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SIRT1基因对牛卵泡颗粒细胞增殖及细胞周期的影响 预览
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作者 陈洋 单雪松 +2 位作者 赵志辉 刘红羽 吕文发 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第3期1-6,13共7页
【目的】探讨沉默信息调节因子1(Silent information regulator1,SIRT1)对牛卵泡颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。【方法】选取牛卵巢上直径2~6mm的卵泡,用注射器抽取卵泡中的颗粒细胞,进行体外培养。根据牛SIRT1基因的核苷酸序列,构建了... 【目的】探讨沉默信息调节因子1(Silent information regulator1,SIRT1)对牛卵泡颗粒细胞增殖及细胞周期的影响。【方法】选取牛卵巢上直径2~6mm的卵泡,用注射器抽取卵泡中的颗粒细胞,进行体外培养。根据牛SIRT1基因的核苷酸序列,构建了4条干扰载体(shRNA-SIRT1-1597、shRNA-SIRT1-1471、shRNA-SIRT1-1186、shRNA-SIRT1-1306)及1条阴性对照载体(shRNA-NC),利用脂质体将质粒转入牛卵泡颗粒细胞,通过实时荧光定量PCR法筛选出干扰效果最佳的干扰载体用于后续试验。以转染shRNA-SIRT1-1471的颗粒细胞为干扰组,转染sh-RNA-NC的颗粒细胞为阴性对照组,不做处理的颗粒细胞为空白对照组,采用CCK-8法检测转染后24,36,48和60h各组颗粒细胞增殖情况,用流式细胞术检测转染后24,36和48h各组颗粒细胞的细胞周期变化情况。【结果】转染后48h shRNA-SIRT1-1471干扰的颗粒细胞SIRT1表达量显著低于其他处理组(P<0.05),故选用shRNA-SIRT1-1471作为最佳干扰载体。转染后24,36,48和60h,干扰组颗粒细胞增殖效果显著高于空白对照组和阴性对照组(P<0.05);转染后24~48h干扰组与空白对照组和阴性对照组相比G1期细胞比例显著降低,S期细胞比例显著升高,从而使更多细胞进入M期进行正常的有丝分裂,促进细胞增殖。【结论】SIRT1能抑制牛卵泡颗粒细胞的增殖,并阻滞细胞周期的进程。 展开更多
关键词 SIRT1基因 牛卵泡颗粒细胞 细胞增殖 细胞周期
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SIRT1对牛卵泡颗粒细胞凋亡及雌激素分泌的影响 预览 被引量:1
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作者 陈洋 单雪松 +1 位作者 吕文发 赵志辉 《中国畜牧杂志》 北大核心 2018年第8期56-60,共5页
本实验旨在研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对牛卵泡颗粒细胞凋亡及雌激素分泌的影响。构建SIRT1基因干扰载体,并转染体外培养的颗粒细胞。实验分为转染SIRT1-sh RNA的干扰组、转染NC-sh RNA的对照组和未转染的空白组,每组设3个重复。... 本实验旨在研究沉默信息调节因子1(SIRT1)对牛卵泡颗粒细胞凋亡及雌激素分泌的影响。构建SIRT1基因干扰载体,并转染体外培养的颗粒细胞。实验分为转染SIRT1-sh RNA的干扰组、转染NC-sh RNA的对照组和未转染的空白组,每组设3个重复。流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测细胞内Bax、Bcl-2 m RNA表达;Western Blot检测细胞内Bax、Bcl-2蛋白表达;ELISA试剂盒检测雌激素水平。结果表明:干扰组颗粒细胞SIRT1 m RNA表达量显著低于对照组与空白组(P〈0.05),而对照组与空白组之间差异不显著(P〉0.05);干扰组颗粒细胞凋亡率显著低于对照组与空白组(P〈0.05);干扰组颗粒细胞Bax m RNA和蛋白质表达显著低于对照组与空白组(P〈0.05),而Bcl-2 m RNA和蛋白质表达均显著高于对照组与空白组(P〈0.05);干扰组颗粒细胞培养液中雌激素含量显著低于对照组与空白组(P〈0.05)。SIRT1基因可以促进牛卵泡颗粒细胞的凋亡,并促进雌激素分泌。 展开更多
关键词 SIRT1基因 颗粒细胞 凋亡 雌激素
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弓形虫致密颗粒蛋白GRA12的生物信息学分析 被引量:1
