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高表达SMS1效应性T细胞对卵巢癌细胞凋亡影响机制研究
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作者 韩蕾 林昌岫 +4 位作者 孙雨鸿 杭月 付云柯 萨帝什 黄成日 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2019年第10期682-689,共8页
目的神经鞘磷脂酶1 (sphingomyelin synthesisl,SMS1)是催化鞘磷脂生物合成的关键酶之一,与细胞凋亡密切相关,在免疫抗肿瘤研究中较为鲜见。本研究探讨高表达SMS1效应T细胞对卵巢癌细胞增殖和凋亡活性的影响。方法采用密度梯度离心法收... 目的神经鞘磷脂酶1 (sphingomyelin synthesisl,SMS1)是催化鞘磷脂生物合成的关键酶之一,与细胞凋亡密切相关,在免疫抗肿瘤研究中较为鲜见。本研究探讨高表达SMS1效应T细胞对卵巢癌细胞增殖和凋亡活性的影响。方法采用密度梯度离心法收集人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMC)体外采用协同抗CD3抗体、CD28抗体、重组白介素2(interleukin 2,IL-2)和重组IL-15刺激活化T细胞。构建pCMV. sport 6-SMS1,并将SMS1基因转染或空质粒至T细胞,分为SMS1转染组和对照组。经甲胎蛋白(alpha-fetal protein, AFP)刺激活化,分别与SK()V3、()VCAR3、A2780细胞共培养。采用四哇盐(methyl thiazolyl tetrazolim. MTT)比色法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡活性。采用ELISA试剂盒检测共培养上清中了干扰素仃nterferon y,IFNy)和II「2含量。结果 SMS1基因转染T细胞经肿瘤抗原刺激后充分活化,T细胞受体(T cell receptor, TCR)+细胞比例为(32. 83±2. 17)%,高于对照组,72=8,/= 29. 941,P<0. 001;SMSl 转染组 CD45RO’细胞比例为(31. 23 + 3. 41)%,同样高于对照组皿=8,/=1& 715,P<0. 001o qRT-PCR 方法检测,AFP 表达量 SKOV3 细胞为(0. 72 + 0. 13),OVCAR3 细胞为(0. 75 + 0. 14),A2780 细胞为(0. 38±0. 10),SK()V3 细胞和 OVCAR 细胞 AFP 表达量高于 A2780 细胞皿= 8,F=21. 798,PV0. 001oSMS1转染效应性T细胞对SK()V3、()VCAR3、A2780细胞的杀伤率以及促凋亡率高于对照组;且呈效靶比依赖性。但SMS1转染效应性T细胞对A2780细胞抑制生长的作用和促凋亡作用明显低于SKOV3和OVCAR3细胞,F =189. 390,P<0. 001o SMS1转染组靶细胞与卵巢癌细胞40 : 1共培养24 h后,培养上清中IFN-y的含量SKOV3细胞为(32. 74±10. 18) ng/mL,()VCAR3 细胞为(34. 49±12. 72) ng/mL, A2780 细胞为(18. 65 土 6. 37) ng/mL,n = 8, F =5.91,PV0.05;另夕卜,培养上清中 IL-2 的含量 SKOV3 细胞为(2 37& 64 + 579. 23) pg/mL,()VCAR3 细胞为(2 057. 85 土492.73) pg/mL,A2780 细胞为(1 展开更多
关键词 神经鞘磷脂酶1 卵巢癌 过继性T细胞 免疫逃逸 转染
线粒体凋亡通路在棕榈酸诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用 预览
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作者 许文虎 金春子 +2 位作者 王晓龙 陈晨 崔兰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期224-228,共5页
目的探讨线粒体凋亡通路在棕榈酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡中的作用。方法不同浓度棕榈酸(0.1、0.2、0.4、0.8 mmol·L^-1 )作用HUVECs(0、12、24、48 h),MTT法检测HUVECs增... 目的探讨线粒体凋亡通路在棕榈酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)凋亡中的作用。方法不同浓度棕榈酸(0.1、0.2、0.4、0.8 mmol·L^-1 )作用HUVECs(0、12、24、48 h),MTT法检测HUVECs增殖能力;免疫荧光法检测HUVECs细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的表达水平;免疫印迹法检测HUVECs中AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3、Bcl-2、Bax等线粒体凋亡通路蛋白的表达水平;TUNEL法检测细胞内凋亡水平。