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催乳素及其受体在右玉边鸡卵巢中的表达及与就巢性的相关性研究 认领
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作者 张俊珍 李彩娥 +3 位作者 张蒙 苗志强 李建慧 姬凯元 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期51-55,共5页
为揭示催乳素(PRL)和其受体(PRLR)与右玉边鸡就巢性的相关性,本研究采用免疫组织化学、免疫印迹分析了PRL和PRLR在不同日龄的鸡卵巢中的分布与表达水平,采用ELISA法对不同产蛋水平的鸡血清中PRL含量进行分析。结果表明:PRL和PRLR在卵巢... 为揭示催乳素(PRL)和其受体(PRLR)与右玉边鸡就巢性的相关性,本研究采用免疫组织化学、免疫印迹分析了PRL和PRLR在不同日龄的鸡卵巢中的分布与表达水平,采用ELISA法对不同产蛋水平的鸡血清中PRL含量进行分析。结果表明:PRL和PRLR在卵巢发育期(70日龄)的表达量较低,开产期(165日龄)表达量明显升高,产蛋高峰期(220日龄)表达量下降,在就巢期(330日龄)表达量又上升,且PRL和PRLR在不同日龄卵巢的颗粒细胞和卵泡腔中的免疫阳性物强弱与表达量相一致;PRL在就巢期右玉边鸡血清中含量显著高于产蛋高峰期。综上,PRL和PRLR在产蛋前可以促进卵泡发育,但到产蛋后抑制卵泡发育,促进就巢。由此可见,ELISA检测PRL可以作为鸡产蛋水平监测手段。 展开更多
关键词 PRL PRLR 就巢性 右玉边鸡 颗粒细胞 卵泡
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不同有机肥对采煤塌陷区土壤氮素矿化动态特征研究 认领
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作者 张若扬 郝鲜俊 +4 位作者 韩阳 吕鉴于 高文俊 薛玉晨 张博凯 《水土保持学报》 CSCD 北大核心 2020年第2期188-194,共7页
为揭示不同有机肥对煤矿复垦土壤氮素矿化特性的影响,以山西省孝义市水峪煤矿采煤塌陷复垦土壤为研究对象,采用室内好气培养法,研究在40%含水量和30℃培养条件下,施用3种有机肥(鸡粪、猪粪、牛粪)后在0~161天的氮素矿化动态特征,以明确... 为揭示不同有机肥对煤矿复垦土壤氮素矿化特性的影响,以山西省孝义市水峪煤矿采煤塌陷复垦土壤为研究对象,采用室内好气培养法,研究在40%含水量和30℃培养条件下,施用3种有机肥(鸡粪、猪粪、牛粪)后在0~161天的氮素矿化动态特征,以明确不同有机肥对该矿区复垦土壤氮素矿化特征,从而预估不同有机肥的供氮特性,为合理施用有机肥进行低产农田的培肥改造提供科学依据。结果表明:(1)各处理0~14天铵态氮含量均随培养时间的延长迅速下降,与培养时间呈极显著负相关关系(P<0.01),14~161天土壤铵态氮含量维持在较低水平,培养结束时,各处理铵态氮含量均低于1.31mg/kg。(2)各处理土壤硝态氮含量、累积量及矿质氮累积量变化均呈近似的“S”形曲线递增,表现为0~56天缓慢增加,56~84天迅速增加,84天至培养结束(161天)其含量基本不变。培养结束时不同处理间硝态氮含量、累积量及矿质氮累积量整体上均表现为鸡粪>猪粪>牛粪>空白,且鸡粪较猪粪和牛粪处理间存在显著差异,猪粪和牛粪较空白处理间存在显著差异(P<0.05)。(3)不同施肥处理出现氮素净矿化的时间点不同,其中鸡粪处理在第14天时最早出现净矿化现象,而猪粪和牛粪在培养28天后才出现明显的氮素净矿化。(4)不同施肥处理在培养的不同阶段硝态氮和矿质氮累积速率不同,但整体趋势一致,表现为培养0~84天各处理土壤累积矿化波动较大,56~84天达到峰值,培养84~161天各处理矿化速率平稳下降。总体来看,有机肥的施入能有效促进煤矿复垦土壤氮素矿化,从而提高土壤氮素有效性。其中,施鸡粪较猪粪和牛粪对提高矿区复垦土壤有效氮效果更好。4种处理的氮素矿化效果总体表现为鸡粪>猪粪>牛粪>空白。 展开更多
关键词 有机肥 土壤氮素矿化 采煤塌陷区
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多因素法构建肉鸡腹水综合征实验模型及其对肺组织血管内皮舒缩活性因子的影响 认领
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作者 郭宇荣 崔亮 +7 位作者 苏晓菲 王卓 朱昱波 李佩岐 张剑 孙涵燕 员世宇 段智变 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第5期1342-1351,共10页
