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微流控芯片加载低温保护剂过程中卵母细胞的损伤评估
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作者 邵文琪 郭莹莹 +2 位作者 戴建军 张德福 周新丽 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第3期296-304,共9页
卵母细胞的低温保存为辅助生殖技术和胚胎工程技术提供了更大的发展空间,而低温保存需要添加高浓度保护剂,会对细胞造成渗透损伤及毒性损伤.与分步法添加固定浓度的保护剂不同,微流控法能够实现保护剂浓度的连续性变化,关于微流控法连... 卵母细胞的低温保存为辅助生殖技术和胚胎工程技术提供了更大的发展空间,而低温保存需要添加高浓度保护剂,会对细胞造成渗透损伤及毒性损伤.与分步法添加固定浓度的保护剂不同,微流控法能够实现保护剂浓度的连续性变化,关于微流控法连续性添加保护剂时卵母细胞的损伤评估还未见报道.本文首先采用数值模拟的方法,模拟细胞在不同加载时间、不同加载线型(线性、S型、凹型)、不同凹型加载(低凹型、高凹型)中细胞的渗透行为,计算各方案中细胞的传统的损伤评估参数:体积变化极值(ΔV)、积累性渗透损伤值(AOD)及毒性损伤值(J).在此基础上,藉由信息熵理论首次提出了综合损伤评估参数s,并通过猪卵母细胞微流控加载后孤雌激活实验的结果验证评估效果.结果表明,对于不同的加载方案,传统的损伤评估参数结果之间出现分歧,无法得到统一的结论.通过分析囊胚率同综合损伤评估参数s值的关系,发现二者呈负相关关系,且相关系数很高,说明综合损伤评估参数s能够较好地对细胞损伤进行评估,为细胞损伤评估开辟了新思路. 展开更多
关键词 微流控芯片 猪卵母细胞 渗透损伤 毒性损伤 损伤评估
香蕉冻干过程中有效导热系数实验研究 预览
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作者 丁宝森 胥义 +1 位作者 刘道平 郭柏松 《制冷学报》 CSCD 北大核心 2018年第6期115-121,共7页
为实现对冻干工艺的精准热控制,提高冻干产品品质,本文以香蕉为研究对象,利用稳态热流法研究了在真空环境下压强(10、30、50Pa)和干燥温度(-20、-30℃)对香蕉切块整个冻干过程中有效导热系数的影响。借助微cT扫描,观察分析了香... 为实现对冻干工艺的精准热控制,提高冻干产品品质,本文以香蕉为研究对象,利用稳态热流法研究了在真空环境下压强(10、30、50Pa)和干燥温度(-20、-30℃)对香蕉切块整个冻干过程中有效导热系数的影响。借助微cT扫描,观察分析了香蕉内部的升华过程,深入探讨了冻干过程孔隙率和有效导热系数的关系。结果表明:当压强由10Pa增至50Pa,对应的有效导热系数由0.036W/(m·K)增至0.072W/(m·K);升华干燥温度由-30℃增至-20℃,对应的有效导热系数由0.084W/(m·K)降至0.058W/(m·K);微CT在冻干过程(30Pa,-20℃)中,升华界面逐渐向切块中心移动,孔隙率由最初的0.059增至0.252.对应的有效导热系数由0.695W/(m·K)减小至0.123W/(m·K)。 展开更多
关键词 冷冻干燥 有效导热系数 真空度 孔隙率
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微流控芯片用于卵母细胞冷冻保存的实验研究
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作者 周新丽 郭莹莹 +2 位作者 衣星越 戴建军 张德福 《生物化学与生物物理进展》 CSCD 北大核心 2018年第7期763-771,共9页
