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基于PTEN研究桃红四物汤治疗产后血瘀证的机制 预览
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作者 湛宇灿 韩晓静 +4 位作者 李白坤 苏婧婧 刘竹青 刘瑞山 朱继民 《安徽中医药大学学报》 2019年第1期53-57,共5页
目的观察桃红四物汤对产后血瘀证大鼠子宫第10染色体缺失的碱性磷酸和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted in chromosome10,PTEN)mRNA及其蛋白表达的影响,探讨其祛瘀生新的作用机制。方法采用米非司酮和米索前列醇... 目的观察桃红四物汤对产后血瘀证大鼠子宫第10染色体缺失的碱性磷酸和张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted in chromosome10,PTEN)mRNA及其蛋白表达的影响,探讨其祛瘀生新的作用机制。方法采用米非司酮和米索前列醇灌胃法复制产后血瘀证大鼠模型,将模型大鼠分为模型组,阳性对照组(益母草颗粒4.3g/kg),桃红四物汤高剂量(18.0g/kg)、中剂量(9.0g/kg)、低剂量(4.5g/kg)组,另设正常对照组。连续灌胃给药7d后,麻醉大鼠并分离子宫,光镜下观察子宫血瘀状态,分别采用实时PCR和Western blot法检测子宫组织PTENmRNA及其蛋白表达水平。结果桃红四物汤能改善产后血瘀证大鼠子宫间质的充血、水肿。与正常对照组比较,模型组PTENmRNA及其蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与模型组比较,桃红四物汤高剂量组PTEN mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),桃红四物汤中剂量组仅PTEN蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论桃红四物汤的祛瘀生新作用可能与其下调PTEN的表达有关。 展开更多
关键词 桃红四物汤 祛瘀生新 作用机制 PTEN
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异叶天南星查尔酮合成酶和异构酶基因的克隆及蛋白的结构性质分析
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作者 张声祥 施圆圆 +4 位作者 王晨凯 赵德蕊 杨青山 马克龙 吴家文 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1799-1807,共9页
查尔酮合成酶(CHS)和查尔酮异构酶(CHI)是黄酮类物质生物合成途径中的关键酶,该研究从中药异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume,Ah)转录组数据库中筛选出查尔酮合成酶基因(Ah CHS)和查尔酮异构酶基因(Ah CHI),利用RT-PCR技术克隆... 查尔酮合成酶(CHS)和查尔酮异构酶(CHI)是黄酮类物质生物合成途径中的关键酶,该研究从中药异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume,Ah)转录组数据库中筛选出查尔酮合成酶基因(Ah CHS)和查尔酮异构酶基因(Ah CHI),利用RT-PCR技术克隆了它们的开放阅读框(ORF)部分,并对其编码蛋白Ah CHS和Ah CHI的理化性质、表达及结构特点进行分析。Ah CHS的ORF长度为1 176 bp,编码392个氨基酸的蛋白质;而Ah CHI的ORF长度为630 bp,编码蛋白含209个氨基酸。Ah CHS作为对称同二聚体,N端螺旋互相交换,每个单体由2个亚结构域组成,位于2个亚结构域之间交界处的4个保守的氨基酸残基构成了酶的活性中心;Ah CHI的三级结构采用了开放的β-三明治褶皱,1个大的β折叠片层(β4~β11)和1个α螺旋片层(α1~α7)组成其核心结构,其中β4,β5,α4和α6在不同物种间高度保守,部分疏水氨基酸形成了酶的活性位点。系统进化树分析发现Ah CHS与火鹤花CHS亲缘关系最近;而Ah CHI与紫牡丹CHI亲缘关系最近。表达分析表明编码Ah CHS的基因在根和块茎中的表达量明显比叶多,而编码Ah CHI的基因在块茎部位的表达量最高。该研究为Ah CHS和Ah CHI功能的进一步研究及植物黄酮类化合物生物合成途径的解析提供了基础。 展开更多
关键词 异叶天南星 基因克隆 查尔酮合成酶 查尔酮异构酶 生物信息学分析
电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1蛋白表达的影响 预览
