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花生白绢病菌ITS分型、菌丝亲和群分析及相关生物学特性比较 被引量:1
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作者 宋万朵 晏立英 +6 位作者 雷永 万丽云 淮东欣 康彦平 任小平 姜慧芳 廖伯寿 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期305-312,共8页
2013-2016年从全国12个省市采集不同花生白绢病样本,共分离获得39个分离物,对其ITS-r DNA序列进行了分析,表明它们均属于齐整小核菌(Sclerotium rolfsii);这39个分离物分为两个亚组,分别包含22个和17个菌株;对这39个菌株进行了菌丝亲... 2013-2016年从全国12个省市采集不同花生白绢病样本,共分离获得39个分离物,对其ITS-r DNA序列进行了分析,表明它们均属于齐整小核菌(Sclerotium rolfsii);这39个分离物分为两个亚组,分别包含22个和17个菌株;对这39个菌株进行了菌丝亲和群分析及相关生物学特性比较,共鉴定出23个菌丝亲和群;8个亲和群包含2-6个菌株,其余的15个亲和群都只包含1个菌株;同一菌丝亲和群的菌株菌落形态相似,大多数菌株的菌丝生长速度、菌核大小比较相近,个别菌株差异较大;39个菌株均能产生草酸,在菌落形态、菌丝生长速度、菌核大小和重量上均有差异,生长速度为0.47-2.32cm·d^-1,菌核直径为0.71-1.87 mm,单粒菌核干重为0.24-2.64 mg。 展开更多
关键词 花生 白绢病 齐整小核菌 鉴定 生物学特性 菌丝亲和群
花生苗期干旱处理后转录和代谢通路分析 预览
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作者 万丽云 苏威 +7 位作者 李蓓 雷永 晏立英 康彦平 淮东欣 陈玉宁 姜慧芳 廖伯寿 《中国油料作物学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期335-343,共9页
为解析花生耐旱性的调控基础,本研究通过对10个不同的花生材料苗期进行干旱-复水实验,筛选抗感材料进行转录组分析,探讨了干旱条件下不同花生材料抵御干旱胁迫的分子机制。研究结果显示,来源于非洲的花生材料Waliyar Tiga耐旱性最强,其... 为解析花生耐旱性的调控基础,本研究通过对10个不同的花生材料苗期进行干旱-复水实验,筛选抗感材料进行转录组分析,探讨了干旱条件下不同花生材料抵御干旱胁迫的分子机制。研究结果显示,来源于非洲的花生材料Waliyar Tiga耐旱性最强,其次是k Q044抗青、中花16和早花生,干旱敏感的材料为狮头企、山花13、ICGV86745以及丰花2号;耐旱及干旱敏感材料的根冠比存在显著差异,耐旱材料的根冠比平均值为35.0%,干旱敏感材料的根冠比平均值为15.26%。早花生和中花16的根冠比最大。转录组结果表明抗感材料的差异表达基因主要富集在氧化磷酸化、光合作用和植物代谢途径;通过差异基因富集分析发现,耐旱材料在干旱条件下生长素应答途径基因的表达明显弱于敏感材料。生理和转录组的结果表明耐旱材料利用发达的根系系统、能量代谢的提升、次生代谢的加强和生长的抑制四个方面共同应对干旱胁迫。抗旱材料中花16和Waliyar Tiga在干旱条件下均具有较强的光合作用和氧化磷酸化的能力,中花16的根冠比显著大于Waliyar Tiga,但其耐旱性不及Waliyar Tiga,推测可能源于其较大的叶面积导致更多的叶面水分散失,从而使其耐旱能力低于Waliyar Tiga。 展开更多
关键词 花生 耐旱 转录组 根系
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花生白绢病温室接种技术的建立和苗期抗病性鉴定 预览 被引量:5
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作者 晏立英 宋万朵 +7 位作者 张芳 雷永 万丽云 淮东欣 康彦平 任小平 姜慧芳 廖伯寿 《中国油料作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第5期687-692,共6页