低温保存对卵母细胞造成渗透损伤、毒性损伤和冰晶损伤,使得细胞冻后质量难以提高.本文首次提出将微流控法添加-去除保护剂分别与三种冷冻载体(OPS、QC及Cryotop)搭配使用,对猪卵母细胞进行冷冻保存,并与传统冷冻法进行比较;然后,首... 低温保存对卵母细胞造成渗透损伤、毒性损伤和冰晶损伤,使得细胞冻后质量难以提高.本文首次提出将微流控法添加-去除保护剂分别与三种冷冻载体(OPS、QC及Cryotop)搭配使用,对猪卵母细胞进行冷冻保存,并与传统冷冻法进行比较;然后,首次选用透明陶瓷和玻璃制作集成一体化芯片,对猪卵母细胞进行冷冻保存,以冷冻保存后的细胞存活率和发育率为判断依据,筛选出较好的方案;最后,对冻后卵母细胞的早期凋亡情况、胞内活性氧水平和线粒体膜电位水平进行分析.结果表明,微流控添加-去除保护剂组卵母细胞冻后存活率以及卵裂率都显著高于传统冷冻组,可以有效降低卵母细胞的早期凋亡率和胞内活性氧水平,减小线粒体损伤,提高细胞的冻后质量.透明陶瓷一体化芯片保存卵母细胞得到的存活率和卵裂率与传统OPS冷冻的保存结果无显著差异.微流控芯片技术为卵母细胞的低温保存提供新的思路,有较好的应用前景. 展开更多
关键词 微流控芯片 卵母细胞 添加-去除方案 微流控一体化芯片
试验设计与数据处理课程的考核方式改革 预览
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作者 宋晓燕 刘宝林 +1 位作者 卢莎 宋丹萍 《科教导刊》 2017年第6期40-41,共2页
试验设计与数据处理已成为工程技术人员和科学工作者必备的基本技能。然而,在这门课程的教学过程中,由于考核方式存在缺陷,导致研究生对本门课的掌握情况不容乐观。本文从考核形式、考核目的、命题内容和深度、考场环境和打分方式几方... 试验设计与数据处理已成为工程技术人员和科学工作者必备的基本技能。然而,在这门课程的教学过程中,由于考核方式存在缺陷,导致研究生对本门课的掌握情况不容乐观。本文从考核形式、考核目的、命题内容和深度、考场环境和打分方式几方面对现有考核方式进行了讨论分析,并提出了一些改革方案。实践证明,本文提出的改革方案具有一定的可行性。 展开更多
关键词 考核改革 课程 试验设计与数据处理 现状 建议
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微流体装置线性去除猪MII期卵母细胞冷冻保护剂的实验研究 预览
5
作者 周新丽 杨云 +4 位作者 戴建军 张德福 邵文琪 衣星越 陶乐仁 《中国生物医学工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期442-448,共7页
低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂,目前常用的分步法去除步骤繁琐,容易丢失细胞,而且会对细胞造成致命的渗透损伤。为减小细胞渗透损伤,设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置,研究微流控线性法去除猪MII期卵母... 低温保存后的卵母细胞在使用前必须要去除冷冻保护剂,目前常用的分步法去除步骤繁琐,容易丢失细胞,而且会对细胞造成致命的渗透损伤。为减小细胞渗透损伤,设计制作适合卵母细胞保护剂去除的微流体装置,研究微流控线性法去除猪MII期卵母细胞低温保护剂时在不同时间(6、8、10 min)下卵母细胞的体积变化,以及对卵母细胞存活率与发育率的影响;并与传统的去除方法(一步法和分步法)进行比较。结果表明,采用微流体装置线性去除冷冻保护剂,8 min为实验中的最优去除时间;线性法能够明显减小细胞的渗透损伤,其最大归一化渗透膨胀体积为1.12±0.07,卵母细胞的存活率、卵裂率及囊胚率分别达到83.6%、72.4%、21.5%,均显著高于一步法和分步法(P〈0.05)。因此,微流控线性去除冷冻保护剂能够显著减小细胞的渗透损伤,为卵母细胞低温保存技术提供新思路。 展开更多
关键词 微流体 混合 卵母细胞 冷冻保护剂 渗透损伤
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低温保护剂添加与去除过程对猪卵母细胞的渗透损伤 预览
6
作者 杨云 周新丽 +4 位作者 戴建军 张德福 衣星越 滕芸 陶乐仁 《制冷学报》 CSCD 北大核心 2017年第3期114-118,共5页