结果 0.4 mmol·L^-1 棕榈酸作用HUVECs 24h 时,细胞增殖率明显降低;AIF、Cyt-C、cleaved caspase-3、Bax/Bcl-2的水平明显升高( P <0.05),细胞凋亡水平明显增高( P <0.05);线粒体通透性抑制剂环孢素A (ciclosporine A, CsA)预处理组HUVECs凋亡水平明显下调( P <0.05)。结论棕榈酸所致血管内皮细胞损伤的发病机制可能与线粒体凋亡相关通路密切关联,此研究对脂毒性心肌损伤的防治有重要意义。 展开更多
关键词 线粒体凋亡 棕榈酸 血管内皮细胞 活性氧 人脐静脉血管内皮细胞 凋亡
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神经鞘磷脂合成酶2基因沉默对乳腺癌细胞凋亡的影响 预览
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作者 杭月 林昌岫 黄成日 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期1227-1232,共6页
目的探讨神经鞘磷脂合成酶2(SMS2)基因沉默对人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响以及机制分析。方法体外培养MCF-7细胞,分别转染siRNAcontrol(SiR-Con)和SMS2siRNA(SiR2),用MTT法筛选肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导MCF-7细胞凋亡的剂量(IC50)、... 目的探讨神经鞘磷脂合成酶2(SMS2)基因沉默对人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响以及机制分析。方法体外培养MCF-7细胞,分别转染siRNAcontrol(SiR-Con)和SMS2siRNA(SiR2),用MTT法筛选肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导MCF-7细胞凋亡的剂量(IC50)、采用薄层层析法(TLC)检测SMS2基因沉默后MCF-7细胞内SMS酶活性水平并用Hoechst 33258/PI染色法检测细胞凋亡情况。采用qRT-PCR和Western blot检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化。结果随着TNF-α(50~800ng/mL)浓度的增加,对MCF-7细胞增殖抑制率也逐渐增加,IC50为205.7ng/mL。经TNF-α作用后,TNF-α组、SiR-Con组和SiR2组MCF-7细胞内SMS酶活性灰度值明显低于CTL组,且细胞凋亡率和坏死率均高于CTL组;以SiR2组细胞SMS酶活性为最低,凋亡率和坏死率为最高(P<0.05)。SiR2组细胞Bcl-2表达量低于其他3组,而Bax和caspase-3基因表达则高于其他3组(P<0.05)。结论SMS2基因沉默可降低MCF-7细胞内SMS酶活性,通过抑制抗凋亡基因Bcl-2的表达,同时上调促凋亡基因Bax和caspase-3的表达,提高TNF-α诱导肿瘤细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 神经鞘磷脂合成酶2 乳腺癌 肿瘤坏死因子Α
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神经型一氧化氮合酶在高血压大鼠中棕榈酸依赖的心肌细胞收缩性中的调节机制 预览
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作者 关宏锏 刘文博 +2 位作者 金香兰 许文虎 金春子 《中国心血管病研究》 CAS 2018年第8期757-760,766共5页
目的 探讨神经型一氧化氮合酶(nNOS)在高血压大鼠中棕榈酸依赖的心肌细胞收缩性中的调节机制.方法 随机分为对照组和高血压组,各组27只,制备血管紧张素Ⅱ诱导的高血压模型大鼠模型,用美国肯特coda多动物多通道尾袖套法无创血压系统监... 目的 探讨神经型一氧化氮合酶(nNOS)在高血压大鼠中棕榈酸依赖的心肌细胞收缩性中的调节机制.方法 随机分为对照组和高血压组,各组27只,制备血管紧张素Ⅱ诱导的高血压模型大鼠模型,用美国肯特coda多动物多通道尾袖套法无创血压系统监测大鼠血压,采用IonOptix单细胞收缩检测系统检测心肌细胞收缩.结果 ①4周末对照组收缩压和舒张压为(115.4±4.7)mmHg和(94.8±2.8)mm Hg,高血压组为(158.6±4.8)mm Hg和(128.8±2.9)mmHg,4周末与对照组相比高血压组收缩压和舒张压均增高;②棕榈酸增强对照组心肌细胞收缩性,但高血压组无此作用;③依托莫司(ETO)为肉碱脂酰转移酶1抑制刘,ETO能抑制对照组中棕榈酸增强心肌细胞收缩性的作用;④S-甲基-硫代L-瓜氨酸(SMTC)为nNOS抑制剂,在高血压组中,预处理SMT℃可恢复棕榈酸促进心肌细胞收缩的作用.但同时给予ETO和SMTC时棕榈酸增强心肌细胞收缩性的作用又被抑制.结论 在健康大鼠心脏中,棕榈酸通过肉碱脂酰转移酶1增加心肌收缩力.在高血压大鼠心脏中,棕榈酸依赖性心肌细胞收缩被增多的nNOS限制,主要是通过增多的nNOS对肉碱脂酰转移酶1的调控作用. 展开更多
