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农产品中真菌毒素样品前处理和检测方法研究进展 被引量:1
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作者 王晓 王秀嫔 +3 位作者 李培武 张奇 马飞 张文 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期325-332,共8页
真菌毒素是由真菌产生广泛存在于农产品中的有毒次生代谢产物。真菌毒素污染日益加重,世界各国真菌毒素限量要求逐年降低,迫切需要更加灵敏、更加准确的真菌毒素确证性检测技术。系统综述了农产品中真菌毒素样品前处理方法和检测技术,... 真菌毒素是由真菌产生广泛存在于农产品中的有毒次生代谢产物。真菌毒素污染日益加重,世界各国真菌毒素限量要求逐年降低,迫切需要更加灵敏、更加准确的真菌毒素确证性检测技术。系统综述了农产品中真菌毒素样品前处理方法和检测技术,前处理技术包括:液-液萃取技术、固相萃取技术、QuEChERS前处理技术等;检测技术包括:高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、液相色谱-同位素稀释质谱法等。并对真菌毒素样品前处理和检测方法进行了总结和展望。 展开更多
关键词 真菌毒素 农产品 检测方法 前处理技术
磁性氧化石墨烯固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定花生中黄曲霉毒素的含量
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作者 杨代斌 喻理 +3 位作者 马飞 张文 张奇 李培武 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期333-337,共5页
建立了磁固相萃取-高效液相色谱串联质谱(MSPE-HPLC-MS/MS)测定花生黄曲霉毒素的确证性检测方法,利用甲醇-水溶液对样品进行提取,使用磁性固相萃取材料萃取、富集和净化样品初提液中的黄曲霉毒素,高效液相色谱串联质谱定量检测。对影响... 建立了磁固相萃取-高效液相色谱串联质谱(MSPE-HPLC-MS/MS)测定花生黄曲霉毒素的确证性检测方法,利用甲醇-水溶液对样品进行提取,使用磁性固相萃取材料萃取、富集和净化样品初提液中的黄曲霉毒素,高效液相色谱串联质谱定量检测。对影响磁性固相萃取效率的条件进行了优化,主要包括吸附剂用量、萃取溶剂浓度、萃取时间、洗脱剂选择、洗脱周期等。结果表明,黄曲霉毒素在其线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0. 998 2,回收率为91. 0%~120. 2%,相对标准偏差为1. 1%~5. 6%,检出限为0. 01~0. 04μg/kg。该方法样品富集净化操作简单、准确可靠、检出限低,能够满足花生样品黄曲霉毒素的检测。 展开更多
关键词 氧化石墨烯 黄曲霉毒素 磁固相萃取法 液相色谱串联质谱法
Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体方法优化及其应用
3
作者 胡小风 张奇 +1 位作者 张文 李培武 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期338-342,共5页
对Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体的方法进行优化,制备了黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2免疫亲和柱。采用甲醇-水为提取溶剂,用均质机将样品的粉碎和毒素提取一步完成,免疫亲和柱对提取液进行净化、富集,收集洗脱液,在UPLC-MS/MS多反应... 对Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体的方法进行优化,制备了黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2免疫亲和柱。采用甲醇-水为提取溶剂,用均质机将样品的粉碎和毒素提取一步完成,免疫亲和柱对提取液进行净化、富集,收集洗脱液,在UPLC-MS/MS多反应监测(MRM)模式下进行了定性和定量分析。实验结果表明,该偶联方法稳定,亲和柱回收率在94.4%~107.1%之间,相对标准偏差为1.5%~4.9%,重复性、再现性和稳定性良好,柱容量可满足国标检测要求。采用所建立的方法检测花生、玉米和小麦实际样品中的黄曲霉毒素,检出率分别为15%、10%和10%。 展开更多
