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猪细小病毒7型广西分离株全基因组序列分析 认领
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作者 曹亮 孙文超 +7 位作者 汪伟 田明尧 郭丹丹 刘云霞 郑敏 钱爱东 鲁会军 金宁一 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期457-462,共6页
采集2017年中国广西壮族自治区部分地区猪组织样品,并对PPV7的流行情况进行调查分析。采集健康猪和患病猪样品的PPV7感染率分别为66.7%和84%。此外健康猪和患病猪PCV2共感染率分别为51.74%和77.33%。二者的高感染率表明PPV7可能与PCV2... 采集2017年中国广西壮族自治区部分地区猪组织样品,并对PPV7的流行情况进行调查分析。采集健康猪和患病猪样品的PPV7感染率分别为66.7%和84%。此外健康猪和患病猪PCV2共感染率分别为51.74%和77.33%。二者的高感染率表明PPV7可能与PCV2感染存在一定关系。随机选取3份PPV7阳性样品进行主要结构基因测序,并进行系统进化分析。结果显示,3份样品中全基因组序列同源性为94.1%~99.6%,NS1基因核苷酸序列同源性为96.0%~100%。cap基因核苷酸序列同源性为93.9%~97.6%。与PPV7参考株相比,NS1基因同源性为94.2%~97.6%,cap同源性为87.4%~95.0%。在3株PPV7全长基因组,其cap基因分别编码474,470及469个氨基酸,而作为参考的PPV742株则编码469个氨基酸,cap基因序列变异导致cap编码区域氨基酸序列的增加。 展开更多
关键词 猪细小病毒7型 基因插入 流行病学
广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌3种毒力基因检测及tlh基因的蛋白表达 认领
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作者 刘杰 贺晓晨 +7 位作者 黎姗梅 黄艳华 张振豪 黄德生 杨廷雅 吴伟锋 梁静真 黄钧 《河北渔业》 2020年第8期28-32,共5页
采用PCR技术检测分离自广西钦州、北海和防城港3市凡纳滨对虾样品中的67株副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)3种毒力基因tdh、trh和tlh的携带情况,并将tlh基因进行原核表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定分析。结果显示,67株副溶... 采用PCR技术检测分离自广西钦州、北海和防城港3市凡纳滨对虾样品中的67株副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)3种毒力基因tdh、trh和tlh的携带情况,并将tlh基因进行原核表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定分析。结果显示,67株副溶血弧菌均未扩增出tdh和trh基因,而tlh基因检出率为100.0%,所检副溶血弧菌的毒力基因型为tdh-trh-tlh+。成功构建了原核表达质粒pET-28a-tlh,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测得到大小约为53 kDa的产物,与预测值相符。经Western blotting鉴定,该重组表达产物能与抗6×His标签的单克隆抗体发生特异性反应。 展开更多
关键词 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus) tdh基因 trh基因 tlh基因 蛋白表达
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广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌耐药性及其整合子-基因盒检测 认领
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作者 贺晓晨 韩书煜 +6 位作者 黎姗梅 胡大胜 黄德生 吴伟锋 黄钧 梁静真 胡庭俊 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期893-900,共8页
【目的】检测广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌的耐药性和整合子-基因盒携带情况,为凡纳滨对虾副溶血弧菌病的防控及该菌耐药分子机制研究提供基础数据。【方法】采用K-B纸片扩散法测定副溶血弧菌对16种抗菌药物的敏感性;采用PCR检测I、II和... 【目的】检测广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌的耐药性和整合子-基因盒携带情况,为凡纳滨对虾副溶血弧菌病的防控及该菌耐药分子机制研究提供基础数据。【方法】采用K-B纸片扩散法测定副溶血弧菌对16种抗菌药物的敏感性;采用PCR检测I、II和III型整合子及I型整合子可变区基因盒的携带情况,并分析菌株整合子-基因盒携带情况与耐药性的相关性。