为探索温室条件下适宜花生白绢病人工接种的技术体系,对花生白绢病人工接种技术进行了系统的研究。通过比较5种接种技术,发现带菌燕麦粒贴茎法和撒表土法的发病效果较好,可以作为花生白绢病温室抗性鉴定的接种方法,其中带菌燕麦粒撒表... 为探索温室条件下适宜花生白绢病人工接种的技术体系,对花生白绢病人工接种技术进行了系统的研究。通过比较5种接种技术,发现带菌燕麦粒贴茎法和撒表土法的发病效果较好,可以作为花生白绢病温室抗性鉴定的接种方法,其中带菌燕麦粒撒表土法比贴茎法更易操作;不同量(1-5粒)的带菌燕麦粒撒表土法接种花生幼苗的病情指数差异不显著,但以接种4粒燕麦粒病害发展速度最快;15-35d苗龄的花生幼苗接种带菌燕麦粒后,病情指数差异不显著。本研究建立的接种技术白绢病发病快,发病率达到100%,最大病情指数为89.2。利用该技术在温室内对19个花生品种/系进行了苗期白绢病抗病性鉴定,大部分材料中感或高感,仅中花16表现相对抗性。 展开更多
关键词 花生 白绢病 接种技术 抗性鉴定
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拟康宁木霉对花生菌核病的生防机制 预览 被引量:1
4
作者 康彦平 晏立英 +4 位作者 雷永 万丽云 淮东欣 王志慧 廖伯寿 《中国油料作物学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期842-847,共6页
从黑龙江双城大田花生茎秆中采集的核盘菌菌核中分离得到1株拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis),通过平板对峙培养发现该木霉菌对花生核盘菌具有明显的抑制作用,木霉菌菌落可覆盖整个核盘菌菌落,产生大量分生孢子,并抑制核盘菌菌... 从黑龙江双城大田花生茎秆中采集的核盘菌菌核中分离得到1株拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis),通过平板对峙培养发现该木霉菌对花生核盘菌具有明显的抑制作用,木霉菌菌落可覆盖整个核盘菌菌落,产生大量分生孢子,并抑制核盘菌菌核的产生或分解已形成的菌核。显微观察发现该木霉菌丝可沿着核盘菌菌丝生长或侵入、缠绕在核盘菌菌丝上,抑制核盘菌菌丝的生长,最终使核盘菌菌丝消解、断裂。拟康宁木霉菌非挥发性代谢产物能有效抑制核盘菌的生长。因此,拟康宁木霉菌株TM对花生菌核病的主要生防机制是在重寄生过程中产生抗菌类代谢产物协同作用消解花生核盘菌菌丝,抑制菌核形成。 展开更多
关键词 花生 核盘菌 拟康宁木霉 生防机制
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三种杀菌剂在不同生态区对花生叶斑病的防治效果 预览 被引量:2
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作者 晏立英 宋亚辉 +8 位作者 倪皖莉 蒋相国 雷永 康彦平 万丽云 淮东欣 任小平 姜慧芳 廖伯寿 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期644-648,共5页
2015年在河北石家庄鹿泉市3502农场、湖北省襄阳市农科院合肥试验基地和安徽省农业科学院合肥试验基地同时开展了3种新型杀菌剂(70%代森联、55%多菌灵·氟硅唑和20%烯肟菌胺·戊唑醇)与传统杀菌剂50%多菌灵的田间对比试验,以... 2015年在河北石家庄鹿泉市3502农场、湖北省襄阳市农科院合肥试验基地和安徽省农业科学院合肥试验基地同时开展了3种新型杀菌剂(70%代森联、55%多菌灵·氟硅唑和20%烯肟菌胺·戊唑醇)与传统杀菌剂50%多菌灵的田间对比试验,以评价它们对花生叶斑病的防治效果。结果表明,该年份3个试验点花生叶斑病均发生严重;在3个试验点杀菌剂处理小区花生叶斑病的扩展速度均慢于对照小区,病情发展曲线下面积小于该试验点的对照小区。与常规药剂多菌灵相比,喷施55%多菌灵·氟硅唑和20%烯肟菌胺·戊唑醇在石家庄试验点防治效果分别提高21%和1%,荚果和籽仁产量分别提高13%、9%和15%、10%;在襄阳试验点,3种新杀菌剂比多菌灵的防效提高10%~34%,比多菌灵处理的荚果和籽仁产量增加9%~17%和9%~18%;在合肥试验点,3种新杀菌剂比多菌灵防效提高6%~10%,但荚果和籽仁产量不及多菌灵处理。 展开更多
关键词 花生 叶斑病 杀菌剂 田间防治 产量
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山东临沭花生焦斑菌株多菌灵抗药性的研究 预览
