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中国女性宫颈人乳头瘤病毒感染型别分布区域性特征的Meta分析 被引量:20
1
作者 张靖 高波 +2 位作者 康赟 马智静 李启明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期913-920,共8页
目的:了解中国女性宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及型别分布特征。方法以PubMed、中国知网、万方数据库为检索源,系统检索2004—2013年公开发表的中英文文献,摘录相关信息。分别将全国以及7个地理区域 HPV 感染研究的统计数据进... 目的:了解中国女性宫颈人乳头瘤病毒(HPV)感染状况及型别分布特征。方法以PubMed、中国知网、万方数据库为检索源,系统检索2004—2013年公开发表的中英文文献,摘录相关信息。分别将全国以及7个地理区域 HPV 感染研究的统计数据进行数据分析。结果符合纳入标准的数据覆盖全国所有省份和地区,样本量共计661658例,年龄范围16~87岁。共纳入文献245篇,我国女性人群宫颈 HPV 感染率为25.0%,感染率最高的6个高危型别依次为 HPV16、HPV52、HPV58、HPV18、HPV33和 HPV31。我国所有地区以 HPV16为主要感染型别,HPV52和 HPV58的检出率明显高于 HPV18,而 HPV35和 HPV45检出率较低。结论 HPV 感染型别分布有明显地域性,我国的统计数据与世界范围的统计数据有明显差异。我国7个地理区域间感染型别分布也有差异。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 型别 分布
批质量保证抽样的原理和方法 被引量:11
2
作者 罗凤基 袁立国 杨立清 《中国计划免疫》 2003年第5期307-310,共4页
1 批质量保证抽样(Lot quality asurance sampling,LQAS)的概念 LQAS最初是用于对工业产品进行质量监督的一种方法,20世纪80年代初开始用于卫生项目的监督与评价,特别是在计划免疫的接种率评价中,其作用更为突出.在LQAS中,所谓"批&... 1 批质量保证抽样(Lot quality asurance sampling,LQAS)的概念 LQAS最初是用于对工业产品进行质量监督的一种方法,20世纪80年代初开始用于卫生项目的监督与评价,特别是在计划免疫的接种率评价中,其作用更为突出.在LQAS中,所谓"批"是指在抽样研究中的一个已定义的组群单位,例如1个初级卫生保健单位(PHC)、1个乡和1个社区等.LQAS在抽样研究前事先需确定从每个"批"中抽样的数量和可允许的未接种人数的上限和/或下限标准,再通过抽样获得的样本来判定这个"批"是否符合既定的标准. 展开更多
关键词 批质量保证抽样 原理 计划免疫 接种率
生物制品的现状与展望 预览 被引量:8
3
作者 章金刚 倪道明 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2006年第5期 349-351,共3页
传统的生物制品主要是指疾病预防用的疫苗和少量的治疗性制荆,现代生物制品的概念几乎已是生物药品或生物技术产品的同义词。作为一门学科,生物制品学已经形成了一个独立的学科体系;作为一个产业,生物制药已经成为现代高新技术和生... 传统的生物制品主要是指疾病预防用的疫苗和少量的治疗性制荆,现代生物制品的概念几乎已是生物药品或生物技术产品的同义词。作为一门学科,生物制品学已经形成了一个独立的学科体系;作为一个产业,生物制药已经成为现代高新技术和生物技术发展的热点和重点。预计至2010年,全球生物技术相关药品将占药物市场的25%,其中重组蛋白药物的市场将达600亿美元,治疗性抗体市场将达121亿美元,基因及相关产品市场将达450亿美元。生物技术药物和疫苗市场将达1500亿美元。鉴于生物制品的范畴仍在扩展,笔者仅就预防性疫苗、治疗性疫苗、基因工程与转基因药物、工程抗体药物、血液制品与血液代用品等研发现状和未来前景做一介绍。 展开更多
关键词 生物制品 输血 疫苗
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科技期刊审稿专家的评价和改进措施 被引量:7
4
作者 刘凤华 陈立敏 李启明 《中国科技期刊研究》 CSSCI 北大核心 2016年第8期857-862,共6页
