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褪黑素对高糖刺激系膜细胞NF-κB与TGF-β/Smad3通路的影响 预览
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作者 马玉 杨雯雯 +2 位作者 范哲 吴永贵 夏玲玲 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2019年第6期840-845,共6页
目的探讨褪黑素(MT)对高糖刺激的小鼠肾小球系膜细胞(MCs)核因子-κB(NF-κB)与转化生长因子-β(TGF-β)/Smad3通路的影响。方法将MCs分为甘露醇对照组、正常对照组、正常对照+MT组、高糖组、高糖+不同浓度(10、100、1000)μmol/LMT组... 目的探讨褪黑素(MT)对高糖刺激的小鼠肾小球系膜细胞(MCs)核因子-κB(NF-κB)与转化生长因子-β(TGF-β)/Smad3通路的影响。方法将MCs分为甘露醇对照组、正常对照组、正常对照+MT组、高糖组、高糖+不同浓度(10、100、1000)μmol/LMT组。采用CCK-8检测MCs活性;5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)试剂盒检测MCs增殖情况;激光共聚焦法检测MCsNF-κBp65核转移及Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(Fn)表达情况;ELISA法检测细胞上清液中ColⅣ、Fn含量变化;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测ColⅣ、FnmRNA表达水平;Westernblot法检测ColⅣ、Fn、核因子κB抑制因子(IκB)、核因子κB抑制因子磷酸化(p-IκB)、TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白表达。结果与正常对照组比较,高糖组MCs的增殖功能明显增强,同时MCsColⅣ、Fn、p-IκB/IκB、NF-κBp65、TGF-β1、p-Smad3/Smad3表达均明显上调(P<0.05);与高糖组比较,高糖+不同浓度MT组各项指标呈浓度依赖性降低(P<0.05)。结论高糖可以增强MCsNF-κBp65核转移及TGF-β/Smad3信号通路的激活,导致细胞外基质ColⅣ和Fn分泌增加,MT能干预高糖刺激的MCsNF-κBp65核转移,并且抑制TGF-β/Smad3信号通路的激活,降低纤维化因子的释放。 展开更多
关键词 褪黑素 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 纤维化
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血管紧张素Ⅱ1型受体及其拮抗剂对肾脏损伤和高糖诱导巨噬细胞的影响 预览
2
作者 江肖 吴永贵 《临床肾脏病杂志》 2019年第2期126-133,140共9页
目的探究糖尿病肾病(DN)患者肾脏损伤与血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的表达及巨噬细胞浸润之间的关系,以及AT1R拮抗剂氯沙坦对巨噬细胞的调控作用。方法收集不同病理分期的DN患者肾穿刺样本,并收集肾癌患者的癌旁组织作为癌旁对照组,免疫... 目的探究糖尿病肾病(DN)患者肾脏损伤与血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)的表达及巨噬细胞浸润之间的关系,以及AT1R拮抗剂氯沙坦对巨噬细胞的调控作用。方法收集不同病理分期的DN患者肾穿刺样本,并收集肾癌患者的癌旁组织作为癌旁对照组,免疫组化法检测不同病理分期患者肾组织中AT1R的表达以及CD68阳性巨噬细胞的浸润;从医院HIS系统调取患者信息,比较肾穿刺前服用过血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂(ARB)类药物的患者与未服用过ARB类药物的患者之间巨噬细胞浸润的改变。细胞实验以骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,不同浓度的氯沙坦作为干预因素;采用流式细胞术测定巨噬细胞的纯度、共刺激分子的表达以及吞噬能力;采用实时荧光定量PCR法以及Elisa法测定各组细胞中炎症因子、巨噬细胞分型标记物的mRNA及蛋白表达;应用一氧化氮(NO)试剂盒检测各组细胞培养上清液中NO的表达。结果与癌旁对照组相比,DNⅢ型和Ⅳ型患者的肾脏中AT1R的表达有明显上升趋势,差异具有统计学意义(P<0.05)。随着DNⅢ型和Ⅳ型患者的肾脏中AT1R的表达上升,巨噬细胞浸润明显增加(P<0.05)。此外,在相同病理分期的患者中,服用过ARB类药物的患者较未服用的患者其肾组织中的巨噬细胞浸润明显减少(P<0.05)。细胞实验结果进一步证实使用氯沙坦干预后能显著减少巨噬细胞活化,抑制高糖诱导的巨噬细胞M1型分化。结论 AT1R在肾脏中的表达水平及巨噬细胞浸润程度与DN患者肾脏损伤程度成正相关,ARB类药物能减轻DN患者肾脏组织中巨噬细胞浸润及活化。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ1型受体 巨噬细胞 糖尿病肾病
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皮肤AGEs荧光检测对糖尿病肾病的临床意义 预览
3
作者 吴怡琪 卢文 《医学信息》 2019年第6期101-104,共4页
