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单甲基化表没食子儿茶素没食子酸酯的化学合成 预览
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作者 刘军 孙玥 +1 位作者 彭凯 万升标 《中国海洋大学学报:自然科学版》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期85-92,共8页
表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)经甲基化后在抗过敏、降血脂等方面具有更高的生物活性。但茶叶中甲基化EGCG含量较低,为进一步研究其生物活性,本文对其半合成路线进行了优化。先以EGCG为原料制得五苄基化的表没食子儿茶素(EGC),然后将... 表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)经甲基化后在抗过敏、降血脂等方面具有更高的生物活性。但茶叶中甲基化EGCG含量较低,为进一步研究其生物活性,本文对其半合成路线进行了优化。先以EGCG为原料制得五苄基化的表没食子儿茶素(EGC),然后将没食子酸丙酯经4-甲氧基苯甲醛二甲缩醛保护,甲基化,脱保护,苄基化,水解得到3,4-二苄氧基-5-甲氧基苯甲酸,再与苄基化EGC酯化和脱苄基得到表没食子儿茶素3-O-甲基没食子酸酯(3″-Me-EGCG);同样将没食子酸丙酯经全乙酰化、选择性甲基化、脱除乙酰基、苄基化、水解得到3,5-二苄氧基-4-甲氧基苯甲酸,再与苄基化EGC酯化和脱苄基得到表没食子儿茶素4-O-甲基没食子酸酯(4″-Me-EGCG);总产率分别为53%和57%。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素3-O-甲基没食子酸酯 表没食子儿茶素4-O-甲基没食子酸酯 苄基化 没食子酸丙酯 半合成
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现代生物技术在海洋功能性食品开发中的应用 预览
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作者 毛相朝 《生物产业技术》 2019年第4期11-15,共5页
海洋功能性食品是以海洋生物资源为原料开发的具有多种生理活性的功能性食品,其开发已成为实现海洋生物资源高效利用的重要途径之一。近几年来,随着现代生物技术的快速发展和进步,对海洋资源的探究越来越深入,在海洋功能性食品的研发方... 海洋功能性食品是以海洋生物资源为原料开发的具有多种生理活性的功能性食品,其开发已成为实现海洋生物资源高效利用的重要途径之一。近几年来,随着现代生物技术的快速发展和进步,对海洋资源的探究越来越深入,在海洋功能性食品的研发方面取得了较大的进展。本文主要介绍了现代生物技术如发酵工程、基因工程、酶工程、蛋白质工程、代谢工程等在海洋功能性食品如脂质功能食品、活性糖功能食品、多肽功能食品及角鲨烯、虾青素开发中的应用,为现代生物技术在海洋功能性食品领域的应用提供参考。同时指出了海洋功能性食品开发中存在的构效关系不明确、效率低下等问题,并提出为进一步加快海洋功能性食品的开发与应用,需要加强对海洋生物新型代谢途径的探索,加深对海洋生物活性成分机理的分析,开发更加快速高效的制备海洋功能性食品的方法。 展开更多
关键词 生物技术 海洋 功能性食品 生物活性
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电子鼻和随机森林算法快速鉴别野生与养殖日本真鲈
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作者 孙永 刘楠 +2 位作者 李智慧 马玉洁 周德庆 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第2期551-556,共6页
目的建立电子鼻和随机森林算法快速鉴别野生与养殖日本真鲈的分析方法。方法采用来源确定且规格不同的日本真鲈,利用电子鼻中14个金属氧化物传感器获取53份日本真鲈样本(养殖样本25份,野生样本28份)的特征信号,构建得到行×列为53&#... 目的建立电子鼻和随机森林算法快速鉴别野生与养殖日本真鲈的分析方法。方法采用来源确定且规格不同的日本真鲈,利用电子鼻中14个金属氧化物传感器获取53份日本真鲈样本(养殖样本25份,野生样本28份)的特征信号,构建得到行×列为53×15(含标签列,野生为1,养殖为-1)的初始特征矩阵。构建随机森林(randomforest,RF)模型,并依据袋外错误率(out-of-bagerrorrate,OOB)对随机森林模型的估计器(决策树)数量和单一决策树最大特征的2个参数进行优化。结果模型最优估计器数为50,最大特征数为14,模型的鉴别准确率达到98.2%。通过该模型,以贡献率为指标,对电子鼻传感器进行了特征筛选和排序,其中S14和S4传感器的贡献率分别为42.9%和36.0%。结论该技术可以快速鉴别野生和养殖日本真鲈。 展开更多
