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埃及伊蚊浓核病毒(AaeDV)对致倦库蚊的致病性研究
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作者 王衍海 赖植发 顾金保 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期176-179,共4页
致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)是西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒等重要的媒介。蚊浓核病毒(Mosquito densovirus,MDV)是特异性感染蚊类的病毒,对蚊虫具有明显的致病性。为研究MDV对致倦库蚊的致病效应,... 致倦库蚊(Culex quinquefasciatus)是西尼罗病毒(West Nile virus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒等重要的媒介。蚊浓核病毒(Mosquito densovirus,MDV)是特异性感染蚊类的病毒,对蚊虫具有明显的致病性。为研究MDV对致倦库蚊的致病效应,我们使用不同浓度埃及伊蚊浓核病毒(Aedes aegypti densovirus,AaeDV)感染致倦库蚊不同发育阶段的幼虫、蛹与成蚊,测定其感染率与死亡率,结果证实AaeDV对致倦库蚊1-2龄幼虫、3-4龄幼虫、蛹和雌雄成蚊的感染率分别为93.33%±2.49%、66%±3.74%、2.67%±0.94%、23.33%±3.40%和24.00%±1.63%,感染率与其发育阶段有关而与性别无关。AaeDV对幼虫的杀伤效果具有剂量依赖性,且与发育阶段有关,在1×10^11拷贝/mL浓度下,新孵化龄幼虫和3-4龄幼虫的死亡率高达95.33%±0.74%和61.67%±2.07%。因此AaeDV对致倦库蚊具有生物防制的潜在价值。 展开更多
关键词 致倦库蚊 埃及伊蚊浓核病毒 生物杀虫剂
登革病毒治疗性抗体的基础研究进展 预览
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作者 尹庆庆 王建宇 +1 位作者 陈强 周晓红 《分子诊断与治疗杂志》 2016年第4期277-286,共10页
近年来蚊媒性传染病登革热在全球呈现快速蔓延和上升流行趋势,但目前仍没有特异性的治疗药物和有效疫苗应用于临床。登革病毒(dengue virus,DENV)治疗性抗体的研发面临抗体依赖性增强效应(antibody dependent enhancement,ADE)等方... 近年来蚊媒性传染病登革热在全球呈现快速蔓延和上升流行趋势,但目前仍没有特异性的治疗药物和有效疫苗应用于临床。登革病毒(dengue virus,DENV)治疗性抗体的研发面临抗体依赖性增强效应(antibody dependent enhancement,ADE)等方面的阻滞。本文就目前DENV治疗性抗体主要靶向表位及ADE等基础研究进行综述,为治疗性抗体和疫苗深入研究提供参考。 展开更多
关键词 登革病毒 治疗性抗体 抗体依赖性增强效应 人源中和抗体 E蛋白二聚体依赖性表位
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白纹伊蚊滞育及其分子机制 被引量:5
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作者 夏丹 滕萍英 +1 位作者 陈晓光 周晓红 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期282-289,共8页
白纹伊蚊是登革热、基孔肯雅热等虫媒疾病的重要传病媒介.亦是最具生物入侵能力的蚊媒.其在全球的快速播散和定殖,为登革病毒等的迅速扩延提供了必要条件,而白纹伊蚊的滞育为其适应不同气候地理条件提供了重要生物学基础,本文综述... 白纹伊蚊是登革热、基孔肯雅热等虫媒疾病的重要传病媒介.亦是最具生物入侵能力的蚊媒.其在全球的快速播散和定殖,为登革病毒等的迅速扩延提供了必要条件,而白纹伊蚊的滞育为其适应不同气候地理条件提供了重要生物学基础,本文综述了白纹伊蚊滞育及其分子机制研究进展。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 滞育 滞育相关基因 滞育分子机制 光周期