关键词 神经型一氧化氮合酶 高血压 心肌细胞收缩 棕榈酸
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丙戊酸通过上皮钙黏蛋白的核移位诱导结肠癌细胞EMT的作用
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作者 金武男 吉美瑛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CSCD 北大核心 2018年第10期994-998,共5页
目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对结肠癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法:以结肠癌细胞系DLD-1、HCT116、SW480 和HT29 为研... 目的:探讨组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对结肠癌细胞上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用。方法:以结肠癌细胞系DLD-1、HCT116、SW480 和HT29 为研究对象,用MTT法检测不同浓度(0.5、5 mmol/L) VPA对结肠癌细胞增殖的影响,用Western blotting 检测细胞EMT相关蛋白上皮钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达水平,免疫荧光染色法检测上皮钙黏蛋白和波形蛋白表型的变化,划痕愈合与Transwell侵袭实验检测结肠癌细胞的迁移与侵袭能力。结果:不同浓度VPA作用4 种结肠癌细胞48 h,低浓度VPA(0.5 mmol/L)对4 种结肠癌细胞增殖几乎影响,取0.5 mmol/L为实验浓度。0.5 mmol/L VPA作用后,结肠癌细胞上皮钙黏蛋白表达水平显著下降(P〈0.05)但波形蛋白表达水平显著升高(P〈0.05);0.5 mmol/L VPA处理组细胞的上皮钙黏蛋白出现膜衰减和核移位,以及波形蛋白含量显著增加,上述反应在6 h 后开始且可维持24 h;0.05 mmol/L的VPA处理可增强结肠癌细胞的迁移和侵袭能力。结论:低浓度VPA可通过上皮钙黏蛋白的核移位诱导结肠癌细胞EMT的发生且明显增强细胞的迁移侵袭能力,因此在结肠癌中选择HDAC抑制剂作为一个新型抗癌药物之前应谨慎。 展开更多
关键词 结肠癌 丙戊酸 上皮一间质转化 上皮钙黏蛋白 波形蛋白
轮叶党参粗多糖对体外培养小鼠脾淋巴细胞及RAW 264.7细胞的免疫活性 预览 被引量:3
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作者 张妍 林昌岫 +2 位作者 邵玉健 黄睿 康东周 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2018年第12期311-315,共5页
目的:研究轮叶党参多糖对小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞(RAW 264.7)作用以探究其免疫增强的功效。方法:浓度为1000,500,250,125μg/m L多糖体外分别与脾脏细胞、RAW 264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-6和... 目的:研究轮叶党参多糖对小鼠脾淋巴细胞及巨噬细胞(RAW 264.7)作用以探究其免疫增强的功效。方法:浓度为1000,500,250,125μg/m L多糖体外分别与脾脏细胞、RAW 264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-6和TNF-α浓度的变化。采用MTT法,研究轮叶党参粗多糖对RAW 264.7增殖的影响。Griess法测定细胞上清液中NO的含量变化。通过RT-PCR法检测i NOS m RNA的生成情况。结果:与正常组相比,轮叶党参粗多糖组IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α和NO的分泌量极显著增加(p〈0.01),显著促进RAW 264.7增殖(p〈0.05)。与正常组比较,i NOS m RNA明显增加。结论:轮叶党参粗多糖可与Con A协同增强T细胞活性,也可参与活化单核-巨噬细胞对特异性免疫与非特异性免疫活性起到正向调节的作用。 展开更多
关键词 轮叶党参 多糖 脾淋巴细胞(RAW 264.7) 巨噬细胞 免疫活性
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费菜粗多糖对小鼠免疫活性的研究 预览
