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马立克病病毒编码的miR-M11-5p宿主靶基因的筛选与鉴定 预览
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作者 刘豪丽 滕蔓 +5 位作者 李会珍 余祖华 刘金玲 丁轲 张改平 罗俊 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1026-1038,共13页
作为α疱疹病毒的重要成员,马立克病病毒(MDV)感染鸡可引起免疫抑制及快速发作的T细胞淋巴瘤,即马立克病(MD)。此前发现MDV基因组编码大量病毒miRNA,可能在病毒复制、潜伏感染及肿瘤发生中起重要作用。基因敲除miR-M11-5p可显著增强MDV... 作为α疱疹病毒的重要成员,马立克病病毒(MDV)感染鸡可引起免疫抑制及快速发作的T细胞淋巴瘤,即马立克病(MD)。此前发现MDV基因组编码大量病毒miRNA,可能在病毒复制、潜伏感染及肿瘤发生中起重要作用。基因敲除miR-M11-5p可显著增强MDV致病性及致瘤性,表明其可能是MD肿瘤抑制因子。为进一步揭示miR-M11-5p介导的调控机制,本研究利用鸡胚成纤维细胞(CEF)总RNA的cDNA为模板,通过hybrid-PCR扩增miR-M11-5p的候选宿主靶基因片段,然后连接至pMD19-T载体、转化至E.coliJM109中构建cDNA文库。对文库菌落进行PCR鉴定、测序分析以及Blast序列对比,共获得77个候选宿主靶基因,其中37个miRNA结合靶点位于候选靶基因的3'-UTR中。进一步通过双荧光素酶报告试验、miR-M11-5p过表达以及RT-qPCR分析,最终鉴定鸡MAFB、LOC776816和RFX7为miR-M11-5p的宿主靶基因。本研究为进一步阐明miR-M11-5p在MDV肿瘤发生中的调控机制奠定了重要基础。 展开更多
关键词 马立克病病毒 微小RNA miR-M11-5p hybrid-PCR 靶基因 实时荧光定量PCR
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鸡马立克病毒的研究进展
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作者 崔治中 苏帅 +4 位作者 罗俊 钱琨 庄国庆 孙爱军 滕蔓 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1812-1826,共15页
马立克病毒(Marek’s disease virus,MDV)是一类可感染鸡诱发急性或亚急性淋巴细胞肉瘤的疱疹病毒。本文在对MDV的经典病毒学及分子生物学研究的早期成果进行概述的基础上,对近十多年来感染性克隆技术用于探索MDV主要蛋白基因的功能、... 马立克病毒(Marek’s disease virus,MDV)是一类可感染鸡诱发急性或亚急性淋巴细胞肉瘤的疱疹病毒。本文在对MDV的经典病毒学及分子生物学研究的早期成果进行概述的基础上,对近十多年来感染性克隆技术用于探索MDV主要蛋白基因的功能、以病毒编码的全部蛋白质为对象的蛋白组学、病毒编码的有调控作用的RNA及基因工程疫苗等方面的研究进展进行综述,并展望MDV进一步的研究方向和内容。 展开更多
关键词 马立克病毒 感染性克隆 蛋白组学 调控性RNA 重组疫苗
转人抑癌基因p53鸡的研究 预览
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作者 李鹏姗 雷雪芹 +7 位作者 徐廷生 王攀林 宋祯 李振红 史明艳 韦光辉 张广平 李俊堂 《西北农林科技大学学报:自然科学版》 CSCD 北大核心 2019年第7期54-61,共8页
【目的】探索MAR调控序列对外源人抑癌基因p53在转基因鸡体内整合稳定性的影响,为转基因禽类输卵管生物反应器的建立奠定基础。【方法】利用脂质体包埋法,将pEGFP-N1-p53/MAR重组真核表达载体转染人肝癌细胞(Hep3B),荧光显微镜和透射电... 【目的】探索MAR调控序列对外源人抑癌基因p53在转基因鸡体内整合稳定性的影响,为转基因禽类输卵管生物反应器的建立奠定基础。【方法】利用脂质体包埋法,将pEGFP-N1-p53/MAR重组真核表达载体转染人肝癌细胞(Hep3B),荧光显微镜和透射电镜检测转染含人野生型p53基因的Hep3B细胞形态及超微观结构的变化情况;显微注射法将脂质体介导的重组载体注入鸡X期胚盘的明区和暗区,制备G0代转基因鸡。以EGFP为报告基因,人工授精法制备G1代转基因鸡,对G0代和G1代鸡体外源基因p53进行PCR检测,并对G1代转基因鸡进行小动物活体成像检测。【结果】转染含人p53基因重组载体的Hep3B细胞明显皱缩变圆;微观结构层面,粗面内质网不明显,线粒体肿胀,细胞核中异染色质边集明显,并出现凋亡小体。G0代转基因鸡暗区组孵化率(45%)显著高于明区组孵化率(0)(P<0.05),但均显著低于对照组孵化率(82.5%)(P<0.05);获得4只基因组中含有外源p53基因的G0代转基因鸡,外源基因转染率为22.2%(4/18);获得2只G1代转基因鸡,转基因世代遗传率为3.08%(2/65)。【结论】重组真核表达载体pEGFP-N1-p53/MAR可以促进人肝癌细胞Hep3B的凋亡;脂质体介导的含MAR序列调控元件的pEGFP-N1-p53/MAR质粒,可以提高p53在转基因鸡基因组中的整合稳定性,并可遗传给后代。 展开更多
关键词 重组真核表达载体 HEP3B 转基因鸡 P53基因 转染率 世代遗传率