医学寄生虫学慕课教学平台的建设与教学实践探索 预览
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作者 王春梅 彭鸿娟 《中国高等医学教育》 2016年第8期48-49,共2页
慕课与传统的在线课程相比,具有互动性强、课程资源精、课程安排系统性强等特点,但也面临着受众缺乏利用优质课程资源能力、课程完成率低等问题。中国高校在慕课开发过程中面临着管理体制、技术条件落后、优质师资缺乏、课程内容缺乏... 慕课与传统的在线课程相比,具有互动性强、课程资源精、课程安排系统性强等特点,但也面临着受众缺乏利用优质课程资源能力、课程完成率低等问题。中国高校在慕课开发过程中面临着管理体制、技术条件落后、优质师资缺乏、课程内容缺乏竞争力、校际间合作不足等问题。本研究以医学寄生虫学慕课教学平台建设与教学实践过程中的一些经验出发,探讨了如何打破陈旧的教育理念,结合传统高校课堂,探索“慕课”教学模式的创新方法。 展开更多
关键词 医学寄生虫学 慕课 教学模式
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深圳市孕妇弓形虫感染调查
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作者 赖植发 陈润莉 +4 位作者 牛姬飞 顾金保 黄慧萍 司徒潮满 莫浩联 《热带医学杂志》 CAS 2016年第12期1562-1564,共3页
目的调查深圳市孕妇的弓形虫感染流行状况及其可能的影响因素,为弓形虫病的预防控制提供依据。方法 采用ELISA法检测669例体检孕妇的血清弓形虫IgG、IgM抗体,比较不同接触史或饮食习惯的孕妇弓形虫感染率。提取弓形虫抗体阳性结果的样... 目的调查深圳市孕妇的弓形虫感染流行状况及其可能的影响因素,为弓形虫病的预防控制提供依据。方法 采用ELISA法检测669例体检孕妇的血清弓形虫IgG、IgM抗体,比较不同接触史或饮食习惯的孕妇弓形虫感染率。提取弓形虫抗体阳性结果的样本核酸,采用LAMP法检测弓形虫特异的SAG1基因。结果 669例体检孕妇中检出弓形虫血清IgG/IgM抗体阳性35例,阳性率为5.2%;有动物密切接触史组感染率15.8%,高于无接触史组的2.3%,差异有统计学意义(P〈0.05);有不良饮食习惯组与无不良饮食习惯组间感染率差异无统计学意义(P〉0.05)。抗体阳性样本经LAMP法检测弓形虫SAG1基因结果均为阴性。结论 本次调查中孕妇仍具较高弓形虫抗体阳性率,密切接触动物为可疑危险因素。 展开更多
关键词 孕妇 弓形虫 血清学监测
日本血吸虫主要虫卵抗原Sjp40在感染新西兰白兔肝脏中的表达与免疫定位 预览
6
作者 夏丹 邓淦明 +12 位作者 滕萍英 谢郁 李耀民 王春梅 陈淑洁 陈敏芳 麦荣嘉 廖海燕 石玲玉 欧丽妍 陈启伟 陈晓光 周晓红 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期826-831,共6页
目的 观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法 日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸... 目的 观察Sjp40在感染新西兰白兔肝脏沉积虫卵及其肉芽肿病变形成中的表达情况,并进行免疫定位。方法 日本血吸虫尾蚴感染新西兰白兔,收集未感染组、29 dpi组和45 dpi组肝脏,Trizol法提取各组肝脏总RNA,以日本血吸虫甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)为内参,Taqman探针qRT-PCR检测Sjp40 mRNA的表达;提取各组肝脏总蛋白,以硫酸铵盐析法和Protein G免疫亲和柱层析法纯化的抗Sjp40-McAb 9G7和抗弓形虫tSAG1-McAb Y3A8(对照抗体),western blot检测Sjp40蛋白的表达;制备肝脏石蜡切片,HE染色观察肝脏虫卵肉芽肿的形成与发展,进一步以免疫荧光技术进行Sjp40在肝脏沉积虫卵及其肉芽肿组织中的定位。结果 日本血吸虫感染兔呈急性肝肉芽肿病变期的45 dpi肝脏沉积虫卵中Sjp40 mRNA水平显著高于29 dpi 尚未形成虫卵肉芽肿结节的肝脏沉积的未成熟虫卵(P〈0.05),westernb blot证实了Sjp40蛋白在29 dpi和45 dpi兔肝脏中的表达。