7
作者 黄睿 于思文 +2 位作者 田海玲 林昌岫 康东周 《饮食科学》 2018年第10X期146-148,共3页
目的 :研究费菜(SedumaizoonL.)粗多糖对小鼠免疫活性的研究方法 :首先采用水提醇沉法以及Sevage法去蛋白等工艺提取费菜粗多糖。体外实验需将配置成不同浓度的多糖提取液分别与脾脏细胞,RAW264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞... 目的 :研究费菜(SedumaizoonL.)粗多糖对小鼠免疫活性的研究方法 :首先采用水提醇沉法以及Sevage法去蛋白等工艺提取费菜粗多糖。体外实验需将配置成不同浓度的多糖提取液分别与脾脏细胞,RAW264.7共培养,采用ELISA法检测细胞上清中细胞因子IL-2,IFN-γ,IL-6,TNF-α浓度的变化。采用cck-8法,研究费菜粗多糖对RAW264.7增殖的影响。Griess法测定细胞上清液中NO的含量变化。结果 :与正常组相比,费菜粗多糖组显著增加IL-2,IFN-γ,IL-6,TNF-α,NO的分泌量,差异具有统计学意义(p<0.01)。促进RAW264.7增殖,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论 :费菜多糖轮增加脾淋巴细胞与RAW264.7分泌IL-2、IFN-γ、IL-6、TNF-α、NO,促进RAW264.7增殖. 展开更多
关键词 费菜 多糖 细胞因子 T淋巴细胞亚群 免疫活性
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糖尿病合并细菌性肝脓肿 预览
8
作者 权海燕 《肝博士》 2018年第1期50-51,共2页
糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢相关性疾病,发病原因主要是由于机体胰岛素分泌障碍或相关受体缺陷引起,由于血液中长期存在高浓度的葡萄糖,易导致各种器官如眼、肾、心血管、神经及肝脏等的慢性损害和功能障碍。而细菌性肝脓肿是... 糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢相关性疾病,发病原因主要是由于机体胰岛素分泌障碍或相关受体缺陷引起,由于血液中长期存在高浓度的葡萄糖,易导致各种器官如眼、肾、心血管、神经及肝脏等的慢性损害和功能障碍。而细菌性肝脓肿是指化脓性细菌通过各种途径侵入肝脏,并在肝内定居形成化脓性病灶,因为肝脏内有丰富的血供,所以一旦发生感染,大量的细菌内毒素就会进入全身血循环,引起脓毒症,最终因全身多器官功能障碍综合征而死亡。 展开更多
关键词 糖尿病合并细菌性肝脓肿 全身多器官功能障碍综合征 代谢相关性疾病 胰岛素分泌障碍 化脓性细菌 细菌内毒素 肝脏内 受体缺陷
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RT-PCR法应用于50例小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值
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作者 周东梅 《延边大学医学学报》 CAS 2018年第2期142-143,共2页
[背景]探讨RT-PCR法应用于小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值.[病例报告]采用随机的原则选取行小肠结肠炎耶尔森菌检验的腹泻患者100例(2017年4月—2018年4月),按照随机等量原则分为培养法组和RT-PCR法组,每组各为50例... [背景]探讨RT-PCR法应用于小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)检验的临床价值.[病例报告]采用随机的原则选取行小肠结肠炎耶尔森菌检验的腹泻患者100例(2017年4月—2018年4月),按照随机等量原则分为培养法组和RT-PCR法组,每组各为50例.两组分别应用相应方法进行检验,比较两组腹泻粪便中小肠结肠炎耶尔森菌的检查率.RT-PCR法组腹泻粪便中耶尔森菌的检查率显著高于培养法组(P〈0.05).[讨论]RT-PCR法检验小肠结肠炎耶尔森菌(腹泻粪便中)的临床价值较高,效果满意. 展开更多
关键词 耶尔森菌小肠结肠炎 培养法 RT-PCR法
紫苏叶提取物对肥胖小鼠的影响及作用机制 被引量:2
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作者 朴颖 费宏扬 权海燕 《中华中医药杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期3992-3996,共5页
