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白茶保健功效研究进展 预览
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作者 欧阳明秋 傅海峰 +2 位作者 朱晨 李小桢 郭玉琼 《亚热带农业研究》 2019年第1期66-72,共7页
根据白茶保健功效的研究现状,论述了不同等级和年份白茶在保健功效方面的差异性,包括维护生殖健康、神经保护作用、对肝损伤的保护作用、抗细胞突变和抗癌作用以及降血压、血脂和血糖等,且白茶在抗氧化、抗辐射和抗菌消炎方面效果显著... 根据白茶保健功效的研究现状,论述了不同等级和年份白茶在保健功效方面的差异性,包括维护生殖健康、神经保护作用、对肝损伤的保护作用、抗细胞突变和抗癌作用以及降血压、血脂和血糖等,且白茶在抗氧化、抗辐射和抗菌消炎方面效果显著。并探讨了白茶保健功效研究与临床试验之间存在的问题。 展开更多
关键词 白茶 功能性成分 保健功效
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香蕉几丁质酶基因ChiI2超表达载体和干涉表达载体的构建
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作者 黄玉吉 赖钟雄 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期672-678,共7页
分离克隆栽培香蕉中的几丁质酶基因ChiI2,构建超表达载体和干涉表达载体,可为进一步研究ChiI2基因响应抗逆胁迫的功能提供基础.从栽培香蕉天宝蕉(Musa spp., AAA)中克隆几丁质酶基因ChiI2,利用生物信息软件对该基因进行分析,并用无缝克... 分离克隆栽培香蕉中的几丁质酶基因ChiI2,构建超表达载体和干涉表达载体,可为进一步研究ChiI2基因响应抗逆胁迫的功能提供基础.从栽培香蕉天宝蕉(Musa spp., AAA)中克隆几丁质酶基因ChiI2,利用生物信息软件对该基因进行分析,并用无缝克隆技术分别构建ChiI2的超表达载体和干涉表达载体.从香蕉果皮中克隆到一个几丁质酶基因ChiI2,该基因全长942 bp,蛋白编码313个氨基酸,其编码的蛋白质理论分子量(Mr)为32.96,等电点(pI)为6.77.ChiI2蛋白的α-螺旋结构有6个,β-折叠结构有5个,转角结构有33个.蛋白质疏水性预测分析值为-0.233,属于亲水性蛋白.功能保守域分析表明,该蛋白是糖苷水解酶家族几丁质酶家族的一员.该基因核苷酸序列推导的氨基酸与野生香蕉、玉米、水稻、小麦、莲等植物的同源性都在70%以上.对ChiI2基因进行荧光定量PCR检测,发现4℃处理6 h的表达显著高于对照和38℃处理6 h,表明ChiI2基因可能与低温响应有关,诱导香蕉苗产生抗冷性.利用无缝克隆技术成功构建了pGreenII-ChiI2超表达载体和pGreenII-ChiI2i干涉表达载体,并转化到农杆菌EHA105菌株中.本研究成功地从栽培香蕉天宝蕉中分离克隆到了ChiI2基因,并对其基因特点和蛋白功能进行了预测分析,成功构建了超表达载体和干涉表达载体,可为进一步研究其功能奠定基础,也为采用基因工程方法改良选育香蕉抗寒品种提供了新尝试. 展开更多
关键词 香蕉 几丁质酶 干涉表达载体 超表达载体 无缝克隆
摇青机械力对乌龙茶脂肪族类香气形成的影响 预览
3
作者 周子维 游芳宁 +3 位作者 刘彬彬 邓婷婷 赖钟雄 孙云 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第13期52-59,共8页
做青是乌龙茶香气品质形成的核心工艺,为明确做青过程中摇青机械力对茶叶脂肪族类香气形成的影响,以乌龙茶品种毛蟹(Camellia sinensis cv. Maoxie)的鲜叶、摇青叶及未摇青等时间摊放叶(简称摊放叶)为供试材料,采用超高效液相色谱-串联... 做青是乌龙茶香气品质形成的核心工艺,为明确做青过程中摇青机械力对茶叶脂肪族类香气形成的影响,以乌龙茶品种毛蟹(Camellia sinensis cv. Maoxie)的鲜叶、摇青叶及未摇青等时间摊放叶(简称摊放叶)为供试材料,采用超高效液相色谱-串联质谱法对脂肪族香气前体物质亚油酸、亚麻酸及愈伤酸进行检测,结果表明,摇青机械力能显著降低鲜叶中的亚麻酸及亚油酸含量(P<0.05),摊放处理仅能显著降低鲜叶中亚油酸的含量(P<0.05),摊放叶中愈伤酸的含量虽然较鲜叶有所降低,但仍旧显著高于摇青叶(P<0.05)。通过顶空气相色谱-质谱联用法检测脂肪族类香气物质,结果表明,摇青叶的C6醛类相对含量明显降低,C6醇类和叶醇酯类衍生物相对含量增多;而摊放叶中C6醛类、C6醇类和叶醇酯类的衍生物相对含量均远低于摇青叶。实时荧光定量聚合酶链式反应结果表明,LOX1、ADH基因在摇青叶中表达量最高,LOX2、LOX3、HPL基因在摊放叶中表达量最高。相关性分析表明,不同叶态中LOX1基因的表达水平与C6醛类含量间存在极显著的负相关性(P<0.01),与C6醇、叶醇酯类衍生物含量间均存在显著正相关性(P<0.05),ADH基因表达水平与叶醇酯类衍生物含量间均存在极显著的正相关性(P<0.01),而LOX2、HPL基因表达水平与脂肪族类香气含量间相关性均未达显著水平(P>0.05)。LOX1、ADH基因在做青过程中的上调表达可能与乌龙茶花果香的形成密切相关。 展开更多
