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凋亡相关基因pnas-2的表达谱分析 预览 被引量:1
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作者 王海嵘 朱坚轶 +5 位作者 顾春红 钟华 钟济华 韩洁英 陈芳源 欧阳仁荣 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期 282-285,共4页
为了确定凋亡相关基因pnas-2在正常组织及急性白血病患者组织中的表达谱,应用Northernblot检测了pnas-2在心脏、脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、淋巴结、胸腺、白细胞、骨髓和胎肝等组织中的表达,应用实时PCR(real—... 为了确定凋亡相关基因pnas-2在正常组织及急性白血病患者组织中的表达谱,应用Northernblot检测了pnas-2在心脏、脑、胎盘、肺、肝脏、骨骼肌、肾脏、胰腺、脾脏、淋巴结、胸腺、白细胞、骨髓和胎肝等组织中的表达,应用实时PCR(real—timePCR)和Northernblot检测了该基因在急性白血病44份初发、9份未缓解、27份缓解、12份复发样本中的表达,并检测了pnas-2在31例恶性肿瘤患者癌组织及正常组织中的表达。结果表明,pnas-2基因除了在胎盘中表达外,在其他检测的组织中均无表达。pnas-2基因在初发,未CR和复发急性白血病患者中的表达显著高于CR和癌肿患者的癌组织及正常组织中的表达。在7例急性白血病患者的自身前后对照中,pnas-2的表达变化与病程演变有关,即初发时高表达,未CR时无明显改变,但在CR时显著下降,复发时表达又上升。结论:pnas-2的高表达在急性白血病中是特异的,可能是一种癌基因,并很可能参与了白血病的发病。 展开更多
关键词 凋亡相关基因 PNAS-2 急性白血病 癌基因
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凋亡相关基因PNAS-2siRNA质粒表达载体的构建、鉴定及转染后筛选方法的选择 被引量:5
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作者 王海嵘 顾春红 +4 位作者 钟济华 王婷 韩洁英 陈芳源 欧阳仁荣 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期 552-554,共3页
硫化砷作用后急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡相关基因PNAS-2(apoptosis—related protein)表达显著降低。Busch等认为PANS-2基因与细胞增殖有关。我们前期的研究发现硫化砷作用后的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者白血病细胞... 硫化砷作用后急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡相关基因PNAS-2(apoptosis—related protein)表达显著降低。Busch等认为PANS-2基因与细胞增殖有关。我们前期的研究发现硫化砷作用后的急性早幼粒细胞白血病(APL)患者白血病细胞及NB4细胞PNAS-2基因表达特异性下调,且呈时间依赖性而K562和U937细胞则无此较应。为了进一步研究封闭该基因后对细胞凋亡的影响,我们扩增其5’端未知序列,构建了PNAS-2 siRNA质粒表达载体并转染U937细胞,筛选、纯化转染细胞后检测U937细胞凋亡的变化以初步了解PNAS-2的作用。 展开更多
关键词 细胞凋亡相关基因 质粒表达载体 转染细胞 筛选方法 早幼粒细胞白血病细胞系 急性早幼粒细胞白血病 U937细胞凋亡 硫化砷作用 NB4细胞 鉴定
柔红霉素、阿糖胞苷作用于NB4细胞的体外实验研究 被引量:2
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作者 罗忠光 钟璐 +2 位作者 陈芳源 王海嵘 欧阳仁荣 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期 247-249,共3页
