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人参二醇类皂苷的生物转化动态及人参稀有皂苷C-K或F2的制备 预览
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作者 肖永坤 刘春莹 +6 位作者 鱼红闪 李泰厚 徐龙权 宋建国 林完泽 孙长凯 金凤燮 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1184-1192,共9页
为了低成本有效制备人参稀有皂苷C-K或F2,将A.nigerg.848菌酶用于转化含有人参皂苷(质量分数)分别为49.6%Rb1,25.9%Rd,19.3%Rc和5.23%Rb2的西洋参二醇混合皂苷.霉菌发酵时,采用人参二醇皂苷诱导物比人参提取液诱导物的产酶总活力提高10%... 为了低成本有效制备人参稀有皂苷C-K或F2,将A.nigerg.848菌酶用于转化含有人参皂苷(质量分数)分别为49.6%Rb1,25.9%Rd,19.3%Rc和5.23%Rb2的西洋参二醇混合皂苷.霉菌发酵时,采用人参二醇皂苷诱导物比人参提取液诱导物的产酶总活力提高10%~15%.所产的2种诱导酶均能水解人参二醇皂苷的3-O-和20-O-多种糖基,均为人参皂苷酶Ⅰ型;但是人参二醇皂苷诱导物所产酶几乎全部转化人参二醇皂苷为C-K,而人参提取液诱导物所产酶则残留中间产物.使用黑曲霉人参二醇皂苷诱导所产酶,在转化西洋参二醇皂苷的动态研究中发现,酶反应1.5~2.5h,主要为产物F2;酶反应12h后,主要产物为C-K皂苷.基于此,40g人参二醇类皂苷在45℃粗酶反应24h,经处理得到含C-K质量分数为87%的23g酶反应产物,C-K转化率达85%(摩尔分数).用40g西洋参二醇皂苷在45℃粗酶反应2.5h,经处理得到含有质量分数为58%的F2和27%的C-K的26g酶反应产物,F2转化率为50.4%,C-K转化率为29.5%.通过人参二醇皂苷诱导的黑曲霉粗酶转化人参二醇类皂苷动态研究,建立了C-K转化率为85%,F2转化率为50%的制备方法,为大批量制备提供了基础依据. 展开更多
关键词 人参二醇类皂苷 人参皂苷生物转化 人参皂苷F2 人参皂苷C-K 黑曲霉
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低场核磁及成像技术原位监测温度对刺参干燥过程中水分流动性的影响 预览
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作者 臧秀 王偲琦 +2 位作者 章坦 祖崟雪 谭明乾 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期5-9,共5页
选取45、60和75℃3个温度对刺参进行原位干燥,利用低场核磁及成像技术原位监测刺参干燥过程中的水分动态变化。结果表明,3个温度条件下的横向弛豫时间图谱均有3个峰,分别为弛豫时间小于2ms的结合水、15~183ms的不易移动水、200~1600ms... 选取45、60和75℃3个温度对刺参进行原位干燥,利用低场核磁及成像技术原位监测刺参干燥过程中的水分动态变化。结果表明,3个温度条件下的横向弛豫时间图谱均有3个峰,分别为弛豫时间小于2ms的结合水、15~183ms的不易移动水、200~1600ms的自由水。结合水的峰比例为上升趋势,不可移动水的峰比例总体下降趋势,但有波动,自由水峰比例先升后降。磁共振成像可以看出,在同样干燥12h条件下,75℃时干燥水分变化明显,说明此温度下干燥速率最大。 展开更多
关键词 刺参 低场核磁 磁共振成像 弛豫时间 水分状态
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莱茵衣藻叶绿体型磷酸甘油醛脱氢酶过表达对其储能物质生产的影响 预览
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作者 朱振 曹旭鹏 +3 位作者 苑广泽 刘娇 薛松 田晶 《中国海洋大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期50-58,共9页