关键词 Crystarose 4B 黄曲霉毒素 亲和柱 液质联用
黄曲霉毒素饲料基体标准物质研究
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作者 赵天天 张伟 +4 位作者 王秀嫔 李培武 张奇 马飞 张文 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期343-347,共5页
建立了含黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的饲料基体标准样品制备、定值和不确定度评估方法。饲料样品经加标、干燥、辐照灭菌、混匀、分装、密封制备而得。经过均匀性检验、稳定性检验、实验室联合定值以及不确定度评估等过程,最终确定饲料... 建立了含黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的饲料基体标准样品制备、定值和不确定度评估方法。饲料样品经加标、干燥、辐照灭菌、混匀、分装、密封制备而得。经过均匀性检验、稳定性检验、实验室联合定值以及不确定度评估等过程,最终确定饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量值分别为(71. 23±1. 60)、(75. 53±1. 28)、(74. 87±1. 79)、(75. 77±2. 68)μg/kg。结果表明,饲料基体标准物质的均匀性良好,稳定性符合标准物质技术要求,同时分析并评估了该基体标准物质研制过程中引入的不确定度。该样品可用于饲料样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的定性和定量检测。 展开更多
关键词 基体标准物质 黄曲霉毒素 联合定值 不确定度
山区油菜“稀植套种”高产高效机理初探 预览
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作者 赵运成 杨雪 +4 位作者 陈畅 李必钦 李俊 马霓 张春雷 《江苏农业科学》 2019年第12期100-103,共4页
以中油杂12号油菜品种为材料,通过在株间套种芥菜,比较山区油菜稀植净作(T1)和稀植套种(T2)2种不同的种植方式对于群体叶面积指数、冠层透光率、油菜单株干物质量、产量及经济效益的影响。结果表明,稀植套种对于油菜株高、茎粗影响较小... 以中油杂12号油菜品种为材料,通过在株间套种芥菜,比较山区油菜稀植净作(T1)和稀植套种(T2)2种不同的种植方式对于群体叶面积指数、冠层透光率、油菜单株干物质量、产量及经济效益的影响。结果表明,稀植套种对于油菜株高、茎粗影响较小,且对油菜的正常生长发育进程影响也较小,但可以提高群体叶面积指数、降低群体透光率;该种植方式下的油菜收获产量虽低于净作,但综合芥菜的产出,该模式可增收4762.2元/hm2,具有良好的经济效益。 展开更多
关键词 油菜 稀植净作 稀植套种 产量 经济效益
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盛花期油菜绿肥还田对土壤微生物和后茬花生的影响 预览
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作者 韩配配 胡小加 +5 位作者 廖祥生 谢立华 李银水 顾炽明 秦璐 廖星 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期638-642,共5页
为明确油菜作为绿肥对土壤微生物和后茬花生生长的影响,选用种子硫苷含量不同的甘蓝型油菜和芥菜型油菜盛花期地上部作为绿肥,以盆栽方式模拟绿肥归田。结果表明:相比低硫苷甘蓝型油菜,高硫苷的芥菜型油菜不同生育期植株硫苷含量相对较... 为明确油菜作为绿肥对土壤微生物和后茬花生生长的影响,选用种子硫苷含量不同的甘蓝型油菜和芥菜型油菜盛花期地上部作为绿肥,以盆栽方式模拟绿肥归田。结果表明:相比低硫苷甘蓝型油菜,高硫苷的芥菜型油菜不同生育期植株硫苷含量相对较高,花期植株硫苷含量差异显著。模拟还田后30d内,两类油菜植株体内硫苷的降解产物异硫氰酸酯(ITC),均在20d时出现最高峰值。芥菜型油菜硫苷含量高,作为绿肥用其抑制细菌和真菌的能力较强,而低硫苷甘蓝型油菜肥用,对真菌无抑菌能力。芥菜型油菜还田能促进后茬花生生长,花生有效根瘤数和单株干重分别比对照增加11.4%和7.1%,均达到了显著水平。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 芥菜型油菜 花生 土壤 绿肥 微生物 异硫氰酸酯
