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细胞间隧道纳米管介导的线粒体转运诱导急性单核细胞白血病细胞抵抗凋亡的研究 预览
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作者 徐前飞 刘亚蒙 +6 位作者 周震 田志祥 王丽红 胡艳 李静 刘晓颖 葛健 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第9期1377-1382,共6页
目的观察人类急性单核细胞白血病(AML-M5)细胞系THP-1与骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)之间隧道纳米管(TNTs)结构的形成;探讨TNTs中线粒体转运对THP-1细胞凋亡的影响及线粒体在TNTs中转运的分子机制。方法使用特异性荧光染料分别对线粒体、... 目的观察人类急性单核细胞白血病(AML-M5)细胞系THP-1与骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)之间隧道纳米管(TNTs)结构的形成;探讨TNTs中线粒体转运对THP-1细胞凋亡的影响及线粒体在TNTs中转运的分子机制。方法使用特异性荧光染料分别对线粒体、细胞骨架蛋白F-Actin和细胞核进行荧光标记,共聚焦显微镜观察BM-MSCs与THP-1细胞间TNTs的形成及TNTs中线粒体的传递。BM-MSCs与THP-1细胞共培养5 d后运用流式细胞术检测THP-1细胞凋亡;共培养体系分为4组:直接共培养(SC组)、Transwell透膜共培养(TC组)、直接共培养体系中加入细胞松弛素(TNTs抑制剂)Latrunculin B(LC组)、无BM-MSCs而仅有培养液(MC组);Western blot检测细胞器转运相关马达蛋白(KIF5B)表达水平。结果 BM-MSCs与THP-1细胞间可观察到TNTs形成,BM-MSCs中线粒体通过TNTs单向传递到THP-1细胞,并未观察到线粒体逆向传递。Annexin V-FITC/PI检测THP-1细胞凋亡结果显示,SC组跟LC组凋亡率较MC组明显减低( P <0.01),LC组高于SC组( P <0.01),TC组较SC组和LC组明显升高( P <0.01),TC组与MC组凋亡率无明显差异( P >0.05)。BM-MSCs中 KIF5B表达水平明显高于THP-1细胞( P <0.001),Rotenone处理BM-MSCs后显著抑制KIF5B的表达( P <0.01)。结论 BM-MSCs线粒体通过TNTs向THP-1细胞单向传递,THP-1细胞摄取BM-MSCs线粒体后可能诱导凋亡抵抗;细胞间线粒体转运可能与马达蛋白KIF5B相关。 展开更多
关键词 急性单核细胞白血病 人骨髓间充质干细胞 THP-1细胞 凋亡
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结核分枝杆菌耐药性相关膜蛋白MmpL6的表达与纯化 预览
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作者 崔克乐 李静 孙安源 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第1期40-45,共6页
目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6(Rv1557)表达载体,在大肠杆菌E.coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化。方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-MmpL6表达载体。将表达载... 目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6(Rv1557)表达载体,在大肠杆菌E.coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化。方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-MmpL6表达载体。将表达载体转化至大肠杆菌中,加入异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,并针对不同表达菌株、温度进行优化,获取最优表达条件。采用Ni-NTA亲和层析以及凝胶过滤色谱纯化目标蛋白。结果 成功构建pET21b-MmpL6重组表达质粒,经IPTG诱导后,在Rosetta菌株中25℃条件下获得最高表达量。结论 成功表达并纯化了MmpL6蛋白,为该蛋白后续的结构与功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 外排泵蛋白 原核表达 纯化 亲和层析
