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慢性酒精中毒大鼠在学习记忆方面差异基因的生物信息学分析
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作者 杜爱林 董家行 +4 位作者 侯佳宝 朱继文 秦浩志 罗晓秋 张瑞岭 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期1280-1291,共12页
借助基因芯片获取慢性酒精中毒大鼠海马相关基因的表达数据集,通过生物信息学的分析方法对差异表达基因进行筛选与分析。从分子水平揭示慢性酒精中毒对大鼠大脑海马体的影响,为慢性酒精中毒的损伤机制以及相关疾病发病机制的基础研究与... 借助基因芯片获取慢性酒精中毒大鼠海马相关基因的表达数据集,通过生物信息学的分析方法对差异表达基因进行筛选与分析。从分子水平揭示慢性酒精中毒对大鼠大脑海马体的影响,为慢性酒精中毒的损伤机制以及相关疾病发病机制的基础研究与临床治疗提供新的方向。同时,还通过Y迷宫实验对实验大鼠的学习记忆功能进行了检测,借助电镜拍摄其线粒体。结果显示,我们一共筛选出208个差异表达基因,其中51个表达上调,157个表达下调。其中涉及的主要信号通路有氧化磷酸化通路、D-谷氨酰胺和谷氨酸代谢通路、阿尔茨海默病信号通路、帕金森病信号通路、膀胱癌信号通路、B细胞受体信号通路和亨廷顿病信号通路等。由此我们得出结论,慢性酒精中毒可能影响了海马多个基因的表达,其中包括Rpsa、Wdr31、Rps11、Rps9、Ndufa2、Mrto4、Rpl6、Dap3、Ndufb8、Ndufb6、Ephb2、Cox6c、Prkcd、Rela、Raf1、Ubd、Mrps28、Mrpl35等关键基因,进而损伤了电子传递链复合体Ⅰ,最终损伤线粒体,导致大鼠学习记忆能力的损伤。 展开更多
关键词 慢性酒精中毒 生物信息学 差异表达基因 基因芯片 大鼠
丁苯酞对急性酒精中毒小鼠海马γ网络振荡的保护作用 预览
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作者 杜爱林 张越 +4 位作者 姚良雪 秦浩志 黄亚迪 张玉姣 罗晓秋 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期1139-1143,共5页
目的研究丁苯酞(NBP)对急性酒精中毒小鼠学习记忆能力、脑内海马CA3区γ网络振荡的保护作用。方法应用场电位记录30只C57BL/6小鼠(3月龄、6月龄、12月龄各10只)急性酒精中毒前后、NBP作用前后的海马γ网络振荡的幅值及频率变化。结果 10... 目的研究丁苯酞(NBP)对急性酒精中毒小鼠学习记忆能力、脑内海马CA3区γ网络振荡的保护作用。方法应用场电位记录30只C57BL/6小鼠(3月龄、6月龄、12月龄各10只)急性酒精中毒前后、NBP作用前后的海马γ网络振荡的幅值及频率变化。结果 100 mmol/L无水乙醇使不同月龄(3月龄,6月龄,12月龄)组小鼠海马脑片海马γ网络振荡的能谱分别下降(39. 26±4. 97)%、(53. 85±6. 65)%、(28. 30±13. 68)%,差异显著(P<0. 001)。100μmol/L NBP使不同月龄(3月龄,6月龄,12月龄)组急性酒精中毒小鼠海马脑片海马γ网络振荡的能谱分别上升(57. 37±8. 94)%、(107. 82±18. 67)%、(47. 82±7. 26)%,差异有统计学意义(P<0. 001)。结论 NBP能够有效减轻急性酒精中毒对小鼠海马CA3区神经元造成的损伤,缓解急性酒精中毒对小鼠学习记忆能力的损害,其作用机制可能与NBP对神经元突触传递及线粒体的保护作用有关。 展开更多
关键词 急性酒精中毒 丁苯酞 γ网络振荡 学习记忆能力
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P2X7R介导的神经炎症在神经精神疾病中的作用 预览
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作者 黄亚迪 杨坤丽 +2 位作者 李雪盼 贾肖扬 李东亮 《医学综述》 2019年第6期1070-1075,共6页
嘌呤能P2X7受体(P2X7R)是腺苷三磷酸门控阳离子通道受体,作为嘌呤受体P2X家族受体亚型之一,主要由各种免疫细胞表达。P2X7R及其介导的信号通路可触发炎症反应的激活,具有介导先天免疫反应的重要作用。中枢神经系统的炎症反应能激活小胶... 嘌呤能P2X7受体(P2X7R)是腺苷三磷酸门控阳离子通道受体,作为嘌呤受体P2X家族受体亚型之一,主要由各种免疫细胞表达。P2X7R及其介导的信号通路可触发炎症反应的激活,具有介导先天免疫反应的重要作用。中枢神经系统的炎症反应能激活小胶质细胞,从而导致白细胞介素1β等炎性因子的释放,这些炎性因子促使组织变性、损伤及细胞的死亡。目前认为,神经炎症是神经退行性疾病、精神疾病和各种脑损伤的病理进程中的重要一环,也就成为人们试图干预这些疾病落脚点。 展开更多
关键词 神经精神疾病 小胶质细胞 神经炎症 嘌呤能P2X7受体 白细胞介素1Β
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氨基羟乙酸对慢性酒精中毒大鼠学习记忆的影响及可能的机制 预览
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作者 秦浩志 姜洪波 +4 位作者 代玄 黄亚迪 罗晓秋 张瑞岭 杜爱林 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期485-489,582共6页