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与马立克病病毒编码的miR-M31-3p互作的宿主靶基因筛选与鉴定 预览
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作者 张雅 滕蔓 +4 位作者 李会珍 朱志坚 刘豪丽 罗俊 张改平 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期441-448,共8页
血清Ⅰ型马立克病病毒(MDV-1)编码26个病毒miRNA,前期研究发现这些miRNA可能在鸡马立克病肿瘤发生中发挥重要调控作用。为研究MDV-1编码的miRNA基因miR-M31-3p在病毒感染及致病过程中的作用机制,本研究利用杂交PCR方法构建宿主cDNA文库... 血清Ⅰ型马立克病病毒(MDV-1)编码26个病毒miRNA,前期研究发现这些miRNA可能在鸡马立克病肿瘤发生中发挥重要调控作用。为研究MDV-1编码的miRNA基因miR-M31-3p在病毒感染及致病过程中的作用机制,本研究利用杂交PCR方法构建宿主cDNA文库,对与miR-M31-3p互作的宿主候选靶基因进行初步筛选,结果获得了49个候选靶基因。通过双荧光素酶报告试验证实miR-M31-3p与鸡GNPAT、TCF12、FIGNL1、CNDP2、MGST1和CD99L2的3'-UTR在体外存在相互作用。进一步通过qRT-PCR分析显示:过表达miR-M31-3p的CEF中,上述6个候选基因mRNA转录水平均显著下调;当MDV感染CEF时,除CD99L2之外的5个候选靶基因的转录水平均显著下调,而在miR-M31-3p基因缺失的MDV株感染的CEF中这5个靶基因均正常转录。上述结果证实CNDP2、GNPAT、TCF12、FIGNL1和MGST1为与miR-M31-3p互作的宿主靶基因。本研究为进一步揭示miR-M31-3p调控MDV感染宿主的致病机制奠定了重要基础。 展开更多
关键词 马立克病病毒 miRNA miR-M31-3p 宿主靶基因 CDNA文库
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鼠伤寒沙门菌5’-nucleotidase基因缺失株的构建及其生物学特性的研究
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作者 张梦珂 廖成水 +5 位作者 毛福超 王晓利 张春杰 李银聚 吴庭才 程相朝 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期589-597,共9页
为了探究5’-nucleotidase基因的功能及其在鼠伤寒沙门菌感染中的作用,本研究首先构建缺失1112 bp的5’-nucleotidase基因的重组自杀性质粒pR E 112Δ5’-nucleotidase,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选出SL1344Δ5... 为了探究5’-nucleotidase基因的功能及其在鼠伤寒沙门菌感染中的作用,本研究首先构建缺失1112 bp的5’-nucleotidase基因的重组自杀性质粒pR E 112Δ5’-nucleotidase,利用重组自杀性质粒介导的等位基因交换技术,两步法筛选出SL1344Δ5’-nucleotidase缺失株,并对其生物学特性进行初步研究。PCR及测序结果表明,SL1344Δ5’-nucleotidase构建成功,且回复株SL1344CΔ5’-nucleotidase构建成功。进一步研究表明,缺失株SL1344Δ5’-nucleotidase保留了亲本菌株SL1344的血清型1,4,5,12∶i∶1,2,且能够稳定遗传缺失1 112 bp的5’-nucleotidase基因,生长速度没有发生明显改变。但是,缺失株SL1344Δ5’-nucleotidase口服感染6周龄BALB/c小鼠的LD50为4.30×10^7CF U,毒力降低至亲本株SL1344的1.96%。免疫保护率试验结果显示,对6周龄BALB/c小鼠免疫后第17天,鼠伤寒沙门菌野生株攻毒有50%的保护率。缺失株免疫小鼠后第21天,血清抗体IgG水平达到最高。回复菌株与亲本亲株之间生物学特性无显著性差异,基本恢复到野生型水平。上述结果表明,SL1344Δ5’-nucleotidase基因缺失株构建成功,遗传稳定,毒力明显降低,且具有较好的免疫原性,为研究鼠伤寒沙门菌5’-nucleotidase基因与其致病力之间的关系提供了依据,并为研究它在鼠伤寒沙门菌感染中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌SL1344 5’-nucleotidase基因 缺失株 回复株 生物学特性
塞内卡病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用 预览
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作者 王淑娟 王东方 +6 位作者 赵月龙 谢彩华 赵雪丽 马震原 王华俊 杨朋霞 闫若潜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期479-483,共5页