【结果】104株广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌对16种抗菌药物表现出不同程度的敏感性,其中,对氟苯尼考(FFC)的敏感性最高,敏感率达82.7%;对磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、磺胺二甲嘧啶(SM2)和复方磺胺嘧啶(SD)的耐药性较强,耐药率达93.3%~100.0%。在2013-2018年,广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌共有20种耐药谱,其中优势耐药谱为SD/SM2/SMM/SMD/SXT/RAD。PCR扩增结果表明,I型整合酶int1基因检出率为64.4%,sul1和qacEΔ1基因检出率分别为25.0%和27.9%。int1、sul1和qacEΔ1基因均为阳性的菌株检出率为22.1%。在int1、sul1和qacEΔ1基因均为阳性的菌株中,有6株检出携带基因盒,基因盒种类包括blaCTX-M-2-aadA1和blaVIM-60-aadA1-aacA。所有菌株均未检出II和III型整合酶基因。int1和qacEΔ1基因在广西北海市、钦州市和防城港市分离菌株中的检出率差异显著(P<0.05,下同)。int1阳性菌株对甲砜霉素(TAP)的耐药率显著大于int1阴性菌株,但其余抗菌药物的耐药表型与int1基因无显著相关性(P>0.05,下同);头孢拉定(RAD)的耐药表型与blaCTX-M-2和blaVIM-60基因、新霉素(NEO)的耐药表型与aadA1和aacA基因、磺胺类的耐药表型与sul1基因均无显著相关性。【结论】广西凡纳滨对虾源副溶血弧菌对氟苯尼考的敏感性最高,可考虑将该抗菌药物作为广西凡纳滨对虾副溶血弧菌病防治的备选药物。副溶血弧菌对大部分抗菌药物的耐药表型与int1基因间未检测到显著相关性、基因盒与相应抗菌药物的耐药 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 副溶血弧菌 耐药性 整合子 基因盒
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基于浮游生物完整性指数的不同循环饥饿投饲模式黄颡鱼养殖塘水质评价 认领
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作者 张亚军 秦秀东 +7 位作者 李恩军 程光平 李文红 张伟刚 孙玉章 张曼 崔亮 赵晚晨 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1754-1763,共10页
【目的】探索不同循环饥饿投饲模式对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)养殖塘水质状况的影响,筛选出基于优良水质的黄颡鱼池塘养殖循环饥饿投饲模式,为其规模化生态化养殖提供科学参考。【方法】按间隔3 d(X3组)、5 d(X5组)、7 d(X7组)... 【目的】探索不同循环饥饿投饲模式对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)养殖塘水质状况的影响,筛选出基于优良水质的黄颡鱼池塘养殖循环饥饿投饲模式,为其规模化生态化养殖提供科学参考。【方法】按间隔3 d(X3组)、5 d(X5组)、7 d(X7组)和10 d(X10组)饥饿1 d等4种循环饥饿投饲模式养殖黄颡鱼,以正常投饲塘(X0组)为参照点,利用浮游生物完整性指数(P-IBI)评价各模式塘水体健康状况,比较分析P-IBI评价结果和灰色关联分析结果。【结果】最终筛选出Y2(浮游植物种类数)、Y14(浮游植物生物量)、Y19(浮游动物Margalef丰富度指数)、Y31(硅藻门相对丰度)、Y33(绿藻门相对丰度)和Y35(枝角类和桡足类相对丰度)作为构建P-IBI评价体系的指标。P-IBI分值显示,养殖中、后期各试验塘和参照点的水体健康状况均有所下降,至养殖结束时,X0、X3、X5、X7和X10各组的P-IBI分值比其初始值分别下降57.66%、19.30%、11.10%、30.08%和29.91%;各试验组的P-IBI平均值排序为X7<X10<X3<X5,X5组水体健康状况最好,P-IBI平均值较X0组提高11.77%。基于Pearson相关性分析结果显示,各组P-IBI与水温(WT)呈显著正相关(P<0.05,下同),与总磷(TP)呈显著负相关,与其他环境因子的相关性不显著(P>0.05)。灰色关联分析结果表明,4组试验塘和参照点水质综合判定均为Ⅲ类,其中X3组和X5组水质状况较优,其试验后期均为Ⅲ类,且有1个时期为Ⅱ类。【结论】循环饥饿投饲模式中处于饥饿期的黄颡鱼对饲料利用率较高,减少养殖塘中残饵的富集;同时饥饿期黄颡鱼直接或间接利用养殖塘中的浮游生物,在一定程度上能保持浮游生物群落结构相对稳定,达到改善水质的目的。综合分析水质因子和P-IBI得出,间隔5 d饥饿1 d的投饲模式有助于改善黄颡鱼养殖塘水质状况。 展开更多
关键词 黄颡鱼 浮游生物完整性指数 循环饥饿 水质评价
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广西2株H9N2亚型猪源流感病毒的HA基因序列分析 认领
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作者 孔子荣 李凡 +7 位作者 李三木 何奇松 曾咏芳 杨可妍 冯淑萍 孙翔翔 熊毅 颜健华 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期1087-1092,共6页