【目的】通过对审稿专家的评价进而提出优化审稿专家的措施。【方法】选取《中华微生物学和免疫学杂志》2011—2015年267位审稿专家7756条审稿记录,统计267位专家的审稿数量、审稿时滞及审稿结论。【结果】通过统计和分析,5年间审稿篇次... 【目的】通过对审稿专家的评价进而提出优化审稿专家的措施。【方法】选取《中华微生物学和免疫学杂志》2011—2015年267位审稿专家7756条审稿记录,统计267位专家的审稿数量、审稿时滞及审稿结论。【结果】通过统计和分析,5年间审稿篇次〉31篇的66位专家是期刊的核心审稿专家,其中,审稿时滞在3周以内的专家占92.5%;审稿时滞上,就所有专家而言,74.2%的能在3周内审回稿件;审稿结论上,拒审占5.0%,无具体审稿意见或审稿意见过简无针对性的占10.5%。【结论】要保证期刊的核心专家队伍,必须从专家和编辑两个层面进行改进。对专家适当取舍,保证核心审稿专家的数量;同时编辑应做好服务工作,重视专家的知识回报。 展开更多
关键词 科技期刊 审稿专家 审稿时滞 评价
基于血凝素的新型流感疫苗的研究进展 被引量:7
5
作者 李驰 冯靖 +1 位作者 杨春亭 许洪林 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期272-279,284共9页
现有流感疫苗虽然能够预防季节性流感,但不能有效防控流感大流行。在本世纪初人类社会面临H5N1禽流感和H1N1猪源流感等大流行威胁的前提下,欧美各国政府和疫苗企业加速了新型流感疫苗的研发进程。血凝素是现有流感疫苗的主要有效成分,... 现有流感疫苗虽然能够预防季节性流感,但不能有效防控流感大流行。在本世纪初人类社会面临H5N1禽流感和H1N1猪源流感等大流行威胁的前提下,欧美各国政府和疫苗企业加速了新型流感疫苗的研发进程。血凝素是现有流感疫苗的主要有效成分,也是诱生保护性抗体的主要抗原,因此成为新型流感疫苗抗原设计的热门靶点。本文就近年来基于血凝素的新型流感疫苗的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 流感病毒 血凝素 流感疫苗
轮状病毒疫苗研究进展 被引量:7
6
作者 王奔(综述) 唐玉龙(审校) 王宁(审校) 《国际生物制品学杂志》 CAS 2012年第4期178-181,共4页
轮状病毒是引起婴幼儿严重腹泻的主要原因,疫苗接种是预防轮状病毒感染的有效方法。此文讨论了轮状病毒的生物学和流行病学特征及轮状病毒疫苗的研究进展。
关键词 轮状病毒属 轮状病毒疫苗 腹泻 安全性
尿毒症和肾移植患者血清透明质酸的变化 预览 被引量:5
7
作者 王清涛 孟娟 +2 位作者 胡永翔 尹翼鸣 蒋盘宏 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期 28-30,共3页
目的测定血浆中透明质酸(HA)与尿毒症和肾移植患者病情变化的关系.方法采用竞争性酶联免疫吸附试验测定尿毒症组(A组)、肾移植组(B组)、正常对照组(C组)血浆HA水平,同时测定血清肌酐(SCr).结果血清HA水平A组(414.25±208.65 ng/ml)... 目的测定血浆中透明质酸(HA)与尿毒症和肾移植患者病情变化的关系.方法采用竞争性酶联免疫吸附试验测定尿毒症组(A组)、肾移植组(B组)、正常对照组(C组)血浆HA水平,同时测定血清肌酐(SCr).结果血清HA水平A组(414.25±208.65 ng/ml)高于B组[(69.57 ±46.28) ng/ml]和C组[(60.85 ±25.55) ng/ml](P<0.05);B组和C组比较差异无显著意义(P>0.05),与血肌酐呈正相关(r=0.87).同时A组患者血肌酐透析前后比较差异有显著意义[分别是透前(810.48±214.72)μmol/L透后(225.28±166.32)μmol/L,(P<0.05)];而血浆HA透析前后无变化[分别是透前(414.25±157.83) ng/ml]透后(402.34±125.67) ng/ml,(P>0.05)].结论血HA可作为评估尿毒症和肾移植患者病情变化的一个指标. 展开更多
关键词 尿毒症 血清 透明质酸 肾移植术
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肠道病毒71型中和抗体检测用标准病毒候选株的筛选及制备 被引量:3
8