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作者 邵雪芳 蔡荣林 +6 位作者 曹奕 吴生兵 吴子建 王璐璐 刘磊 郑良玉 李小贾 《安徽中医药大学学报》 2019年第3期37-43,共7页
目的观察电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症因子表达的影响,初步探讨其保护心肌的作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎再灌注法复制急性心肌缺血再灌注损伤模型,将模型大鼠随机分为模型对照组、神门支正... 目的观察电针预处理不同原络配穴对急性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌炎症因子表达的影响,初步探讨其保护心肌的作用机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎再灌注法复制急性心肌缺血再灌注损伤模型,将模型大鼠随机分为模型对照组、神门支正组、神门通里组、大陵内关组、大陵外关组,每组6只,另取6只大鼠设为假手术组。电针预处理组分别选取神门、支正、通里、内关、大陵和外关穴位,用电针仪进行电针刺激,刺激电压1 V,频率为2 Hz,每日1次,每次20 min。模型复制前共刺激14 d。假手术组、模型组不给予电针刺激。监测大鼠心电图,分析ST段位移情况;采用免疫组织化学法检测心肌组织肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha, TNF-α)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、环氧合酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)表达水平。采用Wester blot 法检测心肌组织COX-2蛋白相对表达水平。结果电针预处理不同原络配穴均可显著降低急性心肌缺血再灌注损伤模型大鼠升高的ST段电压(P< 0.05),以神门支正组的效应最显著。免疫组织化学法检测结果显示,电针预处理不同原络配穴均可显著降低模型大鼠心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1表达水平(P<0.05),以神门支正组的效应最显著。Western blot法检测结果显示,各组心肌组织COX-2蛋白表达水平与免疫组织化学法检测结果相一致。结论电针预处理减轻急性心肌缺血再灌注损伤的机制与调节心肌组织TNF-α、COX-2、ICAM-1表达水平有关,电针神门、支正穴的效应最为显著。 展开更多
关键词 急性心肌缺血再灌注 原络配穴 肿瘤坏死因子-α 环氧合酶-2 细胞间黏附分子-1
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桃红四物汤促进产后血瘀大鼠子宫修复的作用 预览
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作者 张琪 李白坤 +3 位作者 朱继民 刘竹青 苏婧婧 李庆林 《安徽中医药大学学报》 2019年第4期72-75,共4页
目的 观察桃红四物汤对产后血瘀大鼠子宫修复的促进作用,探讨其与内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生... 目的 观察桃红四物汤对产后血瘀大鼠子宫修复的促进作用,探讨其与内皮素-1(endothelin-1,ET-1)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor2,VEGFR -2)的关联性。方法 选取产后血瘀模型复制成功的大鼠40只,将其随机分为桃红四物汤高剂量(18.0 g/kg)、中剂量(9.0 g/kg)、低剂量(4.5 g/kg)组,阳性对照组(益母草颗粒4.3 g/kg)和模型组(蒸馏水),另取正常雌性大鼠作为正常对照组。连续给药7 d后,腹主动脉取血,分离子宫,苏木精-伊红染色法观察子宫血瘀状态,免疫组织化学法检测子宫VEGFR-2表达情况;酶联免疫吸附法检测血清中ET-1、iNOS及VEGF水平。结果 桃红四物汤可明显改善子宫血瘀程度,促进子宫组织中VEGFR-2的表达;桃红四物汤高、中剂量组大鼠血清VEGF及iNOS水平明显升高(P<0.05), ET-1水平明显降低(P<0.05)。结论 桃红四物汤可促进产后血瘀大鼠子宫修复,其修复作用可能与调节子宫血管舒缩功能及促进子宫血管新生有关。 展开更多
关键词 桃红四物汤 祛瘀生新 促血管生成因子 一氧化氮合酶
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独活药材香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱研究 预览
5
作者 王斌 周安 +2 位作者 杨沫 刘先华 韩燕全 《安徽中医药大学学报》 2019年第1期87-92,共6页