目的:探究氨基羟乙酸(AOAA)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力及可能机制的影响。方法:将60只SD雄性大鼠随机均分为3组(n=20):空白对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组饮含6%(v/v)酒精水溶液28 d。14 d后,治疗组连续14 d腹腔注射AOAA(... 目的:探究氨基羟乙酸(AOAA)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力及可能机制的影响。方法:将60只SD雄性大鼠随机均分为3组(n=20):空白对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组饮含6%(v/v)酒精水溶液28 d。14 d后,治疗组连续14 d腹腔注射AOAA(5 mg/kg·d)注射液,其余两组注射等量生理盐水。实验结束前5d连续进行5 d的水迷宫实验,实验结束取大鼠海马组织检测H2S含量、线粒体ATP酶活性及5-HT受体蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠水迷宫实验的第2~4日潜伏期、第2~4日游泳距离、H2S含量均升高,ATP酶活性和海马CA1、CA3区5-HT受体阳性表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,治疗组大鼠第2~4日潜伏期、第2~4日游泳距离、H2S含量均下降,ATP酶活性和海马CA1、CA3区5-HT受体阳性表达显著升高(P<0.01)。结论:AOAA能够减轻慢性酒精中毒大鼠的症状,可能与AOAA影响H2S的含量、线粒体酶活性、5-HT受体的含量有关。 展开更多
关键词 氨基羟乙酸 慢性酒精中毒 大鼠 海马 学习记忆能力
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ATP处理导致PC12细胞通透性变化及NaHS的干预作用
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作者 沈慧 马洁 +7 位作者 王国红 王璐 李新娟 张利彬 魏琳郁 李超堃 赵红岗 李东亮 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期184-190,共7页
目的:观察NaHS(H2S供体)对ATP(三磷酸腺苷)诱导的PC12细胞存活率及膜通透性变化的影响,探讨H2S对抗ATP致伤作用的可能机制。方法:高分化PC12细胞置于含有高浓度ATP的培养基中3 h制备细胞损伤模型。在ATP处理前30 min,把NaHS或CBX... 目的:观察NaHS(H2S供体)对ATP(三磷酸腺苷)诱导的PC12细胞存活率及膜通透性变化的影响,探讨H2S对抗ATP致伤作用的可能机制。方法:高分化PC12细胞置于含有高浓度ATP的培养基中3 h制备细胞损伤模型。在ATP处理前30 min,把NaHS或CBX(生胃酮,Pannxin-1通道阻滞剂)加入培养基中,作为预处理。用CCK-8检测细胞存活率,Fura-2/AM荧光染料检测细胞[Ca~(2+)]i,YO-PRO-1或Lucifer Yellow(荧光黄)荧光染料检测RFU(胞内相对荧光单位),研究NaHS干预后细胞存活率和膜通透性的变化。结果:ATP(3、5mmol/L)处理使PC12细胞存活显著降低,NaHS(200μmol/L)和CBX(10μmol/L)预处理均可显著拮抗ATP(3 mmol/L)诱导的细胞存活率下降。ATP(3、5 mmol/L)可使PC12细胞内[Ca~(2+)]i明显增加,而NaHS(200μmol/L)和CBX(10μmol/L)预处理可使ATP(3 mmol/L)诱导的胞内[Ca~(2+)]i的增幅明显降低。ATP(3、5mmol/L)使PC12细胞对YO-PRO-1和Lucifer Yellow通透明显增加,而NaHS(200μmol/L)和CBX(10μmol/L)预处理可显著阻遏ATP诱导的膜通透性增加。结论:Pannxin-1蛋白在ATP诱导PC12细胞膜孔形成中有重要作用,干预膜孔形成可能是NaHS拮抗ATP损伤作用的机制之一。 展开更多
关键词 ATP 硫化氢 Pannxin-1 PC12细胞 CBX
肌醇磷酸酶-1与宫内感染小鼠海马神经炎性反应引起认知障碍的关系
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作者 李多多 程远 +1 位作者 李振晓 朱凤莲 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第11期850-853,共4页
目的探讨肌醇磷酸酶-1(SHIP-1)与宫内感染小鼠海马神经炎性反应引起认知障碍之间的关系。方法30只C57BL/6雌鼠与15只雄鼠以21合笼,孕鼠均分为宫内感染模型组脂多糖(LPS组)和对照组,LPS组于孕13.5 d尾静脉注射LPS 350 μg/kg制... 目的探讨肌醇磷酸酶-1(SHIP-1)与宫内感染小鼠海马神经炎性反应引起认知障碍之间的关系。方法30只C57BL/6雌鼠与15只雄鼠以21合笼,孕鼠均分为宫内感染模型组脂多糖(LPS组)和对照组,LPS组于孕13.5 d尾静脉注射LPS 350 μg/kg制备宫内感染模型,对照组注射等量9 g/L盐水。孕鼠产后3 d,各组分别取15只新生鼠处死,分离海马组织提取蛋白,采用Western blot法检测海马组织中SHIP-1、核因子-κB(NF-κB)p65、NF-κB磷酸化(NF-κBp)的蛋白水平,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测海马组织中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平。待剩余小鼠8周龄时(各15只),行Morris水迷宫实验、定位航行和空间探索实验,评估小鼠是否存在认知障碍。