关键词 电子鼻 随机森林 鉴别 日本真鲈 特征筛选
南极磷虾中不同形态虾青素的分离制备、结构鉴定及含量分析 预览
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作者 丛心缘 孙伟红 +4 位作者 张辉珍 冷凯良 邢丽红 苗钧魁 刘小芳 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期174-178,共5页
以南极磷虾为研究对象,采用丙酮提取南极磷虾中的虾青素。优化硅胶柱层析技术分离虾青素双酯、单酯及游离虾青素;筛选合适的展开剂,利用薄层层析法对得到的样品进行鉴定;通过ChiralpakIC柱鉴别其立体结构;运用C30-HPLC法测定不同形态虾... 以南极磷虾为研究对象,采用丙酮提取南极磷虾中的虾青素。优化硅胶柱层析技术分离虾青素双酯、单酯及游离虾青素;筛选合适的展开剂,利用薄层层析法对得到的样品进行鉴定;通过ChiralpakIC柱鉴别其立体结构;运用C30-HPLC法测定不同形态虾青素的含量。结果表明,硅胶柱层析以不同比例的丙酮-石油醚溶液梯度淋洗,可以分离制备虾青素双酯、单酯及游离虾青素;V(正己烷)∶V(丙酮)∶V(乙酸)=8∶2∶0.2为薄层层析最佳展开剂。南极磷虾中不同形态虾青素均由3S,3′S、3S,3′R、3R,3′R3种光学异构体组成,虾青素双酯和单酯中3R,3′R所占比例 >70%,3S,3′S的比例最低。南极磷虾中总虾青素含量为18.9mg/kg,其中虾青素双酯中虾青素含量为12.0mg/kg,虾青素单酯中虾青素含量为6.1mg/kg,游离虾青素含量为0.8mg/kg。 展开更多
关键词 南极磷虾 虾青素酯 硅胶柱层析 光学异构体
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产褐藻胶裂解酶菌株的筛选及发酵条件优化 预览
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作者 周敏 冷凯良 +4 位作者 王致鹏 苗钧魁 刘小芳 高华 王海英 《青岛大学学报:自然科学版》 CAS 2019年第1期37-45,共9页
为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibriosp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件... 为进一步探索高产褐藻胶裂解酶菌株,促进其工业化应用,以褐藻酸钠为唯一碳源筛选培养基,从鲍鱼内脏中筛选出一株高产褐藻胶裂解酶菌株B4,通过形态学观察和系统发育分析,鉴定为弧菌属细菌Vibriosp.B4。通过单因素实验对B4菌株的发酵条件和发酵培养基进行优化,获得发酵培养基的最适碳源为褐藻酸钠10g/L,最适氮源为(NH4)2SO410g/L,最适发酵条件为温度30℃,接种量1%,培养基初始pH6.0。在单因素实验的基础上,通过Plackett-Burman(PB)筛选出3个影响产酶活力的显著因素:(NH4)2SO4浓度、pH、接种量。通过响应面进一步分析优化,得到最佳的发酵培养基为褐藻酸钠10g/L,(NH4)2SO410.91g/L,NaCl10g/L,KH2PO41g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,CaCl20.2g/L,FeSO4·7H2O0.02g/L,最佳发酵条件为温度30℃,接种量1.1%,起始pH6.07。在最佳培养条件下,褐藻胶裂解酶活力可达19.09U/mL,比基础培养条件下提高了3.67倍。该菌经过产酶发酵条件的优化,酶活力得到较大幅度的提高,且其发酵产酶时间短,可为褐藻胶裂解酶的进一步研究应用提供参考。 展开更多
关键词 褐藻胶裂解酶 弧菌 鉴定 响应面分析 条件优化
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暗色等刺参(Isostichopus fuscus)营养成分分析
