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钙离子感受蛋白STIM1与Orai1在钙敏感受体介导钙内流及NO生成中的相互作用 预览
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作者 王腊梅 钟华 +3 位作者 唐娜 庞丽娟 张春军 何芳 《中国病理生理杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期1773-1780,共8页
目的:研究Ca2+感受蛋白[基质相互作用分子1(STIM1)与钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)]在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(Ca SR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。方法:将Ca SR激动剂精胺[钙池操纵性钙通道... 目的:研究Ca2+感受蛋白[基质相互作用分子1(STIM1)与钙释放激活钙通道蛋白1(Orai1)]在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙敏感受体(Ca SR)介导的钙内流和一氧化氮(NO)生成中的相互作用。方法:将Ca SR激动剂精胺[钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)均激活]单用或与ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(TPA)+Ca SR负性变构调节剂Calhex 231(激活ROC、阻断SOC)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro 31-8220和PKCα/β1选择性抑制剂Go 6976(激活SOC、阻断ROC)联合孵育HUVECs;利用免疫荧光技术检测HUVECs中STIM1和Orai1的蛋白表达和共定位;免疫共沉淀法检测STIM1和Orai1之间的相互作用;取23代HUVECs随机分为特异性的质粒转染组(sh STIM1+sh Orai1组)、空质粒组(vehicle-STIM1+vehicle-Orai1组)和未转染组(control组),将3组细胞分别加入上述4组不同药物刺激,采用荧光探针Fura-2/AM检测HUVECs中Ca2+浓度的变化,NO荧光探针DAF-FM DA负载方法同步检测HUVECs中NO生成的变化。结果:STIM1和Orai1蛋白表达共定位于胞浆,与control组相比,加入Calhex 231+TPA、Ro 31-8220和Go 6976刺激后,STIM1和Orai1在胞浆中的定位均减少,且二者的相互作用均减弱;在4种不同处理因素作用下,sh STIM1+sh Orai1组细胞内Ca2+浓度和NO净荧光强度均明显降低(P〈0.05)。结论:STIM1与Orai1以二元复合物的形式共同调节Ca SR,并通过激活SOC和ROC介导钙内流及NO生成。 展开更多
关键词 基质相互作用分子1 钙释放激活钙通道蛋白1 钙敏感受体 一氧化氮
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TRPC1/ORAI1复合体调节HUVECs SOC和ROC介导的Ca^2+内流和NO生成 预览
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作者 王腊梅 胡清华 +3 位作者 钟华 唐娜 孙志萍 何芳 《基础医学与临床》 CSCD 2017年第5期696-704,共9页
目的研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)/钙释放激活钙通道调节分子1(ORAI1)复合体在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)介导Ca^2+内流和NO生成中的作用。方法取2~3代HUVECs,将构建的TRPC1和O... 目的研究瞬时受体电位通道1(TRPC1)/钙释放激活钙通道调节分子1(ORAI1)复合体在人脐静脉内皮细胞(HUVECs)钙池操纵性钙通道(SOC)和受体操纵性钙通道(ROC)介导Ca^2+内流和NO生成中的作用。方法取2~3代HUVECs,将构建的TRPC1和ORAI1干扰质粒分别转染入HUVECs。用激光共聚焦显微镜观察细胞转染效果,real-time PCR和Western blot检测TRPC1、ORAI1 mRNA和蛋白的表达及抑制效率。细胞随机分组:特异性质粒转染组即实验组,未转染组即空白对照组及空质粒组(vehicle组),将上述3组细胞分别与CaR激动剂、ROC模拟剂TPA+CaR负性变构调节剂Calhex231、蛋白激酶C(PKC)抑制剂Ro31-8220、经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967孵育,用荧光探针Fura-2/AM及DAF-FM负载方法同步检测[Ca^2+]i和NO。随后将构建的TRPC1和ORAI1干扰质粒同时转染入HUVEC,与CaR激动剂孵育后检测[Ca^2+]i和NO,用免疫共沉淀法检测TRPC1和ORAI1的相互作用。结果 1)与对照组相比,TRPC1及ORAI1组,mRNA和蛋白表达均明显降低(P〈0.05);2)在4种不同处理作用下,TRPC1及ORAI1转染组中细胞内Ca^2+浓度变化值和NO净荧光强度值均明显降低(P〈0.05);3)与对照组及单转染TRPC1及ORAI1组比,共转染组细胞内Ca^2+浓度变化值和NO净荧光强度值均明显降低(P〈0.05);4)TRPC1与ORAI1相互作用形成复合体,且在CaR激动剂的剌激下相互作用增强。结论 TRPC1与ORAI1复合体共同调节CaR经SOC和ROC激活介导的Ca^2+内流和NO生成。 展开更多