【目的】了解广西H9N2亚型猪源流感病毒的分子流行病学特征并揭示其遗传变化规律,为有效防控猪流感提供参考依据。【方法】运用PCR方法扩增广西2株H9N2亚型猪源流感病毒(A/swine/Guangxi/P2/2011和A/swine/Guangxi/P3/2011)的HA基因,并... 【目的】了解广西H9N2亚型猪源流感病毒的分子流行病学特征并揭示其遗传变化规律,为有效防控猪流感提供参考依据。【方法】运用PCR方法扩增广西2株H9N2亚型猪源流感病毒(A/swine/Guangxi/P2/2011和A/swine/Guangxi/P3/2011)的HA基因,并进行克隆测序及序列比对分析,绘制遗传进化树。【结果】2株H9N2亚型猪流感分离株的HA基因全长1701 bp,开放阅读框(ORF)全长1683 bp,编码560个氨基酸;与参考毒株核苷酸的同源性在83.7%~98.3%,推导氨基酸同源性在86.6%~98.2%。遗传进化树分析结果显示,2株分离株与A/Duck/HongKong/Y280/97病毒同属欧亚谱系的Y280亚系,其HA基因的裂解位点序列均为RSSR↓GLF,具有低致病性流感病毒的分子生物学特征;共有8个糖基化位点,其中6个位于HAl区,2个位于HA2区;HA受体结合位点均具有人流感病毒和猪流感病毒特征。【结论】分离获得的广西2株H9N2亚型猪源流感病毒A/Swine/Guangxi/P2/2011和A/Swine/Guangxi/P3/2011,其HA基因属于欧亚普系的Y280亚系,均具备典型的低致病性和与人流感受体结合特征。 展开更多
关键词 猪流感病毒 H9N2亚型 HA基因 序列分析 同源性
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广西西江干流斑点半鲿形态差异分析 认领
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作者 高峰 谭虹雨 +3 位作者 张曼 王振光 汪开成 陈秀荔 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第5期1093-1100,共8页
【目的】分析广西西江干流10个地理群体野生斑点半鲿(Hemibagrus guttatus)的形态分化情况和野外生存现状,为斑点半鲿种质资源的保护、管理和良种选育提供参考依据。【方法】采用传统形态学和框架分析法测定广西西江干流上游(天峨、东... 【目的】分析广西西江干流10个地理群体野生斑点半鲿(Hemibagrus guttatus)的形态分化情况和野外生存现状,为斑点半鲿种质资源的保护、管理和良种选育提供参考依据。【方法】采用传统形态学和框架分析法测定广西西江干流上游(天峨、东兰、大化、合山和来宾)、中游(武宣、桂平、平南和藤县)及下游(梧州)10个地理群体共333尾斑点半鲿的形态指标,运用主成分分析、聚类分析和判别分析等3种多元统计方法分析其形态特征。基于体长和体质量参数,构建各群体的回归方程并计算肥满度。【结果】主成分分析共提取7个主成分(PC1~PC7),累积贡献率为72.686%,其中前3个主成分的贡献率较高,主要反映鱼体头尾轴、躯干部和尾部的形态变化。主成分散点图显示,中下游的5个群体和上游的天峨群体及东兰、大化、合山和来宾等4个上游群体间具有较明显的形态离散分布。聚类分析结果表明,斑点半鲿10个地理群体可分为两大类群,其中中下游群体的欧氏距离最接近,聚合为一类,而上游群体的形态较相似,亲缘关系相近,聚为另一类。判别分析结果表明,基于各性状相关系数建立各地理群体判别函数的判别准确率为92.7%~100.0%,综合判别率达95.4%,具有较好的区分度。体长-体质量回归分析及肥满度分析结果显示,各地理群体样本斑点半鲿生长均匀适中,鱼体较肥满。【结论】采用主成分分析、聚类分析和判别分析3种多元统计方法可判断广西西江干流10个斑点半鲿不同地理群体间存在明显的形态分化,且野外生存状况良好,可用于指导斑点半鲿种质资源保护、管理和良种选育。 展开更多
关键词 斑点半鲿 地理群体 形态差异 多元统计方法 西江干流
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广西西江干流9个卷口鱼群体的形态差异研究 认领
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作者 王从刚 谭虹雨 +4 位作者 张曼 高峰 武琳 汪开成 陈秀荔 《渔业研究》 2020年第3期205-215,共11页
对采自广西西江干流上游(天峨、东兰、大化、都安和合山)、中游(武宣、桂平和平南)以及下游(梧州)的333尾卷口鱼进行传统形态学测量,以主成分分析、单因子方差分析(One-way ANOVA)、判别分析和聚类分析等多种统计方法系统研究卷口鱼9个... 对采自广西西江干流上游(天峨、东兰、大化、都安和合山)、中游(武宣、桂平和平南)以及下游(梧州)的333尾卷口鱼进行传统形态学测量,以主成分分析、单因子方差分析(One-way ANOVA)、判别分析和聚类分析等多种统计方法系统研究卷口鱼9个地理群体间的形态差异。其中,主成分分析共获取4个主成分(PC1~PC4),能解释81.429%的形态差异,PC1和PC2的贡献率分别为61.830%和7.863%,主要反映鱼体背腹轴和尾部的形态变化。PC1和PC2散点图显示,各地理群体间的形态差异在PC1轴上较在PC2轴上更易区分,其中桂平、平南和梧州群体已与其他群体产生明显偏离。进一步的单因子方差分析显示此三个群体的背腹轴性状(D3-6和D5-8)与多数群体存在显著性差异(P<0.05)。判别分析中,各地理群体的综合判别率高达96.36%,交互验证后为91.30%,能较好地区分各群体。聚类分析发现,武宣群体与上游5个群体形态最为相似性,先聚为一支,而后依次与形态距离较远的梧州、桂平和平南群体聚类。综上,广西西江干流9个卷口鱼群体间存在较为明显的形态差异,本研究将为卷口鱼种质资源保护管理及合理利用提供参考依据。 展开更多