作者 毛群颖 郭增兵 +8 位作者 郝春生 于丹 高帆 董承红 安文琪 高强 谢忠平 李秀玲 梁争论 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期 725-729,共5页
目的筛选并制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)中和抗体检测用标准病毒候选株,规范EV71中和抗体检测方法。方法通过对亲本株与非亲本株交叉中和试验,进行相应的几何平均滴度(GMT)比较,从10株EV71毒株中筛选出具有理想亲本中和... 目的筛选并制备肠道病毒71型(Enterovirus 71,EV71)中和抗体检测用标准病毒候选株,规范EV71中和抗体检测方法。方法通过对亲本株与非亲本株交叉中和试验,进行相应的几何平均滴度(GMT)比较,从10株EV71毒株中筛选出具有理想亲本中和能力、又具有较广泛交叉中和作用的毒株。筛选出的毒株按《中国药典》三部(2010版)相关要求,冷冻干燥后制备1批符合我国疾病流行特征的标准病毒候选株,联合3家实验室对候选株的病毒滴度进行协作标定,并初步应用于人血清样品的检测。结果筛选出交叉中和能力强、分离、传代背景清晰的EV71 V03株(523-07T)作为候选病毒株;制备的候选病毒株分装精确度、水分含量、无菌检查、支原体检查、其他外源因子检查等项目均符合《中国药典》三部(2010版)相关要求;经联合标定,候选毒株的平均病毒滴度为4.83 lgTCID50/ml(95%CI:4.53~5.12 lgTCID50/ml),变异系数为3.16%;应用候选毒株和中和抗体定值标准品检测EV71自然感染人血清样品,可将实验室间检测差异由4.4倍降至1.6倍。结论初步筛选出的候选株EV71/523-07T株具有理想的亲本株中和作用,又具有较广泛的交叉中和特性,有望成为EV71中和抗体检测的标准毒株候选株。 展开更多
关键词 肠道病毒A型 手足口病 中和抗体
PEG定点修饰重组人睫状神经营养因子及其生物活性评价 被引量:4
9
作者 冯翠 王祺 +5 位作者 张纯 秦培勇 郑秀玉 王健 刘永东 苏志国 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期15-21,共7页
采用分子质量为40kDa的马来酰亚胺聚乙二醇(mPEG-MAL),对重组人睫状神经营养因子突变体CNTF-C^12的第17位半胱氨酸巯基进行定点修饰,通过离子交换层析获得单修饰产物Mono-PEG-CNTF-C^12,并对其结构及体内外活性进行评价。实验结果... 采用分子质量为40kDa的马来酰亚胺聚乙二醇(mPEG-MAL),对重组人睫状神经营养因子突变体CNTF-C^12的第17位半胱氨酸巯基进行定点修饰,通过离子交换层析获得单修饰产物Mono-PEG-CNTF-C^12,并对其结构及体内外活性进行评价。实验结果表明,在pH7.5的Tfis-HCl缓冲液体中,蛋白质与修饰剂的为1:3,4℃下反应12h,修饰率可达到90%以上,修饰混合物通过一步阴离子交换层析可获得纯度98%以上的单修饰产物。荧光光谱(FL)及圆二色(CD)图谱显示Mono-PEG-CNTF-C^12与原蛋白二、三级结构一致。TF-1.CN5a.1细胞增殖活性检测表明,Mono-PEG-CNTF-C^17的比活达到了6.51×10^5IU/mg,体内循环半衰期相对原蛋白显著提高了30.3倍。该研究可为开发CNTF长效产品提供基础。 展开更多
关键词 马来酰亚胺聚乙二醇 CNTF-C^12 单修饰物 重组人睫状神经营养因子 分离纯化
冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗在流行区的人体反应及免疫效果 被引量:6
10
作者 郭绍红 殷纪牧 +5 位作者 陈海平 郑理 钱迟华 王文庆 董春明 迮文远 《中国计划免疫》 2002年第5期241-244,共4页
