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抗肠道病毒EV71型外壳蛋白VP1单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:2
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作者 伊瑶 郭敏卓 +5 位作者 沈心亮 余陶 贾志远 毕胜利 李秀玲 陈斯勇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期62-64,共3页
目的制备具有中和活性的抗肠道病毒EV71型外壳蛋白VP1的单克隆抗体。方法人工合成SP55和SP70(分别包含VP1的第163~177,208—222位氨基酸)两段VP1的多肽,分别免疫BALB/c小鼠,常规杂交瘤技术进行细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验... 目的制备具有中和活性的抗肠道病毒EV71型外壳蛋白VP1的单克隆抗体。方法人工合成SP55和SP70(分别包含VP1的第163~177,208—222位氨基酸)两段VP1的多肽,分别免疫BALB/c小鼠,常规杂交瘤技术进行细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性杂交瘤细胞并测定效价。用分泌的单抗和EV71病毒在RD细胞上进行中和试验以检验其中和活性。结果得到2株能稳定分泌抗肠道病毒EV71型VP1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,2株单抗的中和效价分别为1:8和1:16。结论成功制备出2株具有中和活性的抗肠道病毒EV71型VP1蛋白单克隆抗体,为其下一步应用打下基础。 展开更多
关键词 肠道病毒属 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定
表位依赖型急性期戊型肝炎诊断抗原的制备与抗原性分析 被引量:1
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作者 苏秋东 郭敏卓 +4 位作者 伊瑶 邱丰 田瑞光 毕胜利 贾志远 《国际病毒学杂志》 2017年第1期9-12,共4页
目的原核表达制备表位依赖型戊型肝炎诊断抗原,并对其抗原性及其在急性戊肝诊断的性能进行评价。方法以包含密码子优化的GST、HEV优势表位的H15质粒为模板,PCR获取GST-HEV优势表位片段,将其插人表达质粒pET43.1a中,在大肠杆菌中进... 目的原核表达制备表位依赖型戊型肝炎诊断抗原,并对其抗原性及其在急性戊肝诊断的性能进行评价。方法以包含密码子优化的GST、HEV优势表位的H15质粒为模板,PCR获取GST-HEV优势表位片段,将其插人表达质粒pET43.1a中,在大肠杆菌中进行表达;利用亲和层析和阴离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blotting技术对目的蛋白抗原性进行鉴定;建立HEV-IgM抗体检测ELISA方法,初步评价其对阴、阳血清样本的鉴别能力。结果获取高度均质的表位依赖型急性戊肝诊断抗原;WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被戊肝急性期血清相应抗体所识别;分别对60份戊肝急性期血清、阴性血清进行检测,发现其与临床和实验室诊断结果一致性较高。结论原核表达与层析纯化可以获取抗原性优异的表位依赖型急性戊肝诊断抗原,偶联HRP后可应用于HEV-IgM ELISA血清学检测。 展开更多
关键词 多表位抗原 戊型肝炎病毒 原核表达 层析纯化 偶联反应
人白细胞介素12在哺乳动物细胞中的稳定表达及其生物活性的研究 预览 被引量:2
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作者 焦宏远 詹美云 +5 位作者 郭敏卓 伊瑶 丛郁 田瑞光 张文英 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 235-237,共3页