6
作者 晏立英 雷永 +2 位作者 万丽云 程柯 廖伯寿 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期520-524,共5页
从山东临沭花生田表现焦斑病症状的花生叶片上分离病原菌,对该地及其他地方采集的焦斑病病原菌进行r DNA-ITS区的核苷酸序列分析,测定多菌灵和其他杀菌剂对焦斑病菌的抑制能力,比较了不同焦斑病菌分离物在PSA培养基上的生长速率。结果表... 从山东临沭花生田表现焦斑病症状的花生叶片上分离病原菌,对该地及其他地方采集的焦斑病病原菌进行r DNA-ITS区的核苷酸序列分析,测定多菌灵和其他杀菌剂对焦斑病菌的抑制能力,比较了不同焦斑病菌分离物在PSA培养基上的生长速率。结果表明,焦斑症状的病原菌为落花生小光壳菌(Leptosphaerulina arachidicola)。12株临沭分离物中3株对多菌灵具有抗药性,抗药性比例达25%。在PSA平板上,33.33~1 666.7mg/L的多菌灵对临沭多菌灵抗性分离物的抑菌率为9.4%~14.2%,3 333.3mg/L的多菌灵对抗性菌的抑菌率为45.2%。多菌灵抗性菌对20%戊唑醇+烯肟菌胺悬浮剂,30%醚菌酯和70%代森联同样具有抗药性,但是对70%丙森锌可湿性粉剂、30%戊唑醇悬浮剂、25%代森锰锌+8%三唑酮可湿性粉剂、丙环唑乳油等敏感。在PSA培养基上培养12d,临沭多菌灵抗性菌的生长速率曲线呈直线,与其他多菌灵敏感菌的生长速率无显著差异。 展开更多
关键词 花生 焦斑菌 多菌灵 抗药性
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黄曲霉毒素饲料基体标准物质研究
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作者 赵天天 张伟 +4 位作者 王秀嫔 李培武 张奇 马飞 张文 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期343-347,共5页
建立了含黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的饲料基体标准样品制备、定值和不确定度评估方法。饲料样品经加标、干燥、辐照灭菌、混匀、分装、密封制备而得。经过均匀性检验、稳定性检验、实验室联合定值以及不确定度评估等过程,最终确定饲料... 建立了含黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的饲料基体标准样品制备、定值和不确定度评估方法。饲料样品经加标、干燥、辐照灭菌、混匀、分装、密封制备而得。经过均匀性检验、稳定性检验、实验室联合定值以及不确定度评估等过程,最终确定饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的量值分别为(71. 23±1. 60)、(75. 53±1. 28)、(74. 87±1. 79)、(75. 77±2. 68)μg/kg。结果表明,饲料基体标准物质的均匀性良好,稳定性符合标准物质技术要求,同时分析并评估了该基体标准物质研制过程中引入的不确定度。该样品可用于饲料样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的定性和定量检测。 展开更多
关键词 基体标准物质 黄曲霉毒素 联合定值 不确定度
农产品中真菌毒素样品前处理和检测方法研究进展 被引量:1
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作者 王晓 王秀嫔 +3 位作者 李培武 张奇 马飞 张文 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期325-332,共8页
真菌毒素是由真菌产生广泛存在于农产品中的有毒次生代谢产物。真菌毒素污染日益加重,世界各国真菌毒素限量要求逐年降低,迫切需要更加灵敏、更加准确的真菌毒素确证性检测技术。系统综述了农产品中真菌毒素样品前处理方法和检测技术,... 真菌毒素是由真菌产生广泛存在于农产品中的有毒次生代谢产物。真菌毒素污染日益加重,世界各国真菌毒素限量要求逐年降低,迫切需要更加灵敏、更加准确的真菌毒素确证性检测技术。系统综述了农产品中真菌毒素样品前处理方法和检测技术,前处理技术包括:液-液萃取技术、固相萃取技术、QuEChERS前处理技术等;检测技术包括:高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、液相色谱-同位素稀释质谱法等。并对真菌毒素样品前处理和检测方法进行了总结和展望。 展开更多