目的探讨皮肤AGEs荧光检测对糖尿病肾病的早期诊断价值及与糖尿病肾病分期相关性的临床意义。方法将我院住院的122例糖尿病患者按尿白蛋白/肌酐比值,眼底检查及CKD分期分为单纯糖尿病组(DM0组)42例、糖尿病肾病eGFR≥45 ml/(min·1.... 目的探讨皮肤AGEs荧光检测对糖尿病肾病的早期诊断价值及与糖尿病肾病分期相关性的临床意义。方法将我院住院的122例糖尿病患者按尿白蛋白/肌酐比值,眼底检查及CKD分期分为单纯糖尿病组(DM0组)42例、糖尿病肾病eGFR≥45 ml/(min·1.73 m~2)组(DKD1组)49例和糖尿病肾病e GFR<45 ml/(min/1.73·m~2)组(DKD2组)31例,选取同期行肾穿刺肾功能正常的非糖尿病患者51例为对照组(NC组),分别检测各组皮肤AGEs、血白蛋白、尿微量白蛋白等指标。结果①糖尿病患者的皮肤AGEs、SBP、SCr、TG、TC均高于对照组,ALB、HB低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);②与DMO组比较,DKD1组和DKD2组的SBP、肌酐、UA、24hUP、尿微量白蛋白、皮肤AGEs水平均升高,且DKD2组高于DKD1组,差异有统计学意义(P<0.05);而TP、ALB、HB水平均降低,且DKD2组低于DKD1组,差异有统计学意义(P<0.05);③糖尿病患者皮肤AGEs水平与尿微量白蛋白水平呈正相关(r=0.484,P<0.05)。④皮肤AGEs是糖尿病肾病相关的危险因素[OR=1.113,95%CI(1.055,1.174)]。⑤ROC曲线分析显示皮肤AGEs检测糖尿病肾病的敏感性为68.75%,特异性为71.43%。结论 AGEs可能参与糖尿病肾病发生发展,荧光检测皮肤AGEs可用于早期筛查DKD并且评估其病变程度。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 糖尿病 糖基化终产物 荧光光谱法 皮肤
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腹膜透析发生肺部感染危险因素的病例对照研究 预览
4
作者 王坤 任琳 +1 位作者 王金霞 吴永贵 《安徽医学》 2019年第8期924-927,共4页
目的分析腹膜透析(PD)患者发生肺部感染的危险因素。方法以2011年3月至2017年6月在安徽医科大学第一附属医院住院治疗的184例PD患者为研究对象,将发生肺部感染的36例患者设为病例组,其余148例设为对照组,行logistics回归分析,探讨PD发... 目的分析腹膜透析(PD)患者发生肺部感染的危险因素。方法以2011年3月至2017年6月在安徽医科大学第一附属医院住院治疗的184例PD患者为研究对象,将发生肺部感染的36例患者设为病例组,其余148例设为对照组,行logistics回归分析,探讨PD发生肺部感染的危险因素。结果病例组患者的收缩压、舒张压、C-反应蛋白(CRP)升高及合并心功能不全患者的比例高于对照组,血红蛋白浓度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,心功能不全(OR=10.860,95%CI:3.290~35.843,P=0.000)、贫血(OR=1.041,95%CI:1.018~1.064,P=0.000)、CRP(OR=2.563,95%CI:1.074~6.116,P=0.034)是PD患者发生肺部感染的独立危险因素。结论PD患者在贫血、心功能不全及CRP升高的情况下容易出现肺部感染,临床应予以积极干预。 展开更多
关键词 腹膜透析 肺部感染 危险因素 病例对照研究
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p53激动剂nutlin-3对高糖培养的肾系膜细胞增殖的影响 预览
5
作者 王金霞 姚亚兰 +2 位作者 任琳 王坤 吴永贵 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期692-697,共6页
目的:观察p53激动剂nutlin-3对高糖培养的肾系膜细胞增殖、凋亡和细胞外基质表达的影响。方法:制备糖尿病肾病(DN)小鼠动物模型,对小鼠肾组织行PAS染色,观察病理形态学变化,免疫组化染色检测肾组织中p53的表达。对肾小球系膜细胞株SV40... 目的:观察p53激动剂nutlin-3对高糖培养的肾系膜细胞增殖、凋亡和细胞外基质表达的影响。方法:制备糖尿病肾病(DN)小鼠动物模型,对小鼠肾组织行PAS染色,观察病理形态学变化,免疫组化染色检测肾组织中p53的表达。对肾小球系膜细胞株SV40进行体外培养,根据实验需要将细胞分为甘露醇(Motl)组、正常糖浓度对照(NG)组、高糖(HG)组,高糖+nutlin-3(HG+Nut)组及nutlin-3对照(Nut)组,CCK-8法和台盼蓝染色活细胞计数检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测Ⅳ型胶原蛋白(Col-Ⅳ)、p53、p-p53、Bcl-2和Bax的蛋白水平。结果:DN小鼠肾组织中系膜细胞增生,细胞外基质增多,p53水平明显升高。高糖环境可以增强系膜细胞的活力,40μmol/L的nutlin-3对高糖培养下的系膜细胞有抑制作用。与HG组比较,HG+Nut组的p53、Bax和p-p53的蛋白水平显著升高(P<0.05),Bcl-2和Col-IV的蛋白水平降低(P<0.05),Bax/Bcl-2的比值大于1。与HG组比较,nutlin-3可促进高糖培养下的系膜细胞凋亡,凋亡率明显增高(P<0.05)。结论:高糖环境增强肾系膜细胞的增殖能力。p53激动剂可抑制高糖培养的肾系膜细胞的活力和Col-IV的表达,促进其凋亡。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 细胞凋亡 细胞外基质 Nutlin-3 P53
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尿毒症透析患者心血管钙化及左心室肥厚影响因素的研究 预览
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作者 程颖 卢文 《医学信息》 2019年第9期91-94,共4页