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油菜稀植栽培的产量形成及投入/产出效益研究 预览
7
作者 赵运成 杨雪 +4 位作者 李必钦 陈畅 李俊 马霓 张春雷 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期40-45,100共7页
为探究山区油菜稀植栽培的推广价值,在湖北省西南部的恩施州设计实验,以甘蓝型油菜品种中油杂12和阳光2009为材料,比较了油菜稀植移栽(D1,1.2万株/hm^2)和常规移栽(D2,12万株/hm^2)、密植直播(D2,37.5万株/hm^2)三种不同种植方式对产量... 为探究山区油菜稀植栽培的推广价值,在湖北省西南部的恩施州设计实验,以甘蓝型油菜品种中油杂12和阳光2009为材料,比较了油菜稀植移栽(D1,1.2万株/hm^2)和常规移栽(D2,12万株/hm^2)、密植直播(D2,37.5万株/hm^2)三种不同种植方式对产量及经济效益的影响。结果表明,D1处理显著提高有效分枝数的数量,提高了株高,增加了茎粗,这些因素构成了产量提高的生物学基础。产量构成因素以单株角果数差异最为显著,D1单株角果数在3 000个以上,而D2为250~285个,D3为130~150个,同时,D1产量分别比D2、D3提高31.27%、26.63%,平均产量在3000 kg/hm^2以上。试验结果还表明,D1所需人工投入较少,分别比D2、D3降低39.5工/hm^2、42.5工/hm^2,从而使经济效益分别增加7543.55元/hm^2、5535.73元/hm^2,可显著提高投入产出比。因此,在湖北省的山区条件下,稀植移栽可降低生产成本,提高经济效益。 展开更多
关键词 油菜 稀植 产量 经济效益
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我国油菜产业发展现状、潜力及对策 预览
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作者 刘成 冯中朝 +5 位作者 肖唐华 马晓敏 周广生 黄凤洪 李加纳 王汉中 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期485-489,共5页
油菜是我国最主要的油料作物,大力发展油菜产业将有助于保障我国油料供给安全。近年来,我国油菜产业的发展虽然取得了一定的成就,但油菜生产的比较效益有所下滑,国外进口油料冲击十分突出,产业发展处于瓶颈期,面临着巨大挑战。基于2018... 油菜是我国最主要的油料作物,大力发展油菜产业将有助于保障我国油料供给安全。近年来,我国油菜产业的发展虽然取得了一定的成就,但油菜生产的比较效益有所下滑,国外进口油料冲击十分突出,产业发展处于瓶颈期,面临着巨大挑战。基于2018年农业农村部油料作物专家组的大量调研数据,通过广泛收集一手资料,结合国内外油菜产业发展形势,对我国油菜产业发展现状、困境以及潜力进行了系统梳理,为促进我国油菜产业发展提出对策建议,以期为保障我国油料产业供给安全、更有效地应对中美贸易摩擦提供智力支持。 展开更多
关键词 油菜产业 发展现状 比较效益 食用油安全 出路
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含多酶切位点融合黄色荧光蛋白的植物通用载体的构建与应用 预览
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作者 匡琛 朱晓义 +2 位作者 张亮 范世航 华玮 《江苏农业科学》 2019年第16期56-62,共7页
以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了... 以植物表达载体pCAMBIA3301为基本骨架,以黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,简称YFP)为标签蛋白构建可融合目标蛋白的表达载体,并包含可用于外源基因插入的单一识别位点的核酸酶酶切位点(SpeⅠ、XbaⅠ、SmaⅠ、Bam HⅠ)。为了验证载体的实用性,将构建完成的载体转化到感受态GV3101农杆菌上,进行菌落PCR鉴定,再分别瞬时转化烟草下表皮和稳定转化拟南芥。激光共聚焦显微镜观察结果显示,在阳性转基因植株上均观察到荧光,在阴性对照上没有观察到荧光,表明YFP标签蛋白在转基因受体细胞中能够正常表达。pCAMBIA3301::YFP载体的成功构建为植物蛋白亚细胞定位及过表达转基因植株等相关领域的研究提供了稳定可靠的通用型载体资源。 展开更多
