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Kv1.5蛋白与脂多糖诱导的血管内皮细胞损伤的相关性
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作者 许关霞 崔乐 +2 位作者 王必蓉 余和平 许涛 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期755-757,共3页
目的探讨Kv1.5蛋白与脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤的相关性。方法LPS以浓度梯度(0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml)及时间梯度(0、6、12、24、48 h)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,建立内皮... 目的探讨Kv1.5蛋白与脂多糖(LPS)诱导的血管内皮细胞损伤的相关性。方法LPS以浓度梯度(0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml)及时间梯度(0、6、12、24、48 h)作用于人脐静脉内皮细胞(HUVECs),应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,建立内皮细胞损伤模型,并通过Western blot法检测内皮细胞中Kv1.5蛋白水平;分别予以75、125、250、500 mmol/L浓度的Kv1.5特异性通道阻滞剂(MT)预处理30 min阻断Kv1.5通道后,运用流式细胞术检测内皮细胞凋亡率,酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定内皮细胞损伤标志物内皮细胞特异性分子-1(endocan)、血管细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的浓度。结果LPS浓度为0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml刺激HUVECs 24 h,内皮细胞凋亡率分别为(33.530±1.266)%、(35.530±0.551)%、(48.270±0.901)%、(51.600±2.179)%,与对照组比较差异有统计学意义(P值分别为0.025、0.027、0.011、0.004),且在LPS 5.0 μg/ml时作用最显著;LPS(5.0 μg/ml)处理内皮细胞6、12、24、48 h,内皮细胞凋亡率分别为(30.200±1.113)%、(32.470±0.814)%、(46.630±0.513)%、(50.870±1.498)%,与对照组比较差异有统计学意义(P值分别为0.027、0.025、0.012、0.006),并且在24 h时作用最明显;建立内皮细胞损伤模型适宜的条件为5.0 μg/ml LPS刺激HUVECs 24 h;同时可见不同浓度LPS组Kv1.5蛋白表达明显上调(P值分别为0.036、0.027、0.008、0.005),12、24、48 h时LPS组Kv1.5蛋白表达亦上升(P值分别为0.004、0.036、0.007),Kv1.5蛋白表达与LPS呈一定的浓度及时间依赖性。与LPS组比较,不同浓度梯度MT组(75、125、250、500 mmol/L)内皮细胞凋亡率明显降低(P值均为0.000),且细胞损伤标志物endocan(P值分别为0.001、0.000、0.001、0.006)及VCAM-1分泌减少(P值分别为0.006、0.000、0.000、0.000)。结论内毒素诱导损伤的血管内皮细胞表达Kv1.5蛋 展开更多
关键词 KV1.5 人脐静脉内皮细胞 Kv1.5通道特异性阻滞剂 血管内皮细胞损伤
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