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生物医学工程专业《普通生物学》课程教学的优化 预览
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作者 高倩 刘晓颖 范礼斌 《学周刊》 2018年第1期5-6,共2页
《普通生物学》课程是生物医学工程专业学生接触的第一门生物学相关的专业课程。根据专业及课程的特点,探讨生物医学工程专业《普通生物学》课程教学的优化问题具有重要意义,具体包括对教学内容、教学方法、实验项目的优化,以期达到... 《普通生物学》课程是生物医学工程专业学生接触的第一门生物学相关的专业课程。根据专业及课程的特点,探讨生物医学工程专业《普通生物学》课程教学的优化问题具有重要意义,具体包括对教学内容、教学方法、实验项目的优化,以期达到改善教学效果的目的。 展开更多
关键词 生物医学工程专业 普通生物学 优化
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CXCR7在急性单核细胞白血病中的表达及对THP-1细胞功能的影响 预览
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作者 胡艳 李静 +5 位作者 王丽红 徐前飞 夏瑞祥 曾庆曙 刘晓颖 葛健 《中国实验血液学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期1300-1306,共7页
目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR7在急性单核细胞白血病(AML-M5)中的表达,及其对急性单核细胞白血病细胞系THP-1增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法:应用流式细胞术、Western blot、RTPCR分别检测初诊AML-M5患者... 目的:探讨基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)受体CXCR7在急性单核细胞白血病(AML-M5)中的表达,及其对急性单核细胞白血病细胞系THP-1增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法:应用流式细胞术、Western blot、RTPCR分别检测初诊AML-M5患者和正常人外周血单个核细胞(PBMNC)及THP-1细胞CXCR7蛋白和mRNA表达。CCK8法、Annexin V/PI标记法和Transwell法观察CXCR7对THP-1细胞体外增殖、凋亡和侵袭的作用。结果:在初诊AML-M5患者PBMNC幼稚细胞表面CXCR7表达高于正常对照(P〈0.05),在THP-1细胞表面CXCR7也有高表达;THP-1细胞和AML-M5患者PBMNC中CXCR7蛋白和mRNA水平均明显高于正常对照(P〈0.05);SDF-1α刺激可增高THP-1细胞增殖活性,但这种增殖活性可被CXCR7抗体抑制(P〈0.01);CXCR7抗体不影响THP-1细胞凋亡(P〉0.05);CXCR7抗体可明显抑制SDF-1α诱导的THP-1细胞侵袭能力(P〈0.01)。结论:CXCR7在急性单核细胞白血病患者及THP-1细胞中均有高表达,并参与细胞增殖和侵袭,阻断CXCR7表达有可能降低急性单核细胞白血病的浸润风险。 展开更多
关键词 急性单核细胞白血病 CXCR7 THP-1细胞 细胞增殖 细胞侵袭
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结构生物学在本科教育中教学方法的探讨与思考 预览
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作者 滕衍斌 《亚太教育》 2016年第15期109-109,72共2页
结构生物学作为一门生物学基础学科,近年来随着国家基础科研和制药产业的飞速发展而越来越重要。因此,为培养大批全面的生命科学专业人才,在本科阶段开设结构生物学课程并总结出一套适用于本科大学生的结构生物学教学方法则显得十分重... 结构生物学作为一门生物学基础学科,近年来随着国家基础科研和制药产业的飞速发展而越来越重要。因此,为培养大批全面的生命科学专业人才,在本科阶段开设结构生物学课程并总结出一套适用于本科大学生的结构生物学教学方法则显得十分重要。本文结合了作者自身的教学经验,从课程内容设置和教学方法两大方面总结了本科结构生物学教学工作中的一些心得。希望可以为结构生物学在大学本科教育中的推广和发展起到积极作用。 展开更多