目的研究慢性肾脏病5期(CKD5)已透析患者,心血管钙化及左心室肥厚(LVH)的影响因素。方法选取2015年12月~2017年5月在我院行透析的患者63例设为观察组,另选eGFR>90ml/(min·1.73m^2)的慢性肾脏病患者21例设为对照组,根据有无心脏... 目的研究慢性肾脏病5期(CKD5)已透析患者,心血管钙化及左心室肥厚(LVH)的影响因素。方法选取2015年12月~2017年5月在我院行透析的患者63例设为观察组,另选eGFR>90ml/(min·1.73m^2)的慢性肾脏病患者21例设为对照组,根据有无心脏瓣膜钙化进一步分为钙化组与非钙化组。分别测量并比较两组患者血压,检测血清白蛋白(ALB)、PTH、血钙(Ca)、血磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、25羟维生素D[25(OH)VitD]、成纤维生长因子23(FGF23),记录患者心脏结构及功能指标、腹主动脉钙化情况,分析血磷、FGF23等与心脏瓣膜钙化及左室肥厚的关系。结果观察组较对照组患者收缩压、P、钙磷乘积、PTH、左心室心肌重量指数(LVMI)、年龄高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组心脏瓣膜及腹主动脉钙化率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组中,心脏瓣膜钙化组与非钙化组患者的年龄比较,差异有统计学意义(P<0.05);多元Logistic回归分析显示:年龄(OR=1.245,P<0.05)及透析龄(OR=1.029,P<0.05)是心脏瓣膜钙化的独立危险因素;收缩压(OR=1.228,P<0.05)是LVH的独立危险因素,收缩压与LVMI呈正相关(r=0.442)。结论透析患者更易发生心血管钙化,且年龄越大、透析时间越久越容易发生钙化,是心脏瓣膜钙化的独立危险因素,收缩压为LVH的独立危险因素,且收缩压越高LVMI水平越高。 展开更多
关键词 透析 心脏瓣膜钙化 左室肥厚 钙磷代谢 成纤维生长因子23
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芍药苷对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞TLR4信号通路的影响 预览 被引量:1
7
作者 杨雯雯 段分分 +2 位作者 邵云侠 王坤 吴永贵 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第7期1037-1044,共8页
目的探讨芍药苷(PF)对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)Toll样受体4(TLR4)信号通路的影响。方法分离骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,芍药苷作为干预因素分组。将BMDMs分为7组:正常糖对照组(LG组)、... 目的探讨芍药苷(PF)对高糖刺激的小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMDMs)Toll样受体4(TLR4)信号通路的影响。方法分离骨髓来源的巨噬细胞作为研究对象,高糖作为刺激因素,芍药苷作为干预因素分组。将BMDMs分为7组:正常糖对照组(LG组)、正常糖对照+PF组(LG+PF组)、高糖刺激组(HG组)、高糖刺激+PF组(HG+PF组)、TLR4-/-对照组(TLR4-/-组)、TLR4-/-对照+高糖刺激组(TLR4-/-+HG组)、TLR4-/-对照+高糖刺激+PF组(TLR4-/-+HG+PF组)。流式细胞术鉴定巨噬细胞的纯度及成熟度;CCK-8检测PF对BMDMs活力的影响;Transwell检测各组BMDMs的趋化功能;激光共聚焦法检测各组的TLR4和诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的协同表达;qRT-PCR测定各组细胞中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及i NOS mRNA的转录表达;Western blot法检测各组总蛋白中i NOS、TLR4、髓样分化因子88(My D88)、TIR结构域衔接蛋白(Trif)、磷酸化白介素-1受体相关激酶(p-IRAK1)、磷酸化干扰素调节因子3(p-IRF3)、核因子κB(NF-κB)p65和NF-κBp-p65蛋白的表达;ELISA法检测各组细胞培养上清液中促炎因子TNF-α、IL-1β和MCP-1的分泌情况。结果与LG组比较,高糖刺激可以增加巨噬细胞的趋化功能;明显上调细胞TNF-α、IL-1β、MCP-1及i NOS mRNA的转录表达(P〈0.01);同时HG组的i NOS及TLR4、My D88、Trif、p-IRF3、NF-κBp65和NF-κBpp65等信号通路蛋白表达水平明显增强(P〈0.01);细胞培养上清液中分泌的TNF-α、IL-1β及MCP-1水平增高(P〈0.01)。PF和敲除TLR4基因均可以抑制高糖刺激导致的巨噬细胞的激活效应。结论高糖可以诱导BMDMs细胞内的TLR4及下游信号传导通路表达上调,同时使巨噬细胞激活导致促炎因子表达上调;PF和敲除TLR4基因均可抑制TLR4信号通路的激活,并且使巨噬细胞促炎因� 展开更多
关键词 芍药苷 巨噬细胞 TOLL样受体4 炎症 糖尿病肾病
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氯硝柳胺磷酸酯通过抑制Wnt/β-catenin通路抑制肾脏组织纤维化 预览
8
作者 常晓燕 吴启美 +1 位作者 江肖 吴永贵 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第10期1538-1543,共6页