关键词 真菌毒素 农产品 检测方法 前处理技术
Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体方法优化及其应用
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作者 胡小风 张奇 +1 位作者 张文 李培武 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期338-342,共5页
对Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体的方法进行优化,制备了黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2免疫亲和柱。采用甲醇-水为提取溶剂,用均质机将样品的粉碎和毒素提取一步完成,免疫亲和柱对提取液进行净化、富集,收集洗脱液,在UPLC-MS/MS多反应... 对Crystarose 4B偶联黄曲霉毒素单克隆抗体的方法进行优化,制备了黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2免疫亲和柱。采用甲醇-水为提取溶剂,用均质机将样品的粉碎和毒素提取一步完成,免疫亲和柱对提取液进行净化、富集,收集洗脱液,在UPLC-MS/MS多反应监测(MRM)模式下进行了定性和定量分析。实验结果表明,该偶联方法稳定,亲和柱回收率在94.4%~107.1%之间,相对标准偏差为1.5%~4.9%,重复性、再现性和稳定性良好,柱容量可满足国标检测要求。采用所建立的方法检测花生、玉米和小麦实际样品中的黄曲霉毒素,检出率分别为15%、10%和10%。 展开更多
关键词 Crystarose 4B 黄曲霉毒素 亲和柱 液质联用
磁性氧化石墨烯固相萃取-高效液相色谱串联质谱法测定花生中黄曲霉毒素的含量
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作者 杨代斌 喻理 +3 位作者 马飞 张文 张奇 李培武 《化学试剂》 CAS 北大核心 2019年第4期333-337,共5页
建立了磁固相萃取-高效液相色谱串联质谱(MSPE-HPLC-MS/MS)测定花生黄曲霉毒素的确证性检测方法,利用甲醇-水溶液对样品进行提取,使用磁性固相萃取材料萃取、富集和净化样品初提液中的黄曲霉毒素,高效液相色谱串联质谱定量检测。对影响... 建立了磁固相萃取-高效液相色谱串联质谱(MSPE-HPLC-MS/MS)测定花生黄曲霉毒素的确证性检测方法,利用甲醇-水溶液对样品进行提取,使用磁性固相萃取材料萃取、富集和净化样品初提液中的黄曲霉毒素,高效液相色谱串联质谱定量检测。对影响磁性固相萃取效率的条件进行了优化,主要包括吸附剂用量、萃取溶剂浓度、萃取时间、洗脱剂选择、洗脱周期等。结果表明,黄曲霉毒素在其线性范围内线性关系良好,相关系数均大于0. 998 2,回收率为91. 0%~120. 2%,相对标准偏差为1. 1%~5. 6%,检出限为0. 01~0. 04μg/kg。该方法样品富集净化操作简单、准确可靠、检出限低,能够满足花生样品黄曲霉毒素的检测。 展开更多
关键词 氧化石墨烯 黄曲霉毒素 磁固相萃取法 液相色谱串联质谱法
花生主要品种出仁率和百果重的生态稳定性分析 预览
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作者 郭建斌 贾朝阳 +9 位作者 荆建国 陈四龙 陈伟刚 黄莉 陈玉宁 周小静 罗怀勇 刘念 任小平 姜慧芳 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期186-191,共6页