关键词 结构生物学 教学方法 本科教育
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人β4GalTⅡ基因在哺乳动物细胞株中的表达与定位 预览
6
作者 徐雪琴 潘林鑫 +2 位作者 耿慧武 刘晓颖 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第11期1610-1614,共5页
目的运用基因克隆技术构建人源β1,4-半乳糖转移酶Ⅱ(β4Gal TⅡ)真核表达质粒,并将其转染到COS7细胞中,观察蛋白在细胞内的定位,同时转染到HEK 293T细胞中检测其表达。方法分别设计带FLAG标签和GFP标签的β4Gal TⅡ基因的特异性引物... 目的运用基因克隆技术构建人源β1,4-半乳糖转移酶Ⅱ(β4Gal TⅡ)真核表达质粒,并将其转染到COS7细胞中,观察蛋白在细胞内的定位,同时转染到HEK 293T细胞中检测其表达。方法分别设计带FLAG标签和GFP标签的β4Gal TⅡ基因的特异性引物,以含人β4Gal TⅡ全长c DNA序列为模板,定向构建到pc DNA3.1(+)及p CDGFP真核表达载体中,构建重组表达质粒。通过酶切和测序鉴定阳性重组质粒,利用Lipofectamine 2000分别转染COS7、HEK 293T细胞,免疫荧光显微镜观察重组蛋白在细胞内的定位,Western blot法鉴定重组蛋白的表达。结果成功构建pc DNA3.1-β4Gal TⅡ-FLAG和p CDGFP-β4Gal TⅡ重组表达载体,定位实验表明:β4Gal TⅡ-FLAG和GFP-β4Gal TⅡ二者在COS7细胞中均主要定位在细胞核周围,并有明显的块状染色,胞核中未见明显分布;Western blot法检测显示重组β4Gal TⅡ蛋白在HEK 293T细胞中稳定表达。结论获得了人β4Gal TⅡ的真核表达质粒,并能在COS7和HEK 293T细胞中表达,为进一步研究β4Gal TⅡ的功能及其与其他蛋白的相互作用奠定了一定基础。 展开更多
关键词 β4Gal TⅡ 转染 细胞定位 蛋白表达
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FKBP25缺失突变体在细胞中的表达与定位 预览
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作者 张姗靖 王蓓华 +5 位作者 龚芮 潘林鑫 耿慧武 刘晓颖 邓松华 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第9期1250-1253,共4页
目的研究FKBP25缺失突变体蛋白在细胞内的表达和定位。方法以人FKBP25全长cDNA序列的质粒为模板,PCR方法分别扩增出FKBP25缺失突变体序列,然后插入真核表达载体peDNA3.I中,通过Westernblot方法和免疫荧光方法检测其在细胞株中的表... 目的研究FKBP25缺失突变体蛋白在细胞内的表达和定位。方法以人FKBP25全长cDNA序列的质粒为模板,PCR方法分别扩增出FKBP25缺失突变体序列,然后插入真核表达载体peDNA3.I中,通过Westernblot方法和免疫荧光方法检测其在细胞株中的表达和定位。结果成功构建了FKBP25缺失突变体的真核表达载体,经Westernblot检测FKBP25缺失突变体在HEK293T细胞中能够有效表达,免疫荧光显微镜结果显示FKBP25缺失突变体在COS7细胞中分布于细胞核和细胞质。结论FKBP25缺失突变体住HEK293rr、COS7细胞中能够表达,为了解FKBP25缺失突变体的功能提供了一定基础。 展开更多
关键词 FKBP25 基因表达 免疫荧光 细胞定位
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人AK3基因在哺乳动物细胞系中的表达与定位 预览
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作者 李克娟 顾彧 +1 位作者 刘晓颖 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第11期1531-1534,共4页