目的 探讨氯硝柳胺磷酸酯(P-NICLO)抑制肾脏组织纤维化的作用及其可能机制。方法 构建体内试验(UUO模型)及体外实验(TGF-β1体外刺激NRK-52E细胞导致细胞转分化)模型,予以一定浓度P-NICLO干预,然后通过病理染色,Western blot及... 目的 探讨氯硝柳胺磷酸酯(P-NICLO)抑制肾脏组织纤维化的作用及其可能机制。方法 构建体内试验(UUO模型)及体外实验(TGF-β1体外刺激NRK-52E细胞导致细胞转分化)模型,予以一定浓度P-NICLO干预,然后通过病理染色,Western blot及Real-time PCR等生物信息学方法,检测P-NICLO对不同模型组肾脏组织纤维化的抑制作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果 体内及体外实验均表明,P-NICLO可以明显抑制模型组肾脏组织纤维化,模型组Wnt/β-catenin信号通路也被明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 P-NICLO可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路而抑制肾脏组织纤维化。 展开更多
关键词 P-NICLO 肾脏纤维化 WNT/Β-CATENIN
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慢性肾脏病不同分期患者焦虑抑郁状态研究 预览 被引量:4
9
作者 程光敏 齐向明 +2 位作者 徐兴欣 曹竹如 刘文燕 《安徽医学》 2018年第3期349-351,共3页
目的 研究慢性肾脏病(CKD)不同分期患者的焦虑状态、抑郁状态发生情况。方法 根据美国CKD临床实践指南(K/DIQO)诊断标准,随机选择安徽医科大学第一附属医院2015年9月至2016年9月住院的CKD患者100例,根据肾小球滤过率分为CKD 1~4期组和CK... 目的 研究慢性肾脏病(CKD)不同分期患者的焦虑状态、抑郁状态发生情况。方法 根据美国CKD临床实践指南(K/DIQO)诊断标准,随机选择安徽医科大学第一附属医院2015年9月至2016年9月住院的CKD患者100例,根据肾小球滤过率分为CKD 1~4期组和CKD 5期组。应用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对其进行焦虑和抑郁状态的评估。结果 CKD1~4期组患者SAS评分为(48.92±7.01)分,CKD 5期组患者评分为(49.84±3.41)分,两组差异无统计学意义(P>0.05);CKD1~4期组患者SDS评分为(42.32±4.28)分,CKD 5期组患者评分为(56.84±7.37)分,差异有统计学意义(P<0.05)。CKD患者的SAS、SDS总体评分高于国内正常人群评分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CKD患者存在不同程度的焦虑、抑郁状态,利用有效的护理措施对不同分期的CKD患者心理状况进行干预,可缓解其焦虑、抑郁情绪,改善预后提高生活状态。 展开更多
关键词 焦虑 抑郁 慢性肾脏病
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芍药苷对糖尿病小鼠肾组织中TLR2信号通路的调节作用 预览
10
作者 段分分 杨雯雯 +2 位作者 邵云侠 王坤 吴永贵 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第8期1252-1259,共8页
目的探讨芍药苷(PF)通过Toll样受体2(TLR2)对糖尿病小鼠的肾脏保护作用。方法选用C57BL/6J及TLR2基因敲除(TLR2^(-/-))雄性小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导为糖尿病模型,分为模型组、PF干预[25、50、100mg/(kg·d)]组... 目的探讨芍药苷(PF)通过Toll样受体2(TLR2)对糖尿病小鼠的肾脏保护作用。方法选用C57BL/6J及TLR2基因敲除(TLR2^(-/-))雄性小鼠,腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导为糖尿病模型,分为模型组、PF干预[25、50、100mg/(kg·d)]组、TLR2^(-/-)模型组,另选取C57BL/6J及TLR2^(-/-)小鼠作为对照组(n=12)。实验12周末收集各组小鼠的血、尿及肾组织标本,测定血糖、体重、肾重以及24 h尿白蛋白排泄率(UAER);光镜下观察各组小鼠肾组织病理学改变;采用免疫组化检测肾组织中巨噬细胞(CD68阳性细胞)、TLR2、核因子κB p65(NF-κB p65)的表达;RT-PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA的表达;Western blot检测肾组织TLR2、转接信号髓分化因子88(My D88)、磷酸化白介素受体相关激酶-1(p-IRAK-1)、诱生型一氧化氮合酶(i NOS)、NF-κB p-p65、NF-κB p65蛋白表达。结果与对照组比较,模型组小鼠血糖、肾重/体重、UAER升高,系膜扩张指数和肾小管间质损伤指数评分明显增加,免疫组化CD68、TLR2及NF-κB p65表达明显升高,炎症因子TNF-α、IL-1β和MCP-1 mRNA表达及TLR2、My D88、p-IRAK-1、NF-κB pp65、NF-κB p65、i NOS的蛋白表达明显上调(P〈0.05,P〈0.01);与模型组比较,PF干预组及TLR2^(-/-)模型组小鼠肾重/体重、UAER明显下降(P〈0.01),但对血糖无影响(P〉0.05),肾组织病理改变及巨噬细胞浸润程度减轻,炎症因子水平降低,TLR2及其下游信号通路蛋白的表达下降(P〈0.05,P〈0.01)。结论 PF通过抑制炎症反应发挥肾脏保护作用可能与下调TLR2信号通路有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 芍药苷 TLR2 炎症
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NGAL在腹膜透析相关性腹膜炎诊断中的应用 预览
11
作者 王娟 姚运娇 吴永贵 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第12期1927-1931,共5页