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作者 刘胜男 曹荣 +2 位作者 赵玲 孙慧慧 刘淇 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第8期2263-2267,共5页
目的测定暗色等刺参的主要营养成分,评价其营养价值。方法分别采用凯氏定氮法、高温灼烧法、亚甲基蓝比色法测定海参中的粗蛋白、灰分、海参多糖含量,采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸组成,采用电感耦合等离子体质谱法测定常量、微量无... 目的测定暗色等刺参的主要营养成分,评价其营养价值。方法分别采用凯氏定氮法、高温灼烧法、亚甲基蓝比色法测定海参中的粗蛋白、灰分、海参多糖含量,采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸组成,采用电感耦合等离子体质谱法测定常量、微量无机元素。结果暗色等刺参的海参多糖含量为8.04%,蛋白质含量高达83.35%,且氨基酸组成丰富,其中甘氨酸、谷氨酸、丙氨酸含量相对较高。暗色等刺参富含人体所需的多种矿物质元素,常量元素中Ca、Mg含量较高,微量元素中Fe、Zn的含量较高。结论暗色等刺参富含蛋白质、海参多糖以及人体所需的无机元素,具有较高的食用价值和开发利用前景。 展开更多
关键词 暗色等刺参 营养成分 海参多糖
基于高通量测序技术分析凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)冷藏过程菌群结构变化
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作者 曹荣 林瑞环 +2 位作者 赵玲 孙慧慧 刘淇 《食品安全质量检测学报》 CAS 2019年第8期2127-2131,共5页
目的揭示凡纳滨对虾(4±1)℃条件下贮藏过程中菌群结构的变化规律,为其贮运保鲜提供参考。方法采用高通量测序技术对不同冷藏期凡纳滨对虾中的细菌种类及其丰度迚行分析。结果凡纳滨对虾初始菌群以鞘脂杆菌属(Sphingobacterium)、... 目的揭示凡纳滨对虾(4±1)℃条件下贮藏过程中菌群结构的变化规律,为其贮运保鲜提供参考。方法采用高通量测序技术对不同冷藏期凡纳滨对虾中的细菌种类及其丰度迚行分析。结果凡纳滨对虾初始菌群以鞘脂杆菌属(Sphingobacterium)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)和寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)为主;冷藏过程中,Sphingobacterium、Chryseobacterium、Stenotrophomonas比例迅速减少,系统迚化关系上比较接近的交替假单胞菌属(Pseudoalteromonas)、希瓦氏菌属(Shewanella)和别弧菌属(Aliivibrio)成为优势菌,其中Aliivibrio的比例相对稳定,Shewanella比例呈先增加后减少的趋势,Pseudoalteromonas比例不断增加,可能在凡纳滨对虾腐败过程中起重要作用。结论高通量测序可以更加全面反映凡纳滨对虾中菌群的组成及其丰度信息,Pseudoalteromonas是凡纳滨对虾冷藏过程的优势腐败菌。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 菌群结构 高通量测序
超高压处理对牡蛎冷藏过程腐败菌群结构的影响及典型菌株——腐败希瓦氏菌致死机理研究
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作者 曹荣 孟辉辉 +1 位作者 刘淇 魏玉西 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第2期192-198,共7页