结果对照组小鼠海马组织中SHIP-1蛋白表达(0.677±0.074)明显高于LPS组(0.317±0.095),而NF-κB p65及NF-κBp蛋白表达(0.630±0.109、0.352±0.084)则明显低于LPS组(1.028±0.029、1.080±0.113),差异均有统计学意义(t=2.984、3.516、5.161,P=0.041、0.025、0.007);LPS组海马组织中炎性因子IL-1β和TNF-α的表达[(5.875±0.349) pg/mg、(14.256±0.784) pg/mg]明显高于对照组[(1.621±0.151) pg/mg、(3.984±0.255) pg/mg],差异均有统计学意义(t=11.190、12.460,P=0.000、0.000)。LPS组小鼠学习能力[逃避潜伏期1~6 d分别为(58.286±1.418) s、(56.036±2.252) s、(55.071±1.856) s、(50.071±3.251) s、(52.893±2.372) s、(46.929±3.761) s]明显高于对照组[逃避潜伏期1~6 d分别为(53.679±2.413) s、(47.571±3.529) s、(54.071±2.777) s、(47.250±2.864) s、(45.107±3.447) s、(42.393±3.463) s],差异有统计学意义(F=4.466,P=0.001)。空间探索实验结果:LPS组在第1次进入平台SE象限的潜伏时间[(44.080±6.313) s]明显长于对照组[(25.900±6.033) s],而停留在平� 展开更多
关键词 宫内感染 肌醇磷酸酶-1 认知障碍
Beclin-1 shRNA对低氧诱导的SH-SY5Y细胞自噬的影响 预览
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作者 卢娜 李成长 +1 位作者 罗晓秋 杨坤丽 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期464-469,共6页
目的:构建Beclin-1基因短发夹干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,感染人SH-SY5Y细胞,观察沉默Beclin-1基因后低氧对SH-SY5Y细胞自噬的影响。方法:构建特异性靶向Beclin-1基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体;再将载体转染入SH-S... 目的:构建Beclin-1基因短发夹干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,感染人SH-SY5Y细胞,观察沉默Beclin-1基因后低氧对SH-SY5Y细胞自噬的影响。方法:构建特异性靶向Beclin-1基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体;再将载体转染入SH-SY5Y细胞;RT-PCR检测Beclin-1的mRNA表达;Western blot检测Beclin-1蛋白表达;CCK-8法测定Beclin-1 shRNA对SH-SY5Y细胞活力的影响。再将空白对照、阴性对照、转染型三种细胞分别以21%常氧及5%低氧培养,Western blot检测各组细胞LC3蛋白表达;电镜观察自噬小体。结果:Beclin-1 shRNA能明显抑制SH-SY5Y细胞Beclin-1的mRNA及蛋白的表达;沉默Beclin-1基因后,Beclin-1 shRNA组细胞存活率与阴性对照组相比无差异;成功建立了稳定表达Beclin-1 shRNA的SH-SY5Y细胞。5%低氧处理后,与阴性对照组相比较,Beclin-1 shRNA组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下调,细胞内自噬小体数量减少。结论:慢病毒介导的Beclin-1shRNA对SH-SY5Y细胞的活力无影响,但可以抑制低氧诱导的自噬。 展开更多
关键词 SH-SY5Y BECLIN-1 自噬 短发夹RNA
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刺五加注射液对脑缺氧大鼠学习记忆能力和海马组织中纤维状肌动蛋白的影响 预览
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作者 张越 秦浩志 +4 位作者 王婷 牛源 葛瑶 乔立雪 杜爱林 《中华诊断学电子杂志》 2018年第4期272-276,共5页
目的 探讨刺五加注射液(ASI)对脑缺氧大鼠学习记忆的影响。 方法 将36只SD雄性大鼠进行编号,采用随机数字表法分为3组,剔除不适应环境的大鼠后余24只大鼠,模型组(颈动脉注射栓塞液, n=8)和治疗组(颈动脉注射栓塞液, n =8),... 目的 探讨刺五加注射液(ASI)对脑缺氧大鼠学习记忆的影响。 方法 将36只SD雄性大鼠进行编号,采用随机数字表法分为3组,剔除不适应环境的大鼠后余24只大鼠,模型组(颈动脉注射栓塞液, n=8)和治疗组(颈动脉注射栓塞液, n =8), 正常对照组(颈动脉注射等剂量生理盐水, n=8)。模型组和治疗组通过颈外动脉逆行穿刺插管注入栓塞液,使其进入颅内,制作大鼠脑缺氧模型;3 d后,治疗组腹腔注射90 mg/(kg·d)刺五加注射液,每日1次,连续7 d,正常对照组和模型组每日腹腔注射等剂量生理盐水。结束后利用水迷宫实验,通过比较各组大鼠4 d的潜伏期和游泳距离,测试大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织中纤维状肌动蛋白(f-actin)的表达情况。潜伏期、游泳距离及f-actin光密度值采用单因素方差分析进行组间比较, 两两比较采用LSD法。 