为了筛选高产稳产广适性的花生品种,连续2年对60份花生品种4个生态区种植的出仁率和百果重进行了考察分析。结果表明,不同品种间出仁率(SP)和百果重(HPW)以及不同年份不同地点间差异均极显著,不同环境中出仁率稳定性高的品种,其百果重... 为了筛选高产稳产广适性的花生品种,连续2年对60份花生品种4个生态区种植的出仁率和百果重进行了考察分析。结果表明,不同品种间出仁率(SP)和百果重(HPW)以及不同年份不同地点间差异均极显著,不同环境中出仁率稳定性高的品种,其百果重相对较小。进一步分析表明,不同环境下花生百果重与出仁率之间均存在极显著负相关关系。通过2年4点共8个环境的重复鉴定,筛选得到出仁率稳定性较强且百果重相对较大的品种5份,分别是中花5号、中花16号、豫花7号、中花10号和皖花8号。结合SSR多样性分析结果,这5份稳定性强且高产的花生品种属于不同的类群,遗传差异相对较大。该结果为花生高产品种的应用提供了材料基础和理论依据。 展开更多
关键词 花生 出仁率 百果重 稳定性
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5-羟色胺对油菜幼苗干旱的缓解效应 预览
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作者 田姗姗 李继强 +11 位作者 邹锡玲 张学昆 付桂萍 吕艳 曾柳 闫蕾 刘月 钟燕 杨静 陈建军 马海清 程勇 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期192-198,共7页
为探讨5-羟色胺(5-HT,又名血清素)对油菜耐旱性的调节作用,以甘蓝型油菜品种中双11号为材料,通过水培试验,采用PEG6000(polyethylene glycol)胁迫模拟干旱,分析了干旱条件下施加外源5-羟色胺对油菜幼苗生长、活性氧代谢及渗透调节物质... 为探讨5-羟色胺(5-HT,又名血清素)对油菜耐旱性的调节作用,以甘蓝型油菜品种中双11号为材料,通过水培试验,采用PEG6000(polyethylene glycol)胁迫模拟干旱,分析了干旱条件下施加外源5-羟色胺对油菜幼苗生长、活性氧代谢及渗透调节物质的影响。结果表明,在干旱模拟胁迫下,油菜的生长受到抑制,过氧化氢(H2O2)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、脯氨酸(proline,Pro)以及可溶性糖(soluble sugar,SS)的含量明显增加,过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)的活性显著提高。在干旱模拟条件下施加外源5-羟色胺可以缓解干旱对油菜幼苗的不良影响,促进其生长。与单纯干旱模拟条件下的幼苗相比,添加外源5-羟色胺显著地提高了CAT、SOD、APX的活性,减少了过氧化氢和丙二醛的积累,同时渗透调节物质脯氨酸与可溶性糖含量显著增加。以上结果说明,外源5-羟色胺通过增加油菜幼苗的抗氧化酶活性来清除过多的过氧化氢和丙二醛,减轻膜脂过氧化反应,同时提高渗透调节物质含量从而缓解干旱胁迫对油菜幼苗的不利因素,促进油菜幼苗生物量积累,提高油菜幼苗的耐旱能力。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 5-羟色胺 模拟干旱 幼苗
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解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)ATCC30162脂肪酶基因Yllip1和Yllip2的结构及表达特征 预览
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作者 游灵杰 叶蕴瑶 +2 位作者 王丹 戴妮杰 龚阳敏 《生物资源》 CAS 2019年第2期166-173,共8页
以目前报道油脂产量最高的解脂耶氏酵母菌株(Yarrowia lipolytica)ATCC 30162为对象,采用逆转录PCR扩增到脂肪酶编码基因Yllip1和Yllip2,编码产物分别为816和549个氨基酸。保守结构域预测表明,Yllip1包含Patatin类磷脂酶和功能未知的DUF... 以目前报道油脂产量最高的解脂耶氏酵母菌株(Yarrowia lipolytica)ATCC 30162为对象,采用逆转录PCR扩增到脂肪酶编码基因Yllip1和Yllip2,编码产物分别为816和549个氨基酸。保守结构域预测表明,Yllip1包含Patatin类磷脂酶和功能未知的DUF3336结构域,而Yllip2包含lipase3类脂肪酶结构域,且这两个蛋白都具有1~4个跨膜区域。与不同物种来源的脂肪酶同源蛋白的多序列比对表明Yllip1和Yllip2分别包含8和6个保守区域,这些生物信息学分析表明这两个来源于解脂耶氏酵母的脂肪酶作用底物可能分别为细胞内膜磷脂和酰基甘油酯。荧光定量PCR分析表明:培养基中添加油酸在短期内(6 h)诱导了这两个脂肪酶基因Yllip1和Yllip2的显著上调表达,表明它们可能参与了酵母分解利用油酸的生化过程。 展开更多