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作者 王英贺 曹利利 +5 位作者 郭衍冰 董航 宫鹏涛 苑淑贤 姚新华 魏峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第4期74-78,共5页
为分析并预测弓形虫致密颗粒蛋白GRA12基因编码蛋白的结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,本研究从Gen Bank数据库获取GRA12基因序列,通过在线蛋白分析专家系统(Expasy)并结合GENERUNR、DNAStar、DNAMAN等生物信息学分析软件对... 为分析并预测弓形虫致密颗粒蛋白GRA12基因编码蛋白的结构、功能以及其作为疫苗候选抗原的可能性,本研究从Gen Bank数据库获取GRA12基因序列,通过在线蛋白分析专家系统(Expasy)并结合GENERUNR、DNAStar、DNAMAN等生物信息学分析软件对GRA12序列的编码区进行分析、对该基因编码蛋白质的理化性质、信号肽、跨膜结构域、二级结构、亲/疏水性、抗原表位等信息预测。结果表明:该基因全长1 311 bp,编码436个氨基酸,蛋白性质稳定,理论分子质量约为47.8 ku,无信号肽,有6个跨膜区,14个丝氨酸磷酸化位点、7个苏氨酸磷酸化位点、3个酪氨酸磷酸化位点、18个O-糖基化位点、3个乙酰化蛋白附着位点、1个酪氨酸硫酸化位点、1个潜在的N-糖基化位点、1个棕榈酰化位点,15个潜在的抗原表位。研究结果分析说明GRA12有潜力成为弓形虫疫苗候选抗原。 展开更多
关键词 弓形虫 GRA12 生物信息学 蛋白质结构 抗原表位
一株貉子源毛滴虫的分离鉴定 预览
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作者 王秋悦 杜义明 +3 位作者 李媛 陈丽凤 肖佳孟 张西臣 《中国预防兽医学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期633-636,共4页
为进一步鉴定从河北秦皇岛地区腹泻貉子的盲肠中新分离得到的一株毛滴虫,本研究分别对其进行了分离与体外培养、形态学观察及18S rRNA和ITS1-5.8S rRNA-ITS2基因序列相似性分析。形态学观察结果表明从貉子体内分离的毛滴虫具有4根前鞭... 为进一步鉴定从河北秦皇岛地区腹泻貉子的盲肠中新分离得到的一株毛滴虫,本研究分别对其进行了分离与体外培养、形态学观察及18S rRNA和ITS1-5.8S rRNA-ITS2基因序列相似性分析。形态学观察结果表明从貉子体内分离的毛滴虫具有4根前鞭毛和一根独立鞭毛,为人五毛滴虫形态结构。18S rRNA和ITS1-5.8SrRNA-ITS2基因序列与GenBank中登录的人五毛滴虫基因序列的相似性均为99%。基于18S rRNA和ITS1-5.8SrRNA-ITS2两种基因构建系统进化树,结果显示本研究从貉体内分离的毛滴虫与人五毛滴虫处于同一进化分支,亲缘关系较近。综合以上鉴定结果表明本研究从秦皇岛地区貉子体内所分离的这株毛滴虫为人五毛滴虫。由此推断貉子毛滴虫病可能由人体内的毛滴虫感染所致。 展开更多
关键词 貉子 毛滴虫 鉴定
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奶牛隐性乳房炎临床诊治进展 预览
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作者 牟瑞营 张乃生 《山东畜牧兽医》 2016年第5期60-61,共2页
隐性乳房炎由于乳腺、乳汁临床症状不明显,但是造成的奶量隐性损失是奶牛场巨大经济浪费,本病也是广大畜牧兽医工作者一直关注焦点、热点,本文对我国奶牛隐性乳房炎在临床诊断及治疗研究方面做一总结。
关键词 奶牛隐性乳房炎 经济浪费 泌乳母牛 兽医工作者 临床症状 临床诊断 体细胞数 奶牛小区 奶牛存栏量 水上
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弓形虫致密颗粒蛋白研究进展 预览
6
作者 王英贺 曹利利 +6 位作者 姚新华 苑淑贤 郭衍冰 宫鹏涛 丁鹤 董航 魏峰 《动物医学进展》 北大核心 2016年第8期75-78,共4页
弓形虫是一种胞内寄生性原虫,由其引发的人兽共患病给公共卫生安全带来了威胁。弓形虫致密颗粒蛋白是弓形虫致密颗粒细胞器分泌的一类免疫活性蛋白,与虫体在细胞内寄生、发育密切相关,是重要的弓形虫疫苗候选抗原分子。论文将近年来在... 弓形虫是一种胞内寄生性原虫,由其引发的人兽共患病给公共卫生安全带来了威胁。弓形虫致密颗粒蛋白是弓形虫致密颗粒细胞器分泌的一类免疫活性蛋白,与虫体在细胞内寄生、发育密切相关,是重要的弓形虫疫苗候选抗原分子。论文将近年来在致密颗粒蛋白方面的研究发现和进展进行阐述,为今后的深入研究提供参考。 展开更多
