甲基转移酶,并体外验证该甲基转移酶能否甲基化PhoP。使用real-time PCR检测高浓度Mg^2+、弱酸性等培养条件下,phoP与其甲基转移酶在转录水平的相对表达变化。结果·随着培养基中Mg^2+浓度升高,PhoP甲基化水平上升;而经过弱酸刺激后,PhoP甲基化水平下降。生物信息学预测并筛选到9个甲基转移酶,其中体内过表达STM14_0023后,phoP及其下游基因的转录水平下降且PhoP蛋白水平也下降,但敲除STM14_0023对上述分子的表达无影响。体外甲基化酶促反应显示STM14_0023能够甲基化PhoP,体内过表达STM14_0023后也可提高PhoP的甲基化水平,且在抑制phoP表达的高浓度Mg2+培养条件下STM14_0023的转录水平升高。结论·STM14_0023是PhoP的甲基转移酶,甲基化修饰抑制PhoP活性。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌 PHOP 甲基化修饰 STM14_0023 毒力
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