目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在透出液中的表达及其在诊断腹膜透析相关性腹膜炎(PDRP)中的作用。方法 选取60例PDRP患者(G^+菌组24例、G^-菌组16例、培养阴性组20例)为腹膜炎组,同时选择30例腹透患者作为对照组。... 目的 探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在透出液中的表达及其在诊断腹膜透析相关性腹膜炎(PDRP)中的作用。方法 选取60例PDRP患者(G^+菌组24例、G^-菌组16例、培养阴性组20例)为腹膜炎组,同时选择30例腹透患者作为对照组。收集患者临床资料、透出液培养结果并检测透出液中NGAL、白细胞计数(WBC)、多核细胞百分比和白细胞介素-6(IL-6)水平及全血中的C反应蛋白浓度(CRP)、WBC,分析NGAL与腹膜炎发生的相关性。结果 与对照组比较,腹膜炎组患者透出液中的NGAL、WBC、多核细胞百分比、IL-6及全血中的CRP、WBC、中性粒细胞百分比显著升高,而血白蛋白、血肌酐、转铁蛋白、转铁蛋白饱和度明显降低(P<0.05);G^+菌组、G^-菌组、培养阴性组透出液中的NGAL、WBC、多核细胞百分比、IL-6均明显高于对照组(P<0.05)。与培养阴性组比较,G^+菌组与G-菌组透出液中的NGAL、多核细胞百分比显著升高(P<0.05),但G^+菌组与G^-菌组之间差异无统计学意义。腹膜炎组透出液中的NGAL与WBC呈正相关性(r=0.492,P<0.05);而IL-6与WBC无相关性(r=0.034,P>0.05)。应用二分类logistic回归分析发现透出液中NGAL与腹膜炎发生(OR=1.028,P<0.05)及培养阳性(OR=0.998,P<0.05)显著相关,但在鉴别G^+菌与G^-菌性腹膜炎中的作用无相关性。结论 腹透透出液中NGAL可作为诊断PDRP及区分培养阳性腹膜炎及菌阴性腹膜炎的指标。 展开更多
关键词 NGAL 腹膜透析相关性腹膜炎 IL-6 腹透液白细胞计数
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高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制
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作者 王东 徐兴欣 +2 位作者 范哲 齐向明 吴永贵 《中华肾脏病杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期681-688,共8页
目的探讨高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制。方法(1)正常糖(5.5mmol/L)及高糖(30.0mmol/L)分别处理人肾小管上皮细胞(HK2)48h,收集两组上清液,使用超速离心法提取外泌体,采用透射电镜、W... 目的探讨高糖环境下肾小管上皮细胞来源外泌体诱导巨噬细胞激活的作用与机制。方法(1)正常糖(5.5mmol/L)及高糖(30.0mmol/L)分别处理人肾小管上皮细胞(HK2)48h,收集两组上清液,使用超速离心法提取外泌体,采用透射电镜、Western印迹鉴定外泌体。(2)两组外泌体以PKH67标记后分别刺激人急性单核细胞白血病细胞株(THP-1)诱导分化的巨噬细胞,激光共聚焦观察THP-1巨噬细胞是否吞噬外泌体;显微镜下观察THP-1巨噬细胞的形态;Transwell小室法检测THP-1巨噬细胞的趋化能力;实时荧光定量PCR与酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测THP-1巨噬细胞的诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1/CCL2)水平;Western印迹检测各组p-JNK、p-p38MAPK和NF—κBp65蛋白的水平。结果(1)上清液经超速离心获取的囊泡,在电镜下观察到外泌体,粒径30~100nm。Western印迹检测囊泡表达外泌体的标志蛋白CD63和TSG101,不表达Calnexin蛋白,提示所获取外泌体的纯度较高。(2)激光共聚焦证实各组外泌体均能被THP-1巨噬细胞吞噬。与正常糖外泌体刺激组相比,高糖外泌体刺激组的THP-1巨噬细胞趋化能力增强,iNOS、TNF-α、IL-1β、MCP-1的表达和分泌水平均上调(均P〈0.01),p-JNK、p-p38MAPK和NF-κBp65蛋白水平也显著升高(均P〈0.01)。结论高糖环境下肾小管上皮细胞分泌的外泌体可通过MAPK/NF-κB信号通路诱导巨噬细胞的激活和功能改变。 展开更多
关键词 巨噬细胞 丝裂原活化蛋白激酶 炎症 外泌体
芍药苷减轻糖尿病小鼠肾组织炎症与JAK2/STAT3信号通路的关系 预览
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作者 李新玉 邵云侠 +1 位作者 王坤 吴永贵 《安徽医科大学学报》 北大核心 2018年第7期1026-1032,共7页
目的研究芍药苷(PF)对糖尿病小鼠肾组织炎症的影响并初步探讨其可能的作用机制。方法 60只C57BL/6J小鼠随机分为5组:对照组、模型组、PF 25 mg/kg组、PF 50mg/kg组和PF 100 mg/kg组。于实验12周末测定各组小鼠血糖、相对肾重(肾重/... 目的研究芍药苷(PF)对糖尿病小鼠肾组织炎症的影响并初步探讨其可能的作用机制。方法 60只C57BL/6J小鼠随机分为5组:对照组、模型组、PF 25 mg/kg组、PF 50mg/kg组和PF 100 mg/kg组。于实验12周末测定各组小鼠血糖、相对肾重(肾重/体质量)及24 h尿白蛋白排泄率(UAER);光镜下观察各组小鼠肾组织病理学改变并评分;免疫组化检测肾组织CD68、p-JAK2及p-STAT3表达;Western blot检测肾组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达;实时定量PCR法检测肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)与诱生型一氧化氮合酶(i NOS)的mRNA表达。