目的运用基因克隆技术构建带FLAG标签的腺苷酸激酶3(AK3)真核表达载体,观察其在哺乳动物细胞内的定位和表达情况。方法以人AK3全长的cDNA序列的菌液为模板,设计带有FLAG标签的引物,用PCR方法构建出真核表达载体pcDNA3.1-AK3-FLAG。运... 目的运用基因克隆技术构建带FLAG标签的腺苷酸激酶3(AK3)真核表达载体,观察其在哺乳动物细胞内的定位和表达情况。方法以人AK3全长的cDNA序列的菌液为模板,设计带有FLAG标签的引物,用PCR方法构建出真核表达载体pcDNA3.1-AK3-FLAG。运用免疫荧光及Western blot法检测其在哺乳动物细胞中的定位与表达情况。结果成功构建了pcDNA3.1-AK3-FLAG质粒;荧光定位试验表明AK3在COS7细胞的胞质中呈斑点状分布,细胞核中未见明显分布;Western blot法检测表明AK3在HEK-293T细胞中能有效表达。结论 AK3在哺乳动物细胞内能够有效表达和定位,为进一步研究AK3和其他蛋白之间的相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 AK3 细胞定位 免疫荧光
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OPTN基因shRNA真核表达载体的构建及干扰效应的检测 预览
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作者 顾彧 范礼斌 刘晓颖 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第1期1-4,共4页
目的通过构建针对视神经病变诱导基因(OPTN)的shRNA的真核表达载体,并转染HEK293FT细胞,实现对OPTN基因表达的抑制,为进一步研究OPTN蛋白的分子机制奠定基础。方法根据Origene中OPTN基因序列设计并合成能转录shRNA的双链DNA序列,... 目的通过构建针对视神经病变诱导基因(OPTN)的shRNA的真核表达载体,并转染HEK293FT细胞,实现对OPTN基因表达的抑制,为进一步研究OPTN蛋白的分子机制奠定基础。方法根据Origene中OPTN基因序列设计并合成能转录shRNA的双链DNA序列,插入真核表达载体pRFP—C—RS中,构建重组载体pRFP—C—RS—shOPTN。经鉴定正确后转染HEK293FT细胞,荧光显微镜下观察shRNA转染情况,Westernblot法检测OPTN蛋白表达,检测其干扰效率;沙门菌感染实验检测沙门菌在细胞内的增殖,进一步检测OPTN蛋白干扰后对OPTN蛋白作为自噬受体功能的影响。结果成功构建了针对OPTN基因的shRNA表达载体,转入HEK293FT细胞72h之后,pRFP—C—RS—shOPTN表达增强,OPTN蛋白表达受到明显抑制;细胞内的沙门菌感染实验证明OPTN蛋白可以显著抑制沙门菌的增殖。结论靶向OPTN基因的特异性shRNA转染HEK293FF细胞后可抑制OPTN蛋白表达效率达80%以上,可用于OPTN调控自噬的进一步研究,同时自噬调节蛋白OPTN可以显著抑制沙门菌在细胞内的增殖。 展开更多
关键词 RNA干扰 OPTN 沙门菌
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人MT2A基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达 预览 被引量:2
10
作者 李新颖 潘林鑫 +3 位作者 耿慧武 刘君 刘晓颖 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第3期232-235,共4页
目的用基因克隆方法构建带FLAG—tag的人金属硫蛋白2A(MT2A)真核表达载体,用其转染HEK293T,COS-7细胞观察MT2A在增殖细胞内的表达和定位。方法设计带FLAG-tag的引物,以人MT2A全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增MT2A全长序列,然... 目的用基因克隆方法构建带FLAG—tag的人金属硫蛋白2A(MT2A)真核表达载体,用其转染HEK293T,COS-7细胞观察MT2A在增殖细胞内的表达和定位。方法设计带FLAG-tag的引物,以人MT2A全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增MT2A全长序列,然后插入pCDNA3.1中构建pCDNA3.1-MT2A—FLAG质粒;将构建的质粒转染至HEK293T细胞,提取总蛋白,进行Western blot检测;脂质体法转染至COS-7细胞,荧光显微镜下观察MT2A表达的蛋白在细胞内定位。结果正确构建了pCDNA3.1-MT2A-FLAG质粒;其在HEK293T细胞中能有效地表达;免疫荧光实验表明在COS-7细胞中,MT2A主要分布在细胞质内。结论该研究结果为了解MT2A在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。 展开更多
关键词 金属硫蛋白 细胞定位 转染 免疫印迹
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人MRG15在哺乳动物细胞中表达与定位的初步研究 预览
