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酵母表达的重组戊型肝炎病毒结构区ORF2蛋白的抗原性鉴定 被引量:2
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作者 佟玉品 毕胜利 +2 位作者 鲁健 江永珍 詹美云 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期 258-261,共4页
目的对应用巴氏毕赤酵母表达系统制备的重组戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2蛋白的抗原性进行鉴定.方法以原核细胞表达的重组HEV ORF2抗原作为对照,应用间接ELISA方法鉴定重组HEV ORF2蛋白在HEV IgM和IgG抗体检测中的特异性和敏感性;并测... 目的对应用巴氏毕赤酵母表达系统制备的重组戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2蛋白的抗原性进行鉴定.方法以原核细胞表达的重组HEV ORF2抗原作为对照,应用间接ELISA方法鉴定重组HEV ORF2蛋白在HEV IgM和IgG抗体检测中的特异性和敏感性;并测定不同保存时间对抗原稳定性的影响.同时,比较了两种重组抗原与国外5株HEV ORF2单克隆抗体的反应特性.结果应用酵母抗原可检测到HEV抗体的最低包被量为12.5 ng/ml,可检测到HEV IgM、IgG抗体的血清最大稀释度皆为1:5 120.重组蛋白与其他类型肝炎患者血清无交叉反应,37℃加速试验证实重组蛋白4℃保存12个月可保持良好的抗原性.各株单克隆抗体与酵母表达的HEV ORF2蛋白有更好的反应性,其中4B2、2E2与酵母表达的HEV ORF2蛋白的反应性比与原核表达抗原的反应性分别高出125倍和25倍.结论应用巴氏毕赤酵母表达系统制备的重组HEV ORF2蛋白可能包含了更为广泛的构象依赖性抗原表位,具有良好抗原性、特异性和稳定性.提示其可作为开发戊型肝炎诊断试剂的一个独具优势的候选抗原. 展开更多
关键词 酵母 重组戊型肝炎病毒 ORF2蛋白 抗原 ELISA 戊型肝炎
莱姆病螺旋体P39蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的高效表达 预览 被引量:1
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作者 佟玉品 毕胜利 《中国人兽共患病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期 9-11,共3页
克隆并表达我国莱姆病螺旋体分离株BmpA即P39基因,为制备莱姆病螺旋体基因工程重组抗原以用于我国现的基础与临床诊断研究奠定基础。方法应用PCR方法及蔑理组技术对我国莱现螺旋体分离株P39蛋白进行全基因克隆,并在此基... 克隆并表达我国莱姆病螺旋体分离株BmpA即P39基因,为制备莱姆病螺旋体基因工程重组抗原以用于我国现的基础与临床诊断研究奠定基础。方法应用PCR方法及蔑理组技术对我国莱现螺旋体分离株P39蛋白进行全基因克隆,并在此基础上去掉信号肽序列,将P39基因插入原核表达载体LKB2,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。表达产物以SDS-PAGE电泳、Western blot、薄层扫描分析。结果成功地 展开更多
关键词 伯氏疏螺旋体 BmpA基因 莱姆病 P39蛋白
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