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水稻ygl98黄绿叶突变基因的精细定位与遗传分析 预览 被引量:19
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作者 孙小秋 王兵 +3 位作者 肖云华 万春美 邓晓建 王平荣 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期 991-997,共7页
通过EMS诱变获得1份遗传稳定的水稻黄绿叶突变体ygl98,该突变体整个生育期呈黄绿色。与野生型相比,突变体的叶绿素和类胡萝卜素含量分别下降45.3%和45.6%,有效穗数和结实率分别减少14.4%和10.7%,株高降低7.4%。透射电镜观察表明,ygl98... 通过EMS诱变获得1份遗传稳定的水稻黄绿叶突变体ygl98,该突变体整个生育期呈黄绿色。与野生型相比,突变体的叶绿素和类胡萝卜素含量分别下降45.3%和45.6%,有效穗数和结实率分别减少14.4%和10.7%,株高降低7.4%。透射电镜观察表明,ygl98突变体的叶绿体形状不规则,叶绿体中有许多空的囊泡状结构,类囊体数目减少,每个基粒仅由少数几个类囊体垛叠而成。遗传分析表明,ygl98的突变性状由1对隐性核基因控制。利用(ygl98/浙辐802)F2作为定位群体,将突变基因定位在第3染色体长臂InDel标记I3和I4之间,遗传距离分别为0.07cM和0.19cM,两标记之间的物理距离约为44.2kb,此区间内包含8个预测基因。基因组序列分析发现,ygl98突变体在编码镁离子螯合酶ChlD亚基的OsChlD基因编码区第1522碱基处(位于第10外显子),碱基G突变为碱基A,从而造成编码蛋白序列第508位的丙氨酸(Ala)突变成苏氨酸(Thr)。该基因是已报道的水稻黄绿叶基因Chlorina-1的等位基因,但突变体表型有明显区别,Chlorina-1突变体在2~3周龄幼苗时开始出现黄绿叶,且该黄绿叶性状仅在苗期表现,而ygl98突变体整个生育期都表现为黄绿叶,这可能是OsChlD基因组序列的突变位点不同造成的。 展开更多
关键词 水稻 黄绿叶突变体 OsChlD 遗传分析 精细定位
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水稻类病变突变体C23的遗传分析与基因的精细定位 预览 被引量:9
2
作者 李秀兰 王平荣 +3 位作者 曲志才 孙小秋 王兵 邓晓建 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第18期3691-3697,共7页
【目的】对水稻类病变突变体C23进行遗传分析,并对其突变基因进行分子标记定位。【方法】通过EMS化学诱变获得类病变突变体。对突变体的形态特征、主要农艺性状进行观察,同时进行组织化学分析,对突变性状进行遗传分析,并以C23/浙辐802F... 【目的】对水稻类病变突变体C23进行遗传分析,并对其突变基因进行分子标记定位。【方法】通过EMS化学诱变获得类病变突变体。对突变体的形态特征、主要农艺性状进行观察,同时进行组织化学分析,对突变性状进行遗传分析,并以C23/浙辐802F2作群体,应用分子标记进行基因定位。【结果】突变体植株三叶期开始在叶片上出现近似圆形淡黄色斑点,随着植株的生长,斑点数量增多,面积逐渐扩大并连成中心枯黄色,边缘黄褐色的病斑,至成熟时病斑几乎遍布整个植株,该类病变发生可能属于程序性细胞死亡过程。与野生型相比,突变体C23的成熟期株高降低,有效分蘖数和每穗着粒数减少,千粒重和结实率降低。遗传分析表明,C23的突变性状由1对隐性核基因控制,该基因位于水稻第12染色体着丝粒附近,SSR标记RM101和InDel标记Ch12-112之间,与这2个标记的遗传距离分别为0.36和0.73cM,并与该区段内的4个InDel标记Ch12-91、Ch12-92、Ch12-95和Ch12-104共分离。【结论】认为C23的突变基因位点与已鉴定的spl1位点接近,但其植株类病变表型与spl1突变体表型有较大差异。 展开更多
关键词 水稻 类病变基因 遗传分析 分子标记定位
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大豆立枯丝核菌G蛋白β亚基基因的克隆与分析 预览 被引量:1