免疫荧光显示:Sjp40在29 dpi兔肝脏中定位于未成熟虫卵内,而45 dpi可见感染兔肝脏中沉积大量成簇内含毛蚴的成熟虫卵及其周围肉芽肿组织均有明显荧光。结论 Sjp40在日本血吸虫感染兔肝脏沉积虫卵中的转录水平随虫卵发育成熟而显著增加,在感染兔急性肉芽肿病变期(45dpi)呈现由虫卵向其周围肉芽肿组织扩散现象,提示该分子在血吸虫肉芽肿形成与发展过程中具有重要作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 血吸虫病 SjP40 虫卵肉芽肿 免疫荧光定位
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蚊虫的组学研究:媒介生物学和传播疾病的大数据分析平台 预览 被引量:1
7
作者 吴恙 谢李华 +3 位作者 刘培文 李小聪 闫桂云 陈晓光 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期625-630,共6页
近年来随着二代测序等生物技术的的快速发展,蚊虫基因组学、转录组学、小RNA组学等领域的研究也得到了迅速提升。迄今为止,已有多种重要蚊媒包括冈比亚按蚊、致倦库蚊、埃及伊蚊等的基因组获得解析;不同蚊种的基因组大小差异很大,... 近年来随着二代测序等生物技术的的快速发展,蚊虫基因组学、转录组学、小RNA组学等领域的研究也得到了迅速提升。迄今为止,已有多种重要蚊媒包括冈比亚按蚊、致倦库蚊、埃及伊蚊等的基因组获得解析;不同蚊种的基因组大小差异很大,且与基因组中的重复序列的多少呈正相关;基因组序列为嗅觉相关基因、性别决定基因等蚊虫基因的克隆鉴定提供了便利。转录组研究则给蚊虫基因的功能分析带来了有效手段,吸血蚊虫的分子基础、唾液腺蛋白的分类构成以及滞育的发生机制等都借此取得了突破性发展。小RNA组研究则揭示miRNA和piRNA对蚊虫的卵巢发育和吸血消化具有调节作用,而且在蚊媒抗病毒免疫中起重要作用。总之,蚊虫的组学研究为其媒介生物学和传播疾病的防治,提供了广阔的、实用的大数据分析平台。 展开更多
关键词 媒介 基因组学 转录组学 小RNA组学 蚊媒传染病
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AaeDV编码的miRNA样分子的分析与鉴定
8
作者 王衍海 吴江 顾金保 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期537-541,共5页
一些双链DNA病毒和RNA病毒可以在宿主细胞内编码自身的miRNAs分子,其在病毒感染宿主细胞与病毒复制过程中发挥重要的作用,为研究单链DNA病毒是否可编码miRNAs,我们利用VMir、miRNAFold和MaturePred软件,通过生物信息学方法预测了一株单... 一些双链DNA病毒和RNA病毒可以在宿主细胞内编码自身的miRNAs分子,其在病毒感染宿主细胞与病毒复制过程中发挥重要的作用,为研究单链DNA病毒是否可编码miRNAs,我们利用VMir、miRNAFold和MaturePred软件,通过生物信息学方法预测了一株单链DNA病毒-埃及伊蚊浓核病毒(Aedes aegypti densovirus,AaeDV)编码的miRNAs分子的颈环结构前体与成熟体,并通过Northern blot与stem-loop RT-PCR方法进行了验证,结果在预测的4个茎环结构前体中,通过stem-loop RT-PCR方法验证到一个miRNA样分子AaeDVMD。该结果证实了单链DNA病毒可编码miRNAs,为进一步研究蚊浓核病毒与宿主蚊类之间的相互作用提供了新的研究方向。 展开更多
关键词 病毒编码的miRNA 埃及伊蚊浓核病毒 单链DNA病毒
冈比亚按蚊性别决定基因doublesex的克隆、序列分析及表达谱 被引量:1
9
作者 刘培文 李小聪 +2 位作者 顾金保 刘艳 陈晓光 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期122-131,共10页