关键词 乌龙茶 摇青机械力 脂肪族类香气 脂氧合酶代谢途径 基因表达
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茶树体胚APX基因克隆及其在体胚发生过程中的表达与酶活性分析 预览
4
作者 郭玉琼 黄道斌 +7 位作者 李小桢 朱晨 张舒婷 傅海峰 周承哲 欧阳明秋 陈兰 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第5期922-931,共10页
以铁观音茶树体胚为材料,克隆了茶树抗坏血酸过氧化物酶基因CsAPX(Genbank登录号为MG799534.1)。CsAPX基因包含一个长度为753 bp的开放阅读框(ORF),共编码250个氨基酸,并对其进行相关生物信息学分析。APX酶活性测定结果表明在球形胚至... 以铁观音茶树体胚为材料,克隆了茶树抗坏血酸过氧化物酶基因CsAPX(Genbank登录号为MG799534.1)。CsAPX基因包含一个长度为753 bp的开放阅读框(ORF),共编码250个氨基酸,并对其进行相关生物信息学分析。APX酶活性测定结果表明在球形胚至子叶胚阶段APX酶活性呈现下降趋势,并在子叶胚阶段到达最低值,随着体胚进一步的分化,在子叶胚、成熟胚和萌发胚阶段,茶树APX酶活性不断上升,总体呈"先降后升"的趋势。在体胚发生过程中CsAPX基因的表达分析显示,CsAPX基因在茶树体胚发生的5个阶段均存在显著差异表达,总体呈"升-降-升"的趋势,其中在萌发胚阶段的CsAPX基因的表达水平显著高于其他4个阶段,推测CsAPX基因在体胚发生过程中的萌发胚阶段发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 茶树体胚 抗坏血酸过氧化物酶 基因克隆 表达分析 酶活性分析
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苋菜AtPAL基因密码子偏好性分析 预览
5
作者 曾林 黄彬茹 +3 位作者 赵春丽 王晓 赖钟雄 刘生财 《园艺与种苗》 CAS 2019年第4期1-9,共9页
[目的]对苋菜AtPAL基因密码子的偏好性进行分析。[方法]利用codonW、MEGA、Origin、Excel、SPSS等软件及CUSP在线程序,分析了苋菜AtPAL基因密码子使用偏好性,并与菠菜、甜菜、一品红等14个不同物种PAL基因密码子偏好性以及大肠杆菌、酵... [目的]对苋菜AtPAL基因密码子的偏好性进行分析。[方法]利用codonW、MEGA、Origin、Excel、SPSS等软件及CUSP在线程序,分析了苋菜AtPAL基因密码子使用偏好性,并与菠菜、甜菜、一品红等14个不同物种PAL基因密码子偏好性以及大肠杆菌、酵母菌等5种模式生物基因组密码子偏好性进行对比分析,同时基于不同物种PAL基因密码子偏好性及基因编码区进行聚类分析。[结果]苋菜AtPAL基因表达水平和密码子偏好性均较弱,更偏好使用A/T碱基以及以A/T结尾的密码子;聚类分析结果显示,单双子叶植物分别聚成一类,且亲缘关系近的物种往往聚成同一小类,但基于PAL基因编码区的聚类结果更接近传统意义上的物种分类;中性分析、ENc与GC3s关联性分析、奇偶偏好(PR2)分析的结果均显示,突变压力是影响PAL基因密码子使用偏好性的主要因素,同时也受自然选择压力等其他一些因素的影响;与模式生物基因组密码子偏好性对比的结果显示,拟南芥比较适合作为苋菜AtPAL基因的遗传转化受体,酵母真核表达系统比大肠杆菌原核表达系统更适合作为苋菜PAL基因的异源表达载体。[结论]为苋菜AtPAL基因进行异源表达时,选择合适受体及表达系统提供了理论基础,并为苋菜AtPAL基因密码子的优化提供了依据。 展开更多
关键词 苋菜 AtPAL基因 密码子偏好性 聚类分析
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茶树光敏色素基因家族成员的生物信息学及其表达量与黄酮含量的相关性分析 预览
6
作者 莫晓丽 周子维 +3 位作者 把熠晨 武清扬 赖钟雄 孙云 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1173-1182,共10页