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作者 姜天鹏 潘林鑫 +5 位作者 赵健 乔正 李春雨 张珊静 李克娟 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第9期1022-1025,共4页
目的研究细胞周期调控蛋白(MRG15)在哺乳动物细胞中的表达与定位。方法以含人MRG15全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增,构建MRG15真核表达载体,分别利用Western blot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞株中的表达与定位。结果 Western... 目的研究细胞周期调控蛋白(MRG15)在哺乳动物细胞中的表达与定位。方法以含人MRG15全长cDNA序列的质粒为模板,PCR扩增,构建MRG15真核表达载体,分别利用Western blot法和免疫荧光法检测其在哺乳动物细胞株中的表达与定位。结果 Western blot法检测结果表明MRG15在哺乳动物细胞中能有效地表达,免疫荧光法结果显示MRG15主要分布在细胞核。结论 MRG15蛋白主要在细胞核中表达,为进一步了解MRG15的功能奠定了一定基础。 展开更多
关键词 MRG15 蛋白表达 免疫荧光
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浅谈如何提高高校青年教师的教学能力 预览 被引量:3
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作者 张秀红 《科教文汇》 2013年第31期26-27,共2页
青年教师已成为高校教师队伍中的主力军,但关于青年教师的教学能力还存在一些问题。本文根据高校青年教师的现状及实际情况,提出了几点针对青年教师如何快速提高教学能力的方法和注意事项,以供刚参加工作的青年教师参考。这对促进高校... 青年教师已成为高校教师队伍中的主力军,但关于青年教师的教学能力还存在一些问题。本文根据高校青年教师的现状及实际情况,提出了几点针对青年教师如何快速提高教学能力的方法和注意事项,以供刚参加工作的青年教师参考。这对促进高校教育事业发展有一定的现实意义。 展开更多
关键词 青年教师 师德 教学能力 青年教师导师制
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人cystatinB基因在哺乳动物细胞株中的定位与表达 预览 被引量:2
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作者 耿慧武 刘君 +3 位作者 陈应炉 杨军 刘晓颖 范礼斌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2012年第4期 361-364,共4页
目的用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人cystatinB真核表达载体,用其转染COS-7和HEK 293 T细胞观察cystatin B在增殖细胞内的定位;转染HEK 293 T细胞检测其表达。方法设计带FLAG-tag的引物,以人cystatin B全长cDNA序列的质粒为模板,PCR... 目的用基因克隆方法构建带FLAG-tag的人cystatinB真核表达载体,用其转染COS-7和HEK 293 T细胞观察cystatin B在增殖细胞内的定位;转染HEK 293 T细胞检测其表达。方法设计带FLAG-tag的引物,以人cystatin B全长cDNA序列的质粒为模板,PCR法扩增cystatin B全长序列,然后插入pCDNA 3中构建pCDNA 3-cystatin B-FLAG(CSTBF)质粒;脂质体法转染至COS-7、HEK 293 T细胞,荧光显微镜下观察其在细胞内定位;转染至HEK 293 T细胞,提取细胞总蛋白进行Western blot。结果正确构建了pCD-NA 3-cystatin B-FLAG质粒;定位实验表明在COS-7和HEK293 T细胞中,cystatin B主要分布在细胞核内,核膜处更集中,胞浆内也有广泛分布;Western blot结果表明该质粒能在细胞中有效表达。结论该研究结果为了解cystatin B在细胞内与其他蛋白质相互作用及功能提供了一定的基础。 展开更多
关键词 cystatinB 细胞定位 转染 免疫荧光
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细胞生物学课程现代教学方法的探讨与思考 预览 被引量:2