叶绿体型磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)光合固碳生产储能物质的关键酶,加深对该酶生物学功能的认识对探索微藻光合固碳有着重要意义。本文首先构建了2种叶绿体型GAPDH过表达转化株,实现了持续稳定和生... 叶绿体型磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)是莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)光合固碳生产储能物质的关键酶,加深对该酶生物学功能的认识对探索微藻光合固碳有着重要意义。本文首先构建了2种叶绿体型GAPDH过表达转化株,实现了持续稳定和生长偶联2种不同模式的叶绿体型GAPDH的表达;通过对比分析2种转化株与野生株的生长(OD与干重)、叶绿素荧光参数Fv/Fm、碳水化合物含量以及脂肪酸种类与含量的变化规律,考察过表达GAPDH对莱茵衣藻储能物质生产能力的影响。研究表明,过表达叶绿体型GAPDH实现了转化株碳水化合物和脂肪酸产率的明显提升。与野生株相比,稳定过表达GAPDH的转化株不仅能够积累较高含量的碳水化合物,且脂肪酸最大产率提升了55%,最大储能物质产率提升了75%。本研究首次从实验角度证实,莱茵衣藻叶绿体型GAPDH的过表达可显著提升其储能物质生产能力,本研究对基于微藻光合固碳的合成生物学的发展起到推动作用。 展开更多
关键词 莱茵衣藻 磷酸甘油醛脱氢酶 光合固碳 储能物质 合成生物学
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金属离子对人参皂苷Re的催化转化 预览
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作者 丁杉 刘春莹 +2 位作者 徐龙权 宋建国 鱼红闪 《江西师范大学学报:自然科学版》 CAS 北大核心 2019年第1期96-101,共6页
以金属离子催化转化人参皂苷Re生成Rg2为目标,考察金属离子在有机-水为溶剂下催化反应产物的变化情况,以及在乙醇-水体系下Fe……3+催化反应产物含量随乙醇浓度、反应温度、铁离子浓度、反应时间的变化.结果表明:在乙醇-水为溶剂下催化... 以金属离子催化转化人参皂苷Re生成Rg2为目标,考察金属离子在有机-水为溶剂下催化反应产物的变化情况,以及在乙醇-水体系下Fe……3+催化反应产物含量随乙醇浓度、反应温度、铁离子浓度、反应时间的变化.结果表明:在乙醇-水为溶剂下催化反应产物20(S,R)-Rg2最多,催化反应条件优化结果为:乙醇体积浓度为50%,Fe……3+反应浓度为0.8mol·L^-1,在40℃下反应12h,产物得率为64.8%,其中20(S,R)-Rg2的质量分数为74.3%.为人参皂苷催化转化为稀有皂苷提供了新的方法. 展开更多
关键词 人参皂苷 催化转化 条件优化 HPLC-ELSD
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蛹虫草菌深层液体发酵耦合大孔树脂吸附高效生产虫草素 预览
5
作者 关海晴 李鸿宇 +3 位作者 李倩 刘冰南 王际辉 王亮 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第7期2675-2683,共9页
虫草素是一种核苷类抗生素,具有抗癌、抗肿瘤等活性,主要由蛹虫草菌液体发酵生产,然而低产量限制了其应用。考虑到高浓度虫草素积累对其生物合成过程产生强烈反馈抑制,提出了应用发酵分离耦合技术移除部分虫草素、弱化反馈抑制作用以提... 虫草素是一种核苷类抗生素,具有抗癌、抗肿瘤等活性,主要由蛹虫草菌液体发酵生产,然而低产量限制了其应用。考虑到高浓度虫草素积累对其生物合成过程产生强烈反馈抑制,提出了应用发酵分离耦合技术移除部分虫草素、弱化反馈抑制作用以提高虫草素产量的策略。通过静态吸附实验,筛选出虫草素吸附和解吸性能良好的大孔树脂NKA-Ⅱ,并优化了大孔树脂使用量(60g·L^-1)、吸附温度(37℃)和解吸剂种类(100%乙醇)。在30g·L^-1葡萄糖的分批发酵体系中,经过两次树脂吸附,发酵21d后虫草素产量达到644.50mg·L^-1,较对照组提高32.07%;随后,将树脂吸附分离策略应用于补料分批发酵体系,虫草素产量达到787.50mg·L^-1,较对照组提高35.78%。这些结果表明,将虫草素液体发酵与大孔树脂吸附分离耦合,有效弱化了虫草素反馈抑制,显著提高虫草素产量,为虫草素高效生产分离提供了新思路。 展开更多