目的建立独活中香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为独活药材的质量控制提供依据。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.2mL/min,柱温25℃,检测波长330nm。结果建立了独活药材香... 目的建立独活中香豆素类成分的高效液相色谱指纹图谱分析方法,为独活药材的质量控制提供依据。方法采用C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以水-甲醇为流动相进行梯度洗脱,流速1.2mL/min,柱温25℃,检测波长330nm。结果建立了独活药材香豆素类成分的高效液相色谱特征指纹图,标定了15个共有色谱峰,采用相似度评价、聚类分析、主成分分析对所收集的15批样品进行指纹图谱模式识别研究,对6个共有峰借助对照品进行了指认,采用高效液相色谱-电喷雾离子源-质谱技术并结合文献报道对其余9个共有峰进行了初步归属。15批独活药材的相似度结果为0.797~0.979。运用聚类分析,15批独活药材可大致聚成5类。结论该法所建立的独活药材香豆素类成分指纹图谱特征性强,为该药材的质量控制提供了实验依据。 展开更多
关键词 独活 香豆素 高效液相色谱 指纹图谱 主成分分析 聚类分析
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异叶天南星苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与蛋白结构分析 预览
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作者 施圆圆 张声祥 +3 位作者 赵德蕊 王晨凯 马克龙 吴家文 《植物科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期221-229,共9页
以异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)为材料,采用逆转录PCR(RT-PCR)法扩增其苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因Ah PAL,获得该基因的开放读码框(ORF),并通过系统的生物信息学软件分析Ah PAL的结构和理化性质... 以异叶天南星(Arisaema heterophyllum Blume)为材料,采用逆转录PCR(RT-PCR)法扩增其苯丙氨酸解氨酶(Phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因Ah PAL,获得该基因的开放读码框(ORF),并通过系统的生物信息学软件分析Ah PAL的结构和理化性质。结果显示,Ah PAL的ORF全长为2184 bp,编码727个氨基酸;Ah PAL与郁金香(Tulipa fosteriana W. Irving) PAL的亲缘关系最近,序列相似性达88%。空间结构模型分析结果显示,Ah PAL为同型四聚体,每个单体由3个结构域组成,其中MIO结构域含有PAL酶家族的保守序列和Ala-Ser-Gly三肽活性中心,是Ah PAL酶活性的决定性结构域。利用荧光定量PCR方法检测3个Ah PAL Unigene在根、块茎和叶中的表达情况,发现它们在根中表达量均最高,而在叶和块茎中表达较低。 展开更多
关键词 异叶天南星 苯丙氨酸解氨酶 基因克隆 生物信息学分析
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W/O型黄芩苷纳米乳的制备及质量评价 预览
7
作者 郑转弟 周安 吴鸿飞 《安徽中医药大学学报》 2019年第3期89-92,共4页
目的制备W/O型黄芩苷纳米乳并对其质量进行评价。方法通过优化处方工艺制得W/O型黄芩苷纳米乳,并对其外观、粒径、载药量及稳定性进行考察,采用高效液相色谱法测定纳米乳中黄芩苷的含量,检测波长为280 nm。结果 W/O型黄芩苷纳米乳为均... 目的制备W/O型黄芩苷纳米乳并对其质量进行评价。方法通过优化处方工艺制得W/O型黄芩苷纳米乳,并对其外观、粒径、载药量及稳定性进行考察,采用高效液相色谱法测定纳米乳中黄芩苷的含量,检测波长为280 nm。结果 W/O型黄芩苷纳米乳为均一透明的液体,平均粒径为(63.40±1.10)nm,载药量为9.5 mg/mL。黄芩苷在12.40~310.00 μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好, r =0.999 7。高、中、低质量浓度的黄芩苷供试品溶液平均加样回收率分别为99.88%、99.01%、100.31%,RSD均小于0.87%。黄芩苷纳米乳在常温和低温条件下贮存30 d,含量无明显变化。结论制备的W/O型黄芩苷纳米乳质量稳定可靠,建立的高效液相色谱法操作简便、快捷、重复性好,可用于测定纳米乳中黄芩苷的含量。 展开更多