结果实验12周末,模型组小鼠血糖、相对肾重、UAER及肾组织病理学评分较对照组明显升高(P〈0.05,P〈0.01),PF给药可使小鼠相对肾重、UAER及肾组织病理学评分较模型组明显减少(P〈0.05,P〈0.01)。与对照组相比,模型组小鼠肾组织CD68、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达以及TNF-α、IL-1β、MCP-1和i NOS的mRNA表达均显著增加(P〈0.01),PF 25、50、100 mg/kg给药组小鼠肾组织CD68、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达以及TNF-α、IL-1β、MCP-1和i NOS的mRNA表达明显低于模型组(P〈0.05,P〈0.01)。结论 PF能够明显改善糖尿病小鼠肾损伤,这种保护作用的机制可能部分与抑制肾组织JAK2/STAT3信号通路激活及炎症反应有关。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏疾病 芍药苷 JAK2/STAT3信号通路 炎症 巨噬细胞
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心踝血管指数对腹膜透析患者动脉硬化的预测价值及相关影响因素 被引量:2
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作者 吴启美 卢文 郑林林 《中国动脉硬化杂志》 北大核心 2017年第12期1269-1272,共4页
目的评估心踝血管指数在腹膜透析患者动脉硬化中的应用价值及相关影响因素。方法选择95例维持性腹膜透析患者,收集患者的基本信息和实验室指标,同时测定患者的心踝血管指数(CAVI)。根据CAVI是否升高分为高CAVI组(CAVI≥9)和正常CAV... 目的评估心踝血管指数在腹膜透析患者动脉硬化中的应用价值及相关影响因素。方法选择95例维持性腹膜透析患者,收集患者的基本信息和实验室指标,同时测定患者的心踝血管指数(CAVI)。根据CAVI是否升高分为高CAVI组(CAVI≥9)和正常CAVI组(CAVI〈9)。结果高CAVI组CAVI(9.85±0.73)明显高于正常CAVI组(7.67±0.81),高CAVI组年龄(54.64±5.68岁)、透析时间(48.32±30.43月)、脉压(57.41±12.43 mm Hg)、血清矫正钙(2.52±0.28 mmol/L)、血磷(2.22±0.66 mmol/L)、钙磷乘积(5.59±1.70)、空腹血糖(6.02±1.83 mmol/L)明显高于正常CAVI组,血红蛋白(83.96±20.53 g/L)、血白蛋白(32.40±5.22 g/L)明显低于正常CAVI组。Spearman相关分析显示腹膜透析患者CAVI与年龄、透析时间、脉压、血清矫正钙、血磷、钙磷乘积、空腹血糖、高敏C反应蛋白呈正相关(r值分别为0.520、0.260、0.244、0.347、0.231、0.338、0.225、0.298,P均〈0.05),与血白蛋白、25-羟维生素D呈负相关(r值分别为-0.335、-0.222,P均〈0.05);多元线性回归分析显示年龄、血白蛋白是腹膜透析患者CAVI的独立危险因素。结论心踝血管指数可以作为评价腹膜透析患者动脉硬化的无创检测指标,早期检测心踝血管指数、改善营养状况可以降低腹膜透析患者动脉硬化发生风险,减少心血管疾病的发生,改善预后。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 腹膜透析 心踝血管指数 动脉硬化
单次大剂量对比多次小剂量STZ诱导昆明小鼠糖尿病肾病的研究 预览 被引量:2
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作者 姚亚兰 王金霞 +2 位作者 阚春明 吴永贵 王坤 《安徽医科大学学报》 北大核心 2017年第12期1786-1790,共5页
目的研究单次大剂量注射与多次小剂量连续注射链脲佐菌素(STZ)诱导昆明小鼠糖尿病肾病的成模率,以得出最佳的建模方法。方法 26只昆明小鼠随机分为3组:阴性对照组6只(注射等量的柠檬酸盐缓冲液)、单次大剂量组10只(150 mg/kg单次... 目的研究单次大剂量注射与多次小剂量连续注射链脲佐菌素(STZ)诱导昆明小鼠糖尿病肾病的成模率,以得出最佳的建模方法。方法 26只昆明小鼠随机分为3组:阴性对照组6只(注射等量的柠檬酸盐缓冲液)、单次大剂量组10只(150 mg/kg单次腹腔注射)、多次小剂量组10只(40 mg/kg连续注射5 d)。末次注射后,每天记录饮水量,且于注射后第3、7、14、28天检测随机血糖,在注射STZ后4、10周各处死一半的小鼠,处死前分别测量小鼠体重和随机血糖,并记录小鼠成模后第2、4、10周24 h尿量;眼球取血测定血肌酐,血尿素氮;以及取肾脏组织作肾脏病理。结果与单次大剂量组相比,多次小剂量组成模率高,死亡率低。单次大剂量组、多次小剂量组分别与阴性对照组相比,10周时24 h尿蛋白值均差异有统计学意义(P〈0.05)。4周小鼠肾组织光镜无明显变化;10周出现肾小球肥大,系膜增生等。结论多次小剂量注射STZ(40 mg/kg,连续注射5 d)是合理的诱导糖尿病小鼠发生肾病的方法。 展开更多
关键词 链脲佐菌素 糖尿病肾病 不同剂量 昆明小鼠
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细胞DNA定量分析技术在尿路上皮癌诊断中的应用价值 预览 被引量:3
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作者 苏杰 陶伟 +2 位作者 张培 梁朝朝 李俊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第5期750-753,共4页