为揭示超高压处理对牡蛎腐败菌群的影响及其作用机制,采用高通量测序技术分析生鲜和腐败牡蛎的细菌群落结构,并以存活率、胞外碱性磷酸酶活力、胞外还原糖含量等为指标,结合电镜观察,探讨超高压处理对牡蛎中典型致腐菌株的致死机制。结... 为揭示超高压处理对牡蛎腐败菌群的影响及其作用机制,采用高通量测序技术分析生鲜和腐败牡蛎的细菌群落结构,并以存活率、胞外碱性磷酸酶活力、胞外还原糖含量等为指标,结合电镜观察,探讨超高压处理对牡蛎中典型致腐菌株的致死机制。结果表明:新鲜牡蛎中菌群以弧菌属、希瓦氏菌属和交替假单胞菌属为主,而腐败时交替假单胞菌属和希瓦氏菌属比例较高。超高压处理改变了牡蛎冷藏过程中的菌群结构,腐败样本中嗜冷菌属占绝对优势,而交替假单胞菌属比例仅为0.8%,希瓦氏菌属比例小于0.1%。代表性菌株腐败希瓦氏菌经100 MPa以下的压力处理后,存活率无明显变化(P>0.05),之后随处理压力的增大而迅速下降,用400 MPa及以上压力处理后未检出活菌。胞外碱性磷酸酶活力、还原糖含量均在较低压力处理条件(<100 MPa)下发生显著变化,之后随着处理压力的增大变化趋于缓和。菌体经超高压处理,细胞发生相互黏连,出现聚集成簇的现象。随着处理压力的进一步增大,菌体细胞彼此间的界限已模糊不清,直至丧失原有形态,最终死亡。 展开更多
关键词 超高压 牡蛎 细菌群落 腐败希瓦氏菌 致死机理
南极海洋丝状真菌Lecanicillium kalimantanense HDN13-339胞外多糖结构及抗氧化活性研究
9
作者 咸华丽 杨宝勤 +5 位作者 李慧 张其 李琳 刘山 朱天骄 毛文君 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2018年第2期1-6,共6页
目的对来源于南极海洋丝状真菌Lecanicillium kalimantanense HDN13-339产生的胞外多糖的结构和抗氧化活性进行研究。方法利用乙醇沉淀法、强阴离子交换色谱柱和凝胶渗透色谱柱对菌株所产胞外多糖进行分离纯化;通过PMP柱前衍生高效液相... 目的对来源于南极海洋丝状真菌Lecanicillium kalimantanense HDN13-339产生的胞外多糖的结构和抗氧化活性进行研究。方法利用乙醇沉淀法、强阴离子交换色谱柱和凝胶渗透色谱柱对菌株所产胞外多糖进行分离纯化;通过PMP柱前衍生高效液相色谱法、红外光谱、气质联用色谱和核磁共振波谱对多糖的结构进行表征;通过测定DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基、ABTS自由基清除活性及Fe2+螯合能力研究胞外多糖的抗氧化活性。结果从南极海洋丝状真菌Lecanicillium kalimantanense HDN13-339发酵产物中分离得到多糖HDN-51,其分子量为16.3kDa,主要由甘露糖和半乳糖构成,糖链是由(1→)-Gal f、(1→2)-Manp、(1→5)-Gal f、(1→6)-Manp、(1→6)-Gal f和(1→2,6)-Manp组成,HDN-51具有良好的抗氧化活性,特别是羟基自由基清除能力。结论首次从南极海洋丝状真菌Lecanicillium kalimantanense HDN13-339中分离得到1种结构新颖的半乳甘露聚糖HDN-51,其具有一定的抗氧化活性。 展开更多
关键词 海洋丝状真菌 胞外多糖 结构表征 抗氧化活性
聚苯乙烯微球固定化海洋脂肪酶YS2071及其性能研究 预览
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作者 张士恒 孙谧 +3 位作者 孙晶晶 王伟 刘均忠 郝建华 《中国油脂》 CSCD 北大核心 2018年第11期99-104,共6页
采用6种不同孔径和亲疏水性的聚苯乙烯微球,通过吸附法固定化脂肪酶YS2071,筛选得到最佳载体,对固定化条件进行了优化并对其性能进行了研究。结果表明:粒径范围0. 6~1μm的氨基聚苯乙烯微球B具有最佳的固定化效果,在酶质量浓度5 mg/m ... 采用6种不同孔径和亲疏水性的聚苯乙烯微球,通过吸附法固定化脂肪酶YS2071,筛选得到最佳载体,对固定化条件进行了优化并对其性能进行了研究。结果表明:粒径范围0. 6~1μm的氨基聚苯乙烯微球B具有最佳的固定化效果,在酶质量浓度5 mg/m L、p H 10、固定化温度20℃、振荡转速250 r/min、吸附时间6 h条件下,酶活回收率达到42. 82%;与YS2071脂肪酶游离酶相比,经固定化后的载体脂肪酶的温度稳定性、金属离子稳定性、有机溶剂稳定性、pH稳定性均明显增强; 25℃存储30 d后,固定化酶酶活保留率比游离酶酶活保留率提高了15. 09个百分点;固定化酶重复使用5次后,酶活保留率为63. 77%。 展开更多
关键词 聚苯乙烯微球 吸附法 固定化 脂肪酶 酶活回收率
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中国海洋微塑料污染的研究现状与展望 预览
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作者 王西西 曲长凤 +2 位作者 王文宇 安美玲 缪锦来 《海洋科学》 CSCD 北大核心 2018年第3期131-141,共11页