试验旨在研究多因素法构建肉鸡腹水综合征(AS)实验模型及其对肺组织血管内皮舒缩活性因子的影响。将158羽健康罗斯肉鸡随机分为空白组、低温模型组和多因素模型组,于25、35、45日龄随机取样,观察临床症状、剖检变化及肺组织病理变化,测... 试验旨在研究多因素法构建肉鸡腹水综合征(AS)实验模型及其对肺组织血管内皮舒缩活性因子的影响。将158羽健康罗斯肉鸡随机分为空白组、低温模型组和多因素模型组,于25、35、45日龄随机取样,观察临床症状、剖检变化及肺组织病理变化,测定体重、发病率、腹水心脏指数(AHI),检测肺组织一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮合酶(NOS)变化,并以实时荧光定量PCR法检测肺组织内皮素A型受体(ETAR)及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达量。结果显示,各日龄低温模型组和多因素模型组肉鸡AHI均极显著高于空白组(P<0.01),各日龄多因素模型组肉鸡AHI均显著高于低温模型组(P<0.05);35、45日龄低温模型组和各日龄多因素模型组肉鸡体重显著或极显著低于空白组(P<0.05,P<0.01);35、45日龄低温模型组和各日龄多因素模型组AS发病率均极显著高于空白组(P<0.01),25日龄多因素模型组AS发病率极显著高于低温模型组(P<0.01);35日龄AS肉鸡肺组织结构损伤,内皮细胞脱落、平滑肌排列紊乱;与空白组相比,35、45日龄低温模型组和多因素模型组肺组织NO与ET-1含量、iNOS活性、ETAR及VEGF mRNA表达量均显著或极显著升高(P<0.05,P<0.01),肺组织NO/ET-1、cNOS与TNOS活性均显著或极显著降低(P<0.05,P<0.01)。表明低温、高钠、高能饲料多因素法能够成功构建AS实验模型,多因素造模法较低温造模法更能反映疾病因素的多样性;肺组织血管内皮舒缩活性因子表达紊乱参与了AS的发生发展。 展开更多
关键词 多因素法 腹水综合征(AS) 肺组织 血管内皮舒缩活性因子
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鼠伤寒沙门菌yibT基因缺失株的构建及其生物学特性分析 认领
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作者 王涛 赵威 +3 位作者 裴芳樱 岳敏 王文魁 齐永华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期338-345,共8页
为了探讨yibT基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性的影响,采用λ-red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌CVCC541的yibT基因缺失株CVCC541ΔyibT,同时利用表达质粒pET28a构建yibT缺失株的基因回补株CVCC541ΔyibT/pyibT,研究野生株、缺失株、回补株... 为了探讨yibT基因对鼠伤寒沙门菌生物学特性的影响,采用λ-red同源重组技术构建鼠伤寒沙门菌CVCC541的yibT基因缺失株CVCC541ΔyibT,同时利用表达质粒pET28a构建yibT缺失株的基因回补株CVCC541ΔyibT/pyibT,研究野生株、缺失株、回补株之间的生长特性、生化特性、遗传稳定性、生物膜形成和应激环境抵抗力等生物学特性。结果表明,本研究成功构建了yibT基因缺失株CVCC541ΔyibT及其回补株CVCC541ΔyibT/pyibT,yibT基因的缺失不影响细菌的生化特性,该缺失株具有良好的遗传稳定性,但其生长特性较野生株及其回补株显著减缓,生物膜形成能力相较于野生株及其回补株有所减弱,缺失株在热应激环境以及正丁醇压力下表现出更强的耐受力。综上所述,yibT基因的缺失会影响鼠伤寒沙门菌的生长特性、生物膜形成、应激环境抵抗力和细菌形态等生物学特性,并且yibT基因可能影响鼠伤寒沙门菌菌膜的流动性。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌CVCC541 yibT基因 流动性 环境应激 耐受性
不同有机肥对矿区复垦土壤磷素矿化特征研究 认领
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作者 吕鉴于 高文俊 +3 位作者 郝鲜俊 张若扬 张博凯 薛玉晨 《灌溉排水学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期59-67,共9页
【目的】探究不同有机肥对采煤塌陷复垦土壤磷素的矿化特征。【方法】采用室内培养试验,以不施肥处理为空白处理(CK),研究了施用3种有机肥(鸡粪、猪粪、牛粪)对矿区复垦土壤速效磷的动态变化,并综合其矿化过程中的磷酸酶活性及磷转化强... 【目的】探究不同有机肥对采煤塌陷复垦土壤磷素的矿化特征。【方法】采用室内培养试验,以不施肥处理为空白处理(CK),研究了施用3种有机肥(鸡粪、猪粪、牛粪)对矿区复垦土壤速效磷的动态变化,并综合其矿化过程中的磷酸酶活性及磷转化强度,分析了不同有机肥对矿区复垦土壤磷生物有效性的影响。【结果】①在整个室内恒温培养过程中,各施肥处理的速效磷量均随培养时间延长呈下降趋势,不同培养时期速效磷量大致呈现出:鸡粪>猪粪≥牛粪>化肥>CK。培养结束时(105d),鸡粪、猪粪和牛粪处理较化肥处理显著提高了土壤速效磷量(18.56%~37.09%);鸡粪处理较猪粪和牛粪处理速效磷量显著提高了11.93%~15.62%,而猪粪和牛粪处理间差异不显著;②在整个室内恒温培养过程中,拟二阶动力学模型能较好地反映各施肥处理速效磷释放过程,其次为Elovich模型和幂函数模型,而粒内扩散模型拟合效果较差。③在整个培养时期施有机肥处理的磷酸酶活性显著高于化肥处理,提高幅度为39.14%~120.70%。④培养前期(0~14 d),猪粪处理与化肥处理对土壤有机磷转化强度影响较大,二者间差异不显著,且猪粪处理较牛粪、鸡粪处理能显著提高有机磷转化强度,分别提高了41.51%和86.52%;在培养中后期(42~105d)各施肥处理的有机磷转化强度差异均不显著。【结论】施用有机肥能促进矿区复垦土壤磷素矿化,其中鸡粪较猪粪和牛粪对提高土壤有效磷量作用更为明显。 展开更多