目的:探讨细胞DNA定量分析技术(DNA-ICM)在尿路上皮癌诊断中的应用价值。方法:收集162例尿液标本,其中92例来自尿路上皮癌患者,70例来自良性泌尿系统疾病患者,分别采用DNA-ICM和液基细胞学(LBC)两种方法进行检查,并将两种结果对... 目的:探讨细胞DNA定量分析技术(DNA-ICM)在尿路上皮癌诊断中的应用价值。方法:收集162例尿液标本,其中92例来自尿路上皮癌患者,70例来自良性泌尿系统疾病患者,分别采用DNA-ICM和液基细胞学(LBC)两种方法进行检查,并将两种结果对比。结果:细胞DNA-ICM在尿路上皮癌诊断中的敏感度为65.2%、特异度为100%,LBC分别为27.2%、98.6%,DNA-ICM检查的敏感度高于LBC,差异有统计学意义(P〈0.01)。上尿路上皮细胞癌患者尿液标本中DNA-ICM敏感度为77.1%,高于膀胱尿路上皮细胞癌患者尿液标本的57.9%,但两者比较差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:细胞DNA-ICM在诊断尿路上皮癌方面有较大应用价值,可提高尿脱落细胞学的阳性检出率,是尿路上皮癌诊断和随访的有效检查方法。 展开更多
关键词 尿路上皮癌 DNA倍体 DNA定量分析系统 液基细胞学
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甲状旁腺切除加自体移植术对尿毒症患者近期临床症状及钙磷代谢的影响(附20例临床分析) 预览 被引量:5
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作者 左江乐 卢文 +4 位作者 张敬杰 吴开乐 钱浩 张培 吴永贵 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1288-1292,共5页
目的观察甲状旁腺切除加自体移植(parathyroidectomy with autotransplantation,PTX+AT)对尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)患者近期临床症状及各项生化指标的影响。方法回顾性分析20例SHPT手... 目的观察甲状旁腺切除加自体移植(parathyroidectomy with autotransplantation,PTX+AT)对尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进症(secondary hyperparathyroidism,SHPT)患者近期临床症状及各项生化指标的影响。方法回顾性分析20例SHPT手术前和手术后短期内的临床症状、血清全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,i PTH)、血钙、血磷等变化以及术后近期疗效及并发症的发生情况。结果 20例尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进症患者,术前i PTH为(1648±797)pg/m L,甲状旁腺切除后,术后1w i PTH为(125±263)pg/m L,P〈0.01,差异具有统计学意义。术前血钙(2.58±0.25)mmol/L、血磷(2.30±0.73)mmol/L;术后第1天血钙(1.97±0.46)mmol/L、血磷(1.92±0.81)mmol/L,术后1 w血钙(1.99±0.46)mmol/L、血磷(1.38±0.66)mmol/L。术后1w 15例患者(占总失眠人数100%)失眠症状,13例患者(占总皮肤瘙痒人数80%)皮肤瘙痒症状、3例患者(占不安腿人数100%)不安腿症状明显好转,12例患者(占骨关节痛患者80%)骨关节疼痛症状、5例患者(占肌无力患者60%)肌无力症状有所改善。术后5位患者出现抽搐,4例患者出现声音嘶哑,经相应处理后,患者症状明显改善。结论甲状旁腺切除在短期内显著改善尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进患者的骨关节痛、皮肤瘙痒、肌无力、失眠等临床症状,同时缓解高钙,高磷血症。 展开更多
关键词 尿毒症 甲状旁腺功能亢进 甲状旁腺切除 钙磷代谢
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检测血清抗PLA2受体抗体在特发性膜性肾病中的意义 预览 被引量:3
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作者 齐向明 江肖 +2 位作者 汪燕 朱启金 徐兴欣 《安徽医学》 2016年第8期1005-1007,共3页
目的探讨特发性膜性肾病(IMN)患者血清抗PLA2受体(PLA2R)抗体与尿蛋白谱的变化情况及临床意义。方法回顾性分析2015年11月至2016年5月安徽医科大学第一附属医院肾内科行肾脏活检并确诊IMN患者60例的临床资料,比较血清抗PLA2R抗体阳性与... 目的探讨特发性膜性肾病(IMN)患者血清抗PLA2受体(PLA2R)抗体与尿蛋白谱的变化情况及临床意义。方法回顾性分析2015年11月至2016年5月安徽医科大学第一附属医院肾内科行肾脏活检并确诊IMN患者60例的临床资料,比较血清抗PLA2R抗体阳性与阴性患者尿蛋白谱的差异。结果血清抗PLA2R抗体阳性组患者的血清清蛋白低于阴性组(P<0.05),24 h尿蛋白定量高于阴性组(P<0.05)。血清抗PLA2R抗体阳性组患者尿蛋白谱中尿白蛋白(A1b)/肌酐、总蛋白/肌酐和转铁蛋白/肌酐值均明显高于阴性组(P<0.05);尿视黄醇结合蛋白(RBP)/肌酐、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)/肌酐、Ig G/肌酐、α1微球蛋白(α1-MG)/肌酐、β2微球蛋白(β2-MG)/肌酐、胱抑素C/肌酐和纤维蛋白原降解产物(FDP)/肌酐与阴性组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IMN患者24 h尿蛋白定量分别与尿A1b/肌酐(r=0.43,P=0.001)、尿总蛋白/肌酐(r=0.56,P=0.001)及尿转铁蛋白(TRF)/肌酐(r=0.46,P=0.00)呈正相关。结论 IMN患者血清抗PLA2R抗体阳性与阴性的尿蛋白谱存在差异,阳性患者的尿蛋白含量更高。 展开更多