为建立塞内卡病毒(SVA)荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)检测方法,本研究根据GenBank中SVA 3D基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以SVA cDNA为模板,经优化反应条件,建立了SVA FQ-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、... 为建立塞内卡病毒(SVA)荧光定量RT-PCR(FQ-PCR)检测方法,本研究根据GenBank中SVA 3D基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以SVA cDNA为模板,经优化反应条件,建立了SVA FQ-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对28份临床疑似SVA感染样品进行了检测,并与本实验室建立的SVA RT-PCR方法检测结果及测序结果比较分析。结果显示,该方法仅对SVA出现阳性扩增信号,对BHK-21正常细胞对照和口蹄疫病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒等5种病原均未出现扩增,特异性较强;该方法最低检测限为10.4拷贝/μL质粒标准品,比常规RT-PCR敏感性高10倍,敏感性较高;该方法批内及批间变异系数均小于4%,重复性好。利用该方法对28份疑似SVA感染样品检测显示,检出9份阳性样品,与测序结果一致,而常规RT-PCR仅检出6份阳性样品,其敏感性高于常规RT-PCR方法,两种方法的符合率为89.3%。本研究为SVA的早期检测提供了特异、敏感、快速的方法。 展开更多
关键词 塞内卡病毒 荧光定量RT-PCR 建立 应用
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围产期低能饲粮添加过瘤胃赖氨酸对初乳质量、断奶前犊牛生长性能的影响 预览
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作者 蒋青荣 DELELESSE Debele Girma +5 位作者 顾鲲涛 杜超 马露 吴鹏 王建平 卜登攀 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期3164-3173,共10页
本试验旨在研究围产期低能饲粮添加过瘤胃赖氨酸(RPL)对初乳质量、断奶前犊牛生长性能和瘤胃发酵的影响。试验采用2×2析因试验设计,即能量(产奶净能)水平设为6.40、5.73 M J/kg DM和RPL添加水平设为0、40 g/(d·头)。选取体况... 本试验旨在研究围产期低能饲粮添加过瘤胃赖氨酸(RPL)对初乳质量、断奶前犊牛生长性能和瘤胃发酵的影响。试验采用2×2析因试验设计,即能量(产奶净能)水平设为6.40、5.73 M J/kg DM和RPL添加水平设为0、40 g/(d·头)。选取体况和预产期相近的52头第3胎荷斯坦奶牛,分为4组,分别为基础饲粮(B)组、低能饲粮(L)组、基础饲粮+RPL(BL)组和低能饲粮+RPL(LL)组,每组13头牛。试验从预产期前21天至产后犊牛断奶结束。奶牛产后第1次泌乳时采集初乳,测定初乳中总固形物、蛋白质、脂肪和乳糖、免疫球蛋白(Ig) G、IgM和IgA含量;犊牛出生当天(1日龄)、60日龄测定体重和体尺;犊牛60日龄采集瘤胃液,测定pH、氨态氮(NH3-N)和挥发性脂肪酸(VFA)浓度。结果表明:1)围产期低能饲粮显著降低了初乳总固形物、乳糖和IgM含量(P<0.05);围产母牛饲粮添加RPL对初乳乳糖含量有提高的趋势(P=0.068 2),对其他初乳指标无显著影响(P> 0.05)。2)围产期低能饲粮显著降低了母犊60日龄体重、体高、体斜长和胸围(P<0.05),显著降低了公犊60日龄体斜长和初生胸围(P<0.05)。围产母牛饲粮添加RPL有降低公犊60日龄体重的趋势(P=0.073 0)。3)围产期低能饲粮显著降低了母犊初生体躯指数(P<0.05),对母犊60日龄体躯指数有升高的趋势(P=0.059 6),对公犊初生体躯指数有降低的趋势(P=0.099 1),提高了公犊60日龄体躯指数(P<0.05),降低了公犊60日龄体长指数(P<0.05)。围产母牛饲粮添加RPL对公、母犊体尺指数没有显著影响(P>0.05)。4)围产期低能饲粮显著降低了犊牛瘤胃液中总挥发性脂肪酸、乙酸、丙酸、异丁酸、丁酸、异戊酸和戊酸浓度(P<0.05)。围产母牛饲粮添加RPL对犊牛瘤胃发酵指标无显著影响(P>0.05)。5)围产母牛饲粮能量水平与添加RPL对奶牛初乳质量指标、断奶前犊牛体重、体尺指标、体尺指数和瘤胃发酵指标均不存在交互作用(P 展开更多
关键词 低能饲粮 过瘤胃赖氨酸 初乳质量 生长性能 瘤胃发酵
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日粮不同精粗比对9月龄后备奶牛甲烷排放与生长性能及营养物质消化率的影响 预览
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作者 李斌昌 董利锋 +4 位作者 王贝 叶疆凤 王睿鑫 成述儒 刁其玉 《饲料工业》 北大核心 2019年第11期12-18,共7页