【目的】doublesex是控制昆虫性别分化的关键基因,决定了昆虫体细胞与生殖细胞的性别。本研究旨在克隆、鉴定重要疟疾媒介冈比亚按蚊Anopheles gambiae性别决定基因doublesex(Angdsx),分析其在雌雄个体内的剪切体及在不同发育时期的... 【目的】doublesex是控制昆虫性别分化的关键基因,决定了昆虫体细胞与生殖细胞的性别。本研究旨在克隆、鉴定重要疟疾媒介冈比亚按蚊Anopheles gambiae性别决定基因doublesex(Angdsx),分析其在雌雄个体内的剪切体及在不同发育时期的表达模式。【方法】基于冈比亚按蚊转录组数据库,比对到Angdsx相关片段,分别以雌雄成蚊c DNA为模板,采用RT-PCR与RACE方法克隆分别获得雌雄个体内Angdsx全长基因,利用生物信息软件对所得序列进行结构域预测、氨基酸序列比对和进化树分析。根据Angdsx特异性表达引物,利用RT-PCR方法研究其在冈比亚按蚊雌雄个体及不同发育时期的表达谱。【结果】分别从冈比亚按蚊雌雄成虫中克隆获得Angdsx c DNA全长序列,分别命名为AngdsxF(Gen Bank登录号:KM978937)和AngdsxM(Gen Bank登录号:KM978938)。Angdsx位于2号常染色体右臂,基因横跨接近80 kb基因组长度。AngdsxF长度为4 874 nt,编码长度为265个氨基酸的雌性特异性蛋白DSXF;AngdsxM长度为3 183 nt,编码长度为633个氨基酸的雄性特异性蛋白DSXM。结构域分析发现Angdsx包括doublesex保守的TRA/TRA-2结合位点、dsx重复序列、富含精氨酸/丝氨酸双肽区、多聚嘌呤增强子序列和RNA结合蛋白结合序列,以及连续的双核苷酸GT为主的重复序列。与AngdsxF相比,AngdsxM具有一个雌性特异性的外显子。AngdsxM在0-2 h卵中高表达,随后逐渐减少,在12-24 h卵中降至最低,之后再次升高;AngdsxF则在6-8 h卵中开始表达。【结论】本研究获得了冈比亚按蚊性别决定基因Angdsx在雌雄个体内的全长序列,Angdsx具有保守的结构域与表达特征。本研究结果为蚊虫性别分化的分子机制及将其最终应用于显性致死昆虫施放技术进行蚊媒的防制提供了理论基础。 展开更多
关键词 冈比亚按蚊 性别决定基因 DOUBLESEX 显性致死昆虫施放技术 序列分析 表达谱
传疟按蚊抗药性研究进展
10
作者 秦茜 闫桂云 陈晓光 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2014年第3期191-196,共6页
我国卫生部于2010年5月印发《中国消除疟疾行动计划(2010-2020年)》,提出在2020年,将全面彻底消除疟疾.控制及消除疟疾的关键在于传播媒介的控制,而按蚊为疟疾主要传播媒介,传疟媒介对杀虫剂的抗药性直接导致了疟疾发病的死灰复燃.为... 我国卫生部于2010年5月印发《中国消除疟疾行动计划(2010-2020年)》,提出在2020年,将全面彻底消除疟疾.控制及消除疟疾的关键在于传播媒介的控制,而按蚊为疟疾主要传播媒介,传疟媒介对杀虫剂的抗药性直接导致了疟疾发病的死灰复燃.为了全面了解疟疾蚊媒的抗药性现状和产生机制,该文对国内外传疟按蚊抗药性现状、产生机制和检测方法进行综述. 展开更多
关键词 传疟按蚊 抗药性 机制
截短弓形虫表面抗原SAG2C的基因克隆、蛋白表达及其初步应用
11
作者 程璐 吴焜 陈晓光 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第1期56-59,64共5页
目的克隆截短的弓形虫表面抗原SAG2C基因,在大肠埃希菌中表达SAG2C蛋自,并探讨其在弓形虫病诊断中的应用。方法对已知的弓形虫SAG2C基因序列进行部分取舍,用RT-PCR技术从弓形虫Prugniaud(PRU)株的总RNA中扩增截短的SAG2基因片段,... 目的克隆截短的弓形虫表面抗原SAG2C基因,在大肠埃希菌中表达SAG2C蛋自,并探讨其在弓形虫病诊断中的应用。方法对已知的弓形虫SAG2C基因序列进行部分取舍,用RT-PCR技术从弓形虫Prugniaud(PRU)株的总RNA中扩增截短的SAG2基因片段,插入载体pET32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达,应用westemblot和EI—ISA检测重组表达蛋白的免疫反应性。用重组SAG2C蛋自ELISA祛检测弓形虫感染血清特异抗体.观察初步应用效果。结果从弓形虫PRU株总RNA中扩增出截短的SAG2CC基因片段,成功构建了重组表达质粒pET32a(+)-tSAG2C;该重组质粒经IPTG诱导能表达可溶性大小为51ku的SAG2C蛋白。Western blot显求重组SAG2C能被弓形虫感染小鼠血清识别;以重组SAG2C蛋门、重组SAG1蛋白及BAG1蛋白ELISA检测精神病患者血清弓形虫抗体,阳性率分别为8.07%(23/285)、4.56%(13/285)和7.37%(21/285),差异无统计学意义(P〉0.05)。结论成功构建了重组质粒pET32a(+)-tSAG2C,表达的融合蛋白具有免疫反应性,具有用于弓形虫感染诊断的潜在价值。 展开更多