关键词 特发性膜性肾病 血清抗磷脂酶A2受体抗体 尿蛋白谱
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TLR4信号通路在高糖诱导骨髓来源巨噬细胞激活中的作用 预览 被引量:2
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作者 张婷敏 邵云侠 +2 位作者 徐兴欣 王坤 吴永贵 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第10期1396-1402,共7页
目的通过研究高糖对骨髓来源巨噬细胞(BMDM)Toll受体4(TLR4)表达及其下游信号通路的影响,初步探讨高糖通过TLR4信号通路促进巨噬细胞分泌炎症因子的机制。方法分离获取C57BL/6J及B10Sc NNju(TLR4基因敲除小鼠)BMDM,流式细胞仪检... 目的通过研究高糖对骨髓来源巨噬细胞(BMDM)Toll受体4(TLR4)表达及其下游信号通路的影响,初步探讨高糖通过TLR4信号通路促进巨噬细胞分泌炎症因子的机制。方法分离获取C57BL/6J及B10Sc NNju(TLR4基因敲除小鼠)BMDM,流式细胞仪检测其纯度;选取不同浓度的高糖及甘露醇,在不同时间点刺激BMDM;后将BMDM分为4组:正常糖浓度(LG)组、高糖刺激(HG)组、TLR4基因敲除(TLR4-/-)组、TLR4基因敲除BMDM高糖刺激(TLR4-/-+HG)组。采用流式细胞术观察BMDM M1表型,细胞免疫荧光法观察BMDM TLR4与诱生型一氧化氮合酶(i NOS)共表达,实时定量PCR法检测各组细胞中促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素1β(IL-1β)及iNOS的mRNA表达,Western blot法检测各组总蛋白中TLR4、髓样分化因子88(My D88)、TIR结构域衔接蛋白(Trif)、磷酸化白介素受体相关激酶-1(p-IRAK-1)、干扰素调节因子3(IRF3)、磷酸化(p)-IRF3、核因子κB(NF-κB)p65、NF-κB p-p65、i NOS蛋白的表达,ELISA法测定细胞上清液中促炎因子TNF-α、MCP-1、IL-1β的表达。结果与LG组比较,高糖可使M1型巨噬细胞百分比增加;TNF-α、MCP-1、IL-1β及i NOS的mRNA水平上调;TLR4、My D88、Trif、p-IRAK-1、p-IRF3、IRF3、NF-κB p65、NF-κB p-p65、iNOS蛋白表达水平升高;细胞培养基中分泌的TNF-α、MCP-1、IL-1β水平升高。TLR4基因敲除可消除高糖导致的巨噬细胞激活效应。结论高糖可诱导BMDM向M1型极化;TLR4基因敲除可抑制高糖诱导的巨噬细胞向M1活化及炎症因子的产生。 展开更多
关键词 骨髓来源巨噬细胞 Toll受体4 高糖 炎症
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褪黑素对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响 预览 被引量:1
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作者 邢蓓蓓 朱启金 +2 位作者 齐向明 徐兴欣 吴永贵 《临床肾脏病杂志》 2016年第4期240-245,共6页
【摘要】目的观察褪黑素(melatonin,MT)对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响。方法将38只雄性SD大鼠分为对照组(6只)、腹膜纤维化模型组(8只)、模型+低剂量MT(5mg·kg^-1·d^-1)腹腔给药组(8只)、模型+中剂量MT... 【摘要】目的观察褪黑素(melatonin,MT)对大鼠腹膜透析相关性腹膜纤维化的影响。方法将38只雄性SD大鼠分为对照组(6只)、腹膜纤维化模型组(8只)、模型+低剂量MT(5mg·kg^-1·d^-1)腹腔给药组(8只)、模型+中剂量MT(10mg·kg^-1·d^-1)腹腔给药组(8只)、模型+高剂量MT(20mg·kg^-1·d^-1)腹腔给药组(8只)。腹腔注射4.25%腹膜透析液100ml·kg^-1·d^-1建立腹膜纤维化大鼠模型。实验第28天行4h腹膜平衡实验(peritoneal equilibration test,PET),量取超滤量(ultra-filtration,UF),检测腹透液尿素氮浓度(dialysate urea nitrogen concentration,D)、血浆尿素氮浓度(plasma urea nitrogen concentration,Purea)、初始腹膜透析液葡萄糖浓度(D0)、4h后透出液葡萄糖浓度(D4),并计算D/Purea、D4/D0。取大鼠壁层腹膜组织行HE和Masson染色,采用免疫组化方法检测转化生长因子β1(transfotruing growth factor β1,TGF-β1),胶原Ⅰ(collagen Ⅰ,Col-Ⅰ)和Q平滑肌肌动蛋白(msmooth muscleactin,a-SMA)表达。结果4hPET显示模型组与对照组相比,UF和D4/D0明显减少(P〈0.05),D/Purea明显增加(P〈0.05);MT各给药组与模型组比较,UF和D4/DO明显增加(P〈0.05),D/Purea明显减少(P〈0.05);HE和Masson染色显示对照组腹膜菲薄,间皮细胞连接紧密,模型组腹膜明显增厚,部分可见间皮细胞缺失,间皮下可见胶原沉积,MT各给药组上述腹膜病理改变较模型组明显减轻;免疫组化显示模型组TGF-β1、Col-I、rSMA表达明显高于对照组(P〈0.05),MT各给药组表达明显低于模型组(P〈0.05)。结论MT能通过改善腹膜的结构和功能来发挥其对抗大鼠腹膜纤维化的作用并能抑制TGF-β1、Col-Ⅰ和a-SMA表达。 展开更多
关键词 褪黑素 腹膜纤维化 转化生长因子B1 胶原I Α平滑肌肌动蛋白
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