目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切人位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺... 目的采用遗传基因工程方法获得具有生物活性的人白细胞介素12,探索其治疗肿瘤和慢性肝炎的可行性。方法采用已克隆的国人IL-12基因序列,利用内部核糖体切人位点(IRES)完成IL-12P35、P40双亚基共表达载体的构建,通过转染CHODHFR缺陷细胞,双抗夹心ELISA法筛选阳性克隆,MTX加压扩增,PCR检测其基因整合,T淋巴细胞增殖和诱生γ干扰素实验检测其生物活性。结果获得了稳定高效表达人IL-12的工程细胞系,表达产物为70×10^3左右的糖蛋白。结论本研究得到的基因重组人IL-12具有良好的生物活性,有强的诱导产生γ干扰素的能力和诱导活化T淋巴细胞增殖能力。 展开更多
关键词 白细胞介素12 细胞系 哺乳动物 重组蛋白质类
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自发生物素化风疹病毒重组诊断抗原的制备 被引量:2
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作者 苏秋东 郭敏卓 +7 位作者 邱丰 贾志远 卢学新 孟庆玲 田瑞光 高燕 毕胜利 伊瑶 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期236-240,共5页
目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒(Rubella Virus,RV)重组抗原E1(RV-E1),并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物(BSP)插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)插入到R... 目的 获取原核表达过程中自发生物素化的风疹病毒(Rubella Virus,RV)重组抗原E1(RV-E1),并初步评价其抗原性.方法 将2×BirA酶底物(BSP)插入到RV-E1抗原优势表位区域aa 148-295的羧基端,硫氧还蛋白(Thioredoxin,TRX)插入到RV-E1的氨基端,密码子优化后全基因合成;在大肠埃希进行表达,并利用亲和层析和离子交换层析纯化获取生物素化的RV-E1抗原;利用Western Blotting技术对目的蛋白进行鉴定,并建立风疹病毒IgM抗体检测方法,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的生物素化的可溶性RV-E1抗原,WB实验表明目的蛋白不但可以被RV-E1抗原和TRX抗原单克隆抗体识别,而且可以被标记HRP的链霉亲和素所识别.分别对50份风疹病毒感染阳性血清、阴性血清和健康人血清进行检测,发现一致性优异.结论 RV-E1诊断抗原携带BSP,可以在大肠埃希菌表达过程中自发共价结合生物素分子,并可以作为新型诊断抗原应用于生物素-亲和素ELISA血清学检测中. 展开更多
关键词 BirA酶底物 风疹病毒E1抗原 原核表达 生物素化抗原
食用变质鲐鱼引起急性组胺中毒87例报告 被引量:2
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作者 崔成祥 于夕娟 曹珊珊 《预防医学论坛》 2012年第10期781-782,共2页
[目的]查明食物中毒发生的原因,防止类似事件发生。[方法]对就餐现场卫生状况、流行病学进行调查,采集6份样品,按照GB/T5009.45-2003《水产品卫生标准的分析方法》中4.4组胺测定方法进行实验室检测。[结果]300人就餐,87名发病,... [目的]查明食物中毒发生的原因,防止类似事件发生。[方法]对就餐现场卫生状况、流行病学进行调查,采集6份样品,按照GB/T5009.45-2003《水产品卫生标准的分析方法》中4.4组胺测定方法进行实验室检测。[结果]300人就餐,87名发病,罹患率为29.00%。87例病人有共同午餐史,临床表现为头晕、头痛、恶心、面色潮红、胸闷等不适症状。剩余食品鲐鱼检出超标组胺382.0mg/100g。[结论]该事件是食用变质鲐鱼引起的急性组胺中毒。 展开更多
关键词 鲐鱼 组胺 食物中毒
b型流感嗜血杆菌D蛋白原核可溶性表达研究 被引量:1
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作者 尹梦梦 苏秋东 +9 位作者 郭敏卓 寸怡娜 普元倩 贾志远 杨景然 汤洋 廖国阳 伊瑶 毕胜利 李卫东 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2013年第2期89-91,共3页