关键词 解脂耶氏酵母 脂肪酶 保守结构域 多序列比对
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花生FAD2基因家族表达分析及其对低温胁迫的响应 预览
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作者 薛晓梦 李建国 +6 位作者 白冬梅 晏立英 万丽云 康彦平 淮东欣 雷永 廖伯寿 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1586-1594,共9页
为了探究FAD2在花生低温响应中的作用,本研究从普通油酸花生中花16(ZH16)和高油酸花生中花413(ZH413)中克隆得到花生AhFAD2家族的全部基因,共7个。通过分析这些基因的表达模式发现,在ZH16和ZH413中各FAD2基因表达模式相似,AhFAD2-1A/B... 为了探究FAD2在花生低温响应中的作用,本研究从普通油酸花生中花16(ZH16)和高油酸花生中花413(ZH413)中克隆得到花生AhFAD2家族的全部基因,共7个。通过分析这些基因的表达模式发现,在ZH16和ZH413中各FAD2基因表达模式相似,AhFAD2-1A/B主要在花和发育的种子中表达,AhFAD2-3A/B主要在营养组织中表达,AhFAD2-4A/B主要在根和花中表达,表明AhFAD2基因在花生不同发育阶段和不同组织中发挥各自的生物学功能。在15℃下发芽6d发现,ZH413的发芽率未显著下降,而ZH16的发芽率显著下降。种子萌发过程中,AhFAD2-1A/B和AhFAD2-4A/B均受低温诱导表达。在ZH16中AhFAD2-1A/B在低温诱导第6天开始显著上调表达,而在ZH413中第1天显著上调表达;在ZH16中AhFAD2-4A/B在低温诱导第3天出现显著上调表达,之后表达量下降,但在ZH413中第1天就显著上调表达,且始终维持在高水平表达。基于以上研究结果推测,高油酸花生在受到低温胁迫时,AhFAD2-1A/B编码蛋白失活,但AhFAD2-4A/B的高量表达在一定程度上弥补了这部分功能。同时也说明AhFAD2-1A/B功能的缺失并不是决定花生耐寒性的主要因素。本研究的开展为培育抗寒的高油酸花生品种奠定了理论基础,为高油酸花生在高纬度、高海拔地区推广提供了理论支持。 展开更多
关键词 脂肪酸脱氢酶(FAD2) 基因克隆 低温胁迫 基因表达
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芝麻硬脂酸脱饱和酶基因SiSAD的克隆及功能验证 预览
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作者 周瑢 刘盼 +4 位作者 黎冬华 张艳欣 王林海 张秀荣 魏鑫 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1678-1685,共8页
[目的]对芝麻△9 硬脂酰-ACP 脱饱和酶基因 SiSAD (△9 stearoyl acyl-carrier-protein desaturase)进行克隆与表达分析,并转入拟南芥,探究其在油酸合成过程中的作用,为芝麻油酸含量的遗传改良提供分子基础。[方法]提取中芝 13 叶片的总... [目的]对芝麻△9 硬脂酰-ACP 脱饱和酶基因 SiSAD (△9 stearoyl acyl-carrier-protein desaturase)进行克隆与表达分析,并转入拟南芥,探究其在油酸合成过程中的作用,为芝麻油酸含量的遗传改良提供分子基础。[方法]提取中芝 13 叶片的总 RNA,反转录为 cDNA。根据芝麻基因组数据库中的 SiSAD序列信息(序列号为 SIN_1008977)设计引物,以 cDNA 为模板,通过 RT-PCR 克隆获得 SiSAD编码区序列,并与参考基因组序列进行比较。利用 InterPro 进行保守结构域分析,获得 SiSAD 蛋白的保守结构域。利用 BLAST 对 SiSAD 蛋白进行同源对比,获得 SiSAD 的同源蛋白质。