关键词 有机肥 磷素矿化 矿区复垦 土壤 化肥
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中华蜜蜂离子型受体AcerIR76b、AcerIR75f.1生物信息学和差异表达分析 认领
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作者 冯宇佳 杜亚丽 +5 位作者 赵慧婷 马卫华 刘晋佳 马秀梅 张宇昊 姜玉锁 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期513-521,共9页
【目的】从中华蜜蜂Apis cerana cerana触角转录组测序结果中筛选获得中华蜜蜂离子型受体IR76b、IR75f.1的基因序列,对其进行蛋白结构预测和表达谱分析,为该基因的功能研究提供依据。【方法】利用多种生物信息学软件对其编码蛋白的理化... 【目的】从中华蜜蜂Apis cerana cerana触角转录组测序结果中筛选获得中华蜜蜂离子型受体IR76b、IR75f.1的基因序列,对其进行蛋白结构预测和表达谱分析,为该基因的功能研究提供依据。【方法】利用多种生物信息学软件对其编码蛋白的理化特性进行分析;采用qRT-PCR技术对AcerIR76b、AcerIR75f.1在中蜂1日龄工蜂和采集蜂、1日龄雄蜂和性成熟雄蜂各部位(触角、头、胸、腹和足)中mRNA的表达情况进行比较分析。【结果】成功获得了AcerIR76b、AcerIR75f.1的完整开放阅读框ORF序列,全长分别为1635 bp和1686 bp,分别编码545、562个氨基酸。预测AcerIR76b分子量为63.09 ku,AcerIR75f.1分子量为62.28 ku,它们均具有3个跨膜结构。qRT-PCR结果显示,AcerIR76b在1日龄工蜂和采集蜂、1日龄雄蜂和性成熟雄蜂的各部位中均有表达,但在触角中的表达量极显著的高于其它部位(P<0.01);AcerIR75f.1在1日龄工蜂和采集蜂中,均在触角中高表达,而在1日龄雄蜂和性成熟雄蜂中,均在足部高表达。【结论】AcerIR76b和AcerIR75f.1的编码产物均具有昆虫离子型受体的典型结构特征,2个离子型受体在中华蜜蜂工蜂和雄蜂各个部位均有表达,推测其不仅参与气味分子的识别过程,在味觉感知中也同样发挥着一定作用。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 离子型受体 IR76b IR75f.1 生物信息学分析 MRNA表达
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中华蜜蜂AcerOr1基因昆虫表达载体pIB/V5-His的构建及功能分析 认领
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作者 郭丽娜 赵慧婷 +2 位作者 任有蛇 徐兵 姜玉锁 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期359-365,共7页
【目的】构建能在Sf9昆虫细胞中稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr1的重组表达载体,并对其功能进行分析。【方法】将目的基因AcerOr1和昆虫表达载体pIB/V5-His载体用Bam HI和EcoRI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含目的基因AcerOr1... 【目的】构建能在Sf9昆虫细胞中稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr1的重组表达载体,并对其功能进行分析。【方法】将目的基因AcerOr1和昆虫表达载体pIB/V5-His载体用Bam HI和EcoRI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含目的基因AcerOr1的表达载体pIB/V5-AcerOr1。将重组表达载体用脂质体转染的方法转染至Sf9细胞中,利用免疫荧光和Western blot检测AcerOr1蛋白的亚细胞定位和表达情况;利用全波长多功能酶标仪检测该受体对4种花香物质刺激后细胞内Ca2+浓度的变化。【结果】成功构建重组表达载体pIB/V5-AcerOr1并建立稳定转染细胞系;Western blot结果证明重组表达载体能在昆虫细胞Sf9中表达;免疫荧光显示重组表达载体在Sf9细胞膜上表达,与预测结果一致。转染pIB/V5-AcerOr1的细胞受花香物质月桂酸(Lauric acid)、亚麻酸(Linolenic acid)、α-松油醇(α-Terpineol)、十一酸(Undecanoic acid)刺激时,均能引起细胞内Ca2+浓度升高。【结论】构建的重组表达载体pIB/V5-AcerOr1能在Sf9细胞中稳定表达,并具有对气味分子的识别功能。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 气味受体AcerOr1 pIB/V5-His 表达 亚细胞定位 功能分析
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中华蜜蜂气味受体AcerOr1基因启动子克隆及序列分析 认领
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作者 郭丽娜 赵慧婷 +2 位作者 任有蛇 徐兵 姜玉锁 《山西农业科学》 2020年第4期623-626,共4页