关键词 弓形虫 表面抗原 克隆 蛋白表达 免疫反应性
白纹伊蚊嗅觉受体OR7的基因克隆、鉴定和功能分析 预览
12
作者 周宁 王晓明 +3 位作者 邓裕华 刘宏美 刘通 陈晓光 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1420-1425,共6页
目的克隆鉴定白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7,并对其表达谱和功能进行分析。方法提取成蚊总RNA,采用RT-PCR技术扩增白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7的全长编码基因,并检测OR7在不同虫期和不同组织器官中的表达谱;将OR7基因克隆于真核表达载体pME18s中... 目的克隆鉴定白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7,并对其表达谱和功能进行分析。方法提取成蚊总RNA,采用RT-PCR技术扩增白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7的全长编码基因,并检测OR7在不同虫期和不同组织器官中的表达谱;将OR7基因克隆于真核表达载体pME18s中,转染HEK293细胞,利用钙成像技术初步分析其对气味分子刺激的钙调功能。结果成功克隆出白纹伊蚊嗅觉受体基因OR7的全长编码基因,经测序得知其编码区序列长度为1395 bp;表达谱分析显示,其在蚊幼虫、蛹、成蚊中都有表达,且在雌蚊嗅器中表达显著。钙成像结果显示OR7对气味分子刺激后的钙离子通道有一定的调节功能。结论克隆出白纹伊蚊的嗅觉受体基因OR7,初步分析显示其在雌蚊中显著表达,并具有对气味分子的识别功能。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 嗅觉受体 表达谱 气味 功能分析
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我国蚊媒研究概况 被引量:25
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作者 郑学礼 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第2期183-187,共5页
蚊类不仅吸血骚扰。而且传播多种严重疾病。本文就我国疟疾媒介鉴定及基因特征,登革热媒介白纹伊蚊基因特征与易感性做了综述,并就淋巴丝虫病媒介与乙腩媒介做了概要。
关键词 蚊媒病 蚊媒介 综述
弓形虫缓殖子期相关蛋白的研究进展 预览
14
作者 韩思琪 吴焜 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期965-970,共6页
弓形虫是一种机会致病性原虫,专性细胞内寄生,能导致人兽共患的弓形虫病.近年来,国内外学者对弓形虫主要抗原及其免疫特性进行了多方面的研究,含缓殖子的组织包囊作为弓形虫慢性感染阶段,该时期的相关蛋白是弓形虫病致病机制研究的重要... 弓形虫是一种机会致病性原虫,专性细胞内寄生,能导致人兽共患的弓形虫病.近年来,国内外学者对弓形虫主要抗原及其免疫特性进行了多方面的研究,含缓殖子的组织包囊作为弓形虫慢性感染阶段,该时期的相关蛋白是弓形虫病致病机制研究的重要分子.本文就弓形虫缓殖子期相关蛋白研究进展进行总结,阐述其在弓形虫慢性感染致病机制中的作用. 展开更多
关键词 弓形虫 组织包囊 缓殖子 期相关蛋白
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LAMP技术检测弓形虫感染方法的建立 被引量:4
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作者 赖植发 黄慧萍 +5 位作者 顾金保 司徒潮满 陈润莉 钟剑明 陈晓光 曾胜波 《热带医学杂志》 CAS 2014年第8期1035-1037,1068共4页