关键词 黄芩苷 W/O型黄芩苷纳米乳 质量评价 高效液相色谱法 稳定性
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使药石菖蒲对定志小丸中人参皂苷类成分肠吸收的影响
8
作者 汪鼎 刘晓闯 +2 位作者 纪娟 彭代银 周安 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期7-13,共7页
目的:探究使药石菖蒲对定志小丸中人参皂苷成分肠吸收的影响,从肠吸收角度揭示石菖蒲'佐使则有功'的科学内涵。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠样品中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的浓度;通过大鼠在体肠灌流试... 目的:探究使药石菖蒲对定志小丸中人参皂苷成分肠吸收的影响,从肠吸收角度揭示石菖蒲'佐使则有功'的科学内涵。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定大鼠样品中人参皂苷Rg1,Re,Rb1的浓度;通过大鼠在体肠灌流试验比较不同配伍方式下定志小丸中3种人参皂苷类成分肠吸收速率常数(Ka)与表观通透系数(Papp)的差异;通过大鼠外翻肠囊试验考察不同剂量石菖蒲挥发油及P-糖蛋白(P-gp)抑制剂维拉帕米对3种人参皂苷类成分累积吸收量的影响。结果:缺失石菖蒲条件下定志小丸中3种人参皂苷类成分的Papp均≤0. 191×10-3cm·min-1。与缺石菖蒲组相比,缺石菖蒲挥发油组的Ka和Papp无显著性差异,但定志小丸全方组的Ka提高了3. 97~8. 35倍,Papp提高了3. 99~8. 49倍;外翻肠囊研究表明定志小丸中石菖蒲挥发油能显著促进3种人参皂苷类成分在大鼠肠道的累积吸收量,但没有剂量依赖性。结论:石菖蒲挥发油可明显促进定志小丸中3种人参皂苷类成分的肠吸收,其促吸收机制可能与抑制P-gp有关。 展开更多
关键词 定志小丸 石菖蒲 人参皂苷类 外翻肠囊法 P-糖蛋白 在体单向肠灌流法 维拉帕米
一类非线性偏微分方程组的行波解 预览
9
作者 邬家成 周安 《通化师范学院学报》 2019年第8期17-21,共5页
首次积分法用于求解非线性偏微分方程.通过建立首次积分,以简明的方式获得其精确的行波解.通过将该方法应用于(2+1)-维Chaffe-Infante系统和phi-four系统,有效地得到精确解.
关键词 首次积分法 行波解 (2+1)-维Chaffe-Infante系统 phi-four系统
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新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 预览
10
作者 鲍金平 陈贺骏涛 +3 位作者 侯梅 程卉 苏婧婧 李庆林 《安徽中医药大学学报》 2019年第3期68-71,共4页
目的探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变... 目的探讨新藤黄酸对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖和凋亡的影响。方法用不同浓度的新藤黄酸培养细胞24、48 h后,采用MTT法观察新藤黄酸对细胞生长的抑制作用;倒置显微镜下观察HUVECs细胞形态变化;通过DAPI染色后倒置荧光显微镜观察新藤黄酸对细胞形态学的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术检测新藤黄酸对HUVECs细胞凋亡率的影响;Western blot检测新藤黄酸对HUVECs中凋亡相关蛋白Caspase-3的表达变化。结果 MTT检测结果显示新藤黄酸能够明显抑制HUVECs的增殖,并呈时效及量效关系;荧光显微镜观察结果显示,新藤黄酸作用HUVECs后出现大量凋亡细胞;流式细胞术结果显示,与空白对照组相比,随着新藤黄酸浓度的增加,细胞凋亡率明显增加;Western blot检测结果表明Caspase-3蛋白表达水平显著增加。结论新藤黄酸对HUVECs有明显的抑制作用,其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡实现的。 展开更多
关键词 新藤黄酸 人脐静脉内皮细胞 细胞凋亡
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新藤黄酸诱导卵巢癌A2780细胞凋亡的作用研究 预览
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作者 程卉 李庆林 +1 位作者 侯梅 苏婧婧 《安徽中医药大学学报》 2019年第1期58-62,共5页