为获取中华蜜蜂气味受体AcerOr1基因启动子并分析调控元件,以前期获得的中华蜜蜂AcerOr1基因的cDNA序列为模板,设计特异性引物并采用染色体步移的方法,从中华蜜蜂基因组中克隆到AcerOr1基因部分序列及其5'侧翼区,并分析其调控元件... 为获取中华蜜蜂气味受体AcerOr1基因启动子并分析调控元件,以前期获得的中华蜜蜂AcerOr1基因的cDNA序列为模板,设计特异性引物并采用染色体步移的方法,从中华蜜蜂基因组中克隆到AcerOr1基因部分序列及其5'侧翼区,并分析其调控元件组成。生物信息学分析结果表明,克隆产物长1831 bp,3′侧翼序列与GenBank中AcerOr1基因序列的5'端序列同源性为92%;在1100~1139 bp处存在基础启动子,其序列为:5′-ATTATATAAATATTGCTCGTGGCAAAATGATTCATAAGT-3′,转录起始位点可能位于翻译起始密码子ATG上游621 bp处的碱基T,其可能性为0.98。除含有基本启动子元件(TATA-Box、CAAT-Box等)外,还存在与胚胎发育或组织发育相关的元件CF2-II、NIT2、CdxA和与环境应激相关的元件HSF,表明AcerOr1基因在中华蜜蜂体内的转录和表达可能受到胚胎、组织及外界环境的调控。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 染色体步移 AcerOr1基因 调控元件
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中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因最佳干扰片段的筛选 认领
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作者 郭丽娜 赵慧婷 +2 位作者 任有蛇 徐兵 姜玉锁 《山西农业科学》 2020年第6期860-864,共5页
为了筛选出中华蜜蜂气味受体基因AcerOr2最佳干扰效率的序列,以中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因为靶标,分别选取3个片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp),并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后进行RNAi试验,通过... 为了筛选出中华蜜蜂气味受体基因AcerOr2最佳干扰效率的序列,以中华蜜蜂气味受体AcerOr2基因为靶标,分别选取3个片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp),并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后进行RNAi试验,通过qPCR和Western从mRNA水平和蛋白水平检测干扰效率。mRNA结果显示,饲喂3个不同的片段AcerOr2-1(411 bp)、AcerOr2-2(205 bp)和AcerOr2-3(471 bp)对AcerOr2表达量均会产生抑制作用,抑制率分别为69.72%±0.49%、47.26%±0.25%、73.17%±0.97%,抑制率最佳的是471 bp的dsRNA AcerOr2-3。Western Blot结果显示,饲喂3个大小不同的干扰片段后AcerOr2蛋白的表达量均受到显著抑制。试验成功构建AcerOr2基因干扰载体,最终确定471 bp的dsRNA AcerOr2-3为最佳干扰片段,证实其能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达。研究结果可为进一步应用RNAi技术研究该基因的体内外功能奠定基础。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 AcerOr2基因 RNA干扰
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复方黄芪益气口服液对AFB1致鸡肝损伤的保护作用 认领
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作者 严文瑞 梁占学 +2 位作者 王玲芝 侯玲玲 张立伟 《中兽医医药杂志》 2020年第2期18-24,共7页
研究复方黄芪益气口服液对黄曲霉毒素B1(AFB1)致鸡肝损伤的治疗作用。随机将140只鸡分为正常对照组、AFB1模型组、黄芪多糖对照组、复方黄芪益气口服液低剂量组[0.8 mL/(kg·bw)]和复方黄芪益气口服液高剂量组[1.6 mL/(kg·bw)... 研究复方黄芪益气口服液对黄曲霉毒素B1(AFB1)致鸡肝损伤的治疗作用。随机将140只鸡分为正常对照组、AFB1模型组、黄芪多糖对照组、复方黄芪益气口服液低剂量组[0.8 mL/(kg·bw)]和复方黄芪益气口服液高剂量组[1.6 mL/(kg·bw)]、复方黄芪益气口服液对照组,其中,正常对照组和AFB1模型组每组28羽;其余组每组21羽。饲喂AFB1含量为2.8 mg/kg的饲料8 d建立鸡肝损伤模型。分别于9、17、26和33 d采样,采集血清、肝组织标本进行指标检测。结果表明,与AFB1模型组相比,复方黄芪益气口服液能显著改善肝脏组织病变,降低血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量;增加血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)和球蛋白(GLB)含量;提高肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的含量,同时能降低丙二醛(MDA)生成量。复方黄芪益气口服液能增强机体免疫和抗氧化能力,对AFB1造成的雏鸡肝损伤亦有很好的保护和治疗作用。 展开更多