为了进一步观察冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的接种反应及免疫效果,在乙脑流行区江苏省苏州市吴中区选择6~18月龄未接种过乙脑疫苗的健康婴幼儿为观察对象,分别接种Vero细胞乙脑疫苗、原代地鼠肾细... 为了进一步观察冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的接种反应及免疫效果,在乙脑流行区江苏省苏州市吴中区选择6~18月龄未接种过乙脑疫苗的健康婴幼儿为观察对象,分别接种Vero细胞乙脑疫苗、原代地鼠肾细胞(PHK)乙脑灭活疫苗和乙脑减毒活疫苗.结果显示:接种Vero细胞乙脑疫苗第1剂后体温中、强反应率为12.4%,未见局部及其它不良反应;接种第2剂后无发热反应.用Vero细胞乙脑疫苗免疫2针后1个月,血清中和抗体阳转率和几何平均滴度(GMT)分别为100.0%和1∶27.7,显著高于PHK乙脑灭活疫苗和乙脑减毒活疫苗的免疫后血清学效果.用Vero细胞乙脑疫苗初免的儿童,1年后抗体阳性率与GMT分别为88.3%和1∶26.4,用同一种疫苗加强免疫后抗体阳性率与GMT分别为100.0%和1∶280.1.此外,用Vero细胞乙脑疫苗对该区的1~6岁已接种过乙脑疫苗的儿童进行加强免疫,结果显示:免疫前阳性率与GMT分别为68.2%和1∶10.2,免疫后阳性率为100.0%,GMT达1∶232.4,≥4倍增长率为98.5%,加强免疫前后差异显著.由此可见,用Vero细胞乙脑疫苗对儿童进行初免或加强免疫,除初免第1针有一过性发热外,无其它不良反应,血清学效果明显优于PHK乙脑灭活疫苗及乙脑减毒活疫苗,是一种安全有效的预防乙脑的免疫制剂. 展开更多
关键词 冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗 乳地鼠肾(BHK21)细胞蚀斑减少中和试验 免疫效果 人体反应 流行性乙型脑炎
一种重组人睫状神经营养因子突变体的分离纯化及结构鉴定 被引量:3
11
作者 冯翠 赵大伟 +4 位作者 张纯 王健 秦培勇 刘永东 苏志国 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期21-27,共7页
研究并建立从细胞破碎上清中获得一种含游离半胱氨酸的重组人睫状神经营养因子突变体(CNTF-C17)的分离纯化方法并对纯化产物的结构及活性进行表征。通过疏水层析、离子交换和亲和层析的组合层析路线,能实现目标蛋白与其它杂蛋白的有... 研究并建立从细胞破碎上清中获得一种含游离半胱氨酸的重组人睫状神经营养因子突变体(CNTF-C17)的分离纯化方法并对纯化产物的结构及活性进行表征。通过疏水层析、离子交换和亲和层析的组合层析路线,能实现目标蛋白与其它杂蛋白的有效分离。组合层析后CNTF-C17的纯化倍数可达11.4,收率35.5%。反相高效液相色谱和凝胶过滤层析证明产物纯度可达到98%以上,且以单体形式稳定存在,无分子间二硫键结合的二聚体。质谱测得产物分子量与理论值一致,圆二色光谱和荧光光谱证明纯化产物具有正确的二、三级结构,TF-1.CN5a.1细胞增殖活性检测表明纯化产物比活达到2.1×106 IU/mg。因此,为这种新的CNTF突变体规模化生产及后续应用奠定了基础。 展开更多
关键词 重组人睫状神经营养因子 半胱氨酸 可溶表达 分离纯化 组合层析
冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗在低流行区的人体反应及免疫效果 被引量:5
12
作者 郭绍红 闫绍宏 +5 位作者 陈海平 张双一 田美成 王文庆 董春明 迮文远 《中国计划免疫》 2002年第6期330-332,共3页
为了进一步观察冻干精制猴肾传代细胞(Vero细胞)流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的接种反应及免疫效果,在乙脑的低流行区内蒙古自治区选择6~9岁未接种过乙脑疫苗的健康儿童为观察对象,分别接种Vero细胞乙脑疫苗、原代... 为了进一步观察冻干精制猴肾传代细胞(Vero细胞)流行性乙型脑炎(乙脑)灭活疫苗(Vero细胞乙脑疫苗)的接种反应及免疫效果,在乙脑的低流行区内蒙古自治区选择6~9岁未接种过乙脑疫苗的健康儿童为观察对象,分别接种Vero细胞乙脑疫苗、原代地鼠肾细胞(PHK)乙脑灭活疫苗和乙脑减毒活疫苗.结果显示:接种第1剂Vero细胞乙脑疫苗后体温中、强反应率为5.6%,未见局部及其它全身反应,接种第2剂后只有1人为中反应;用Vero细胞乙脑疫苗基础免疫2针后1个月,血清中和抗体阳转率和几何平均滴度(GMT)分别为100.0%和1∶25.30,显著高于PHK乙脑灭活疫苗的56.8%和1∶8.83,亦显著高于乙脑减毒活疫苗1针免疫后的60.7%和1∶8.35;用Vero细胞乙脑疫苗基础免疫2针1年后中和抗体阳性率及GMT分别为50.0%和1∶7.42,加强免疫后中和抗体阳性率为100.0%,GMT达1∶220.1,≥4倍增长率为95.1%,加强免疫前后差异显著.由此可见,用Vero细胞乙脑疫苗对学龄儿童进行基础免疫或加强免疫,是安全有效的. 展开更多