目的研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst33342染色荧光显微镜观察细胞... 目的研究新藤黄酸对卵巢癌细胞增殖的抑制作用及其可能的机制。方法采用MTT检测新藤黄酸对卵巢癌A2780细胞存活率的影响,采用fluo-3AM染色荧光显微镜观察新藤黄酸对A2780细胞钙离子水平的影响,采用Hoechst33342染色荧光显微镜观察细胞的凋亡率,采用PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞周期的影响,采用Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测新藤黄酸对细胞凋亡率的影响,采用Western blot检测凋亡相关蛋白表达的影响。结果MTT检测结果表明,新藤黄酸对卵巢癌细胞A2780的增殖具有抑制作用,且抑制作用具有明显的剂量依赖性;fluo-3AM染色荧光显微镜下观察,可见各浓度新藤黄酸均能升高A2780细胞内钙离子水平,且呈现浓度依赖关系;PI染色流式细胞仪检测结果表明,新藤黄酸能阻滞A2780细胞于G0/G1期;Hoechst33342染色和Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测结果表明,随着新藤黄酸浓度的增加,A2780细胞凋亡率呈现增高的趋势;Western blot检测结果表明,新藤黄酸可以促进凋亡相关蛋白p53、细胞色素C以及Caspase-9表达水平升高。结论新藤黄酸具有抑制卵巢癌A2780细胞增殖和诱导肿瘤细胞发生线粒体凋亡的作用。 展开更多
关键词 新藤黄酸 卵巢癌细胞A2780 线粒体凋亡
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人参灵芝胶囊缓解体力疲劳小鼠的试验 预览
12
作者 苏婧婧 李庆林 《安徽农业科学》 CAS 2019年第5期176-177,198共3页
[目的]考察人参灵芝胶囊缓解实验性小鼠体力疲劳的作用。[方法]小鼠连续灌胃给予不同剂量(0.9、0.6、0.3 g/kg)的人参灵芝胶囊,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30 d后,测定小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素含量、血乳酸含量、肝糖... [目的]考察人参灵芝胶囊缓解实验性小鼠体力疲劳的作用。[方法]小鼠连续灌胃给予不同剂量(0.9、0.6、0.3 g/kg)的人参灵芝胶囊,阴性对照组给予等量蒸馏水。连续灌胃30 d后,测定小鼠负重游泳时间、运动后血清尿素含量、血乳酸含量、肝糖原含量。[结果]与阴性对照组比较,高、中剂量组小鼠负重游泳时间显著延长,各给药组血清尿素含量明显降低,各给药组肝糖原含量明显升高,中剂量组小鼠游泳后20 min血乳酸值和血乳酸曲线下面积显著降低。[结论]人参灵芝胶囊具有缓解体力疲劳的作用。 展开更多
关键词 人参灵芝胶囊 缓解体力疲劳 负重游泳时间 血清尿素 血乳酸 肝糖原
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槐糖脂通过线粒体途径诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的机制 预览
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作者 成利娟 杨莉 +2 位作者 蒋磊 侯梅 马晓静 《山西医科大学学报》 CAS 2019年第4期427-432,共6页
目的 探讨槐糖脂抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,并阐明其诱导SGC-7901细胞线粒体凋亡的机制。方法 不同浓度(40,80,160,320μg/ml)槐糖脂作用于人胃癌SGC-7901细胞,与未加槐糖脂处理的空白对照组进行比较,观察各浓度槐糖脂作用组中... 目的 探讨槐糖脂抑制人胃癌SGC-7901细胞增殖的作用,并阐明其诱导SGC-7901细胞线粒体凋亡的机制。方法 不同浓度(40,80,160,320μg/ml)槐糖脂作用于人胃癌SGC-7901细胞,与未加槐糖脂处理的空白对照组进行比较,观察各浓度槐糖脂作用组中人胃癌SGC-7901细胞的变化。倒置显微镜观察槐糖脂作用后细胞活力变化,并采用CCK-8法检测各浓度槐糖脂作用后细胞的存活率;DAPI染色,荧光显微镜观察槐糖脂作用后细胞形态变化;罗丹明123(Rhodamine123)染色,流式细胞术检测槐糖脂作用组及未加槐糖脂处理的空白对照组细胞内线粒体膜电位水平;采用Westernblot检测各组Bcl-2、Bax、Cyt-C、Caspase3及Caspase9蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,槐糖脂作用组人胃癌SGC-7901细胞活力下降,细胞存活率显著降低(P<0.05),且降低程度与槐糖脂剂量成正相关,细胞形态呈现明显的凋亡样改变;与空白对照组比较,槐糖脂作用组人胃癌SGC-7901细胞线粒体膜电位显著降低(P<0.05),Bax蛋白的表达量明显增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),Cyt-C、Caspase3及Caspase9蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论 槐糖脂能够抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖,其机制可能是通过线粒体凋亡途径诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 槐糖脂 线粒体途径 细胞凋亡