关键词 多酶切位点 黄色荧光蛋白 通用载体 激光共聚焦 植物基因表征工具
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我国农业科技计划管理改革的实践与思考--中国农业科学院科技创新工程典型案例分析 预览 被引量:1
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作者 苗水清 杨泽宇 熊明民 《农业科技管理》 2019年第1期1-4,14共5页
开展科技计划管理改革是实施创新驱动发展战略的重要举措。文章以中国农业科学院科技创新工程为例,分析了当前我国农业科技计划管理中存在的突出问题,介绍了科技创新工程的实践与探索,提出了改革科技计划立项机制、加强稳定经费支持、... 开展科技计划管理改革是实施创新驱动发展战略的重要举措。文章以中国农业科学院科技创新工程为例,分析了当前我国农业科技计划管理中存在的突出问题,介绍了科技创新工程的实践与探索,提出了改革科技计划立项机制、加强稳定经费支持、简化科技计划管理流程、建立分类绩效考评机制等进一步深化农业科技计划管理改革的建议。 展开更多
关键词 科技计划管理改革 科技创新工程 绩效考核 经费管理
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肉豆蔻精油微胶囊化及其稳定性研究 预览
11
作者 吴邦富 董绪燕 +6 位作者 邓乾春 从仁怀 魏芳 陈洪 吕昕 臧茜茜 黄凤洪 《中国食物与营养》 2019年第2期29-32,共4页
目的:肉豆蔻精油因刺激性气味及易挥发的特点限制了其在食品中的应用,为提高肉豆蔻精油的适用性,利用喷雾干燥技术制备肉豆蔻精油微胶囊。方法:以辛烯基琥珀酸淀粉酯/麦芽糊精(OSA/MD)为复合壁材制备微胶囊,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS... 目的:肉豆蔻精油因刺激性气味及易挥发的特点限制了其在食品中的应用,为提高肉豆蔻精油的适用性,利用喷雾干燥技术制备肉豆蔻精油微胶囊。方法:以辛烯基琥珀酸淀粉酯/麦芽糊精(OSA/MD)为复合壁材制备微胶囊,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法测定了包埋前后肉豆蔻精油的成分组成及相对含量,并对微胶囊稳定性进行考察。结果:制备的肉豆蔻精油微胶囊包埋率和保留率分别达到99.28%和88.15%,且40℃时保持稳定。结论:以辛烯基琥珀酸淀粉酯/麦芽糊精(OSA/MD)为复合壁材,利用喷雾干燥技术制备肉豆蔻精油微胶囊包埋效果好,且稳定性得到明显提高。 展开更多
关键词 肉豆蔻精油 气相色谱-质谱联用 微胶囊 储藏稳定性
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5-羟色胺对油菜幼苗干旱的缓解效应 预览
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作者 田姗姗 李继强 +11 位作者 邹锡玲 张学昆 付桂萍 吕艳 曾柳 闫蕾 刘月 钟燕 杨静 陈建军 马海清 程勇 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期192-198,共7页
为探讨5-羟色胺(5-HT,又名血清素)对油菜耐旱性的调节作用,以甘蓝型油菜品种中双11号为材料,通过水培试验,采用PEG6000(polyethylene glycol)胁迫模拟干旱,分析了干旱条件下施加外源5-羟色胺对油菜幼苗生长、活性氧代谢及渗透调节物质... 为探讨5-羟色胺(5-HT,又名血清素)对油菜耐旱性的调节作用,以甘蓝型油菜品种中双11号为材料,通过水培试验,采用PEG6000(polyethylene glycol)胁迫模拟干旱,分析了干旱条件下施加外源5-羟色胺对油菜幼苗生长、活性氧代谢及渗透调节物质的影响。结果表明,在干旱模拟胁迫下,油菜的生长受到抑制,过氧化氢(H2O2)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脯氨酸(proline,Pro)以及可溶性糖(soluble sugar,SS)的含量明显增加,过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)的活性显著提高。在干旱模拟条件下施加外源5-羟色胺可以缓解干旱对油菜幼苗的不良影响,促进其生长。与单纯干旱模拟条件下的幼苗相比,添加外源5-羟色胺显著地提高了CAT、SOD、APX的活性,减少了过氧化氢和丙二醛的积累,同时渗透调节物质脯氨酸与可溶性糖含量显著增加。以上结果说明,外源5-羟色胺通过增加油菜幼苗的抗氧化酶活性来清除过多的过氧化氢和丙二醛,减轻膜脂过氧化反应,同时提高渗透调节物质含量从而缓解干旱胁迫对油菜幼苗的不利因素,促进油菜幼苗生物量积累,提高油菜幼苗的耐旱能力。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 5-羟色胺 模拟干旱 幼苗