关键词 流行性乙型脑炎 低流行区 冻干精制Vero细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗 BHK21细胞 蚀斑减少中和试验 免疫效果 人体反应
柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白的原核表达及其免疫原性 被引量:5
13
作者 杨永娟 郝春生 +5 位作者 李懿 宋冬梅 刘宇 马淑花 田龙 李秀玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期1-4,8共5页
目的原核表达柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus group A type 16,CA16)VP1蛋白,并检测其免疫原性。方法通过RT-PCR法从CA16病毒青岛株中扩增VP1基因,克隆至原核表达载体pET43.1a(+)中,构建重组表达质粒pET43.1a-VP1,转化感受态E.c... 目的原核表达柯萨奇病毒A组16型(Coxsackievirus group A type 16,CA16)VP1蛋白,并检测其免疫原性。方法通过RT-PCR法从CA16病毒青岛株中扩增VP1基因,克隆至原核表达载体pET43.1a(+)中,构建重组表达质粒pET43.1a-VP1,转化感受态E.coli Rossatte(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组CA16 VP1蛋白通过Ni柱亲和层析纯化后,采用不同剂量(5、10、20、40μg)免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3抗体效价,微量细胞病变抑制法检测血清中和抗体效价。结果重组表达质粒pET43.1a-VP1经双酶切及测序证实构建正确;表达的重组CA16 VP1蛋白相对分子质量约为34 000,主要以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的15%;纯化的重组CA16 VP1蛋白纯度可达95%以上,可与猴CA16抗血清反应;不同剂量的重组CA16 VP1蛋白免疫BALB/c小鼠,可诱导产生CA16特异性抗体,血清中总IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3抗体效价均明显高于对照组,且抗体效价与免疫剂量存在一定的量效关系;各剂量CA16 VP1组免疫小鼠血清中和抗体效价均小于1∶8。结论已成功在大肠杆菌中表达了重组CA16 VP1蛋白,纯化的重组蛋白可诱导小鼠特异性体液免疫应答,为进一步研究CA16的结构、功能及相关疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒A组16型 VP1蛋白 原核细胞 基因表达 免疫原性
高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定W135群和Y群脑膜炎球菌多糖中半乳糖和葡萄糖含量 被引量:4
14
作者 李冶珊 刘梅影 +2 位作者 陈敬 林海涛 王平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第4期553-557,共5页
目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培法(High-performance anion-exchange chromatography with pulsedamperometric detection,HPAEC-PAD)测定W135群和Y群脑膜炎球菌荚膜多糖中半乳糖和葡萄糖的含量,并对该方法进行验证及初步应用... 目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培法(High-performance anion-exchange chromatography with pulsedamperometric detection,HPAEC-PAD)测定W135群和Y群脑膜炎球菌荚膜多糖中半乳糖和葡萄糖的含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法多糖蛋白结合物原液的混合液经HCl水解处理后,进样CarboPac PA10柱,以氢氧化钠-醋酸钠梯度流洗,脉冲积分安培检测器检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密性及准确性验证,并进行初步应用。