关键词 发酵 生物分离 生物过程 虫草素 蛹虫草菌
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二步法制备稀有人参皂苷Rh1组异构体 预览
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作者 金豆豆 刘春莹 +2 位作者 徐龙权 宋建国 鱼红闪 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第16期156-162,共7页
本论文以制备人参皂苷Rh1为目标,选择三醇类人参皂苷Re为底物,采用酶转化和金属离子催化联用的二步法催化转化,研究了各步骤中的催化反应条件,并对产物进行了纯化和组成分析。结果表明:Absidia sp.P39r菌株产酶能催化转化Re生成Rg1,确... 本论文以制备人参皂苷Rh1为目标,选择三醇类人参皂苷Re为底物,采用酶转化和金属离子催化联用的二步法催化转化,研究了各步骤中的催化反应条件,并对产物进行了纯化和组成分析。结果表明:Absidia sp.P39r菌株产酶能催化转化Re生成Rg1,确定其最佳反应条件为:缓冲液pH5.0,反应温度40℃,底物浓度1.2%,反应时间16 h,乙醇浓度10%,在此反应条件下得到的Rg1质量分数最高,为70.5%。然后以Rg1为底物,确定在乙醇-水体系下Fe3+的催化反应产物20(S,R)-Rh1的质量分数最高,催化反应条件优化结果为:乙醇浓度50%,反应温度50℃,底物浓度1.7%,Fe3+溶液反应浓度1.4 mol/L,反应时间14 h,20(S,R)-Rh1的质量分数高达61.83%,Rk3、Rh4的质量分数之和为27.34%。在上述条件下将20 g人参皂苷Re与酶液反应,反应结束后用AB-8大孔吸附树脂分离干燥得到含有Rg1的产物14.1 g。再取10.2 g反应得到的Rg1与Fe^3+溶液反应,干燥后最终得到的人参皂苷Rh1组异构体质量为8.18 g,得率为80.2%,其中20(S)-Rh1,20(R)-Rh1,Rk3和Rh4的含量分别为37.71%,24.12%,7.27%,20.07%。 展开更多
关键词 酶催化法 Fe^3+催化法 人参皂苷RH1 异构体
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氢化大豆油对小鼠肝脏和血液反式脂肪酸含量及脂代谢的影响 预览
7
作者 简路洋 王晗 +3 位作者 梁帅 肖珊 刘冰南 王际辉 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期29-31,共3页
将3周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为豆油组(对照组)和氢化大豆油组(实验组),每组4只,饲养至8周。应用GC-MS对肝脏和血浆的反式脂肪酸组分进行测定。对小鼠肝脏组织进行苏木精伊红(HE)染色,并对总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(G... 将3周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为豆油组(对照组)和氢化大豆油组(实验组),每组4只,饲养至8周。应用GC-MS对肝脏和血浆的反式脂肪酸组分进行测定。对小鼠肝脏组织进行苏木精伊红(HE)染色,并对总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(GPT)和天冬氨酸转移酶(GOT)进行测定。结果表明,实验组小鼠肝脏和红细胞中含有反十八碳一烯酸(t18:1),而在对照组的肝脏、血浆和红细胞中均未检出t18:1;实验组肝脏细胞脂肪变明显,但未出现明显的炎性浸润。血浆中TC、TG、GPT和GOT指标未出现显著变化。结果提示,氢化大豆油能够影响肝脏及血浆中反式脂肪酸含量,并导致肝脏细胞出现明显的脂肪变。 展开更多