塑料垃圾通过各种途径进入海洋,海洋塑料污染已成为全球性环境问题。本文系统总结了国内外塑料污染的研究历程与现状,发现直接或者间接来源的微塑料在环境中广泛积累,呈全球化分布趋势;重点探讨了我国微塑料的来源、分布以及污染形势和... 塑料垃圾通过各种途径进入海洋,海洋塑料污染已成为全球性环境问题。本文系统总结了国内外塑料污染的研究历程与现状,发现直接或者间接来源的微塑料在环境中广泛积累,呈全球化分布趋势;重点探讨了我国微塑料的来源、分布以及污染形势和生态影响,发现我国微塑料污染形势严峻,覆盖范围广泛,甚至涉及食品安全领域。塑料的生物降解是受到高度关注的研究领域,本文通过对微塑料的生物降解途径的归纳,总结了塑料降解的过程、生物种类以及相关的降解酶等,以期为海洋微塑料污染的治理提供启示。目前微塑料污染已经引起世界各国的广泛关注,但对海洋环境中微塑料的鉴定以及污染物消除技术等研究极少,迫切需要开展相关研究工作。 展开更多
关键词 微塑料 塑料污染 海洋生态环境 生物降解 生物酶
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荣成鲜海带及其干、盐制品的营养成分分析
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作者 姜雪 刘楠 +1 位作者 孙永 周德庆 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第8期1874-1880,共7页
目的对荣成鲜海带及其干、盐制品的营养成分进行全面分析与评价。方法采用常规方法测定荣成干海带、荣成盐渍海带的营养成分,并与荣成鲜海带进行对比。结果荣成盐渍海带中粗纤维、膳食纤维、总糖、褐藻胶含量较高,荣成干海带中甘露醇含... 目的对荣成鲜海带及其干、盐制品的营养成分进行全面分析与评价。方法采用常规方法测定荣成干海带、荣成盐渍海带的营养成分,并与荣成鲜海带进行对比。结果荣成盐渍海带中粗纤维、膳食纤维、总糖、褐藻胶含量较高,荣成干海带中甘露醇含量较高;3种海带共检测出16种氨基酸,其中7种为必需氨基酸,蛋白质组成均符合FAO/WHO推荐的理想蛋白质模式,且荣成盐渍海带的必需氨基酸/总氨基酸(essential amino acid/total amino acids,EAA/TAA)和必需氨基酸/非必需氨基酸(essential amino acid/non-essential amino acid,EAA/NEAA)值最高;荣成鲜海带的必需氨基酸指数(essential amino acid index,EAAI)最高,为74,荣成干海带的EAAI最低,为59;以氨基酸评分(amino acid score,AAS)为标准时,3种海带的第一限制性氨基酸都为赖氨酸,而以化学评分(chemical score,CS)为标准时,荣成干海带的第一限制性氨基酸是赖氨酸,荣成盐渍海带和荣成鲜海带的第一限制性氨基酸是赖氨酸和异亮氨酸。3种海带中矿物质元素含量丰富,其中盐渍海带中钠的含量最高,为8.24×10~4(干重计)。重金属分析表明3种海带重金属含量都符合食品安全国家标准。结论本研究中采集的荣成鲜海带及其干、盐制品具有较好的营养价值。 展开更多
关键词 荣成鲜海带 荣成干海带 荣成盐渍海带 营养成分 营养评价
壳聚糖基褐藻多酚可食膜的制备工艺优化 预览 被引量:1
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作者 史建如 孙永 +2 位作者 刘楠 赵峰 周德庆 《南方农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第5期979-985,共7页
【目的】优化壳聚糖基褐藻多酚可食膜的制备工艺,为可食性包装膜的开发和应用提供参考依据。【方法】以壳聚糖和羧甲基纤维素钠(CMC)为成膜基础材料,采用流延法制备可食膜,以抗拉强度、断裂伸长率和水蒸气透过率为考察指标,通过多指... 【目的】优化壳聚糖基褐藻多酚可食膜的制备工艺,为可食性包装膜的开发和应用提供参考依据。【方法】以壳聚糖和羧甲基纤维素钠(CMC)为成膜基础材料,采用流延法制备可食膜,以抗拉强度、断裂伸长率和水蒸气透过率为考察指标,通过多指标综合评分结合正交试验的方法确定壳聚糖基褐藻多酚可食膜的最佳制备工艺,并对可食膜进行性能表征。【结果】各因素对壳聚糖基褐藻多酚可食膜物理性能的影响排序为壳聚糖浓度〉甘油浓度〉CMC浓度〉褐藻多酚浓度,其中壳聚糖浓度和甘油浓度对可食膜的物理性能影响显著(P〈0.05)。优化后的可食膜制备工艺条件为:壳聚糖浓度1.5%、甘油浓度1.0%、褐藻多酚浓度0.4%、CMC浓度2.0%,在此条件下制得的可食膜物理性能较好,其平均拉伸强度为24.78 MPa,断裂伸长率为36.94%,水蒸气透过率为0.445 g·mm/(m^2·h·k Pa),综合评分69.06分。复合膜各组分间相容性较好,膜表面平整致密。【结论】优化工艺制得的壳聚糖基褐藻多酚可食膜具有良好的成膜性能和微观结构,为研发新型可食性包装膜提供了新思路。 展开更多