【目的】分析茶树光敏色素(PHY)基因(CsPHY)的生物学信息及不同采摘时间点茶叶中光敏色素基因表达量与黄酮含量的相关性,为茶叶适时采摘及品质调控提供理论参考。【方法】从茶树基因组数据库(CSA)中筛选出CsPHY基因家族成员,对其进行生... 【目的】分析茶树光敏色素(PHY)基因(CsPHY)的生物学信息及不同采摘时间点茶叶中光敏色素基因表达量与黄酮含量的相关性,为茶叶适时采摘及品质调控提供理论参考。【方法】从茶树基因组数据库(CSA)中筛选出CsPHY基因家族成员,对其进行生物信息学分析,并通过邻接法(NJ)构建系统发育进化树。以一天中不同时间点0:00(R0)、6:00(R6)、12:00(R12)和18:00(R18)采摘的乌龙茶品种肉桂鲜叶为试材,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CsPHY基因家族成员在不同时间点的表达量,并采用三氯化铝比色法检测茶叶中黄酮含量的日变化,以皮尔逊(Pearson)相关系数评估CsPHY基因相对表达量与黄酮含量的相关性。【结果】共筛选获得6个CsPHY基因家族成员,编码蛋白的氨基酸数量674~1142个,分子量为76126.75~126714.53Da,等电点(pI)为5.74~5.96,脂溶性系数为91.11~95.27,其中,CsPHY1基因属于PHYC亚族,CsPHY2和CsPHY4基因属于PHYA亚族,CsPHY3和CsPHY5基因属于PHYB亚族,CsPHY6基因属于PHYE亚族,说明CsPHY2和CsPHY4蛋白属于PhyI型光敏色素,CsPHY1、CsPHY3、CsPHY5和CsPHY6蛋白属于PhyII型光敏色素。6个CsPHY蛋白均与双子叶植物PHY蛋白的亲缘关系较近,其中,CsPHY2蛋白与水晶兰PHYA亚族蛋白的亲缘关系较近,CsPHY4蛋白与美味猕猴桃PHYA亚族蛋白的亲缘关系较近;CsPHY3和CsPHY5蛋白均与美味猕猴桃PHYB亚族蛋白的亲缘关系较近,且CsPHY5蛋白与葡萄PHYB亚族蛋白的亲缘关系相近;CsPHY1蛋白与河岸葡萄PHYC亚族蛋白的亲缘关系较近,CsPHY6蛋白与中华猕猴桃和河岸葡萄PHYE亚族蛋白的亲缘关系较近。CsPHY1、CsPHY3、CsPHY4和CsPHY5基因在R6时的表达量最高,其中,CsPHY4和CsPHY5基因在R6时的表达量显著高于其他时间点的表达量(P<0.05,下同),而CsPHY2和CsPHY6基因分别在R12和R18时的表达量达最高,其中CsPHY6基因在R18时的表达量显著高于R12时的表达量。在R0~R18时段内茶树鲜叶中� 展开更多
关键词 茶鲜叶 采摘时间 光敏色素基因 QRT-PCR 黄酮
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苋菜AtPAL基因克隆与表达分析 预览
7
作者 曾林 黄彬茹 +3 位作者 王晓 赵春丽 赖钟雄 刘生财 《园艺与种苗》 CAS 2019年第7期15-20,共6页
[目的]研究苋菜AtPAL基因的功能及在不同非生物胁迫条件下的表达特性。[方法]利用RT-PCR及RACE技术扩增AtPAL基因cDNA全长序列,并对AtPAL基因进行生物信息学分析,同时在不同光质、不同浓度水杨酸(SA)条件下研究AtPAL基因的表达情况。[结... [目的]研究苋菜AtPAL基因的功能及在不同非生物胁迫条件下的表达特性。[方法]利用RT-PCR及RACE技术扩增AtPAL基因cDNA全长序列,并对AtPAL基因进行生物信息学分析,同时在不同光质、不同浓度水杨酸(SA)条件下研究AtPAL基因的表达情况。[结果]苋菜AtPAL基因cDNA序列全长为2476bp,包含一个2142bp的开放阅读框,预测编码713个氨基酸。AtPAL基因生物信息学分析结果显示,AtPAL编码蛋白分子量(Mw)为77.4692kD,理论等电点(pI)为6.10;蛋白序列中α螺旋、β转角、延伸主链和随即卷曲分别占51.05%、7.57%、10.80%和30.58%;AtPAL蛋白不含信号肽序列,属于非跨膜蛋白,不含跨膜螺旋区,含有59个磷酸化修饰位点,其亚细胞定位于内质网(E.R)可能性较大。序列对比与系统进化树分析结果显示,AtPAL氨基酸序列与其他物种PAL氨基酸序列具有较高的同源性,并且AtPAL蛋白与菠菜、甜菜、康乃馨3种石竹目物种的PAL蛋白亲缘关系较近。非生物胁迫条件下AtPAL基因表达分析结果表明,蓝光能够有效上调AtPAL基因在苋菜中的表达量;不同浓度水杨酸(SA)的处理下,AtPAL基因在苋菜中的表达量相较于CK对照都呈现上调的变化。[结论]该次克隆的苋菜AtPAL基因属于典型的PAL家族成员,推测在苋菜中该基因可能参与多种胁迫防御反应和激素应答。 展开更多
关键词 苋菜 AtPAL基因 基因克隆 表达分析
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茶树遗传转化体系研究进展 预览