目的:研究紫苏叶提取物(PFE)对高脂饲料诱导肥胖模型小鼠脂肪组织中脂肪生成及脂质合成相关基因表达的影响,探讨PFE影响脂肪脂质代谢的可能机制。方法:5周龄的雄性ICR小鼠,适应性喂养1周后,随机分为正常饲料(RD)组和高脂饲料(HFD)组,HFD... 目的:研究紫苏叶提取物(PFE)对高脂饲料诱导肥胖模型小鼠脂肪组织中脂肪生成及脂质合成相关基因表达的影响,探讨PFE影响脂肪脂质代谢的可能机制。方法:5周龄的雄性ICR小鼠,适应性喂养1周后,随机分为正常饲料(RD)组和高脂饲料(HFD)组,HFD+PFE(150、300mg/kg)组,每天灌胃给药1次,RD组灌服等量蒸馏水,每周测2次体质量,连续4周。实验结束后,分别称量内脏脂肪和附睾脂肪重量;检测血浆血糖、胰岛素、HOMA-IR指数、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、非游离脂肪酸(NEFA)、谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)。用Western blot法和RT-PCR法检测过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和CAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达。此外,检测脂肪合成转录因子SREBP1及其靶基因(FAS、SCD1、GPAT)的基因表达。结果:与HFD组比较,治疗4周后,PFE显著降低了小鼠体质量、内脏脂肪量及附睾脂肪量,血糖、胰岛素水平均显著下降,HOMA-IR也得到改善。血脂(TG、TC、NEFA)和肝功(s AST和s ALT)在给PFE后均显著降低。与RD组比较,脂肪生成转录因子PPAR-γ、C/EBPα和脂肪合成转录因子SREBP1及其靶基因在HFD组增强,而在PFE组上述基因表达均显著被抑制。结论:PFE通过抑制脂肪生成转录因子PPAR-γ、C/EBPα和脂肪合成转录因子SREBP1及其靶基因的表达来降低脂肪和体质量,调节脂肪组织脂质代谢。 展开更多
关键词 紫苏叶提取物 ICR小鼠 过氧化物酶体增殖物激活受体-Γ CCAT/增强子结合蛋白α SREBP1
神经型一氧化氮合酶在慢性心力衰竭患者血浆中的变化及其作用 预览 被引量:1
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作者 丁娜 刘文博 +2 位作者 崔兰 林梅花 金春子 《中国心血管病研究杂志》 CAS 2017年第9期787-791,I0002共6页
目的 探讨神经型一氧化氮合酶(nNOS)在慢性心力衰竭(CHF)患者血浆中的变化及其作用.方法 入选2015年11月至2016年4月就诊于延边大学附属医院的失代偿CHF患者共计234例,根据左室射血分数(LVEF)值不同分成3个组:A组(LVEF 20%~2... 目的 探讨神经型一氧化氮合酶(nNOS)在慢性心力衰竭(CHF)患者血浆中的变化及其作用.方法 入选2015年11月至2016年4月就诊于延边大学附属医院的失代偿CHF患者共计234例,根据左室射血分数(LVEF)值不同分成3个组:A组(LVEF 20%~29%)、B组(LVEF 30%~49%)、C组(LVEF≥50%);另根据年龄分为中老年组和老年组,均进行nNOS浓度比较.结果 ①三组患者血浆nNOS浓度比较,差异均有统计学意义[(87.7±6.6)U/L比(178.0±11.5)U/L比(142.6±8.8)U/L,P<0.05],其中A组患者血浆nNOS浓度明显低于B组[(87.7±6.6)U/L比(178.0±11.5)U/L,P<0.01];C组患者血浆nNOS浓度略低于B组[(178.0±11.5)U/L比(142.6±8.8)U/L,P<0.05];A组患者血浆nNOS浓度低于C组[(87.7±6.6)U/L比(142.6±8.8)U/L,P<0.05].②三组患者E峰值比较,差异均有统计学意义[(0.7±0.05)m/s比(0.9±0.03)m/s比(0.8±0.03)m/s,P<0.05],其中A组患者E峰值低于B组[(0.7±0.05)m/s比(0.9±0.03)m/s,P<0.05];C组患者E峰值略低于B组(0.8±0.03)m/s比(0.9±0.03)m/s,P<0.05);A组患者E峰值略低于C组[(0.7±0.05)m/s比(0.8±0.03)m/s,P<0.05].③中老年组与老年组比较,血浆nNOS浓度未见统计学差异(P>0.05).④用Spearman相关分析对血浆nNOS浓度与抗心衰药物之间的关系进行分析,血浆nNOS浓度与ACEI类、ARB类、地高辛和β-blocker呈正相关.结论 心力衰竭患者增加的神经型一氧化氮合酶是通过对E峰的调节来保护心功能的. 展开更多
关键词 神经型一氧化氮合酶 慢性心力衰竭 左室射血分数
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内质网应激信号通路在棕榈酸诱导的血管内皮细胞凋亡中的作用 预览 被引量:5
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作者 许文虎 金春子 +2 位作者 王晓龙 陈晨 崔兰 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2017年第12期1668-1672,共5页
