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血站单采血小板献血者HLA和HPA基因型数据库的调查和分析
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作者 马开荣 洪小珍 +4 位作者 陈舒 李伟 毛伟 张志欣 朱发明 《中国输血杂志》 CAS 2019年第5期420-422,共3页
目的 调查分析国内血站系统单采血小板献血者HLA和HPA基因型数据库情况,以促进其建库发展和应用。方法 制定调查表并经专业人员审定,培训调查人员后依据实际情况填写表单,然后收集数据进行分析。结果 调查的24个血站中,有18个建立了血... 目的 调查分析国内血站系统单采血小板献血者HLA和HPA基因型数据库情况,以促进其建库发展和应用。方法 制定调查表并经专业人员审定,培训调查人员后依据实际情况填写表单,然后收集数据进行分析。结果 调查的24个血站中,有18个建立了血小板献血者HLA和HPA基因型数据库,合计有25 240人;2017年HLA或HPA基因型配合应用总共为137例。有5个血站建立了CD36抗原阴性筛查数据库。入库标本进行了HLA-A,-B位点检测,而HPA系统检测范围不同血站存在差异,其中9个血站只检测HPA 1-6, 15, 21w系统。13个血站采用聚合酶链反应核苷酸特异性引物技术检测HPA系统基因型。13个血站开展HPA抗体检测,6个血站开展CD36抗体检测。结论 血站已建立一定规模的单采血小板献血者HLA和HPA基因型数据库,但其应用存在明显不足。 展开更多
关键词 单采血小板献血者 HLA和HPA基因型数据库 血小板输注无效 血小板同种抗原系统
杭州无偿献血人群人类嗜T细胞白血病病毒流行概况
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作者 董杰 励晓涛 +3 位作者 凌霞 戴兵 祝宏 朱发明 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2019年第5期366-369,共4页
目的探讨浙江杭州地区无偿献血人群中人类嗜T细胞白血病病毒(HTLV)感染状况。方法采用酶联免疫吸附实验对2016年3月至2018年3月杭州地区无偿献血者进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体筛查。筛查反应性的样本采用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认,并对其采用... 目的探讨浙江杭州地区无偿献血人群中人类嗜T细胞白血病病毒(HTLV)感染状况。方法采用酶联免疫吸附实验对2016年3月至2018年3月杭州地区无偿献血者进行HTLV-Ⅰ/Ⅱ抗体筛查。筛查反应性的样本采用蛋白免疫印迹法(WB)进行确认,并对其采用实时荧光PCR方法检测。结果杭州地区32万份献血者样本中筛查反应性样本为70份,经WB法确证阳性为10份,条带分析显示全部为HTLV-Ⅰ。实时荧光PCR的结果与WB法完全一致。杭州地区无偿献血人群中HTLV确认感染率为0.003%。结论杭州地区无偿献血人群中存在HTLV感染,现阶段感染率处于较低水平。 展开更多
关键词 HTLV-Ⅰ抗体 献血人群 筛查 流行率
应用下一代测序技术进行HLA-A、HLA-B基因分型的模棱两可结果情况分析
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作者 董丽娜 赵烁贤 +3 位作者 王芳 章伟 何吉 朱发明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2019年第16期1924-1927,1931,共5页
目的统计分析NGS法进行HLA-A、HM-B基因分型检测的模棱两可结果的种类、比例。方法对369例浙江省脐带血库标本采用NGS法检测HLA-A、HLA-B位点,并同步对其中94例标本采用PCR-SBT测序法测定HLA-A、HL4-B位点,余下275例标本采用PCR-SS0流... 目的统计分析NGS法进行HLA-A、HM-B基因分型检测的模棱两可结果的种类、比例。方法对369例浙江省脐带血库标本采用NGS法检测HLA-A、HLA-B位点,并同步对其中94例标本采用PCR-SBT测序法测定HLA-A、HL4-B位点,余下275例标本采用PCR-SS0流式磁珠法检测。使用专业软件指定NGS法的HLA-A、HL4-B分型结果,直接计算法分析模棱两可组合比例。结果所有标本NGS法检测结果与PCR-SBT法或PCR-SSO法相符合,未发现NGS法遗漏等位基因情况。NGS法以HLA-A.HLA-B命名*后第四区域的数字作为高分辨水平统计,369例有34例标本出现模棱两可结果,占9.21%(34/369),其中只有2例标本HLA-A、HLA-B位点同时存在模棱两可结果。HLA-4位点有9例标本存在模棱两可结果,表现出8种类型;HLA-B位点有27例,25种类型,分别占标本总数的2.44%(9/369)、7.32%(27/369)。结论应用NGS技术仍有少量HLA-A、HLA-B基因分型的模棱两可组合结果。 展开更多