关键词 弓形虫 致密颗粒蛋白 免疫活性蛋白
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寄生虫丝裂原活化蛋白激酶的研究进展 被引量:1
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作者 郭衍冰 王英贺 +5 位作者 曹利利 董航 宫鹏涛 姚新华 苑淑贤 魏峰 《畜牧与兽医》 北大核心 2016年第10期138-141,共4页
寄生虫丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)由丝/苏氨酸蛋白激酶组成,相关构象研究表明,MAPKs的结构与功能间存在密切的关系。论文详细阐述了寄生虫p38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶... 寄生虫丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPKs)由丝/苏氨酸蛋白激酶组成,相关构象研究表明,MAPKs的结构与功能间存在密切的关系。论文详细阐述了寄生虫p38MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、细胞外信号调节激酶(ERK)等MAPK亚族成员,并对寄生虫MAPK信号转导通路进行了简要介绍。同时,概述了寄生虫对宿主MAPK信号通路的影响,并对未来寄生虫丝裂原活化蛋白激酶的相关研究做了展望。 展开更多
关键词 MAPKS P38 JNK ERK MAPK信号通路
BMP2和BMP4基因在草原红牛睾丸组织中的表达量分析 被引量:3
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作者 秦立红 张国梁 +5 位作者 吴健 李旭 刘基伟 王蕾 赵玉民 赵志辉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期661-664,共4页
采用实时荧光定量PCR技术检测BMP2和BMP4基因在草原红牛1,12,18,30月龄4个发育阶段睾丸组织中的mRNA表达水平。旨在探讨该基因在草原红牛睾丸不同发育阶段的表达情况。结果表明:BMP2和BMP4基因在所检测的肉牛4个发育阶段睾丸组织中均... 采用实时荧光定量PCR技术检测BMP2和BMP4基因在草原红牛1,12,18,30月龄4个发育阶段睾丸组织中的mRNA表达水平。旨在探讨该基因在草原红牛睾丸不同发育阶段的表达情况。结果表明:BMP2和BMP4基因在所检测的肉牛4个发育阶段睾丸组织中均有表达。BMP4基因1月龄表达量显著低于12,18,30月龄(P〈0.05),12月龄表达量最高,随着月龄增加,表达量减少。而BMP2基因在出生阶段表达量最低,但是与其他3个阶段差异不显著(P〉0.05),基因表达趋势也是12月龄表达量最高,然后随着月龄增加,表达量减少。 展开更多
关键词 BMP2基因 BMP4基因 草原红牛 睾丸组织 表达量分析
天津地区奶牛蹄病分析研究 预览 被引量:5
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作者 王东源 王玉舜 +2 位作者 谷禹 金天明 高丰 《天津农学院学报》 CAS 2015年第2期37-39,共3页
分析了当前天津地区规模化奶牛场奶牛蹄病的发生率及种类,以期为该地区制定综合防治措施提供依据。选取2013年8月至2014年11月间天津地区12个规模化奶牛场的4 298头荷斯坦奶牛为研究对象,统计奶牛蹄病的发生率,分析其发生特点,结果表明... 分析了当前天津地区规模化奶牛场奶牛蹄病的发生率及种类,以期为该地区制定综合防治措施提供依据。选取2013年8月至2014年11月间天津地区12个规模化奶牛场的4 298头荷斯坦奶牛为研究对象,统计奶牛蹄病的发生率,分析其发生特点,结果表明,奶牛蹄病平均发病率为14.55%(217/1 491),其中指(趾)间皮肤增殖、蹄底溃疡、白线病和疣性皮炎等发病率高于其他蹄病。 展开更多
关键词 奶牛 蹄病 综合防治
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Kisspeptin/GPR54系统功能研究进展 预览 被引量:1
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作者 王建发 张旭 +3 位作者 徐丹丹 李启涛 张义爽 柳巨雄 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2015年第19期85-90,共6页