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作者 马炳田 曲广林 +2 位作者 黄文娟 林瑜凡 李仕贵 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期 370-374,共5页
由立枯丝核菌[Rhizoctonia solani Kiihn,有性世代:Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk]引起的大豆纹枯病(soybean sharp eyespot)是一种重要病害。G蛋白β亚基(guanine nucleotide binding proteinbeta-subunit)作为重要的信... 由立枯丝核菌[Rhizoctonia solani Kiihn,有性世代:Thanatephorus cucumeris(Frank)Donk]引起的大豆纹枯病(soybean sharp eyespot)是一种重要病害。G蛋白β亚基(guanine nucleotide binding proteinbeta-subunit)作为重要的信号传导因子,在植物病原菌致病分子机制中起着重要作用。为了解G蛋白β亚基基因的结构与功能,根据同源物种G蛋白β亚基相关序列设计引物,利用PCR和RT-PCR技术克降了大豆立枯丝核菌G蛋白β亚基的基因序列和开放阅读框(G-proteinbeta-subnnit of soybean Rhizoctoniasolani,简写为gbsrsl,GenBank登录号为EU663628)。该片段全长1864bp,含有4个内含子和5个外显子;开放阅读框(ORF)长1047bp,编码348氨基酸残基,与多种真菌G蛋白β亚基的氨基酸序列相似程度较高,达79.72%-99.43%;该蛋白质具有2个α-螺旋和7个β-折叠的二级结构,形成无规则卷曲连接的桶形三级结构。将gbsrsl的ORF连接于原核融合表达载体pGEX-4T-2中,经IPTG诱导,获得了相应蛋白的表达。gbsrsl的克隆和特性研究为了解大豆直枯丝核菌的致病机理、有效防治纹枯病奠定了基础。 展开更多
关键词 大豆 立枯丝核菌 致病性 G蛋白β亚基 信号传导
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水稻品种稻瘟病抗性和抗病基因同源序列多态性分析 预览 被引量:10
4
作者 任鄄胜 肖培村 +3 位作者 陈勇 黄湘 王玉平 李仕贵 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期1-9,共9页
【目的】明晰水稻抗瘟性表型和抗病基因同源序列多态性之间的关系,了解广谱、持久抗瘟性的分子遗传基础。【方法】利用25个稻瘟病鉴别品种(系)和20个水稻品种(系)在人工接种条件下的对稻瘟病单孢菌株的抗性表型和抗病基因同源序列... 【目的】明晰水稻抗瘟性表型和抗病基因同源序列多态性之间的关系,了解广谱、持久抗瘟性的分子遗传基础。【方法】利用25个稻瘟病鉴别品种(系)和20个水稻品种(系)在人工接种条件下的对稻瘟病单孢菌株的抗性表型和抗病基因同源序列(resistance gene analogs,RGA)多态性进行聚类比较分析。【结果】以单孢菌株接种的抗性表型聚类,取相似系数0.450,可将45个品种(系)划分为A、B两大类;取相似系数0.618,A、B两大类又分别可分为i、ii、iii、iv等4个亚类。以抗病基因同源序列多态性聚类,取遗传相似系数0.620,可将45个品种(系)划归Ⅰ,Ⅱ两类,这两类明显地趋向籼粳两亚种划分;取遗传相似系数0.783时,类群Ⅰ又可划分为i、ii、iii、iv、v、vi等6个亚类,类群Ⅱ又可划分为i、ii、iii、iv、v、vi、vii等7个亚类。用抗感单孢稻瘟病菌表型聚类,倾向于抗谱相似的聚为一类;按RGA相似性聚类,倾向于遗传背景相近的聚为一类。对于抗病频率低或是抗病频率高的品种两者类与类之间有较好的对应关系,但总体看来类与类之间没有明显的对应关系。【结论】在抗稻瘟病育种方面,对亲本材料进行单孢菌株抗性鉴定和抗病基因同源序列多态性分析,可以更准确地反映亲本抗性遗传背景,从而避免同一抗源反复使用,还可以丰富培育品种的抗性遗传基础和延长品种抗性。 展开更多
关键词 水稻品种 抗瘟性表型 抗病基因同源基因序列 多态性
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水稻H14早熟性的遗传分析及基因定位 预览 被引量:3