关键词 壳聚糖 褐藻多酚 羧甲基纤维素钠 制备工艺 成膜性能
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基于宏基因组学的海带降解菌群微生物多样性及其褐藻多糖降解酶系分析
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作者 周敏 王海英 +4 位作者 冷凯良 苗钧魁 刘小芳 赵静 高华 《海洋湖沼通报》 CSCD 北大核心 2018年第6期109-117,共9页
为系统探讨一组高效海带降解菌群的微生物多样性及其褐藻多糖降解酶系,本实验利用高通量测序技术对该菌群进行组学分析。结果表明,共获得36552330条reads,预测得到105145条基因序列,比对显示此高效海带降解菌群中有75.41%的厚壁菌门(Fir... 为系统探讨一组高效海带降解菌群的微生物多样性及其褐藻多糖降解酶系,本实验利用高通量测序技术对该菌群进行组学分析。结果表明,共获得36552330条reads,预测得到105145条基因序列,比对显示此高效海带降解菌群中有75.41%的厚壁菌门(Firmicutes)细菌,优势菌属包括Lachnoclostridium、芽孢杆菌属(Bacillus)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、解硫胺素芽孢杆菌属(Aneurinibacillus)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus)。数据显示有4526个基因编码蛋白质具有海带多糖降解相关酶活性,其中糖苷水解酶(GH)基因数量最多(1520),碳水化合物结合模块(CBM)(764)、碳水化合物酯酶(CE)基因(706)和糖基转移酶(GT)(693)数量次之,多糖裂合酶(PL)基因(107)和辅助氧化还原酶(AA)基因(126)数量较少。在不同的GH基因家族,归属于GH109、GH13、GH18、GH43家族的基因较多。此外还发现了少量的纤维小体组分蛋白基因。本研究发现海带降解菌群中有丰富的褐藻胶裂解酶,纤维素酶,果胶酶,淀粉酶酶系产酶菌,为进一步开发人工高效褐藻降解菌群及褐藻多糖降解酶提供参考。 展开更多
关键词 海带 海带降解菌群 宏基因组学 菌群多样性 多糖降解酶
太平洋鳕鱼排酶解产物的制备及其钙螯合活性研究 被引量:2
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作者 王珊珊 林海燕 +2 位作者 朱兰兰 赵峰 周德庆 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第1期7-12,共6页
目的以太平洋鳕鱼排为原料,制备具有良好钙螯合活性的酶解产物,并对其促钙吸收转运功效进行评价。方法采用动物蛋白水解酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶分别进行水解,比较3种酶解产物的水解度与蛋白回收率,确定最佳水解酶,并研究酶解... 目的以太平洋鳕鱼排为原料,制备具有良好钙螯合活性的酶解产物,并对其促钙吸收转运功效进行评价。方法采用动物蛋白水解酶、中性蛋白酶和菠萝蛋白酶分别进行水解,比较3种酶解产物的水解度与蛋白回收率,确定最佳水解酶,并研究酶解产物的钙螯合活性与促钙吸收转运活性。结果经动物蛋白水解酶制备的酶解产物水解度与蛋白回收率最高。当酶解时间为320min时,该酶解产物的钙螯合活性最高。氨基酸分析表明谷氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、丝氨酸和苏氨酸等特定氨基酸所占比例较高。该酶解产物对Caco-2细胞无毒性作用,能够明显促进钙转运率。结论太平洋鳕鱼排酶解产物具有较好的钙螯合活性与促钙转运活性。 展开更多
关键词 太平洋鳕 加工副产物 酶解产物 钙螯合活性
藻类水通道蛋白的研究进展 预览
16