研究旨在用六氟化硫(SF6)示踪技术在自然状态下跟踪研究日粮中不同精粗比对9月龄后备奶牛甲烷(CH4)排放与生长性能及营养物质消化的影响。试验采用单因素试验设计,选用15头[体重=(274.4±24.4)kg,月龄=9.4±0.56]后备奶牛随机... 研究旨在用六氟化硫(SF6)示踪技术在自然状态下跟踪研究日粮中不同精粗比对9月龄后备奶牛甲烷(CH4)排放与生长性能及营养物质消化的影响。试验采用单因素试验设计,选用15头[体重=(274.4±24.4)kg,月龄=9.4±0.56]后备奶牛随机分成三组(A、B和C),分别饲喂精料水平为30%(A)、40%(B)、50%(C)的全混合日粮(TMR)。试验期18 d,其中预饲期10 d,正试期8 d。试验期第10 d和18 d分别称重。正试期第4、6、8 d采集饲料样和粪样,采用酸不溶法测定营养物质表观消化率;记录正试期每天采食量。结果表明:①随着日粮精粗比增加,CH4日排放量、单位代谢体重CH4排放量、单位干物质采食量CH4排放量、单位有机物采食量CH4排放量、单位中性洗涤纤维CH4排放量、甲烷能、甲烷能占总能的比例皆显著降低(P<0.05);②日增重和料重比随精粗比增加无显著变化(P>0.05);干物质采食量(D MI)随精粗比增加显著提高(P<0.05);③干物质(D M)、有机物(O M)和粗脂肪(EE)的表观消化率随日粮精粗比增加无显著变化(P>0.05);粗蛋白质(CP)的表观消化率C组显著高于A和B(P<0.05),然而NDF和酸性洗涤纤维(A DF)的表观消化率C组显著低于A(P<0.05)且两组皆与B无显著差异(P>0.05)。综上所述,提高日粮精粗比,能够有效降低后备牛CH4排放量和甲烷能/总能的比值,并能提高DMI和CP的表观消化率。 展开更多
关键词 精粗比 甲烷排放 SF6示踪技术 后备牛 营养物质表观消化率
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放牧强度对高寒草甸植物叶片生态化学计量特征的影响 预览
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作者 高巧静 朱文琰 +4 位作者 侯将将 王娅琳 赵新全 徐世晓 孙平 《中国草地学报》 CSCD 北大核心 2019年第3期45-50,共6页
在青藏高原高寒草甸封育、适度放牧、重度放牧3种放牧强度中,选取并测定了异针茅、麻花艽、蒲公英3种植物叶片中C、N、P的含量,探讨了植物叶片的化学计量特征对不同放牧强度的响应机制。结果表明:3种植物叶片在不同放牧强度样地中C含量... 在青藏高原高寒草甸封育、适度放牧、重度放牧3种放牧强度中,选取并测定了异针茅、麻花艽、蒲公英3种植物叶片中C、N、P的含量,探讨了植物叶片的化学计量特征对不同放牧强度的响应机制。结果表明:3种植物叶片在不同放牧强度样地中C含量无差异;3种植物叶片N、P含量在重度放牧草地中高于其他两种放牧强度,且重度放牧草地整体受N限制,其他两种草地植物受P限制;重度放牧草地的C/P、N/P比值显著低于其他两种草地放牧强度中的比值,说明重度放牧草地3种植物采取了快速生长策略,而且不同物种在不同生境中受养分限制的程度不同。以上结果说明草地的放牧强度不同,在很大程度上间接改变植物对养分的利用状况,不同植物对相同生境有不同的适应策略。 展开更多
关键词 高寒草甸 放牧强度 化学计量特征
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嗜热细菌Anaerobaculum hydrogeniforman Pif1解旋酶的异源表达与解旋反应特性
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作者 段晓雷 刘娜女 +4 位作者 张涛 曹睿 姜钧耀 闵迅 奚绪光 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期566-577,共12页
【目的】原核表达与纯化源自嗜热细菌Anaerobaculum hydrogeniforman的Pif1解旋酶,从而探究其解旋反应特性。【方法】将重组载体pET21a-AnaPif1-TEV/SUMO导入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并进行Ni-NTA亲和层析、Superdex200凝胶过滤层... 【目的】原核表达与纯化源自嗜热细菌Anaerobaculum hydrogeniforman的Pif1解旋酶,从而探究其解旋反应特性。【方法】将重组载体pET21a-AnaPif1-TEV/SUMO导入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并进行Ni-NTA亲和层析、Superdex200凝胶过滤层析等一系列纯化手段;再利用快速停留监测技术系统地研究Ana.Pif1的解旋反应特性,包括解旋极性、最佳ATP浓度、最佳金属辅因子、最佳解旋温度以及解旋复制中间体DNA的底物特异性。【结果】通过异源表达与纯化,获得了无任何标签序列、分子量59 kDa的Ana.Pif1蛋白,纯度达97%,产率为9.5 mg/L。本研究首先验证Ana.Pif1具有5’’-3’’的解旋极性,并发现其解旋反应最佳ATP浓度为2 mmol/L,其最佳二价金属辅因子为Mg2+,最适反应温度为55°C。解旋复制中间体的底物特异性显示,Y-S型复制叉的解旋速率最高,为0.127s–1;而12 nt-bubble底物的解旋幅度最大,达到78.8%;暗示这些底物可能是Ana.Pif1的天然底物。【结论】本文首次较为系统地分析了Ana.Pif1解旋酶的解旋反应特性,为阐明此类嗜热细菌Pif1解旋酶的分子作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 Pif1解旋酶 嗜热厌氧棒菌 快速停留检测 解旋特征参数
钼致小鼠睾丸组织氧化损伤及对PI3K/AKT信号通路的影响