关键词 氢化大豆油 反式脂肪酸 小鼠 肝脏 脂代谢
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酶转化制备人参皂苷Rg2及其对巨噬细胞增殖分化的影响 预览
8
作者 孙爱华 王宇 +2 位作者 孙秀艳 袁小林 鱼红闪 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第2期88-91,共4页
利用Absidia sp.G8r菌产酶液,以人参皂苷Re为底物进行酶转化制备人参皂苷Rg2。采用硅胶柱层析法分离纯化人参皂苷Rg2,探讨了人参皂苷Rg2对巨噬细胞增殖及单核-巨噬细胞分化的影响。结果表明,人参皂苷Re转化为Rg2,酶转化率为66.3%。硅胶... 利用Absidia sp.G8r菌产酶液,以人参皂苷Re为底物进行酶转化制备人参皂苷Rg2。采用硅胶柱层析法分离纯化人参皂苷Rg2,探讨了人参皂苷Rg2对巨噬细胞增殖及单核-巨噬细胞分化的影响。结果表明,人参皂苷Re转化为Rg2,酶转化率为66.3%。硅胶柱层析法对产物分离纯化,得到高纯度Rg2,HPLC检测纯度达95%,得率为13.1%。人参皂苷Rg2对巨噬细胞增殖分化的研究表明,低质量浓度(25~100μg/mL)对巨噬细胞的增殖抑制作用不明显,高质量浓度(大于100μg/mL)时对巨噬细胞的增殖抑制作用明显;当Rg2质量浓度为100μg/mL时,能促进单核-巨噬细胞的分化。 展开更多
关键词 人参皂苷 酶转化 巨噬细胞 单核-巨噬细胞
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二烯丙基二硫醚对蜂房哈夫尼菌群体感应的抑制作用 预览
9
作者 王一芳 侯红漫 +2 位作者 张公亮 卢美杉 王越 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第3期161-165,共5页
以从海参中分离的优势腐败菌蜂房哈夫尼菌为对象,研究了二烯丙基二硫醚(DADS)对受其群体感应调控的生物膜及泳动性的抑制作用。采用CV026报告菌定性检测DADS的抗群体感应活性,利用96微孔板法、扫描电镜(SEM)和琼脂扩散法分析DADS对蜂房... 以从海参中分离的优势腐败菌蜂房哈夫尼菌为对象,研究了二烯丙基二硫醚(DADS)对受其群体感应调控的生物膜及泳动性的抑制作用。采用CV026报告菌定性检测DADS的抗群体感应活性,利用96微孔板法、扫描电镜(SEM)和琼脂扩散法分析DADS对蜂房哈夫尼菌生物膜及泳动性的抑制作用。结果表明,DADS作用于蜂房哈夫尼菌和CV026的最低抑菌浓度是48 mmol/L。在亚抑菌浓度下,与未处理对照组相比,DADS能够抑制由群体感应调控的CV026中紫色素的分泌而不抑制其生长。在0~12 mmol/L,随着浓度增加,DADS对生物膜的抑制率可达49.6%,对泳动性的抑制率达到73.5%。在12 mmol/L时,DADS能够抑制生物膜的形成。DADS能够抑制蜂房哈夫尼菌的群体感应活性、生物膜及泳动性,从而发挥防腐功效。 展开更多
关键词 蜂房哈夫尼菌 二烯丙基二硫醚 生物膜 泳动性
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基于ThT荧光寿命检测蛋清溶菌酶蛋白寡聚体 预览
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作者 李成 宋吉雪 +7 位作者 刘婷婷 李妍 刘冰南 王亮 肖珊 李琳 耿旭辉 王际辉 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第1期90-95,共6页