作者 李露露 曲长凤 +3 位作者 郑洲 王以斌 缪锦来 张莉 《生物技术通报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1-6,共6页
目前,大量水通道蛋白已在古菌、细菌、真菌、动物和植物中相继被发现,但对于低等植物——藻类水通道蛋白的研究相对较少。藻类与陆地高等植物在生长环境方面存在较大差异,因此其体内存在的水通道蛋白在功能作用机制方面与高等植物会有... 目前,大量水通道蛋白已在古菌、细菌、真菌、动物和植物中相继被发现,但对于低等植物——藻类水通道蛋白的研究相对较少。藻类与陆地高等植物在生长环境方面存在较大差异,因此其体内存在的水通道蛋白在功能作用机制方面与高等植物会有不同。所有藻类的生长发育过程都与水分传导息息相关,而藻类水通道蛋白不仅仅是水分运输的通道蛋白,同时还具有其他生理生化功能,是一类多功能蛋白。与植物水通道蛋白相比,藻类水通道蛋白的研究起步较晚。在2004年从莱茵衣藻中得到第一个水通道蛋白后,越来越多的研究者开始对藻类体内存在的水通道蛋白产生关注。近年来,在一些藻类全基因组测序完成的基础之上,研究者对藻类水通道蛋白的探索也有了新的进展。迄今为止,已有8个不同亚族的藻类水通道蛋白被确定出来,而且在近两年内,又有研究者从南极冰藻、条斑紫菜和羊栖菜中发现新的藻类水通道蛋白。综述了当前藻类水通道蛋白的分类和结构特征等方面的研究进展,并结合新发现的几种藻类水通道蛋白,阐述了藻类处于胁迫环境时水通道蛋白的特异性表达和所发挥的生理功能,为后续相关藻类水通道蛋白的研究奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 藻类 水通道蛋白 分类 结构特征 生理功能
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碱性蛋白酶抑制剂lupI-MSSS原核表达载体的构建及其蛋白表达、纯化 预览 被引量:2
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作者 王昆 梁朋娟 +5 位作者 李尚勇 王伟 孙晶晶 刘均忠 孙谧 郝建华 《食品与发酵工业》 CSCD 北大核心 2017年第7期20-26,共7页
低温碱性金属蛋白酶MP是从菌株YS-80-122中提取纯化的,属于沙雷氏蛋白酶家族,与该家族报道的其他酶的结构类似,在MP基因下游有一抑制剂基因lupl,该抑制剂可以完全抑制蛋白酶MP的活性。在野生型抑制剂基因的基础上,通过定点突变将L... 低温碱性金属蛋白酶MP是从菌株YS-80-122中提取纯化的,属于沙雷氏蛋白酶家族,与该家族报道的其他酶的结构类似,在MP基因下游有一抑制剂基因lupl,该抑制剂可以完全抑制蛋白酶MP的活性。在野生型抑制剂基因的基础上,通过定点突变将LupI的N端增加Met-Ser-Ser-Ser,命名为LupI-MSSS,通过构建pET28a-lupl-MSSS原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)并诱导表达,SDS-PAGE凝胶电泳结果表明该蛋白的大小约11kDa,与预测的蛋白分子量一致。对影响蛋白诱导表达的诱导剂添加时间、诱导温度、异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导时间4个因素进行优化,并经初步优化得到了其诱导表达的条件为:接种量2%,诱导剂添加时间3h,诱导剂IPTG终浓度0.5mmol/L,诱导温度为37℃,诱导时间为8h。表达的蛋白依次通过超滤,Super-dex200凝胶过滤层析,Q-Sepharose离子交换层析进行纯化,结果显示目的蛋白纯化倍数为20,比活力为15720U/mg,活性回收率达60.7%,纯化后的lupI通过高效液相色谱法进行纯度分析,其纯度可达99%以上。 展开更多
关键词 蛋白酶抑制剂 原核表达 蛋白纯化
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海洋金属蛋白酶MP仿生亲和材料纯化条件的优化 预览 被引量:1
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作者 杨娟 李尚勇 +4 位作者 马子宾 刘均忠 郝建华 王跃军 孙谧 《食品工业科技》 CSCD 北大核心 2017年第15期146-152,共7页