目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化人感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白,经过... 目的通过原核表达系统可溶性表达重组D蛋白,为多糖结合疫苗的制备提供蛋白载体。方法将HibCMCC株基因组DNA中去除信号肽的hpd基因片段插入pET43.1a表达质粒,转化人感受态大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白,经过硫酸铵沉淀和DEAE阴离子交换柱层析纯化后,用WesternBlot的方法鉴定其免疫反应原性。结果表达的重组蛋白以可溶性形式存在,表达量约占菌株总蛋白的44%,经过初步纯化后的重组蛋白可以和Hib抗血清发生特异性反应。结论成功构建了D蛋白重组表达质粒,并在原核细胞中以可溶性形式表达出具有良好免疫反应原性的D蛋白。 展开更多
关键词 蛋白质 表达的序列标 嗜血菌 流感 b型
重组风疹病毒外膜蛋白E1的表达及其在血清学中的初步应用 被引量:1
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作者 伊瑶 郭敏卓 +3 位作者 余陶 许文波 杨进业 陈斯勇 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期382-384,共3页
目的在大肠埃希菌中表达重组风疹病毒外膜蛋白E1,用其作为包被抗原,建立一种用于诊断风疹病毒感染的ELISA检测方法。方法通过基因重组的方式构建表达质粒并在大肠埃希菌中表达风疹病毒外膜蛋白E1,蛋白纯化后作为包被抗原,用ELISA的... 目的在大肠埃希菌中表达重组风疹病毒外膜蛋白E1,用其作为包被抗原,建立一种用于诊断风疹病毒感染的ELISA检测方法。方法通过基因重组的方式构建表达质粒并在大肠埃希菌中表达风疹病毒外膜蛋白E1,蛋白纯化后作为包被抗原,用ELISA的方法检测世界卫生组织(WHO)的风疹检测质控血清以及来自广西桂林的未知血清样本。结果采用WHO用于风疹检测的质控血清对所表达的重组抗原的抗原性进行鉴定,通过试验,特异性、敏感性均为100%。用表达的抗原对来自我国广西的200份未知血清样本进行风疹病毒外膜蛋白抗体的检测,阳性率为93%,与文献报道的我国其他地区风疹病毒抗体阳性率基本一致。结论通过实验我们表达了具有良好抗原性的风疹病毒外膜蛋白E1,为进一步研究风疹病毒感染的实验室诊断技术奠定了基础。 展开更多
关键词 风疹病毒 基因表达 酶联免疫吸附测定 流行病学
乙型肝炎病毒表面抗原基因点突变对HBsAg抗原性的影响 被引量:1
8
作者 郭敏卓 伊瑶 +3 位作者 陈斯勇 白玉 贾志远 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期48-50,共3页
目的研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)常见基因点突变对HBsAg抗原性的影响,了解我国目前常用的HBsAg检测试剂对HBVS基因突变株的检测灵敏性,减少漏检,有效控制乙肝病毒(HBV)感染的传播。方法构建HBsAg重组野毒株和重组变异株表... 目的研究乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)常见基因点突变对HBsAg抗原性的影响,了解我国目前常用的HBsAg检测试剂对HBVS基因突变株的检测灵敏性,减少漏检,有效控制乙肝病毒(HBV)感染的传播。方法构建HBsAg重组野毒株和重组变异株表达质粒,分别将重组野毒株HBsAg表达质粒pSS1adw2及pSS1adr和重组变异株HBsAg表达质粒pSS1adw2-145Arg、pSS1ad-126Ser和pSS1adr-126Asn转染COS-7细胞,进行瞬时转染。采用市售HBsAg ELISA检测试剂盒对细胞上清进行抗原性检测。结果野毒株HBsAg和两种126位变异株HBsAg具有较好的抗原性;145位点突变后导致HBsAg的抗原性下降。结论推测是由于145位点变异影响了“a”抗原决定簇的空间结构,从而降低了其与抗-HBs的结合能力。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 肝炎表面抗原 乙型 变异(遗传学) 抗原
肝病毒表面抗原“a”决定簇病毒样颗粒的构建和鉴定 被引量:1
9
作者 陈斯勇 郭敏卓 +6 位作者 邱丰 费永亮 伊瑶 郭瑜 贾志远 余陶 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期30-32,共3页