结果 大鼠第1~4天潜伏期, 正常对照组大鼠分别为(48.31±17.13)s、(30.25± 16.02)s 、(24.25±14.87)s和(14.09±9.06)s, 模型组大鼠分别为(54.94±13.09)s、(48.85±17.21)s、(38.41±21.01)s和(26.13± 15.82)s,治疗组大鼠分别为(52.28±14.95)s、(36.66±16.90)s、(28.38±15.83)s和(17.03± 12.14)s , 3组 比较均差异有统计学意义( F =10.29,48.19,156.64,168.74;均 P <0.05)。第1~4天游泳距离,正常对照组大鼠分别为(925.54±98.69)cm、(594.47±117.33)cm、(382.38±71.17)cm和 (226.58± 23.82)cm ,模型组大鼠分别为(1 033.61±125.20)cm、(902.09±145.52)cm、(698.86± 121.05)cm和 (467.27± 107.18)cm ,治疗组大鼠分别为(930.36±124.51)cm、(662.17±145.40)cm、(412.42±73.98)cm和 (233.36± 32.48)cm,3组比较均差异有统计学意义( F =27.30,10.21,5.58, 7.88; 均 P <0.05)。海马组织中 f-actin蛋 白免疫组化阳性表达,正常对� 展开更多
关键词 刺五加属 缺氧 肌动蛋白 学习记忆能力 大鼠
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洛贝林对小鼠空间学习记忆能力的影响 预览
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作者 黄河 李成长 +3 位作者 王然 訾丹丹 葛校永 张云鹏 《齐齐哈尔医学院学报》 2017年第2期139-141,共3页
目的研究洛贝林对小鼠空间学习记忆能力的影响。方法 18只小鼠被随机分为洛贝林组和对照组,洛贝林组9只,对照组9只。洛贝林组按3 mg/kg的剂量腹腔注射洛贝林溶液,对照组注射同体积的纯水。用Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力。... 目的研究洛贝林对小鼠空间学习记忆能力的影响。方法 18只小鼠被随机分为洛贝林组和对照组,洛贝林组9只,对照组9只。洛贝林组按3 mg/kg的剂量腹腔注射洛贝林溶液,对照组注射同体积的纯水。用Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力。定位航行实验和反向学习实验中,小鼠寻找水下平台的游泳路程作为评价其学习记忆功能的指标。空间探索实验中,小鼠到水下平台的平均距离以及小鼠进入目标象限的频率作为评价学习记忆功能的指标。结果定位航线实验各时间点洛贝林组小鼠游泳路程比对照组长,但无统计学意义(P〉0.05)。空间探索实验阶段用小鼠距离水下平台的平均距离和进入目标象限的频率在两组小鼠间都无统计学意义(P〉0.05)。反向学习各时间点两组小鼠游泳路程差异无统计学意义(P〉0.05)。结论剂量为3 mg·kg-1的洛贝林短期给药对小鼠空间学习能力没有影响。 展开更多
关键词 洛贝林 MORRIS水迷宫 学习记忆
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孕酮减轻ATP诱导的SH-SY5Y细胞损伤 预览
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作者 李秀娟 沈慧 +8 位作者 魏林郁 王国红 张利彬 李超堃 李新娟 王璐 赵红岗 宋景贵 李东亮 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期1587-1592,共6页
目的:探讨孕酮对抗腺苷三磷酸(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用和机制。方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞按照孕酮或ATP浓度的不同进行分组,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Fluo-3染色... 目的:探讨孕酮对抗腺苷三磷酸(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞损伤的神经保护作用和机制。方法:取对数生长期的SH-SY5Y细胞按照孕酮或ATP浓度的不同进行分组,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Fluo-3染色检测细胞内Ca~(2+)浓度的变化,Western blot法检测嘌呤能P2X_7受体表达的变化。结果:与对照组相比,不同浓度(1、3、5和7 mmol/L)ATP作用2 h,SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P〈0.05),细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度明显增加(P〈0.05),且呈剂量依赖性。浓度为3、10和30 nmol/L的孕酮预孵育30 min可减轻ATP损伤作用,细胞存活率较单纯ATP组明显升高(P〈0.05或P〈0.01)。孕酮(30nmol/L)或P2X_7受体拮抗剂KN-62(500 nmol/L)预孵育30 min均可显著抑制ATP诱导的胞内YO-PRO-1的荧光增强(P〈0.01),而孕酮和KN-62两者之间没有明显差异。正常组细胞内钙离子含量少,ATP组细胞内钙离子荧光强度较对照组明显增高(P〈0.05),孕酮(30 nmol/L)或KN-62(500 nmol/L)预孵育30 min可明显降低(P〈0.05)ATP诱导的胞内钙荧光增强,而孕酮和KN-62两者之间的作用无明显差异。ATP组SH-SY5Y细胞P2X_7受体表达较对照组明显增加(P〈0.05),而孕酮(30 nmol/L)预孵育30 min则可显著降低ATP诱导的P2X_7受体表达(P〈0.05)。结论:孕酮可抑制ATP诱导的P2X_7受体表达、膜孔形成和胞内Ca~(2+)升高,降低细胞死亡率,明显减轻高浓度ATP对SH-SY5Y细胞的损伤作用。 展开更多