关键词 TRPC1 ORAI1 一氧化氮 钙离子 人脐静脉内皮细胞
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过表达microRNA-29a上调锌脂蛋白91对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响 预览 被引量:3
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作者 刘永敏 段萍 +3 位作者 鄢文海 何芳 唐娜 钟华 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2016年第11期18-23,共6页
目的 建立高感染效率、稳定过表达microRNA-29a(miR-29a)的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12),探索miR-29a对PC12细胞凋亡的影响。方法 将miR-29a前体表达载体、空白对照载体进行慢病毒包装,用病毒上清感染PC12并进行抗性筛选。实时... 目的 建立高感染效率、稳定过表达microRNA-29a(miR-29a)的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC12),探索miR-29a对PC12细胞凋亡的影响。方法 将miR-29a前体表达载体、空白对照载体进行慢病毒包装,用病毒上清感染PC12并进行抗性筛选。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-29a的表达,流式细胞术检测miR-29a稳定过表达组、空质粒对照组以及未感染组PC12细胞的凋亡情况,利用TargetScan6.0数据库预测miR-29a的关键靶点,RT-qPCR以及Western blot检测预测的miR-29a下游靶基因mRNA以及蛋白表达的变化。结果 经抗性筛选后获得稳定表达miR-29a的PC12细胞系,荧光显微镜下观察各组PC12细胞的感染效率均达80%以上,miR-29a过表达组凋亡率为(5.1±0.92)%,空质粒对照组为(1.832±0.26)%,未感染组为(1.667±0.185)%,miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡(P〈0.01),空质粒对照组与未感染组细胞凋亡率比较,差异无统计学意义;RT-qPCR检测miR-29a过表达时锌指蛋白91(ZFP91)的表达量升高,miR-29a过表达组ZFP91mRNA的表达量是空质粒对照组的1.835倍(P=0.000),空质粒对照组与未感染组ZFP91mRNA的表达量比较差异无统计学意义;Western blot检测的ZFP91蛋白表达量与空质粒对照组比较也升高。结论 在PC12中miR-29a过表达促进PC12细胞凋亡,过表达miR-29a也促进ZFP91表达,其机制仍待进一步阐明。 展开更多
关键词 microRNA-29a 锌指蛋白91 细胞凋亡 大鼠 嗜铬细胞瘤细胞 实时荧光定量聚合酶链反应
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关于如何提升病理生理学实验教学质量的探讨 预览 被引量:1
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作者 唐娜 何芳 +6 位作者 张万江 张春军 钟华 吴芳 李新芝 刘永敏 章乐 《农垦医学》 2016年第2期179-181,共3页
病理生理学实验是医学高等院校基础课程中的重要内容之一,本文就针对如何提升其教学质量及学生综合素养的培养提出一些建议。
关键词 病理生理学 实验教学 教学质量
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新疆地区汉族高血压患者人巨细胞病毒gB基因型分析
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作者 唐娜 李佳蔚 +6 位作者 钟华 刘永敏 李新芝 魏丽丽 王腊梅 邓峰美 何芳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第12期1061-1067,共7页
目的调查新疆地区汉族人群及高血压患者人巨细胞病毒(HCMV)感染流行株,研究其糖蛋白B(gB)基因型分布。方法采用病例-对照研究方法,采集300例高血压患者和200例非高血压(对照)中的HCMV活动性感染外周血标本。使用Real-time PCR、PC... 目的调查新疆地区汉族人群及高血压患者人巨细胞病毒(HCMV)感染流行株,研究其糖蛋白B(gB)基因型分布。方法采用病例-对照研究方法,采集300例高血压患者和200例非高血压(对照)中的HCMV活动性感染外周血标本。使用Real-time PCR、PCR限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及测序技术检测HCMV-DNA,鉴别gB基因型并构建进化树。结果 18例HCMV活动性感染患者中高血压患者占77.8%(14/18),健康对照组22.2%(4/18),差异有统计学意义(χ~2=5.556,P〈0.05)。