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作者 贺德良 杨自军 +5 位作者 唐永坡 马淑浩 张才 汪纪仓 王宏伟 孔涛 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期789-796,共8页
为探索钼致雄性小鼠的睾丸组织的氧化损伤及其对PI3K/AKT信号通路的影响,本试验选取4周龄清洁级雄性健康昆明系小鼠60只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,分别在饮水中添加0、100、200、400 mg/L的钼,基础日粮相同,自由饮水,试验周期90 d。试... 为探索钼致雄性小鼠的睾丸组织的氧化损伤及其对PI3K/AKT信号通路的影响,本试验选取4周龄清洁级雄性健康昆明系小鼠60只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,分别在饮水中添加0、100、200、400 mg/L的钼,基础日粮相同,自由饮水,试验周期90 d。试验结束后剖杀并采集睾丸。比色法检测睾丸组织SOD、T-AOC、MDA、LDH活性或含量;RT-PCR和Western-blotting测定PI3K/AKT信号通路上PI3K、PTEN、AKT、Caspase-9、Bcl-2、Bax和Bad的m RNA和蛋白的表达情况。结果显示,与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组SOD和T-AOC活性极显著下降(P<0.01),Ⅱ组LDH活性显著下降(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组LDH活性极显著上升(P<0.01),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组MDA含量极显著升高(P<0.01)。与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组PI3K、AKT、Bcl-2、Bad和Bax的m RNA表达量显著升高(P<0.05),Ⅱ组PTEN、Caspase-9的m RNA表达量显著下降(P<0.05),Ⅲ组Caspase-9的m RNA表达量显著升高(P<0.05);Ⅳ组PI3K、AKT、Caspase-9、Bcl-2、Bad和Bax的m RNA表达量显著下降(P<0.05),PTEN的m RNA表达量显著升高(P<0.05)。与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅲ组PI3K、AKT、P-AKT、Caspase-9、Bcl-2和Bax蛋白表达量显著升高(P<0.05),Ⅱ组PTEN蛋白表达量显著下降(P<0.05);Ⅳ组PI3K、PTEN、AKT和Bax蛋白表达量显著升高(P<0.05),Bcl-2和Bad蛋白表达量显著下降(P<0.05)。本试验所设剂量钼均能导致小鼠睾丸组织氧化损伤,同时通过激活PI3K/AKT信号通路上相关信号因子m RNA和蛋白表达对雄性小鼠生殖系统产生影响。 展开更多
关键词 小鼠 睾丸 氧化损伤 PI3K/AKT信号通路
绵羊MKRN3基因多态性与产羔数的关联分析 预览
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作者 陈炜昊 田志龙 +1 位作者 孙伟 储明星 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第4期40-44,共5页
本实验旨在探究绵羊MKRN3基因g.275981C>T与g.276999C>T位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,以期为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用全基因组重测序结合Sequenom MassARRAY~?SNP技术对常年发情绵羊品种(小尾寒羊、策勒... 本实验旨在探究绵羊MKRN3基因g.275981C>T与g.276999C>T位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,以期为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用全基因组重测序结合Sequenom MassARRAY~?SNP技术对常年发情绵羊品种(小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊)和季节性发情绵羊品种(滩羊、苏尼特羊和草原型藏羊)MKRN3基因2个多态位点多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果表明:MKRN3基因g.275981C>T位点与g.276999C>T位点均存在3种基因型;g.276999C>T位点基因型频率和等位基因频率在2种发情模式绵羊品种间差异均达到极显著水平(P<0.01);g.275981C>T位点在6个绵羊品种中均表现为低度多态(PIC<0.25),g.276999C>T位点在6个绵羊品种中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5);g.275981C>T位点在苏尼特羊和策勒黑羊中均处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05),g.276999C>T位点在6个绵羊品种中均处于哈代温伯格平衡状态;关联分析表明,g.275981C>T和g.276999C>T位点不同基因型与小尾寒羊第1、2、3胎产羔数均无显著关联。可见,MKRN3基因2个多态位点均不适合用于小尾寒羊产羔数选育。 展开更多