关键词 孕酮 腺苷三磷酸 嘌呤能P2X7受体 SH-SY5Y细胞
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NaHS对ATP诱导大鼠小胶质细胞P2X受体表达的影响 预览
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作者 马洁 郭康 +5 位作者 吕林亚 李新娟 王璐 魏林郁 赵红岗 李东亮 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第6期519-523,共5页
目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对ATP致伤的大鼠小胶质细胞细胞活力、细胞膜通透性及P2X_7受体表达的影响。方法:实验取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞,随机分4组,每组设3个复孔。(1)正常对照组:常... 目的:观察硫化氢(H_2S)供体硫氢化钠(Na HS)对ATP致伤的大鼠小胶质细胞细胞活力、细胞膜通透性及P2X_7受体表达的影响。方法:实验取对数期形态结构及生长分化良好的大鼠小胶质细胞,随机分4组,每组设3个复孔。(1)正常对照组:常规培养,不进行ATP处理。(2)ATP组:接种细胞24 h后ATP处理。(3)NaHS+ATP组:Na HS预先孵育30 min后再用ATP处理,并且Na HS始终存在于反应体系中。(4)KN-62(P2X_7受体阻断剂)+ATP组:KN-62预先孵育30 min,其余同Na HS+ATP组。MTT检测各组细胞活力,荧光染料YO-PRO-1检测各组相对荧光单位(RFU)反映膜的通透性,Western blot检测各组P2X_7受体表达水平。结果:(1)与对照组相比,不同浓度的ATP(1、3、5、10 mmol/L)作用3 h均可明显降低大鼠小胶质细胞活力,Na HS(200μmol/L)干预后大鼠小胶质细胞活力较ATP组明显增加(P〈0.01),但Na HS达400μmol/L浓度时,其保护作用未进一步增加。(2)随着ATP浓度的增加,大鼠小胶质细胞内YO-PRO-1的荧光强度显著增加,Na HS预处理可明显减少细胞对YO-PRO-1的摄取(P〈0.01)。(3)ATP(3 mmol/L)能上调P2X_7受体蛋白表达水平,而Na HS(200μmol/L)预孵育则可明显抑制ATP引起的P2X_7受体蛋白表达的上调(P〈0.01)。结论:Na HS可减少ATP致伤的大鼠小胶质细胞的P2X_7受体表达、降低通透性、增加细胞活力,提示调控P2X_7受体的表达和功能可能是H_2S神经保护作用的重要环节。 展开更多
关键词 三磷酸腺苷 嘌呤能P2X7受体 大鼠小胶质细胞 NaHS
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便秘小鼠结肠肌的电生理变化 预览
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作者 姜洪波 杜爱林 +6 位作者 刘伯语 张越 孙莉莉 黄静静 张瑞岭 罗晓秋 许予明 《中国老年学杂志》 北大核心 2017年第11期2641-2642,共2页
目的 观察便秘小鼠结肠肌的电生理变化。方法 用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘模型,然后测定其小肠结肠段的肌电,并分析其电生理活动变化。结果 与对照组比较,便秘组慢波肌电频率明显增快(P〈0.01);结肠肌电慢波频率的变... 目的 观察便秘小鼠结肠肌的电生理变化。方法 用复方地芬诺酯混悬液对小鼠进行灌胃建立便秘模型,然后测定其小肠结肠段的肌电,并分析其电生理活动变化。结果 与对照组比较,便秘组慢波肌电频率明显增快(P〈0.01);结肠肌电慢波频率的变异系数明显增大(P〈0.01);结肠肌电慢波振幅明显减少(P〈0.01);结肠肌电慢波振幅变异系数明显增大(P〈0.01)。结论 便秘小鼠结肠肌电慢波频率及振幅的异常改变可能是导致结肠传输减慢的重原因。 展开更多
关键词 便秘 肌电 结肠
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P2X7受体阻断剂对三磷腺苷诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^2+水平的影响 预览
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作者 李秀娟 王国红 +6 位作者 张利彬 杨坤丽 李超堃 王璐 宋景贵 赵红岗 李东亮 《新乡医学院学报》 CAS 2017年第7期555-559,共5页
目的观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^2+水平变化的特点,并探讨P2X7受体阻断剂对其的影响。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10%胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积... 目的观察三磷腺苷(ATP)诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞内Ca^2+水平变化的特点,并探讨P2X7受体阻断剂对其的影响。方法取对数生长期的SH-SY5Y细胞接种于含体积分数10%胎牛血清高糖达尔伯克改良伊格尔培养基(DMEM)中,在37℃、体积分数5%CO2培养箱中培养24 h,随机分为4组,分别加入含0、1、3、5 mmol·L^-1ATP的培养液,每孔100μL,各组均分别作用15、30、60 min,然后用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluo-3/AM染细胞内Ca^2+,Hoechst 33258染细胞核。荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度。另取对数生长期的SH-SY5Y细胞悬液接种于含体积分数10%胎牛血清高糖DMEM的96孔板中,在37℃、体积分数5%CO2培养箱中培养24 h,随机分为正常对照组、ATP组及KN-62低、中、高剂量组,正常对照组细胞在每孔100μL培养液中常规培养,ATP组细胞在每孔100μL含5 mmol·L^-1ATP的培养液中培养,KN-62低、中、高剂量组细胞分别每孔先用100μL含100、500、1 000 nmol·L^-1KN-62的培养液孵育30 min,每孔再用100μL的5 mmol·L^-1ATP培养液处理1 h,用Hank's溶液洗涤细胞3次,Fluro-3/AM染色细胞内Ca^2+,Hoechst 33258染色细胞核。荧光显微镜下观察细胞内荧光发射强度变化,图像分析软件记录结果,测每组细胞中Ca^2+的平均荧光强度。每次实验每组设3个平行复孔,实验重复3次。结果0 mmol·L^-1ATP组呈现荧光的细胞数量少,荧光强度弱;1、3、5 mmol·L^-1ATP组随着ATP剂量增加,呈现荧光的细胞数量逐渐增多,荧光强度逐渐增强;若ATP剂量相同,则随着ATP作用时间的延长,呈现荧光的细胞数量逐渐增多,荧光强度逐渐增强。正常对照组、ATP组、KN-62低、中、高剂量组细胞荧光强度分别为468.24±45.67、3 292.35±159.64、3 013.27±321.42、2 515.77±320.98、2 486.32±318.31,ATP组细胞平均荧光强度显著强于正常对照组(P〈0.05);KN-62低、中、高剂量组细胞平均荧光强度均低于 展开更多
关键词 三磷腺苷 人神经母细胞瘤 SH-SY5Y细胞 Ca^2+ P2X7受体
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H_2S对ATP诱导小胶质细胞活化的影响
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作者 王娇娇 马洁 +3 位作者 李超堃 李璐 宋景贵 李东亮 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期543-548,共6页
目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放的调节,并探讨小胶质细胞条件培养基对神经元样细胞凋亡的影响。方法:选定的大鼠小胶质细胞随机分4组:(1)正... 目的:研究硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)诱导大鼠小胶质细胞炎性因子释放的调节,并探讨小胶质细胞条件培养基对神经元样细胞凋亡的影响。方法:选定的大鼠小胶质细胞随机分4组:(1)正常对照组:常规培养;(2)ATP组:细胞接种24 h后用ATP处理;(3)Na HS(sodium hydrosulfide,H_2S供体)+ATP组:ATP处理前用Na HS预孵育30 min,且Na HS始终存在于反应体系中;(4)KN-62(异喹啉衍生物,嘌呤受体拮抗剂)+ATP组:ATP处理前用KN-62预孵育30 min。用ELISA检测各组细胞上清液中TNF-α、IL-6的变化,用Western Blot检测各组丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)P38和JNK表达水平。用人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)研究条件培养基对神经元的影响,其方法与上述大鼠小胶质细胞处理相同。用倒置显微镜观察SH-SY5Y细胞形态变化及凋亡情况,用MTT法检测各组细胞活力。结果:当ATP浓度3 mmol/L时,大鼠小胶质细胞释放TNF-α和IL-6水平增加(P〈0.05),同时上调大鼠小胶质细胞p-P38、p-JNK蛋白表达水平(P〈0.05)。当ATP浓度5 mmol/L时,小胶质细胞活化后的条件培养基可以使SH-SY5Y细胞形态发生改变,其细胞活力降低(P〈0.05)。ATP引起的上述变化可以通过Na HS预处理而逆转(P〈0.05),其作用与P2X7R阻断剂KN-62相类似。结论:H_2S可下调被ATP诱导的p-P38和pJNK MAPK蛋白表达,减少TNF-α和IL-6等炎性因子的释放,从而对神经元产生保护作用。 展开更多
关键词 硫化氢 三磷酸腺苷 P2X7嘌呤受体 丝裂原活化蛋白激酶
响应面试验优化动物源性食品中呋喃西林代谢物ELISA检测的衍生条件 预览 被引量:1
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作者 彭宏威 白瑞樱 +6 位作者 陈殿 孙远明 徐振林 曾道平 李段 伍志权 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期287-294,共8页
利用响应面法优化酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测呋喃西林代谢物前处理的衍生条件。根据Box-Behnken试验设计原理,在单因素试验基础上,以呋喃西林代谢物回收率为响应值,应用响应面分析法研究衍生剂... 利用响应面法优化酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)检测呋喃西林代谢物前处理的衍生条件。根据Box-Behnken试验设计原理,在单因素试验基础上,以呋喃西林代谢物回收率为响应值,应用响应面分析法研究衍生剂体积、衍生剂浓度、衍生温度和衍生时间各因素间的交互作用及对呋喃西林代谢物回收率的影响。最终确定ELISA方法线性检测范围为0.13~10.51ng/mL,IC50为1.17ng/mL;在选取样品质量为2g时,最佳衍生条件为衍生剂体积415μL、衍生剂浓度15mmol/L、衍生温度57℃、衍生时间50min,实际回收率为98.57%~103.76%;衍生产物与呋喃西林原药交叉反应率为7.63%,与其他结构类似物、功能类似物及衍生剂交叉反应率均小于0.17%;加标回收率为93.45%~103.21%,批内变异系数为1.86%~6.15%,批间变异系数为3.88%~8.84%。该衍生条件高效,检测方法准确可靠,适用于动物源性食品中呋喃西林代谢物的快速筛查。 展开更多