汉族人群中存在4种gB基因型,其中gB1占5.6%(1/18),gB2占50%(9/18),gB1+2占38.9%(7/18),gB2+3占5.6%(1/18),差异有统计学意义(χ~2=11.333,P〈0.05);高血压患者中存在3种gB基因型,其中gB1占7.1%(1/14),gB2占57.1%(8/14),gB1+2占35.7%(5/14),差异无统计学意义(χ~2=4.069,P〉0.05)。男性高血压患者存在两种基因型,其中gB2占87.5%(7/8),混合基因型gB1+2占12.5%(1/8);女性高血压患者存在3种基因型,gB1和gB2各占16.7%(1/6),混合基因型gB1+2占66.7%(4/6)。男、女患者gB基因型分布差异有统计学意义(χ~2=6.725,P〈0.05)。生物信息学分析10例单一gB基因核苷酸序列差异性为0~3.9%,氨基酸序列差异性为0~3.8%。结论新疆地区汉族居民HCMV感染流行株gB基因型存在单一及混合gB基因型,人群以gB2型为主,高血压男性以gB2型为主,高血压女性以gB1+2型为主;尚未发现gB3和gB4型,该人群中单一gB基因序列变异不大。本研究中感染HCMV的高血压患者所占比例高于健康对照组,提示HCMV感染可能为新疆汉族人群高血压易感的诱因之一。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 原发性高血压 gB基因型
PAK6基因沉默对前列腺癌细胞放疗敏感性研究 预览 被引量:1
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作者 王新敏 章乐 +5 位作者 赵静 李强 倪钊 李应龙 钱彪 王勤章 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2015年第6期732-735,共4页
为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0... 为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0、1、3、5Gy单次剂量放射治疗,观察放疗对PAK6基因沉默的前列腺癌细胞的抑制作用。用CCK-8法检测前列腺癌细胞的增殖活性;流式细胞仪测定其凋亡变化。结果显示,放疗能抑制前列腺癌细胞的增殖,增加其凋亡率;接受等剂量照射的PAK6基因沉默组前列腺癌细胞增殖减缓更明显,凋亡的肿瘤细胞显著增多。由此可知,PAK6基因沉默的前列腺癌细胞对放射治疗更敏感。 展开更多
关键词 前列腺癌 p21活化激酶6 放射治疗 基因沉默 LNCAP细胞
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论病理生理学实验报告中亟待解决的几个问题 预览
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作者 刘永敏 何芳 +4 位作者 章乐 吴芳 钟华 李新芝 张春军 《科技视界》 2015年第12期130-130,230共2页
病理生理学是一门理论和实践紧密结合的学科,病理生理学实验教学不仅要注重理论知识的掌握和实验操作技能,更应掌握如何用理论知识解释分析实验结果。书写实验报告是实验教学中的重要环节,书写实验报告是学生对实验进行自我整理、反思... 病理生理学是一门理论和实践紧密结合的学科,病理生理学实验教学不仅要注重理论知识的掌握和实验操作技能,更应掌握如何用理论知识解释分析实验结果。书写实验报告是实验教学中的重要环节,书写实验报告是学生对实验进行自我整理、反思、深化的过程[1],培养学生发现问题、分析问题、解决问题的能力,尤其是对科研素质及创新能力的培养意义重大。但是,当前实验报告的书写质量还不令人满意,所以提高实验报告的书写质量对医学生综合素质的培养非常重要。 展开更多
关键词 实验报告 病理生理学 书写能力 素质
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IL-12加强BCG初免对小鼠抗结核免疫效果 预览
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作者 王婵 王新敏 +4 位作者 章乐 季榕 吴江东 吴芳 张万江 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第10期1412-1413,共2页
长期以来各国一直使用卡介苗(Bacillus Calmette Gerin)来预防结核病,但BCG在不同地区的免疫保护效果差异显著,序贯免疫策略是单用一种疫苗产生的免疫效力不足时,使用相同或不同的疫苗来重复免疫接种可增强免疫效果[1-2].本研究利用... 长期以来各国一直使用卡介苗(Bacillus Calmette Gerin)来预防结核病,但BCG在不同地区的免疫保护效果差异显著,序贯免疫策略是单用一种疫苗产生的免疫效力不足时,使用相同或不同的疫苗来重复免疫接种可增强免疫效果[1-2].本研究利用已经构建好的表达免疫调节因子的质粒(IL-12)作为在接种BCG后连续使用,以观察BCG初次免疫后IL-12进行免疫加强的免疫效果. 展开更多
关键词 IL-12 免疫效果 BCG 抗结核 小鼠 初免 免疫保护效果 序贯免疫策略
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PBL教学方法在泌尿外科教学中的应用 预览 被引量:2
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作者 王新敏 章乐 +6 位作者 丁国富 王勤章 欧阳松 李应龙 倪钊 钱彪 王文晓 《科技信息》 2014年第15期376-376,381共2页