5
作者 李秀兰 姜曰水 +1 位作者 王平荣 邓晓建 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 332-336,共5页
品种生育期是水稻最重要的农艺性状之一,对水稻生育期基因进行定位具有重要意义.水稻籼粳中间型材料H14具有显性早熟特性,它与多个不同类型的中、迟熟品种杂交,F1抽穗期均与早熟亲本H14相近或更早.H14与明恢63和蜀恢881等杂交F2和B... 品种生育期是水稻最重要的农艺性状之一,对水稻生育期基因进行定位具有重要意义.水稻籼粳中间型材料H14具有显性早熟特性,它与多个不同类型的中、迟熟品种杂交,F1抽穗期均与早熟亲本H14相近或更早.H14与明恢63和蜀恢881等杂交F2和B1F1抽穗期呈双峰分布,从峰谷处进行分组,早熟植株与迟熟植株分离比经X^2测验分别符合3:1和1:1,表明该早熟特性主要受一对显性基因控制.以H14/明恢63F2作定位群体,采用微卫星标记将H14所携带的显性早熟基因定位于水稻第6染色体短臂,位于微卫星标记RM314和RM276的一侧,与RM314的遗传距离为8.2cM.认为该基因是一个新的水稻显性早熟基因,暂命名为Ef-h(t). 展开更多
关键词 水稻 早熟性 显性早熟基因 基因定位
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稻米淀粉RVA谱特征及其与理化品质性状相关性的研究 预览 被引量:71
6
作者 贾良 丁雪云 +1 位作者 王平荣 邓晓建 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期 790-794,共5页
测定了四川地区种植的124个水稻品种的RVA谱特征值及各项理化品质指标,分析了RVA谱各特征值间,及其与各项理化品质指标间的相关性,并分析了不同直链淀粉含量(AC)品种的RVA谱特征值差异,结果表明,RVA谱6个特征值之间,最高黏度(PKV)... 测定了四川地区种植的124个水稻品种的RVA谱特征值及各项理化品质指标,分析了RVA谱各特征值间,及其与各项理化品质指标间的相关性,并分析了不同直链淀粉含量(AC)品种的RVA谱特征值差异,结果表明,RVA谱6个特征值之间,最高黏度(PKV)与冷胶黏度(CPV)、回复值(CSV)相关不显著,热浆黏度(HPV)与崩解值(BDV)相关显著,其余均相关极显著。AC、胶稠度(GC)与RVA谱6个特征值均极显著相关,而碱消值(ASV)与RVA谱6个特征值相关均不显著,说明AC和GC是影响RVA谱特征值的两个重要理化品质指标。不同AC品种间的RVA谱不尽相同,一般而言,AC越高的品种崩解值越小,而消减值和回复值越大。 展开更多
关键词 水稻 稻米品质 稻米淀粉RVA谱 理化品质指标
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水稻抗稻瘟病Pib基因的分子标记辅助选择与应用 预览 被引量:71
7
作者 刘洋 徐培洲 +3 位作者 张红宇 徐建第 吴发强 吴先军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期 9-14,共6页
【目的】为探索抗稻瘟病Pib基因的分子标记用于水稻抗稻瘟病辅助选育,36个四川地方稻瘟病菌株被用来检测Pib基因的抗性。同时利用检测感病等位基因Pib的显性标记Lys145,并结合前人报道的检测抗病等位基因Pib的显性标记Pibdom组成一套... 【目的】为探索抗稻瘟病Pib基因的分子标记用于水稻抗稻瘟病辅助选育,36个四川地方稻瘟病菌株被用来检测Pib基因的抗性。同时利用检测感病等位基因Pib的显性标记Lys145,并结合前人报道的检测抗病等位基因Pib的显性标记Pibdom组成一套水稻抗稻瘟病基因Pib显性分子标记。【方法】利用这套水稻抗稻瘟病基因所6显性分子标记对122个杂交稻亲本或材料进行分子鉴定,并分别采用稻瘟病菌株05—12(ZB13)和05—30(ZC15)单小种接种试验进行致病性测试。【结果】所检测的122个杂交稻亲本或材料中,只有7个杂交稻亲本或材料含抗病基因Pib,且对稻瘟病菌菌株ZB13和ZC15表现抗病反应。此外,利用这套水稻抗稻瘟病基因Pib显性分子标记对600个杂交F2代单株进行早期筛选,得到185个抗病基因州6纯合的单株,田间抗性调查结果与抗病基因分子检测结果一致。【结论】该套显性分子标记可应用于水稻抗稻瘟病基因Pib的分子标记辅助选育。 展开更多