关键词 复方黄芪益气口服液 黄曲霉毒素B1 肝损伤 抗氧化
中华蜜蜂AcerOr2基因昆虫表达载体pIB/V5-His的构建 认领
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作者 郭丽娜 赵慧婷 +2 位作者 任有蛇 徐兵 姜玉锁 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第6期994-999,共6页
为构建能稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr2的重组表达载体,并在Sf9昆虫细胞中表达,将目的基因AcerOr2和昆虫表达载体pIB/V5-His用BamHⅠ和EcoRⅠ做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含目的基因AcerOr2的表达载体pIB/V5-His-AcerOr2。... 为构建能稳定高效表达中华蜜蜂气味受体AcerOr2的重组表达载体,并在Sf9昆虫细胞中表达,将目的基因AcerOr2和昆虫表达载体pIB/V5-His用BamHⅠ和EcoRⅠ做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含目的基因AcerOr2的表达载体pIB/V5-His-AcerOr2。将重组DNA用脂质体转染的方法转染至Sf9细胞中,利用Western blot和免疫荧光检测AcerOr2蛋白的表达和亚细胞定位情况。结果表明,成功构建重组表达载体pIB/V5-His-AcerOr2并建立稳定转染细胞系;Western blot结果证明,重组表达载体能在昆虫细胞Sf9中表达,融合蛋白相对分子质量为56 ku左右;免疫荧光显示,重组表达载体在Sf9细胞膜上表达,与预测结果一致。说明构建的重组表达载体pIB/V5-His-AcerOr2能在Sf9细胞中稳定表达,为进一步研究中华蜜蜂气味受体AcerOr2的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 气味受体AcerOr2 载体构建 亚细胞定位
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食淀粉乳酸菌在青贮饲料中的研究进展 认领
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作者 史悦 许庆方 玉柱 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2020年第1期163-168,共6页
淀粉是青贮原料中重要的营养成分,提高青贮饲料中淀粉的利用率是提升青贮饲料营养价值的有效方法之一。随着饲用微生物菌剂的大力开发,食淀粉乳酸菌(Lactobacillus amylovorus)在青贮中的添加引起广泛关注。青贮饲料接种菌剂可以提高青... 淀粉是青贮原料中重要的营养成分,提高青贮饲料中淀粉的利用率是提升青贮饲料营养价值的有效方法之一。随着饲用微生物菌剂的大力开发,食淀粉乳酸菌(Lactobacillus amylovorus)在青贮中的添加引起广泛关注。青贮饲料接种菌剂可以提高青贮的发酵品质、养分利用率以及保质期。本文对青贮饲料中食淀粉乳酸菌的应用进行了综述,总结了在青贮中接种食淀粉乳杆菌对青贮发酵过程中淀粉含量,微生物组成和有氧稳定性的影响。 展开更多
关键词 食淀粉乳酸菌 青贮饲料 研究进展
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中华蜜蜂气味受体AcerOR57的表达及定位分析 认领
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作者 冯宇佳 杜亚丽 +5 位作者 赵慧婷 马卫华 李新宇 龙登隆 王春梅 姜玉锁 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期707-717,共11页
为研究中华蜜蜂气味受体AcerOR57的表达及定位,利用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测气味受体AcerOR57 mRNA及蛋白在1日龄工蜂和雄蜂、采集蜂及性成熟雄蜂各部位(触角、头、胸、腹和足)的相对表达量;通过免疫组织化学技术检测该... 为研究中华蜜蜂气味受体AcerOR57的表达及定位,利用实时荧光定量PCR和Western blot技术检测气味受体AcerOR57 mRNA及蛋白在1日龄工蜂和雄蜂、采集蜂及性成熟雄蜂各部位(触角、头、胸、腹和足)的相对表达量;通过免疫组织化学技术检测该基因受体蛋白在中华蜜蜂触角中的表达定位。结果表明:AcerOR57转录本在1日龄工蜂和采集蜂,1日龄雄蜂和性成熟雄蜂各部位均有表达,但表达程度不一:在1日龄工蜂、采集蜂的触角和1日龄雄蜂、性成熟雄蜂的头部中高丰度表达,均极显著高于其它部位(P<0.01);Western blot结果显示,AcerOR57受体蛋白在1日龄工蜂和采集蜂触角中的表达量高于其它部位,这与荧光定量PCR结果相一致;但该蛋白在1日龄雄蜂和性成熟雄蜂的触角和头部表达均不明显,与mRNA水平表达结果相反;免疫组化结果显示,AcerOR57在工蜂和雄蜂触角的毛形感器、板形感器和锥形感器中表达。在1日龄工蜂和性成熟雄蜂中,毛形感器所占的比例大于板形感器,说明其主要在毛形感器中表达;在1日龄雄蜂和采集蜂中,板形感器的表达量比毛形感器表达量多,说明其主要在板形感器中表达;除采集蜂外,其它样本中均发现少量锥形感器的表达。推测AcerOR57可能在探测外界气味分子中发挥一定的作用,这为进一步研究气味受体的功能提供了理论依据。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 OR57 蛋白定位 蛋白表达 MRNA表达