结果确定的样品水解条件为以2 mol/L HCl于85℃处理1 h。载体蛋白破伤风类毒素对检测结果无干扰;重复性、日内精密性和不同操作者之间精密性试验结果的RSD均小于5%;准确性试验中葡萄糖和半乳糖的回收率在90%~110%之间。HPAEC-PAD法测定多糖蛋白结合物原液的多糖含量与传统间苯二酚比色法测定结果相当;成品疫苗中的W135群和Y群多糖含量测定结果符合《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》的规定(均≥4μg/剂)。结论 HPAEC-PAD法专属性、精密性和准确性良好,可用于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗中W135群和Y群多糖含量的测定。 展开更多
关键词 高效阴离子交换色谱-脉冲安培法 脑膜炎球菌多糖疫苗 W135群 Y群 多糖含量
戊型肝炎疫苗评价用小鼠品系的比较
15
作者 苏瑶 林惠娟 +4 位作者 孙光 李媛媛 姜崴 吴星 梁争论 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2017年第8期785-787,799共4页
目的 比较不同品系及相同品系不同来源BALB/c小鼠对戊型肝炎疫苗(HE疫苗)的免疫应答,探讨适用于HE疫苗评价的小鼠品系,规范疫苗效力评价用动物。方法 分别用2家企业制备的HE疫苗免疫BALB/c、C57BL/6、KM和NIH 4种品系小鼠及3种不同公... 目的 比较不同品系及相同品系不同来源BALB/c小鼠对戊型肝炎疫苗(HE疫苗)的免疫应答,探讨适用于HE疫苗评价的小鼠品系,规范疫苗效力评价用动物。方法 分别用2家企业制备的HE疫苗免疫BALB/c、C57BL/6、KM和NIH 4种品系小鼠及3种不同公司来源的BALB/c小鼠,均免疫1针,28 d后采血,分离血清,检测抗体应答,计算效力ED50。结果 2家疫苗免疫C57BL/6、KM和NIH小鼠时,各剂量组均表现出敏感应答,提示C57BL/6、KM和NIH小鼠对本研究中的2家疫苗不能灵敏地反映出剂量变化趋势,不适用于HE疫苗效力评价;BALB/c小鼠对2家企业各剂量组HE疫苗均呈现良好的免疫应答,且呈明显的剂量效应关系。3种不同来源的BALB/c小鼠免疫HE疫苗后,抗体应答存在差异。结论 BALB/c小鼠可作为评价HE疫苗免疫原性和效力ED50的模型动物;应用BALB/c小鼠进行疫苗评价时需固定小鼠来源。 展开更多
关键词 戊型肝炎疫苗 效力试验 小鼠品系 小鼠来源
高效液相色谱法分析重组酿酒酵母表达的乙型肝炎表面抗原病毒样颗粒的结构性状 被引量:2
16
作者 孙玉杰 马锐 +8 位作者 马晓宇 刘旭 王瑜 盛玉博 王辉 黄浩 陈兴 赵铠 李津 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第12期1840-1843,共4页
目的 采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析重组酿酒酵母表达的乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构性状。方法 采用HPLC法,分别以... 目的 采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析重组酿酒酵母表达的乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)的结构性状。方法 采用HPLC法,分别以磷酸盐缓冲液和含去垢剂SDS的磷酸盐缓冲液为流动相,分析3批重组酿酒酵母表达的纯化HBsAg VLP的出峰规律。结果3批纯化的HBsAg样品在不含SDS的流动相条件下,均只在(15.39±0.01)min处出现单一的相对分子质量2 000 000的HBsAg VLP峰,峰面积积分百分含量为(100.00±0.0)%。3批纯化的HBsAg样品在含SDS的流动相条件下,在(15.07±0.02)min处出现相对分子质量2 000 000的HBsAg VLP峰,峰面积积分百分含量为(55.07±0.05)%;在(28.62±0.04)min处出现1个相对分子质量24 000的P24亚基多肽峰,峰面积积分百分含量为(44.93±0.04)%。结论HBsAg在常规保存条件下为P24亚基通过非共价键或(和)共价键聚合形成的相对分子质量为2 000 000的大分子蛋白颗粒,在含SDS的条件下,HBsAg颗粒可部分解聚为P24亚基。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 乙型肝炎表面抗原 病毒样颗粒 P24亚基