关键词 水稻 抗稻瘟病基因Pib 分子标记 辅助选择
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香稻品种的遗传多样性研究 预览 被引量:26
8
作者 张涛 郑家奎 +3 位作者 徐建第 蒋开锋 吴先军 汪旭东 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期 625-635,共11页
【目的】研究香稻品种的遗传多样性。【方法】利用分布于12条水稻染色体上的60个SSR引物和22个水稻功能基因标记检测了32个香稻品种的遗传多样性。【结果】60对SSR引物共检测出188个等位基因,其中有效等位基因数126个。每对引物等位基... 【目的】研究香稻品种的遗传多样性。【方法】利用分布于12条水稻染色体上的60个SSR引物和22个水稻功能基因标记检测了32个香稻品种的遗传多样性。【结果】60对SSR引物共检测出188个等位基因,其中有效等位基因数126个。每对引物等位基因数在2~6之间,平均为3.13个。多态性信息含量(PIC)变幅为0.116~0.744,平均为0.467±0.175。32个品种间的遗传相似系数在0.51~0.96之间,平均为0.697。聚类分析将32个香稻品种在遗传相似系数0.58处分为籼、粳两类,分类结果与品种系谱分析比较吻合。【结论】SSR分子标记在香稻品种遗传多样性分析和育种应用方面具有重要价值。功能基因标记检测表明,部分功能基因在所研究材料中不存在等位变异。而存在等位变异的功能基因标记则表明不同产地来源、不同生态类型的香稻品种具有不同的等位基因。抗稻瘟病基因标记检测出宜香B、香恢1号和丝苗香3个品种同时含有两个抗稻瘟病等位基因,为香稻抗性育种提供了材料基础。 展开更多
关键词 香稻 SSR标记 遗传多样性 聚类分析 功能基因
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水稻显性早熟基因Ef-cd的基因效应分析及育种应用潜力的初步评价 预览 被引量:6
9
作者 董春林 孙业盈 +2 位作者 王平荣 黄晓群 邓晓建 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期 384-388,共5页
利用近等基因系,比较系统地分析了水稻Ef-cd基因的感光效应、早熟效应以及对其他主要农艺性状的影响,并对该基因的育种应用潜力进行了初步评价。结果表明Ef-ca基因是一个非感光的显性早熟基因,它能使水稻提早抽穗13~21d,并能显著... 利用近等基因系,比较系统地分析了水稻Ef-cd基因的感光效应、早熟效应以及对其他主要农艺性状的影响,并对该基因的育种应用潜力进行了初步评价。结果表明Ef-ca基因是一个非感光的显性早熟基因,它能使水稻提早抽穗13~21d,并能显著降低水稻的株高,但对有效穗、穗长、每穗总粒数、结实率和千粒重等主要农艺性状无显著影响。同时,该基因可使迟熟杂交稻的抽穗期提早13~17d,并且通过导人该基因育成的早熟杂交稻新组合比同熟期对照显著增产,因而该基因在早熟杂交稻育种中具有较大的应用潜力。 展开更多
关键词 水稻 早熟性 近等基因系 基因效应
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玉米ae基因的研究进展 预览 被引量:1
10
作者 任红丽 张军杰 黄玉碧 《玉米科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期 56-59,共4页
ae基因是一种胚乳突变基因。玉米ae突变体的表现型为玻璃状、无光泽胚乳。ae基因编码淀粉分枝酶Ⅱb(SBEⅡb)是SBEⅡb的结构基因,ae基因定位在玉米第5条染色体长臂上,在玉米中是单拷贝基因。在ae突变体胚乳中,SBEⅡb的活性缺失,子... ae基因是一种胚乳突变基因。玉米ae突变体的表现型为玻璃状、无光泽胚乳。ae基因编码淀粉分枝酶Ⅱb(SBEⅡb)是SBEⅡb的结构基因,ae基因定位在玉米第5条染色体长臂上,在玉米中是单拷贝基因。在ae突变体胚乳中,SBEⅡb的活性缺失,子粒的表观直链淀粉含量增加,同时支链淀粉的α-1,6糖苷键分支点的数量降低。本文对ae基因的结构、功能、特性等作了一个较全面的综述,对其做更深入的研究,以改良淀粉品质。 展开更多