目的 构建一个以乙肝核心抗原为骨架的病毒样颗粒,乙肝表面抗原"a"决定簇呈现在该病毒样颗粒的表面.方法 乙肝adr血清型的HBsAg蛋白"a"抗原决定簇(aa139~148,CSKPTDGNCT)插入到HBcAg的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子... 目的 构建一个以乙肝核心抗原为骨架的病毒样颗粒,乙肝表面抗原"a"决定簇呈现在该病毒样颗粒的表面.方法 乙肝adr血清型的HBsAg蛋白"a"抗原决定簇(aa139~148,CSKPTDGNCT)插入到HBcAg的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后基因合成,酶切后连接到表达载体上,在大肠埃希菌中进行表达,纯化后对蛋白进行电镜观察、ELISA检测抗原性、免疫兔后检测免疫原性.结果 构建得到预期的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达,纯化后电镜观察为病毒样颗粒,ELISA检测证实具有良好的抗原性和免疫原性.结论 成功获得预期的带乙肝表面抗原"a"决定簇的病毒样颗粒,为其应用奠定基础. 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 表位 病毒粒子
程序死亡蛋白1基因的克隆及原核表达 被引量:1
10
作者 陈斯勇 关坤萍 +5 位作者 郭敏卓 伊瑶 贾志远 余陶 郭瑜 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期33-35,共3页
目的克隆人程序死亡蛋白(PD-1)基因并构建PD-1蛋白的原核表达质粒,在大肠埃希菌中进行表达。方法用RT-PCR的方法从慢性乙肝患者外周血淋巴细胞总RNA中逆转录得到PD-1基因的eDNA,构建PD-1基因的原核表达质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3... 目的克隆人程序死亡蛋白(PD-1)基因并构建PD-1蛋白的原核表达质粒,在大肠埃希菌中进行表达。方法用RT-PCR的方法从慢性乙肝患者外周血淋巴细胞总RNA中逆转录得到PD-1基因的eDNA,构建PD-1基因的原核表达质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3)中进行表达并纯化。用SDS-PAGE、DNA测序、氨基酸测序等方法对表达蛋白进行鉴定。结果克隆到PD-1基因编码区全长序列eDNA,经DNA测序与已报道的序列同源性达99.8%。构建得到PD-1的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达,纯化获得纯度较高的PD-1蛋白。氨基酸测序证明表达蛋白的正确性。结论成功克隆人PD-1基因,在大肠埃希菌中获得表达,得到纯化的PD-1蛋白,为进一步研究PD-1蛋白的功能及应用打下基础。 展开更多
关键词 程序死亡蛋白1 逆转录聚合酶链反应 基因 克隆 分子
丹参注射液对细菌性脑炎患儿血清NSE和D-二聚体的影响
11
作者 曹姗姗 李希红 +1 位作者 杨琳 陈述英 《泰山医学院学报》 CAS 2017年第2期186-187,共2页
目的探讨丹参注射液对细菌性脑炎患儿血清NSE和D二聚体的影响。方法将56例细菌性脑炎患儿随机分为对照组和治疗组,每组28例。对照组给予常规综合治疗,治疗组采用在常规综合治疗基础上加用丹参注射液治疗,对两组患儿的血清NSE和D-二聚体... 目的探讨丹参注射液对细菌性脑炎患儿血清NSE和D二聚体的影响。方法将56例细菌性脑炎患儿随机分为对照组和治疗组,每组28例。对照组给予常规综合治疗,治疗组采用在常规综合治疗基础上加用丹参注射液治疗,对两组患儿的血清NSE和D-二聚体进行检测。另选28例健康儿童做对照研究。结果丹参注射液治疗组的血清NSE和D-二聚体水平较对照组明显降低(P〈0.05)。结论复方丹参可以提高细菌性脑炎患儿的临床疗效,减少后遗症的发生。 展开更多
关键词 丹参注射液 细菌性脑炎 NSE D-二聚体
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河南省人民医院门诊患者戊型病毒性肝炎的阳性率调查
12
作者 许泼男 郭敏卓 +4 位作者 伊瑶 田瑞光 余陶 贾志远 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2014年第4期294-295,共2页