在卵母细胞低温保存过程中,低温保护剂的添加与去除是必不可少的步骤,但此过程会对细胞造成致命的渗透损伤和毒性损伤。为了研究保护剂添加和去除联合过程对猪MII期细胞的损伤程度,本文设计并制作了一个适合卵母细胞低温保护剂连续添加... 在卵母细胞低温保存过程中,低温保护剂的添加与去除是必不可少的步骤,但此过程会对细胞造成致命的渗透损伤和毒性损伤。为了研究保护剂添加和去除联合过程对猪MII期细胞的损伤程度,本文设计并制作了一个适合卵母细胞低温保护剂连续添加与去除的微流体装置,分别采用微流控线性法和传统的分步法加载和去除低温保护剂,分析了两种方法对卵母细胞的体积变化以及存活率与发育潜能的影响。结果表明:微流控线性法加载和去除低温保护剂时,卵母细胞的体积变化明显小于分步法;线性法处理后细胞的存活率、卵裂率、囊胚率分别为95.3%、64.4%、19.4%,都显著高于传统的分步法(79.4%、43.6%、9.7%)(P〈0.05)。因此,微流体装置用于卵母细胞低温保护剂添加与去除是有效的,能够显著减小细胞的渗透损伤,为卵母细胞低温保存技术提供了新思路。 展开更多
关键词 低温保存 低温保护剂 渗透损伤 卵母细胞
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高频率微波信号对微波消融效果影响的仿真研究 预览
7
作者 吴曦 刘宝林 徐彬凯 《中国生物医学工程学报》 CSCD 北大核心 2017年第4期449-455,共7页
生物体的介电常数能反映其对微波频率的响应程度,相同微波频率下,不同生物组织的介电常数存在差异,在不同频率的微波消融过程中,微波对消融对象的材料选择性也存在差异性。参照乳腺癌结构建立肿瘤、脂肪相接的生物模型,对比研究高频率... 生物体的介电常数能反映其对微波频率的响应程度,相同微波频率下,不同生物组织的介电常数存在差异,在不同频率的微波消融过程中,微波对消融对象的材料选择性也存在差异性。参照乳腺癌结构建立肿瘤、脂肪相接的生物模型,对比研究高频率微波(6、12、18 GHz)和传统微波(915、2 450 MHz)的消融特性,讨论高频率微波信号在微波消融领域应用的可行性。模拟结果显示,当消融时间达到600 s时,微波频率为12 GHz对正常组织损伤最少,相比正常组织误杀范围最大的2 450 MHz小61.6%;当肿瘤区域达到100%消融时,微波频率为6 GHz对正常组织损伤最少,相比正常组织误杀范围最大的2 450 MHz小71.4%;当肿瘤边缘温度达到52℃时,微波频率为18 GHz时肿瘤边缘两侧温差最大,6 mm区域内最大温差达111.2℃,相同区域内2 450 MHz温差仅为40.1℃。模拟结果表明,高频率微波对介电常数较高的肿瘤组织材料选择性较强,相对于传统的915和2 450 MHz的微波消融,高频率微波具有对周围正常组织的损伤低、消融范围集中的优点。 展开更多
关键词 高频微波消融 有限元 介电常数
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卵母细胞在微流控装置加载保护剂过程中的渗透行为模拟及损伤评估 被引量:1
8
作者 周新丽 邵文琪 +1 位作者 杨云 周楠峰 《热科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期8-12,共5页
卵母细胞在冷冻保护剂加载过程中受到的渗透损伤和毒性损伤会影响细胞的存活率,针对这一情况,通过软件模拟来了解卵母细胞在不同冷冻保护剂加载情况下的渗透行为,以寻求合适的加载方案使得卵母细胞所受的损伤最小。利用MLAB编程分别模... 卵母细胞在冷冻保护剂加载过程中受到的渗透损伤和毒性损伤会影响细胞的存活率,针对这一情况,通过软件模拟来了解卵母细胞在不同冷冻保护剂加载情况下的渗透行为,以寻求合适的加载方案使得卵母细胞所受的损伤最小。利用MLAB编程分别模拟出卵母细胞在四步法、一般线性法、凸型线性法以及凹型线性法加载冷冻保护剂的方案下的渗透行为;综合积累性渗透损伤AOD、积累性毒性损伤J、归一化体积V/V0三项参数来评估卵母细胞受到的损伤。结果表明,当胞外冷冻保护剂为乙二醇时,采用凹型线性加载法加载冷冻保护剂对卵母细胞造成的损伤最小。 展开更多