采用邻接法构建系统进化树,获得芝麻 SAD 蛋白与橄榄、牵牛花、蓖麻、莴苣、葡萄、柑橘、拟南芥等植物 SAD 蛋白的亲缘关系。通过荧光定量 PCR 检测 SiSAD在 2 个芝麻品种中芝 33 和中丰芝一号的根、茎、叶、蕾和种子中的相对表达量,分析 SiSAD的表达特异性。将 SiSAD连接过表达载体,通过农杆菌介导法转化野生型拟南芥(Col-0),筛选阳性后代,对 T3 代转基因和野生型的拟南芥种子中硬脂酸和油酸相对含量进行测定,分析 SiSAD的功能。[结果]成功获得 SiSAD的编码区序列,与参考基因组序列一致,全长为 1 152 bp,编码 383 个氨基酸,SiSAD 蛋白的分子量为 43 kD,等电点为 6.18。发现SiSAD 蛋白含有一个保守结构域,属于脂肪酸去饱和酶家族成员,与其他植物的 SAD 蛋白质序列的同源性较高,暗示 SiSAD在不同物种中的功能可能比较保守。系统进化分析显示,芝麻 SAD 蛋白与牵牛花和橄榄的 SAD 蛋白处于同一分支,进化关系较近,与蓖麻、拟南芥、柑橘的 SAD 蛋白亲缘关系较远。荧光定量 PCR 结果表明,SiSAD在芝麻种子中的表达量远远高于其他组织,有显著的组织特异性。成功构建了 SiSAD的过表达载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥,结果表明 SiSAD成功导入拟南芥中,� 展开更多
关键词 芝麻 SiSAD 过表达 油酸 功能验证
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油莎豆高油高产品种中油莎1号 预览
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作者 赵永国 邹锡玲 +3 位作者 张燕 韩忠奎 曾柳 张学昆 《中国种业》 2019年第6期96-97,共2页
油莎豆新品种中油莎1号是中国农业科学院油料作物研究所通过辐射诱变、提纯复壮及南繁加代穿梭育种方法选育的高产高油品种,2017年通过中国作物学会油料作物专业委员会组织的品种认定。
关键词 油莎豆 中油莎1号 高油 高产
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甘蓝型油菜花序长发夹lhRNAi文库的构建 预览
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作者 曾新华 赵圣博 +3 位作者 李可琪 袁荣 吴刚 闫晓红 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期340-348,共9页
异源四倍体油菜含有大量多拷贝基因及冗余基因,难以通过T-DNA插入、物理及化学诱变等常规突变体库创制方法发掘功能基因。为开发适应于油菜简单高效的突变体库创制方法,本研究通过滚环复制方法构建了甘蓝型油菜的花序lhRNAi文库,并对这... 异源四倍体油菜含有大量多拷贝基因及冗余基因,难以通过T-DNA插入、物理及化学诱变等常规突变体库创制方法发掘功能基因。为开发适应于油菜简单高效的突变体库创制方法,本研究通过滚环复制方法构建了甘蓝型油菜的花序lhRNAi文库,并对这种新型的干扰文库进行质量评估;然后将该花序lhRNAi文库对甘蓝型油菜进行遗传转化,获得763株T0植株,从中鉴定分离出74株具有可见表型变异的花发育相关突变体,包括花瓣减少、形状异常,柱头卷曲,雄蕊退化萎缩,雄性不育、死蕾或花蕾闭合等。说明通过滚环复制介导的lhRNAi文库的构建方法可以成功应用到油菜中,这将为油菜花序发育相关基因的功能研究提供重要的研究平台。 展开更多
关键词 油菜 滚环复制 长发夹RNAi文库 花发育
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花生品系对白绢病的抗性评价及产量损失研究 预览
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作者 晏立英 宋万朵 +5 位作者 雷永 万丽云 淮东欣 康彦平 姜慧芳 廖伯寿 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期415-420,共6页