本文针对泌尿外科教学过程中存在的问题,探索PBL教学模式在泌尿外科教学中的作用。通过对临床医学5年制90名学生,分别采用以问题为基础(PBL)和以授课为基础(LBL)的教学方法,比较PBL和传统教学效果的差异。教学结果显示PBL教学法的教学... 本文针对泌尿外科教学过程中存在的问题,探索PBL教学模式在泌尿外科教学中的作用。通过对临床医学5年制90名学生,分别采用以问题为基础(PBL)和以授课为基础(LBL)的教学方法,比较PBL和传统教学效果的差异。教学结果显示PBL教学法的教学效果及成绩测试优于传统教学方式。 展开更多
关键词 以问题为基础教学法 以授课为基础教学法 泌尿外科学
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小凹蛋白-1下调人脐静脉内皮细胞外钙敏感受体介导的钙内流的作用机制 预览 被引量:1
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作者 钟华 龚艳 +5 位作者 吴玲玲 赵慧 王静 孙志萍 邓峰美 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期577-583,共7页
目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流的作用机制。方法:取2~3代HUVECs,采用细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂非律平(filipin)和甲基-β-环糊精(MβCD)及Cav-1基因... 目的:研究小凹蛋白-1(Cav-1)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞外钙敏感受体(CaR)介导钙内流的作用机制。方法:取2~3代HUVECs,采用细胞膜穴样凹陷(caveolae)结构破坏剂非律平(filipin)和甲基-β-环糊精(MβCD)及Cav-1基因沉默,配合CaR激动剂精胺(spermine)和负性变构调节剂Calhex 231。Fura-2/AM负载检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)。Western blotting检测HUVECs中Cav-1以及CaR蛋白表达,免疫共沉淀技术检测Cav-1和CaR相互作用。用蔗糖密度梯度离心的方法提取并鉴定caveolae,Western blotting检测caveolae的标志蛋白Cav-1和浮舰蛋白1(flotillin-1)及CaR表达。同时检测胞膜、胞浆和高尔基体标志蛋白:转铁蛋白受体(TfR)、β-肌动蛋白(β-actin)和β-外被体蛋白(β-COP)。检测富含Cav-1膜(CEM)区、非caveolae I区(NCF I)和II区(NCF II)的Cav-1和CaR表达。结果:(1)细胞外液为含钙液时,Calhex 231完全阻断精胺刺激引起的[Ca2+]i升高(P〈0.05),MβCD可加强精胺升高[Ca2+]i的作用(P〈0.05)。不同浓度MβCD处理后各组Cav-1和CaR相互作用的差异无统计学意义(P〉0.05);(2)免疫共沉淀结果显示,各组Cav-1和CaR蛋白表达的差异无统计学意义(P〉0.05);(3)与control组比较,spermine+Ca2+组、filipin+spermine+Ca2+组和MβCD+spermine+Ca2+组CEM区的Cav-1和CaR蛋白表达均降低(P〈0.05),NCF I区的Cav-1和CaR蛋白表达增加(P〈0.05),NCF II区Cav-1蛋白表达增加(P〈0.05),而CaR蛋白表达的差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:在HUVECs中,Cav-1和CaR共定位于同一caveolae区,同时Cav-1对CaR介导的Ca2+内流有下调作用,其机制可能与Cav-1抑制CaR膜定位、促使其向非caveolae区转位及减弱其对激动剂的反应性有关。 展开更多
关键词 小凹蛋白-1 人脐静脉内皮细胞 受体 钙敏感 钙信号
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血管疾病治疗新靶标:STIM1和Orai1 预览 被引量:3
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作者 赵慧 何芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期179-182,187共5页
钙离子(Ca^2+)是常见的第二信使,不同于其它第二信使,其主要位于细胞外或存储于内质网(endoplasmicreticulum,ER)等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2+浓度(intracellular Ca^2+ concentra.tion,[Ca^2+]i)约为细胞外的... 钙离子(Ca^2+)是常见的第二信使,不同于其它第二信使,其主要位于细胞外或存储于内质网(endoplasmicreticulum,ER)等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2+浓度(intracellular Ca^2+ concentra.tion,[Ca^2+]i)约为细胞外的1/20000,受体激活或生物信号刺激可通过改变[Ca^2+]i进一步发挥生物放大效应。[Ca^2+]; 展开更多