关键词 绵羊 MKRN3基因 SNP分型 产羔数
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绵羊Tacr3基因多态性与产羔数的关联分析 预览
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作者 陈炜昊 田志龙 +1 位作者 孙伟 储明星 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第5期1405-1412,共8页
本研究旨在探究绵羊速激肽受体3(tachykininreceptor3,Tacr3)基因g.21484478A>C、g.21560640C>T和g.21560688T>C位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用全基因组重测序结合SequenomMa... 本研究旨在探究绵羊速激肽受体3(tachykininreceptor3,Tacr3)基因g.21484478A>C、g.21560640C>T和g.21560688T>C位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用全基因组重测序结合SequenomMassARRAYSNP技术对常年发情绵羊品种(小尾寒羊、湖羊和策勒黑羊)和季节性发情绵羊品种(滩羊、苏尼特羊和草原型藏羊)Tacr3基因3个多态位点进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果表明,3个位点均存在3种基因型,其中g.21484478A>C位点存在AA、CC和CA基因型,g.21560640C>T位点存在TT、CC和TC基因型,g.21560688T>C位点存在TT、CC和CT基因型,3个多态位点基因型频率和等位基因频率在两种发情模式绵羊品种间均达到差异极显著水平(P<0.01)。群体遗传学分析表明,g.21484478A>C位点在滩羊和策勒黑羊中均表现为中度多态(0.25<PIC<0.5),在小尾寒羊、苏尼特羊和湖羊中均为低度多态(PIC<0.25);g.21560640C>T位点在6个绵羊品种中均表现为中度多态;g.21560688T>C位点在小尾寒羊、苏尼特羊、湖羊和草原型藏羊中均表现为低度多态。卡方适合性检验表明,g.21560640C>T位点在6个绵羊品种中均处于哈代-温伯格平衡状态(P>0.05);g.21484478A>C位点在草原型藏羊中处于哈代-温伯格不平衡状态(P<0.05);g.21560688T>C位点在滩羊、策勒黑羊中处于哈代-温伯格不平衡状态(P<0.05)。关联分析表明,3个多态位点与小尾寒羊第一、二、三胎产羔数均无显著关联(P>0.05)。推测Tacr3基因3个多态位点均不适用于小尾寒羊产羔数选育。 展开更多
关键词 绵羊 Tacr3基因 分型 产羔数
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绵羊FSTL3基因g.40674542C>T位点多态性与产羔数的关联分析 预览
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作者 陈炜昊 田志龙 +1 位作者 孙伟 储明星 《中国草食动物科学》 CAS 2019年第1期1-4,24共5页
文章旨在探究绵羊FSTL3基因g.40674542C>T位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,以期为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用全基因组重测序结合SequenomMassARRAY■SNP技术对常年发情绵羊品种(小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊)和季节... 文章旨在探究绵羊FSTL3基因g.40674542C>T位点多态性与绵羊产羔数之间的关系,以期为绵羊高繁殖力分子育种提供新的遗传标记。利用全基因组重测序结合SequenomMassARRAY■SNP技术对常年发情绵羊品种(小尾寒羊、策勒黑羊和湖羊)和季节性发情绵羊品种(滩羊、苏尼特羊和草原型藏羊)FSTL3基因g.40674542C>T位点多态性进行了检测,并与小尾寒羊产羔数进行了关联分析。结果表明:FSTL3基因g.40674542C>T位点存在CC、TC和TT三种基因型,基因型频率和等位基因频率在两种发情模式绵羊品种间差异均不显著(P>0.05);g.40674542C>T位点在6个绵羊品种中均表现为低度多态(PIC<0.25),经卡方适合性检验,该位点在小尾寒羊、湖羊和草原型藏羊中处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05),在其余3个绵羊品种中处于哈代温伯格不平衡状态;g.40674542C>T位点不同基因型与小尾寒羊第一、第二以及第三胎产羔数均无显著关联(P>0.05)。说明FSTL3基因g.40674542C>T位点不适合用于小尾寒羊产羔数选育。 展开更多
关键词 绵羊 FSTL3基因 SNP分型 产羔数
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关于《饲草生产学》课程的教学改革探索 预览