采用时间分辨荧光技术,检测了不同形态蛋白聚集体的荧光染料硫磺素T(ThT)荧光寿命.利用蛋清溶菌酶体外制备了蛋白聚集体;采用透射电子显微镜(TEM)及ThT稳态荧光检测了结合蛋白纤维生长的动力学曲线,确定其形成寡聚体及纤维样聚集体的特... 采用时间分辨荧光技术,检测了不同形态蛋白聚集体的荧光染料硫磺素T(ThT)荧光寿命.利用蛋清溶菌酶体外制备了蛋白聚集体;采用透射电子显微镜(TEM)及ThT稳态荧光检测了结合蛋白纤维生长的动力学曲线,确定其形成寡聚体及纤维样聚集体的特征和时间.通过时间相关单光子计数(TCSPC)技术测定了蛋清溶菌酶单体、寡聚体和淀粉样纤维的ThT荧光寿命曲线,并拟合、计算其荧光寿命.根据圆二色谱(CD)分析结果推测聚集体的结构不同导致其与ThT的结合状态不同,从而影响ThT荧光寿命.结果表明,通过测定ThT荧光寿命可以区分蛋白单体、寡聚体和纤维样聚集体,并监测蛋白寡聚体的形成,为后续病理蛋白聚集过程中形成寡聚体物质的监测提供了研究基础. 展开更多
关键词 寡聚体 硫磺素T 时间相关单光子计数 荧光寿命
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拟南芥AtGrp7RRM结构域的纯化及其结构与结合的初步分析(英文) 预览
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作者 迟秀娟 乔晓亚 +4 位作者 刘颖 刘惠丽 陈雷 王际辉 艾选军 《波谱学杂志》 CAS 北大核心 2019年第1期1-14,共14页
富含甘氨酸的RNA结合蛋白AtGrp7是拟南芥(Arabidopsis thaliana)调节生物钟负反馈回路的组分.在使用常规方法纯化AtGrp7 RRM结构域的初始试验中,观察到烟草蚀纹病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域的紫外吸收峰为蛋白和杂质... 富含甘氨酸的RNA结合蛋白AtGrp7是拟南芥(Arabidopsis thaliana)调节生物钟负反馈回路的组分.在使用常规方法纯化AtGrp7 RRM结构域的初始试验中,观察到烟草蚀纹病毒(TEV)酶切后AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域的紫外吸收峰为蛋白和杂质的混合信号峰.为解决常规纯化中的杂质问题,对AtGrp71-90应用了变性-复性两步纯化方法.AtGrp7 RRM结构域的1H-15N HSQC指纹谱和CS-Rosetta模型结构表明快速稀释重折叠后其结构完全恢复.等温滴定量热法(ITC)和核磁共振(NMR)滴定实验进一步证实,重折叠后AtGrp71-90 RRM结构域具有正确结合RNA/DNA的功能. 展开更多
关键词 变性-复性 快速稀释 核磁共振(NMR) AtGrp7 RNA识别基序(RRM)结构域 结合分析
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高产β-丙氨酸基因工程菌的构建与优化 预览
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作者 李博 宿承璘 +2 位作者 范超 洪皓 张春枝 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第1期1-4,共4页
为构建高产β-丙氨酸基因工程菌,克隆了来源于枯草芽孢杆菌的L-天冬氨酸-α-脱羧酶(panD)基因,在E.coli BL21(DE3)中异源表达,得到重组菌后,采用不同方法进行优化。通过选用不同表达载体、对目的基因序列进行密码子优化以及对菌株进行... 为构建高产β-丙氨酸基因工程菌,克隆了来源于枯草芽孢杆菌的L-天冬氨酸-α-脱羧酶(panD)基因,在E.coli BL21(DE3)中异源表达,得到重组菌后,采用不同方法进行优化。通过选用不同表达载体、对目的基因序列进行密码子优化以及对菌株进行自动诱导的策略,逐步提高目的蛋白的表达量,进而提高β-丙氨酸产量。结果表明,经优化后,菌株30a-1的β-丙氨酸产量提高到140.82mmol/L,较优化前提高了2.5倍。 展开更多
关键词 L-天冬氨酸-α-脱羧酶 Β-丙氨酸 密码子优化 自动诱导
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接种量对草莓酒发酵特性的影响 预览