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新藤黄酸诱导脑胶质瘤细胞U87自噬的研究 预览
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作者 王巧雪 程卉 李庆林 《安徽中医药大学学报》 2019年第2期72-76,共5页
目的观察不同浓度新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对脑胶质瘤细胞U87增殖及自噬的影响。方法倒置显微镜下观察细胞形态变化,采用噻唑蓝法检测细胞的存活率,单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色法检测自噬泡的形成,吖啶橙(acridin... 目的观察不同浓度新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对脑胶质瘤细胞U87增殖及自噬的影响。方法倒置显微镜下观察细胞形态变化,采用噻唑蓝法检测细胞的存活率,单丹磺酰尸胺(monodansylcadaverine,MDC)染色法检测自噬泡的形成,吖啶橙(acridine orange,AO)染色流式细胞仪观察酸性囊泡细胞器的数量变化,Westernblot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ以及Beclin-1的表达变化。结果 GNA在1~32 μmol/L浓度范围抑制U87细胞的增殖;MDC染色表明GNA促进U87细胞内自噬泡的形成;AO染色表明GNA增加U87细胞内酸性囊泡细胞器的数量;Western blot结果显示,GNA作用U87细胞后,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增大,Beclin-1的表达增加,提示细胞内自噬活性增强。结论 GNA在一定剂量和时间范围内抑制脑胶质瘤细胞U87细胞的增殖可能与诱导U87细胞自噬的发生有关。 展开更多
关键词 新藤黄酸 胶质瘤 U87细胞 自噬
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微量元素分析技术在中医药研究中应用概况 预览
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作者 刘先华 周安 《安徽中医药大学学报》 2019年第4期90-92,共3页
微量元素分析技术现有原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子体原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱法,已有大量的实验研究将这些检测技术应用于中医用药理论、药效关系以及药材质量评价等领域。对每一种检测方法的特点以... 微量元素分析技术现有原子吸收光谱法、原子荧光光谱法、电感耦合等离子体原子发射光谱法和电感耦合等离子体质谱法,已有大量的实验研究将这些检测技术应用于中医用药理论、药效关系以及药材质量评价等领域。对每一种检测方法的特点以及在中医药研究中的应用实例进行介绍,为微量元素分析技术在中医药中的研究提供更好的技术支持。 展开更多
关键词 微量元素 中医药 原子吸收光谱法 原子荧光光谱法 电感耦合等离子体原子发射光谱法 电感耦合等离子体质谱法
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重楼皂苷Ⅱ诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡的体外研究
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作者 侯梅 陈贺骏涛 +1 位作者 苏婧婧 李庆林 《中南药学》 CAS 2019年第5期647-651,共5页