目的 通过检测部分门诊病例血清的戊型肝炎病毒标志物(HEV IgG),简要描述本地区的戊型病毒性肝炎的感染水平.方法 收集河南省人民医院内科门诊病例血清415份,应用万泰公司的戊型病毒性肝炎诊断试剂盒进行ELISA检测,检测结果进行统计... 目的 通过检测部分门诊病例血清的戊型肝炎病毒标志物(HEV IgG),简要描述本地区的戊型病毒性肝炎的感染水平.方法 收集河南省人民医院内科门诊病例血清415份,应用万泰公司的戊型病毒性肝炎诊断试剂盒进行ELISA检测,检测结果进行统计学分析,对不同分组进行x2检验.结果 415例门诊病例的HEV阳性率为21.93%,在性别间、年龄分组间,差异有统计学意义,而在城乡间的差别无统计学意义.结论 我市的戊型病毒性肝炎阳性率处于全国HEV感染率的平均水平,成人的HEV阳性率显著性高于青少年.在低年龄阶段进行有效的疫苗接种,可以控制戊型病毒性肝炎在我省的流行. 展开更多
关键词 肝炎 戊型 肝炎病毒 戊型 流行病学
基因优化对基因工程丁型肝炎小抗原蛋白表达和纯化的影响
13
作者 丁军颖 孟庆玲 +5 位作者 郭敏卓 伊瑶 苏秋东 卢学新 邱丰 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2012年第5期335-337,共3页
目的探讨基因优化对基因工程丁型肝炎(丁肝)小抗原蛋白表达和纯化的影响。方法依据GenBank上的丁肝小抗原原始基因,参照大肠埃希菌优势密码子谱进行优化;再分别将优化前后的两组基因进行常规原核表达,用SDS—PAGE电泳比较目的蛋白... 目的探讨基因优化对基因工程丁型肝炎(丁肝)小抗原蛋白表达和纯化的影响。方法依据GenBank上的丁肝小抗原原始基因,参照大肠埃希菌优势密码子谱进行优化;再分别将优化前后的两组基因进行常规原核表达,用SDS—PAGE电泳比较目的蛋白表达量及优势表达方式;进一步以柱层析进行纯化,再以Image Lab软件分析SDS-PAGE电泳条带,比较两组目的蛋白的纯度。结果SDS-PAGE显示,两组表达的目的蛋白均与预期相对分子质量大小一致,优化基因组的蛋白表达量高于原始基因组,且更倾向于可溶性表达;经柱层析纯化后,前者的目的蛋白纯度也明显高于后者,可达96.3%。结论基因优化可提高基因工程丁肝小抗原蛋白表达量,增加可溶性蛋白的比例;且表达产物更易纯化至较高纯度以供诊断使用。 展开更多
关键词 基因 肝炎 丁型 表达的序列标记
一种改良的环介导恒温扩增技术在甲型肝炎病毒核酸检测上的应用
14
作者 邱丰 郭敏卓 +4 位作者 丁军颖 伊瑶 贾志远 苏秋东 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期483-485,共3页
目的建立一种更加快速简便的环介导恒温扩增技术(LAMP)检测甲型肝炎病毒(HAV)。方法本研究通过在传统LAMP的基础上加入加速引物建立了一种改进型的LAMP体系。结果精确性和可重复性实验证实改进后的HAVLAMP检测体系稳定可靠,重复性... 目的建立一种更加快速简便的环介导恒温扩增技术(LAMP)检测甲型肝炎病毒(HAV)。方法本研究通过在传统LAMP的基础上加入加速引物建立了一种改进型的LAMP体系。结果精确性和可重复性实验证实改进后的HAVLAMP检测体系稳定可靠,重复性强,并且较传统的LAMP灵敏度更高,检测极限可以达到5TCID50/ml。当该方法用于甲型肝炎患者急性期血清临床样本的检测时,实验结果与TaqMan实时荧光定量PCR的检测结果一致。结论改进型的LAMP技术有望应用于HAV临床样本检测,同时也适用于HAV流行地区的病原学监测和调查。 展开更多
关键词 肝炎病毒 甲型 核酸扩增技术 敏感性与特异性
诊断用丁肝抗原的基因优化及其蛋白表达、纯化和鉴定
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作者 丁军颖 郭敏卓 +4 位作者 伊瑶 苏秋东 卢学新 邱丰 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期 87-89,共3页
目的获取有生物活性的丁肝抗原蛋白,探讨其作为诊断试剂的应用价值。方法经密码子优化,合成人工编码的丁肝抗原基因序列;以M48作为表达载体,构建带有硫氧还蛋白的重组表达质粒;在大肠埃希氏菌中经IPTG诱导表达;以亲和层析纯化并以... 目的获取有生物活性的丁肝抗原蛋白,探讨其作为诊断试剂的应用价值。方法经密码子优化,合成人工编码的丁肝抗原基因序列;以M48作为表达载体,构建带有硫氧还蛋白的重组表达质粒;在大肠埃希氏菌中经IPTG诱导表达;以亲和层析纯化并以ELISA鉴定该蛋白。结果酶切鉴定构建的质粒正确;SDS—PAGE结果显示表达和纯化的外源蛋白与预期相对分子质量大小一致;ELISA鉴定该蛋白有与丁肝抗体特异性结合的活性。结论成功获得有生物活性的可供诊断用的丁肝抗原蛋白,为丁肝诊断试剂的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 基因 硫氧还蛋白 色普法 肝炎 丁型