关键词 卷口鱼 地理群体 形态差异 统计分析
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卵黄抗体五种提取工艺比较及初步应用 认领
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作者 向冬梅 易思宇 +5 位作者 唐青海 吴思雯 王姝姝 李彦 黎露 韩涛涛 《湖北农业科学》 2020年第15期108-113,共6页
为了得到较优的卵黄抗体提取工艺,试验改良了辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法与聚乙二醇沉淀法5种提取方法。IPGT诱导表达重组猪致病性大肠杆菌(Escherichia coli)毒素STxB蛋白(rSTxB),与佐剂71VG乳化制备免疫原免疫蛋鸡,利用... 为了得到较优的卵黄抗体提取工艺,试验改良了辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法与聚乙二醇沉淀法5种提取方法。IPGT诱导表达重组猪致病性大肠杆菌(Escherichia coli)毒素STxB蛋白(rSTxB),与佐剂71VG乳化制备免疫原免疫蛋鸡,利用改良的聚乙二醇沉淀法提取高免卵黄抗体,采用SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,通过Western blot检测卵黄抗体和血清抗体效价。结果表明,辛酸法、水稀释法、氯仿法、硫酸铵沉淀法、聚乙二醇沉淀法提取效率分别为96.00、81.99、155.50、65.34、46.00 mg/mL,其中聚乙二醇沉淀法的提取纯度最高。重组STxB蛋白分子量大小约25 kDa,血清中抗体效价最高达到64000倍,卵黄抗体最高稀释倍数为16000倍。综合评估,聚乙二醇的提取法相对较优,且提取的卵黄抗体具有良好的免疫活性。 展开更多
关键词 卵黄抗体 提取工艺 聚乙二醇沉淀法 STxB蛋白 佐剂
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一例犬前十字韧带断裂的TPLO手术治疗 认领
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作者 曹嘉慧 葛秀国 +1 位作者 曹鑫盛 曹随忠 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第12期84-86,共3页
1只8岁雌性泰迪犬因主人看护不当而从高处坠落,导致无法站立行走,左后肢悬垂跛行,为了对该犬进行诊治,试验采用前抽屉实验和X射线检查进行诊断。结果表明:患犬左后肢膝关节前抽屉实验呈阳性,X射线检查可见患肢胫骨平台明显前倾,诊断为... 1只8岁雌性泰迪犬因主人看护不当而从高处坠落,导致无法站立行走,左后肢悬垂跛行,为了对该犬进行诊治,试验采用前抽屉实验和X射线检查进行诊断。结果表明:患犬左后肢膝关节前抽屉实验呈阳性,X射线检查可见患肢胫骨平台明显前倾,诊断为前十字韧带断裂,采用胫骨平台调平截骨术(TPLO)进行治疗,术后第6天,病犬患肢能够正常行走,未出现跛行,仅奔跑时患肢悬垂。术后第11天拆线后,患肢逐渐完全恢复正常功能。说明该手术方法疗效显著且预后良好,值得推广使用。 展开更多
关键词 膝关节 前十字韧带断裂 手术治疗 胫骨平台调平截骨术 预后
RIG-I敲除293T细胞系的建立及其对B型流感病毒复制的影响 认领
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作者 田璐 焦鹏涛 +5 位作者 侯力丹 李芸 宋正宇 刘文军 范文辉 孙蕾 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期109-121,共13页
CRISPR/Cas9基因编辑技术是通过人工设计的单向导RNA(Single-guide RNA,sgRNA)指导Cas9蛋白对目的基因靶位点进行特异性的识别、结合和切割后,通过细胞的非同源末端连接或同源末端重组修复机制来完成对基因组的敲除与敲入的编辑技术。RI... CRISPR/Cas9基因编辑技术是通过人工设计的单向导RNA(Single-guide RNA,sgRNA)指导Cas9蛋白对目的基因靶位点进行特异性的识别、结合和切割后,通过细胞的非同源末端连接或同源末端重组修复机制来完成对基因组的敲除与敲入的编辑技术。RIG-I是机体的一种模式识别受体,能够识别胞质中的含5′-三磷酸基团的RNA,并通过与下游信号分子MAVS相互作用,激活IRF3/7和NF-κB,从而启动I型干扰素和炎性因子的表达。已有研究表明,B型流感病毒(IBV)在感染早期能够上调RIG-I的表达水平。为了探索RIG-I是否为B型流感病毒激活抗病毒天然免疫信号通路的主要受体及其对IBV复制的影响,本研究利用CRISPR-Cas9技术对293T细胞中的RIG-I基因进行了敲除,经嘌呤霉素压力筛选到了一株稳定敲除RIG-I基因的293T(RIG-I-/-293T)细胞系。Western blotting检测发现,IBV或仙台病毒感染后该细胞系中RIG-I不再表达,说明该敲除细胞系构建成功。IBV感染RIG-I-/-293T细胞后,干扰素、炎性因子及干扰素刺激基因的转录水平与野生型293T细胞相比明显下降,并且在RIG-I-/-293T细胞中检测不到p65和IRF3磷酸化,表明IBV感染早期细胞因子的表达主要依赖于RIG-I信号通路的激活。IBV在野生型及RIG-I-/-293T细胞中的多步生长曲线表明,RIG-I可抑制IBV的复制。以上结果表明,RIG-I敲除的293T细胞系构建成功,RIG-I是IBV激活下游抗病毒天然免疫信号通路的主要受体之一,且对IBV的复制具有负调控作用,该研究为探索IBV的感染机制奠定了基础。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 RIG-I 基因敲除 B型流感病毒