选取中国农业科学院油料作物研究所培育的10个花生新品系,通过自然发病和人工接种两种方法进行了白绢病抗性鉴定和产量损失研究。结果表明,在自然发病条件下,10个新品系由白绢病造成的枯萎率为11. 0%~50. 0%,其中7个品系白绢病枯萎率低... 选取中国农业科学院油料作物研究所培育的10个花生新品系,通过自然发病和人工接种两种方法进行了白绢病抗性鉴定和产量损失研究。结果表明,在自然发病条件下,10个新品系由白绢病造成的枯萎率为11. 0%~50. 0%,其中7个品系白绢病枯萎率低于30. 0%;白绢病枯萎率与花生荚果产量呈显著负相关(r=-0. 73,P <0. 05)。在田间人工接种条件下,接种2周后,10个品系导致的植株枯萎率为66. 1%~94. 0%,收获前的白绢病枯萎率为66. 1%~97. 4%,均为感病品系;白绢病导致的植株枯萎率与花生荚果产量的相关系数为-0. 85(P <0.05)。产量损失试验表明,在人工接种条件下,所有品系产量损失均超过91. 7%,严重者几乎绝产。综合田间自然发病和人工接种鉴定,获得一份耐病品系16-A13440。 展开更多
关键词 花生 白绢病 齐整小核菌(Sclerotium rolfsii Sacc) 抗病性评价 产量损失
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甘蓝型油菜及其二倍体祖先种COR413家族基因生物信息学分析 预览
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作者 袁淑培 张付贵 +3 位作者 黄倩 程希 高桂珍 伍晓明 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期507-516,共10页
COR413(cold- regulated 413)是植物响应低温与冷害胁迫的重要基因家族,为深入解析油菜耐寒分子机制,利用生物信息学方法在甘蓝型油菜、白菜和甘蓝基因组中分别筛选和鉴定到11、6和6个COR413基因,它们大部分定位在质膜和叶绿体膜上。COR... COR413(cold- regulated 413)是植物响应低温与冷害胁迫的重要基因家族,为深入解析油菜耐寒分子机制,利用生物信息学方法在甘蓝型油菜、白菜和甘蓝基因组中分别筛选和鉴定到11、6和6个COR413基因,它们大部分定位在质膜和叶绿体膜上。COR413家族蛋白高度保守,具疏水性,较稳定,含有COR大家族其它类型蛋白所没有的色氨酸,不含信号肽。拟南芥、白菜和甘蓝组织表达特异性分析发现,亚家族I中的基因大部分在根和叶中有较高的表达量,亚家族II中的基因在茎和叶中有高表达。 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 COR413基因家族 低温 生物信息学
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野生大豆转录因子GsWRKY57基因的克隆与抗旱性功能分析 预览
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作者 王岩岩 张永兴 +4 位作者 郭葳 代文君 周新安 矫永庆 沈欣杰 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期524-530,共7页
WRKY转录因子是近年来在植物中发现的一类重要转录因子,在植物抗逆相关过程中发挥重要作用。本研究通过对野生大豆转录组数据进行分析,从野生大豆中克隆得到GsWRKY57基因的CDS序列。该基因开放阅读框为903bp,编码300个氨基酸残基,分子量... WRKY转录因子是近年来在植物中发现的一类重要转录因子,在植物抗逆相关过程中发挥重要作用。本研究通过对野生大豆转录组数据进行分析,从野生大豆中克隆得到GsWRKY57基因的CDS序列。该基因开放阅读框为903bp,编码300个氨基酸残基,分子量为34.23kD,等电点为5.88。氨基酸序列分析显示该蛋白含有一个WRKY保守结构域,属于III类WRKY转录因子。系统发育树分析表明该蛋白与栽培大豆同源性最高、其次是赤豆、木豆。启动子作用元件分析预测显示该基因可能存在多种非生物胁迫作用元件。组织特异性表达分析表明该基因在大豆叶片中高丰度表达,然后依次是茎、花、荚、根。GsWRKY57基因表达受茉莉酸、水杨酸、脱落酸、干旱等植物逆境诱导。过表达GsWRKY57基因的转基因拟南芥植株相对于野生型耐旱能力增强。 展开更多
关键词 野生大豆 GsWRKY57 转录因子 过表达 干旱胁迫
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