目的建立一种快速、简便的检测弓形虫感染的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法根据弓形虫RH株SAG1基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化扩增体系与参数。通过与常规PCR方法的比较,评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性。利用建立的LAMP... 目的建立一种快速、简便的检测弓形虫感染的环介导等温扩增方法(LAMP)。方法根据弓形虫RH株SAG1基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化扩增体系与参数。通过与常规PCR方法的比较,评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性。利用建立的LAMP初步检测人工感染弓形虫4 d后白兔与大鼠的肌肉组织。结果 LAMP法检测弓形虫基因组DNA的灵敏度是传统PCR方法的100倍。LAMP法检测与其他常见寄生原虫、寄生虫无非特异性阳性结果。LAMP法检测人工接种动物的肌肉组织,阳性率达到100%,对照组为0,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论 LAMP法检测弓形虫感染快速简便、敏感性高、设备要求低,具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 环介导等温扩增技术 弓形虫 PCR
孕妇弓形虫感染相关诱因的Meta分析 预览 被引量:8
16
作者 魏海霞 李雪兰 +1 位作者 张浩 彭鸿娟 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1177-1180,共4页
目的分析宠物接触和吃生肉习惯与孕妇感染弓形虫的相关性。方法从多个文献数据库中搜索关于孕妇弓形虫感染与宠物接触和吃生肉习惯的文献(无语言限制),运用StataSE软件进行Meta分析。结果宠物接触组中弓形虫感染率高于无接触组,比... 目的分析宠物接触和吃生肉习惯与孕妇感染弓形虫的相关性。方法从多个文献数据库中搜索关于孕妇弓形虫感染与宠物接触和吃生肉习惯的文献(无语言限制),运用StataSE软件进行Meta分析。结果宠物接触组中弓形虫感染率高于无接触组,比值比(OddsRatios,OR)为2.35(95%置信区间:1.68~3.28),有吃生肉习惯组中弓形虫感染率也高于对照组,OR值为1.68(95%置信区间:1.40~2.01)。结论接触宠物和吃生肉习惯是与孕妇弓形虫感染显著相关的危险因素。 展开更多
关键词 弓形虫感染 妊娠 宠物接触 生肉习惯 META分析
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LAMP的影响因素及其检测寄生虫的研究进展 预览 被引量:1
17
作者 薛俊宇 李华 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2013年第4期272-281,共10页
本文从靶标基因选取、样本采集及处理、LAMP反应、产物检测等方面综述了环介导等温扩增法检测过程中的影响因素及其在寄生虫检测方面的研究进展。
关键词 寄生虫 LAMP 检测方法 影响因素
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抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体的制备及其生物学特性鉴定 预览 被引量:2
18
作者 闫俊 赵小玲 +4 位作者 陈伟强 孙思明 周晓红 陈敏芳 张艳淑 《解放军预防医学杂志》 CAS 2013年第6期487-489,共3页