关键词 卵母细胞 渗透行为
微流控线性加载低温保护剂减少猪MⅡ期卵母细胞的渗透损伤 被引量:2
9
作者 杨云 周新丽 +4 位作者 戴建军 张德福 邵文琪 衣星越 陶乐仁 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第6期616-623,共8页
在卵母细胞低温保存中,通常需要加载冷冻保护剂来抑制冰晶对细胞的损伤,但高浓度冷冻保护剂的加载会对细胞造成渗透损伤.为了减小细胞的渗透损伤,本文设计并制作了适合卵母细胞冷冻保护剂加载的微流体装置,研究了微流控线性加载30%(v/... 在卵母细胞低温保存中,通常需要加载冷冻保护剂来抑制冰晶对细胞的损伤,但高浓度冷冻保护剂的加载会对细胞造成渗透损伤.为了减小细胞的渗透损伤,本文设计并制作了适合卵母细胞冷冻保护剂加载的微流体装置,研究了微流控线性加载30%(v/v)二甲基亚砜(Me2SO)低温保护剂时细胞内保护剂浓度变化、细胞体积变化,以及对细胞存活率与发育率的影响,并与传统的加载方法(一步法、分步法)做了比较.结果表明:微流控法能够实现卵母细胞冷冻保护剂的连续线性加载,避免了卵母细胞体积的骤变,显著减小了细胞的渗透损伤,提高了细胞的存活率.其中细胞的最小渗透体积减小为0.86V0,细胞的存活率达到92.8%,比一步法高33%,比两步法高16.3%,但与四步法之间无显著性差异.经孤雌激活后体外培养,细胞的卵裂率和囊胚率分别达到75.8%和27.4%,都显著高于一步法和分步法(P〈0.05).因此,微流控线性加载低温保护剂能够显著减小细胞的渗透损伤,为卵母细胞低温保存技术提供新思路. 展开更多
关键词 卵母细胞 微流体 渗透损伤 冷冻保护剂 低温保存
冷冻保护剂添加-去除过程对猪MII期卵母细胞损伤研究 预览
10
作者 杨云 周新丽 +4 位作者 戴建军 张德福 邵文琪 衣星越 陶乐仁 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期106-111,共6页
在卵母细胞的低温保存过程中,冷冻保护剂的添加与去除是一个必不可少的步骤,但高浓度的冷冻保护剂会对细胞造成渗透损伤和毒性损伤。为研究冷冻保护剂添加与去除过程对猪MII期卵母细胞的损伤,本文采用传统的方法(一步法、两步法)来添... 在卵母细胞的低温保存过程中,冷冻保护剂的添加与去除是一个必不可少的步骤,但高浓度的冷冻保护剂会对细胞造成渗透损伤和毒性损伤。为研究冷冻保护剂添加与去除过程对猪MII期卵母细胞的损伤,本文采用传统的方法(一步法、两步法)来添加和去除冷冻保护剂,探究冷冻液、解冻液、稀释液对细胞存活率的影响。实验结果表明:在冷冻保护剂添加-去除过程中,卵母细胞的渗透损伤主要发生在卵母细胞从冷冻液转移至解冻液,以及保护剂去除阶段;解冻液浓度与平衡时间对卵母细胞存活率有很大影响;卵母细胞保护剂的去除与添加过程是相关的,解冻液浓度和平衡时间的选择依赖于细胞在冷冻液中的浓度和平衡时间。此研究结果将为猪MII期卵母细胞的低温保存方案提供参考。 展开更多
关键词 低温保存 冷冻保护剂 渗透损伤 卵母细胞
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降温速率对聚乙烯吡咯烷酮水溶液结晶的影响 预览 被引量:1
11
作者 李维杰 王利红 +1 位作者 刘宝林 周新丽 《制冷技术》 2016年第1期31-34,共4页
聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是一种重要的非渗透性低温保护剂。本文使用低温显微镜,研究了不同浓度(10%、20%和30%)PVP水溶液在不同降温速率(1℃/min、10 ℃/min、50℃/min和100℃/min)的结晶形态以及初始结晶温度。研究结果表明,在较低... 聚乙烯吡咯烷酮(PVP)是一种重要的非渗透性低温保护剂。本文使用低温显微镜,研究了不同浓度(10%、20%和30%)PVP水溶液在不同降温速率(1℃/min、10 ℃/min、50℃/min和100℃/min)的结晶形态以及初始结晶温度。研究结果表明,在较低浓度条件下结晶颗粒较大,容易出现冰沟壑;在较高浓度条件下,冰晶颗粒相对较小,未见明显的冰沟壑产生;此外,初始结晶温度随着降温速率的增加而降低。在适当的高浓度条件下提升降温速率可以有效减少结晶量,有利于低温保存。 展开更多