Kisspeptins(Kp)是KiSS-1基因编码的肽类物质,包括Kp-54、Kp-14、Kp-13和Kp-10,受体为GPR54。Kp在肿瘤调控、生殖调控、内分泌调节等方面具有重要作用,是当前神经内分泌学及神经肽类物质研究热点之一。本文主要对Kp/GPR54系统生... Kisspeptins(Kp)是KiSS-1基因编码的肽类物质,包括Kp-54、Kp-14、Kp-13和Kp-10,受体为GPR54。Kp在肿瘤调控、生殖调控、内分泌调节等方面具有重要作用,是当前神经内分泌学及神经肽类物质研究热点之一。本文主要对Kp/GPR54系统生理功能研究的最新进展进行综述,并对其在动物生产中的应用前景进行了分析。 展开更多
关键词 KISSPEPTIN GPR54 神经内分泌 动物生产
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重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响
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作者 王娅 黄文华 +5 位作者 邓俊良 左之才 任志华 王哲 胡延春 余树民 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1290-1292,共3页
为了探讨重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响,取72h培养良好的肝细胞培养板(6孔板),每孔分别接种重组牛抵抗素0,10,50,100,300,500ng/L(共6个梯度,每个梯度6个重复),继续培养12h,收集上清,采用乳酸脱氢酶偶联比色法测定PE... 为了探讨重组牛抵抗素对体外培养肝细胞PEPCK活性的影响,取72h培养良好的肝细胞培养板(6孔板),每孔分别接种重组牛抵抗素0,10,50,100,300,500ng/L(共6个梯度,每个梯度6个重复),继续培养12h,收集上清,采用乳酸脱氢酶偶联比色法测定PEPCK活性。结果显示,PEPCK酶活性随重组牛抵抗素浓度的升高而增强,10ng/L以上的重组牛抵抗素可明显提高PEPCK活性,这表明牛抵抗素具有生物学活性,能提高PEPCK活性。 展开更多
关键词 牛重组抵抗素 PEPCK 肝细胞
哺乳动物呼肠孤病毒在不同细胞中的复制动力学及体外抗肿瘤活性 被引量:1
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作者 刘辉 杨红育 +8 位作者 丁壮 陶冬 徐志强 赵虹 李婷婷 柏丛 张楠 佐毅 曹宇 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第1期26-29,共4页
目的探讨哺乳动物呼肠孤病毒3型标准株(Reovirus 3)在不同细胞中的复制动力学,并对其体外抗肿瘤活性进行初步的研究。方法将低浓度的呼肠孤病毒分别接种于Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE);采用直接免... 目的探讨哺乳动物呼肠孤病毒3型标准株(Reovirus 3)在不同细胞中的复制动力学,并对其体外抗肿瘤活性进行初步的研究。方法将低浓度的呼肠孤病毒分别接种于Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE);采用直接免疫荧光抗体法检测盲传3代后的病毒复制情况;将黑色素瘤细胞与MDBK细胞置同一个器皿中用呼肠孤病毒进行攻毒,每日观察CPE。结果接种低浓度的呼肠孤病毒后72 h,即可在MDBK细胞中观察到明显的CPE;在MRC-5细胞中盲传3代未发现CPE;在Vero-E6细胞中盲传3代可发现轻微的CPE。呼肠孤病毒在MDBK细胞中可稳定传代;在MRC-5细胞中盲传3代未检测到病毒;在Vero-E6细胞中盲传2代即可检测到病毒,但荧光强度较弱。接种呼肠孤病毒后30 h,黑色素瘤细胞出现破裂且大面积死亡,MDBK细胞局部区域开始出现CPE,且病变区域逐渐扩大。结论 MDBK细胞是最适合培养呼肠孤病毒的细胞,Vero-E6细胞中病毒可以繁殖,但是复制动力较MDBK细胞弱,MRC-5细胞不适于培养呼肠孤病毒。呼肠孤病毒在体外具有选择性的杀死癌细胞的特性,但由于机体的免疫系统相对体外更加复杂,体内具有的抗肿瘤活性尚需在肿瘤动物模型中进行进一步的研究。 展开更多
关键词 呼肠孤病毒 复制 抗肿瘤活性
金黄色葡萄球菌FnbA配体结合区基因核酸疫苗的构建与免疫试验 预览 被引量:2
