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云南省母婴阻断失败后乙型肝炎病毒S基因变异的探讨
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作者 康文玉 和海玉 +5 位作者 李琼芬 王锋 沈立萍 张丽芬 许琳 田子颖 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2019年第6期489-494,共6页
目的探讨云南省乙型肝炎母婴阻断失败后病毒S基因变异情况。方法随机抽取云南省2011年1—6月HBsAg阳性的住院分娩孕产妇及其母婴阻断失败的婴儿(HBsAg阳性)共26对,对其血清样本进行HBV DNA检测及基因测序,并进一步研究母亲组和婴儿组在H... 目的探讨云南省乙型肝炎母婴阻断失败后病毒S基因变异情况。方法随机抽取云南省2011年1—6月HBsAg阳性的住院分娩孕产妇及其母婴阻断失败的婴儿(HBsAg阳性)共26对,对其血清样本进行HBV DNA检测及基因测序,并进一步研究母亲组和婴儿组在HBV S区"a"抗原决定簇氨基酸序列上的变异位点。结果26对母婴阻断失败的样本中,9对(34.62%)配对样本序列与C基因型最接近,11对(42.31%)配对样本序列与B基因型最接近,6对(23.08%)配对样本母婴间发生了基因变异,其中2对样本是C基因型内的亚型变异,4对是基因型变异。在HBV S区"a"抗原决定簇氨基酸序列上发现了7个变异位点,分别为T126I、T131N、M133L、F134Y、T140I、T143S、D144A。母亲组和婴儿组均为发生双点突变最多,分别有14份和11份;发生突变最多的均为C3基因型的T126I/T143S双位点突变。母亲组及婴儿组HBV DNA平均水平均高于2×10^5 IU/mL,HBV DNA高含量组(>2×10^5 IU/mL)"a"抗原决定簇突变率为56.75%(21/37),中含量组(500~2×10^5 IU/mL)突变率为60.00%(3/5),低含量组(<500 IU/mL)突变率为100.00%(10/10)。结论云南省乙型肝炎母婴阻断失败病例中,基因变异虽然不占主导地位,但其占比不容忽视。云南省HBV S区"a"抗原决定簇氨基酸变异位点非常分散,还未形成优势变异株,但应加强监测,防止强变异毒株的蔓延。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 母婴阻断 基因变异 氨基酸序列
中国1~4岁儿童首针乙型肝炎疫苗未及时接种者特征及影响因素分析 被引量:9
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作者 王富珍 张国民 +7 位作者 沈立萍 刘建华 郑徽 王锋 缪宁 孙校金 梁晓峰 崔富强 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期32-36,共5页
目的 分析中国1-4岁儿童乙型肝炎疫苗首针HepB(HepB1)未及时接种的流行病学特征和影响因素。方法 2014年在全国31个省份160个国家级疾病监测点,采用分层二阶段整群随机抽样方法,通过问卷调查1-4岁儿童的出生日期、性别、民族、出生... 目的 分析中国1-4岁儿童乙型肝炎疫苗首针HepB(HepB1)未及时接种的流行病学特征和影响因素。方法 2014年在全国31个省份160个国家级疾病监测点,采用分层二阶段整群随机抽样方法,通过问卷调查1-4岁儿童的出生日期、性别、民族、出生地点、HepB接种史等,并采集静脉血3 ml进行HBsAg检测。运用SAS 9.4统计软件分析HepB免疫儿童中HepB1未及时接种者的年龄、性别、民族、城乡、地区分布及影响因素,以及HepB1不同接种时间与HBsAg流行率的关系。结果 共分析1-4岁儿童12 587人,HepB1未及时接种率为10.12%,出生地点、民族、城乡、居住地区、年龄是影响儿童HepB1未及时接种的主要因素。HepB1未及时接种率3-4岁儿童(11.13%)高于1-2岁儿童(8.97%);农村(12.05%)高于城市(8.19%);西部地区(13.41%)高于中部地区(9.27%),中部地区又高于东部地区(7.72%);少数民族(18.06%)高于汉族(8.77%);在医院外出生者(57.66%)高于在医院内出生者(9.27%)。调查1-4岁儿童HBsAg流行率为0.31%。HepB1及时接种儿童HBsAg流行率(0.25%)低于HepB1未及时接种儿童(0.89%)。结论 中国1-4岁儿童HepB免疫儿童HBsAg流行率降至0.5%以下,HepB1及时接种率达到90%。西部地区、农村、少数民族、在医院外分娩的婴儿是现阶段HepB接种的重点关注对象。 展开更多
关键词 乙型肝炎疫苗 首针及时接种 乙型肝炎病毒表面抗原
云南HBsAg阳性孕产妇生产婴儿免疫应答及感染状况分析 被引量:1