关键词 聚乙烯吡咯烷酮 结晶 降温速率 低温保存
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用于低温保护剂混合的微流控芯片设计及优化 被引量:1
12
作者 周新丽 衣星越 +1 位作者 周楠峰 杨云 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第3期461-465,共5页
卵母细胞在低温保护剂的加载和去除过程中,会受到渗透损伤和毒性损伤,采用微流控技术可实现保护剂浓度连续变化,减小细胞损伤。本文设计了用于低温保护剂加载及去除的5种不同参数的Y型微流控芯片,测定了在不同入口流速、芯片入口角度、... 卵母细胞在低温保护剂的加载和去除过程中,会受到渗透损伤和毒性损伤,采用微流控技术可实现保护剂浓度连续变化,减小细胞损伤。本文设计了用于低温保护剂加载及去除的5种不同参数的Y型微流控芯片,测定了在不同入口流速、芯片入口角度、通道深宽比及转弯半径下,微通道内保护剂溶液和缓冲溶液的混合程度。实验结果表明:随着溶液入口流速的减小、通道深宽比的增大及转弯半径的减小,溶液在微通道内混合长度减小,混合速度加快,而微通道入口角度对流体混合影响很小。但实际芯片的操作条件及结构参数应根据低温保护剂加载和去除时需要达到的效果以及芯片加工工艺等因素确定。本文研究结果可为其他用于低温保护剂混合的微流控芯片的设计提供参考。 展开更多
关键词 低温保护剂 渗透损伤 微流控芯片 混合效率
新型卵母细胞载体降温速率的实验研究 预览 被引量:1
13
作者 李维杰 王利红 +3 位作者 刘宝林 周新丽 楼伟 吴国荣 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期114-118,共5页
降温速率是决定细胞低温保存效果的关键,而冷冻载体的形式和使用方式对细胞的降温速率有重要影响。本文采用数字示波器、线径80μm的T型热电偶建立高速测温系统,研究了一种新型封闭式卵母细胞冷冻载体以不同的方式从空气插入液氮的降温... 降温速率是决定细胞低温保存效果的关键,而冷冻载体的形式和使用方式对细胞的降温速率有重要影响。本文采用数字示波器、线径80μm的T型热电偶建立高速测温系统,研究了一种新型封闭式卵母细胞冷冻载体以不同的方式从空气插入液氮的降温速率,结果发现载体的降温主要通过对流换热实现;载体横卧时,载体的气孔方向与液氮垂直时降温速率高于气孔与液氮相切时的降温速率;将载体直接插入液氮时的降温速度大于插入后左右摆动的操作方法的降温速率;当采用载体倒置插入时,降温速度高于采用载体正置和横卧的降温速率。当采用载体倒置直接插入时,降温速率最高,可以达到54572±1338 K/min,有利于卵母细胞的玻璃化保存。 展开更多
关键词 冷冻载体 降温速率 液氮 莱顿弗罗斯特效应
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微流体技术在低温保存领域的研究进展
14
作者 周楠峰 杨云 周新丽 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期702-706,共5页
微流体技术可能是解决低温保存过程中所遇到问题的一种有效方法。本文详细综述了微流体技术在细胞膜渗透性、保护剂添加与去除、生物材料玻璃化保存三方面的研究进展,总结了在低温保存领域应用微流体技术仍可能存在的问题,并指出了未来... 微流体技术可能是解决低温保存过程中所遇到问题的一种有效方法。本文详细综述了微流体技术在细胞膜渗透性、保护剂添加与去除、生物材料玻璃化保存三方面的研究进展,总结了在低温保存领域应用微流体技术仍可能存在的问题,并指出了未来的研究方向。 展开更多
关键词 低温保存 微流体 低温保护剂
减压冷藏系统的真空配置方法 预览
15
作者 汪洋 刘宝林 《轻工机械》 CAS 2015年第5期51-54,共4页