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我国7种典型热带木本油料加工研究现状 预览
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作者 涂行浩 杜丽清 +3 位作者 魏芳 吕昕 黄凤洪 陈洪 《热带农业科学》 2019年第4期114-122,共9页
对我国典型的7种热带油料作物研究现状进行了综述。对7种热带油料作物的种植生产、用途以及加工现状进行了详细分析,包括7种热带木本油料资源概况、脂肪酸组成及脂类伴随物以及主要加工产品等。分析了当前我国热带油料作物研究中存在的... 对我国典型的7种热带油料作物研究现状进行了综述。对7种热带油料作物的种植生产、用途以及加工现状进行了详细分析,包括7种热带木本油料资源概况、脂肪酸组成及脂类伴随物以及主要加工产品等。分析了当前我国热带油料作物研究中存在的一些亟待解决的问题,针对存在的问题,从加工技术改进等方面提出了相应的对策和建议,为解决我国热带木本油料产业存在的关键问题提供研究思路,并为进一步开发利用热带木本油料提供参考依据。 展开更多
关键词 热带木本油料 加工 产业 研究现状
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花生主要品种出仁率和百果重的生态稳定性分析 预览
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作者 郭建斌 贾朝阳 +9 位作者 荆建国 陈四龙 陈伟刚 黄莉 陈玉宁 周小静 罗怀勇 刘念 任小平 姜慧芳 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期186-191,共6页
为了筛选高产稳产广适性的花生品种,连续2年对60份花生品种4个生态区种植的出仁率和百果重进行了考察分析。结果表明,不同品种间出仁率(SP)和百果重(HPW)以及不同年份不同地点间差异均极显著,不同环境中出仁率稳定性高的品种,其百果重... 为了筛选高产稳产广适性的花生品种,连续2年对60份花生品种4个生态区种植的出仁率和百果重进行了考察分析。结果表明,不同品种间出仁率(SP)和百果重(HPW)以及不同年份不同地点间差异均极显著,不同环境中出仁率稳定性高的品种,其百果重相对较小。进一步分析表明,不同环境下花生百果重与出仁率之间均存在极显著负相关关系。通过2年4点共8个环境的重复鉴定,筛选得到出仁率稳定性较强且百果重相对较大的品种5份,分别是中花5号、中花16号、豫花7号、中花10号和皖花8号。结合SSR多样性分析结果,这5份稳定性强且高产的花生品种属于不同的类群,遗传差异相对较大。该结果为花生高产品种的应用提供了材料基础和理论依据。 展开更多
关键词 花生 出仁率 百果重 稳定性
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花生FAD2基因家族表达分析及其对低温胁迫的响应 预览
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作者 薛晓梦 李建国 +6 位作者 白冬梅 晏立英 万丽云 康彦平 淮东欣 雷永 廖伯寿 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1586-1594,共9页