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作者 康文玉 王锋 +4 位作者 李琼芬 张丽芬 许琳 田子颖 沈立萍 《中国公共卫生》 CSCD 北大核心 2017年第12期1735-1738,共4页
目的 了解云南省乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕产妇所生婴儿在实施母婴阻断后的免疫应答及乙肝感染状况。方法 筛查出全云南省2011年1—6月入院分娩的HBsAg阳性孕产妇,实施母婴阻断后以其所生婴儿为调查对象,于7—12月龄采集静脉血2 mL,... 目的 了解云南省乙肝表面抗原(HBsAg)阳性孕产妇所生婴儿在实施母婴阻断后的免疫应答及乙肝感染状况。方法 筛查出全云南省2011年1—6月入院分娩的HBsAg阳性孕产妇,实施母婴阻断后以其所生婴儿为调查对象,于7—12月龄采集静脉血2 mL,分离出血清标本先统一采用ELISA法做乙肝血清学5项指标检测,筛选出HBsAg阳性的标本采用荧光定量PCR法进行乙肝病毒载量(HBV DNA)检测,筛选出HBsAg阴性且乙肝表面抗体(anti-HBs,抗-HBs)阳性的标本采用化学发光法做抗-HBs定量检测。结果 共收集到调查对象3 026人,母婴阻断实施后免疫应答率为92.43%,有效免疫应答率为80.04%;低、无免疫应答者占16.09%;母婴阻断失败率为3.87%。本次调查共检出10种乙肝血清标志物组合模式,检出率最高为模式6,占74.62%:其次为模式5,占14.44%:再次为模式7,占3.70%:模式4占3.37%。母婴阻断失败组中,HBV DAN含量〉5×10~7IU/mL占45.30%;500~5×10~7IU/mL占39.32%;〈500 IU/mL占15.38%;HBeAg阳性率为79.49%。产生免疫应答组检出3种血清组合模式,乙肝病毒e抗体(anti-HBe,抗-HBe)阳性率为3.79%,乙肝病毒核心抗体(anti-HBc,抗-HBc)阳性率为23.20%。定量检测抗-HBs,抗体水平〉1 000 mIU/mL的高免疫应答者占66.93%,抗体水平在100~1 000 mIU/mL的中免疫应答者占19.66%,抗体水平在10~100 mIU/mL的低免疫应答者占13.41%。经统计分析,产生免疫应答抗-HBs的抗体水平高低与婴儿体内是否携带抗-HBe、抗-HBc及性别无关。结论 对HBsAg阳性孕产妇所生婴儿实施母婴阻断,并建立健全产后对婴儿追踪机制,对预防和控制婴儿感染乙肝起关键作用。 展开更多
关键词 乙肝病毒 母婴阻断 婴儿 感染状况 免疫应答
1992和2014年中国不同流行地区1~29岁人群乙型肝炎血清流行病学调查结果对比分析 被引量:20
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作者 王富珍 张国民 +8 位作者 沈立萍 郑徽 王锋 缪宁 袁千里 孙校金 毕胜利 梁晓峰 王华庆 《中华预防医学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第6期462-468,共7页
目的 分析比较中国1992和2014年不同流行地区1~29岁人群乙型肝炎血清学指标阳性率,评价乙型肝炎预防控制效果.方法 数据来自于1992年全国病毒性肝炎血清流行病学调查和2014年全国乙型肝炎血清流行病学调查数据.1992年调查覆盖内地30个... 目的 分析比较中国1992和2014年不同流行地区1~29岁人群乙型肝炎血清学指标阳性率,评价乙型肝炎预防控制效果.方法 数据来自于1992年全国病毒性肝炎血清流行病学调查和2014年全国乙型肝炎血清流行病学调查数据.1992年调查覆盖内地30个省份(不包括中国香港、澳门、台湾数据)145个疾病监测点;2014年调查覆盖内地31个省份(不包括中国香港、澳门、台湾数据)160个疾病监测点.两次调查均采用入户或集中调查的方式,问卷调查内容包括出生日期、性别、民族、地区等.问卷调查后,采集静脉血5 ml,检测HBsAg、抗-HBs、抗-HBc.1992年调查数据计算相关指标阳性率及其95%CI值为样本数据;2014年调查按设计权重加权估计相关指标阳性率及其95%CI值.结果 1992年共调查1~29岁人群34291名,2014年为31713名.2014年HBsAg阳性率为2.64%(95%CI:2.28%~3.06%),较1992年(10.13%,95%CI:9.81%~10.45%)下降73.92%;2014年抗-HBc阳性率为13.01%(95%CI:12.09%~14.00%),较1992年(45.84%,95%CI:45.31%~46.37%)下降71.61%;2014年抗-HBs阳性率为57.79%(95%CI:56.33%~59.25%),较1992年(25.41%,95%CI:24.95%~25.87%)上升127.41%.