14
作者 王峰松 《科教文汇》 2012年第18期53-53,55共2页
细胞生物学是生命科学中最重要的基础学科之一,随着生命科学自身和生物产业的不断发展,对生命科学相关领域创新型高水平人才的需求也在不断增加。作为从事高等教育的我们,宜在教学过程中不断总结和探索,以期逐步实现细胞生物学教学手段... 细胞生物学是生命科学中最重要的基础学科之一,随着生命科学自身和生物产业的不断发展,对生命科学相关领域创新型高水平人才的需求也在不断增加。作为从事高等教育的我们,宜在教学过程中不断总结和探索,以期逐步实现细胞生物学教学手段的现代化、教学模式的多元化、教学内容的先进化和教学思维的创新化,迎合时代和社会发展的需求,为祖国培养出更多不仅具有扎实的基本知识还具有非凡创新能力的人才。 展开更多
关键词 细胞生物学 教学方法 创新性
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Apak的组织表达谱及其白血病相关性分析
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作者 窦睿 郭兴 +4 位作者 田春艳 曾慧敏 艾辉胜 张令强 范礼斌 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期100-103,共4页
目的探讨P53负调控蛋白Apak的组织分布特征并分析其白血病相关性。方法利用组织斑点杂交分析Apak在多种组织中的分布情况,Northern杂交分析其在5种白血病细胞系的转录,并用RT-PCR分析Apak在32例白血病患者和12例健康人外周血中的mRNA水... 目的探讨P53负调控蛋白Apak的组织分布特征并分析其白血病相关性。方法利用组织斑点杂交分析Apak在多种组织中的分布情况,Northern杂交分析其在5种白血病细胞系的转录,并用RT-PCR分析Apak在32例白血病患者和12例健康人外周血中的mRNA水平。结果 Apak的组织表达谱分析表明该基因只在胎肝、胎脾以及成人唾液腺、膀胱、左右心室和心尖中高表达。在多种白血病细胞系Jurkat,AHH-1,MOLT-4,SKO-007和HL-60和部分白血病患者的外周血中Apak也呈现高转录,提示Apak在白血病发生中可能发挥重要功能。结论本研究揭示了Apak是一种具有组织特异性分布的P53负调节蛋白,其在白血病中的高表达提示其可能与该病的发生有一定的关联。 展开更多
关键词 肿瘤抑制蛋白P53 Apak 组织表达谱 白血病 细胞系 肿瘤 细胞周期 转录因子
PC12细胞中持续性氧糖剥夺模型的建立 被引量:2
16
作者 吴艳 范礼斌 张成岗 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期189-192,共4页
目的在PC12细胞中建立模拟永久性局部脑梗死的持续性氧糖剥夺模型。方法按照常规细胞培养方法,制备PC12细胞不同时间(5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h)持续性氧糖剥夺模型,采用MTT法检测细... 目的在PC12细胞中建立模拟永久性局部脑梗死的持续性氧糖剥夺模型。方法按照常规细胞培养方法,制备PC12细胞不同时间(5 min、10 min、15 min、30 min、45 min、1 h、3 h、6 h、12 h、24 h和48 h)持续性氧糖剥夺模型,采用MTT法检测细胞的存活率,以评估持续性氧糖剥夺对PC12细胞的损伤作用。继而进行氧、血清和葡萄糖3种因素分别交叉缺失5 min后的损伤效应研究,同样采用MTT法分析细胞的存活率。结果 PC12细胞在持续性氧糖剥夺模型条件下的半数存活时间为10.3 min,进而发现低氧和缺乏血清对细胞存活率影响不大,而培养基中葡萄糖浓度对细胞的存活率影响较大,且呈一定的浓度相关性。结论在建立持续性氧糖剥夺模型的基础上确定了PC12细胞的半数存活时间,并明确了氧、血清和葡萄糖对细胞存活率的影响,为揭示局部脑缺血低氧损伤相关疾病的机制提供了重要参考资料。 展开更多
关键词 脑梗死 PC12细胞 氧糖剥夺模型 存活率 再灌注损伤 葡萄糖
人源脑红蛋白转基因秀丽线虫的制备、鉴定及生理功能分析 预览
17
作者 石锦平 任长虹 +3 位作者 李媛 张继业 范礼斌 张成岗 《军事医学》 CAS 2011年第1期21-24,43共5页