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作者 马文锋 赵凌平 +3 位作者 毛培 樊文娜 武晓红 王占彬 《科技创新导报》 2019年第11期223-224,共2页
《饲草生产学》是一门研究牧草作物特性和加工方法的课程,其内容涵盖了植物、栽培及动物营养等多个方面。这门课程注重培养学生的创新意识和实践能力,旨在培养适应于我国饲草行业发展需求的优秀人才。本文重点从教学内容、教学模式及方... 《饲草生产学》是一门研究牧草作物特性和加工方法的课程,其内容涵盖了植物、栽培及动物营养等多个方面。这门课程注重培养学生的创新意识和实践能力,旨在培养适应于我国饲草行业发展需求的优秀人才。本文重点从教学内容、教学模式及方法等方面,对饲草生产学课程相关的教改内容进行了积极探讨。 展开更多
关键词 饲草生产学 教学改革 教学质量
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过表达IL-6对山羊毛囊干细胞增殖和迁移的影响 预览
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作者 史明艳 高雪 +3 位作者 易力 周新雨 亢君芳 李志超 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1154-1161,共8页
旨在通过在山羊毛囊干细胞(HFSCs)中过表达炎症因子白细胞介素6(IL-6),探讨其对山羊HFSCs增殖和迁移的影响,阐明MAPK/ERK信号通路在山羊HFSCs增殖和迁移过程中发挥的作用。本试验通过构建pXJ40-myc-IL-6过表达载体,瞬时转染到山羊HFSCs... 旨在通过在山羊毛囊干细胞(HFSCs)中过表达炎症因子白细胞介素6(IL-6),探讨其对山羊HFSCs增殖和迁移的影响,阐明MAPK/ERK信号通路在山羊HFSCs增殖和迁移过程中发挥的作用。本试验通过构建pXJ40-myc-IL-6过表达载体,瞬时转染到山羊HFSCs中,以空载体细胞为空白对照组。利用Western blot定量检测IL-6蛋白的表达,MTT法检测山羊HFSCs的增殖活力,划痕试验判定山羊HFSCs的迁移能力,最后采用Westernblot检测山羊HFSCs中MAPK/ERK和P38信号通路中关键激酶的表达水平。结果表明,将获得的IL-6过表达载体转染至山羊HFSCs3d后,与对照组比较,山羊HFSCs的增殖活力出现抑制,且抑制效果持续至第7天(P<0.05)。IL-6过表达载体转染至山羊HFSCs24h后,处理组划痕部位的愈合率达到84.2%,显著低于对照组的98.5%(P<0.01)。与对照组相比,MAPK/ERK信号通路中的关键激酶ERK1/2的磷酸化水平(p-ERK1/2)显著下调(P<0.01),P38信号通路中的关键激酶p38的磷酸化水平(p-p38)表达量上调,但差异无统计学意义(P>0.05)。综上所述,过表达IL-6基因对山羊HFSCs的增殖和迁移能力具有抑制作用,且过表达IL-6可能是通过MAPK/REK信号通路对山羊HFSCs增殖和迁移发挥负性调控作用,以上结果为揭示山羊HFSCs的迁移及组织修复机制的研究提供依据。 展开更多
关键词 IL-6 增殖 迁移 毛囊干细胞 MAPK/ERK信号通路
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不同水培时间下大麦苗的营养价值及CNCPS组分 预览
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作者 黄万里 王建平 +1 位作者 刘宁 卜登攀 《草业科学》 CAS CSCD 2019年第7期1811-1818,共8页
为揭示水培大麦(Hordeum vulgare)苗的营养价值,采用专用水培箱人工水培大麦苗,于第4、5、6、7天采集样品,测定干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗灰分(Ash)、粗脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、淀粉(starch)、中性洗涤不... 为揭示水培大麦(Hordeum vulgare)苗的营养价值,采用专用水培箱人工水培大麦苗,于第4、5、6、7天采集样品,测定干物质(DM)、粗蛋白质(CP)、粗灰分(Ash)、粗脂肪(EE)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、淀粉(starch)、中性洗涤不溶蛋白质(NDIP)、酸性洗涤不溶蛋白质(ADIP)、酸性洗涤木质素(ADL)、可溶性蛋白质(SOLP)和非蛋白氮(NPN)含量,同时测定矿物质及18种氨基酸含量,并采用康奈尔净碳水化合物–蛋白质体系(CNCPS)对其组分进行分析。结果表明,1)第7天的CP、NDF、ADF、NDIP、ADIP、SOLP、NPN含量均显著高于第4、5、6天(P<0.05);2)第7天的钙(Ca)、锰(Mn)、铁(Fe)含量均显著高于第4、5、6天(P<0.05);3)第7天的赖氨酸(Lys)、总氨基酸(TAA)、必需氨基酸(EAA)含量均显著高于第4、5、6天(P<0.05);4)第7天的中速降解真蛋白质(PB2)含量显著高于第5、6天(P<0.05),慢速降解真蛋白质(PB3)和不可降解粗蛋白质(PC)含量显著高于第4天(P<0.05);第7天的非结构性碳水化合物(CNSC)含量显著低于第4、5、6天(P<0.05),可利用纤维(CB2)含量显著高于第4、5、6天(P<0.05)。综上所述,第7天水培大麦苗营养价值较高,可作为草食动物优质饲料资源开发利用。 展开更多