目的初步探讨重楼皂苷Ⅱ抑制人胃癌MGC-803细胞增殖并诱导其凋亡的作用及机制。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ作用于细胞后其存活率;DAPI染色观察细胞凋亡;AV/PI双染检测细胞凋亡率;比色法检测天冬氨... 目的初步探讨重楼皂苷Ⅱ抑制人胃癌MGC-803细胞增殖并诱导其凋亡的作用及机制。方法体外培养人胃癌MGC-803细胞,CCK-8法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ作用于细胞后其存活率;DAPI染色观察细胞凋亡;AV/PI双染检测细胞凋亡率;比色法检测天冬氨酸蛋白水解酶caspase-3的活性;Western blot法检测Cyt-c的蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,重楼皂苷Ⅱ可降低MGC-803细胞的存活率,且呈剂量与时间依赖性;镜下可见细胞核破碎,具有明显凋亡特征,凋亡率随着浓度的增大而增加(P <0.01);细胞内caspase-3的活性增加(P <0.01),Cyt-c蛋白的表达量明显增加(P<0.01)。结论重楼皂苷Ⅱ可明显抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖,并诱导细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 胃癌 重楼皂苷Ⅱ 细胞凋亡
吡拉格雷钠对脑缺血再灌注损伤模型大鼠神经功能的改善作用及机制研究 预览
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作者 孙翔 李庆林 《中国药房》 CAS 北大核心 2019年第7期889-895,共7页
目的:研究吡拉格雷钠对脑缺血再灌注损伤模型大鼠神经功能的改善作用及相关机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(地佐环平0.8mg/kg)和吡拉格雷钠低、中、高剂量组(20、30、45mg/kg),每组12只。除假手术组大鼠... 目的:研究吡拉格雷钠对脑缺血再灌注损伤模型大鼠神经功能的改善作用及相关机制。方法:将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组(地佐环平0.8mg/kg)和吡拉格雷钠低、中、高剂量组(20、30、45mg/kg),每组12只。除假手术组大鼠行假手术外,其余各组大鼠均采用大脑中动脉结扎诱导脑缺血再灌注损伤模型。术后2h尾静脉注射相应药物,假手术组和模型组大鼠注射等量生理盐水,连续给药6d,给药间隔均为24h。再灌注24h和末次给药后,评估大鼠的神经功能缺陷评分和姿势反射评分,采用微正电子发射断层扫描评估脑损伤情况(包括全脑、岛状皮层、壳核、纹状体、体细胞皮层、杏仁核、运动皮层)。然后处死大鼠,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色后观察脑梗死情况并计算脑梗死体积,酶联免疫吸附试验检测其脑组织中Na^+-K^+-ATP酶、Ca^2+-ATP酶活性和谷氨酸(Glu)含量。结果:与假手术组比较,模型组大鼠缺血再灌注后24h和末次给药后的神经功能缺陷评分、姿势反射评分均明显升高(P<0.05或P<0.01),脑缺血再灌注24h与末次给药后脑组织的SUV、全脑及各不同脑区的右左脑SUV比值均明显降低(P<0.01);末次给药后脑梗死体积百分数明显升高(P<0.01),脑组织中Na^+-K^+-ATP酶和Ca^2+-ATP酶活性明显降低(P<0.01),Glu含量明显升高(P<0.01)。与模型组比较,吡拉格雷钠低、中、高剂量组和阳性对照组大鼠上述指标均明显改善(P<0.05或P<0.01)。结论:吡拉格雷钠对大鼠脑缺血再灌注损伤和神经功能有改善作用,这可能与上调脑组织中Na^+-K^+-ATP酶和Ca^2+-ATP酶活性和下调Glu含量有关。 展开更多
关键词 吡拉格雷钠 脑缺血再灌注损伤 神经功能 大鼠 机制
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艾灸对腹泻型肠易激综合征模型大鼠血清白细胞介素-6水平和结肠组织β-防御素-2及其mRNA表达的影响 预览
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作者 储浩然 吴立斌 +5 位作者 程红亮 蔡荣林 龙小娜 李难 夏焕娟 吴克宇 《安徽中医药大学学报》 2018年第1期36-40,共5页
目的 探究艾灸天枢、上巨虚治疗腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable bowel syndrome, D-IBS)的机制。方法 将30只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组,每组10只。采用束缚加番泻叶煎剂灌胃的方法复制D-IBS模... 目的 探究艾灸天枢、上巨虚治疗腹泻型肠易激综合征(diarrhea predominant irritable bowel syndrome, D-IBS)的机制。方法 将30只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、艾灸组,每组10只。