8
作者 陈兰 朱晨 +2 位作者 李小桢 傅海峰 郭玉琼 《安徽农业科学》 CAS 2019年第12期14-18,23共6页
茶树遗传转化技术是指应用重组DNA技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到茶树受体基因组中并使其在后代植株中得以表达的过程,在茶树遗传改良、品种选育中发挥重要作用。对茶树遗传转化中受体系... 茶树遗传转化技术是指应用重组DNA技术、细胞组织培养技术或种质系统转化技术,有目的地将外源基因或DNA片段插入到茶树受体基因组中并使其在后代植株中得以表达的过程,在茶树遗传改良、品种选育中发挥重要作用。对茶树遗传转化中受体系统建立、茶树遗传转化方法进行概述,阐述了茶树遗传转化研究重点、方向以及当前茶树遗传转化研究所面临的转化效率低和离体再生困难的问题,提出了原位转化技术在茶树遗传转化中的应用潜力,从而达到优化茶树遗传转化体系的目的。 展开更多
关键词 遗传转化 外植体 农杆菌介导法 基因枪法
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蕹菜耐受长时间高温后的miRNA分析
9
作者 王杏茹 李文静 +4 位作者 陈冰星 刘涛 尚维 赖钟雄 郭容芳 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期486-498,共13页
miRNA是广泛存在于真核生物体内的一类长度为20~24 nt的小分子非编码RNA,在植物生长发育和逆境适应过程中发挥重要作用。蕹菜(Ipomoea aquatica)可以耐受长时间高温,而其miRNA还未被鉴定,其在耐受长时间高温后的作用还未知。以蕹菜耐热... miRNA是广泛存在于真核生物体内的一类长度为20~24 nt的小分子非编码RNA,在植物生长发育和逆境适应过程中发挥重要作用。蕹菜(Ipomoea aquatica)可以耐受长时间高温,而其miRNA还未被鉴定,其在耐受长时间高温后的作用还未知。以蕹菜耐热性强的品种‘泰国三叉’和耐热性差的品种‘柳叶’为材料,经42℃高温处理15d后分别构建两个高质量sRNA库,经检测两个库中碱基质量值大于或等于30的序列数量均超过17.3Mb,且‘泰国三叉’中24nt的序列数量远远高于‘柳叶’。与蕹菜转录组比对分析后,分别得到1 363 258和1 629 209条序列,两个库共有的序列仅有1 047 133条(11.36%),说明耐热性不同的蕹菜中s RNA有很大差别。共鉴定出蕹菜中存在71个miRNA,其中差异表达的有22个,通过TargetFinder预测其靶基因,共得到233个靶基因。进一步以耐热性强的品种‘本地三叉’和耐热性弱的品种‘竹叶’为材料研究其在长时间高温后miR160、miR166、miR172、miR393和miR3627前体的差异表达量,结果表明,高温后两品种中pre-miR160-2的表达都显著上调,但是不耐热的‘竹叶’中上调的倍数更多;mi R166在耐热性强的‘本地三叉’中表达量下降,在耐热性较差的‘竹叶’中表达量显著上升;miR172可以被长时间高温诱导,但在耐热性不同的两个品种蕹菜中并没有差异;miR3627的表达量在耐热蕹菜‘本地三叉’中下降,在不耐热蕹菜‘竹叶’中没有明显变化。miRNA前体表达模式的差异说明其在蕹菜耐受长时间高温过程中的作用机制不同。 展开更多
关键词 蕹菜 长时间高温 miR160 miR166 miR393
猕猴桃POD基因的克隆和表达分析 预览
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作者 陈义挺 赖瑞联 +4 位作者 冯新 高敏霞 程春振 陈文光 吴如健 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期11-18,共8页
为了解猕猴桃POD基因的表达调控功能,采用RT-PCR技术从'米良1号'猕猴桃(Actinidia deliciosa'Miliang-1')克隆了2个POD家族成员基因(AdPOD27和AdPOD64)。结果表明,AdPOD27和AdPOD64开放阅读框分别为984和957 bp,预测分... 为了解猕猴桃POD基因的表达调控功能,采用RT-PCR技术从'米良1号'猕猴桃(Actinidia deliciosa'Miliang-1')克隆了2个POD家族成员基因(AdPOD27和AdPOD64)。结果表明,AdPOD27和AdPOD64开放阅读框分别为984和957 bp,预测分别编码327和318个氨基酸,GenBank登录号分别为MF774100和MF774101。AdPOD27和AdPOD64为亲水性碱性蛋白,属于植物亚铁红素依赖Ⅲ型POD超家族成员,含有信号肽、跨膜螺旋结构和磷酸化位点,亚细胞定位预测分别定位于线粒体和细胞外。qRT-PCR结果表明,AdPOD27在脱落酸(ABA)和4℃处理时表达量急剧上升,而AdPOD64只在ABA处理时表达量显著提高。此外,AdPOD27表达量与POD活性、AdPOD64表达量均存在显著相关性。因此,AdPOD27和AdPOD64可能在猕猴桃果实软化、低温响应和ABA诱导等过程中发挥重要的调控功能。 展开更多