关键词 钙通道 基质相互作用分子1 Orai1 血管疾病 钙库操纵钙通道
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同型半胱氨酸抑制人脐静脉内皮细胞eNOS活性 预览 被引量:3
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作者 钟华 胡清华 +4 位作者 张会敏 赵丹 孙志萍 李增春 何芳 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第8期864-868,共5页
目的研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)作用不同的时间对人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响机制。方法取2~3代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同浓度Hcy孵育以及孵育不同时间。用Western blot和实时荧光定量RT-PC... 目的研究不同浓度同型半胱氨酸(Hcy)作用不同的时间对人脐静脉内皮细胞中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性的影响机制。方法取2~3代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)与不同浓度Hcy孵育以及孵育不同时间。用Western blot和实时荧光定量RT-PCR法检测热休克蛋白90(HSP90)、蛋白激酶B(Akt)蛋白表达,小凹蛋白(Caveolin-1)、eNOS、P-eNOS蛋白及mRNA的表达,二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)mRNA表达。结果与静息和激活状态下的对照组相比,在Hcy作用下,Caveolin-1蛋白的表达上调(P〈0.05),而Akt蛋白的表达下调(P〈0.05),且均呈浓度、时间依赖性。eNOS蛋白的表达无明显改变。Hcy对其他检测指标无影响。结论 Hcy引起的eNOS活性降低与增强Caveolin-1蛋白表达使其与eNOS藕联增加,减少HSP90、Akt和eNOS复合物的形成,进而抑制了eNOS的活性有关。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 ENOS 人脐静脉内皮细胞 A23187
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胱硫醚β-合成酶基因rs719037、rs719038多态性与新疆哈萨克族原发性高血压的相关性研究 预览 被引量:1
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作者 钟华 张春军 +3 位作者 赵丹 石晓鹏 杨建峰 何芳 《石河子大学学报:自然科学版》 CAS 2011年第6期 716-721,共6页
研究新疆哈萨克族原发性高血压(EH)患者胱硫醚β-合成酶(CBS)基因多态性与EH的关系。采用整群抽取随机抽样的方式,以新疆沙湾县733名哈萨克族人(EH组366人,对照组367人)为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样,采用Sna... 研究新疆哈萨克族原发性高血压(EH)患者胱硫醚β-合成酶(CBS)基因多态性与EH的关系。采用整群抽取随机抽样的方式,以新疆沙湾县733名哈萨克族人(EH组366人,对照组367人)为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样,采用SnaPshot技术进行基因分型。结果显示:CBS rs719037基因型及等位基因在EH组和对照组分布差异无显著性(P〉0.05);CBS rs719038基因型及等位基因在EH组和对照组分布差异无显著性(P〉0.05)。结论新疆哈萨克族人群中存在CBS基因rs719038、rs719037多态性位点。同时rs719038、rs719037位点与EH缺乏关联。 展开更多
关键词 CBS 基因多态性 高血压 新疆哈萨克族
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白刺黄酮对高糖损伤内皮细胞的修复作用 被引量:2
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作者 樊莲莲 唐慧 +4 位作者 张永军 张义军 蒲宇红 李连疆 邓峰美 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期21-23,共3页
目的:研究白刺总黄酮及单体化合物对血管内皮细胞损伤的保护及修复。方法:用高糖(HG)诱导血管内皮细胞损伤,用酶标仪检测细胞内一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)以评价... 目的:研究白刺总黄酮及单体化合物对血管内皮细胞损伤的保护及修复。方法:用高糖(HG)诱导血管内皮细胞损伤,用酶标仪检测细胞内一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)以评价氧化的程度。结果:不同浓度的白刺总黄酮及单体化合物槲皮素、山奈酚、异鼠李素可促进高糖受损的内皮细胞修复,同时提高SOD、NOS、GSH-PX活力和NO水平。结论:白刺总黄酮具有保护血管内皮细胞损伤的作用,与其单体化合物槲皮素、异鼠李素相比,作用效果较强,与山奈酚作用效果相当,其机制与抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 自刺黄酮 内皮细胞 高糖 抗氧化