为了探究FAD2在花生低温响应中的作用,本研究从普通油酸花生中花16(ZH16)和高油酸花生中花413(ZH413)中克隆得到花生AhFAD2家族的全部基因,共7个。通过分析这些基因的表达模式发现,在ZH16和ZH413中各FAD2基因表达模式相似,AhFAD2-1A/B... 为了探究FAD2在花生低温响应中的作用,本研究从普通油酸花生中花16(ZH16)和高油酸花生中花413(ZH413)中克隆得到花生AhFAD2家族的全部基因,共7个。通过分析这些基因的表达模式发现,在ZH16和ZH413中各FAD2基因表达模式相似,AhFAD2-1A/B主要在花和发育的种子中表达,AhFAD2-3A/B主要在营养组织中表达,AhFAD2-4A/B主要在根和花中表达,表明AhFAD2基因在花生不同发育阶段和不同组织中发挥各自的生物学功能。在15℃下发芽6d发现,ZH413的发芽率未显著下降,而ZH16的发芽率显著下降。种子萌发过程中,AhFAD2-1A/B和AhFAD2-4A/B均受低温诱导表达。在ZH16中AhFAD2-1A/B在低温诱导第6天开始显著上调表达,而在ZH413中第1天显著上调表达;在ZH16中AhFAD2-4A/B在低温诱导第3天出现显著上调表达,之后表达量下降,但在ZH413中第1天就显著上调表达,且始终维持在高水平表达。基于以上研究结果推测,高油酸花生在受到低温胁迫时,AhFAD2-1A/B编码蛋白失活,但AhFAD2-4A/B的高量表达在一定程度上弥补了这部分功能。同时也说明AhFAD2-1A/B功能的缺失并不是决定花生耐寒性的主要因素。本研究的开展为培育抗寒的高油酸花生品种奠定了理论基础,为高油酸花生在高纬度、高海拔地区推广提供了理论支持。 展开更多
关键词 脂肪酸脱氢酶(FAD2) 基因克隆 低温胁迫 基因表达
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高产核酸的热带假丝酵母诱变选育及其发酵条件优化 预览
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作者 岳秀宏 刘书宇 万霞 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第7期25-30,共6页
以热带假丝酵母(Candida tropicalis)HY4-17为出发菌株,采用电子束辐射技术诱变,经过初筛、复筛及遗传稳定性试验选育核酸高产菌株,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及响应面法优化培养基,并优化接种量和发酵时间以提高核酸产量... 以热带假丝酵母(Candida tropicalis)HY4-17为出发菌株,采用电子束辐射技术诱变,经过初筛、复筛及遗传稳定性试验选育核酸高产菌株,通过Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验及响应面法优化培养基,并优化接种量和发酵时间以提高核酸产量。结果表明,获得一株生长快速,遗传稳定的突变菌株EBI-21,其核酸含量较出发菌株HY4-17提高了25%。最佳培养基组成为:糖蜜185g/L,硫酸铵3g/L,硫酸锌0.05g/L,硫酸镁0.5g/L,硫酸亚铁0.05g/L,磷酸1mL/L,pH值为4.5。在优化培养基及接种量8%,发酵时间12h条件下,核酸产量达到1.73g/L,较未优化前提高了80.21%,培养时间缩短了10h。 展开更多
关键词 热带假丝酵母 核酸 电子束诱变 培养条件优化
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芝麻硬脂酸脱饱和酶基因SiSAD的克隆及功能验证 预览
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作者 周瑢 刘盼 +4 位作者 黎冬华 张艳欣 王林海 张秀荣 魏鑫 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1678-1685,共8页
[目的]对芝麻△9 硬脂酰-ACP 脱饱和酶基因 SiSAD (△9 stearoyl acyl-carrier-protein desaturase)进行克隆与表达分析,并转入拟南芥,探究其在油酸合成过程中的作用,为芝麻油酸含量的遗传改良提供分子基础。[方法]提取中芝 13 叶片的总... [目的]对芝麻△9 硬脂酰-ACP 脱饱和酶基因 SiSAD (△9 stearoyl acyl-carrier-protein desaturase)进行克隆与表达分析,并转入拟南芥,探究其在油酸合成过程中的作用,为芝麻油酸含量的遗传改良提供分子基础。[方法]提取中芝 13 叶片的总 RNA,反转录为 cDNA。根据芝麻基因组数据库中的 SiSAD序列信息(序列号为 SIN_1008977)设计引物,以 cDNA 为模板,通过 RT-PCR 克隆获得 SiSAD编码区序列,并与参考基因组序列进行比较。利用 InterPro 进行保守结构域分析,获得 SiSAD 蛋白的保守结构域。利用 BLAST 对 SiSAD 蛋白进行同源对比,获得 SiSAD 的同源蛋白质。