关键词 猕猴桃 过氧化物酶 果实软化 低温 脱落酸
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污水处理与设施园艺的偶联技术应用及景观改造 预览
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作者 鲁瑶 谢析颖 +5 位作者 王雪晶 张婧 陈闪闪 李蓉 赖钟雄 徐涵 《能源与环境》 2019年第5期71-73,75共4页
研究在污水进水量大、水质复杂及占地面积狭小的前提下,对工艺进行技术升级和规划设计,通过生物反应器-设施园艺偶联技术(B-H工艺)以较小的占地面积达到一级A水质排放和深度的污泥资源化,同时实现了污水厂的园林化,并为进一步提标至地表... 研究在污水进水量大、水质复杂及占地面积狭小的前提下,对工艺进行技术升级和规划设计,通过生物反应器-设施园艺偶联技术(B-H工艺)以较小的占地面积达到一级A水质排放和深度的污泥资源化,同时实现了污水厂的园林化,并为进一步提标至地表4类水排放奠定了基础。 展开更多
关键词 污水生物降解 景观规划 污泥资源化 生态文明建设
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猕猴桃果园间作模式优化构建与技术集成 预览
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作者 赖瑞联 龙宇 +4 位作者 程春振 冯新 吴如健 陈义挺 翁伯琦 《中国生态农业学报(中英文)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1430-1439,共10页
间作是现代生态农业的一种重要生产方式,在生态果园建设中起着极为重要的作用。间作在猕猴桃果园中的应用研究起步较晚但发展迅速,蔬菜、中药材、食用菌、粮食作物和绿肥作物等均有应用。在具体实践中应掌握品种筛选与体系搭配、适时播... 间作是现代生态农业的一种重要生产方式,在生态果园建设中起着极为重要的作用。间作在猕猴桃果园中的应用研究起步较晚但发展迅速,蔬菜、中药材、食用菌、粮食作物和绿肥作物等均有应用。在具体实践中应掌握品种筛选与体系搭配、适时播种与适量间作、科学施肥与合理灌溉等关键技术,同时应充分考虑经济效益、设施配套、转型升级和绿色振兴等要素。结合猕猴桃产业现状,间作提升猕猴桃生态果园综合效益的具体成效主要通过为其提供秸秆废料、改善根际微生物、改土保墒和增加附加农副产品等方式,实现利用闲置土地空间增加前期收入,优化资源利用效率实现增收节支,增强土壤培肥能力并改善根际环境,防止地表水土流失和保护果园生态,实现果实丰产优质最终提升综合效益等。在总结猕猴桃果园间作体系应用的研究与技术现状的基础上,本文提出了充分考虑间作作物与猕猴桃生物学特性,以及果园自然资源与环境特征,探索和完善猕猴桃间作标准化技术,挖掘更多适合猕猴桃间作的新作物等现代化猕猴桃果园间作模式创新发展的新思路。同时,也应进一步加快猕猴桃间作体系相关理论机制的研究,为猕猴桃产业绿色振兴与跨越发展,发挥猕猴桃产业在农业产业转型升级、乡村振兴和精准扶贫等国家战略实施过程中的积极作用。 展开更多
关键词 猕猴桃 间作 绿肥作物 生态效益 经济效益
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野生蕉不同颜色果皮miRNA表达谱及靶基因分析 预览
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作者 邓素芳 程春振 +1 位作者 林玉玲 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期1979-1990,共12页