关键词 大麦苗 营养价值 水培系统 康奈尔净碳水化合物–蛋白质体系
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基于两种模型研究饮茶对不同形态铁生物有效性的影响 预览
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作者 何万领 李晓丽 杨肖娥 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第4期54-60,共7页
利用SD大鼠饲养实验和体外消化/Caco-2细胞系培养模型,分别研究饮茶与否以及间隔时间对不同形态铁生物有效性的影响。结果表明,与对照组相比,几种形态铁均不同程度改善了大鼠体内红细胞总数(RBC)、血红蛋白量(Hb)、总铁结合力(TIBC)、... 利用SD大鼠饲养实验和体外消化/Caco-2细胞系培养模型,分别研究饮茶与否以及间隔时间对不同形态铁生物有效性的影响。结果表明,与对照组相比,几种形态铁均不同程度改善了大鼠体内红细胞总数(RBC)、血红蛋白量(Hb)、总铁结合力(TIBC)、血清铁、肝脏和肾脏铁状况,以EDTA-FeNa效果最好。饮茶降低了补铁各组大鼠血液RBC(P<0.05)、Hb水平和肝脏、肾脏中铁含量。体外消化/Caco-2细胞研究表明,硫酸亚铁、EDTA-FeNa和柠檬酸亚铁组Caco-2细胞铁蛋白合成量分别较对照组(不添加铁)增加了78.57%(P<0.05),202.79%(P<0.05)和146.08%(P<0.05);而用茶水孵育后,细胞铁蛋白量较相应铁组减少了39.52%(P<0.05),29.73%(P>0.05)和48.82%(P<0.05)。补铁同时饮茶会严重影响铁的生物有效性,尤其是补铁后30min内的铁生物有效性降低明显,而补铁45min后再饮茶,对铁生物有效性影响不大。总之,不同形态铁的生物有效性也不同;饮茶可降低几种形态铁的有效性,尤其是补铁与饮茶同时进行时;建议补铁和饮茶应间隔一定时间。 展开更多
关键词 饮茶 不同形态铁 铁生物有效性 CACO-2细胞模型 SD大鼠模型
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动物粪便中纤维素分解菌的分离和鉴定 预览
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作者 杨伟平 丁雅倩 +3 位作者 马梦柯 肖琅琅 陈万光 张耀文 《家畜生态学报》 北大核心 2019年第2期75-79,85共6页
纤维素分解菌可用于动物微生态添加剂和除臭剂。此试验采用羧甲基纤维素平板法及刚果红染色法,从鹅的粪便中初步分离筛选出7株能够降解纤维素的细菌,结合摇瓶发酵法进行复筛,最终选出3株羧甲基纤维素酶活性高的菌株,并对其进行形态学和1... 纤维素分解菌可用于动物微生态添加剂和除臭剂。此试验采用羧甲基纤维素平板法及刚果红染色法,从鹅的粪便中初步分离筛选出7株能够降解纤维素的细菌,结合摇瓶发酵法进行复筛,最终选出3株羧甲基纤维素酶活性高的菌株,并对其进行形态学和16S rRNA鉴定。结果表明:3株纤维素分解菌的菌落形态不一,但其表面均微粗糙,革兰氏染色均呈阳性,短杆状或细杆状,有芽孢;结合16S rRNA鉴定结果,最终将分离到3个菌株鉴定为芽孢杆菌属的地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌和沙福芽孢杆菌,分别命名为Bacillus licheniformis G-1、Bacillus cereus G-4和Bacillus safensis G-10。 展开更多
关键词 粪便 纤维素分解菌 分离筛选 鉴定
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不同温湿指数环境下奶牛阴道温度的变化规律 预览
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作者 陈健 顾宪红 +3 位作者 李淦 彭丹丹 张闯 王占彬 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期112-117,共6页
为探究不同温湿指数(THI)环境下奶牛阴道温度的变化规律,试验分别在高THI(78.5±3.2)、中THI(70.4±4.1)、低THI(56.3±5.5)环境下连续7d监测15头健康妊娠奶牛的阴道温度及所在牛舍内外的温度和相对湿度。结果表明:高THI环... 为探究不同温湿指数(THI)环境下奶牛阴道温度的变化规律,试验分别在高THI(78.5±3.2)、中THI(70.4±4.1)、低THI(56.3±5.5)环境下连续7d监测15头健康妊娠奶牛的阴道温度及所在牛舍内外的温度和相对湿度。结果表明:高THI环境下奶牛平均阴道温度、日极值均差、测期极值差极显著高于中、低THI环境下奶牛相应的测值(P<0.01);奶牛日平均阴道温度和日平均THI、日最高阴道温度和日受热时长的相关系数r分别是0.811、0.896(P<0.01);引起日平均阴道温度、日最高阴道温度开始快速升高的日平均THI、日最大THI分别为71.4、77.3,日受热时长为10.6h时日最高阴道温度变化出现拐点。由此可见,高THI环境下奶牛阴道温度变化幅度大;相比THI,日受热时长会影响奶牛阴道温度的变化。 展开更多
关键词 阴道温度 温湿指数 奶牛 变化规律
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