关键词 呋喃西林代谢物 衍生条件 响应面法 动物源性食品 酶联免疫吸附法
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卓越医生班生理学立体化探究教学的探索与实践 预览
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作者 卢娜 赵文慧 +1 位作者 罗晓秋 杜爱林 《基础医学教育》 2017年第5期335-337,共3页
在卓越医生班课程学习中探索和实践了立体化探究教学的教改模式,摈弃以教师为中心,确立以学生为主体的现代教育观,引导学生在课堂讨论、网络教学及第二课堂活动中养成自主学习的习惯,培育创新精神,激发了学生的学习积极性、主动性,提高... 在卓越医生班课程学习中探索和实践了立体化探究教学的教改模式,摈弃以教师为中心,确立以学生为主体的现代教育观,引导学生在课堂讨论、网络教学及第二课堂活动中养成自主学习的习惯,培育创新精神,激发了学生的学习积极性、主动性,提高了学生的动手能力、思维能力、信息获取能力和创新能力。 展开更多
关键词 生理学 探究教学 卓越医生班 自主学习
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雷帕霉素减轻氧糖剥夺对SH-SY5Y细胞的损伤 预览
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作者 卢娜 魏林郁 +3 位作者 王宝英 李璐 杨坤丽 李东亮 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期104-109,共6页
目的:观察雷帕霉素(Rapa)对氧糖剥夺(OGD)的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的影响,并探讨自噬在其中的作用。方法:SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组(常规培养,不进行OGD处理)、Rapa组、OGD组(无糖培养基、1%O2的三气培养箱内孵... 目的:观察雷帕霉素(Rapa)对氧糖剥夺(OGD)的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的影响,并探讨自噬在其中的作用。方法:SH-SY5Y细胞随机分为4组:正常对照组(常规培养,不进行OGD处理)、Rapa组、OGD组(无糖培养基、1%O2的三气培养箱内孵育细胞12 h)和Rapa+OGD组。进行形态学观察;MTT法检测细胞活力;乳酸脱氢酶(LDH)漏出率判断细胞损伤的程度;caspase-3活性检测试剂盒检测酶活性;原位末端标记(TUNEL)法检测凋亡水平;Western blot法检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2、自噬标志蛋白LC3B-Ⅱ及自噬调控蛋白beclin-1的表达。结果:与OGD组相比,Rapa+OGD组的细胞存活率明显升高(P〈0.05),LDH漏出率及caspase-3酶活性明显降低(P〈0.05)。TUNEL染色观察结果显示,与OGD组相比,Rapa+OGD组的细胞凋亡明显减少(P〈0.05);Western blot实验结果显示Rapa+OGD组的Bcl-2、beclin-1及LC3B-Ⅱ蛋白的表达水平显著高于OGD组(P〈0.05),而Bax蛋白水平明显低于OGD组(P〈0.05)。结论:Rapa对OGD损伤的SH-SY5Y细胞具有保护作用,其机制可能与上调beclin-1蛋白、激活自噬有关。 展开更多
关键词 雷帕霉素 SH-SY5Y细胞 氧糖剥夺 自噬
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H2S抑制高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡与P2X7受体的相关性研究
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作者 李璐 王娇娇 +7 位作者 杨坤丽 李超堃 王国红 李新娟 魏林郁 卢娜 赵红岗 李东亮 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期123-130,共8页
目的:研究H2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用和可能的机制.方法:人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞、HEK 293和HEK 293-hP2X7R细胞,分为对照组,NaHS组,KN-62组,ATP组,ATP+ NaHS组和ATP+ KN-62组.倒置显微镜观察细胞形态变化,C... 目的:研究H2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用和可能的机制.方法:人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞、HEK 293和HEK 293-hP2X7R细胞,分为对照组,NaHS组,KN-62组,ATP组,ATP+ NaHS组和ATP+ KN-62组.