关键词 直链淀粉 胚乳突变基因 ae(amylose extender)基因 淀粉分枝酶Ⅱb(SBEⅡb)
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水稻H14显性早熟性的遗传分析 预览
11
作者 李秀兰 姜曰水 +1 位作者 王平荣 邓晓建 《山东农业科学》 2007年第6期 32-34,共3页
水稻籼粳中间型材料H14具有显性早熟特性,以H14与明恢63、蜀恢881等多个不同类型的中、迟熟品种杂交后代为材料进行早熟性遗传分析。结果显示,各组合F1的抽穗期均与早熟亲本H14相近或更早,H14与明恢63和蜀恢881等的杂交F2和B1F1抽穗期... 水稻籼粳中间型材料H14具有显性早熟特性,以H14与明恢63、蜀恢881等多个不同类型的中、迟熟品种杂交后代为材料进行早熟性遗传分析。结果显示,各组合F1的抽穗期均与早熟亲本H14相近或更早,H14与明恢63和蜀恢881等的杂交F2和B1F1抽穗期呈双峰分布,从峰谷处进行分组,早熟植株与迟熟植株分离比经χ2测验分别符合3∶1和1∶1,表明H14的早熟性主要受一对显性基因控制。 展开更多
关键词 水稻 早熟性 H14 显性早熟基因
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叶绿素缺乏水稻突变体中光系统蛋白和叶绿素合成特性的研究 预览 被引量:32
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作者 徐培洲 李云 +5 位作者 袁澍 张红宇 彭海 林宏辉 汪旭东 吴先军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期 1299-1305,共7页
【目的】以叶绿素缺乏突变体水稻为材料,研究其光系统蛋白和叶绿素的合成特性,以揭示叶绿素的生物合成及其调控的机理。【方法】通过蛋白质电泳、Western杂交、Northern杂交以及叶绿素前体物质的测定等来鉴定叶绿素缺乏突变体胛的黄... 【目的】以叶绿素缺乏突变体水稻为材料,研究其光系统蛋白和叶绿素的合成特性,以揭示叶绿素的生物合成及其调控的机理。【方法】通过蛋白质电泳、Western杂交、Northern杂交以及叶绿素前体物质的测定等来鉴定叶绿素缺乏突变体胛的黄化原因。【结果】与野生型相比,叶绿素缺乏突变体胛的叶绿素含量明显减少,与之对应的是其类囊体膜蛋白的减少,特别是光系统Ⅱ捕光色素蛋白(LHCⅡ)三聚体含量的急剧减少。Western杂交进一步表明,胛的LHCⅡ含量仅为野生型的1/3。编码LHCⅡ脱辅基蛋白的cab基因在突变体胛和野生型中转录水平相仿。突变体胛叶绿素合成的前体物质从合成的起始6一氨基乙酰丙酸(ALA)到原脱植基叶绿素(Pchlide)含量均等于或高于野生型,而脱植基叶绿素(Chlide)、叶绿素a和叶绿素b的含量均显著低于野生型。【结论】通过突变体胛和野生型的比较说明,突变体W1LHCⅡ脱辅基蛋白含量的减少并不是由于cab基因的转录量降低引起的。通过测定叶绿素合成的前体物质初步认为突变体胛叶绿素缺乏的原因是原脱植基叶绿素到脱植基叶绿素的合成效率降低所致。 展开更多
关键词 类囊体膜 LHCⅡ 叶绿素前体物质 水稻
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78个水稻不育系对稻粒黑粉病的抗性评价 被引量:1
13
作者 王爱军 殷得所 +4 位作者 富蓉 盘林秀 顾思思 江波 郑爱萍 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第2期207-212,共6页
水稻稻粒黑粉病主要为害水稻不育系,是限制我国南方杂交水稻制繁种产量和质量的主要病害因素。为挖掘抗稻粒黑粉病的水稻不育系品种,提供具有抗稻粒黑粉病育种价值的水稻不育系材料,本研究于2014—2016年,采用田间接种稻粒黑粉病菌的方... 水稻稻粒黑粉病主要为害水稻不育系,是限制我国南方杂交水稻制繁种产量和质量的主要病害因素。为挖掘抗稻粒黑粉病的水稻不育系品种,提供具有抗稻粒黑粉病育种价值的水稻不育系材料,本研究于2014—2016年,采用田间接种稻粒黑粉病菌的方法,对四川、湖北、福建的78个水稻不育系品种进行了稻粒黑粉病菌抽穗期抗性评价。连续3年接种稻粒黑粉病菌试验表明,共有4个水稻不育系品种对稻粒黑粉病表现中抗及以上抗性,大部分为感病品种,其中4766A接种稻粒黑粉病菌后未发病,对稻粒黑粉病表现稳定高抗,为我国首次报道的高抗稻粒黑粉病水稻品种。 展开更多