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绵羊胚胎成纤维细胞饲养层用于培养人诱导性多能干细胞的效果研究 认领 被引量:1
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作者 张世强 李孟心 +6 位作者 韩高链 郭丽荣 赵迪鹏 李俊玲 郭田燕 杜荣 秦健 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第3期729-735,共7页
试验在体外分离培养1月龄绵羊胚胎成纤维细胞(sheep embryonic fibroblast,SEF),经丝裂霉素C处理后探讨其作为诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)体外培养饲养层的可行性。试验以SNL饲养层细胞为对照,人iPSC(hiPSC... 试验在体外分离培养1月龄绵羊胚胎成纤维细胞(sheep embryonic fibroblast,SEF),经丝裂霉素C处理后探讨其作为诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)体外培养饲养层的可行性。试验以SNL饲养层细胞为对照,人iPSC(hiPSC)为培养对象,通过形态学观察、碱性磷酸酶(AP)染色、以及实时荧光定量PCR和免疫细胞化学对hiPSC标志基因mRNA和蛋白表达的检测,比较了SEF细胞和SNL细胞作为干细胞饲养层的效果。结果表明,在试验期内,与SNL饲养层体外培养的hiPSC相似,SEF饲养层体外培养的hiPSC在形态上呈集落样生长,增殖速度快;AP染色呈蓝紫色,能够维持未分化状态;能正常表达多能性标志基因。两种饲养层细胞培养的hiPSC多能性标志基因c-Myc、Klf4、OCT 4和SOX 2 mRNA的表达以及OCT4、SOX2、SSEA4和TRA-1-60蛋白的表达并无显著差异(P>0.05)。本研究结果初步表明SEF可作为体外培养iPSC的饲养层细胞,为进一步建立可表达促生长因子的基因修饰SEF细胞系奠定了基础。 展开更多
关键词 绵羊胚胎成纤维细胞(SEF) 饲养层 诱导性多能干细胞(iPSC) 多能性
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矿区土接种AMF和根瘤菌对紫花苜蓿及土壤氮磷的影响 认领
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作者 田超 李倩 +2 位作者 许庆方 郝鲜俊 高文俊 《山西农业科学》 2020年第4期580-583,587共5页
以煤矿塌陷区土壤为研究对象,以紫花苜蓿为供试植物,选取摩西球囊霉菌(Gm)和根瘤菌(V)及二者的混合菌剂(Gm+V)为接种处理,以不接种土壤(CK)和自然土(R)为对照,进行温室盆栽试验,通过测定苜蓿植株的氮、磷含量和硝酸还原酶活性以及土壤... 以煤矿塌陷区土壤为研究对象,以紫花苜蓿为供试植物,选取摩西球囊霉菌(Gm)和根瘤菌(V)及二者的混合菌剂(Gm+V)为接种处理,以不接种土壤(CK)和自然土(R)为对照,进行温室盆栽试验,通过测定苜蓿植株的氮、磷含量和硝酸还原酶活性以及土壤的有效氮、有效磷含量和碱性磷酸酶活性,评定苜蓿接种丛枝菌根真菌(AMF)和根瘤菌对煤矿塌陷区土壤的改良效果。结果表明,不同处理下,植株氮和土壤有效氮含量大小均为Gm+V>V>Gm>R>CK;植株磷和土壤有效磷含量大小均为Gm+>Gm>V>CK>R;土壤碱性磷酸酶活性大小为Gm+V>Gm>V>R>CK;苜蓿硝酸还原酶活性大小为Gm+V>Gm>V>R>CK。综上所述,双接种比单接种和未接种处理更能有效改善矿区土壤理化性质,提升矿区土壤肥力,并可促进苜蓿植株对氮、磷营养元素的吸收能力。 展开更多
关键词 矿区土壤 AMF 根瘤菌 紫花苜蓿
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煤矿塌陷区紫花苜蓿与无芒雀麦混播比例对其品质和土壤特性的影响 认领
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作者 姬亚红 张永志 +2 位作者 张艳秋 郝鲜俊 高文俊 《山西农业科学》 2020年第2期213-217,共5页