目的探讨柔红霉素(DNR)联合阿糖胞苷(Ara-C)和单用DNR对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4与另一急性髓系白血病(M2)细胞株HL-60生长抑制率、凋亡率的比较。方法用MTT法和流式细胞术分别检测NB4与HL-60细胞的生长抑制率和细... 目的探讨柔红霉素(DNR)联合阿糖胞苷(Ara-C)和单用DNR对急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4与另一急性髓系白血病(M2)细胞株HL-60生长抑制率、凋亡率的比较。方法用MTT法和流式细胞术分别检测NB4与HL-60细胞的生长抑制率和细胞凋亡率;采用瑞特染色法观察细胞形态。结果两组药物(DNR单药组和双药组)对NB4细胞的生长抑制率[单药组为(35.73±6.82)%,双药组为(36.75±3.82)%]、凋亡率[单药组为(22.55±3.62)%,双药组为(21.24±5.82)%]差异均无统计学意义(P〉0.05);而对HL-60细胞的抑制率[单药组为(62.31±1.80)%,双药组为(67.17±2.07)%]、凋亡率[单药组为(41.51±0.89)%,双药组为(48.05±0.92)%]的差异均有统计学意义(P值分别〈0.01和〈0.05);形态学检测显示,各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。结论从细胞水平说明,DNR联合Ara—C与单用DNR对APL的疗效差异无统计学意义,且后者的临床不良反应明显轻于前者,因此支持单用DNR的治疗方案。 展开更多
关键词 柔红霉素 阿糖胞苷 白血病 早幼粒细胞 急性 细胞系 白血病
斑马鱼血液肿瘤学的研究进展 预览 被引量:1
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作者 张勇 陈芳源 邓敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期 889-895,共7页
斑马鱼已经成为当今人类遗传学和血液学研究的重要模式生物之一。文章介绍了斑马鱼造血系统的基本生物学特征,并重点阐述了斑马鱼在血液肿瘤学领域的应用和研究概况,显示了斑马鱼在血液肿瘤学的基础和临床研究’方面均有着独特的应用... 斑马鱼已经成为当今人类遗传学和血液学研究的重要模式生物之一。文章介绍了斑马鱼造血系统的基本生物学特征,并重点阐述了斑马鱼在血液肿瘤学领域的应用和研究概况,显示了斑马鱼在血液肿瘤学的基础和临床研究’方面均有着独特的应用前景,文章对此进行了展望。 展开更多
关键词 斑马鱼 血液肿瘤学 动物模型
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抑制凋亡相关基因PNAS-2表达后U937细胞凋亡率的改变 预览 被引量:4
5
作者 王海嵘 顾春红 +4 位作者 钟璐 钟济华 韩洁英 陈芳源 欧阳仁荣 《诊断学理论与实践》 2007年第5期 422-426,共5页
目的:构建并鉴定凋亡相关基因——PNAS-2的短发夹RNA(shRNA)质粒表达载体,将其转染U937细胞,筛选后检测细胞凋亡的变化。方法:shRNA质粒载体pRNATU6.1/NEO经限制性内切酶BamHⅠ及HindⅢ双酶切后,连接带有BamH Ⅰ及HindⅢ黏性... 目的:构建并鉴定凋亡相关基因——PNAS-2的短发夹RNA(shRNA)质粒表达载体,将其转染U937细胞,筛选后检测细胞凋亡的变化。方法:shRNA质粒载体pRNATU6.1/NEO经限制性内切酶BamHⅠ及HindⅢ双酶切后,连接带有BamH Ⅰ及HindⅢ黏性末端的shRNA插入片段,转化感受态细菌,并行测序鉴定。将阳性shRNA质粒载体进行细胞转染,合并使用G418及流式细胞仪(FCM)筛选出GFP阳性细胞,应用半定量PCR鉴定shRNA封闭效果;用AnnexinV—APC/7-AAD标记后,使用FCM及激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:测序鉴定证实,PNAS-2特异的shRNA质粒表达载体构建正确;合并使用G418及FCM分选出GFP阳性细胞后,半定量PCR鉴定示shRNAⅠ、Ⅱ、Ⅲ组对PNAS-2的抑制率分别为78.1%、75.4%及51.4%。FCM显示shRNA对照组的细胞凋亡率为(3.52±1.25)%;而shRNAⅠ组为(9.23±1.88)%(P〈0.01);shRNAⅡ(8.85±1.80)%(P〈O.05);shRNAⅢ组为(7.19+2.09)%(p〉0.05)。激光共聚焦显微镜观察显示,shRNA对照组细胞凋亡率为7.3%;shRNAⅠ组为14.7%;shRNAⅡ为13.8%:shRNAⅢ为10.3%。结论:测序结果表明,本研究成功构建了PNAS-2的shRNA质粒表达载体。半定量PCR显示shRNA抑制PNAS-2表达效果佳;抑制PNAS-2后可促使细胞凋亡,提示该基因是抗细胞凋亡基因。 展开更多
关键词 PNAS-2 细胞凋亡 短发夹RNA
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