痘苗病毒滴度测定用国家标准品的制备 被引量:2
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作者 黄维金 朱蓉 +10 位作者 赵晨燕 徐静 万延民 齐影 刘强 王文波 温智恒 周艳 孟淑芳 俞永新 王佑春 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第9期1099-1101,1105共4页
目的制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品。方法以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2... 目的制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品。方法以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度设5个平行孔,计算各实验室检测结果的几何均数,对标准品中痘苗病毒滴度进行赋值。检测病毒标准品于不同温度下保存不同时间的稳定性,并对病毒标准品的各项质量指标进行检定。结果 4个实验室共测定44次,4个实验室间的检测结果差异无统计学意义(P〉0.05),各实验室检测结果的几何平均数为3.05×10^6PFU/ml,95%CI为2.00×10^6~4.65×10^6PFU/ml,标准差为0.09,总变异系数1.41%。制备的痘苗病毒标准品于4℃可稳定放置10 d,37℃放置稳定性较差。制备的痘苗病毒标准品装量检查合格(1 ml/支);pH值为6.9;无菌试验合格;分装重量精密性为0.95%。结论制备的痘苗病毒标准品可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。 展开更多
关键词 痘苗病毒 蚀斑滴定 标准品
人乳头瘤病毒18型融合蛋白和重组痘苗病毒联合免疫的效果评价
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作者 赵莉 任皎 +6 位作者 冯靖 庞正 黄盼盼 赵颖 谭文杰 阮力 田厚文 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期347-351,共5页
目的研究人乳头状瘤病毒18型(HPV18)融合蛋白和重组痘苗病毒联合免疫诱发小鼠产生的细胞免疫和体液免疫反应水平。 方法原核表达系统表达并纯化的HPV18L231-600E7E6融合蛋白与表达HPV18E7E6融合蛋白的重组痘苗病毒(rVV18E7E6)联合... 目的研究人乳头状瘤病毒18型(HPV18)融合蛋白和重组痘苗病毒联合免疫诱发小鼠产生的细胞免疫和体液免疫反应水平。 方法原核表达系统表达并纯化的HPV18L231-600E7E6融合蛋白与表达HPV18E7E6融合蛋白的重组痘苗病毒(rVV18E7E6)联合免疫C57BL/6小鼠,通过酶联免疫斑点法(ELISPOT)、ELISA和假病毒中和实验分别对不同免疫程序的免疫组诱发机体产生的细胞免疫和体液免疫应答进行评价。结果HPV18L231-600E7E6融合蛋白/CpG佐剂初免、重组痘苗病毒rVV18E7E6加强免疫的联合免疫方式可以诱发小鼠产生最强水平的T细胞免疫反应,同时可产生较高水平的结合抗体,并能检测到低水平中和抗体。结论以HPV18L231-600E7E6/CpG初免、重组痘苗病毒rVV18E7E6加强免疫的联合免疫策略诱导了较强的细胞免疫和体液免疫应答,可作为治疗HPV18型慢性感染和宫颈癌手术后辅助治疗的候选疫苗。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 宫颈肿瘤 疫苗 免疫治疗
诺如病毒样颗粒疫苗的研究进展