目的:建立一种高效的海洋金属蛋白酶MP仿生亲和纯化方法。方法:采用硼酸仿生亲和材料,利用单因素实验,P1ackett—Burman实验设计、Box—Behnken实验等响应面优化法,对纯化条件进行优化,利用SDS—PAGE及HPLC分析纯化后样品纯度。... 目的:建立一种高效的海洋金属蛋白酶MP仿生亲和纯化方法。方法:采用硼酸仿生亲和材料,利用单因素实验,P1ackett—Burman实验设计、Box—Behnken实验等响应面优化法,对纯化条件进行优化,利用SDS—PAGE及HPLC分析纯化后样品纯度。结果:利用单因素法和响应面法对纯化条件进行优化和分析,获得硼酸琼脂糖凝胶亲和柱的最佳纯化条件为:粗酶液浓度在100mg/mL,上样缓冲液为pH8.6的甘氨酸一氢氧化钠,上样速度lmL/min,洗脱缓冲液为pH5.2的磷酸氢二钠一柠檬酸,洗脱速度2mL/min,洗脱缓冲液加入75mm01/L的甘露醇时纯化效果最好,纯化效率提高了11倍,纯化后的样品纯度达到98.8%。 展开更多
关键词 金属蛋白酶MP 亲和层析 纯化
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平颏海蛇皮中新型硫酸皮肤素的分离纯化和结构表征
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作者 白明月 王清池 +1 位作者 邓世明 赵峡 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2018年第1期7-14,共8页
目的从平颏海蛇皮中提取分离糖胺聚糖(GAGs),并对其结构进行初步表征。方法对海蛇皮进行脱脂处理后,采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解提取粗多糖,采用氯代十六烷基吡啶(CPC)沉淀和Q-Sepharose Fast Flow离子交换树脂对粗多糖进行... 目的从平颏海蛇皮中提取分离糖胺聚糖(GAGs),并对其结构进行初步表征。方法对海蛇皮进行脱脂处理后,采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解提取粗多糖,采用氯代十六烷基吡啶(CPC)沉淀和Q-Sepharose Fast Flow离子交换树脂对粗多糖进行分离纯化。运用醋酸纤维素薄膜电泳分析其GAGs种类,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生高效液相色谱(HPLC)法分析其单糖组成,利用硫酸软骨素酶降解结合质谱和强阴离子交换色谱(SAX-HPLC)法分析其二糖组成。结果获得了2种GAGs纯化组分,并对其中1种含量较高的纯化组分(HSAP-2)进行了初步结构表征。HSAP-2中含有4种二糖,主要为单硫酸化二糖(4S和6S);单糖组成中含有艾杜糖醛酸(IdoA)、葡萄糖醛酸(GlcA)和乙酰氨基半乳糖(GalNAc);是1种高度杂合的新型硫酸皮肤素(DS)。结论从平颏海蛇皮中分离纯化获得了1种结构新颖的DS,为平颏海蛇多糖结构与生物活性的深入研究提供了基础。 展开更多
关键词 平颏海蛇 糖胺聚糖 分离纯化 二糖组成
表阿霉素卡拉胶寡糖-金纳米粒的制备和质量控制 被引量:1
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作者 陈祥艳 韩文伟 +3 位作者 赵峡 王丽丽 岳帆 高芹芹 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2018年第5期67-73,共7页
目的建立盐酸表阿霉素-卡拉胶寡糖-金纳米(EPI-CAO-AuNPs)中盐酸表阿霉素(EPI)的含量测定方法,并测定其包封率。方法采用ZORBAx-Extend-C18色谱柱,以乙腈和水为流动相,对检测波长、流动相比例及pH、流速和柱温等因素进行优化。结果优化... 目的建立盐酸表阿霉素-卡拉胶寡糖-金纳米(EPI-CAO-AuNPs)中盐酸表阿霉素(EPI)的含量测定方法,并测定其包封率。方法采用ZORBAx-Extend-C18色谱柱,以乙腈和水为流动相,对检测波长、流动相比例及pH、流速和柱温等因素进行优化。结果优化后最适色谱条件为:流动相为乙腈-水(30:70,体积比),含0.1%的三氟乙酸(TFA),柱温25℃,流速1.0mL/min,检测波长233nm。经测定,EPI-CAO-AuNPs中EPI的载药量为12.5%,包封率为94.3%。结论该测定方法操作简单,快速灵敏,重复性好,可在15min内完成测定,适用于EPI-CAO-AuNPs材料中EPI的含量检测。 展开更多
关键词 表阿霉素 金纳米粒 卡拉胶寡糖 高效液相色谱法 含量测定
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