目的探讨内质网应激(endoplasmicreticulumstress,ERS)信号通路在棕榈酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)凋亡中的作用。方法不同浓度(01、02、04、08mmol·L-1)棕榈酸刺激HUVECs(0、12、24... 目的探讨内质网应激(endoplasmicreticulumstress,ERS)信号通路在棕榈酸诱导的人脐静脉血管内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)凋亡中的作用。方法不同浓度(01、02、04、08mmol·L-1)棕榈酸刺激HUVECs(0、12、24、48h),CCK8法检测血管内皮细胞增殖能力;免疫印迹法检测血管内皮细胞GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6等ERS信号通路蛋白的表达水平;免疫荧光法检测细胞内凋亡水平。结果04mmol·L-1棕榈酸刺激血管内皮细胞24h,细胞增殖率明显降低;GRP78、CHOP、PERK、IRE1、ATF6等ERS信号通路蛋白的表达明显升高(P<005),细胞凋亡水平明显增高(P<005);ERS抑制剂4苯基丁酸(4PBA,10mmol·L-1)预处理组血管内皮细胞凋亡水平明显下调(P<005)。结论ERS信号通路在棕榈酸所致血管内皮细胞凋亡的防治中有重要意义。 展开更多
关键词 内质网应激 棕榈酸 血管内皮细胞 4苯基丁酸 人脐静脉血管内皮细胞 凋亡
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NADPH氧化酶在高脂诱导的人脐静脉血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用 预览 被引量:4
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作者 许文虎 金春子 +2 位作者 王晓龙 丛柏林 崔兰 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2017年第11期1574-1578,共5页
目的 探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤中的作用。方法 不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8mmol·L^-1)棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激HUVECs0、12、24... 目的 探讨NADPH氧化酶在高脂诱导的人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤中的作用。方法 不同浓度(0.1、0.2、0.4、0.8mmol·L^-1)棕榈酸(palmitic acid,PA)刺激HUVECs0、12、24、48h,CCK-8法检测血管内皮细胞增殖能力;免疫印迹法检测血管内皮细胞NADPH氧化酶亚基p22phox、p47phox、p67phox、gp91phox的表达水平;免疫荧光法检测血管内皮细胞细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)的表达水平。结果 0.4mmol·L^-1PA刺激HUVECs 24、48h组的细胞增殖率出现明显降低。因此,实验中我们采用0.4mmol·L^-1PA刺激24h作为模型组;0.4mmol·L^-1PA刺激HUVECs24、48h时,p22phox、p47phox、p67phox、gp91phox的表达均明显升高(P〈0.05),24h组与48h组差异不明显(P〉0.05);0.4mmol·L^-1PA刺激血管内皮细胞24、48h时,细胞内ROS表达水平均明显增高(P〈0.05),24h组与48h组差异不明显(P〉0.05);与模型组(0.4mmol·L^-1PA刺激24h)相比,NADPH氧化酶抑制剂diphenyliodonium(DPI,10μmol·L^-1)预处理可以使模型组血管内皮细胞ROS表达水平明显下调(P〈0.05)。结论 NADPH氧化酶活性对高脂所致血管内皮细胞氧化应激损伤的防治有重要意义。 展开更多
关键词 NADPH 高脂 棕榈酸 人脐静脉血管内皮细胞 氧化应激损伤 ROS
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恩替诺特对K562人慢性粒细胞白血病细胞株G0/G1细胞周期的影响
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作者 朴哲 林昌岫 马天泽 《延边大学医学学报》 CAS 2017年第1期15-17,共3页