针对目前实验研究中出现对真空预冷和减压冷藏2种技术的混淆,文中从真空预冷和减压贮藏的基本原理和运行时系统负荷差异产生的根本原因上对2种技术予以区分。结合不同类型真空泵的使用特点和不足,对减压冷藏系统的真空部分进行了详细的... 针对目前实验研究中出现对真空预冷和减压冷藏2种技术的混淆,文中从真空预冷和减压贮藏的基本原理和运行时系统负荷差异产生的根本原因上对2种技术予以区分。结合不同类型真空泵的使用特点和不足,对减压冷藏系统的真空部分进行了详细的设计校核。本文提供的设计和校核方法可为减压冷藏装置真空系统的选型设计提供参考。 展开更多
关键词 冷藏 减压冷藏 真空系统 真空泵
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卵母细胞冷冻保存技术新进展 被引量:3
16
作者 杨云 周新丽 +1 位作者 周楠峰 陶乐仁 《生殖与避孕》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期179-184,195共7页
卵母细胞的冷冻保存已经成为女性生殖力保存的一个重要方式,在人类辅助生殖领域中起着关键的作用。近几年,卵母细胞冷冻保存技术的研究有了很大的突破,在诸多方面都提出了一些新技术与新方法,主要包括冷冻方法、保护剂种类、保护剂... 卵母细胞的冷冻保存已经成为女性生殖力保存的一个重要方式,在人类辅助生殖领域中起着关键的作用。近几年,卵母细胞冷冻保存技术的研究有了很大的突破,在诸多方面都提出了一些新技术与新方法,主要包括冷冻方法、保护剂种类、保护剂添加与去除的方式以及卵母细胞质量的评价等,其中微流体装置不仅用于保护剂的连续添加和去除,还能用于细胞的玻璃化冷冻保存,同时细胞质量评价技术的优劣直接会影响胎儿的发育,甚至成人的健康。因此,微流体技术与科学的质量评价方法可能是未来卵母细胞冷冻保存研究的重要方向。 展开更多
关键词 卵母细胞 冷冻保存 低温保护剂 冷冻载体
用于卵母细胞保护剂添加过程的微混合器优化模拟 预览 被引量:1
17
作者 杨云 周新丽 +2 位作者 周楠峰 邵文琪 陶乐仁 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第3期460-466,共7页
为了减小卵母细胞低温保存的渗透损伤与毒性损伤,微流体装置被应用于低温保护剂的连续添加和去除。针对卵母细胞保护剂添加过程,建立了基于S形混合通道的微混合器模型,研究了通道的几何参数与操作参数对流体混合过程的影响,并对其进行... 为了减小卵母细胞低温保存的渗透损伤与毒性损伤,微流体装置被应用于低温保护剂的连续添加和去除。针对卵母细胞保护剂添加过程,建立了基于S形混合通道的微混合器模型,研究了通道的几何参数与操作参数对流体混合过程的影响,并对其进行了理论优化。结果表明:混合通道的高度增加,或宽度减小都会增加流体的混合性能;当Re数的范围在0.04~11.2,流体处于层流状态,混合仅靠分子扩散实现,随着Re数的增大,分子扩散的时间减少,两股流体的混合长度增加,混合效果变差;弯道产生的二次流对流体的扩散混合起着重要作用,明显提高了流体的混合效率,同时弯道并不会增大流体流动的局部阻力。这些结论可为微混合器的优化设计及后期卵母细胞低温保存试验提供参考。 展开更多
关键词 卵母细胞 低温保存 微混合器
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纳米低温保护剂提高卵母细胞玻璃化保存效果的机理初探 预览 被引量:2
18
作者 李维杰 周新丽 +1 位作者 吕福扣 刘宝林 《制冷学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期114-118,共5页
纳米颗粒添加到低温保护剂中可能是未来低温保存的重要手段。采用添加了羟基磷灰石(HA)纳米颗粒的低温保护剂冷冻卵母细胞,使用低温显微镜观察了结晶、再结晶和融化时冰晶的形态和细胞的变化,同时记录各现象发生的温度。发现添加0... 纳米颗粒添加到低温保护剂中可能是未来低温保存的重要手段。采用添加了羟基磷灰石(HA)纳米颗粒的低温保护剂冷冻卵母细胞,使用低温显微镜观察了结晶、再结晶和融化时冰晶的形态和细胞的变化,同时记录各现象发生的温度。发现添加0.05%HA组在升温过程中再结晶不明显,且再结晶危险区较小,对细胞无损伤;而未添加HA组细胞在复温过程中受伤几率很高。结果表明纳米颗粒减少了复温过程中的再结晶可能是纳米低温保护剂提高细胞存活率的主要机理之一。 展开更多