关键词 水稻 不育系 黑粉病菌 高抗品种
我国水稻纹枯病菌的融合类群及致病性差异 预览
14
作者 王爱军 王娜 +3 位作者 顾思思 赵文娟 李平 郑爱萍 《草业学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期55-63,共9页
为明确我国水稻纹枯病菌的融合类群及其致病力差异,于2015年8月从黑龙江、吉林、辽宁、河南、安徽、浙江、江苏、四川、重庆、贵州、云南、湖北、湖南、广西、广东、福建16个主要水稻种植区采集与水稻纹枯病症状类似的水稻叶鞘和叶片,... 为明确我国水稻纹枯病菌的融合类群及其致病力差异,于2015年8月从黑龙江、吉林、辽宁、河南、安徽、浙江、江苏、四川、重庆、贵州、云南、湖北、湖南、广西、广东、福建16个主要水稻种植区采集与水稻纹枯病症状类似的水稻叶鞘和叶片,采用水琼脂分离法分离病菌,在每个产区分离的病菌中各选择1个菌株,采用形态学、菌丝细胞核荧光染色和rDNA-ITS序列分析对分离出的真菌进行鉴定,比较不同地区病原菌生长速度、菌核结构和细胞核数量的差异,并应用柯赫氏法则对不同地区病样中分离的纯培养物致病性进行测定。结果表明,分离自不同地区的61株真菌菌株均为Rhizoctonia solani,且属于AG1IA融合群,菌丝细而松散,菌丝多分枝有隔膜,分枝直角或近45°的锐角,后期产生的菌核大多数细胞为多核,但不同地区的病原菌菌株生长速度、菌核结构和细胞核数量具有一定的差异;在致病性试验中选取的16株菌株均侵染水稻叶片,产生水稻纹枯病典型症状,分离自不同地区的菌株致病力具有明显差异,其中分离自广东、广西、福建和重庆的菌株致病力较强。 展开更多
关键词 水稻 立枯丝核菌 融合群 致病性
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水稻稻粒黑粉病病原菌鉴定及致病性测定
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作者 王爱军 江波 +5 位作者 富蓉 王娜 殷得所 李平 张靖 郑爱萍 《植物病理学报》 CSCD 北大核心 2018年第3期297-304,共8页
为明确我国南方杂交水稻制繁种区稻粒黑粉病病原菌及其致病力情况,于2015年8月从安徽、湖南、江苏、贵州、四川遂宁、四川新津、四川温江7个主要杂交稻制繁种区采集稻粒黑粉病样本,采用冬孢子悬浮液分离法进行病原菌的分离。基于形态学... 为明确我国南方杂交水稻制繁种区稻粒黑粉病病原菌及其致病力情况,于2015年8月从安徽、湖南、江苏、贵州、四川遂宁、四川新津、四川温江7个主要杂交稻制繁种区采集稻粒黑粉病样本,采用冬孢子悬浮液分离法进行病原菌的分离。基于形态学、菌丝细胞核荧光染色和r DNA-ITS序列分析对病原菌进行鉴定,并应用柯赫氏法则对不同地区病样中分离的纯培养物致病性进行测定。结果表明分离到的35株病原菌菌株并无明显形态学差异,冬孢子呈球形或椭圆形,次生小孢子单细胞核,呈线状或弯曲状两种类型,与已报道的黑粉菌属Tilletia horrida形态特征相似;r DNA-ITS序列分析表明,选取的7株病原菌菌株与T.horrida DQ827699同源性达100%,说明所分离菌株为稻粒黑粉病菌;致病性试验表明,7株病原菌菌株侵染水稻稻粒均能产生稻粒黑粉病的典型症状,其中分离自江苏的菌株JS造成的单穗病粒数和产量损失最大,致病力较强,且萌芽率最高,分离自不同地区的菌株致病力具有明显差异。该7株病原菌最适生长温度为28℃,光照对其生长没有明显影响。 展开更多
关键词 水稻 稻粒黑粉病菌 鉴定 致病性
苏云金芽胞杆菌晶体蛋白2Ab32(Cry2Ab32)基因的克隆、表达与杀虫活性分析 被引量:1
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作者 余宗兰 黄刚辉 +5 位作者 李巧 贺利业 龚莉 刘瑶 李平 郑爱萍 《农业生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期798-805,共8页