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作者 马欣娟 吕慧威 孙玉梅 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第5期123-126,共4页
采用裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的接种量分别为3%、5%、7%和9%(V/V),在25 ℃条件下制备草莓酒,比较不同接种量草莓酒发酵的降糖速率、产酒精速率、产酸量及香气成分含量等发酵特性的影响。结果表明,随着接种量在3%~7%的范围... 采用裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)的接种量分别为3%、5%、7%和9%(V/V),在25 ℃条件下制备草莓酒,比较不同接种量草莓酒发酵的降糖速率、产酒精速率、产酸量及香气成分含量等发酵特性的影响。结果表明,随着接种量在3%~7%的范围内增加,降糖和产酒精速率越高,产酸量越低;当接种量达到9%时,产酒精速率降低;在发酵后期的草莓酒中,随接种量增大,丁酸乙酯、乙酸异戊酯、正丙醇、正丁醇和异丁醇含量升高,乙酸乙酯、乳酸乙酯和异戊醇含量先升高后降低,而β-苯乙醇含量与接种量无明显相关。7%接种量的草莓酒具有较高的酯和高级醇含量,发酵降糖、产酒精速率快,产酸量适中,同时兼具较高的香气质量。因此,草莓酒发酵的适宜接种量为7%(V/V)(7×10^7 CFU/mL)。 展开更多
关键词 草莓酒 裂殖酵母 接种量 发酵特性
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补加碳源对采油菌株ZY-1生长及发酵液表面活性的影响 预览
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作者 于亚男 王佳新 孙玉梅 《中国酿造》 CAS 北大核心 2019年第1期109-112,共4页
该试验选取一株分离自辽河油田原油的菌株ZY-1,分别补加培养基碳源(木糖、淀粉、葡萄糖),于60℃静置培养7d,通过测定发酵液的菌体密度、表面张力、乳化活性以及石蜡的残留量,考察菌株ZY-1利用上述碳源的生长以及发酵液表面活性情况。结... 该试验选取一株分离自辽河油田原油的菌株ZY-1,分别补加培养基碳源(木糖、淀粉、葡萄糖),于60℃静置培养7d,通过测定发酵液的菌体密度、表面张力、乳化活性以及石蜡的残留量,考察菌株ZY-1利用上述碳源的生长以及发酵液表面活性情况。结果表明,菌株ZY-1可利用木糖生长,并代谢产生物表面活性剂。补加木糖能明显促进细胞生长,减慢对石蜡的利用,使发酵液表面张力降至49.5mN/m,发酵液的乳化活性提高至61.3%。补加葡萄糖或淀粉虽不能明显促进细胞生长,但能明显减少石蜡消耗,都能将发酵液表面活性提高至63.3%。木糖、葡萄糖和淀粉都能减少石蜡的消耗,木糖效果更明显。 展开更多
关键词 微生物采油 碳源 生长 表面张力 乳化活性
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忧遁草茎段悬浮培养快繁体系的建立 预览
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作者 刘铭 刘兴斌 张宗申 《河南农业科学》 北大核心 2019年第1期115-119,共5页
为了促进药食两用植物忧遁草资源的开发利用,将忧遁草无菌茎段置于液体培养基中,采用正交设计法优化植物生长调节剂组合、基本培养基类型、NO3^-/NH4^+值、PO4^3-和蔗糖质量浓度,以繁殖系数为指标,建立其悬浮高效繁殖的工艺。结果表明,... 为了促进药食两用植物忧遁草资源的开发利用,将忧遁草无菌茎段置于液体培养基中,采用正交设计法优化植物生长调节剂组合、基本培养基类型、NO3^-/NH4^+值、PO4^3-和蔗糖质量浓度,以繁殖系数为指标,建立其悬浮高效繁殖的工艺。结果表明,改良的1/2MS培养基(20mmol/LKNO3+5mmol/LNH4NO3+1.5mmol/LKH2PO4)+蔗糖20g/L+IBA 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.8mg/L+KT 0.2mg/L(pH值6.0)是最适合忧遁草茎段悬浮培养的配方,其无菌苗根数为4.09个,根长为5.47cm,茎高为11.79cm,植株形态为叶片展开充分,叶色深绿,植株健壮。 展开更多