乙型肝炎疫苗纳入计划免疫管理后出生人群(即1992—2001年出生),2014年高、中、低流行区该人群HBsAg阳性率分别为4.74%(95%CI:3.79%~5.69%)、1.59%(95%CI:1.09%~2.10%)、2.53%(95%CI:1.66%~3.39%),抗-HBs阳性率分别为64.25%(95%CI:62.11%~66.39%)、56.34%(95%CI:54.50%~58.57%)、54.49%(95%CI:51.75%~57.23%),抗-HBc阳性率分别为15.16%(95%CI:13.56%~16.76%)、11.07%(95%CI:9.80%~12.33%)、7.61%(95%CI:6.15%~9.07%).乙型肝炎疫苗纳入免疫规划后出生人群(即2002—2013年出生),2014年高、中、低流行区HBsAg阳性率分别为0.88%(95%CI:0.66%~1.11%)、0.37%(95%CI:0.24%~0.49%)、0.71%(95%CI:0.48%~0.94%),抗-HBs阳性率分别为60.74%(95%CI:59.57%~61.90%)、59.46% 展开更多
关键词 肝炎 乙型 血清学 肝炎疫苗 乙型
中国2014年2~29岁人群甲型肝炎疫苗接种率及甲型肝炎报告发病分析 被引量:6
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作者 王富珍 郑徽 +5 位作者 刘建华 孙校金 缪宁 沈立萍 张国民 崔富强 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1099-1104,共6页
目的 评价中国2~29岁人群甲型肝炎(甲肝)疫苗接种率和甲肝报告发病率。方法 基于2014年全国乙型肝炎血清流行病学调查数据库中甲肝疫苗接种史信息,运用SAS 9.4软件分析2~29岁人群甲肝疫苗接种率。通过全国传染病报告信息管理系统获... 目的 评价中国2~29岁人群甲型肝炎(甲肝)疫苗接种率和甲肝报告发病率。方法 基于2014年全国乙型肝炎血清流行病学调查数据库中甲肝疫苗接种史信息,运用SAS 9.4软件分析2~29岁人群甲肝疫苗接种率。通过全国传染病报告信息管理系统获取2004-2014年甲肝报告发病资料,运用Excel 2007软件分析甲肝报告发病率。结果 共分析全国2~29岁人群29 058人,甲肝疫苗接种率为44.6%,年龄越小,甲肝疫苗接种率越高,其中2~6岁、7~14岁人群甲肝疫苗接种率分别为91.2%、76.0%。2004-2014年全国甲肝报告发病率逐年下降,其中2~6岁、7~14岁人群和全人群2007-2013年甲肝报告发病率下降幅度分别为82.5%、90.6%、72.1%。结论 甲肝疫苗纳入我国扩大免疫规划以后,2~6岁出生人群甲肝疫苗接种率达到90%以上,无城乡差异;2~6岁甲肝报告发病率下降幅度大于全人群。 展开更多
关键词 甲型肝炎 甲型肝炎疫苗 接种率 发病率
自发生物素化风疹病毒重组诊断抗原的制备 被引量:4
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作者 苏秋东 郭敏卓 +7 位作者 邱丰 贾志远 卢学新 孟庆玲 田瑞光 高燕 毕胜利 伊瑶 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期236-240,共5页
目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒(Rubella Virus,RV)重组抗原E1(RV-E1),并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物(BSP)插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)插入到R... 目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒(Rubella Virus,RV)重组抗原E1(RV-E1),并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物(BSP)插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)插入到RV-E1的氨基端,密码子优化后全基因合成;在大肠埃希进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化获取生物素化的RV-E1抗原;利用Western Blotting技术对目的蛋白进行鉴定,并建立风疹病毒IgM抗体检测方法,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的生物素化的可溶性RV-E1抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被RV-E1抗原和TRX抗原单克隆抗体识别,而且可以被标记HRP的链霉亲和素所识别.分别对50份风疹病毒感染阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.结论 RV-E1诊断抗原携带BSP,可以在大肠埃希菌表达过程中自发共价结合生物素分子,并可以作为新型诊断抗原应用于生物素-亲和素ELISA血清学检测中. 展开更多