肿节风三清颗粒成型工艺与中试生产研究 认领
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作者 邓锐涵 彭健波 +7 位作者 吴文健 唐廷崇 陶卿 廖晓光 王春元 郝智慧 杨善忠 何家康 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第4期1233-1240,共8页
为了优选肿节风三清颗粒的最佳成型工艺并考察中试生产的合理性,进行颗粒成型工艺和中试工艺放大研究,颗粒成型工艺试验以成型率、溶化率、吸湿率为考察指标,以浸膏粉与辅料的配比、蔗糖与糊精的配比、乙醇浓度为考察因素,采用正交试验... 为了优选肿节风三清颗粒的最佳成型工艺并考察中试生产的合理性,进行颗粒成型工艺和中试工艺放大研究,颗粒成型工艺试验以成型率、溶化率、吸湿率为考察指标,以浸膏粉与辅料的配比、蔗糖与糊精的配比、乙醇浓度为考察因素,采用正交试验优化成型工艺;中试生产以浸膏得率、成品率、有效成分含量为指标,考察中试工艺放大的可行性。结果显示,优选的肿节风三清颗粒最佳成型工艺为蔗糖∶糊精为3∶2、乙醇浓度为65%、浸膏粉∶辅料为1∶6;颗粒临界相对湿度为73.49%。三批肿节风三清浸膏(中间体)的浸膏得率分别为8.58%、8.58%和8.63%,三批肿节风三清颗粒(成品)的成品率分别为93.40%、92.13%和93.53%,中间体和成品中有效成分异嗪皮啶、迷迭香酸的含量均稳定可控。表明肿节风三清颗粒成型工艺合理,中试生产稳定可控,适合批量生产。 展开更多
关键词 浸膏 颗粒 成型工艺 中试生产 浸膏得率 成品率
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巴马小型猪内源性反转录病毒的整合对HEK293细胞周期、细胞凋亡和相关基因表达的影响 认领
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作者 马玲 钟华 +6 位作者 秦树英 唐海波 白安斌 陈凤莲 刘金凤 覃绍敏 吴健敏 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期882-887,共6页
检测广西巴马小型猪内源性反转录病毒(PERV)整合到HEK293细胞基因组(HEK293-PERV-BM)后,宿主细胞的细胞周期、细胞凋亡及cyclin D1、CDK4、c-Myc、p53、p16和k-Ras等相关基因表达的改变,推测相关作用机制。检测发现P10代巴马小型猪内源... 检测广西巴马小型猪内源性反转录病毒(PERV)整合到HEK293细胞基因组(HEK293-PERV-BM)后,宿主细胞的细胞周期、细胞凋亡及cyclin D1、CDK4、c-Myc、p53、p16和k-Ras等相关基因表达的改变,推测相关作用机制。检测发现P10代巴马小型猪内源性反转录病毒感染HEK293细胞模型(HEK293-PERV-BM)的细胞周期主要被阻滞在S期和G2/M期,细胞凋亡受到抑制,P25代细胞周期主要被阻滞在S期,细胞凋亡明显受到诱导。通过实时荧光定量PCR和Western blot检测发现细胞周期相关基因的表达与细胞感染模型传代次数(P1~P35)有密切关系,其中cyclin D1、c-Myc和k-Ras基因表现为先降低后升高,而CDK4和p16基因则恰好相反,同时,p53基因表达的改变不明显,据此可以推测P10代细胞周期的改变可能由Rb调控通路诱导发生,P25代细胞周期的改变可能由Rb调控通路与p53调控通路协同诱导发生。上述结果提示PERV的感染可能存在潜在的危险。 展开更多
关键词 巴马小型猪 猪内源性反转录病毒 细胞周期 细胞凋亡
饥饿对尼罗罗非鱼肌肉和肝KLF15基因节律性表达的影响 认领
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作者 安晓玲 张建社 +4 位作者 褚武英 吴萍 王利香 丁兆坤 许友卿 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期51-58,共8页
Krüppel样转录因子15 (Krüppel-like factors,KLF15)是Krüppel样转录因子家族的一员。Krüppel样转录因子家族的特征是含有3个高度保守的Cys2His2锌指结构,与DNA的CACCC元件和富含GC区连接,从而调控转录激活或抑制。... Krüppel样转录因子15 (Krüppel-like factors,KLF15)是Krüppel样转录因子家族的一员。Krüppel样转录因子家族的特征是含有3个高度保守的Cys2His2锌指结构,与DNA的CACCC元件和富含GC区连接,从而调控转录激活或抑制。KLF15在糖、脂肪酸、氨基酸代谢过程中发挥重要的调控作用。本研究克隆了尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) KLF15基因全长cDNA序列,根据推测的氨基酸序列分析,发现其具有KLF15的两个典型结构域zf-H2C2-2和zf-C2H2。系统进化树的比较分析表明,尼罗罗非鱼KLF15与雪鲷(Maylandia zebra) KLF15亲缘关系最为接近。尼罗罗非鱼短期饥饿实验结果显示:正常进食状态时尼罗罗非鱼肌肉、肝中KLF15基因都呈现明显的昼夜节律性,均为昼低夜高;饥饿7 d后KLF15基因依然有显著昼夜节律性,但振幅降低,且在肝中表现出昼高夜低现象。以上结果说明尼罗罗非鱼的营养变化在一定程度上直接或间接影响KLF15基因节律性表达。 展开更多