白刺总黄酮及单体化合物对过氧化氢损伤内皮细胞的修复作用研究 被引量:2
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作者 樊莲莲 张永军 +3 位作者 李连疆 唐克 韩荣 邓峰美 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2010年第47期4432-4434,共3页
目的:研究白刺总黄酮及单体化合物对过氧化氢(H2O2)损伤内皮细胞的修复作用及机制。方法:用H2O2诱导血管内皮细胞损伤,以酶标仪检测细胞内一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P... 目的:研究白刺总黄酮及单体化合物对过氧化氢(H2O2)损伤内皮细胞的修复作用及机制。方法:用H2O2诱导血管内皮细胞损伤,以酶标仪检测细胞内一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)以测定氧化的程度,评价黄酮单体化合物槲皮素、山柰酚、异鼠李素的药理作用。结果:不同浓度的黄酮单体化合物槲皮素、山柰酚、异鼠李素可促进受损的内皮细胞修复,同时提高SOD、NOS、GSH-PX活力和NO水平。结论:白刺总黄酮及单体化合物具有保护血管内皮细胞损伤的作用,其中山柰酚的修复作用最强,其机制与其抗氧化作用有关。 展开更多
关键词 白刺 黄酮 内皮细胞 过氧化氢 抗氧化
血管平滑肌细胞中ERK通路与TGF-β1/Smad通路的相互作用 预览
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作者 钟华 何芳 +4 位作者 胡清华 王振焕 邓峰美 孙志萍 李增春 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期15-18,共4页
目的:探讨血管平滑肌细胞(VSMC)中TGF-β/Smad与ERK信号转导通路是否存在相互调节关系。方法:原代培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞,分四组:①对照组,②TGF-β1组,③ERK阻断剂(PD98059)组和④TGF-β1+ERK阻断剂(PD98059)组。分别... 目的:探讨血管平滑肌细胞(VSMC)中TGF-β/Smad与ERK信号转导通路是否存在相互调节关系。方法:原代培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞,分四组:①对照组,②TGF-β1组,③ERK阻断剂(PD98059)组和④TGF-β1+ERK阻断剂(PD98059)组。分别用Western blot法检测VSMC内Smad2/3、ERK1/2蛋白表达及磷酸化Smad2/3、磷酸化ERK1/2蛋白含量,RT-PCR方法测VSMC中Smad2、Smad3mRNA的表达。结果:①与对照组相比,TGF-β1组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量增多(P〈0.05),ERK阻断剂组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量减少(P〈0.05),TGF-β1+ERK阻断剂组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量无差异;与TGF-β1组相比,TGF-β1+ERK阻断剂组P-Smad2/3、P-ERK1/2蛋白含量减少(P〈0.05)。各组间Smad2/3、ERK1/2蛋白表达无差异。②各组的Smad2、Smad3mRNA表达无差异。结论:TGF-β1诱导的Smad2/3蛋白磷酸化依赖ERK通路激活,但ERK通路对Smad2/3蛋白和mRNA表达水平无影响。 展开更多
关键词 ERK 血管平滑肌细胞 TGF-β_1
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癌抑素(canstatin)在肿瘤治疗中的研究现状 被引量:1
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作者 赵贵先 王雪雯 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期18-21,共4页
癌抑素(canstatin,Cans)是继血管生成抑素(angiostatin)、内皮抑素(endostatin)和肿瘤抑素(tumstatin)之后,新近发现的一种内源性肿瘤血管生成抑制因子,因其具有高效的抗肿瘤血管形成活性而成为肿瘤治疗中的研究热点。本文就... 癌抑素(canstatin,Cans)是继血管生成抑素(angiostatin)、内皮抑素(endostatin)和肿瘤抑素(tumstatin)之后,新近发现的一种内源性肿瘤血管生成抑制因子,因其具有高效的抗肿瘤血管形成活性而成为肿瘤治疗中的研究热点。本文就Cans的结构、功能、作用机制及在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 癌抑素 肿瘤血管生成抑制因子 抗肿瘤血管新生
ERK促进大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞Smad7表达 预览
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作者 钟华 何芳 +4 位作者 胡清华 陈雄英 邓峰美 孙志萍 李增春 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2009年第10期1104-1105,共2页
研究表明,在多种细胞,转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad与细胞外信号调节蛋白激酶(extra cellalar signal regulated protein,ERK)信号传导通路可在多个环节存在相互调节^[1]。但在血管平滑肌细胞(va... 研究表明,在多种细胞,转化生长因子(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad与细胞外信号调节蛋白激酶(extra cellalar signal regulated protein,ERK)信号传导通路可在多个环节存在相互调节^[1]。但在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs),这两条通路是否存在类似关系, 展开更多
关键词 主动脉血管平滑肌细胞 SMAD7 细胞外信号调节蛋白激酶 ERK 信号传导通路 protein 大鼠 转化生长因子
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Smad通路参与ERK通路诱导血管平滑肌细胞增殖的过程 预览 被引量:6
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作者 牟达 何芳 +4 位作者 任江林 张会敏 钟华 邓峰美 孙志萍 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期 701-706,共6页
目的:探讨Smad通路是否参与细胞外信号调节激酶(ERK)通路诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的过程及其可能机制。方法:将人脐动脉平滑肌细胞(hUASMCs)分为对照组、血小板源性生长因子(PDGF)组、ERK阻断剂组和PDGF+ERK阻断剂组。... 目的:探讨Smad通路是否参与细胞外信号调节激酶(ERK)通路诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖的过程及其可能机制。方法:将人脐动脉平滑肌细胞(hUASMCs)分为对照组、血小板源性生长因子(PDGF)组、ERK阻断剂组和PDGF+ERK阻断剂组。用MTT法测hUASMCs的增殖活性(A值),用免疫组化法测hUASMCs内细胞核增殖抗原(PCNA)、磷酸化ERK和磷酸化Smad蛋白的表达,用RT-PCR法测hUASMCs内Smad2/3mRNA的表达。结果:PDGF组hUASMCs的增殖活性(A值)及hUASMCs内的PCNA、磷酸化ERK和磷酸化Smad2/3蛋白的表达都明显高于其它各组(P〈0.01);各组hUASMCs内Smad2/3mRNA的表达没有差异。结论:Smad通路可在蛋白水平参与ERK通路诱导VSMCs的增殖过程。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 细胞外信号调节激酶类 Smad信号转导通路 信号转导
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TGF—β1和低氧对肝癌HepG2细胞表达VEGF的影响 预览 被引量:2
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作者 褚成静 王雪雯 +4 位作者 何芳 张万江 韩忠诚 邓峰美 章乐 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第4期 436-439,共4页
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和低氧(CoCl2)对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 体外培养肝癌细胞系HepG2细胞,实验分为对照组、不同浓度TGF-β1和CoCl:的分别处理组、TGF-β1(100pmol/L)+CoCl2(200... 目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和低氧(CoCl2)对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法 体外培养肝癌细胞系HepG2细胞,实验分为对照组、不同浓度TGF-β1和CoCl:的分别处理组、TGF-β1(100pmol/L)+CoCl2(200μmol/L)组;用免疫细胞化学法检测VEGF蛋白表达;半定量RT—PCR技术检测细胞中VEGFmRNA相对表达量。结果 各处理组VEGF蛋白表达均为阳性;TGF-β1或CoCl2组中VEGF mRNA相对表达量明显高于对照组(P〈0.01),并且呈浓度依赖性;TGF-β1+CoCl2组中VEGF mRNA表达高于单因素刺激组(P〈0.05)。结论 TGF-β1能够刺激HepG2细胞表达VEGF,并且可以协同CoCl2增加VEGF的表达。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 血管内皮生长因子 缺氧 肝细胞肝癌
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