采用束缚加番泻叶煎剂灌胃的方法复制D-IBS模型。艾灸组大鼠每日艾灸双侧天枢、上巨虚20 min,连续7 d。采用ELISA法检测大鼠血清白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平,分别采用Western blot法、RT-PCR法检测大鼠结肠组织β-防御素-2(beta-defensin-2,BD-2)蛋白及其mRNA的相对表达水平。结果 艾灸能够显著降低D-IBS大鼠升高的血清IL-6水平和结肠组织BD-2蛋白及其mRNA表达水平(P<0.05)。结论 艾灸天枢、上巨虚治疗D-IBS的机制可能与TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 腹泻型肠易激综合征 艾灸 白细胞介素6 β防御素2
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蔷薇科果实类药材脂肪酸不同样品前处理的GC-MS分析 预览
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作者 杨沫 况作品 +1 位作者 方文韬 谢晓梅 《安徽中医药大学学报》 2018年第5期78-82,共5页
目的 考察不同样品前处理方法对气相色谱-质谱法(gas chromatography and mass spectrometry,GC-MS)分析药材中脂肪酸成分的影响,为样品前处理条件选择提供实验依据。方法 用H2SO4-CH3OH(1∶10)溶液分别对蔷薇科5种果实类药材(... 目的 考察不同样品前处理方法对气相色谱-质谱法(gas chromatography and mass spectrometry,GC-MS)分析药材中脂肪酸成分的影响,为样品前处理条件选择提供实验依据。方法 用H2SO4-CH3OH(1∶10)溶液分别对蔷薇科5种果实类药材(木瓜、乌梅、山楂、覆盆子和金樱子)粉末进行直接甲酯化和乙醇提取物甲酯化,运用GC-MS方法检测各供试品中脂肪酸并加以比较。结果 直接甲酯化检测到脂肪酸成分数目较多,可测到从C2—C24脂肪酸;提取后再甲酯化,则检测到的脂肪酸成分随着提取溶剂极性改变而发生相应变化,提取溶剂极性偏大时有利于苹果酸、柠檬酸等短链小分子脂肪酸检测,极性偏小时有利于油酸、亚油酸等长链脂肪酸检测。结论 不同样品前处理方法对脂肪酸的检测结果存在差异;在相同的分析条件下,采用药材粉末直接甲酯化,可较全面地了解所含脂肪酸种类的信息;提取后再甲酯化,测得的脂肪酸种类减少,检测成分与提取溶剂极性大小相关。 展开更多
关键词 气相色谱-质谱法 样品前处理 甲酯化 脂肪酸 蔷薇科果实类药材
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HPLC-DAD双波长法同时测定柴胡中5种皂苷的含量 被引量:1
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作者 刘玉梅 周安 +6 位作者 俞年军 韩荣春 张威 朱月健 曹勇 李翔宇 彭代银 《中国中药杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期363-368,共6页
环氧醚型和异环双烯型皂苷为中药柴胡中的两类主要皂苷成分,但由于其紫外光谱存在差异,目前缺少针对2类皂苷成分同时进行定量的测定方法。为此,该文建立一种同时测定中药柴胡中环氧醚型(柴胡皂苷a,c,d)和异环双烯型(柴胡皂苷b_1,b_2... 环氧醚型和异环双烯型皂苷为中药柴胡中的两类主要皂苷成分,但由于其紫外光谱存在差异,目前缺少针对2类皂苷成分同时进行定量的测定方法。为此,该文建立一种同时测定中药柴胡中环氧醚型(柴胡皂苷a,c,d)和异环双烯型(柴胡皂苷b_1,b_2)5种皂苷成分含量的双波长高效液相色谱分析方法。采用Welch Topsil~-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)柱温30℃,流动相为乙腈-水(0.1%磷酸)梯度洗脱,流速为1.0 m L·min-1,检测波长分别为:208 nm(柴胡皂苷a,c,d)、254 nm(柴胡皂苷b_1,b_2)。结果表明5种柴胡皂苷分离度良好,线性范围分别为:9.70~1 935.00(r=0.999 4),8.20~1 380.00(r=0.999 3),6.90~1 640.00(r=0.999 0),5.25~630.00(r=0.999 4),5.15~618.00 mg·L^-1(r=0.999 5),线性关系良好,平均加样回收率在97.7%~100.2%,RSD均小于3%(n=6)。所建立的方法简便、快捷、重复性好,可用于中药柴胡中5种柴胡皂苷类成分的含量测定。 展开更多
关键词 柴胡 柴胡皂苷 双波长法 高效液相色谱法-二极管阵列检测器
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