[目的]探讨恩替诺特对K562人慢性粒细胞白血病细胞株G0/G1细胞周期的影响.[方法]采用CCK-8试剂盒观察恩替诺特对体外培养的K562人慢性粒细胞白血病细胞生长抑制的影响,并利用流式细胞仪检测细胞周期.[结果]CCK-8试剂盒观察结果显示,与... [目的]探讨恩替诺特对K562人慢性粒细胞白血病细胞株G0/G1细胞周期的影响.[方法]采用CCK-8试剂盒观察恩替诺特对体外培养的K562人慢性粒细胞白血病细胞生长抑制的影响,并利用流式细胞仪检测细胞周期.[结果]CCK-8试剂盒观察结果显示,与对照组比较,随着恩替诺特药物浓度的增加及作用时间的延长,K562细胞抑制率显著升高(P〈0.05).流式细胞仪分析结果显示,恩替诺特可使K562细胞阻滞于G0/G1期,且阻滞细胞的数量与药物浓度呈正相关(P〈0.05);恩替诺特作用48h时对细胞周期的阻滞作用最强.[结论]恩替诺特通过阻滞细胞周期于G0/G1期而抑制K562细胞增殖. 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 恩替诺特 K562 细胞周期
运动训练对高血压模型大鼠心脏功能的影响
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作者 朴艳虹 刘文博 +1 位作者 金春子 崔兰 《延边大学医学学报》 CAS 2017年第3期160-163,共4页
[目的]探讨运动训练对高血压模型大鼠心脏功能的影响.[方法]取健康雄性SD大鼠,随机分为非运动对照组(Sham)、运动组(Sham-ET)、高血压组(Ang-HT)和高血压运动组(Ang-ET).利用血管紧张素Ⅱ诱导建立大鼠高血压模型.采用多动物多... [目的]探讨运动训练对高血压模型大鼠心脏功能的影响.[方法]取健康雄性SD大鼠,随机分为非运动对照组(Sham)、运动组(Sham-ET)、高血压组(Ang-HT)和高血压运动组(Ang-ET).利用血管紧张素Ⅱ诱导建立大鼠高血压模型.采用多动物多通道尾袖套法无创血压系统监测大鼠血压值,心脏超声仪测定左心室射血分数(LVEF).分离心肌细胞,采用IonOptix单细胞收缩检测系统检测心肌细胞收缩性及肌丝钙敏感性.[结果]运动2周末(制作模型4周末)时,Ang-HT与Ang-ET组收缩压和舒张压间差异均有统计学意义(P〈0.05),Sham与Sham-ET组收缩压与舒张压间差异均无统计学意义(P〉0.05),Ang-HT与Ang-ET组LVEF及心肌细胞收缩性间差异均有统计学意义(P〈0.05),Ang-ET组EC50值较Ang-HT组明显缩短(P〈0.05).[结论]运动训练通过恢复心肌细胞肌丝钙离子敏感性而改善心肌细胞收缩性及心功能. 展开更多
关键词 左室射血分数 心肌细胞收缩性 运动训练 高血压 肌丝钙敏感性
自发性细菌性腹膜炎 预览
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作者 权海燕 《肝博士》 2017年第4期52-53,共2页
自发性细菌性腹膜炎(简称SBP),也称原发性腹膜炎,是指致病菌通过肠道、血液或淋巴系统引起的腹腔内感染,但急性胆囊炎坏疽穿孔、急性重症胰腺炎、肠穿孔等继发引起腹腔感染的情况(即继发性腹膜炎)需除外,它是肝硬化伴腹水患者... 自发性细菌性腹膜炎(简称SBP),也称原发性腹膜炎,是指致病菌通过肠道、血液或淋巴系统引起的腹腔内感染,但急性胆囊炎坏疽穿孔、急性重症胰腺炎、肠穿孔等继发引起腹腔感染的情况(即继发性腹膜炎)需除外,它是肝硬化伴腹水患者一种常见且严重的临床并发症。自发性腹膜炎一旦发生,若治疗不及时,则预后极差,死亡率极高。 展开更多
关键词 自发性细菌性腹膜炎 继发性腹膜炎 急性重症胰腺炎 原发性腹膜炎 肝硬化伴腹水 自发性腹膜炎 腹腔内感染 急性胆囊炎
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猪胚胎中差异表达基因检测方法的研究
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作者 马天泽 李华 林昌岫 《延边大学医学学报》 CAS 2016年第2期81-84,共4页
[目的]探讨不同检测方法检测猪胚胎中差异表达基因的效果.[方法]采用现行的ACPs differential display技术和改良的ACP方法检测人工授精和核移植猪胚胎中的差异表达基因.改良的ACP方法中第2次cDNA合成过程和DNA扩增过程在分开的步骤中执... [目的]探讨不同检测方法检测猪胚胎中差异表达基因的效果.[方法]采用现行的ACPs differential display技术和改良的ACP方法检测人工授精和核移植猪胚胎中的差异表达基因.改良的ACP方法中第2次cDNA合成过程和DNA扩增过程在分开的步骤中执行.[结果]采用现行的ACP方法无法获得真实扩增的DNA克隆,采用改良的ACP方法时获得了所愿的DNA克隆.[结论]在检测猪胚胎差异表达基因中改良的ACP方法较现行的ACP方法更为有效. 展开更多
关键词 差异表达基因 猪胚胎 核移植
延边地区341例慢性丙型肝炎病毒基因分型的检测临床观察 被引量:1
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作者 沈哲式 李香善 +2 位作者 张英哲 张美兰 金仁顺 《延边大学医学学报》 CAS 2015年第4期313-314,共2页