关键词 KLF15 尼罗罗非鱼 肌肉 肝脏 饥饿 节律性分析
CAT1基因在尼罗罗非鱼肌肉和肝的节律性表达研究 认领
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作者 王利香 褚武英 +6 位作者 安晓玲 吴萍 许友卿 丁兆坤 李玉珑 陈小贞 张建社 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期2529-2535,共7页
为了探究碱性氨基酸转运载体(CAT1)基因在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)饥饿0、7 d肌肉和肝的昼夜表达规律,实验分别在尼罗罗非鱼饥饿0,7 d 06:00、09:00、12:00、15:00、18:00、21:00和24:00、第2天03:00、06:00,分别对应区时(Zon... 为了探究碱性氨基酸转运载体(CAT1)基因在尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)饥饿0、7 d肌肉和肝的昼夜表达规律,实验分别在尼罗罗非鱼饥饿0,7 d 06:00、09:00、12:00、15:00、18:00、21:00和24:00、第2天03:00、06:00,分别对应区时(Zone time,ZT)ZT0、ZT3、ZT6、ZT9、ZT12、ZT15、ZT18、ZT21、ZT24采样,采样在一昼夜内完成。每组随机取3尾鱼进行解剖,取其肌肉和肝样品分析。结果表明:CAT1基因在正常投喂的尼罗罗非鱼肌肉表达具有显著性时间差异(p<0.05),呈现昼低夜高的节律性振荡(p<0.3),达到峰值的时间为ZT 0.72。饥饿7 d后,虽然在各时间点上CAT1基因表达有显著性差异(p<0.05),但无昼夜节律性(p>0.3);CAT1基因表达为在光周期先升后降,在暗周期先降后升,峰值相位在光照阶段,为ZT 7.44。在尼罗罗非鱼肝中,CAT1基因在正常投喂时表达具有显著性时间差异(p<0.05),呈现节律性振荡(p<0.3),CAT1基因表达为在光周期先降后升,在暗周期则先升后降,峰值相位在黑暗阶段,达到峰值的时间为ZT 16.56。饥饿7 d后,在各时间点上CAT1基因表达无显著性时间差异(p>0.05),且表达无昼夜节律性(p>0.3);CAT1基因表达为在光周期先降后升,在暗周期则先升后降,峰值相位在黑暗阶段,为ZT 21.60。以上结果说明CAT1基因在尼罗罗非鱼肌肉和肝表达的昼夜节律不同。 展开更多
关键词 尼罗罗非鱼 碱性氨基酸转运载体 实时荧光定量RT-PCR 节律性表达
三株猫杯状病毒的分离鉴定及致病性研究 认领
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作者 王浩 白安斌 +5 位作者 刘金凤 方晴 凌何婷 秦树英 覃绍敏 吴健敏 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期717-724,共8页
为了解猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)在广西地区的流行情况与致病性,本研究采集55份疑似FCV拭子,按常规方法分离鉴定得到3株FCV,以VP1基因进行同源性分析,在77.5%~85%之间,这3株分离株(2019)与广西株GX01(2013)、吉林株CH-JL4(20... 为了解猫杯状病毒(feline calicivirus,FCV)在广西地区的流行情况与致病性,本研究采集55份疑似FCV拭子,按常规方法分离鉴定得到3株FCV,以VP1基因进行同源性分析,在77.5%~85%之间,这3株分离株(2019)与广西株GX01(2013)、吉林株CH-JL4(2015)、上海株SH(2014)及英国株F65(1999)、哈尔滨株HRB-SS(2014)处于同一进化分支,具有相同的遗传起源,但与目前临床上使用的国内疫苗株255、国外疫苗株F9处于不同的进化分支,存在疫苗免疫失败的风险。为了解这3株FCV的毒力,进行动物致病性试验。结果显示,模拟自然感染的试验猫,FCV潜伏期最长为7 d,5~7 d为排毒的高峰期,FCV存在短暂病毒血症的情况。器官病变集中在肺部,会出现明显的淤血、出血现象。这3株的感染率均为100%,死亡率分别为50%、50%、75%,表明这3株FCV毒株均有致病性。综合剖检和HE染色结果分析,致病力最强的是GXN3株。 展开更多
关键词 猫杯状病毒 遗传进化 同源性 动物试验 致病性
检测基孔肯雅病毒SYBR Green I real-time PCR方法的建立及应用 认领
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作者 于宁 李成辉 +6 位作者 汪伟 庄忻雨 孙福亮 肖朋朋 鲁承 鲁会军 金宁一 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第7期795-799,共5页