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作者 尹荣兰 尹荣焕 +7 位作者 白文林 李琳 任清丹 许志林 李卫 许尧 杨正涛 张乃生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第11期28-31,共4页
扩增了奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤粘连结合蛋白A(Fnb A)配体结合区基因,并将其克隆至真核表达载体p VAX1启动子下游,构建成真核表达质粒,通过体外细胞转染试验,运用IFA方法进行抗原性初步确认,所构建的重组DNA疫苗质粒能在真核细胞... 扩增了奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤粘连结合蛋白A(Fnb A)配体结合区基因,并将其克隆至真核表达载体p VAX1启动子下游,构建成真核表达质粒,通过体外细胞转染试验,运用IFA方法进行抗原性初步确认,所构建的重组DNA疫苗质粒能在真核细胞中表达外源基因并被金黄色葡萄球菌抗体特异性识别。为进一步评价侯选疫苗的免疫原性,进行了BALB/c小鼠免疫试验,分别检测免疫后的ELISA抗体水平、Th1/Th2类细胞因子水平以及T淋巴细胞增殖试验。结果表明,构建的核酸疫苗p VAX1-p Fnb A免疫小鼠后,ELISA抗体水平提高,Th1/Th2类细胞因子含量提升,T细胞增殖能力增强。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 pFnbA DNA疫苗 免疫原性
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比格犬ERβ1293基因真核载体的构建及其在HEK293T细胞中的表达和定位 预览 被引量:1
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作者 甘艺 钟睿 +7 位作者 任秀梅 赵彦斌 胡仲明 刘冰 陈旖 孙兆增 曾林 杨焕民 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第2期7-10,15,I0001共6页
目的 观察比格犬Myc 标签ERβ1293重组真核表达载体在HEK293T细胞中的表达及定位.方法 以pEGFP-N1-ERβ1293重组真核表达载体为模板,PCR保真酶扩增得到ERβ1293基因编码区全长.Myc标签ERβ1293重组真核载体瞬时转染HEK293T细胞,运用蛋... 目的 观察比格犬Myc 标签ERβ1293重组真核表达载体在HEK293T细胞中的表达及定位.方法 以pEGFP-N1-ERβ1293重组真核表达载体为模板,PCR保真酶扩增得到ERβ1293基因编码区全长.Myc标签ERβ1293重组真核载体瞬时转染HEK293T细胞,运用蛋白质印迹技术(Western blotting)和间接免疫荧光技术(indirect immunofluorescence,IF)鉴定pcDNA3.1-Myc-ERβ1293在HEK293T细胞中的表达和定位情况.结果 成功构建pcDNA3.1-Myc-ERβ1293重组真核表达载体,转染至HEK293T细胞中.Western blotting检测有蛋白条带表达,共聚焦显微镜下观察IF处理后的转染细胞,荧光定位于细胞质.结论 前期实验得到比格犬ERβ剪切异构体ERβ1293编码区序列,缺失第四外显子,导致其与配体结合能力减弱或消失,因此目的 基因编码蛋白定位在细胞中发生变化. 展开更多
关键词 比格犬 ERβ1293 蛋白定位 第4外显子缺失
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维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA的克隆及原核表达 预览 被引量:3
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作者 翟新新 温振才 +6 位作者 沈雪飞 孙真 贾生美 张俊辉 王文东 杨振国 卢强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第7期40-43,共4页