目的制备抗日本血吸虫蛋白(sjp40)鸡卵黄抗体(eggyolkimmunoglobulinY,IgY),以期为日本血吸虫病的免疫学诊断提供一种特异性强、灵敏度高的优势抗体。方法以纯化的sjp40抗原免疫健康SPF级产蛋鸡,初次免疫2周后开始每日收集的鸡... 目的制备抗日本血吸虫蛋白(sjp40)鸡卵黄抗体(eggyolkimmunoglobulinY,IgY),以期为日本血吸虫病的免疫学诊断提供一种特异性强、灵敏度高的优势抗体。方法以纯化的sjp40抗原免疫健康SPF级产蛋鸡,初次免疫2周后开始每日收集的鸡蛋为样本,采用水稀释硫酸铵沉淀法从鸡蛋中初步提取抗sjp40IgY,进一步经透析袋、DEAE-FF阴离子交换柱纯化IgY。用SDS—PAGE、WesternBlot及ELISA对纯化后的抗sjp40IgY进行分析鉴定。结果纯化的特异性抗Sjp40IgY,抗体效价1:10。。相对分子质量为180kDa,SDS.PAGE可见有2条主要蛋白带,分别约为66kDa和35kDa。并可被sj040特异性识别。结论成功制备具有良好免疫反应性、特异性强、灵敏度高的抗Sip40特异性IgY抗体。 展开更多
关键词 卵黄抗体 Sjp40 日本血吸虫病 诊断
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白纹伊蚊气味结合蛋白基因OBP68的克隆鉴定及其在蚊不同发育时期表达分析 被引量:2
19
作者 赵大川 郑学礼 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期251-254,共4页
目的克隆鉴定白纹伊蚊气味结合蛋白基因OBP68,了解该基因在白纹伊蚊不同发育时期表达量的差异。方法提取幼虫、蛹、雄蚊、未吸血雌蚊总RNA,用RT—PCR扩增OBP68基因特异片段,克隆于pMD 18-T载体并测序鉴定;用半定量RT-PCR分析白纹伊... 目的克隆鉴定白纹伊蚊气味结合蛋白基因OBP68,了解该基因在白纹伊蚊不同发育时期表达量的差异。方法提取幼虫、蛹、雄蚊、未吸血雌蚊总RNA,用RT—PCR扩增OBP68基因特异片段,克隆于pMD 18-T载体并测序鉴定;用半定量RT-PCR分析白纹伊蚊不同发育时期OBP68基因mRNA表达量差异。结果从白纹伊蚊扩增出OBP68基因,测序分析克隆白纹伊蚊OBP68基因序列与GenBank注册号FJ04086.1的白纹伊蚊OBP68基因同源性99%,与埃及伊蚊的OBP68基因的同源性为71%。白纹伊蚊OBP68基因在白纹伊蚊发育不同时期皆有表达,以幼虫阶段表达较弱,蛹、雄蚊、雌蚊表达量增高,且后3个时期表达量差异无统计学意义(P〉0.05)。结论从白纹伊蚊成功扩增出OBP68基因,该基因在白纹伊蚊不同发育时期均有表达。 展开更多
关键词 白纹伊蚊 气味结合蛋白 OBP68基因 鉴定 表达
无机盐及葡萄糖对广州管圆线虫三期幼虫的体外趋化作用
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作者 吴雅欣 莫泽珣 +2 位作者 张鑫 佘丹 李华 《热带医学杂志》 CAS 2013年第7期801-803,812共4页
目的观察不同浓度的无机盐及葡萄糖对广州管圆线虫三期幼虫(AC-L3)的趋化作用。方法将含有20、50、100和150mmol/L无机盐(KCl、NaCl、Na2HPO4、NaHCO3、CaCl2、MgCl2)及葡萄糖溶液的纸片与蒸馏水浸泡的纸片分别贴于琼脂糖平皿的两... 目的观察不同浓度的无机盐及葡萄糖对广州管圆线虫三期幼虫(AC-L3)的趋化作用。方法将含有20、50、100和150mmol/L无机盐(KCl、NaCl、Na2HPO4、NaHCO3、CaCl2、MgCl2)及葡萄糖溶液的纸片与蒸馏水浸泡的纸片分别贴于琼脂糖平皿的两个区域(实验区和对照区),将活力好的AC-L3离心后重悬,释放于平皿中央,避光孵化8h,显微镜下计数各区域幼虫。结果 20mmol/L Na2HPO4(P=0.016,CI=0.587)和50mmol/L NaCl(P=0.025,CI=0.696)对AC-L3有较明显的趋向作用,而100mmol/L KCl(P=0.027,CI=-0.546)和150mmol/L NaCl(P=0.028,CI=-0.366)对AC-L3有趋避作用。20mmol/L KCl、NaHCO3、MgCl2,100mmol/L CaCl2,150mmol/L NaHCO3、MgCl2均对AC-L3有趋向作用,但CI值均在0.5以下。不同浓度的葡萄糖对AC-L3的趋化作用差异无统计学意义(P〉0.05)。结论 NaCl、NaHPO、KCl等无机盐对AC-L3具有一定的趋化作用,并且与无机盐的浓度相关。 展开更多
关键词 无机盐 广州管圆线虫 三期幼虫 趋化作用
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