目的建立一种基孔肯雅病毒的快速诊断方法。方法采用基孔肯雅病毒E1基因的重组质粒作为阳性标准品。优化反应条件,建立针对基孔肯雅病毒的SYBR Green I real-time PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果建立的SYBR Gr... 目的建立一种基孔肯雅病毒的快速诊断方法。方法采用基孔肯雅病毒E1基因的重组质粒作为阳性标准品。优化反应条件,建立针对基孔肯雅病毒的SYBR Green I real-time PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性和重复性进行评价。结果建立的SYBR Green I real-time PCR检测方法的Ct值与阳性标准品在6.94×10~0~6.94×10~8 copies/μl范围内呈良好的线性关系,相关性为0.997,斜率为-3.571;其检测下限为0.694 copies/μl,且对ZIKV、DENV和JEV等均无特异性扩增;所有稀释倍数的标准品在84.0℃出现特异性熔解峰;组内和组间变异系数均小于2%。采用该方法对93份蚊虫样品进行检测,基孔肯雅病毒核酸阳性率为2.15%,普通PCR核酸阳性率为1.07%。结论成功建立了针对基孔肯雅病毒E1基因的SYBR Green I real-time PCR检测方法。该方法灵敏、特异,可用于基孔肯雅病毒感染的快速诊断。 展开更多
关键词 基孔肯雅病毒 SYBR GreenⅠreal-time PCR E1基因
桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾对摩拉水牛公牛生产性能和血液指标的影响 认领
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作者 蒋健钊 李标 +4 位作者 林国强 梁广博 黄琳峰 林波 黄金华 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第16期109-113,共5页
为了探讨桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾对肉牛生产性能和血液指标的影响,试验选择8月龄、体重相近的健康河流型摩拉水牛公牛27头,随机分为3组,每组9头。对照组饲喂全混合日粮Ⅰ,其中青贮甘蔗尾40%,未添加桑枝叶;试验组1饲喂全混合日粮Ⅱ,其... 为了探讨桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾对肉牛生产性能和血液指标的影响,试验选择8月龄、体重相近的健康河流型摩拉水牛公牛27头,随机分为3组,每组9头。对照组饲喂全混合日粮Ⅰ,其中青贮甘蔗尾40%,未添加桑枝叶;试验组1饲喂全混合日粮Ⅱ,其中青贮甘蔗尾28%、桑枝叶12%;试验组2饲喂全混合日粮Ⅲ,其中青贮甘蔗尾16%、桑枝叶24%。预试期7 d,正式期50 d,测定各组试验水牛的末重、平均日增重、平均日采食量、料重比及血液指标,并计算分析经济效益。结果表明:试验组2水牛的平均日增重、平均日采食量均显著高于对照组和试验组1(P<0.05);试验组1,2水牛的料重比显著低于对照组(P<0.05);3组试验水牛血液中白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度标准差(RDW-SD)、红细胞分布宽度变异系数(RDW-CV)、血红蛋白浓度(HGB)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数(PLT)以及血清中总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、尿素氮(BUN)、肌酐(CR)、总胆固醇(T-CHO)、丙二醛(MDA)含量和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)活性,以及总抗氧化能力(T-AOC)、ALB/GLB、AST/ALT均差异不显著(P>0.05);试验组2水牛的净收入最高,比对照组和试验组1分别提高了41.82%、16.22%。说明用桑枝叶代替部分青贮甘蔗尾制备成发酵全混合日粮能够显著提高水牛的生长性能和经济效益。 展开更多
关键词 桑枝叶 甘蔗尾 全混合日粮 生产性能 血液指标 经济效益
FoxO3转录因子在鸡卵巢组织中的表达鉴定 认领
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作者 洪永兴 彭腊如 +6 位作者 黄振文 徐天鹏 濮黎萍 虞霖田 谢龙 廖玉英 陆阳清 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1849-1856,共8页