本试验旨在利用大肠杆菌BL21(DE3)表达维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性。根据GenBank公布的序列设计1对引物,经PCR扩增获得flaA基因的完整开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET 30a,转入大... 本试验旨在利用大肠杆菌BL21(DE3)表达维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性。根据GenBank公布的序列设计1对引物,经PCR扩增获得flaA基因的完整开放阅读框序列,克隆至原核表达载体pET 30a,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导、表达和纯化。SDS-PAGE结果显示重组目的蛋白在大肠杆菌成功表达,约在38 ku处可见清晰的表达产物,诱导产物大小与理论值相符。经Western blotting检测,结果显示表达的重组蛋白可与特异性血清抗体和His-tag抗体发生免疫反应。因此,本试验成功表达了维氏气单胞菌鞭毛蛋白flaA,为进一步研究其生物学功能及免疫佐剂作用奠定了基础。 展开更多
关键词 维氏气单胞菌 鞭毛蛋白 克隆 表达
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PK15、ST细胞增殖猪传染性胃肠炎病毒的比较研究 被引量:4
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作者 魏凤 管宇 +3 位作者 肖跃强 谢金文 沈旭 沈志强 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第1期125-126,208共3页
猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)引起的一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病。该病是我国及世界各养猪国家仔猪早期死亡的重要传染病之一,尤其是在冬季和早春寒冷季节常呈地方性爆发流行,
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 T细胞增殖 接触性传染病 临床特征 早期死亡 寒冷季节 爆发流 地方性
水貂犬瘟热病毒LD-1株的分离与鉴定 预览 被引量:2
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作者 庄金秋 梅建国 +3 位作者 王金良 张倩 沈志强 丁壮 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第4期226-232,共7页
取山东某貂场疑似犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)感染的水貂肝脏等组织病料,通过RTPCR检测呈CDV阳性,且无水貂细小病毒存在,将病料接种原代CEF细胞、传代系Vero细胞和DF1细胞3种细胞进行病毒分离,通过优化细胞培养条件... 取山东某貂场疑似犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)感染的水貂肝脏等组织病料,通过RTPCR检测呈CDV阳性,且无水貂细小病毒存在,将病料接种原代CEF细胞、传代系Vero细胞和DF1细胞3种细胞进行病毒分离,通过优化细胞培养条件,最终在Vero细胞上传代培养成功,出现露珠状典型细胞病变(CPE)。分离毒应用RTPCR、PCR产物测序、抗体中和试验(SN)、间接免疫荧光试验(IFA)及病毒包涵体检查等多种方法进行了CDV的鉴定,结果显示CDV阳性,表明分离到的病毒为水貂CDV,并将其命名为CDV LD-1株。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 病毒分离 鉴定
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基于SELDI-TOF-MS技术的患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组谱分析 预览
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作者 王朋贤 舒适 +5 位作者 王博 许楚楚 刘健男 夏成 吴凌 王哲 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 2014年第11期1895-1903,共9页