关键词 下一代测序法 HL4-Ⅰ类基因 模棱两可 测序分析
大规模伤亡事件血液保障与需求预测的研究进展
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作者 潘凌凌 徐健 胡伟 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1055-1057,共3页
当前,大规模伤亡事件已经成为一种全球现象,直接对一个国家的医疗体系带来严峻考验[1-2],如何利用有限的资源对蜂拥而至的伤员进行及时、合理、有效的救治和处理,已逐渐成为各国专家学者关注的重要课题。在伤员救治过程中,血液是必备物... 当前,大规模伤亡事件已经成为一种全球现象,直接对一个国家的医疗体系带来严峻考验[1-2],如何利用有限的资源对蜂拥而至的伤员进行及时、合理、有效的救治和处理,已逐渐成为各国专家学者关注的重要课题。在伤员救治过程中,血液是必备物资,对于降低伤员病死率具有显著作用[3]。本文综述了大规模伤亡事件的主要特点和挑战、血液的重要性与特殊性,以及目前血液需求预测的困境和研究现状。 展开更多
关键词 血液保障 伤亡事件 需求预测 伤员救治 专家学者 病死率
新媒体时代突发事件血液采集应急处置
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作者 胡伟 徐健 金志坚 《中华急诊医学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第2期212-215,共4页
目的探讨在新媒体时代背景下,面对突发事件血液采集应急处置的有效管理方法。方法收集杭州“7·21”爆炸事故、“7·5”公交纵火事件和汶川“5·12”地震三次重大突发事件经媒体报道以后,杭州市民参与无偿献血的相关信息... 目的探讨在新媒体时代背景下,面对突发事件血液采集应急处置的有效管理方法。方法收集杭州“7·21”爆炸事故、“7·5”公交纵火事件和汶川“5·12”地震三次重大突发事件经媒体报道以后,杭州市民参与无偿献血的相关信息并进行统计分析。结果新媒体传播后的“7·21”杭州爆炸事故中,杭城市民响应无偿献血的速度较传统媒体报道的“7·5”公交纵火事件和汶川“5·12”地震分别提前了24h至48h;突发事件期间,捐献400mL血液的献血者人数比例比平时工作日明显下降,差异有统计学意义(P〈0.05),而捐献300mL血液的再次献血者比例仅在“7·21”爆炸事故期间比上月同期有显著性增多(P〈0.05)。结论应对新媒体时代突发事件,采供血机构应通过舆情监控、舆论主导、组织管理、人员调配、物资保障等全平台全流程的系统化方案,充分利用好黄金4小时,做好血液采集的应急处置工作。 展开更多
关键词 新媒体 突发事件 黄金4小时 血液采集 “7·21”爆炸事故 7·5”公交纵火事件 汶川“5·12”地震 应急处置
一例B糖基转移酶基因缺失导致Bel变异型的分子机制
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作者 应燕玲 洪小珍 +5 位作者 陈舒 许先国 马开荣 蓝小飞 何吉 朱发明 《中华医学遗传学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期423-426,共4页