关键词 低温生物 重结晶 低温显微镜 纳米低温保护剂
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纳米颗粒对猪GV期卵母细胞低温保存效果的影响 预览 被引量:2
19
作者 李维杰 周新丽 +4 位作者 刘宝林 戴建军 吕福扣 张德福 徐利 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期601-605,共5页
纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少.本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵... 纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的重要发展方向,但纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道较少.本研究将羟基磷灰石(HA)、二氧化硅、三氧化二铝、二氧化钛等4种纳米颗粒添加到低温保护剂中,使用Cryotop法冷冻猪GV期卵母细胞,使用形态观察和荧光染色的方法,研究其对细胞存活率和发育率的影响.结果显示在实验浓度范围内,HA较其它纳米颗粒对猪卵母细胞的毒性低,当浓度低于0.5%时,细胞发育率为100%;低温保护剂中添加0.1%HA纳米颗粒,发育率比其它组显著提高,可以达到22%,且HA的粒径对结果影响不大;当低温保护剂中添加0.05%粒径为60 nm的HA颗粒时,卵母细胞冷冻复温后发育率会进一步从14.7%提高达到30.4%.在低温保护剂中添加适宜浓度的HA纳米颗粒,可以减少复温过程中的重结晶现象,促进细胞的冷冻存活率和发育率,保存效果与浓度相关,而与纳米颗粒的粒径关系不大. 展开更多
关键词 纳米微粒 卵母细胞 低温保存 发育率
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羟基磷灰石纳米颗粒对猪MⅡ期卵母细胞玻璃化保存的影响及其机理初探 被引量:1
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作者 李维杰 周新丽 +4 位作者 戴建军 张德福 刘宝林 王海松 徐利 《生物医学工程学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期789-793,共5页
纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的发展方向,但未见将纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道。本文将不同粒径的羟基磷灰石纳米颗粒添加到冷冻保护剂中,使用Cryotop法对第二次减数分裂中期(MⅡ期)的猪卵母细胞进行玻璃... 纳米低温保存技术很可能是新一代低温保存技术的发展方向,但未见将纳米颗粒应用于卵母细胞玻璃化保存的报道。本文将不同粒径的羟基磷灰石纳米颗粒添加到冷冻保护剂中,使用Cryotop法对第二次减数分裂中期(MⅡ期)的猪卵母细胞进行玻璃化保存,结果表明纳米颗粒的添加提高了猪MⅡ期的卵母细胞的低温保存存活率,但纳米颗粒的粒径影响不显著。采用超快速测温装置测量低温保护剂的降温速率,并采用差示扫描量热仪(DSC)测量冷冻保护剂的熔融焓,发现纳米颗粒的添加并不能加速溶液的降温速率,而是降低了冷冻过程及复温过程中反玻璃化产生的冰晶量,由于冰晶量减少,从而可能降低了细胞内外冰晶对细胞的机械损伤。 展开更多
关键词 纳米微粒 卵母细胞 低温保存 降温速率 差示扫描量热仪
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