为了选出适宜煤矿塌陷区复垦的紫花苜蓿和无芒雀麦牧草混播比例,探讨不同混播比例对煤矿塌陷区土壤的改良效果,在山西省孝义市煤矿塌陷区的试验样地播种了7种混播比例的紫花苜蓿和无芒雀麦,研究不同混播比例对牧草粗蛋白、粗脂肪、酸性... 为了选出适宜煤矿塌陷区复垦的紫花苜蓿和无芒雀麦牧草混播比例,探讨不同混播比例对煤矿塌陷区土壤的改良效果,在山西省孝义市煤矿塌陷区的试验样地播种了7种混播比例的紫花苜蓿和无芒雀麦,研究不同混播比例对牧草粗蛋白、粗脂肪、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维以及煤矿塌陷区土壤养分(土壤速效磷、碱解氮、有机质)的影响。结果表明,无芒雀麦粗蛋白、粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维在紫花苜蓿和无芒雀麦5∶5混播比例中各项指标均最优;紫花苜蓿在紫花苜蓿和无芒雀麦6∶4混播比例中粗蛋白、粗脂肪、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维最优;土壤中的速效磷、碱解氮和有机质含量在0~10 cm中均高于其他土层,紫花苜蓿和无芒雀麦6∶4混播比例的各土壤养分最高。 展开更多
关键词 煤矿塌陷区 混播比例 品质 土壤特性
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绵羊c-Myc与EGFP融合蛋白的真核表达及其对细胞增殖的调控作用 认领
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作者 韩高链 郭丽荣 +4 位作者 李孟心 郑腾飞 李俊玲 秦健 杜荣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期965-975,共11页
为了探讨c-Myc基因对细胞增殖及相关基因表达的调控作用,本试验构建了c-Myc-(G4S)3-EGFP融合基因的真核表达载体pc-Myc-EGFP,并利用生物信息学分析了其结构和理化特征。转染后分别通过细胞计数和qRT-PCR检测了其对绵羊胚胎成纤维细胞(sh... 为了探讨c-Myc基因对细胞增殖及相关基因表达的调控作用,本试验构建了c-Myc-(G4S)3-EGFP融合基因的真核表达载体pc-Myc-EGFP,并利用生物信息学分析了其结构和理化特征。转染后分别通过细胞计数和qRT-PCR检测了其对绵羊胚胎成纤维细胞(sheep embryonic fibroblasts,SEF)增殖及相关基因表达的影响,并利用启动子分析软件解析了相应的表达调控机制。酶切鉴定和测序结果表明,载体构建成功。生物信息学分析表明,绵羊c-Myc蛋白主要定位于细胞核,含有螺旋环螺旋(helix-loop-helix,HLH)结构域,其分子量为48474.78 u。融合蛋白c-Myc-(G4S)3-EGFP有较强的亲水性,且含有31个磷酸化位点。因(G4S)3有较高的灵活度(9.8485),两侧的c-Myc和EGFP都保持各自的空间构象且互不干扰。进一步的细胞试验结果表明,重组质粒pc-Myc-EGFP在SEF中能够表达。过表达c-Myc促进了SEF的增殖,使cyclin D2、Cdk4、Cdk6、cyclin E1、cyclin A2、cdc25A mRNA的表达水平分别升高至5.20、3.10、6.54、6.52、23.37和8.22倍(P<0.01),E2F1 mRNA的表达升高至1.83倍(P<0.05)。启动子分析结果表明,各基因的5′调控区存在c-Myc和E2F1的结合元件。综上所述,绵羊c-Myc通过上调细胞周期相关基因的表达促进SEF细胞增殖,c-Myc的作用机制可能是通过直接作用于靶基因5′调控区的E-box元件,也可能是通过其他转录因子(如E2F1)的间接调控作用而实现。 展开更多
关键词 绵羊 C-MYC基因 EGFP 真核表达 生物信息学 细胞周期相关基因 调控元件
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灭除甘肃臭草对不同放牧方式亚高山草地植物群落和土壤肥力的影响 认领
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作者 陈晓鹏 李飞 +4 位作者 白彦福 潘剑玲 刘志云 孙涛 尚占环 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期70-76,共7页
为探究放牧方式对毒杂草型退化草地恢复效果的影响,在祁连山北坡选取甘肃臭草型退化草地,喷施臭草利宁后,分别以轮牧和自由放牧两种方式进行利用,8a后对草地植物群落和土壤肥力特征进行调查分析。结果如下:轮牧草地甘肃臭草消失,自由放... 为探究放牧方式对毒杂草型退化草地恢复效果的影响,在祁连山北坡选取甘肃臭草型退化草地,喷施臭草利宁后,分别以轮牧和自由放牧两种方式进行利用,8a后对草地植物群落和土壤肥力特征进行调查分析。结果如下:轮牧草地甘肃臭草消失,自由放牧草地甘肃臭草再生,但与对照相比重要值显著降低;灭除甘肃臭草后轮牧草地和自由放牧草地植物群落Shannon-Winner多样性指数和Margalef丰富度指数显著提高,Simpson优势度指数显著降低;灭除甘肃臭草后,轮牧草地0~30cm土壤pH显著降低,土壤水分、有机碳、全氮和有效磷含量显著升高;但是,自由放牧草地0~30cm土壤pH无显著变化,土壤水分、有机碳和全氮含量,以及0~20cm土壤有效磷含量显著降低。因此,臭草利宁对甘肃臭草斑块的扩张具有明显遏制作用,化学灭除甘肃臭草与轮牧方式相结合,既能增加可食牧草比例,又有利于土壤水分、养分含量的提高,是治理甘肃臭草型退化草地的有效方式。 展开更多
关键词 甘肃臭草 亚高山草地 化学除草 放牧方式
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丛枝菌根真菌对采煤塌陷复垦土壤磷形态和玉米吸磷量的影响 认领
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作者 吕鉴于 高文俊 +4 位作者 牛群 郝鲜俊 张铠珏 张杰 洪坚平 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期81-87,共7页
丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza,AM)真菌用于退化农林生态系统的生物修复研究是当今生态及环境科学领域的热点问题.许多研究表明AM真菌促进植物对土壤磷的吸收利用,为了解不同的AM真菌对土壤磷形态及其转化规律的影响,通过盆栽试验以... 丛枝菌根(Arbuscular mycorrhiza,AM)真菌用于退化农林生态系统的生物修复研究是当今生态及环境科学领域的热点问题.许多研究表明AM真菌促进植物对土壤磷的吸收利用,为了解不同的AM真菌对土壤磷形态及其转化规律的影响,通过盆栽试验以不接种处理为对照,分别接种幼套近明球囊霉(Claroideoglomus etunicatum,Ce)、摩西管柄囊霉(Funneliformis mosseae,Mo)、根内根孢囊霉(Rhizophagus intraradices,Ri)3种AM真菌,通过连续种植两茬玉米(2015-2016年)后测定AM真菌侵染率、玉米磷素吸收和土壤磷素形态的变化.结果表明:(1)接种3种AM真菌均成功侵染玉米根系,两茬玉米根系AM真菌侵染率顺序均为Ce≥Mo≥Ri,第二茬侵染率(38.3%-68.8%)较第一茬(14.5%-32.5%)有所提高;(2)随着AM真菌的侵染,接种处理显著提高了玉米磷素吸收,提高幅度达25.5%-82.0%;(3)接种3种AM真菌均显著提高了土壤活性态无机磷(H2O-Pi、NaHCO3-Pi)和中等活性无机磷(NaOH-Pi)含量;而土壤中度稳定态磷(HCl-P)和稳定态磷(Residue-P)含量不受影响;接种Mo和Ce对土壤NaHCO3-Pi含量提高最显著,分别提高了141.02%和88.47%,其次为Ri(43.12%);(4)接种Mo和Ri显著提高了土壤中等活性态无机磷(NaOH-Pi)的含量,分别比CK提高了36.15%和18.82%.总之,接种不同AM真菌均能提高根系侵染率、磷素吸收以及促进土壤磷素活性态、中等活性态无机磷(H2O-Pi、NaHCO3-Pi、NaOH-Pi)的转化,提高了土壤磷素的生物有效性,其中接种Ce和Mo能够更好地促进土壤中的磷素向植物可供利用的形态转化,提高植株吸磷量,是适合该矿区土壤的经济高效菌种. 展开更多
关键词 丛枝菌根真菌 采煤塌陷复垦土壤 Hedley磷分级 磷素有效性
饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭产蛋性能、蛋品质、血浆生化指标及血浆、蛋黄、蛋清中核黄素含量的影响 认领
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作者 赵睿 张博 +4 位作者 夏芳 唐静 侯水生 吕丽华 冯焱 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期2889-2895,共7页
本试验旨在研究饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭产蛋性能、蛋品质、血浆生化指标及血浆、蛋黄、蛋清中核黄素含量的影响。采用单因子完全随机试验设计,选取80只40周龄产蛋期北京鸭母鸭,随机分为5个组,每组8个重复,每个重复2只鸭。各组分... 本试验旨在研究饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭产蛋性能、蛋品质、血浆生化指标及血浆、蛋黄、蛋清中核黄素含量的影响。采用单因子完全随机试验设计,选取80只40周龄产蛋期北京鸭母鸭,随机分为5个组,每组8个重复,每个重复2只鸭。各组分别饲喂核黄素水平为1.48、3.98、6.48、11.48和16.48 mg/kg的试验饲粮。试验期7周。结果显示:1)饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭的体重、产蛋率、蛋重均无显著影响(P>0.05)。2)饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭的蛋壳强度、蛋黄颜色、哈氏单位、蛋黄重及蛋黄比例均无显著影响(P>0.05)。3)饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭的血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性及总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量均无显著影响(P>0.05)。4)饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭血浆、蛋黄、蛋清中核黄素含量均有显著影响(P<0.05)。随着饲粮核黄素水平提高,各组血浆、蛋黄和蛋清中核黄素含量均呈上升趋势,当饲粮核黄素水平提高至11.48 mg/kg时,血浆、蛋黄和蛋清核黄素含量均达到稳定。由此可见,饲粮核黄素水平对产蛋期北京鸭产蛋性能、蛋品质和血浆生化指标均无显著影响,但对血浆、蛋黄和蛋清中核黄素的含量有提高作用。分别以血浆、蛋黄和蛋清中核黄素含量作为评价指标,采用折线模型估测产蛋期北京鸭核黄素的需要量为6.91、5.04和8.02 mg/kg。 展开更多
关键词 核黄素 维生素B2 北京鸭 产蛋性能 蛋品质 血浆生化指标
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