旨在探讨患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组学的异常变化。收集32头患亚临床低血钙症奶牛和59头健康奶牛的血浆,应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,经wilcoxon sum rank test分析两组峰值,结合Swissport蛋白质数据库鉴定,从而获得... 旨在探讨患亚临床低血钙症奶牛血浆蛋白质组学的异常变化。收集32头患亚临床低血钙症奶牛和59头健康奶牛的血浆,应用SELDI-TOF-MS技术测得血浆蛋白质谱,经wilcoxon sum rank test分析两组峰值,结合Swissport蛋白质数据库鉴定,从而获得组间差异表达蛋白,并进行决策树分析。结果获得了7个差异峰,经鉴定得到6种差异表达蛋白质。经决策树模型分析得出神经分泌蛋白VGF片段和淀粉样β蛋白4可能为诊断健康牛和亚临床低血钙症牛的生物标志物。应用SELDI-TOF-MS技术可有效分离健康牛与患病牛之间的血浆差异表达蛋白质,其中有可能存在能够成为该疾病的诊断标识物,其具体发生机制有待研究,该结果对探究奶牛亚临床低血钙症发病机制及其对机体生物学功能的影响具有重要的理论价值。 展开更多
关键词 奶牛 亚临床低血钙症 SELDI-TOF-MS 血浆蛋白质组学 差异表达的蛋白
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旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后细胞因子变化比较分析 预览 被引量:2
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作者 张小飞 刘冉 +3 位作者 崔晓霞 马帅 张西臣 白杰英 《中国比较医学杂志》 CAS 2014年第8期11-15,23共6页
目的:比较旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后两种动物免疫状态的变化,建立适合感染寄生虫的动物模型。方法用旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后,通过检测血细胞生理值、脾脏 IL-2蛋白浓度和脾脏 IL-6基因表达水平,分析两种动物... 目的:比较旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后两种动物免疫状态的变化,建立适合感染寄生虫的动物模型。方法用旋毛虫感染黑线仓鼠及其白化突变系后,通过检测血细胞生理值、脾脏 IL-2蛋白浓度和脾脏 IL-6基因表达水平,分析两种动物在感染旋毛虫前后免疫应答水平及免疫调控状态的变化。结果黑线仓鼠在感染旋毛虫后免疫细胞及细胞因子的水平高于白化突变系,反应程度更加剧烈。结论黑线仓鼠是旋毛虫感染的较为适宜的模型动物。 展开更多
关键词 旋毛虫 黑线仓鼠 白化突变系 细胞因子
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犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库的构建 预览
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作者 韩岩岩 宋德光 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第5期49-52,共4页
试验旨在筛选水泡性门炎病毒的受体,构建犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库。通过用Trizol试剂提取犊牛口腔黏膜上皮细胞总RNA,然后分离和纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRI/HindⅢ接头,然后用EcoRI... 试验旨在筛选水泡性门炎病毒的受体,构建犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库。通过用Trizol试剂提取犊牛口腔黏膜上皮细胞总RNA,然后分离和纯化mRNA,经反转录合成双链cDNA。在双链cDNA末端加上定向EcoRI/HindⅢ接头,然后用EcoRI和HindⅢ酶消化双链cDNA末端接头,使双链cDNA2端含有EcoRI和HindlI黏性末端。所有处理后的双链cDNA,经MiniColumn纯化,收集400bp以上的双链cDNA片段,将其连接带有EcoRI和Hindm末端的T7Select10—3b载体,经体外包装后,以BLT5403为受体菌构建T7噬菌体展示文库。经测定未扩增文库的滴度为1.3×10^7PFU/mL,重组率为95.8%,扩增后文库滴度为2.6×10^10PFU/mL。随机挑取100个噬菌斑进行PCR鉴定,95%的插入片段大于400bp。结果表明成功构建了犊牛口腔黏膜上皮细胞T7噬菌体展示文库。 展开更多
关键词 口腔黏膜上皮细胞 T7噬菌体展示文库 水泡性口炎病毒
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