【目的】明确FoxO3转录因子在不同日龄鸡卵巢组织中的表达模式及其具体定位情况,为后续开展家禽卵泡激活及发育调控等相关机理研究提供科学依据。【方法】在GenBank中搜索鸡与其他物种(鸭、鹅、老鼠、猪、牛及人类)的FoxO3氨基酸序列,通... 【目的】明确FoxO3转录因子在不同日龄鸡卵巢组织中的表达模式及其具体定位情况,为后续开展家禽卵泡激活及发育调控等相关机理研究提供科学依据。【方法】在GenBank中搜索鸡与其他物种(鸭、鹅、老鼠、猪、牛及人类)的FoxO3氨基酸序列,通过LaserGene分析鸡FoxO3氨基酸序列与其他物种FoxO3氨基酸序列间的亲缘关系及同源差异情况;利用RT-PCR鉴定FoxO3基因是否在鸡卵巢组织中表达,再采用实时荧光定量PCR检测不同发育阶段鸡卵巢组织中FoxO3基因的表达水平,最后以免疫荧光检测FoxO3蛋白在鸡卵巢组织中的定位情况。【结果】鸡与鸭和鹅的FoxO3氨基酸序列相似性分别为92.7%和95.3%,基于FoxO3氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示鸡与鸭和鹅的亲缘关系较近,说明FoxO3基因的进化相对较保守。在不同发育阶段的鸡卵巢组织中均能检测到FoxO3基因表达,且FoxO3基因在0日龄鸡卵巢组织中的相对表达量最高,显著高于在其他发育阶段的相对表达量(P<0.05)。在0日龄鸡卵巢组织中未检测到FoxO3蛋白,但在21日龄和成年鸡的卵巢组织中均能检测到FoxO3蛋白;在21日龄鸡卵巢组织中FoxO3蛋白主要定位在原始卵泡细胞周围,在卵泡内部没有表达;而在成年鸡卵巢组织中FoxO3蛋白仅定位于大卵泡细胞边缘,小卵泡细胞内并未发现FoxO3蛋白。【结论】由于鸡和哺乳动物的FoxO3氨基酸序列高度同源,且FoxO3蛋白在鸡卵巢组织中的定位与在哺乳动物卵巢组织中的定位相似,说明FoxO3在鸡卵巢组织中发挥着与哺乳动物相似的功能,即在卵泡激活与成熟过程中发挥重要作用,因此通过调控FoxO3能有效提高鸡的繁殖性能。 展开更多
关键词 FoxO3转录因子 卵巢 卵泡激活 表达定位
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1株犬源PCV3的全基因克隆与序列分析 认领
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作者 辛佳亮 汪伟 +9 位作者 杜倩 韩知晓 闭璟珊 孔子荣 张书祥 孙文超 曹亮 鲁会军 郑敏 金宁一 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期504-509,共6页
根据GenBank上已发表的PCV3毒株序列设计1对检测引物和2对扩增全长引物。应用检测引物对广西地区的犬血清样品进行PCR检测,应用扩增全长引物对检测阳性样品进行PCR扩增、克隆和测序,并对其全基因序列进行分析,绘制遗传进化树。结果显示... 根据GenBank上已发表的PCV3毒株序列设计1对检测引物和2对扩增全长引物。应用检测引物对广西地区的犬血清样品进行PCR检测,应用扩增全长引物对检测阳性样品进行PCR扩增、克隆和测序,并对其全基因序列进行分析,绘制遗传进化树。结果显示,广西地区147份犬血清样品中,阳性样品为36份,感染率为24.3%。本试验成功扩增1株2000bp的PCV3毒株的全基因核苷酸序列,并命名为PCV3/Guangxi-5。将PCV3/Guangxi-5序列与NCBI公布的PCV3的参考序列进行同源性比对,结果显示PCV3/Guangxi-5与参考序列的全基因序列同源性为98.9%~100.0%,其中与DE27.16同源性最低,与PCV3/CN/Chongqing-148/2016同源性最高。应用MEGA7.0对PCV3进行ORF2基因的氨基酸序列进行比对发现,第24位至第27位氨基酸存在6种形式,分别为VRRK、ARRR、ARKR、LRRK、VRRR和ARRK。利用MEGA7.0软件中Maximum Likelihood(ML)法p-distance模式构建基于ORF2基因和PCV3全基因的系统发育分析表明,PCV3可分为PCV3a和PCV3b等2种基因型,本试验获得的PCV3/Guangxi-5为PCV3a亚型,其ORF2基因与PCV3/CN/Liaoning-23/2016亲缘关系最近,与NWHEB21、毒株亲缘关系相距最远;其全基因组与CN/Jiangxi-62/2016毒株亲缘关系最近,与CNFJ-1毒株亲缘性最远。结果表明,广西地区犬群普遍存在感染PCV3的情况,理论上丰富了广西地区PCV3的流行病学资料,为PCV3的防治措施的制定和流行病学研究提供一定的参考依据。 展开更多
关键词 PCV3 进化分析
人工饲养条件下黄额闭壳龟的繁殖行为研究 认领
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作者 曹鑫盛 黄凯 +4 位作者 路斌 潘建洲 曹嘉慧 张震 陈成勋 《四川动物》 北大核心 2020年第2期189-195,共7页
2017—2019年在广西壮族自治区桂林市永福县对7只性成熟(5雌2雄)黄额闭壳龟Cuora galbinifrons的交配与繁殖进行了观察研究,记录人工养殖条件下亲龟的生活、交配及繁殖习性,结合相关研究报导,调整亲龟饲养及龟卵孵化方法,在人工养殖条... 2017—2019年在广西壮族自治区桂林市永福县对7只性成熟(5雌2雄)黄额闭壳龟Cuora galbinifrons的交配与繁殖进行了观察研究,记录人工养殖条件下亲龟的生活、交配及繁殖习性,结合相关研究报导,调整亲龟饲养及龟卵孵化方法,在人工养殖条件下成功繁殖出F_1代个体。结果表明,试验亲龟生长状况良好,体质量年平均增长率达6.37%,交配高峰期为5—6月,产卵期为6—7月。共获得5枚受精卵,2次产卵之间积温为197 230~207 955℃·h,并成功孵化出F_1代稚龟3只,龟卵孵化时间为118~136 d,孵化积温为76 464~88 128℃·h,孵化率60.00%。本研究为黄额闭壳龟的人工饲养繁殖提供了理论依据和实践基础。 展开更多
关键词 黄额闭壳龟 繁殖生物学 积温 孵化积温
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