关键词 BirA酶底物 风疹病毒E1抗原 原核表达 生物素化抗原
应用In—Fusion技术构建HBV基因组全长重组质粒及序列分析
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作者 张寻 赵洪兰 +1 位作者 沈立萍 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期111-113,共3页
目的研究In—Fusion技术在HBV全进组克隆中的应用,并分析所获得的的序列信息。方法在浙江杭州地区收集23份慢性乙型肝炎患者血清,提取病毒核酸,分别设计PCR引物扩增病毒基因组和pMDl8T载体,采用In-Fusion方法构建基因组测序质粒,... 目的研究In—Fusion技术在HBV全进组克隆中的应用,并分析所获得的的序列信息。方法在浙江杭州地区收集23份慢性乙型肝炎患者血清,提取病毒核酸,分别设计PCR引物扩增病毒基因组和pMDl8T载体,采用In-Fusion方法构建基因组测序质粒,并对序列进行分析。结果成功扩增出了23条HBV基因组序列,向NCBI提交的24株HBV全长序列,测序结果分析显示,B基因型11例,C基因型12例,没有B+C型,发现YMDD耐药株1例。结论In.Fusion技术构建重组质粒是一种高效的连接方法,提高了连接率与成功率,可以大大简化目的片段与载体的连接,有效避免了在连接过程中常见的载体自连现象,探索了该技术在HBV序列研究中的初步应用。本研究丰富了我国的HBV全长基因组数据库,为HBV基因组特点、变异、药物、疫苗研究以及乙型肝炎的个体化治疗提供了参考依据。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 克隆 分子 基因
b型流感嗜血杆菌D蛋白原核可溶性表达研究 被引量:1
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作者 尹梦梦 苏秋东 +9 位作者 郭敏卓 寸怡娜 普元倩 贾志远 杨景然 汤洋 廖国阳 伊瑶 毕胜利 李卫东 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期89-91,共3页
目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化人感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白,经过... 目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化人感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用WesternBlot的方法鉴定其免疫反应原性。结果表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占菌株总蛋白的44%,经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应。结论成功构建了D蛋白重组表达质粒,并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白。 展开更多
关键词 蛋白质 表达的序列标 嗜血菌 流感 b型
两种嵌合乙型肝炎病毒preSl中和表位的乙肝核心病毒样颗粒的制备与抗原性分析
9
作者 苏秋东 郭敏卓 +5 位作者 伊瑶 陈斯勇 贾志远 卢学新 邱丰 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期336-339,共4页
目的构建嵌合preSl2147位氨基酸(aa)、以全长乙肝病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3,并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插... 目的构建嵌合preSl2147位氨基酸(aa)、以全长乙肝病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3,并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插入到全长HBc(aa1—183)和截断HBc(8a1—144)的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后全基因合成,目的片段经双酶切(NdeI和XhoI)回收后连接到同样处理的pET43.1a载体上,在大肠埃希菌E.coliBL21(DE3)中表达,精细纯化后通过电镜观察蛋白形态、ELISA以及WesternBlott检测其抗原性。结果成功构建表达质粒H2和H3,并在BL21(DE3)中高效表达和自发组装成病毒样颗粒。纯化后电镜观察H2和H3形态为二十面体立体对称样病毒样颗粒,H2为实心颗粒,直径为(31.61±1.27)nm,H3为空心颗粒,直径为(28.46±1.16)nm。统计分析可得H2直径要比H3直径大(P〈0.01)。ELISA和WesternBlott检测结果证实其插入表位preSl以及载体蛋白HBc的抗原性。结论成功获得两种嵌合HBVpreSl中和表位的病毒样颗粒,为其在疫苗研究中的应用探索奠定基础。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 表位 病毒核心蛋白质类 病毒样颗粒