两种嵌合乙型肝炎病毒preSl中和表位的乙肝核心病毒样颗粒的制备与抗原性分析
16
作者 苏秋东 郭敏卓 +5 位作者 伊瑶 陈斯勇 贾志远 卢学新 邱丰 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期336-339,共4页
目的构建嵌合preSl2147位氨基酸(aa)、以全长乙肝病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3,并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插... 目的构建嵌合preSl2147位氨基酸(aa)、以全长乙肝病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)为骨架的病毒样颗粒H2和嵌合preSlaa37-45、以截断HBcAg为骨架的病毒样颗粒H3,并对比其抗原性。方法将HBVadr血清型preSl中和表位aa2147和aa37-45分别插入到全长HBc(aa1—183)和截断HBc(8a1—144)的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后全基因合成,目的片段经双酶切(NdeI和XhoI)回收后连接到同样处理的pET43.1a载体上,在大肠埃希菌E.coliBL21(DE3)中表达,精细纯化后通过电镜观察蛋白形态、ELISA以及WesternBlott检测其抗原性。结果成功构建表达质粒H2和H3,并在BL21(DE3)中高效表达和自发组装成病毒样颗粒。纯化后电镜观察H2和H3形态为二十面体立体对称样病毒样颗粒,H2为实心颗粒,直径为(31.61±1.27)nm,H3为空心颗粒,直径为(28.46±1.16)nm。统计分析可得H2直径要比H3直径大(P〈0.01)。ELISA和WesternBlott检测结果证实其插入表位preSl以及载体蛋白HBc的抗原性。结论成功获得两种嵌合HBVpreSl中和表位的病毒样颗粒,为其在疫苗研究中的应用探索奠定基础。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 表位 病毒核心蛋白质类 病毒样颗粒
高效表达乙型肝炎病毒表面抗原的CHO细胞株的建立
17
作者 伊瑶 郭敏卓 +6 位作者 田瑞光 苏秋东 卢学新 邱丰 周文亭 贾志远 毕胜利 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期289-291,共3页
目的探索乙型肝炎病毒表面抗原(s)基因在CHO无血清细胞培养系统中的高效表达。方法构建包含乙肝病毒s基因的质粒,转染CHO细胞,经MTX筛选后对培养液上清中的表达产物进行血清学检测以及形态学的观察。结果获得了能高效稳定表达HBsAg... 目的探索乙型肝炎病毒表面抗原(s)基因在CHO无血清细胞培养系统中的高效表达。方法构建包含乙肝病毒s基因的质粒,转染CHO细胞,经MTX筛选后对培养液上清中的表达产物进行血清学检测以及形态学的观察。结果获得了能高效稳定表达HBsAg的CHO细胞株,电镜下可观测到小球型和管型颗粒,ELISA检测表达产物滴度达到1:5000。结论成功构建高效表达乙型肝炎病毒s蛋白的CHO无血清培养细胞株,表达的HBsAg具有良好的抗原活性。 展开更多
关键词 肝炎病毒 乙型 肝炎表面抗原 乙型 细胞培养
2012年某科研单位职工体检状况分析
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作者 曹姗姗 李希红 《泰山医学院学报》 2013年第9期705-706,共2页
近年来伴随饮食结构及生活方式的变化,各种疾病的发病率也在逐年上升。健康查体是发现疾病的重要方式,通过对身体各个重要的器官定期进行功能检查,及时了解到自己的健康状况,查出早期病变,做到早期诊断,早期预防,早期治疗,以保证身体健... 近年来伴随饮食结构及生活方式的变化,各种疾病的发病率也在逐年上升。健康查体是发现疾病的重要方式,通过对身体各个重要的器官定期进行功能检查,及时了解到自己的健康状况,查出早期病变,做到早期诊断,早期预防,早期治疗,以保证身体健康。本文通过对某科研单位482名职工体检资料及其各种相关因素进行分析, 展开更多
关键词 职工 健康现状 体检 健康教育
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