目的探讨1例ABO血型Bel变异型的分子机制。方法血清学方法检测样本的红细胞和血清;用PCR扩增其ABO基因的全部外显子及侧翼的内含子序列,并进行双向测序。通过克隆进行单体型分析,并模建分析其糖基转移酶的三维结构。结果吸收放散实... 目的探讨1例ABO血型Bel变异型的分子机制。方法血清学方法检测样本的红细胞和血清;用PCR扩增其ABO基因的全部外显子及侧翼的内含子序列,并进行双向测序。通过克隆进行单体型分析,并模建分析其糖基转移酶的三维结构。结果吸收放散实验检出样本红细胞上有表达极弱的B抗原,血清学表现为Bel。直接测序分析发现ABO基因第6外显子261del/G杂合,第7外显子297A/G、484del/G、526c/G、657C/T、703G/A、796C/A、803G/C、930G/A杂合。单倍型克隆测序发现有1个O01等位基因和1个新的B等位基因。与B101参考序列相比,新的B等位基因序列中存在484delG,并被红细胞血型抗原基因突变数据库(dRBC NCBI)命名为B120。484delG可导致B糖基转移酶阅读框发生改变而提前终止,三维结构分析显示其蛋白仅保留部分N端结构区域,为不完整的转移酶蛋白。结论B转移酶基因第484位缺失G可引起酶活性缺失或显著减弱,从而导致Bel表型。 展开更多
关键词 Bel变异型 ABO基因 缺失突变
献血人群丙型肝炎病毒感染与人类白细胞抗原A基因的相关性 被引量:1
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作者 戴兵 徐罡 +2 位作者 王芳 何吉 朱发明 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第12期1725-1727,1733共4页
目的探讨浙江献血人群中丙型肝炎病毒感染与人类白细胞抗原A基因的相关性。方法选择2011年10月-2013年10月浙江省血液中心献血人群,经血液核酸筛查HCVRNA阳性的样本45例。采用基因测序方法检测HLA-I类基因中A等位基因情况,同时以健康... 目的探讨浙江献血人群中丙型肝炎病毒感染与人类白细胞抗原A基因的相关性。方法选择2011年10月-2013年10月浙江省血液中心献血人群,经血液核酸筛查HCVRNA阳性的样本45例。采用基因测序方法检测HLA-I类基因中A等位基因情况,同时以健康人8333例为对照样本。结果HLA-A基因的A%02:01(P=0.0029,OR=2.18,95%CI:1.32~3.59)和A$33:01(P=0.0270,OR=26.74,95%CI:3.25~219.7)位点在HCVRNA阳性献血者中的频率与健康对照人群比较差异有统计学意义。结论在浙江献血人群中HCV感染与矗LA-A基因中部分多态性位点有相关性。 展开更多
关键词 献血人群 丙型肝炎病毒 人类白细胞抗原-A基因
用体外表达的血小板膜蛋白GPⅢa偶联Luminex微球检测HPA-1a抗体
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作者 陶苏丹 刘瑛 +3 位作者 和艳敏 应燕玲 何吉 朱发明 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期40-44,共5页
目的拟利用体外克隆表达的GPⅢa蛋白作为HPA—1a抗原与LuminexxMAP微球相连,建立和评估用Luminex微球技术检测血清中抗HPA—1a的效果。方法扩增并克隆GPⅢa蛋白的编码基因ITGB3至真核表达载体,转染中国仓鼠卵巢癌细胞株。利用G418筛... 目的拟利用体外克隆表达的GPⅢa蛋白作为HPA—1a抗原与LuminexxMAP微球相连,建立和评估用Luminex微球技术检测血清中抗HPA—1a的效果。方法扩增并克隆GPⅢa蛋白的编码基因ITGB3至真核表达载体,转染中国仓鼠卵巢癌细胞株。利用G418筛选稳定表达细胞株,体外获取并鉴定相应的特异性膜糖蛋白GPⅢa。将重组蛋白通过表面游离氨基和Luminex xMAP微球表面激活的羧基相偶联,再利用偶联后的微球与待测血清反应。利用PE-抗人IgG进行显色,在Luminex-100仪上读取数据并判断结果。结果ITGB3基因测序为HPA-1aa,将克隆后的GPⅢa重组蛋白偶联Luminex xMAP微球,Luminex微球法检测HPA-1a抗体的灵敏度为滴度1/32(抗体浓度3.125U/mL)。微球技术能特异性鉴别出待测样本的HPA—1a抗体,与MAIPA结果一致,而且与HLA抗体、ABO抗体以及其他HPA血小板系统抗体(HPA-3a、HPA_5b)均不发生交叉反应,说明建用立的Luminex微球技术来检测血小板抗体是可行的。结论成功获取了重组表达的血小板膜蛋白GPⅢ3,并初步建立了Luminex微球检测HPA-1a抗体方法。 展开更多
关键词 Luminex微球技术 GPⅢa体外重组表达 抗HPA—1a
血小板捐献者血型资料数据库的建设与应用展望
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作者 朱发明 毛伟 张志欣 《中国输血杂志》 CAS 2019年第5期413-416,共4页