为了扩充新的鳞翅目杀虫蛋白基因,本研究采用限制性片段长度多态性PCR(PCR-restricted fragment length polymorphisms,PCR-RFLP)方法对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株BN23-5中所含杀虫晶体蛋白基因进行鉴定和分析。... 为了扩充新的鳞翅目杀虫蛋白基因,本研究采用限制性片段长度多态性PCR(PCR-restricted fragment length polymorphisms,PCR-RFLP)方法对苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)菌株BN23-5中所含杀虫晶体蛋白基因进行鉴定和分析。结果表明,该菌株中含有晶体蛋白(crystal,cry)cry2Ab类基因。根据已知cry2Ab类基因编码区设计简并引物,以菌株BN23-5全质粒DNA为模板进行扩增并测序。结果显示,扩增产物为一个完整的cry2Ab类基因,全长1 902 bp,由634个氨基酸组成,氨基酸序列与Cry2Ab1同源性最高(96.5%),命名为cry2Ab32(Gen Bank登录号:KJ710647)。将该基因插入表达载体p ET-28a,构建重组质粒p ET-2Ab并转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),异丙基-β-d-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导成功表达蛋白,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)验证其相对分子质量为65 k D左右。表达的包涵体蛋白采用饲喂法进行生物活性测定,结果表明,Cry2Ab32对小菜蛾(Plutella xylostella)、玉米螟(Ostrinia fumacalis)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)均有杀虫活性,半致死浓度(median lethal concentration,LC50)分别为8.99、19.34和21.24μg/m L,对甜菜夜蛾(Laphygma exigua)的致死率不高,但能明显抑制甜菜夜蛾的生长。cry2Ab32新基因的发现将为重要农业害虫的防治提供更多选择,为进一步研究Cry2Ab类蛋白结构和杀虫机理提供基础资料。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 克隆 杀虫活性 晶体蛋白2Ab32(Cry2Ab32)
热胁迫下丹参迷迭香酸代谢途径关键酶基因的表达研究 预览 被引量:6
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作者 李东 吴先军 陈新 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期 60-67,共8页
为探索热胁迫对丹参迷迭香酸途径关键酶基因表达的影响,采用定量RT-PCR法,以Actin与GAPDH作为内参基因,0~48h叶片cDNA作为模板,对迷迭香酸途径7个关键酶基因PAL、C4H、4CL、TAT、HPPD、HPPR和RAS的表达进行分析。通过试验结果构建出这... 为探索热胁迫对丹参迷迭香酸途径关键酶基因表达的影响,采用定量RT-PCR法,以Actin与GAPDH作为内参基因,0~48h叶片cDNA作为模板,对迷迭香酸途径7个关键酶基因PAL、C4H、4CL、TAT、HPPD、HPPR和RAS的表达进行分析。通过试验结果构建出这7个关键酶基因0~48h代谢途径表达图谱。其中,PAL、C4H和RAS受热胁迫影响表达量下降;TAT、4CL和HPPD表达量呈先上升后下降趋势;HPPR表达量前期变化不大,后期呈下降趋势。结果表明热胁迫对迷迭香酸途径关键酶基因表达有极显著影响。该表达时序谱的建立为进一步研究热胁迫与酚酸类成分累积之间的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 丹参 热胁迫 定量RT-PCR
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胁迫条件下植物DNA甲基化的稳定性 预览 被引量:6
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作者 彭海 席婷 +1 位作者 张静 吴先军 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2431-2438,共8页