采用邻接法构建系统进化树,获得芝麻 SAD 蛋白与橄榄、牵牛花、蓖麻、莴苣、葡萄、柑橘、拟南芥等植物 SAD 蛋白的亲缘关系。通过荧光定量 PCR 检测 SiSAD在 2 个芝麻品种中芝 33 和中丰芝一号的根、茎、叶、蕾和种子中的相对表达量,分析 SiSAD的表达特异性。将 SiSAD连接过表达载体,通过农杆菌介导法转化野生型拟南芥(Col-0),筛选阳性后代,对 T3 代转基因和野生型的拟南芥种子中硬脂酸和油酸相对含量进行测定,分析 SiSAD的功能。[结果]成功获得 SiSAD的编码区序列,与参考基因组序列一致,全长为 1 152 bp,编码 383 个氨基酸,SiSAD 蛋白的分子量为 43 kD,等电点为 6.18。发现SiSAD 蛋白含有一个保守结构域,属于脂肪酸去饱和酶家族成员,与其他植物的 SAD 蛋白质序列的同源性较高,暗示 SiSAD在不同物种中的功能可能比较保守。系统进化分析显示,芝麻 SAD 蛋白与牵牛花和橄榄的 SAD 蛋白处于同一分支,进化关系较近,与蓖麻、拟南芥、柑橘的 SAD 蛋白亲缘关系较远。荧光定量 PCR 结果表明,SiSAD在芝麻种子中的表达量远远高于其他组织,有显著的组织特异性。成功构建了 SiSAD的过表达载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥,结果表明 SiSAD成功导入拟南芥中,� 展开更多
关键词 芝麻 SiSAD 过表达 油酸 功能验证
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油莎豆高油高产品种中油莎1号 预览
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作者 赵永国 邹锡玲 +3 位作者 张燕 韩忠奎 曾柳 张学昆 《中国种业》 2019年第6期96-97,共2页
油莎豆新品种中油莎1号是中国农业科学院油料作物研究所通过辐射诱变、提纯复壮及南繁加代穿梭育种方法选育的高产高油品种,2017年通过中国作物学会油料作物专业委员会组织的品种认定。
关键词 油莎豆 中油莎1号 高油 高产
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浅析油菜作为绿肥的应用优势 预览 被引量:1
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作者 顾炽明 李银水 +3 位作者 谢立华 胡小加 廖星 秦璐 《中国土壤与肥料》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期180-183,共4页
油菜是可以作为绿肥广泛应用的作物。在总结油菜绿肥土壤培肥性状的基础上,从病虫害生物防治、土壤难溶性磷活化、土壤重金属污染治理3个方面总结归纳了油菜作为绿肥在我国可持续农业发展中的应用优势。
关键词 油菜 绿肥 应用优势
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甘蓝型油菜花序长发夹lhRNAi文库的构建 预览
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作者 曾新华 赵圣博 +3 位作者 李可琪 袁荣 吴刚 闫晓红 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期340-348,共9页
异源四倍体油菜含有大量多拷贝基因及冗余基因,难以通过T-DNA插入、物理及化学诱变等常规突变体库创制方法发掘功能基因。为开发适应于油菜简单高效的突变体库创制方法,本研究通过滚环复制方法构建了甘蓝型油菜的花序lhRNAi文库,并对这... 异源四倍体油菜含有大量多拷贝基因及冗余基因,难以通过T-DNA插入、物理及化学诱变等常规突变体库创制方法发掘功能基因。为开发适应于油菜简单高效的突变体库创制方法,本研究通过滚环复制方法构建了甘蓝型油菜的花序lhRNAi文库,并对这种新型的干扰文库进行质量评估;然后将该花序lhRNAi文库对甘蓝型油菜进行遗传转化,获得763株T0植株,从中鉴定分离出74株具有可见表型变异的花发育相关突变体,包括花瓣减少、形状异常,柱头卷曲,雄蕊退化萎缩,雄性不育、死蕾或花蕾闭合等。说明通过滚环复制介导的lhRNAi文库的构建方法可以成功应用到油菜中,这将为油菜花序发育相关基因的功能研究提供重要的研究平台。 展开更多
关键词 油菜 滚环复制 长发夹RNAi文库 花发育
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