供受者血小板配合输注可有效解决免疫性血小板输注无效问题。由于受HLA和HPA基因系统多态性、人群中CD36抗原缺乏个体比例及临床应用需求时限性等因素的影响,需要提前建立有一定规模的血小板捐献者血型资料库,才可能在临床需要时及时提... 供受者血小板配合输注可有效解决免疫性血小板输注无效问题。由于受HLA和HPA基因系统多态性、人群中CD36抗原缺乏个体比例及临床应用需求时限性等因素的影响,需要提前建立有一定规模的血小板捐献者血型资料库,才可能在临床需要时及时提供配合性血小板。血小板捐献者血型资料库涉及HLA-A,-B基因型资料库、HPA基因型资料库和CD36抗原阴性资料库;国内部分血站已建立200—4 000(人)份捐献者血小板血型资料库。建库中献血者选择、HLA-C位点覆盖问题、HPA系统最适检测范围和检测方法选择仍有待标准化。血小板捐献者血型资料库具有良好的应用前景,但仍需要通过扩大血小板捐献者基因型资料库规模、缩短配合血小板制备发放流程所需时间和加强临床沟通等措施,来提升基因型配合血小板的临床应用。 展开更多
关键词 血小板捐献者基因型资料库 血小板同种抗原 血小板输注无效 CD36抗原 抗-HPA 白细胞抗原
基于社会认同理论的团队无偿献血活动分析——以杭州市“我为七一献热血”活动为例
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作者 胡伟 金志坚 +1 位作者 洪丽冰 胡秋月 《中国输血杂志》 CAS 2019年第7期667-670,共4页
目的分析团体无偿献血发展壮大的内在原因与发展规律。方法收集杭州市2006—2017年各年夏季(6月16日—9月15日)捐献全血的无偿献血者资料,按街头流动献血、自主团队献血与参加'我为七一献热血'活动的党员团队献血3种献血模式,... 目的分析团体无偿献血发展壮大的内在原因与发展规律。方法收集杭州市2006—2017年各年夏季(6月16日—9月15日)捐献全血的无偿献血者资料,按街头流动献血、自主团队献血与参加'我为七一献热血'活动的党员团队献血3种献血模式,分组统计12年间杭州市3种无偿献血人群夏季捐献全血的基本情况;将'我为七一献热血'活动开展时间均为分为3个时间段,统计各时间段、各城区党员团队献血人次和比例,运用社会认同理论分析党员团队献血(人)数量、比例增加的原因。结果杭州市夏季无偿献血者捐献全血的人(次)数:2006年为25 859人,2017年达到33 436人,12年间增长了29. 3%;其中党员献血团队由2006年的8 639人增长到2017年17697人,增长率104. 9%,占夏季捐献全血者比例从2006年33. 4%(8 639/25 859)提升至2017年52. 9%(17 697/33436);各城区党员献血团队献血人(次)数的增长率存在一定差距(P<0. 01)。结论 '我为七一献热血'活动的开展符合社会认同理论与品牌活动的规律,既为团体无偿献血的有效性提供了实证,也为团体献血的进一步开展提供了理论保障。 展开更多
关键词 社会认同理论 无偿献血 团体无偿献血 党员献血 品牌活动
人血小板膜糖蛋白ITGB3基因终止突变C.1476G〉A的体外表达研究
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作者 刘瑛 许先国 +5 位作者 陈舒 洪小珍 陶苏丹 何吉 朱发明 吕杭军 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期17-21,共5页
目的对ITGB3基因新的终止突变c.1476G〉A进行体外表达研究,以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3e.1476G〉AcDNA的真核表达载体,转化感受态细胞,提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢... 目的对ITGB3基因新的终止突变c.1476G〉A进行体外表达研究,以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3e.1476G〉AcDNA的真核表达载体,转化感受态细胞,提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞株(Chinesehamsterovariancancer,CHO)细胞,经G418筛选获取稳定表达细胞株。