乙肝患者HBV感染指标、病毒复制水平与基因分型的关系分析 被引量:11
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作者 秦望森 沈立萍 +2 位作者 张爽 尹文娇 王锋 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期328-330,共3页
目的探讨HBV感染指标、病毒复制水平和基因型之间的关联及对乙肝患者诊断和预后的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测样本的HBV PreS1-Ag、Anti—HBc—IgM和HBV两对半;荧光定量PCR法测HBVDNA水平;巢氏PCR法扩增S片段、测序... 目的探讨HBV感染指标、病毒复制水平和基因型之间的关联及对乙肝患者诊断和预后的意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测样本的HBV PreS1-Ag、Anti—HBc—IgM和HBV两对半;荧光定量PCR法测HBVDNA水平;巢氏PCR法扩增S片段、测序并对比分析判定基因型,联合分析指标的关联。结果收集河南地区急、慢性乙肝患者样本355例。模式Ⅰ(HBeAg阳性)的PreS1-Ag阳性率为80.2%、HBV DNA阳性率为73.7%,显著高于其他模式;PreS1-Ag、Anti-HBc-IgM阳性者的ALT、AST异常率显著高于阴性组;HBV基因型结果为B型4例(2.9%),C型76例(55.9%),D型56例(41.2%),C型患者的HBeAg和HBV DNA阳性率显著高于B型和D型。结论PreS1-Ag和Anti—HBc—IgM对乙肝早期诊断、病毒复制监测及预后评估有重要意义;河南地区乙肝患者的HBV基因型以C型和D型为主,C型的HBeAg和HBV DNA阳性率显著高于B和D型。 展开更多
关键词 肝炎 乙型 抗原 免疫球蛋白M 基因型 病毒核心蛋白质类
乙型肝炎与载脂蛋白基因多态性相关性研究
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作者 尹志农 周新 +3 位作者 鄢盛恺 王俊文 孟庆玲 刘薇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2012年第1期 28-30,共3页
目的探讨ApoAI-75Mspl、ApoB—Msp1、ApoCllI—Sst1、LRP5、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式之间的内在相关性。方法将乙型肝炎血清标志物不同模式分为9组,每组80人,共720人份,采用SnaPshot法检测上述基因的多态性,最... 目的探讨ApoAI-75Mspl、ApoB—Msp1、ApoCllI—Sst1、LRP5、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式之间的内在相关性。方法将乙型肝炎血清标志物不同模式分为9组,每组80人,共720人份,采用SnaPshot法检测上述基因的多态性,最后用测序法佐证检测结果的准确性。结果ApoAI-75Msp1、ApoE基因在乙型肝炎血清标志物不同模式之间差异有统计学意义(P〈0.05),ApoCIII-Sst1、ApoB.Msp1、LRP5基因则差异无统计学意义(P〉0.05)。结论ApoAI-75Msp1、ApoE基因多态性与乙型肝炎血清标志物不同模式有相关性,ApoCIII-Sstl、ApoB—Msp1、LRP5与乙型肝炎血清标志物不同模式无相关性。 展开更多
关键词 载脂蛋白类 基因 多态现象(遗传学) 肝炎 乙型
乙型肝炎肝硬化患者病毒基因型与特异性、非特异性CTL的关系和意义 被引量:1
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作者 顾锡炳 杨小娟 +4 位作者 王娟华 华忠 陆忠华 徐月琴 贾志远 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期211-213,共3页