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作者 古琼 李启明 国泰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第7期542-548,共7页
人诺如病毒(Norovirus,NoV)是引发全球性人类非细菌性急性胃肠炎疾病的主要病原,由于无法进行细胞和小动物模型的培养限制了该疫苗的研发,无法利用传统的减毒活疫苗手段进行疫苗研发。以病毒样颗粒(vires like particle,VLP)为... 人诺如病毒(Norovirus,NoV)是引发全球性人类非细菌性急性胃肠炎疾病的主要病原,由于无法进行细胞和小动物模型的培养限制了该疫苗的研发,无法利用传统的减毒活疫苗手段进行疫苗研发。以病毒样颗粒(vires like particle,VLP)为代表的亚单位疫苗在NoV疫苗的研发过程中具有突出的优势。本文就利用不同表达系统进行NoV VLP疫苗的研发近况进行综述和展望。 展开更多
关键词 诺如病毒:病毒样颗粒 疫苗
肠道病毒71型灭活疫苗的小鼠细胞免疫效果 被引量:4
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作者 鲁卫卫 吴蕴怡 +5 位作者 郝春生 宋冬梅 马淑花 刘宇 陈蕾 李秀玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第1期1-8,共8页
目的评价肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1mg/m1)、不同剂型(含铝佐剂1mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV7... 目的评价肠道病毒71型(enterovirus71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1mg/m1)、不同剂型(含铝佐剂1mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV71灭活疫苗经腹腔免疫小鼠,0.5ml/只,均设铝佐剂对照组(仅注射铝佐剂1mg/m1)。采用经典小鼠树突状细胞(dendriticcell,DC)培养方法制备正常小鼠DC,瑞氏染色法检测细胞形态,流式细胞术分析其表型及纯度;免疫磁珠分选法(magneticactivatedcellsorting,MACS)分离小鼠脾脏CD4+,CD8+T淋巴细胞,流式细胞术检测细胞纯度。ELISPOT法检测各组免疫小鼠CD4+.CD8+T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFN-γ的水平;细胞因子试剂盒检测小鼠淋巴细胞培养上清及小鼠血清中细胞因子的水平。结果DC形态不规则,表面树枝状突起形态不同,细胞核较大且不规则;DC纯度为(81.39±9.24)%,可高水平表达MHⅡ(I-A/I-E)类分子,中度表达CD86和CD40。CD4+T,CD8+T细胞纯度分别为95.27%和94.08%。随着疫苗免疫剂量的增加,CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFM及CD8CF细胞分泌IFN'y的SFC显著增加,5μg/ml疫苗组达最大值,且明显高于其他组(P均〈0.05);5μg/ml疫苗组淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-5、TNF-α含量明显高于其他组(P〈0.05);1、2.5、5μg/ml疫苗组血清中IL-10含量明显高于铝佐剂对照组(P〈0.05),1μg/ml疫苗组明显低于2.5及5μg/ml疫苗组(P〈0.05o含铝佐剂疫苗组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNy的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平及血清中IL-10含量均明显高于无铝佐剂疫苗组(P均〈0.05).加强免疫组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFN-γ及CD8+T细 展开更多
关键词 肠道病毒71型 灭活疫苗 细胞免疫
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