采用实时荧光定量PCR、Western印迹和流式细胞术分别检测CHO稳定表达株ITGB3基因的mRNA表达和血小板膜糖蛋白llIa(glycoproteinIIIa,GPⅢa)糖蛋白水平。结果成功构建野生型和突变型ITGB3cDNA的真核表达载体,转染筛选后分别获得了稳定表达的CHO细胞株。突变型细胞株中CD61抗原表达量仅为野生型的37%,而ITGB3mRNA转录水平为野生型的6%。Western印迹结果显示,野生型细胞株稳定表达完整的GPⅢa蛋白,而突变型CHO细胞株无完整的GPⅢa蛋白表达。结论ITGB3c.1476G〉A终止突变可导致ITGB3基因的转录水平降低,影响GPⅢa蛋白合成及CD61抗原的表达水平。 展开更多
关键词 ITGB3基因 血小板膜糖蛋白HIa 终止突变 体外表达
KIR-HLA分子在浙江汉族人群中的分布及其人群比较
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作者 陶苏丹 和艳敏 +1 位作者 何吉 朱发明 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第8期585-585,共1页
杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)与其配基人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子相互作用与许多疾病的发生密切相关,是近年来研究疾病易感性不可忽视的遗传因素.本文采用PCR-SSO方法检测了273名无血缘关系的随机无偿献血者16个KIR基因的分布... 杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)与其配基人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子相互作用与许多疾病的发生密切相关,是近年来研究疾病易感性不可忽视的遗传因素.本文采用PCR-SSO方法检测了273名无血缘关系的随机无偿献血者16个KIR基因的分布情况,利用PCR-SBT方法对其配基HLA进行高分辨分型,获取了KIR基因、KIR基因型和HLA-KIR的分布情况,并与数据库(www.allefrequencies.net)中美国、英国、韩国、日本、泰国、新加坡、中国江苏汉族和云南白族人群KIR的数据进行比较. 展开更多
关键词 HLA分子 汉族人群 杀伤细胞免疫球蛋白样受体 PCR-SSO方法 KIR基因 人类白细胞抗原 PCR-SBT 疾病易感性
应用Solexa技术检测脐血CD34~+细胞体外诱导的巨核细胞mRNA表达 预览
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作者 王芳 何吉 +6 位作者 朱发明 刘晋辉 秦斐 陈舒 徐罡 吕行军 严力行 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期 529-532,共4页
目的应用Solexa技术研究人脐带血CD34+细胞体外诱导巨核细胞的mRNA表达。方法采用密度梯度离心法和免疫磁珠分选系统获取人脐带血CD34+细胞。100 ng/ml促血小板生成素诱导培养12 d后,应用抗CD41+单克隆抗体免疫磁珠法分选获得巨核细... 目的应用Solexa技术研究人脐带血CD34+细胞体外诱导巨核细胞的mRNA表达。方法采用密度梯度离心法和免疫磁珠分选系统获取人脐带血CD34+细胞。100 ng/ml促血小板生成素诱导培养12 d后,应用抗CD41+单克隆抗体免疫磁珠法分选获得巨核细胞和非巨核细胞。应用Solexa技术检测巨核细胞和非巨核细胞的mRNA表达差异。结果获取的Tag初始数量巨核细胞和非巨核细胞分别为3 773 147和3 533 805个。整个清晰的Tag数量分别为3 291 132和2 967 947个,明显独特的tag数量分别为197 769和245 318个。其中上调基因表达数量为1161个,下调为902个。上调Tag表达数量为2717个,下调为1519个。结论巨核细胞和非巨核细胞mRNA表达存在显著差异,差异基因编码产物与细胞发育、黏附、凋亡、代谢、细胞内及细胞间的信号转导以及免疫应答等功能相关,进一步深入将有助于探讨巨核细胞的表达机制、信号传导及调控机制。 展开更多
关键词 巨核细胞 MRNA表达 体外扩增 Solexa测序
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