目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者不同HBV基因型与外周血HBV特异性、非特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的关系和意义.方法 91例乙型肝炎肝硬化患者作HBV基因型检测,比较B、C基因型感染者之间HBV特异性、非特异性CTL的差别,并探讨其临床意义... 目的 探讨乙型肝炎肝硬化患者不同HBV基因型与外周血HBV特异性、非特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的关系和意义.方法 91例乙型肝炎肝硬化患者作HBV基因型检测,比较B、C基因型感染者之间HBV特异性、非特异性CTL的差别,并探讨其临床意义.结果 91例乙型肝炎肝硬化患者中,C基因型55例(60.44%),B基因型35例(38.46%),B、C混合型1例(1.1%),C基因型人白细胞抗原(HLA)-A2阳性27例(49.09%),HBV特异性CTL(0.18%±0.03%),B基因型HLA-A2阳性18例(51.43%),HBV特异性CTL(0.38%±0.04%),高于C基因型,t=5.01,P<0.01,非特异性CTL:C基因型(11.87%±1.50%),B基因型(11.90%±1.51%),t=0.14,P>0.05.HBV DNA水平:C基因型[(6.01 ±0.81)log10拷贝/ml],高于B基因型[(5.01 ±0.54)log10拷贝/ml],t=5.01,P<0.01,丙氨酸转氨酶(ALT):C基因型(251.13 ±131.11)U/L,高于B基因型(121.25±63.21)U/L,t=3.61,P<0.01,血清总胆红素(TBil 45.61 ±15.11)μmoL/L,高于B基因型(28.11 ±6.25)μmol/L,t=3.05,P<0.01.结论 与乙型肝炎肝硬化B基因型感染者相比,C基因型感染者的HBV特异性CTL较低,导致HBV DNA水平较高,肝功能损害较重. 展开更多
关键词 肝炎 乙型 肝硬化 基因型 T淋巴细胞 细胞毒性
丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白的表达及免疫原性测定
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作者 邱丰 贾志远 +7 位作者 郭敏卓 陈斯勇 伊瑶 沈立萍 余陶 费永亮 郭瑜 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期113-115,共3页
目的获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性。方法利用原核表达系统,以pET—11d作为载体,在大肠埃希菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化。通过Western Blo... 目的获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性。方法利用原核表达系统,以pET—11d作为载体,在大肠埃希菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化。通过Western Blot验证融合蛋白的抗原活性。同时以该蛋白免疫实验动物后测定血清中的抗体滴度。结果成功获得很高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白,EIA显示融合蛋白能够诱生出高滴度的抗体。结论原核表达系统表达的丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白具有较强的免疫原性,为丙型肝炎病毒治疗性和预防性疫苗的研制提供了一条新的途径。 展开更多
关键词 肝炎病毒 病毒融合蛋白质类 疫苗 免疫测定
河北正定县某镇人群乙型肝炎病毒“α”抗原决定簇突变初步分析 被引量:6
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作者 闫虹霞 马景臣 +6 位作者 边涛 黄昌红 张爽 张志勇 郝志勇 陈吉朝 张勇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期11-13,共3页
目的了解河北正定县某镇自然人群感染乙型肝炎病毒(HBV)的“α”抗原决定簇突变情况,分析新生儿乙肝疫苗计划免疫对其的影响。方法为正定县某镇全体村民整群采集静脉血标本,用放射免疫法检测血清HBV-M,选取乙肝表面抗原(HBsAg)... 目的了解河北正定县某镇自然人群感染乙型肝炎病毒(HBV)的“α”抗原决定簇突变情况,分析新生儿乙肝疫苗计划免疫对其的影响。方法为正定县某镇全体村民整群采集静脉血标本,用放射免疫法检测血清HBV-M,选取乙肝表面抗原(HBsAg)阳性者提取血清HBVDNA,扩增S基因,测序后与标准序列对比。结果11478份血清样品中,HBsAg检测阳性率4.78%。其中可用于HBVDNA提取的样品443份,扩增HBVS基因并成功测序434例。检测到该地区HBV“α”抗原决定簇氨基酸突变率6.7%,1986年前后出生人群HBV“α”抗原决定簇两个茎环的氨基酸突变率差异无统计学意义(P=1.0000,P=0.0877)。结论该镇存在HBV“α”抗原决定簇突变株,其在乙肝疫苗免疫出生后人群中感染率较低,尚不能说明该镇新生儿乙肝疫苗接种会引发突变株的流行。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 抗原 突变