本文以闽侯野生蕉(阿宽蕉,Musa itinerans)果皮为研究对象,对不同颜色(绿色和紫色)果皮进行转录组测序,旨在探讨miRNA在野生蕉不同颜色果皮转录后水平中发挥的作用及其可能参与的调控通路,为芭蕉属植物果皮颜色分子调控机制的研究奠定... 本文以闽侯野生蕉(阿宽蕉,Musa itinerans)果皮为研究对象,对不同颜色(绿色和紫色)果皮进行转录组测序,旨在探讨miRNA在野生蕉不同颜色果皮转录后水平中发挥的作用及其可能参与的调控通路,为芭蕉属植物果皮颜色分子调控机制的研究奠定基础。取野生蕉同一果梳上不同颜色(紫色和绿色)的果皮为材料,利用高通量测序和生物信息学分析,获得野生蕉不同颜色果皮组织的miRNA表达谱,筛选不同颜色果皮差异表达的miRNA并预测相关靶基因,通过靶基因分析,获得与调控野生蕉果皮颜色可能相关的信号通路。结果从不同颜色野生蕉果皮中共获得34.11兆条原始读长,经过滤后得到28.73兆条clean reads,从中鉴定出132个已知的miRNA序列和122个新的miRNA;筛选出36个差异表达miRNA,其中10个在紫色果皮中上调表达,26个在绿色果皮中上调表达。表达量最高的miRNA为mit-miR167,而差异倍数最大的为mit-miR172a-3p-2。差异表达miRNA共预测出1164个靶基因可能参与野生蕉果皮颜色调控,并主要在DNA结合、离子跨膜运输活动等功能和植物病原互作等途径富集。其中,有7个基因直接与苯丙烷生物合成途径相关,主要受到miR156和miR482家族的调控。同时,选取6个差异表达miRNA进行定量验证,结果表明,3个miRNA在绿色果皮中上调表达,3个miRNA在紫色果皮中上调表达,定量结果与高通量测序的结果一致。本文通过高通量测序获得了野生蕉果皮miRNA表达谱,并通过生物信息学分析得到可能和调控野生蕉果皮颜色性状相关的miRNA和代谢通路。综上所述,野生蕉果皮颜色可能受到多种miRNA的调控,并涉及多个代谢通路,这有助于进一步了解果皮花青素转录后水平的调控过程,并对进一步的功能验证奠定基础。 展开更多
关键词 野生蕉 果皮 花青素 MIRNA 差异表达
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基于提高CRISPR/Cas基因编辑效率的研究进展 预览
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作者 张玉苗 李蓉 +3 位作者 鲁瑶 林玉玲 赖钟雄 徐涵 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第10期2006-2015,共10页
CRISPR 基因编辑技术发展迅速,为功能基因的研究及遗传改良提供了技术支持。提高基因组编辑效率成为使用基因编辑技术的基本点,目前已取得了重要进展。本文结合 CRISPR/Cas 系统的作用原理、晶体结构,着重介绍目前提高编辑效率的最新研... CRISPR 基因编辑技术发展迅速,为功能基因的研究及遗传改良提供了技术支持。提高基因组编辑效率成为使用基因编辑技术的基本点,目前已取得了重要进展。本文结合 CRISPR/Cas 系统的作用原理、晶体结构,着重介绍目前提高编辑效率的最新研究进展,对 CRISPR/Cas 基因编辑效率的提高进行分析并提出改进策略。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas 基因组编辑 基因编辑效率
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刺葡萄愈伤组织UFGT基因克隆及表达分析 预览
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作者 赖呈纯 潘红 +4 位作者 黄贤贵 范丽华 赖钟雄 段长青 刘文慧 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1677-1685,共9页
为从细胞水平上揭示刺葡萄3-O-类黄酮葡萄糖基转移酶(UFGT)基因调控花青素合成的功能,以刺葡萄愈伤组织为试验材料,根据刺葡萄愈伤组织转录组UFGT序列片段,利用RT-PCR结合RACE技术克隆得到VdUFGT基因,并对其进行生物信息学和表达特性分... 为从细胞水平上揭示刺葡萄3-O-类黄酮葡萄糖基转移酶(UFGT)基因调控花青素合成的功能,以刺葡萄愈伤组织为试验材料,根据刺葡萄愈伤组织转录组UFGT序列片段,利用RT-PCR结合RACE技术克隆得到VdUFGT基因,并对其进行生物信息学和表达特性分析。结果表明,VdUFGT基因cDNA和DNA开放阅读框(ORF)分别为1 371 bp和1 448 bp,包含2个外显子和1个内含子,编码456个氨基酸,为带负电荷的不稳定的亲水性蛋白,具有一个UDPGT结构域,是UDPGT超家族成员,包含UDP-黄酮糖基转移酶特征区域。由UFGT同源基因编码蛋白所构建的系统发育树,与植物进化的关系相一致,6个葡萄属植物聚为一支。RT-qPCR分析表明,刺葡萄红色愈伤组织VdUFGT转录水平极显著高于白色愈伤组织,培养25 d的2个细胞培养物差异可达79倍;在刺葡萄愈伤组织连续培养过程中,红色愈伤组织中Vd UFGT转录水平变化幅度较大,在愈伤组织快速生长中期和衰老初期分别出现峰值,而刺葡萄白色愈伤组织VdUFGT转录水平与红色愈伤组织相比变化幅度不大,且始终维持在一个较低的水平。说明VdUFGT对刺葡萄红色愈伤组织细胞培养物中的花青素生物合成有重要的调控作用,这种调控作用主要发生在刺葡萄愈伤组织细胞快速生长中期和细胞衰老初期。本研究结果为进一步阐明VdUFGT调控刺葡萄细胞花青素合成的机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 刺葡萄 愈伤组织 3-O-类黄酮葡萄糖基转移酶基因(UFGT) 基因克隆 基因表达