关键词 忧遁草 快繁 悬浮培养 正交设计
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枯草芽孢杆菌诱变株产抗菌脂肽的特性 预览
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作者 曾国洪 丛丽娜 毕楠 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期235-238,共4页
对枯草芽孢杆菌HS-A38原始菌株进行紫外诱变、紫外化学复合诱变及等离子体诱变,筛选得到高产抗菌脂肽诱变菌株mutHS-246和mutHS-301。对原始菌及诱变菌株发酵上清液进行酸沉淀和甲醇萃取,得到抗菌脂肽。结果发现,诱变株mutHS-246和 mutH... 对枯草芽孢杆菌HS-A38原始菌株进行紫外诱变、紫外化学复合诱变及等离子体诱变,筛选得到高产抗菌脂肽诱变菌株mutHS-246和mutHS-301。对原始菌及诱变菌株发酵上清液进行酸沉淀和甲醇萃取,得到抗菌脂肽。结果发现,诱变株mutHS-246和 mutHS-301的抗菌脂肽产量比原始菌株分别提高了26.0%和31.3%。在25~80℃抗菌活性几乎保持不变,并可耐受强酸强碱,具有良好的热稳定性和pH稳定性。经胰蛋白酶和胃蛋白酶作用后,对金黄色葡萄球菌和灿烂弧菌的抑菌活性降低不明显,说明该产物对动物肠胃的蛋白酶不敏感,有利于进一步开发该抗菌脂肽作为饲料添加剂。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗菌脂肽 诱变 稳定性
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一株产吲哚乙酸菌的筛选、鉴定与优化 预览
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作者 刘璐 唐文竹 李宪臻 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2019年第4期239-243,共5页
为筛选出一株产吲哚乙酸(IAA)能力较好的菌,对采自辽宁省大连市郊区农田的植物根际土壤中的植物根际促生菌进行分离筛选,得到16株有产IAA活性的菌。从中选出产IAA量最高的菌株对其进行鉴定,并通过单因素试验与响应面法优化该菌株产IAA... 为筛选出一株产吲哚乙酸(IAA)能力较好的菌,对采自辽宁省大连市郊区农田的植物根际土壤中的植物根际促生菌进行分离筛选,得到16株有产IAA活性的菌。从中选出产IAA量最高的菌株对其进行鉴定,并通过单因素试验与响应面法优化该菌株产IAA的培养条件。结果表明,该菌为芽孢杆菌属,最适生长条件为培养时间45h,以0.29%的牛肉膏为碳源,1.00%酵母浸粉为氮源,添加金属离子为0.78%硫酸镁。优化后菌株IAA产量由未优化前的83.65mg/L提高至106.11mg/L。 展开更多
关键词 吲哚乙酸 芽孢杆菌 筛选
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类芽孢杆菌环果寡糖糖基转移酶的分离纯化和酶学性质 预览
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作者 马俊 刘思敏 唐文竹 《工业微生物》 CAS 2019年第1期33-38,共6页