目的以秀丽隐杆线虫为模式生物制备人源脑红蛋白(human neuroglobin,hNgb)转基因线虫,初步探讨外源性hNgb对线虫寿命和产卵率的影响。方法通过显微注射方法制备hNgb转基因线虫,使用蛋白印迹和免疫组织化学进行鉴定。使用野生型N2和增... 目的以秀丽隐杆线虫为模式生物制备人源脑红蛋白(human neuroglobin,hNgb)转基因线虫,初步探讨外源性hNgb对线虫寿命和产卵率的影响。方法通过显微注射方法制备hNgb转基因线虫,使用蛋白印迹和免疫组织化学进行鉴定。使用野生型N2和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因线虫作为对照组,测量转基因线虫的寿命和产卵率。结果成功获得hNgb转基因株系线虫,其寿命和产卵率与野生型N2和EGFP转基因线虫相比,差异无统计学意义。结论外源性hNgb转基因不影响线虫的发育和正常生理功能,可用于Ngb功能的深入研究。 展开更多
关键词 脑红蛋白 秀丽隐杆线虫 转基因株系 产卵率 寿命
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社会失败应激致抑郁样行为动物模型的研究 被引量:2
18
作者 张飞龙 徐志伟 +1 位作者 范礼斌 张成岗 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期193-196,共4页
目的探讨社会失败应激抑郁模型建立的可行性及有效性。方法连续给予C57BL/6小鼠社会失败心理应激21 d,应激结束24 h后依次通过社会交互实验、开场实验、糖水偏爱实验等评价手段,对小鼠进行抑郁行为评价。结果 与对照组相比,社会失败应... 目的探讨社会失败应激抑郁模型建立的可行性及有效性。方法连续给予C57BL/6小鼠社会失败心理应激21 d,应激结束24 h后依次通过社会交互实验、开场实验、糖水偏爱实验等评价手段,对小鼠进行抑郁行为评价。结果 与对照组相比,社会失败应激导致C57BL/6小鼠出现显著焦虑样行为,而仅有50%-60%的社会失败应激小鼠出现社会逃避及兴趣缺失的抑郁样行为,表现为应激易感。其他应激小鼠评价结果与对照组无差异,未出现抑郁样行为,表现出应激抗性。结论通过社会失败应激,为建立一种新的抑郁动物模型提供了实验依据。 展开更多
关键词 社会失败 易感表型 抑郁 模型 动物 应激 抗抑郁药
Apak的亚细胞定位机制研究
19
作者 姚菲 唐颖 +2 位作者 田春艳 张令强 范礼斌 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期95-99,共5页
目的探讨P53的调控分子Apak亚细胞定位的结构基础。方法在热休克及DNA损伤诱导剂MMS处理下,通过免疫荧光技术观察Apak的亚细胞定位变化,并通过激光共聚焦荧光显微镜观察Apak截短体的亚细胞定位。结果 Apak多以均匀的形式分布在细胞核质... 目的探讨P53的调控分子Apak亚细胞定位的结构基础。方法在热休克及DNA损伤诱导剂MMS处理下,通过免疫荧光技术观察Apak的亚细胞定位变化,并通过激光共聚焦荧光显微镜观察Apak截短体的亚细胞定位。结果 Apak多以均匀的形式分布在细胞核质,偶见在核仁中聚集;在外界刺激后Apak核内的均匀分布减少,主要以点状的大颗粒形式在核仁中呈聚集样分布;Apak的9种截短体均可定位于核内,且在核质和核仁中具有明显的比例差异。结论在DNA损伤信号下Apak有一个从核质向核仁移位的动态过程;KRAB区可以拮抗Apak在核仁的定位,而锌指尤其是锌指数的数目(锌指数〉14)则决定了Apak能否在核仁定位。 展开更多
关键词 Apak 肿瘤抑制蛋白质P53 亚细胞定位 核仁 细胞凋亡 DNA损伤 转录因子
参苓白术复方提取物抗放射性肠损伤作用的实验研究 被引量:1
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作者 高志买 何珊 +4 位作者 韩媛 程晓晨 卢育新 范礼斌 张庆林 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期 769-772,779,共5页
目的探讨中药参苓白术复方对放射性小鼠肠损伤模型的治疗作用。方法 MTT法检测复方对辐照后小肠上皮细胞的增殖作用。小鼠腹部局部照射后立即灌胃中药复方,测定小鼠体质量,记录腹泻和存活情况,取小鼠空肠切片进行HE染色,观察肠道病理改... 目的探讨中药参苓白术复方对放射性小鼠肠损伤模型的治疗作用。方法 MTT法检测复方对辐照后小肠上皮细胞的增殖作用。小鼠腹部局部照射后立即灌胃中药复方,测定小鼠体质量,记录腹泻和存活情况,取小鼠空肠切片进行HE染色,观察肠道病理改变。结果体外实验显示,参苓白术复方能明显促进辐照后小肠上皮细胞的增殖。治疗组小鼠一般状况和小肠病理切片明显得到改善,腹泻减少,小鼠存活率明显提高。结论中药复方参苓白术对辐射性肠损伤小鼠有明显的保护作用,为其应用于临床放射性肠损伤提供了实验依据。 展开更多
关键词 辐射损伤 小肠 腹泻 上皮细胞 修复 中药复方
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