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闽西宁化2个铁皮石斛品系离体培养条件的优化 预览
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作者 潘红 张静 +4 位作者 赖呈纯 黄贤贵 王琦 高慧颖 赖钟雄 《园艺与种苗》 CAS 2019年第3期8-12,共5页
[目的]优化闽西宁化2个铁皮石斛品系的离体培养条件。[方法]以闽西宁化红杆和青杆2个铁皮石斛试管苗为材料,设计了8组培养基对2个铁皮石斛品系离体培养条件进行优化。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛和青... [目的]优化闽西宁化2个铁皮石斛品系的离体培养条件。[方法]以闽西宁化红杆和青杆2个铁皮石斛试管苗为材料,设计了8组培养基对2个铁皮石斛品系离体培养条件进行优化。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛和青杆铁皮石斛丛生芽增殖;MS+KT 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基有利于红杆铁皮石斛、青杆铁皮石斛壮苗生长,壮苗培养基适当添加香蕉泥有利于植株增高。[结论]2个铁皮石斛品系间的丛生芽增殖和根系生长能力存在较大差异,红杆铁皮石斛的丛生芽增殖能力弱于青杆铁皮石斛;红杆铁皮石斛的根系长度和分蘖数都低于青杆铁皮石斛,一级根系数高于青杆铁皮石斛。 展开更多
关键词 铁皮石斛 离体培养 增殖 株高 生根壮苗
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三明野生蕉抗寒特性的形态学与生理生化研究 预览
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作者 李丹 黄玉吉 +5 位作者 朱宁 刘范 田娜 徐涵 程春振 赖钟雄 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期76-85,共10页
[目的]探究三明野生蕉(Musa itinerans)抗寒的形态学和生理生化机制。[方法]以三明野生蕉为材料,以不耐寒‘天宝蕉’(Musa acuminata‘Tianbaojiao’)为对照,采用石蜡切片法对比二者的叶片组织结构和在4℃低温处理24 h前后的表型变化。... [目的]探究三明野生蕉(Musa itinerans)抗寒的形态学和生理生化机制。[方法]以三明野生蕉为材料,以不耐寒‘天宝蕉’(Musa acuminata‘Tianbaojiao’)为对照,采用石蜡切片法对比二者的叶片组织结构和在4℃低温处理24 h前后的表型变化。同时,比较低温处理前后叶片叶绿素荧光参数,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性,丙二醛(MDA)、脯氨酸(Pro)和可溶性糖(SS)含量的变化差异。[结果]三明野生蕉海绵组织较薄,叶片细胞结构紧密度(CTR)更高。低温处理后,三明野生蕉叶片挺立、无损伤,叶绿素荧光参数均处于较高水平,冷害对其光合系统损伤不明显;低温处理前后,三明野生蕉SOD、POD和PPO活性和Pro含量均显著高于‘天宝蕉’。低温会导致三明野生蕉PPO活性和MDA含量显著降低,而‘天宝蕉’则表现出相反的趋势。室温条件下,三明野生蕉CAT活性与‘天宝蕉’差异不大,低温处理后却显著高于‘天宝蕉’。[结论]三明野生蕉在低温处理前后的表型和叶绿素荧光参数变化不大,推测三明野生蕉抗寒特性与较高的CTR、抗氧化酶活性和Pro含量有关。 展开更多
关键词 三明野生蕉 细胞结构紧密度 叶绿素荧光 低温胁迫 抗氧化酶活性
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苋菜AtGAI基因克隆及表达分析 预览
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作者 赵春丽 王晓 +3 位作者 潘君飞 彭丽云 赖钟雄 刘生财 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期199-209,共11页