人乳头瘤病毒与食管癌病原学关系的Meta分析 被引量:1
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作者 李淑英 李颖 +5 位作者 沈立萍 吴晓舟 赵晓瑜 周玲 刘宏图 曾毅 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期85-87,共3页
目的探讨人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)与我国食管癌发生的相关性。方法汇总了国内有关HPV与食管癌相关的论文,选择采用PCR方法检测的论文对发表的数据进行Meta分析。结果我们以检测方法为PCR、标本为石蜡包埋标本、论文... 目的探讨人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)与我国食管癌发生的相关性。方法汇总了国内有关HPV与食管癌相关的论文,选择采用PCR方法检测的论文对发表的数据进行Meta分析。结果我们以检测方法为PCR、标本为石蜡包埋标本、论文中列出或提示了引物序列的15篇论文作为入选论文。15篇文献涉及蜡块标本共980份,按照只要检出一个HPV型别即为HPV阳性进行计算,检出阳性例数为460例,各地HPV检出率为8.3%~69.8%,HPV平均检出率为46.9%(95%CI:43.8%~50.0%)。在以上980份样品中,检测范围包括了HPV16型的样品有556份,阳性份数为139份,各地检出率为4.4%~63.4%,平均检出率为25.0%(95%CI:21.4%。28.6%);检测范围包括HPV18型的样本有485份,阳性份数为33份,各地检出率为0%~19.0%,HPV18型的平均检出率为6.8%(95%CI:4.6%~9.0%)。以上15篇论文中,使用同一引物的文献只有4篇,共检测406份石蜡包埋标本,HPV阳性率为20.3%-67.6%,平均检出率为40.2%(95%CI:36.0%-45.4%)。结论我国食管癌组织中有HPV存在,并且HPV感染可能是食管癌发生的重要病因。 展开更多
关键词 乳头瘤病毒 食管肿瘤 综合分析
丙型肝炎病毒疫苗研究的现状与展望
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作者 邱丰 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期496-498,共3页
HCV(丙型肝炎病毒)感染人体后发生慢性化的比例非常高,约有50%的被感染者不能清除病毒,HCV的这种逃避宿主免疫监视,在体内持续感染的原因是很复杂的,主要原因之一在于HCV基因组发生突变的频率较高^[1,2],每年每个基因位置平均约... HCV(丙型肝炎病毒)感染人体后发生慢性化的比例非常高,约有50%的被感染者不能清除病毒,HCV的这种逃避宿主免疫监视,在体内持续感染的原因是很复杂的,主要原因之一在于HCV基因组发生突变的频率较高^[1,2],每年每个基因位置平均约有1.9×10^-3碱基替换,继而在机体免疫系统及药物等选择压力作用下, 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 病毒疫苗 HCV基因组 机体免疫系统 被感染者 免疫监视 持续感染 压力作用
PD—L1重组蛋白的表达及生物学活性分析 被引量:1
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作者 沈立萍 陈斯勇 +4 位作者 边涛 伊瑶 王锋 邱丰 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期5-7,共3页
目的构建细胞程序死亡因子1配体1(PD—L1)的重组表达质粒,在原核系统中表达并分析其生物学活性。方法经密码子优化后合成PD—L1全基因序列,构建硫氧还原蛋白.pET43b/(PD.L1)重组表达质粒并在大肠埃希菌中表达;用ELISA验证表... 目的构建细胞程序死亡因子1配体1(PD—L1)的重组表达质粒,在原核系统中表达并分析其生物学活性。方法经密码子优化后合成PD—L1全基因序列,构建硫氧还原蛋白.pET43b/(PD.L1)重组表达质粒并在大肠埃希菌中表达;用ELISA验证表达产物与其受体结合的生物学活性。结果正确构建了PD—L1重组表达质粒及其大肠埃菌基因工程菌,能稳定、高效地表达目的蛋白,相对分子质量为47×10^3,目的蛋白能与其受体特异性结合。结论成功获得有生物学活性的PD-L1重组蛋白,为研制单克隆抗体及其与病毒感染慢性化的关系提供基础条件。 展开更多
关键词 密码子 细胞死亡 重组蛋白质类 硫氧还蛋白
乙肝疫苗长期免疫地区低龄人群乙型肝炎病毒基因序列与突变现状 被引量:3