DNA甲基化是植物逆境响应的重要机制,调控了开花、产量、抗性等与物种稳定性或品种一致性密切相关的性状。这些性状相关位点的甲基化变异在群体内基本稳定一致、在世代间也具有一定的可遗传性,随机变异较少。病原菌胁迫下,抗性相关位点... DNA甲基化是植物逆境响应的重要机制,调控了开花、产量、抗性等与物种稳定性或品种一致性密切相关的性状。这些性状相关位点的甲基化变异在群体内基本稳定一致、在世代间也具有一定的可遗传性,随机变异较少。病原菌胁迫下,抗性相关位点多出现低甲基化、全基因组多为高甲基化,这符合生物遗传与进化机制,规律性强,随机性小。这一现象在烟草、拟南芥等多种生物胁迫,以及冷、盐、重金属和多倍体等非生物胁迫研究中得到了直接或间接证据的支持。本文讨论了甲基化分析中误差的可能来源并提出了控制措施。 展开更多
关键词 植物 胁迫 MSAP 甲基化变异 随机性
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热胁迫下丹参转录组cDNA-AFLP分析 被引量:7
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作者 李东 吴先军 陈新 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期 2083-2091,共9页
目的探索热胁迫影响丹参生长和次生代谢的分子机制。方法采用cDNA-AFLP技术对丹参热胁迫下叶片基因表达进行转录组分析。采用EcoR I和Mse I对叶片cDNA进行双酶切,256对引物组合进行选择性扩增,对差异片段进行测序、功能分析和定量RT-PC... 目的探索热胁迫影响丹参生长和次生代谢的分子机制。方法采用cDNA-AFLP技术对丹参热胁迫下叶片基因表达进行转录组分析。采用EcoR I和Mse I对叶片cDNA进行双酶切,256对引物组合进行选择性扩增,对差异片段进行测序、功能分析和定量RT-PCR。结果共分离出196个差异表达转录衍生片段(transcription derived fragments,TDFs),其中增强与诱导表达的TDFs 122条,抑制表达的74条;从NCBI中鉴定出147个同源TDFs,另有49个TDFs为新发现序列。结论热胁迫影响转录组的信号转导、转录调控、逆境响应蛋白、物质代谢等多个方面,为进一步研究丹参有效成分的代谢调控奠定了基础。 展开更多
关键词 丹参 热胁迫 CDNA-AFLP 转录组 RT-PCR
水稻雄性不育突变体802A的遗传分析及基因定位 预览 被引量:3
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作者 孙小秋 付磊 +2 位作者 王兵 肖云华 邓晓建 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第13期2633-2640,共8页
【目的】对雄性不育突变体802A进行表型鉴定和遗传分析,并对不育突变基因进行分子标记定位。【方法】调查802A突变体的花粉育性、形态特征和主要农艺性状,同时对其不育性状进行遗传分析,并以802A/II-32BFz和802A/02428F:为定位... 【目的】对雄性不育突变体802A进行表型鉴定和遗传分析,并对不育突变基因进行分子标记定位。【方法】调查802A突变体的花粉育性、形态特征和主要农艺性状,同时对其不育性状进行遗传分析,并以802A/II-32BFz和802A/02428F:为定位群体,运用SSR、InDel等分子标记进行基因定位。【结果】802A突变体的花药瘦小、干瘪、不开裂,外观呈乳白色,花粉以典败为主,属于普通雄性不育类型。同时,该突变体还表现颖壳变细、扭曲,剑叶变短、变窄、内卷,穗颈包颈等特征。遗传分析表明,802A的雄性不育性状由1对隐性核基因控制。该不育突变基因定位于第3染色体长臂的SSR5I物RM3513附近,InDel标记s2和s5之间,该基因与这2个InDel标记的遗传距离分别为0.6和0.3cM,并且与InDel标记s3和s4在167株F。不育单株中共分离。【结论】通过与迄今已报道的水稻雄性不育基因比较,认为802A所携带的突变基因是一个新的水稻隐性核不育基因,暂命名为mS92(t)。 展开更多
关键词 水稻 雄性不育 核不育 遗传分析 基因定位
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