为研究苋菜赤霉素不敏感基因(AtGAI)对赤霉素的响应,采用RT-PCR结合RACE技术,从‘大红’苋菜(Amaranthus tricolor L.‘Dahong’)中克隆得到一个GAI基因,命名为AtGAI(GenBank登录号为MK049175)。结果表明:(1)苋菜AtGAI基因含一个1 818b... 为研究苋菜赤霉素不敏感基因(AtGAI)对赤霉素的响应,采用RT-PCR结合RACE技术,从‘大红’苋菜(Amaranthus tricolor L.‘Dahong’)中克隆得到一个GAI基因,命名为AtGAI(GenBank登录号为MK049175)。结果表明:(1)苋菜AtGAI基因含一个1 818bp开放阅读框,编码605个氨基酸。(2)生物信息学分析表明,苋菜AtGAI含2个保守结构域DELLA和GRAS,有GAI家族特有序列特征。(3)系统进化树分析表明,苋菜AtGAI蛋白与籽粒苋GAI蛋白亲缘关系最近。(4)显微观察及色素含量分析表明,甜菜色素主要分布于子叶和下胚轴的表皮及维管束鞘周围的薄壁细胞中,GA3浓度与甜菜色素含量呈负相关。(5)qRT-PCR分析结果表明,GA3抑制AtGAI、AmMYB1、AmaDODA和AmCYP76AD1基因在子叶和下胚轴中的表达。研究表明,GA3可能通过影响AtGAI基因的表达来调控苋菜甜菜色素代谢。 展开更多
关键词 苋菜 AtGAI基因 赤霉素 甜菜色素 表达分析
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三明野生黄精无菌体系的建立 预览
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作者 吕煜梦 徐小萍 +5 位作者 张舒婷 郭志鹏 王锦锋 林玉玲 王天池 赖钟雄 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2019年第8期1559-1564,共6页
通过优化消毒和不定芽诱导条件等,建立了三明野生黄精根状茎的组培体系。结果表明:将野生黄精外植体依次在清水下用软毛刷刷洗去野生黄精根状茎表面的泥土,在加洗衣粉的自来水中冲洗16 h,在3%多菌灵浸泡2 d(期间时常振荡摇晃),用清水洗... 通过优化消毒和不定芽诱导条件等,建立了三明野生黄精根状茎的组培体系。结果表明:将野生黄精外植体依次在清水下用软毛刷刷洗去野生黄精根状茎表面的泥土,在加洗衣粉的自来水中冲洗16 h,在3%多菌灵浸泡2 d(期间时常振荡摇晃),用清水洗去表面残留的多菌灵后置于滤纸上晾放5 h,再用75%酒精处理30 s,加0.2%氯化汞浸泡15 min消毒处理之后,野生黄精外植体的污染率低至20.2%。春季3-4月的野生黄精外植体的不定芽萌发能力和长势均明显优于11-12月。三明野生黄精的最佳不定芽诱导培养基为:MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,在其上培养时诱导出芽率高达88.0%。 展开更多
关键词 野生多花黄精 无菌体系 组织培养 不定芽诱导
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西番莲TeMV和CMV双重RT-PCR检测体系的建立及应用 预览
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作者 焦楠 朱宁 +4 位作者 程春振 林玉玲 李汉生 陈发兴 赖钟雄 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期947-953,共7页
【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合... 【目的】建立西番莲夜来香花叶病毒(Telosma mosaic virus, TeMV)和黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的双重RT-PCR检测体系。【方法】根据TeMV和CMV的外壳蛋白(coat protein, CP)基因序列,分别设计两对特异性引物,并对引物组合浓度、退火温度和循环次数进行优化。【结果】优化结果显示:TeMV和CMV最佳引物组合浓度分别为2.0 mmol·L^-1和8.0 mmol·L^-1;最佳退火温度为57 ℃;最佳循环次数为35次。【结论】灵敏度分析结果显示,在样品cDNA原液稀释到10^-5时,仍能检测到两种病毒扩增出的目的条带。同时,以健康组培苗作为对照组,应用建立的双重RT-PCR检测技术对采集于福建省不同产地的36份西番莲样品进行了病毒检测,发现有8 份样品同时感染两种病毒,8份样品仅感染TeMV,10份样品仅感染CMV。本研究可为西番莲TeMV和CMV的检测提供便利。 展开更多
关键词 西番莲 夜来香花叶病毒 黄瓜花叶病毒 病毒检测 双重RT-PCR技术
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