[背景]观察延边地区慢性丙型肝炎病毒(HCV)基因分型情况.[病例报告]采用荧光PCR法检测HCV RNA含量,并对含量≥104 U/mL的341例标本进行HCV基因分型检测.结果见,慢性HCV基因Ⅰ型阳性的朝鲜族和汉族分别为48,68例,阳性率分别为37.2%,32.... [背景]观察延边地区慢性丙型肝炎病毒(HCV)基因分型情况.[病例报告]采用荧光PCR法检测HCV RNA含量,并对含量≥104 U/mL的341例标本进行HCV基因分型检测.结果见,慢性HCV基因Ⅰ型阳性的朝鲜族和汉族分别为48,68例,阳性率分别为37.2%,32.1%,两者间差异无统计学意义(χ~2=0.942,P〉0.05);慢性HCV基因Ⅰ型阳性的男性和女性分别为97,19例,阳性率分别为36.7%,24.7%,两者间差异有统计学意义(χ~2=3.867,P〈0.05).[讨论]延边地区朝鲜族和汉族慢性HCV基因Ⅰ型感染阳性率间无明显差异,但性别间有显著差异. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 基因型 民族 性别
血管性血友病因子裂解酶对血管新生的抑制作用 被引量:1
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作者 金春海 王霜 +2 位作者 赵艳红 金圣宇 李华 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期602-606,共5页
目的 观察血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)对血管内皮细胞生长因子(VEGF)介导的血管新生的抑制作用.方法 以不同浓度的ADAMTS13(1、5、25、50、100 nmol/L)处理脐带静脉内皮细胞(HUVEC),采用MTT法检测ADAMTS13对HUVEC增殖的影... 目的 观察血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS13)对血管内皮细胞生长因子(VEGF)介导的血管新生的抑制作用.方法 以不同浓度的ADAMTS13(1、5、25、50、100 nmol/L)处理脐带静脉内皮细胞(HUVEC),采用MTT法检测ADAMTS13对HUVEC增殖的影响,通过管腔形成实验观察ADAMTS13对HUVEC分化的影响,通过刮伤愈合实验观察ADAMTS 13对HUVEC迁移的影响,利用鸡胚绒毛尿囊膜实验和基质胶塞实验观察ADAMTS13在体内对血管新生的影响.结果 与对照组相比,25、50、100 nmol/L ADAMTS13对HUVEC增殖均有明显的抑制作用(P值均<0.01).在刮伤愈合实验中,制造损伤8h后,对照组HUVEC的迁移距离为(79±22)μm,VEGF处理组为(250±8) μm,VEGF+ADAMTS13处理组为(170±23)μm,组间差异均有统计学意义(P值均<0.05).在管腔形成试验中,VEGF处理组、VEGF+ADAMTS13处理组HUVEC培养16h后形成的管状结构长度分别是对照组的(450.6±16.6)%、(235.3±19.0)%,VEGF+ ADAMTS13处理组管状结构少于VEGF处理组(P<0.001).鸡胚绒毛尿囊膜实验中,VEGF(20 ng/ml)、ADAMTS13(100 nmol/L)、ADAMTS13(100nmol/L) +VEGF(20 ng/ml)处理组的血管形成数量分别为对照组的(228.2±10.8)%、(69.2±21.1)%、(184.6±15.2)%.基质胶塞实验结果显示VEGF+ADAMTS13处理组小鼠体内的血管数量为VEGF组的43.5%.结论 体外实验结果表明ADAMTS13对HUVEC增殖、分化、迁移能力均有抑制作用;体内实验结果提示ADAMTS13对血管新生有抑制作用. 展开更多
关键词 von WILLEBRAND因子 血管生成抑制剂 内皮生长因子 人脐静脉内皮细胞
毛细管气象色谱法测定月见草油纳米乳中γ-亚麻酸的含量 被引量:2
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作者 李香善 魏显苹 金雪梅 《延边大学医学学报》 CAS 2014年第2期123-125,共3页
[目的]建立测定月见草油纳米乳中γ-亚麻酸含量的气相色谱方法.[方法]纳米乳破乳后进行甲酯化,采用毛细管气相色谱法测定γ-亚麻酸甲酯含量,再将其换算为样品中γ-亚麻酸的含量.以水杨酸甲酯为内标物,色谱柱为DB-WAX毛细管柱,载气为氮气... [目的]建立测定月见草油纳米乳中γ-亚麻酸含量的气相色谱方法.[方法]纳米乳破乳后进行甲酯化,采用毛细管气相色谱法测定γ-亚麻酸甲酯含量,再将其换算为样品中γ-亚麻酸的含量.以水杨酸甲酯为内标物,色谱柱为DB-WAX毛细管柱,载气为氮气,检测器为FID.[结果]γ-亚麻酸甲酯在质量浓度0.042 96-0.429 60g/L范围内时与峰面积比值呈良好的线性关系,R^2=0.999 8(n=7);平均回收率为96.99%,RSD为0.96%.[结论]毛细管气象色谱法可用于月见草油纳米乳中γ-亚麻酸含量的测定. 展开更多
关键词 月见草油纳米乳 Γ-亚麻酸 气相色谱法 内标法
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