倒置显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活力,Hoechst 33258核染色分析细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western Blot和RT-PCR法分别检测Caspase-3、Bcl-2在蛋白和mRNA水平的表达.结果:与对照组比较,6 mmoL/L ATP处理3h后SH-SY5Y细胞损伤明显,活力降低至62.7%±3.8%(P<0.01),而凋亡率升高至30.75%±5.1% (P <0.01).与ATP组比较,用200μmol/L NaHS和500 nmol/L KN-62预处理30 min,SH-SY5Y细胞活力分别升高至90.1%±3.8%和84.6%±3.1%(P<0.05),凋亡率则分别降低至14.73%±3.4%和18.32%±3.1%(P<0.01).ATP组SH-SY5Y细胞内Caspase-3表达上调,Bcl-2表达下调,但NaHS和KN-62可抑制Caspase-3表达,促进Bcl-2表达.与对照组和HEK293细胞比较,用2 mmol/L ATP分别处理HEK 293、HEK 293-hP2X7R细胞3h,可见HEK 293-hP2X7R细胞内Caspase-3表达上调(P<0.01).与ATP组比较,200 μmol/L NaHS预处理30 min,HEK 293-hP2X7R细胞内Caspase-3表达明显下调(P<0.01).HEK 293细胞Caspase-3表达在各组无差异(P>0.05).结论:H2S对高浓度ATP诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有抑制作用,且呈浓度依赖性,其作用机制可能与P2X7R相关. 展开更多
关键词 硫化氢 凋亡 P2X7受体 神经系统疾病
探讨5-HT在睡眠/觉醒周期中的作用 预览 被引量:1
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作者 王桂叶 杨坤丽 李东亮 《中国继续医学教育》 2017年第5期198-200,共3页
五-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)能神经元在中枢神经系统广泛存在,目前对其参与的众多生理功能研究较多,其中在睡眠/觉醒周期调节方面研究也很深入。现就其在睡眠和觉醒两方面的作用进行探讨。
关键词 5-HT 安静觉醒 运动觉醒 慢波睡眠 快速眼球运动睡眠
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慢性酒精暴露后不同戒断时间点大鼠纹状体NMDA受体2B亚基表达的变化 被引量:4
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作者 张艳青 张利彬 +3 位作者 张彦婷 徐亚辉 杜爱林 张瑞岭 《中华行为医学与脑科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期778-783,共6页
目的观察慢性酒精暴露后Wistar大鼠不同戒断时间点纹状体NMDA受体2B亚基(NMDA receptor 2B subunit,NR2B)表达的变化。方法72只雄性Wistar大鼠,按照完全随机法分为戒断2h组、戒断6h组、戒断12h组、戒断1d组、戒断3d组和正常对照组... 目的观察慢性酒精暴露后Wistar大鼠不同戒断时间点纹状体NMDA受体2B亚基(NMDA receptor 2B subunit,NR2B)表达的变化。方法72只雄性Wistar大鼠,按照完全随机法分为戒断2h组、戒断6h组、戒断12h组、戒断1d组、戒断3d组和正常对照组,每组12只。5个戒断组大鼠自由饮用体积百分比为6%的酒精水溶液16周,正常对照组饮用纯净水16周。戒断组分别于末次饮酒后2h、6h、12h、1d、3d时,正常对照组于末次饮水后2h时,评估戒断症状后处死取纹状体,采用免疫荧光法和Western blot检测各组大鼠纹状体NR2B蛋白含量的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠纹状体NR2Bm RNA的表达。结果与正常对照组戒断评分[(1.50±0.80)分]相比,戒断2h、6h、12h、1d、3d组大鼠戒断评分[(10.42±2.50)分、(15.42±1.93)分、(9.25±2.01)分、(7.67±1.92)分、(2.25±0.87)分]均增高,戒断6h组评分最高;与正常对照组大鼠纹状体NR2B荧光表达强度[(2210.00±178.20)]、NR2B蛋白表达水平[(0.150±0.009)]及NR2B mRNA表达水平[(0.006±0.001)]相比,戒断2h、6h、12h、1d组NR2B荧光表达强度[(2710.56±194.21)、(5035.16±234.41)、(3326.23±378.16)、(2570.64±177.88)]、NR2B蛋白表达水平[(0.192±0.008)、(1.649±0.205)、(0.783±0.109)、(0.180±0.009)]及NR2B mRNA表达水平[(0.026±0.002)、(0.351±0.034)、(0.248±0.023)、(0.024±0.003)]均有明显增高(均P〈0.05),且随着戒断时间的延长,表达逐渐上升,至戒断6h达到高峰,其后开始下降,戒断3d恢复至基线水平(P〉0.05);戒断综合征评分与NR2B蛋白表达水平(r=0.719,P〈0.01)、NR2B蛋白表达水平与NR2B mRNA表达水平(r=0.937,P〈0.01)、NR2B mRNA表达水平与戒断综合征评分(r=0.673,P〈0.01)均� 展开更多
关键词 纹状体 酒精 不同戒断时间点 NMDA受体2B亚基
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