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作者 边涛 张勇 +5 位作者 曹彦强 王继杰 沈立萍 王峰 王岳 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期205-207,共3页
目的 通过乙型肝炎流行病学调查和病毒基因检测,了解乙肝疫苗长期免疫地区低年龄人群的基因序列与突变特征。方法 从乙肝监测点收集乙型肝炎病毒表面抗原阳性血清,取其中年龄小于16岁者,扩增包括preS和S基因在内的基因序列片段,共1... 目的 通过乙型肝炎流行病学调查和病毒基因检测,了解乙肝疫苗长期免疫地区低年龄人群的基因序列与突变特征。方法 从乙肝监测点收集乙型肝炎病毒表面抗原阳性血清,取其中年龄小于16岁者,扩增包括preS和S基因在内的基因序列片段,共1100碱基,序列测定后与标准基因型别比较,确定病毒基因及血清型别,确定a抗原决定簇的氨基酸替代突变发生率,选取一株病毒进行全基因扩增、克隆和序列测定。结果 共检测样本35例,33例血清扩增出乙肝病毒基因序列,其中30例乙型肝炎病毒基因型为B型,占90.9%,3例乙型肝炎病毒基因型为C型,占9.0%,1例血清型为ayw,3例为adr,其余29例为adw,共有5例在a抗原决定簇发生氨基酸替代突变,发生率约为15.2%。其中5856号血清扩增乙型肝炎病毒全基因为B型,血清型为adw,共3215个碱基。结论 该地区乙型肝炎基因型主要为B型,血清型为adw,人群中a抗原决定簇某些位点已发生与疫苗免疫逃逸相关的突变。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 基因型 血清分型 突变
乙型肝炎病毒表面抗原基因点突变对HBsAg抗原性的影响 被引量:1
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作者 郭敏卓 伊瑶 +3 位作者 陈斯勇 白玉 贾志远 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期48-50,共3页
目的研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)常见基因点突变对HBsAg抗原性的影响,了解我国目前常用的HBsAg检测试剂对HBVS基因突变株的检测灵敏性,减少漏检,有效控制乙肝病毒(HBV)感染的传播。方法构建HBsAg重组野毒株和重组变异株表... 目的研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)常见基因点突变对HBsAg抗原性的影响,了解我国目前常用的HBsAg检测试剂对HBVS基因突变株的检测灵敏性,减少漏检,有效控制乙肝病毒(HBV)感染的传播。方法构建HBsAg重组野毒株和重组变异株表达质粒,分别将重组野毒株HBsAg表达质粒pSS1adw2及pSS1adr和重组变异株HBsAg表达质粒pSS1adw2-145Arg、pSS1ad-126Ser和pSS1adr-126Asn转染COS-7细胞,进行瞬时转染。采用市售HBsAg ELISA检测试剂盒对细胞上清进行抗原性检测。结果野毒株HBsAg和两种126位变异株HBsAg具有较好的抗原性;145位点突变后导致HBsAg的抗原性下降。结论推测是由于145位点变异影响了“a”抗原决定簇的空间结构,从而降低了其与抗-HBs的结合能力。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 肝炎表面抗原 乙型 变异(遗传学) 抗原
乙肝母婴阻断“成功”儿童外周血中检出HBVDNA 被引量:1
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作者 张爽 边涛 +3 位作者 王锋 沈立萍 闫虹霞 张勇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期214-215,共2页
目的 检测乙型肝炎母婴阻断成功儿童血清HBVDNA,提出应该完善母婴阻断效果评价指标的建议。方法 采集乙肝疫苗母婴阻断后HBsAg阴性的儿童血清标本,经试剂盒提取HBVDNA,采用巢式PCR方法扩增HBVDNAS区基因片段后纯化测序。结果 140例... 目的 检测乙型肝炎母婴阻断成功儿童血清HBVDNA,提出应该完善母婴阻断效果评价指标的建议。方法 采集乙肝疫苗母婴阻断后HBsAg阴性的儿童血清标本,经试剂盒提取HBVDNA,采用巢式PCR方法扩增HBVDNAS区基因片段后纯化测序。结果 140例儿童血标本中,12例HBVDNA阳性,阳性率8.6%;S基因测序检测未发现突变株。结论 鉴于血清学检测方法敏感性低于PCR扩增方法,在评价乙型肝炎母婴阻断效果时,加入HBVDNA指标,可使其更完善。 展开更多
关键词 疾病传播 垂直 肝炎病毒 乙型 肝炎表面抗原 乙型
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