采用硫铵沉淀、疏水层析和DEAE离子交换层析对产自类芽孢杆菌Paenibacillus sp.Lfos16的环果寡糖糖基转移酶(Cycloinulooligosaccharide Fructanotransferase,CFTase)进行分离纯化,得到电泳纯的CFTase,最终纯化倍数为13.9,比活力为33.3 ... 采用硫铵沉淀、疏水层析和DEAE离子交换层析对产自类芽孢杆菌Paenibacillus sp.Lfos16的环果寡糖糖基转移酶(Cycloinulooligosaccharide Fructanotransferase,CFTase)进行分离纯化,得到电泳纯的CFTase,最终纯化倍数为13.9,比活力为33.3 U/mg。纯化的CFTase经SDS-PAGE和Native-PAGE电泳分析得出其相对分子量大小约为120 000,且是双亚基蛋白。探究了CFTase的酶学性质,最适反应条件为:40℃~45℃,pH 7.0;温度稳定范围为30℃~45℃,pH稳定范围为5.0~9.0。并对CFTase降解菊糖的催化机制进行了分析,初步确定为外切加环化作用形成环果寡糖。 展开更多
关键词 菊糖 环果寡糖糖基转移酶 分离纯化 性质研究
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一株瘤胃源产纤维素酶菌株的培养条件优化
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作者 徐同 王红英 +2 位作者 谭军 李茂琳 钱斯日古楞 《饲料研究》 CAS 北大核心 2019年第3期75-79,共5页
山羊瘤胃内容物菌群中分离得到的一株产纤维素酶菌株T15,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)进行优化。对菌株培养基成分碳源、氮源和金属离子进行优化时发现,6 g/L的葡萄糖为碳源和5 g/L的牛肉膏为氮源时,产生酶活力达到最高。培养基中添加... 山羊瘤胃内容物菌群中分离得到的一株产纤维素酶菌株T15,采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)进行优化。对菌株培养基成分碳源、氮源和金属离子进行优化时发现,6 g/L的葡萄糖为碳源和5 g/L的牛肉膏为氮源时,产生酶活力达到最高。培养基中添加0.03 mol/L的Ca2+,对菌株产生纤维素酶有促进作用。在最优发酵培养基成分为基础,对菌株T15的发酵培养温度、培养时间、培养pH条件和接种量等四因素、三水平进行正交试验,该菌株的产纤维素酶最优发酵条件:以9 mL为接种量,培养基pH值7,培养温度35℃和培养时间40 h,其产生酶活力达到26.76 U/mL;其中培养时间、接种量、培养温度、和培养基酸碱条件对菌株发酵产纤维素酶影响依次增大。 展开更多
关键词 瘤胃源微生物 纤维素酶 培养条件 正交试验
蔗糖异构酶PalI包埋和交联固定化方法比较 预览
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作者 王兵兵 张永吉 +1 位作者 李宪臻 李蓉 《食品科学技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期36-40,共5页
采用海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法两种固定化方法,对来源于Klebsiellasp.LX3的蔗糖异构酶PalI的稳定性和可重复利用性进行研究。结果发现,海藻酸钠包埋法在海藻酸钠、CaCl2质量分数为1.5%、2%时,所得固定化酶的酶活最高,其最适反应温度... 采用海藻酸钠包埋法和戊二醛交联法两种固定化方法,对来源于Klebsiellasp.LX3的蔗糖异构酶PalI的稳定性和可重复利用性进行研究。结果发现,海藻酸钠包埋法在海藻酸钠、CaCl2质量分数为1.5%、2%时,所得固定化酶的酶活最高,其最适反应温度为40℃,最适pH值为6;戊二醛交联法在(NH4)2SO4质量分数为90%,戊二醛体积分数为2.5%时得到的固定酶酶活最高,交联酶的最适反应温度为50℃,最适pH值为5。通过对酶的稳定性比较,两种方法酶稳定性都优于游离酶。4℃保存20d后游离酶的酶活降低到30%,而戊二醛交联酶活性在95%以上,海藻酸钠固定化酶残余酶活仍在60%左右。戊二醛交联法固定酶活性优于海藻酸钠固定化酶,重复利用12次戊二醛交联酶,其残余酶活仍为80%。 展开更多
关键词 蔗糖异构酶PalI 海藻酸钠包埋 戊二醛交联 固定化 酶活性
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